Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Araştırma makalesi

NRF2/HO-1 Yolu Aktivasyonu Yoluyla Spontan İntraserebral Kanamayı Takiben RKIP İnhibisyonu ile Nöronal Ferroptoz Zayıflaması

486 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/68511

⸱

31 Ekim 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Neurosurgery, Affiliated Hospital 2 of Nantong University

Bu makalede

Özet

Hem organizma hem de hücre kültürüne dayalı çalışmalar yürütülerek, Raf kinaz inhibitör proteininin (RKIP) inhibe edilmesinin, spontan intraserebral kanamayı takiben nöronal ferroptozu hafifletebileceği ve böylece beyin hasarını azaltabileceği gösterilmiştir. Gözlenen sitoproteksiyon, NRF2/HO-1 sinyal ekseni modülasyonu yoluyla ortaya çıkar.

Özet

Fosfatidiletanolamin bağlayıcı protein ailesinin birincil üyesi olan Raf kinaz inhibitörü proteini (RKIP), hücre farklılaşması, göçü, hücre döngüsü ve apoptoz dahil olmak üzere çeşitli fizyolojik süreçlere katılımıyla tanınır. Bu çalışma, spontan intraserebral kanamayı (İSK) takiben nöronal ferroptozdaki işlevini ve ilişkili mekanizmaları araştırdı. Hemin ile uyarılan kültürlenmiş sıçan feokromasitoma (PC12) hücreleri kullanılarak hücresel bir spontan ICH modeli geliştirildi. Hücre canlılığı, RNA ekspresyonu, reaktif oksijen türleri (ROS) seviyeleri ve lipid hidroperoksit (LPO) değerlendirildi. Ek olarak, protein ekspresyon seviyeleri ölçüldü. Bu çalışma, RKIP inhibisyonunun ICH'yi takiben in vitro nöroprotektif olduğunu doğruladı. Bu etki, nöronlarda ROS ve LPO seviyeleri ile birlikte glutatyon peroksidaz 4'ün (GPX4) artan ekspresyonu ve asil-CoA sentetaz uzun zincir ailesi 4'ün (ACSL4) ekspresyonunun azalması ile ilişkilendirildi. RKIP inhibisyonu, potansiyel olarak nükleer faktör E2 ile ilişkili faktör 2/hem oksijenaz-1 (NRF2/HO-1) yolunun aktivasyonu yoluyla, ICH'yi takiben in vitro nöronal ferroptoza karşı koruyucu bir rol göstermiştir. Bu mekanizma, ICH'de nöronal ferroptozu hedef alan terapötik stratejiler hakkında fikir verebilir.

Giriş

Spontan intraserebral kanama (İSK), intrakraniyal vasküler hasar, nekroz ve damar rüptürüne bağlı kanama ile karakterize, genellikle bazal gangliyonları etkileyen ve hemorajik inmenin önemli bir alt tipini temsil eden serebrovasküler bir durumdur1. İSK tanısı alan hastalarda ölüm oranı yaklaşık %50'dir ve hayatta kalanların önemli bir kısmı ciddi bağımsızlık kaybı yaşamaktadır2. Spontan İSK için mevcut tedavi seçenekleri sınırlıdır ve mevcut tedavilerin mortaliteyi önemli ölçüde azalttığı veya İSK sonrası nörolojik sonuçları önemli ölçüde iyileştirdiği gösterilmemiştir.

Programlanmış hücre ölümünün demire bağımlı bir formu olan ferroptoz, lipid peroksidasyonu, demir iyonlarının birikmesi ve glutatyonun tükenmesi ile tanımlanır ve onu genetik, morfolojik ve biyolojik açıdan diğer programlanmış hücre ölümü formlarından ayırır3. Artan kanıtlar, nöronal ferroptozun ICH patolojisindeki rolünü vurgulamaktadır. Fosfatidiletanolamin bağlayıcı protein 1 (PEBP1) olarak da bilinen Raf kinaz inhibitör proteini (RKIP), nöral gelişimde rol oynar ve ferroptoz4'ün önemli bir düzenleyicisi olan 15-lipoksijenaz (15LOX) ile bağlanması yoluyla 15LOX/PEBP1 kompleksini oluşturur. Bununla birlikte, spontan ICH'nin ilerlemesi ile bağlantılı ferroptozda RKIP'nin spesifik rolü ve mekanizmaları keşfedilmemiştir.

Bu çalışma, RKIP inhibisyonunun nöronlar üzerindeki anti-ferroptoz etkilerini incelemiş ve RKIP ekspresyonunun inhibisyonunun, potansiyel olarak nükleer faktör E2 ile ilişkili faktör 2/hem oksijenaz-1 (NRF2/HO-1) yolunun aktivasyonu yoluyla ICH'yi takiben nöronal ferroptozu baskılayabileceğini göstermiştir. Bu bulgular İSK patogenezini hedefleyen yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesi açısından önemlidir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

PC12 hücrelerinin kültürü
PC12 hücre hattı, standart kültür koşulları (37 °C, %5 CO2 nemlendirilmiş atmosfer) altında rutin bakım ile %10 fetal sığır serumu (FBS) ve %1 penisilin/streptomisin içeren Roswell Park Memorial Institute 1640 (RPMI-1640) büyüme ortamında çoğaltıldı. Deneysel prosedürler için, yapışık hücreler kültür kapları üzerine kaplandı ve birleşen tek tabakalar (yaklaşık %90 yüzey kaplaması) elde edilene kadar çoğalmasına izin verildi. Hücresel ayrışma, %0.25 tripsin-EDTA çözeltisi kullanılarak enzimatik tedavi yoluyla gerçekleştirildi ve ardından popülasyon stabilitesini sağlamak için birbirini takip eden üç alt kültürleme döngüsü yapıldı. İşlenmiş hücreler daha sonra aşağı akış deneysel uygulamaları ve analitik değerlendirmeler için tahsis edildi.

Hücre canlılığı testleri
Test kitinin üreticisi tarafından sağlanan talimatlar izlenerek PC12 hücreleri üzerindeki hemin ve Locostatin'in sitotoksisitesini değerlendirmek için hücre canlılığı değerlendirildi. PC12 hücreleri, 96 oyuklu plakalara homojen bir şekilde ekildi ve 24 saat boyunca hemin veya Locostatin ile kültürlendi. Fosfat tamponlu salin (PBS) ile yıkandıktan sonra hücreler, 37 °C'de 90 dakika boyunca %10 tetrazolyum tuzu çözeltisi içeren RPMI-1640 ortamında inkübe edildi. Optik Yoğunluk (OD) değerleri daha sonra bir mikroplaka okuyucu kullanılarak 450 nm'de ölçüldü.

Kantitatif ters transkripsiyon-polimeraz zincir reaksiyonu (RT-qPCR)
Toplam RNA, RNA ekstraksiyon reaktifi kullanılarak PC12 hücrelerinden ekstrakte edildi. İlk olarak numune, ekstraksiyon reaktifinde homojenize edilerek tam bir lizis sağlandı. Karışıma kloroform ilave edildi, kuvvetlice çalkalandı ve fazları ayırmak için santrifüjlendi (12.000 × g, 15 dakika, 4 °C). RNA'yı içeren sulu faz toplandı ve RNA, izopropanol (sulu faz: iPrOH = 1:1) eklenerek ve oda sıcaklığında inkübe edilerek çökeltildi. RNA'yı peletlemek için santrifüjleme yapıldı (12.000 × g, 10 dakika, 4 °C), safsızlıkları gidermek için 1 mL %70 etanol ilave edildi ve son olarak RNA peleti -80 °C'de saklanmak üzere RNaz içermeyen suda çözüldü. Tamamlayıcı DNA (cDNA) şablonları, RT Master Mix ile ters transkripsiyon yoluyla üretildi. Elde edilen şablonlar daha sonra 1:5 oranında seyreltildi ve gerçek zamanlı bir PCR cihazında kantitatif gerçek zamanlı PCR'ye tabi tutuldu. Her numune üç kopya halinde amplifiye edildi ve PCR ürününün nispi miktarının ortalaması alındı. Kullanılan primerler, temizlik geni olarak hizmet β-aktin ile Tablo 1'de listelenmiştir. Bağıl mRNA konsantrasyonu, E = 2−ΔΔCt formülü kullanılarak belirlendi ve her reaksiyon için Kritik Eşik Döngüsü (CT) Değeri kaydedildi.

Hücre içi reaktif oksijen türleri (ROS) ve lipid hidroperoksit (LPO) testleri
ROS ve LPO düzeyleri akım sitometrisi kullanılarak ölçüldü. PC12 hücreleri, 24 saat boyunca hemin (80 μM), Locostatin (5 μM) ve ML385 (5 μM) ile muamele edildi ve bulaşıklarda PBS ile 3 kez yıkandı. Hücreler daha sonra 37 °C'de %5 CO ile inkübe edildi 2 2',7'-diklorodihidrofloresein diasetat (DCFH-DA), bir ROS probu ve BODIPY 581/591 C11, bir LPO probu varlığında 40dakika boyunca. Fazla probları çıkarmak için PBS yıkamalarının ardından, floresan yoğunluğu akış sitometrisi ile ölçüldü. Tüm numunelerde tutarlı bir geçit stratejisi uygulandı: ilk olarak, hücreler enkazı dışlamak için FSC-A'ya karşı SSC-A'ya karşı kapılandı, ardından tek hücreler FSC-A'ya karşı FSC-H geçitleme ile seçildi. Boyanmamış hücreler ve tek başına hemin ile muamele edilen hücreler, floresan kompanzasyonunu ve kapılarını oluşturmak için negatif ve pozitif kontroller olarak kullanıldı. Veriler bağlantılı yazılım kullanılarak analiz edildi.

Protein ekstraksiyonu ve western blot
Toplam protein ekstraksiyonu
Tedavi edilen PC12 hücrelerinin süpernatanı atıldı, ardından buz gibi soğuk PBS ile üç yıkama yapıldı. Hücreler tripsin kullanılarak toplandı ve 5 dakika boyunca 200 × g'da santrifüjlendi. Süpernatan çıkarıldıktan sonra hücre peleti, %10 proteaz inhibitörü ve %10 fosfataz inhibitörü içeren soğuk Radyo-İmmünopresipitasyon Testi (RIPA) lizis tamponunda homojenize edildi. Buz üzerinde 30 dakikalık bir inkübasyondan sonra, lizat 4 °C'de 15 dakika boyunca 12.000 × g'da santrifüjlendi. Berrak süpernatan, Yükleme Tamponu (4:1) ile karıştırıldı ve proteinleri denatüre etmek için 95 °C'de 5 dakika ısıtıldı. Protein numuneleri daha sonra kullanılmak üzere -80 °C'de saklandı.

Western blot analizi
Proteinler, bir istifleme jeli ve çözme jeli kullanılarak SDS-PAGE ile ayrıldı ve numuneler kuyucuklara yüklendi. İstifleme jeli için 80 V'ta ve çözme jeli için 120 V'ta elektroforez yapıldı. Proteinler, 1-2 saat boyunca 300 mA'lık sabit bir akımda bir transfer sistemi kullanılarak bir poliviniliden florür (PVDF) membranına (metanol içinde 1 dakika önceden aktive edilmiş) aktarıldı. Membran, spesifik olmayan bağlanmayı önlemek için oda sıcaklığında 2 saat boyunca TBST'de %5 yağsız süt ile bloke edildi. TBST ile üç yıkamadan sonra (her biri 10 dakika), membran gece boyunca 4 °C'de inkübe edildi ve aşağıdaki birincil antikorlar TBST içinde seyreltildi: Tavşan anti-ACSL4 (1:1.000), Tavşan anti-GPX4 (1:1.000), Tavşan anti-HO-1 (1:2.000), Tavşan anti-NRF2 (1:1.000), Tavşan anti-RKIP (1:1.500) ve Fare anti-β-aktin (1:5.000). Membran 3 x 10 dakika TBST ile yıkandı ve oda sıcaklığında 2 saat HRP konjuge ikincil antikorlarla inkübe edildi: HRP etiketli Keçi Anti-Fare IgG (1:1.000), HRP etiketli Keçi Anti-Tavşan IgG (1:1.000). 3 x 5 dakikalık ek TBST yıkamalarından sonra, protein sinyalleri bir ECL Western Blot Kiti kullanılarak görselleştirildi ve ImageJ yazılımı kullanılarak ölçüldü.

İmmünofloresan boyama
Hücreler, kültür plakalarına önceden yerleştirilmiş lameller üzerine ekildi ve yapışmasına izin verildi. Deneysel tedavilerden sonra süpernatan atıldı ve hücreler PBS ile 3 kez yıkandı. Hücreler, oda sıcaklığında 15 dakika boyunca %4 paraformaldehit (PFA) ile sabitlendi, ardından üç PBS yıkaması yapıldı. Daha sonra hücreler, oda sıcaklığında 10 dakika boyunca %0.1 Triton X-100 ile geçirgenleştirildi ve 3 kez PBS ile yıkandı. Spesifik olmayan bağlanma, oda sıcaklığında 30 dakika boyunca %3 sığır serum albümini (BSA) ile inkübe edilerek bloke edildi. Birincil antikorlar gece boyunca 4 °C'de uygulandı: Tavşan anti-HO-1 (1:500), Tavşan anti-NRF2 (1:500). Ertesi gün üç PBS yıkamasından sonra hücreler, oda sıcaklığında 1 saat boyunca karanlıkta floresan ikincil antikorlarla inkübe edildi: Alexa Fluor 488 etiketli Keçi Anti-Tavşan IgG (1:500). Son yıkamaların ardından numuneler, nükleer karşı boyama için 4',6-diamidino-2'-fenilindol (DAPI) içeren montaj ortamı ile monte edildi. Görüntüler konfokal lazer tarama mikroskobu kullanılarak yakalandı.

İstatistiksel analiz
Ölçüm verileri ortalama ± standart sapma (S.D.) olarak ifade edildi. Analiz için üç bağımsız kopya tahlilinden elde edilen sonuçları temsil eden nicel veriler alındı. İki grup arasındaki karşılaştırmalarda t-testi, çoklu gruplar arasındaki karşılaştırmalarda tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ve çoklu karşılaştırmalar için Tukey's post hoc testi uygulanmıştır. P değerinin 0,05 < olması istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Hemin, plazma zarı hasarına neden olabilir, bu nedenle ICH'nin in vitro hücre modellerinin yapımında sıklıkla kullanılır. Bu çalışma, değişen konsantrasyonlarda ve sürelerde hemin tedavisinin PC12 hücre canlılığı üzerindeki etkilerini araştırırken, aynı zamanda western blot analizi yoluyla karşılık gelen deneysel koşullar altında RKIP protein ekspresyon dinamiklerini analiz etti (Şekil 1A). Hücre canlılığı, 60 μM veya daha yüksek hemin konsantrasyonlarında önemli ölçüde azaldı (

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu çalışma, in vitro ortamda ICH tarafından indüklenen ferroptoz üzerindeki RKIP yıkımının etkilerini ve altta yatan mekanizmaları araştırdı. Hücrelerin hemin ile uyarılması, aşırı ROS ve LPO üretiminin eşlik ettiği oksidatif stresi tetikler ve böylece ferroptozu teşvik eder. Endojen RKIP ekspresyonunun inhibisyonu, serbest bırakılan NRF2'nin çekirdeğe yer değiştirmesini ve Antioksidan Yanıt Elemanına (ARE) bağlanmasını hızlandırarak aşağı akış antioks...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar, bu makalede bildirilen çalışmayı etkilemiş gibi görünebilecek bilinen hiçbir rakip mali çıkarları veya kişisel ilişkileri olmadığını beyan ederler.

Teşekkürler

Bu çalışma, Nantong Belediye Sağlık Komisyonu Projesi (MS2022015) ve Nantong Bilim ve Teknoloji Bürosu Projesi'nden (JCZ2023022) alınan hibelerle desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Alexa Fluor 488 etiketli keçi Anti-Tavşan IgGBeyotime BiotechA0423
Anti-ACSL4 antikorHücre sinyalizasyonu38493T
Anti-GPX4 antikorHücre sinyalizasyonu59735S
Anti-HO-1 antikorMedChemExpressHY-P80499
Anti-NRF2 antikorHücre sinyalizasyonu12721T
Anti-RKIP antikorAbcamab76582
Anti-β-aktin antikorAbcamAB179467
BeyoECL PlusBeyotime BiotechP0018M
BSANCM BiyoteknolojiWB6504-100g
Hücre Sayma Kiti-8Beyotime BiotechC0037
HÜCRE KAYDETMENCM BiyoteknolojiC40050
ChamQ SYBR Renk qPCR Master MixVazymeQ411-02
DMSOBeyotime BiotechST038
Fetal Sığır SerumuGibcoA5670801
GraphPad Prizması
HeminMedChemExpressHY-19424
HiScript Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA silecek)VazymeR123-01
HRP etiketli keçi Fare Karşıtı IgGTermoC31430100
HRP etiketli Keçi Anti-Tavşan IgGTermoC31460100
Lipid Peroksit (LPO) İçerik Test KitiSolarbioBC5245
LocostatinMedChemExpressHY-W013411A
ML385MedChemExpressHY-100523
Medium Montajı? Antifading (DAPI ile)SolarbioS2110
YAĞSIZ Toz SütSolarbioD8340
PBS (toz?pH7.2-7.4)SolarbioP1010
PC-12ADHNanjing BioChannel BiotechnologyBC-C-RA-005
Penisillin-Streptomisin SıvısıSolarbioP1400
PRMI-1640GibcoA1049101
Genel kullanım için proteaz ve fosfataz inhibitörü kokteyli, 50xBeyotime BiotechP1045
Protein BelirteciTermo26617
PVDF MilliporeRIKB43638
Reaktif Oksijen Türleri Test KitiSolarbioCA1410
RIPA tamponu (yüksek)SolarbioR0010
SDS-PAGE Jel Hızlı Hazırlık KitiEpizymePG110
SDS-PAGE Örnek Yükleme Tamponu, 5xBeyotime BiotechP0015
TritonX-100SolarbioIT9100
TRIzolTermo15596018CN
Tripsin-EDTA çözeltisi?0,25% (fenol kırmızı olmadan)SolarbioT1300

Kaynaklar

  1. Puy, L., et al. Intracerebral haemorrhage. Nat Rev Dis Primers. 9 (1), 14(2023).
  2. Shao, A., Zhu, Z., Li, L., Zhang, S., Zhang, J. Emerging therapeutic targets associated with the immune system in patients with intracerebral haemorrhage (ICH): from mechanisms to translation. EBioMedicine. 45, 615-623 (2019).
  3. Jiang, X., Stockwell, B. R., Conrad, M. Ferroptosis: mechanisms, biology and role in disease. Nat Rev Mol Cell Biol. 22 (4), 266-282 (2021).
  4. Wenzel, S. E., et al. PEBP1 wardens ferroptosis by enabling lipoxygenase generation of lipid death signals. Cell. 171 (3), 628-641 (2017).
  5. Beshir, A. B., Argueta, C. E., Menikarachchi, L. C., Gascón, J. A., Fenteany, G. Locostatin disrupts association of Raf kinase inhibitor protein with binding proteins by modifying a conserved histidine residue in the ligand-binding pocket. Forum Immunopathol Dis Therap. 2 (1), 47-58 (2011).
  6. Janjusevic, M., et al. a disrupter of Raf kinase inhibitor protein, inhibits extracellular matrix production, proliferation, and migration in human uterine leiomyoma and myometrial cells. Fertil Steril. 106 (6), 1530-1538 (2016).
  7. Xiao, Z., et al. Reduction of lactoferrin aggravates neuronal ferroptosis after intracerebral hemorrhagic stroke in hyperglycemic mice. Redox Biol. 50, 102256(2022).
  8. Li, Q., et al. Inhibition of neuronal ferroptosis protects hemorrhagic brain. JCI Insight. 2 (7), e90777(2017).
  9. Zhou, Z. X., et al. Withaferin A inhibits ferroptosis and protects against intracerebral hemorrhage. Neural Regen Res. 18 (6), 1308-1315 (2023).
  10. Sun, Y., Li, Q., Guo, H., He, Q. Ferroptosis and iron metabolism after intracerebral hemorrhage. Cells. 12 (1), 90(2022).
  11. Duan, L., et al. Baicalin inhibits ferroptosis in intracerebral hemorrhage. Front Pharmacol. 12, 629379(2021).
  12. Wang, Y., Wu, S., Li, Q., Sun, H., Wang, H. Pharmacological inhibition of ferroptosis as a therapeutic target for neurodegenerative diseases and strokes. Adv Sci (Wein)h. 10 (24), e2300325(2023).
  13. Dodson, M., Castro-Portuguez, R., Zhang, D. D. NRF2 plays a critical role in mitigating lipid peroxidation and ferroptosis. Redox Biol. 23, 101107(2019).
  14. Xiang, Y., Song, X., Long, D. Ferroptosis regulation through Nrf2 and implications for neurodegenerative diseases. Arch Toxicol. 98 (3), 579-615 (2024).
  15. Anandhan, A., et al. NRF2 controls iron homeostasis and ferroptosis through HERC2 and VAMP8. Sci Adv. 9 (5), eade9585(2023).
  16. Fan, Z., et al. Nrf2-Keap1 pathway promotes cell proliferation and diminishes ferroptosis. Oncogenesis. 6 (8), e371(2017).
  17. Tu, W., Wang, H., Li, S., Liu, Q., Sha, H. The anti-inflammatory and anti-oxidant mechanisms of the Keap1/Nrf2/ARE signaling pathway in chronic diseases. Aging Dis. 10 (3), 637-651 (2019).
  18. Sun, Y. Y., et al. Remote ischemic conditioning attenuates oxidative stress and inflammation via the Nrf2/HO-1 pathway in MCAO mice. Redox Biol. 66, 102852(2023).
  19. Ge, M., et al. Brg1-mediated Nrf2/HO-1 pathway activation alleviates hepatic ischemia-reperfusion injury. Cell Death Dis. 8 (6), e2841(2017).
  20. Wang, H., et al. VDR activation attenuates renal tubular epithelial cell ferroptosis by regulating Nrf2/HO-1 signaling pathway in diabetic nephropathy. Adv Sci (Weinh). 11 (10), e2305563(2024).
  21. Lin, Q., et al. Mitophagy alleviates cisplatin-induced renal tubular epithelial cell ferroptosis through ROS/HO-1/GPX4 axis. Int J Biol Sci. 19 (4), 1192-1210 (2023).
  22. Jiang, T., et al. Gastrodin protects against glutamate-induced ferroptosis in HT-22 cells through Nrf2/HO-1 signaling pathway. Toxicol In Vitro. 62, 104715(2020).
  23. Gong, F., et al. Trehalose inhibits ferroptosis via NRF2/HO-1 pathway and promotes functional recovery in mice with spinal cord injury. Aging (Albany NY). 14 (7), 3216-3232 (2022).
  24. Luo, L., et al. Astaxanthin attenuates ferroptosis via Keap1-Nrf2/HO-1 signaling pathways in LPS-induced acute lung injury. Life Sci. 311 (Pt A), 121091(2022).
  25. Zhao, J., et al. PEBP1 acts as a rheostat between prosurvival autophagy and ferroptotic death in asthmatic epithelial cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 117 (25), 14376-14385 (2020).
  26. Wang, H., Xu, L., Tang, X., Jiang, Z., Feng, X. Lipid peroxidation-induced ferroptosis as a therapeutic target for mitigating neuronal injury and inflammation in sepsis-associated encephalopathy: insights into the hippocampal PEBP1/15-LOX/GPX4 pathway. Lipids Health Dis. 23 (1), 128(2024).
  27. Manivarma, T., et al. Membrane regulation of 15LOX-1/PEBP1 complex prompts the generation of ferroptotic signals, oxygenated PEs. Free Radic Biol Med. 208, 458-467 (2023).
  28. Huang, W., et al. Downregulation of RKIP promotes radioresistance of nasopharyngeal carcinoma by activating NRF2/NQO1 axis via downregulating miR-450b-5p. Cell Death Dis. 11 (7), 504(2020).
  29. Al-Mulla, F., Bitar, M. S., Feng, J., Park, S., Yeung, K. C. A new model for Raf kinase inhibitory protein induced chemotherapeutic resistance. PLoS One. 7 (1), e29532(2012).
  30. Zuo, H., et al. RKIP-mediated NF-κB signaling is involved in ELF-MF-mediated improvement in AD rat. Int J Med Sci. 15 (14), 1658-1666 (2018).
  31. Liu, H., et al. RKIP promotes cisplatin-induced gastric cancer cell death through NF-κB/Snail pathway. Tumour Biol. 36 (3), 1445-1453 (2015).
  32. Casper, E. The crosstalk between Nrf2 and NF-κB pathways in coronary artery disease: can it be regulated by SIRT6. Life Sci. 330, 122007(2023).
  33. Hu, B., et al. NF-κB and Keap1 interaction represses Nrf2-mediated antioxidant response in rabbit hemorrhagic disease virus infection. J Virol. 94 (10), e00016-e00020 (2020).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

NRF2 YoluHO-1 AktivasyonuPC12 HücreleriReaktif Oksijen TürleriLipid HidroperoksitGPX4 EkspresyonuACSL4 Ekspresyonu
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.