Burada, terminal bir prosedür olarak bir vakum pompasına bağlı perkütan intrakardiyak kanülasyon kullanarak domuzdan büyük miktarda kan toplamak için bir yöntem sunuyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
In Vitro Uygulamalar için Domuzdan Büyük Hacimli Kan Alma: İntrakardiyak Kanülasyon ve Vakum Pompasının Terminal Prosedür Olarak Kullanımı
Bu makalede
Özet
Özet
Rutin kan alımı, birçok temel ve uygulamalı araştırma çalışmasında gereklidir. Domuz kanı toplama için birden fazla yöntem iyi tanımlanmıştır. Bunlar, küçük kan hacimlerinin toplanması için kulak damarlarının ve daha büyük kan hacimlerinin toplanması için juguler damarların veya kraniyal vena kava'nın kullanılmasını içerir. Bazı deneyler, analiz veya birincil hücre kültürlerinde kullanım için bir kerede tek bir hayvandan büyük miktarda kan gerektirir ve bu da en iyi şekilde kan kaybı yoluyla elde edilebilir. Birincil hücre kültürü için toplanan kan, hücresel bütünlüğü korumak için taze ve dikkatli bir şekilde işlenmelidir. Kalbe perkütan olarak yerleştirilen geniş delikli intravasküler kateter stile ve verimli, büyük bir verim sağlayan ve hücre lizizini en aza indiren bir vakum pompası kullanarak, cerrahi bir anestezi düzlemi altında domuzdan aseptik olarak kan toplama yöntemini tarif ediyoruz. Bu teknik, bir hayvan üzerinde, cerrahi bir anestezi düzleminde, terminal bir prosedür olarak bir kez gerçekleştirilir ve ağrı veya sıkıntı için minimum risk sağlar.
Giriş
Domuzlar, kardiyovasküler çalışmalardan yara iyileşmesi ve toksikolojiye kadar çeşitli çalışmaların yanı sıra tarıma dayalı araştırma, immünoloji ve hastalık çalışmalarına kadar çeşitli araştırmalarda kullanılmıştır1. Araştırmada toplanan kan, hastalıklar, farmakoloji, genetik, bağışıklık sistemi araştırmaları ve biyobelirteç keşfini incelemek için kullanılabilir. Hücre kültürü, araştırmada yapılan en temel prosedürlerden biridir ve araştırmacıların hücre davranışı ve işlevinin yanı sıra hastalık modelleri ve aşı geliştirme çalışmalarını incelemelerine olanak tanır2. Afrika Domuz Ateşi V....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu çalışma Midwest Veterinerlik Hizmetleri A.Ş. Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır. Bu prosedür sırasında IACUC onaylı, birincil ötenazi yöntemi kan kaybı olduğundan, bazı domuzların kan kaybı nedeniyle kalp durması geçirmesi beklenmektedir. Bu meydana geldiğinde, bilateral torakotomi gibi ikincil bir ötenazi yöntemi gerçekleştirilir. Gerekli kan hacmi toplandıktan sonra, ele gelen bir kalp atışı varsa, stile ötenazi solüsyonlu bir şırınga takılır ve birincil ötanazi yöntemi olarak intrakardiyak olarak uygulanır, ardından ikincil bir fiziksel yöntem uygulanır. Domuzlar, Araştırma ve Öğretimde Tarım Hayvanlarını....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Kan alımından önce, dişi domuzlar Mycoplasma hyopneumoniae, domuz adenovirüsü, domuz parvovirüsü, domuz koronavirüsleri (bulaşıcı gastroenterit, domuz salgını ishali), domuz hemoaglütinan ensefalomiyelit, domuz üreme ve solunum sendromu, grip grubu A, sirkovirüs 1 ve 2 ve Seneca virüsü A için ön taramadan geçirildi. Bu prosedürü 300-600 lbs ağırlığındaki dişi Yorkshire çapraz domuzlarında defalarca tekrarladık. Kan alımı, küçük domuzlardan 3 L ile daha büyük dişi domuzlardan 8 L.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Buradaki prosedür, dişi domuzların kalbinden bir kerelik büyük miktarda kan toplamak için bir kateter-stilet-vakum pompası tertibatını açıklar. Ağrı ve sıkıntı potansiyeli nedeniyle, bu prosedür sadece cerrahi anestezi düzleminde olan hayvanlarda yapılmalıdır. Anesteziden hareketsizlik, bu prosedürün yeni başlayanlar tarafından öğrenilmesini ve hızlı bir şekilde ustalaşmasını sağlar. Hayvanlardan kan almak için birden fazla damar kullanılabilir. En yaygın ve erişilebilir yollar juguler v.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklanacak herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Teşekkürler
Plum Adası Hayvan Hastalıkları Merkezi Hayvan Kaynakları Şubesine, hem Hayvan Sağlığı Teknisyenlerine hem de Hayvan Bakımına mükemmel teknik yardım için özellikle teşekkür etmek istiyoruz. Sözleşmeli araştırma organizasyonundaki proje için finansman, NBAF'deki USDA, ARS, Hayvan Kaynakları Birimi tarafından sağlandı.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 1/8 HP Laboratuvar Modeli Diyafram Pompası & Dash; 115 VAC, maksimum 60 psi | Üs Tedarik Merkezi | 80058845 | |
| 10 G x 6 iğne üzerine kateter | Covetrus Kuzey Amerika Veterinerlik Malzemeleri | 024616 | |
| 50 mL şırınga, luer kilidi | Fisher Scientific | 13-689-8 | |
| Aquasonic 100 ultrason jel mavi | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 001.02109.2 | |
| Argyl kabarcık borusu, İletken Olmayan (¼ ") | Fisher Scientific | NC2282605 (Satıcı kataloğu # 8888280412) | |
| Klorheksidin Q Scrub %2 | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 562.30804.3 | |
| Corning Tek Kullanımlık Silindirli Şişeler. | Fisher Scientific | 06-413 | |
| Corning PYREX dar ağızlı ağır hizmet camı Erlenmeyer şişesi veya benzeri emiyor ve emiyor; | Fisher Scientific | 10-040F | |
| Eisco naylon test tüpü fırçası | Fisher Scientific | S13962 | |
| Fisher markası iki delikli kauçuk stoperler | Fisher Scientific | Boyuta ve nbsp'ye bağlıdır; | |
| Ketamin (10 mg/mL) | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 275.22100.3 | |
| MLL'den 6 mm hortum ucuna (paslanmaz çelik) ve nbsp; | Cadence Science | 6547IND | |
| MLL'den 8mm hortum ucuna (paslanmaz çelik) & nbsp; | Cadence Science | 6549IND | |
| MVet gazlı bez sünger dokumamış 4 x 4 4 ply | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 000.30156.2 | |
| MVet izopropil alkolü %70 | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 000.50054.3 | |
| MVet Kelly, hemostatik pensler düz 5.5" | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 000.36800.2 | |
| Sodyum Heparin (1000 U/mL) | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 191.46701.3 | |
| Sodyum Pentobarbital (390 mg/mL) | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 749.20000.3 | |
| Paslanmaz çelik pipetler; | Hobi Lobisi | 1893635 | |
| Telazol (100 mg/mL) | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 275.40000.3 | |
| Ksilazin (100 mg/mL) | Orta Batı Veterinerlik Tedariki | 310.01150.3 |
Kaynaklar
- Almond, G. W. Research applications using pigs. Vet Clin North Am Food Anim Pract. 12 (3), 707-716 (1996).
- Sageritz, C. P., Vallier, L. Cell culture. Growing cells as model systems in vitro. Basic Science Methods for Clinical Researchers. Jalali, M., Saldanha, F. Y. L., Jalali, M. , 151-172 (2017).
- Mothes....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
