İn vivo konfokal mikroskopi, yüksek çözünürlüklü ve umut verici bir görüntüleme tekniğidir. Klinisyenlerin Demodex'i göz kapağı kenarında in vivo olarak tespit etmeleri için aşağıdaki prosedürü sunuyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
İn vivo konfokal mikroskopi, yüksek çözünürlüklü ve umut verici bir görüntüleme tekniğidir. Klinisyenlerin Demodex'i göz kapağı kenarında in vivo olarak tespit etmeleri için aşağıdaki prosedürü sunuyoruz.
Demodex akar istilası göz kapağı kenarında iltihaplanmaya neden olabilir ve Demodex blefarit klinik vakalarda bir dizi oküler duruma yol açabilir. Çok sayıda doktor, kirpik epilasyonu ve in vitro ışık mikroskobu altında kirpiklerin gözlemlenmesi yoluyla Demodex akarlarının oküler istilasını teşhis eder. Bununla birlikte, kirpiklerin çıkarılmasını takiben rezidüel akarların varlığı ve prosedürle ilişkili ağrı, standart klinik bakımın sınırlamalarıdır.
İn vivo konfokal mikroskopi (IVCM), klinisyenlerin epilasyon olmadan göz kapağı kenarındaki Demodex akarlarını ayrıntılı olarak gözlemlemelerini sağlayan non-invaziv bir görüntüleme tekniğidir. Bu teknik, <30 dakikada tamamlanabilen ağrısız analizler yapılmasını sağlar. Bu muayeneye artan ilgi gösterilmesine rağmen, kapsamlı deneyime sahip olmayan birçok oftalmolog için erişilemez olabilir. Bu makale, klinik çalışmalarda bu yöntemin daha fazla benimsenmesini teşvik etmek için IVCM ile göz kapağı kenarında Demodex akarlarının görselleştirilmesi için standart bir ameliyat prosedürü sunmaktadır.
Blefarit, klinik pratikte en sık karşılaşılan oftalmik tanılardan biridir. Kanıtlar, Demodex akarlarının varlığı ile blefarit1 arasında önemli bir ilişki olduğunu göstermektedir. Akarların istilası, hem Demodex2'nin neden olduğu doğrudan hasarı hem de bakteriler için bir vektör görevi görebilen ve potansiyel olarak blefarit3'ün gelişimine katkıda bulunabilen salgıları tarafından tetiklenen bağışıklık tepkilerini içerir. Demodex blefarit (DB), kornea ve oküler yüzeydehasar 1 dahil olmak üzere hastanın yaşam kalitesini olumsuz yönde etkileyen bir dizi tatmin edici olmayan olaya neden olur 4,5.
Demodex, saç foliküllerinde ve yağ bezlerinde ve bunlara yakın alanlarda yaşayan parazitik bir akardır6. Demodex'in kirpik foliküllerinin içinde veya çevresinde tespit edilmesi, DB7'nin teşhisine yardımcı olabilir. DB'nin klinik tanısı kirpik epilasyonunu ve Demodex'in ışık mikroskobu altında gözlemlenmesini içerir. Bununla birlikte, folikülün derinliklerinde bulunan birçok akarın, kirpiklerinçıkarılmasını takiben delikte kalabileceği kabul edilmektedir 8,9,10 ve bu da potansiyel olarak akar sayısının hafife alınmasına yol açmaktadır. Oftalmolojide non-invaziv bir görüntüleme aracı olan in vivo konfokal mikroskopi (IVCM), Demodex'i kirpik foliküllerinin içinde veya çevresinde in vivo olarak görselleştirmek için alternatif bir yaklaşım sunar 11. Bu teknik, histoloji benzeri çözünürlük11 ile oküler yüzeyin ve göz kapaklarının mikro yapıları hakkında bir fikir verir. Akarlar, karakteristik morfolojilerine ve motilitelerine göre görsel olarak tanımlanabilir. Bununla birlikte, IVCM, bu görüntüleme yöntemiyle ilgili kapsamlı deneyime sahip olmayan oftalmologlar için teknik zorluklar sunabilir12.
Sağlıklı göz kapaklarının yanı sıra DB'nin ayırıcı tanısı ve takibi de dahil olmak üzere rutin klinik uygulamalarda IVCM'nin benimsenmesini kolaylaştırmak için, göz kapağı kenarında Demodex akarlarını gözlemlemek için standart bir ameliyat prosedürü (SOP) öneriyoruz. Bu protokol, klinisyenlere in vivo akar tespiti için sistematik bir yaklaşım sağlar.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu protokol, Demodex'in IVCM ile göz kapağı kenarında gözlemlenmesi için kullanılan SOP'ye odaklanmaktadır (Şekil 1). Bu çalışma, Wenzhou Tıp Üniversitesi Göz Hastanesi Kurumsal İnceleme Kurulu (IRB) tarafından onaylanmıştır (IRB onay No. H2023-022-K-20) ve bu retrospektif analiz için bireysel rıza gerekliliğinden feragat edilmiştir. Burada açıklanan prosedürler, daha önce bildirilen açıklamalara atıfta bulunur 11,13,14,15,16.

Resim 1: Tomografi cihazı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
1. Cihazı ve programı hazırlayın

Şekil 2: PMMA başlığının ve jel uygulamasının doğru şekilde takılması. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
2. Hastayı hazırlayın
NOT: Kornea bütünlüğü şüpheli ise bu muayeneyi yapmayın.
3. Bir inceleme yapın

Şekil 3: Hasta konumlandırma. (A,B) Hastaya pozisyon verilir. (C) Kapak, göz kapağına değecek şekilde ayarlanıyor. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
4. Muayeneden sonra

Şekil 4: Kirpik folikülünün içindeki Demoks. (Resimler: 400 μm x 400 μm). (Bir)Folikül içinde üç Demodex akarı gözlenir (sarı ok) ve tek bir kirpik işaretlenir (beyaz ok). (B) Folikül içinde beş Demodex akarı gözlenir (sarı ok) ve tek bir kirpik işaretlenir (beyaz ok). Akarlar farklı derinliklerde göç edebildiğinden, tek bir odak düzleminde görüntüleme, tek tek akarların parçalanmış kısımlarını yakalayabilir ve böylece eksik morfolojik temsile neden olabilir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
5. Her gün işten sonra cihazı kapatın
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yukarıda açıklanan SOP'yi takiben, 2024 yılında Demodex istilası şüphesi olan hastaları inceledik. Ayrıca, bu SOP'nin uygulanmadığı 2023 yılına ait verileri karşılaştırdık. Şekil 5'te gösterildiği gibi, 2024 yılında Demodex tespiti için IVCM uygulanan hasta sayısı bir önceki yıla göre önemli ölçüde daha yüksektir. Bu SOP, 4 yaşından 92 yaşına kadar farklı yaşlardaki hastaların muayenesine izin verir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Ektoparazit Demodex, insanlarda en sık görülen parazitlerden biridir. Bu akarlar kirpik foliküllerinde, meibomian bezlerinde (MG'ler) ve yağ bezlerinde yaşar ve şeffaftır, uzun şekillidir ve 0.15-0.4 mm uzunluğundadır17. Cihaz kullanılarak gerçekleştirilen IVCM, 1 μm/piksel yanal çözünürlük ve 800x büyütme ile 400 μm x 400 μm gerçek zamanlı görüntü sağlar. IVCM sayesinde, kirpik foliküllerindeki Demodex'in ayrıntılı görüntüleri elde edilebilir; H...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların açıklanacak herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Bu araştırma, Ulusal Geleneksel Çin Tıbbı Bilim ve Teknoloji Departmanı-Zhejiang İl Geleneksel Çin Tıbbı Ortak İnşaat Bilimi ve Teknoloji Planı İdaresi'nden (GZY-ZJ-KJ-23086) bir hibe ile desteklenmiştir. İn vivo konfokal mikroskopi, Rostock Kornea Modülünün eklenmesiyle Heidelberg Retina Tomografi III kullanılarak gerçekleştirildi. Yazarlar, Heidelberg Engineering GmbH'ye, tüm katılımcılara ve bu standart işletim prosedürü üzerinde çalışan kişilere şükranlarını sunar.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Karbomer bazlı oftalmik jel, Vidisic | Bausch ve Lomb, Berlin, Almanya | 8187195 | |
| Heidelberg Eye Explorer Yazılımı | Heidelberg Engineering GmbH, Heidelberg, Almanya | Sürüm 1.3.3.0 | |
| Heidelberg Retina Tomografisi III | Heidelberg Engineering GmbH, Heidelberg, Almanya | HRT3-08398 | |
| Proparakain hidroklorür | Alcon Laboratuvarları, Fort Worth, Teksas, ABD | 8387271 | |
| TomoCap | Heidelberg Engineering GmbH, Heidelberg, Almanya | 18829 | PMMA sınırı |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.