Yöntem makalesi

Juguler Venlerin Bilateral Ligasyonu Yoluyla Serebral Venöz Çıkış Oklüzyonunun Murin Modeli

847 görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/68626

⸱

12 Eylül 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Institut du Cerveau-Paris Brain Institute-ICM, Hôpital de la Salpêtrière, INSERM, CNRS, Sorbonne Université, 2Inserm, UMRS-1144, Optimisation Thérapeutique en Neuropsychopharmacologie, Université Paris Cité, 3Department of Neurology, AP-HP, Hôpital Lariboisière, FHU NeuroVasc, 4Department of Neurology, Yale University School of Medicine, 5Department of Neuroradiology, AP-HP, Pitié-Salpêtrière Hospital

Bu makalede

Özet

Bu protokol, iç ve dış juguler venlerin bilateral ligasyonu ile farelerde serebral venöz çıkış tıkanıklığını indüklemek için cerrahi bir yöntemi detaylandırmaktadır.

Özet

Lenfatik damarlar, dokularda sıvı homeostazının ve immün gözetimin korunmasında önemli bir rol oynar. Beynin sınırında, dural meninksler, venöz sinüslere yakın komşu lenfatik damarlar içerir. İnsanlarda, idiyopatik intrakraniyal hipertansiyon (IIH), dural venöz sinüslerin darlığı ile ilişkilidir, bu da venöz çıkış bozukluklarının beyin sıvısı regülasyonunu ve meningeal lenfatik drenajı etkileyebileceğini düşündürmektedir. Bu ilişkiyi kontrollü bir ortamda araştırmak için, hem iç hem de dış juguler venlerin (JVL) bilateral ligasyonu yoluyla serebral venöz çıkış tıkanıklığının bir fare modelini geliştirdik. Bu cerrahi protokol tekrarlanabilir, invaziv değildir ve yüz ve beyin şişmesinin yanı sıra ekstrakraniyal vasküler yeniden şekillenme gibi beklenen postoperatif belirtilerle yüksek bir başarı oranı (%98,4) elde eder. İki boyutlu uçuş süresi (2D-TOF) MR venografisi ve ardından üç boyutlu (3D) rekonstrüksiyon, yukarı akış venöz tıkanıklığını doğruladı. Bu model, bozulmuş serebral venöz çıkışın serebrovasküler mimari, lenfatik yeniden şekillenme ve beyin sıvısı klirensi üzerindeki sonuçlarının uzunlamasına incelenmesini sağlar. JVL, boyundaki damarları manipüle ederek, kafa içi yapılara zarar vermeden bu süreçlerin araştırılmasına olanak tanır. Türler arasındaki anatomik farklılıklara rağmen JVL, beyindeki venöz çıkış, lenfatik drenaj ve sıvı homeostazı arasındaki etkileşimi incelemek için sağlam ve erişilebilir bir yaklaşım sağlar.

Giriş

Dura mater, beyni ve omuriliği koruyan meninkslerin en dış tabakasıdır. Dura mater yapısal destek sağlar ve özel vasküler ağlar ve çeşitli bağışıklık popülasyonları 1,2 ile karakterize edilen bir bağışıklık platformu olarak işlev görür. Dural venöz sinüsler tüm serebral venlerden kan toplar ve juguler venlereyönlendirir 3,4,5. Dural venöz sinüsler, fareler ve insanlar arasında korunmuş desenlerle MLV'lere yakından komşudur 6,7,8,9,10. MLV'ler beyin sıvılarının drenajına katkıda bulunur ve antijenlerin, makromoleküllerin ve bağışıklık hücrelerinin meninkslerden servikal lenf düğümlerinekaçmasını sağlar 2,7,9,11,12.

Dural venöz sinüslerin daralması (stenozu), serebral venöz çıkışın bozulmasına neden olur ve ağırlıklı olarak genç aşırı kilolu kadınları etkileyen ve altta yatan net bir neden olmaksızın yüksek kafa içi basıncı ile karakterize bir hastalık olan idiyopatik intrakraniyal hipertansiyon (IIH) gibi nörolojik durumlarla ilişkilidir13,14. IIH hastaları, hem fizyolojik serebral venöz çıkışı hem de normal kafa içi basıncını geri kazandıran endovasküler stentleme ile tedavi edilebilir15.

Beyin sıvısı homeostazında venöz çıkışın rolünü ve MLV'lerin bu sürece katılımını daha iyi anlamak için, dış ve iç juguler venlerin iki taraflı ligasyonu ile serebral venöz çıkış tıkanıklığının bir fare modelini geliştirdik. Şimdiye kadar dural venöz sinüs stenozunun murin modeli tanımlanmamıştır ve intrakraniyal serebral venöz çıkış tıkanıklığına yol açan modeller ilgilenilen dural yapılara zarar vermiştir 16,17,18. Ayrıca, kafa içi basınç regülasyonu, beyin sıvısı drenajı ve dural vasküler yeniden şekillenmeyi incelemek için kullanılan JVL modelleri, öncelikle yalnızca dış juguler venlerin ligasyonuna odaklandı ve bu da önemli sonuçlar olmaksızın hafif fenotiplerle sonuçlandı19,20. Önceki çalışmalar, hem dış hem de iç juguler venlerin bağlanmasının fizibilitesini göstermiştir; Bununla birlikte, açıklanan protokoller, boyundaki iç juguler venler ve servikal lenfatikler arasındaki yakın anatomik ilişkiler göz önüne alındığında, lokal invazivliği artıran ve fizyolojik sonuçların, özellikle lenfatik devre ile ilgili olanların yorumlanmasını karıştırabilen bir adım olan ligasyonu takiben damarların tam transeksiyonunu içerir21,22.

Bu yazıda, 6-8 haftalık genç erişkin dişi C57Bl6/J farelerde serebral venöz çıkış oklüzyonunu indüklemek için JVL için geliştirilmiş bir cerrahi protokol açıklanmaktadır. Yaklaşımımız, iç ve dış juguler ven ligasyonunu ameliyattan sonra birden fazla zaman noktasında sistematik analizle birleştirmesi ve venöz hipertansiyonun vasküler yeniden şekillenme ve beyin sıvısı klirensi üzerindeki sonuçlarını kesin olarak tanımlamamıza izin vermesi bakımından orijinaldir.

Protokol

Tüm in vivo prosedürler, INSERM ve Paris Beyin Enstitüsü Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi'nin (APAFIS#34974-2022012017455126) yönergelerine ve kurumsal politikalarına uygundur.

1. Hayvanların transferi ve ön işlemleri

  1. 6-8 haftalık ve yaklaşık 20 g ağırlığındaki dişi C57Bl6/J fareleri deney odasına aktarın.
    1. Her fare için insülin iğneleri (30-31 G) kullanarak aşağıdaki deri altı enjeksiyonları uygulayın:
      Buprenorfin 0,1 mg/kg (12,5 μg/mL; 200 μL).
      Karprofen 20 mg / kg (50 mg / mL, steril% 0.9 NaCl içinde 1:20 seyreltilmiş; 200 μL).
      Anestezi öncesi hidrasyon için Sodyum Klorür% 0,9 (200 μL).
  2. Anestezi indüksiyonu ve idamesi
    1. Fareyi izofluran anestezi odasına yerleştirin ve 400-500 mL/dak hava akış hızında% 3-4 izofluran ile anesteziyi başlatın.
    2. Farenin solunum hızına göre ayarlayarak 140-250 mL/dak hava akış hızıyla anesteziyi %1,5'te tutun.
  3. Tercihen tüy dökücü bir krem kullanarak ameliyat bölgesinde farenin boynundaki kürkü çıkarın.
  4. İzofluranı anestezik burun maskesine açın (ayar 1.2.2).
  5. Kuruluğu önlemek için gözlere oftalmik jel uygulayın.
  6. Fareyi sırtüstü pozisyona getirin, sırtı bir ısıtma yastığının üzerindeki steril örtülere koyun.
  7. Fare kafasının tamamen anestezik burun maskesinin altında olduğundan emin olun.
  8. Boyun damarlarının uygun şekilde açığa çıkmasını kolaylaştırmak için pençeleri vücut ekseninden yaklaşık 90° uzatın.
  9. İşlem sırasında doğru konumlandırma ve stabiliteyi sağlamak için arka patileri vücut ekseniyle aynı hizada bantlayın.
  10. Pençeleri stabilize etmek için cerrahi bantlar kullanın.
  11. Başın ekstansiyonda kaldığından emin olun; Gerekirse, bu pozisyonun korunmasına yardımcı olmak için ağza nazikçe bir çift forseps sokun.
  12. Kuyruğu veya pençeyi sıkıştırarak anestezi derinliğini doğrulayın.
  13. Rektal prob kullanarak vücut ısısını izleyin ve işlem boyunca ısıtma yastığını 37 °C'yi koruyacak şekilde ayarlayın.
  14. Ameliyat bölgesini dezenfekte edin.
    1. Steril bir bez kullanarak bölgeye povidon-iyot ovma uygulayın.
    2. NaCl ile ıslatılmış pamuklu çubuklarla durulayın (üç geçiş).
    3. Alanı kurulayın ve povidon-iyot çözeltisi uygulayın.

2. Operasyonel aşama

NOT: Tüm prosedür bir dürbün büyüteci ve aydınlatıcı bir lamba altında gerçekleştirilir. Prosedür için gerekli tüm ekipman ve cerrahi aletler, Malzeme Tablosunda kullanılan reaktiflerin yanında listelenmiştir ve Şekil 1'de gösterilmektedir.

  1. Juguler ven maruziyeti
    1. Ventro-servikal bölgenin orta hattı boyunca, sternal manubriumun 5 mm yukarısında küçük cerrahi makas kullanarak yaklaşık 1,5 cm'lik uzunlamasına bir cilt kesisi yapın.
    2. İki ince forseps kullanarak, alttaki damarlara erişmek için submandibular bezleri orta hat boyunca nazikçe ayırın, ardından servikal fasyanın yüzeysel ve trakeal öncesi katmanlarını serbest bırakmak için künt diseksiyona devam edin.
    3. Cerrahi alanın görünürlüğünü artırmak için, küçük künt ekartörler kullanarak çevre dokuları dikkatlice değiştirin.
      NOT: Aşağıdaki planda belirtildiği gibi dış juguler venleri ve ardından iç juguler venleri diseke ederek ve bağlayarak başlayın. Dış juguler venlerin bağlanması önce IJV'lerden akışı artırarak genişlemelerine neden olur ve bu da diseksiyonlarını kolaylaştırır.
    4. Dış juguler ven diseksiyonu
      1. Göğüs kafesinin hemen üzerinde bulunan dış juguler damarları, yüzeysel olarak uzandıkları lateralde tanımlayın.
      2. Torasik kafesin hemen üzerindeki kaudal kısmından başlayarak ve kraniyal olarak yaklaşık 1 cm uzanan her damarı dikkatlice inceleyin.
        NOT: Bunu yapmak için, çevredeki yağı kavrayarak küt uçlu bir forseps kullanarak damarı nazikçe kaldırın ve ultra ince, sivri uçlu bir forseps kullanarak etrafını inceleyin.
    5. İç juguler ven diseksiyonu
      1. Trakea üzerindeki kasları sternomastoid ve omohyoid kaslara bağlayan fasyayı ince forseps kullanarak inceleyin.
      2. Sternokleidomastoid kası lateralde ve pretrakeal kasları medialde nazikçe geri çekmek için ekartörler kullanın.
        NOT: İç juguler ven daha sonra iç karotid arteri, vagus sinirini ve servikal lenfatik damarları da içeren bir fasyal kılıf içinde görünür olacaktır. İç juguler ven, fasyal kılıf içindeki diğer yapıların önünde yer alır.
      3. Doku manipülasyonunu en aza indirirken, iç juguler veni çevredeki yapılardan ayırmak için fasyayı hafifçe sıkıştırarak ve yükselterek dikkatlice inceleyin.
        NOT: Son derece kırılgan olduğu için damarı doğrudan kavramaktan kaçının - bunun yerine çevreleyen fasyadan kaldırın. Tercihen, diseksiyon için ultra ince uçlu bir forseps ve damarı yerinde tutmak için yarı künt bir forseps kullanın.
  2. Juguler ven ligasyonu
    NOT: Aşağıdaki adımlar, dış juguler venlerden başlayarak dört damar için de geçerlidir. Özellikle cilt kesisini dikmeden önce, ameliyat bölgesine NaCl damlaları uygulayarak işlem boyunca organların uygun şekilde hidrasyonunu sağlayın.
    1. Damar diseke edildikten sonra, dikkatlice izole etmek ve kalan bağ dokusunu çıkarmak için ultra ince forsepsleri damarın altına hafifçe kaydırın.
    2. 6.0 örgülü dikişi (iğnesiz) forseps uçlarıyla tutun ve yarı künt bir forseps kullanarak damarı nazikçe kaldırırken dikkatlice şah damarının arkasından geçirin.
    3. Dikiş malzemesinin uçlarını birbirinin üzerinden geçirerek bir cerrah düğümü yapın, ardından damarı sabitlemek için sıkın.
    4. Düğümün sağlam olduğundan emin olmak için iki ila üç arasında ek atışlar yapın.
      NOT: İlk ligasyonun tamlığı konusunda belirsizlik varsa, önlem olarak aynı kaba ikinci bir ligatür yerleştirin. Bu ikincil dikiş, aynı eksen boyunca ilk düğümün birkaç milimetre üstüne veya altına yerleştirilmelidir. Sonucu önemli ölçüde etkilemediği için iki düğüm arasındaki mesafenin kesin olarak standartlaştırılmadığını unutmayın. Bu adımı, Şekil 2'de gösterildiği gibi, yalnızca damarın tam tıkanmasını sağlamak için gerektiğinde gerçekleştirin.
  3. Doku kapatma
    1. Diseke edilen dokuları orijinal konumlarına geri yerleştirin.
    2. Forseps kullanarak, net bir şekilde ortaya çıkarmak için cilt kesisinin kenarlarını nazikçe kavrayın.
    3. Kesiğin her iki kenarının da temiz, kalıntı içermediğinden ve mümkün olduğunca yakın hizalandığından emin olun.
    4. Dikiş ipliğini iğne ile (emilmeyen 5.0 polipropilen) iğne tutucu iğnenin dövülmüş kısmında tutun.
    5. İğneyi kesiğin bir ucuna, kenardan yaklaşık 3-5 mm uzağa sokun. Düzgün yerleştirme için doku yüzeyine 90°'lik bir açı kullanın.
    6. İğneyi doku boyunca hareket ettirin ve kesiğin her iki tarafından eşit şekilde geçmesini sağlayın.
    7. İlk düğümü bağlayın ve dokuyu boğmadan hafifçe sıkın.
    8. İki atış daha yapın ve düğümün sağlam olduğundan emin olun.
    9. Sıktıktan sonra, düğümün ötesinde dikişin yaklaşık 1-2 mm'sini bırakmak için dikiş uçlarını kesin.
    10. Yaklaşık 0,25 cm aralıklarla eşit aralıklarla altı ayrı dikiş atarak cilt kesisini tamamen kapatmak için prosedürü tekrarlayın.
      NOT: Deneysel tasarımda uygun kontroller oluşturmak için, sahte çalışan fareler dahil edilebilir. Bu hayvanlar, damar maruziyeti için aynı cerrahi prosedüre tabi tutulur, ancak ligasyon yapılmaz (yani, adım 2.2 atlanır).

3. Ameliyat sonrası bakım

  1. Ameliyattan sonra hayvanı ısıtılmış bir iyileşme odasına yerleştirin.
  2. Bilinci tamamen iyileşene kadar her 5 dakikada bir 2 dakika boyunca görsel gözlem yoluyla hayvanın solunumunu izleyin.
  3. Hayvanın yeterli sıcaklığa sahip olduğundan emin olun.
  4. Kemerli sırt, uyuşukluk, kafes açıldığında hareket etmeme gibi ağrı belirtilerini kontrol edin.
  5. Ameliyattan sonraki 2 gün boyunca her 8-12 saatte bir deri altından buprenorfin (0,1 mg/kg; 12,5 μg/mL; 200 μL) uygulayın.
    NOT: Buprenorfin yetersizse, ameliyattan sonraki ilk günden itibaren her 12 saatte bir Karprofen deri altı enjeksiyonu (5 mg/kg, seyreltilmiş 1:80, 200 μL) eklenebilir.
  6. Sadece uyandıktan ve tamamen iyileştikten sonra, hayvanı yavru arkadaşlarıyla birlikte barınak kafesine geri koyun.
    NOT: Bu aşamada ve 48 saatlik bir süre boyunca, jel formundaki standart yiyecek ve su, kafes rafları yerine doğrudan kafese yerleştirilir ve farelerin boyunlarını germeye gerek kalmadan rahatça yiyip içmelerini sağlar.
  7. Ameliyattan sonraki ilk 48 saat boyunca hayvan refahını günlük olarak, ardından 7. güne kadar 2 günde bir ve daha sonra haftada bir kez izleyin.
    NOT: İzleme, ağrı, stres veya klinik bozulmanın tespit edilmesini sağlayan görünüm, doğal ve kışkırtılmış davranış, vücut ağırlığı ve cerrahi bölgeyi içerir. Bu gözlemlere dayanarak, gerekirse analjezi, destekleyici bakım veya ötenazi dahil olmak üzere uygun önlemler alınmalıdır.

Sonuçlar

Ven ligasyonundan hemen sonra, ligasyon bölgesinin yukarısındaki damar segmenti gözle görülür şekilde genişlerken, aşağı akış segmenti çöker ve kan çıkışının kesilmesi nedeniyle düz ve soluk görünür (Şekil 2). İlk ligasyonu takiben kan akışının yeniden yönlendirilmesi, diğer üç juguler venin pulsatil bir şekilde hafifçe genişlemesine neden olur.

figure-results-1

figure-results-2

figure-results-3

figure-results-4

Tartışma

Bu metodolojik makale, iç ve dış juguler venlerin bilateral ligasyonu yoluyla farelerde serebral venöz çıkış tıkanıklığını indüklemek için cerrahi prosedürü açıklamaktadır. Dişi fareler, tipik olarak IIH'den etkilenen hastaların cinsiyet ve yaş profilini yansıtacak şekilde seçildi. Bu model, intrakraniyal hipertansiyon ve beyin sıvısı tutulması gibi IIH'nin temel klinik özelliklerini etkili bir şekilde indükler, hastalığın merkezi bir patofizyolojik özelliği olarak serebral venöz çıkış bozukluğunu vurgular ve bu modelin uygunluğunu destekler23. Bununla birlikte, telafi edici vasküler yeniden şekillenme nedeniyle, bu özellikler yalnızca geçicidir. JVL'li fareler bu nedenle IIH patofizyolojisini taklit etmez ve kronik venöz bozuklukların uzun vadeli sonuçlarını yeniden üretmezler. Bununla birlikte, serebral venöz çıkışın değişmesinden sonra normal kan akışını ve BOS drenajını eski haline getirmek için kanda ve lenfatik damar sisteminde indüklenen yeniden şekillenme süreçlerini araştırmak için ilginç bir model sağlarlar. Ameliyattan birkaç hafta sonra gözlemlenen vasküler fenotipteki dinamik değişiklikler, JVL farelerini beyin vasküler yeniden şekillenme mekanizmalarını ve bunun sıvı klirensi ve bağışıklık gözetimi üzerindeki etkisini incelemek için uygun bir model haline getirir23. Mevcut aşamalı protokol, özellikle yetenekli uygulayıcılar tarafından gerçekleştirildiğinde, deneyler arasında yüksek düzeyde tutarlılık sağlar ve bu da onu venöz çıkış bozukluklarının patofizyolojisini incelemek için etkili bir yaklaşım haline getirir. Ek olarak, bu model boylamsal çalışma fırsatları sunarak araştırmacıların venöz tıkanıklığın ilerlemesini ve çözümünü değerlendirmesine olanak tanır.

JVL cerrahi prosedürünün ana avantajı ve yeniliği, dural vasküler yapıların bütünlüğünü korurken serebral venöz çıkış tıkanıklığını indükleme yeteneğinde yatmaktadır. İntrakraniyal yaklaşımların 16,17,18 aksine, bu teknik dura mater ve ilişkili meningeal damarlara doğrudan zarar gelmesini önleyerek aşağı akış vasküler ve sıvı klirensi değişikliklerinin güvenilir bir şekilde analiz edilmesini sağlar. Koagülasyon veya çift ligasyon ve ardından damar transeksiyonu21,22 içeren diğer servikal tekniklerle karşılaştırıldığında, bu yöntem daha az invazivdir ve doku manipülasyonunu en aza indirir. Damarın koterizasyonundan veya aşırı manipülasyonlarından kaçınarak, bitişik servikal lenfatik damarlara zarar verme riskini azaltır - beyin sıvısı drenajı ve bağışıklık gözetimindeki rolleriyle giderek daha fazla tanınan yapılar.

Bununla birlikte, ameliyat teknik olarak zorlu olmaya devam etmektedir ve özellikle ilk 48 saat boyunca ameliyat sonrası yakın izleme gerektirir. Başlıca zorluklardan biri, yüksek cerrahi hassasiyete duyulan ihtiyaçtır. Prosedür, bitişik kritik yapıların yaralanmasını önlerken hem iç hem de dış juguler damarların dikkatli bir şekilde diseksiyonunu ve ligasyonunu içerir. Hayvanın doğru konumlandırılması çok önemlidir: Fare, servikal maruziyeti optimize etmek için ön ayakları vücuda dik açılarda uzatılmış ve baş ekstansiyonda tutularak sabit bir şekilde sabitlenmelidir. İç juguler ven, karotis arter, vagus siniri ve servikal lenfatik damarlara yakınlığı nedeniyle izole edilmesi özellikle hassastır. Hayatı tehdit eden yaralanmaları önlemek için titiz bir diseksiyon gereklidir. Vagus sinirinin sıkışması veya hasar görmesi, ciddi otonomik bozukluklar nedeniyle ani ölümle sonuçlanabilir ve özellikle damar delinmesinden kaynaklanan önemli kanamalar, derhal kontrol edilmezse hızlı bozulmaya ve ölüme neden olabilir. Anestezi, işlem boyunca dikkatle izlenmeli, izofluran seviyesi solunum hızına göre ayarlanmalı ve vücut ısısı bir ısıtma yastığı aracılığıyla korunmalıdır. Özellikle intraoperatif kanama durumunda yeterli hidrasyon da kritik öneme sahiptir. Anestezik profili kararsız olduğundan ve etki süresi prosedürün uzunluğuna ve taleplerine uygun olmadığından ketamin kullanımı önerilmez.

Ek olarak, çeşitli sınırlamalar da kabul edilmelidir. Bu model yalnızca genç dişi C57BL/6J farelerde doğrulanmıştır ve sonuçlar cinsiyete, yaşa veya genetik geçmişe bağlı olarak değişebilir. Ayrıca, bu modelde venöz oklüzyon ekstrakraniyaldir, oysa insanlarda IIH intrakraniyal dural sinüs stenozunu içerir. Bu modelde gözlenen ve ekstrakraniyal venöz hipertansiyondan kaynaklanan yüz şişmesi, IIH hastalarında ortaya çıkmaz ve bazı periferik özelliklerin translasyonel ilişkisini sınırlayabilir. Türler arasındaki anatomik farklılıklar, insan fizyolojisine doğrudan ekstrapolasyonu daha da kısıtlar. Örneğin, farelerde, dış juguler venler, insanlarda iç juguler venlerden daha önemli ölçüde serebral venöz drenaja katkıda bulunur23. Ayrıca, vertebral damarlar farelerde insanlardan daha önemli bir rol oynar24,25. Son olarak, insanlarda serebral venöz drenaj, dik pozisyonda büyük ölçüde yerçekimine bağlıdır ve bu da venöz dönüşü etkiler. Farelerde, daha küçük beyin boyutu ve yatay duruş, beyinden venöz kan dönüşünün etkinliğini ve mekanizmasını daha az etkileyen yerçekiminin rolünü azaltır26.

Bununla birlikte, bu model, bozulmuş serebral venöz çıkışın serebro-meningeal kan damarlarının ve meningeal lenfatiklerin yeniden şekillenmesini ve ayrıca zaman içinde beyin sıvısı dinamiklerindeki değişiklikleri nasıl yönlendirdiğini araştırmak için sağlam ve benzersiz bir platform sunar. İnsan venöz bozukluklarının kronik ve anatomik yönlerini taklit etmedeki sınırlamalarına rağmen, JVL modelinin uygulanması kolaydır ve yüksek oranda tekrarlanabilir, bu da onu serebral kan akışının düzenlenmesi ve beyin sıvısının temizlenmesinde yer alan temel mekanizmaları incelemek için değerli bir araç haline getirir.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma Venolymphatic (BBT.1300), NEIMO (FRN, Fond de Recherche Neurosciences), BrainWash (ANR-17-CE14-0005), Lymbrain (ANR-20-CE16-0027-01) tarafından desteklenmiştir. Yazarlar aşağıdaki kaynaklar tarafından finanse edilmektedir: M.-R. El Kamouh, ANR-Lymbrain; M. Spajer, BBT.1300 Venolymfatik ve INCA (Institut National du Cancer); Anne-Laure Joly Marolany: NEIMO (FRN) ve ANR-11-INBS-0006; R. Singabahu: BBT.1300 Venolymphatic, INCA (Institut National du Cancer); S. Lenck: Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale and Assistance Publique des Hôpitaux de Paris CIHU-2021.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
1 mL şırınga Omnifix 100 SoloB. BraunReferans 91611708VHidrasyon/seyreltme için kullanılır
Denge KERN 400-45NKERN & SOHN400-45KHayvan ağırlığını takip etmek için kullanılır
Binoküler stereotaksik mikroskop (Leica S6E)Leica BIOSYSTEMS Leica S6E
Örgülü iplikFST18020-60Damar ligasyonu için kullanılır
Buprenorfin (Buprecare), 0,3 mg/mLMerkezciBUP002 SerisiAnaljezi için kullanılır
Inventor 2010 Scavenger için Kartuş (anestezi)FİME8438025Anestezi için kullanılır
Kumaş MedicompHartmann411029Aseptik koşulları korumak için kullanılır
Pamuklu çubuklarMerkezciCOT010Aseptik koşulları korumak için kullanılır
Kavisli cımbız (Dar Desen Kavisli tırtıklı)FİME11003-20 Sayısı
Euthasol, 400 mg/mLMerkezciEUT003 SerisiÖtenazi için kullanılır
İnce kavisli cımbız (McPherson Forseps) FİME11063-07 Numarası
İnce Iris makası düz FİME22002-10 veya 14094-11 Sayılı
İnce düz cımbız (Dumont Inox Medbio Forseps)FİME11254-20 Numarası
Isıtma haznesi VET-TECHFİMEHE011Vücut sıcaklığını 37 °'de korumak için kullanılır; C
Homeotermal izleme sistemi Thermostar RWD FİME69027Vücut ısısını izlemek için kullanılır
İnsülin şırıngası 0,5 mL U-100 (0,33 mm (29 G) x 12,7 mmBD Mikro İnce TM+Referans 324892 Analjezi için kullanılır
İzofluran (Iso-vet), 1000 mg/gMerkezciISO005 StandardıAnestezi için kullanılır
Düz sivrisinek forsepsFİME13010-12 Numarası
Emici olmayan 5.0 polipropen sütür (Dafilon 5.0)MerkezciDAF003 SerisiCilt dikişi için kullanılır
Noyes makası düz FİME15012-12 Numarası
Oftalmik jel (Ocrygel)MerkezciOCR002 (İngilizce)Gözleri tahriş ve kuruluktan korumak için kullanılır
Povidum İyot Çözeltisi (Vetedine), 75 mg/mLMerkezciVET001Aseptik koşulları korumak için kullanılır
Povidum ovma %4 (sabun)MerkezciBakış Açısı008Aseptik koşulları korumak için kullanılır
Ekartörler (Guthrie)FİME17021-13 Numarası
Rimadil (Karprofen), 50 mg/mLMerkezciRIM012Analjezi için kullanılır
Tıraş Makinesi MOSER Almanya BiyosepBIO-1556Kürk tıraşı için kullanılır
Küçük anestezi kutusu indüksiyonuFİMEpas de ré fé rence
Sodyum klorür çözeltisi %0,9 B.BRAUNMerkezciCHL050Hidrasyon/seyreltme için kullanılır
Stereotaksik çerçeve KOPF FİME963076A SerisiHayvanı konumlandırmak için kullanılır
Ameliyat lambası (ré f: KL 1500 LED)LEICA BİYOSİSTEMLERİ KL 1500 LED
Cerrahi BantMerkezciCOL427Üst ve alt uzuvları sabitlemek için kullanılır
TERUMO AGANI İğneler 26 G x (0.45 x 13 mm) Düzenli eğim 11&derece;Terumo AN*2613R1Analjezi için kullanılır
Ksilazin (Paxman), 20 mg/mLMerkezci221631Analjezi için kullanılır

Kaynaklar

  1. Rua, R., McGavern, D. B. Advances in meningeal immunity. Trends Mol Med. 24 (6), 542-559 (2018).
  2. Rustenhoven, J., et al. Functional characterization of the dural sinuses as a neuroimmune interface. Cell. 184 (4), 1000-1016.e27 (2021).
  3. Kılıç, T., Akakın, A. Anatomy of cerebral veins and sinuses. Front Neurol Neurosci. 23, 4-15 (2007).
  4. Balik, V., et al. Variability in wall thickness and related structures of major dural sinuses in posterior cranial fossa: A microscopic anatomical study and clinical implications. Oper Neurosurg. 17 (1), 88-96 (2019).
  5. Walsh, D. R., Lynch, J. J., O' Connor, D. T., Newport, D. T., Mulvihill, J. J. E. Mechanical and structural characterisation of the dural venous sinuses. Sci Rep. 10 (1), 21763(2020).
  6. Louveau, A., et al. Structural and functional features of central nervous system lymphatic vessels. Nature. 523 (7560), 337-341 (2015).
  7. Antila, S., et al. Development and plasticity of meningeal lymphatic vessels. J Exp Med. 214 (12), 3645-3667 (2017).
  8. Absinta, M., et al. Human and nonhuman primate meninges harbor lymphatic vessels that can be visualized noninvasively by MRI. eLife. 6, e29738(2017).
  9. Ahn, J. H., et al. Meningeal lymphatic vessels at the skull base drain cerebrospinal fluid. Nature. 572 (7767), 62-66 (2019).
  10. Jacob, L., et al. Conserved meningeal lymphatic drainage circuits in mice and humans. J Exp Med. 219 (8), e20220035(2022).
  11. Louveau, A., et al. CNS lymphatic drainage and neuroinflammation are regulated by meningeal lymphatic vasculature. Nat Neurosci. 21 (10), 1380-1391 (2018).
  12. Da Mesquita, S., et al. Functional aspects of meningeal lymphatics in ageing and Alzheimer's disease. Nature. 560 (7717), 185-191 (2018).
  13. Grech, O., et al. Cognitive performance in idiopathic intracranial hypertension and relevance of intracranial pressure. Brain Commun. 3 (3), fcab202(2021).
  14. Markey, K. A., Mollan, S. P., Jensen, R. H., Sinclair, A. J. Understanding idiopathic intracranial hypertension: mechanisms, management, and future directions. Lancet Neurol. 15 (1), 78-91 (2016).
  15. Nicholson, P., et al. Venous sinus stenting for idiopathic intracranial hypertension: a systematic review and meta-analysis. J NeuroInterventional Surg. 11 (4), 380-385 (2019).
  16. Bourrienne, M. -C., et al. A novel mouse model for cerebral venous sinus thrombosis. Transl Stroke Res. 12 (6), 1055-1066 (2021).
  17. Taniguchi, R., et al. A mouse model of stenosis distal to an arteriovenous fistula recapitulates human central venous stenosis. JVS Vasc Sci. 1, 109-122 (2020).
  18. Ding, R., et al. Activating cGAS-STING axis contributes to neuroinflammation in CVST mouse model and induces inflammasome activation and microglia pyroptosis. J. Neuroinflammation. 19 (1), 137(2022).
  19. Atkinson, W., et al. Ligation of the jugular veins does not result in brain inflammation or demyelination in mice. PLoS One. 7 (3), e33671(2012).
  20. Bolte, A. C., et al. Meningeal lymphatic dysfunction exacerbates traumatic brain injury pathogenesis. Nat Commun. 11 (1), 4524(2020).
  21. Auletta, L., et al. Original Research: Feasibility and safety of two surgical techniques for the development of an animal model of jugular vein occlusion. Exp Biol Med. 242 (1), 22-28 (2017).
  22. Nyul-Toth, A., et al. Cerebral venous congestion exacerbates cerebral microhemorrhages in mice. GeroScience. 44 (2), 805-816 (2022).
  23. El Kamouh, M. -R., et al. Cerebral venous blood flow regulates brain fluid clearance via dural lymphatics. bioRxiv. , (2024).
  24. Mancini, M., et al. Head and neck veins of the mouse. A magnetic resonance, micro computed tomography and high frequency color Doppler ultrasound study. PloS One. 10 (6), e0129912(2015).
  25. Farrar, M. J., Rubin, J. D., Diago, D. M., Schaffer, C. B. Characterization of blood flow in the mouse dorsal spinal venous system before and after dorsal spinal vein occlusion. J Cereb Blood Flow Metab. 35 (4), 667-675 (2015).
  26. Fitzpatrick, Z., et al. Venous-plexus-associated lymphoid hubs support meningeal humoral immunity. Nature. 628 (8008), 612-619 (2024).
  27. Johnson, J. N., et al. The human craniospinal venous system and its influence on postural intracranial pressure: a review. J Neurosurg. 141 (6), 1484-1493 (2024).

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Serebral Ven z Okly zyonJuguler Ven LigasyonuLenfatik DrenajBeyin S v Homeostazntrakraniyal HipertansiyonMR VenografiVask ler Yeniden ekillenmeMeningeal Lenfatikler
Video yakında

İlgili makaleler