Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Eklem iltihabı ve travma sonrası osteoartriti incelemek için bir kemirgen modelinde ön çapraz bağ transeksiyonu ve sinovyal sıvı lavajı

3.5K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/68713

⸱

2 Eylül 2025

 ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Burada, kemirgenlerde diz osteoartritini indüklemek için güvenilir bir model olarak ön çapraz bağı (ÖÇB) kesmek için cerrahi bir yöntem ve diz sinovyal sıvısının toplanması, diz ödeminin ölçülmesi ve osteoartrit şiddetinin değerlendirilmesi için metodolojiler açıklanmaktadır.

Özet

Osteoartrit (OA), kronik ağrı ile karakterize bir eklem hastalığıdır ve şu anda tedavisi yoktur. OA'nın bir alt kümesi olan travma sonrası osteoartrit (PTOA), bir eklem yaralanmasından sonra ortaya çıkabilir. Diz en çok etkilenen eklemlerden biridir ve diz yaralanmaları arasında ACL yaralanmaları en yaygın olanları arasındadır. Kıkırdak bozulması ve osteofit oluşumu gibi eklemde değişikliklerin eşlik ettiği semptomatik OA, ilk yaralanmadan yıllar sonra gelişebilir, ancak erken eklem değişiklikleri kısa bir süre sonra tespit edilebilir. Enflamasyon, PTOA gelişimine katkıda bulunan faktörlerden biri olarak kabul edilir ve bir yaralanmaya yanıt olarak üretilen pro-inflamatuar mediatörler PTOA gelişimini katalize edebilir. Hayvan modellerinde, dizdeki yapıların cerrahi olarak yaralanması, OA indüksiyonunun yaygın olarak kullanılan bir yöntemidir ve yaygın bir cerrahi teknik, bir ACL transeksiyonudur (ACLT). Bu çalışmanın amacı, OA indüksiyonu için ACLT tekniğimizin yanı sıra eklem inflamasyonunu izleme ve OA şiddetini ölçme yöntemlerini tanımlamaktır. Ameliyat sonrası iltihabı değerlendirmek için, diz ödemini ölçmek için bir tekniğin yanı sıra diz sinovyal sıvısının toplanması ve analiz edilmesi için bir teknik tarif ediyoruz. OA ile ilişkili uzun vadeli eklem değişikliklerini değerlendirmek için, mikroBT görüntüleme ile OA şiddetini değerlendirmek için geliştirdiğimiz yarı kantitatif bir skorlama sistemi sunuyoruz.

Giriş

Ön çapraz bağ (ÖÇB), diz ekleminde stabilite sağlayan ve tibianın femur1'e göre aşırı ileri hareketini önleyen kritik bir yapıdır. ÖÇB yaralanmaları, özellikle ani durmalar, sıçramalar veyayön 2 değişiklikleri içeren sporlarda en yaygın diz yaralanmaları arasındadır. Bu yaralanmalar kısmi yırtıklardan tam yırtılmalara kadar değişebilir ve genellikle optimal iyileşme için cerrahi müdahale gerektirir3. Bununla birlikte, cerrahi tedaviden sonra bile, ACL yaralanmaları sıklıkla kondral aşınma, osteofit oluşumu ve subkondral kemikte yapısal değişiklikler dahil olmak üz....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan çalışmaları, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzuna uygun olarak yürütülmüş ve Brigham and Women's Hospital Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır.

1. Hayvan hazırlama

NOT: Fare cinsiyeti seçimi, çalışmanın hedefleriyle uyumlu olmalıdır, çünkü ACLT her iki cinsiyette de PTOA'yı güvenilir bir şekilde indüklese de, şiddeti ve ilerlemesi farklı olabilir.

  1. Anestezi hazırlığı: Ketamin-ksilazin (KX) anestezik solüsyonunu önceden hazırlayın.
    NOT: İnhalan anestezi (% 2 izofluran) da kullanılabilir.....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

ACLT prosedürü, kemirgen dizinde osteoartriti indüklemek için etkili ve tekrarlanabilir bir cerrahi yöntemdir. ACLT prosedürü steril koşullar altında gerçekleştirildikten sonra, fareler insizyon bölgesinde herhangi bir sıkıntı veya enfeksiyon belirtisi göstermedi ve ameliyat edilen uzuvda topallık belirtisi olmadan serbestçe hareket etti.

ÖÇLT'yi takiben diz ödemini izlemek için diz boyutu ölçüldü (Şekil 7A). Fare boyutundaki varyasyonu kontrol etmek için, yaralı .......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu teknik açıklama, ACL'yi keserek farelerde ACL yaralanmalarını indüklemek için ayrıntılı bir cerrahi yöntem sağlar ve PTOA'yı incelemek için kontrollü bir model sunar. ACLT cerrahi modeli, PTOA'yı indüklemek için yaygın olarak kullanılan bir klinik öncesi yaklaşımdır ve değişmiş eklem biyomekaniği, sinovyal inflamasyon ve kıkırdak bozulması dahil olmak üzere insan ÖÇB yaralanmalarında gözlenen temel patolojik özellikleri etkili bir şekilde çoğaltır (Şekil 7

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

Hiç kimse.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
1x fosfat tamponlu salin (PBS)CytivaSH30256.02
%4 paraformaldehitFisher BilimselAAJ19943K2
%70 EtanolFisher BilimselBP82031GAL
Emilebilir 6-0 sütürPatterson Veteriner Malzemeleri07-893-1916
Künt uçlu forseps Güzel Bilim Araçları11051-10
Pamuklu çubuklarFisher Bilimsel22-029-685
Diseksiyon mikroskobuLeica MikrosistemleriM165 FC
Elektrikli tıraş makinesiBraintree Scientific CLP-9961 Serisi
Etanol mendilleriFisher Bilimsel22-246073
Ethiqa XR (Buprenorfin SR)Covertus721171,3 mg/mL
Göz kayganlaştırıcıPatterson Veteriner MalzemeleriNC1701236 
İnce makasGüzel Bilim Araçları14061-10
Isı yastığıFisher BilimselNC1061604
HorosHoroshorosproject.org
İzofluran Patterson Veteriner Malzemeleri07-890-8115
KetaminPatterson Veteriner Malzemeleri07-890-8598
MeloksikamPatterson Veteriner Malzemeleri07-893-75655 mg/mL
Multipleks tahlilMesoScaleDiscoveryK15069M-1
İğne tutucuMorina Adamı36-2000
No. 11 neşter Güzel Bilim Araçları10011-00
P10 pipetGilson'ınF144055M
P10 pipet uçlarıFisher Bilimsel02-707-439
Povidon-İyot çubuğuMedlineMDS093901ZZ
Scanco Medikal &mikro; CT-35 sistemiScancohttps://www.scanco.ch/systems-overview.html7&ince; &mikro; m voksel boyutu, 55 kVp, 0.145  mA, 600  Ms
Steril örtülerMcKesson Genel TıpNC2032042
Cerrahi yüz maskesiFisher Bilimsel18-048-010
Cerrahi eldivenlerEncore7823PF
Cerrahi bantPatterson Veteriner Malzemeleri07-888-0614
ŞırıngaBD3096231 mL
Vannas yaylı makasDünya Hassas Aletler5017783 mm bıçaklar
Sürmeli kapilerNeiko 01407A
Xylazine Patterson Veteriner Malzemeleri07-893-8424

Kaynaklar

  1. Furman, W., Marshall, J. L., Girgis, F. G. The anterior cruciate ligament: a functional analysis based on postmortem studies. J Bone Joint Surg Am. 58 (2), 179-185 (1976).
  2. Shimokochi, Y., Shultz, S. J. Mechanisms of noncontact anterior cruciate ligament injury.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Ön Çapraz Bağ KesisiDiz İnflamasyonuKıkırdak DegenerasyonuMikroBT GörüntülemeLökosit Göçüİnterlökin 1 Beta