Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

In Vitro İntraluminal Jel İnfüzyonu: İnsan Dirençli Arterlerin Mikroskobik Analizi İçin İleri Bir Yaklaşım

558 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/68773

⸱

19 Ağustos 2025

 ,  ,  ,  , 
1Physiology Unit, Laboratory of Malaria and Vector Research, National Institute of Allergy and Infectious Diseases, 2Surgical Oncology Program, Center for Cancer Research, National Cancer Institute, 3Infectious Disease Pathogenesis Section, National Institute of Allergy and Infectious Diseases

Bu makalede

Özet

Burada, moleküler veya histopatolojik analiz için kesit almadan önce doku stabilize edici jeli damar lümenine infüze ederek insan arteriyel mimarisini korumak için bir protokol sunuyoruz.

Özet

Küçük arterler ve arteriyolleri içeren dirençli arterler, kan basıncının ve doku perfüzyonunun düzenlenmesinde önemli roller oynar. Bu arterlerdeki işlev bozukluğu, hipertansiyon, ateroskleroz ve kalp yetmezliği gibi çeşitli kardiyovasküler durumların yanı sıra nörovasküler durumlara yol açabilir. İnsan dirençli arterlerin incelenmesi, kardiyovasküler hastalık mekanizmalarını anlamak ve hedefe yönelik terapötik stratejiler geliştirmek için çok önemlidir. Bu çalışma, doğal mimarilerini ve hücresel bütünlüklerini koruyarak, lümene doku stabilize edici bir jel infüze ederek izole edilmiş insan direnç arterlerini hazırlamak için yenilikçi bir yöntem sunmaktadır. Abdominal cerrahi geçiren hastalardan insan omental dokuları elde edildi ve dikkatli mikrodiseksiyon ile küçük dirençli arterler (100-300 μm çapında) izole edildi. Arterler daha sonra kanüle edildi, bir kültür miyografi odasında basınçlandırıldı ve% 10 nötr tamponlu formalin ile sabitlendi. Üç boyutlu yapıyı korumak için katılaşmasına izin verilen kanüllü arterin lümenine doku stabilize edici bir jel infüze edildi. Arterlerin korunmasını değerlendirmek için histolojik, immünohistokimyasal ve gen ekspresyon analizleri yapıldı. Histolojik kesitler, iyi tanımlanmış endotel ve düz kas tabakalarını koruyarak arterlerin iyi korunmuş yapısal bütünlüğünü ve doğal mimarisini ortaya çıkardı. İmmünohistokimyasal boyamada CD31 ve α-düz kas aktini gibi belirteçlerin belirgin lokalizasyonu görüldü. İn situ hibridizasyon, moleküler mekanizmalar hakkında bilgi sağlayan spesifik gen ekspresyon modellerini ortaya çıkardı. Bu gelişmiş intraluminal jel infüzyonu yöntemi, hem sağlıklı hem de hastalıklı durumlarda arteriyel yapının, yeniden şekillenmenin ve hücresel etkileşimlerin gelişmiş görüntülemesini ve kapsamlı analizini sağlayan önemli avantajlar sunar. Bu yöntem, vasküler hastalıklar için klinik teşhis ve terapötik stratejileri geliştirme potansiyeline sahiptir ve böylece vasküler biyoloji araştırmalarını ilerletmek için değerli bir araç sağlar.

Giriş

Dirençli arterler kan akışını ve basıncını düzenler ve hipertansiyon, diyabet ve ateroskleroz 1,2,3,4,5 gibi durumlarda önemli değişikliklere uğrar. İnsan dirençli arterlerin incelenmesi, kardiyovasküler patolojileri anlamak ve hedefe yönelik tedaviler geliştirmek için gereklidir 6,7,8,9,10. Kan damarlarını araştırmak için kullanılan geleneksel yöntemler genellikle artefaktlara ve üç boyutlu bütünlük kaybına yol açmıştır 10,11,12,13,14,15. Bu sınırlamaları ele almak için, lümene bir jel infüze ederek izole edilmiş insan direnç arterlerini hazırlamak için yenilikçi bir yöntem sunuyoruz, böylece yaklaşık ex vivo ve / veya in vivo yapılarını koruyoruz.

Bu intraluminal jel infüzyon tekniği, arterlerin doğal mimarisini koruyarak fizyolojik durumlarının daha doğru bir şekilde temsil edilmesini sağlar. Bu yöntem, damar yapısını stabilize ederek, arteriyel yeniden şekillenme, hücresel yapı, mikro alanlar, hetero-hücresel bağlantılar ve farklı hücre katmanları boyunca gen/protein ekspresyonunun ayrıntılı incelemesini kolaylaştırır. Bu teknik, hem sağlıklı hem de hastalıklı durumlarda hücre tipine özgü bileşenleri incelemek için özellikle avantajlıdır.

Bu teknik, son çalışmamızda16 başarıyla uygulanmış ve insan direnç arterlerinin yapısal ve moleküler bütünlüğünü korumada, gelişmiş görüntüleme ve kapsamlı analizleri kolaylaştırmada etkinliğini göstermiştir. Bu uygulamanın başarısı, başkalarının kullanması için bu ayrıntılı protokolü belgelememiz için bize ilham verdi.

Bu yöntem makalesinde, izole edilmiş insan direnç arterlerinin hazırlanması ve bunların biyouyumlu bir doku stabilize edici jel (Doku Koruyucu Jel) ile infüze edilmesi için protokolü açıklıyoruz. Burada, deneysel yöntemi açıklıyoruz ve arteriyel yapının değerlendirilmesi ve farklı hücre katmanlarındaki gen ve protein ekspresyon modellerinin araştırılması için uygulamalarını gösteriyoruz. İnsan dirençli arterlerin hazırlanması için kapsamlı ve tekrarlanabilir bir teknik sağlayarak, kardiyovasküler biyoloji araştırmalarını ilerletmeyü, sonuçların tekrarlanabilirliğini iyileştirmeyi ve kardiyovasküler hastalıklar için yeni tanı ve tedavi yaklaşımlarına katkıda bulunmayı amaçlıyoruz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Aşağıdaki deneyleri yapmadan önce, insan dokularının kullanımının ve aşağıdaki prosedürlerin Kurumsal İnceleme Kurulu (IRB) tarafından onaylandığından emin olun. Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) Klinik Merkezi'nde klinik olarak belirtilen abdominal operasyonlar geçiren hastalardan meme dokusu toplanması, NIH Kurumsal İnceleme Kurulu'nun (NCT01915225) onayı ile gerçekleştirilmiştir. Tüm katılımcılar yazılı bilgilendirilmiş onam verdi.

1. Malzemeler ve ekipman

  1. Bu protokol için gerekli tüm reaktifler ve malzemeler hakkında bilgi için Malzeme Tablosuna bakın. Ek ayrıntılar için, gerektiğinde ilgili satıcılarla ilişkili kılavuzlara ve web sitelerine başvurulabilir.

2. İnsan omental dokularının toplanması

  1. Cerrahi ekipten insan omental dokularını toplayın.
  2. Dokuları hemen soğuk Krebs Henseleit (KH) tamponu (bileşim: 118 mM NaCl, 4.7 mM KCl, 1.2 mM MgSO4, 1.2 mM KH2PO4, 25 mM NaHCO3, 10 mM HEPES, 2.0 mM CaCl2 ve 11.1 mM glikoz) içeren önceden soğutulmuş bir numune kabına yerleştirin.
  3. Dokuların tampona tamamen daldırıldığından emin olun ve ardından kapağı güvenli bir şekilde kapatın.
  4. Doku canlılığını sağlamak için dokuları kapalı kapta buz üzerinde toplandıktan sonra 30 dakika içinde laboratuvara taşıyın.
    NOT: Tamponun hazırlanması sırasında NaOH kullanarak pH'ı 7.4'e ayarladığınızdan emin olun.

3. İnsan küçük dirençli arterlerin mikrodiseksiyonu

  1. Laboratuvara vardığınızda, fazla kanı çıkarmak için omental dokuları soğuk KH tamponu ile durulayın.
  2. Buz üzerinde bir petri kabında soğuk tamponda diseksiyon için dokunun daha vaskülarize bölgesinden bir parça seçin.
  3. Diseksiyon mikroskobu altında, konumlarına ve dallanma paternine göre küçük dirençli arterleri (100-300 μm çapında) tanımlayın.
  4. Tanımlanan arterleri çevredeki yağ ve bağ dokularından dikkatlice izole edin. İnce forseps ve mikro makas kullanarak, artere zarar vermeden çevre dokuları kesin ve çıkarın.
  5. Canlılığı korumak ve herhangi bir enzimatik bozulmayı önlemek için izole edilmiş arterleri diseksiyon prosedürü boyunca soğuk bir tamponda tutun.
    NOT: Diseksiyondan önce diseksiyon alanının temiz olduğundan emin olun. Mikroskop objektif ölçeğinin ve/veya kamera yazılımının, farklı büyütmelerde çapı doğru bir şekilde ölçmek için uygun şekilde kalibre edildiğini doğrulayın. Genellikle damarlar net bir şekilde görülebilir ve atardamarlar damarların hemen yanında veya çevresinde bulunur. Arterlerin duvarları damarlarınkinden daha kalındır. Arterler, çevre dokudan izole edildiklerinde sağlam damar tüpleri olarak yapılarını korurlar. Buna karşılık, damarlar daha ince duvarlara sahiptir, lümenlerindeki kan nedeniyle genellikle daha parlak görünür ve dokudan ayrıldıktan sonra daha kırılgan olma eğilimindedir.

4. Kültür miyograf odasının hazırlanması

  1. Diseke arterlerin kanülasyonu ve basınçlandırılması için iki cam kanül içeren bir kültür miyograf odası hazırlayın.
  2. Temiz kılcal boru ile 5 mL'lik bir şırınga hazırlayın ve taze KH tamponu ile doldurun. Hortumu kanülün bir ucuna bağlayın ve hava kabarcığı bırakmadan KH ile doldurun.
  3. Hazneyi soğuk tamponla doldurun ve düşük bir sıcaklığı korumak için buzun üzerine yerleştirin.
    NOT: Miyografi odasını taklit etmek için tasarlanmış, iki kanüllü özel yapım küçük bir tabak kullanılabilir.

5. Arterlerin kanülasyonu ve basınçlandırılması

  1. Diseke arteri, ince forseps veya arterinkinden daha büyük bir çapa sahip bir transfer pipeti kullanarak dikkatlice miyograf odasına aktarın.
  2. Naylon sütürle (11/0 sütür, 7 katlı) dört açık düğüm hazırlayın ve arteri kanüle etmeden önce her kanülün üzerine iki tane koyun.
  3. Arterin proksimal ucunu ince forseps kullanarak bir cam kanül üzerine kaydırarak kanül edin ve iki naylon sütürle sabitleyin.
  4. Kalan kanı çıkarmak için kanüllü arteri nazikçe yıkamak için şırıngadaki KH tamponunu kullanın.
  5. Arterin distal ucunu kanül edin ve benzer şekilde sabitleyin.
  6. Odayı, basınç ve sıcaklık kontrol cihazına bağlı olan miyograf ünitesine yerleştirin.
  7. Sıcaklığı 37 °C'ye ayarlayın.
  8. İlk intraluminal basıncı 10 mmHg'ye ayarlayın.
  9. İntraluminal basıncı 60 mmHg'ye ulaşana kadar her 10 dakikada bir 10 mmHg'lik artışlarla artırın. Kültür miyograf sistemine bağlı basınç regülatörü kullanılarak basıncın tutarlı bir şekilde korunduğundan emin olun.
  10. Uzunluğu yaklaşık olarak fizyolojik seviyesine getirmek için basınçlı arteri gerektiği gibi uzunlamasına düzeltmek için mikro konumlandırıcıyı kullanın.
  11. Dijital kumpaslarla iç ve dış arter çaplarını izlemek için MyoVIEW veya başka bir uygun yazılımı bilgisayar monitöründe çalıştırın.
  12. Arterin sabit bir çapa ulaşmak için 45 dakika boyunca dengelenmesine izin verin, fizyolojik boyutlarını ve tonunu koruduğundan emin olun.
  13. Bir vazokonstriktör (ör., 60 mM KCl veya Fenilefrin) veya vazodilatör (ör., Asetilkolin) kullanarak arterin canlılığını test edin ve arteriyel çaptaki değişiklikleri kaydedin.
    NOT: Bir şırınga ile aşırı basınç uygulamak artere zarar verebilir, bu nedenle yıkarken dikkatli olmak önemlidir. Minimum miktarda tampon kullanın ve yavaşça ilerleyin. Alternatif olarak, arteriyel kan, arteri basınçlandırırken perfüzyon tamponu kullanılarak dışarı atılabilir. Arterler 80 mmHg'de basınçlandırılabilir ve dengeleme süresi 1 saate kadar çıkabilir.

6. Arter fiksasyonu

  1. Dengelemeyi takiben,% 10 nötr tamponlu formalin ile arterleri gece boyunca luminal ve abluminal olarak sabitleyin. Fiksasyon işleminin arteriyel duvarın ve hücresel bileşenlerin yapısal bütünlüğünü korumasını sağlamak için 60 mmHg'lik sabit bir basınç koruyun.
  2. Fiksasyondan sonra, arter ve odadan kalan fiksatifleri çıkarmak için arterleri PBS ile luminal ve abluminal olarak durulayın.
    NOT: Çalışma amacına ve analiz için ilgilenilen bölgeye bağlı olarak, monte edilen damar, vazodilatör veya vazokonstriktör gibi farmakolojik ajanların varlığında sabitlenebilir. Bu aşamada, arter PBS'de 4 ° C'de 48 saate kadar saklanabilir. % 4 Paraformaldehit, arterleri sabitlemek için de kullanılabilir.

7. Doku stabilize edici jelin hazırlanması

  1. Kullanmadan önce tüpündeki doku stabilize edici jeli 60 ± 5 °C'ye ısıtarak sıvılaştırın.
  2. Sıvı jelin sıcaklığı düşürmesi için tüpü 3-5 dakika oda sıcaklığında (RT) yerleştirin ve ardından sıvı jeli 10-15 dakika korumak için 40 °C'de bir ısıtma bloğuna yerleştirin.
  3. Sıvı jeli çekmek için 10-15 inç uzunluğunda bir kılcal boruya bağlı 3 mL'lik steril bir şırınga kullanın. Hemen aşağıdaki infüzyon adımlarına geçin.
    NOT: Jel, farklı yöntemler kullanılarak sıvılaştırılabilir. Üreticinin talimatlarına uymak önemlidir.

8. İntraluminal jel infüzyonu ve gömme

  1. Sabit arterleri 37 ° C'de PBS ile haznede kanüle edilmiş halde tutun.
  2. Sıvı jel ile doldurulmuş kılcal borunun distal ucunu proksimal kanüle bağlayın.
  3. Jeli infüze ederken hava kabarcıklarının lümenden geçmesini önlemek için, herhangi bir hava kabarcığının dışarı çıkmasına izin vermek ve jelin kanülü doldurmasına izin vermek için arterin proksimal ucunu ilk kanülden çıkarın.
  4. Arteri tekrar kanül üzerine monte edin ve jeli distal kanülden çıkana kadar arter lümenine nazikçe infüze edin.
  5. Hazneyi en üst seviyeye kadar doldurmak için haznedeki PBS'yi hemen eşit hacimde sıvı jel ile değiştirin.
  6. Jelenin lümen içinde ve odadaki lümenin dışında katılaşmasına izin vermek için üniteyi sıcaklık kontrol cihazından yaklaşık 10 dakika ayırarak arterlerin bulunduğu odanın RT'de dinlenmesine izin verin. Bu, arterin üç boyutlu yapısını koruyarak jele tamamen gömülmesini sağlar.
  7. İnce forseps kullanarak naylon dikişleri gevşetin ve kanülleri hazneden yavaşça dışarı çekin.
  8. Arteri içeren katılaşmış jelin tamamını hazneden% 70 etanol ile dolu bir kaba aktarın. Etanol, numuneyi daha sonraki işlemlere kadar korumak için bir tutma çözeltisi görevi görür.
    NOT: Üç bir valf, jeli demlemeden önce hava kabarcıklarının çıkarılmasını kolaylaştırabilir. Jelin katılaşması, temiz bir pipet ucu kullanılarak haznedeki jele hafifçe dokunularak doğrulanabilir.

9. Histopatoloji

  1. Hala jelin içindeyken arteri enlemesine kesin ve bu numuneleri üreticinin talimatlarına göre işlenmek üzere doku işleme makinesine yerleştirin.
  2. Daha sonra, bir parafin bloğu yapmak için dokuyu gömün. Numunelerin, enine kesitler blok üzerinde aşağı bakacak şekilde "uçta" gömüldüğünden emin olun.
  3. Eksenel bölümleri bir mikrotom kullanarak 5 μm kalınlığında kesin. Kesilen bölümleri yapışkan slaytlara aktarın.
  4. Bölümleri 60 °C'de 1 saat pişirin, ardından ksilen ile mumdan arındırın, ardından kademeli alkollü yıkamalarla rehidrasyon yapın.
  5. Rutin histopatoloji için kesitleri hematoksilen ve eozin (HE) ile boyayın ve% 1 asit alkolde farklılaştırın. Kesitleri uygun bir mikroskop kullanarak ışık mikroskobu altında inceleyin ve uyumlu bir kamera kullanarak fotoğraflar elde edin.

10. İmmünohistokimya

  1. Üreticinin protokolüne göre polimer arıtma algılama sistemi ile otomatik bir sistem kullanarak boyama elde edin.
  2. Doku bölümlerini 72 ° C'de 30 saniye boyunca bir mum giderme solüsyonu ile mumdan arındırın, ardından bölümleri kademeli alkollü yıkamalar ve yıkama solüsyonu ile yeniden sulandırın.
  3. Epitop alma solüsyonu 1'de bölümleri 20 dakika boyunca 100 ° C'ye ısıtarak ısıya bağlı epitop alımını gerçekleştirin ve endojen peroksidaz aktivitesini söndürmek için 5 dakika boyunca bir peroksit bloğu uygulayın.
  4. Birincil antikorları uygulayın (ör., anti-CD31 veya anti-düz kas aktini) arka planda seyreltilmiş uygun konsantrasyonlarda antikor seyreltici azaltıcı. Bölümleri bir yaban turpu peroksidaz polimeri ile 8 dakika inkübe edin ve bölümleri 10 dakika boyunca bir kromojen çözeltisi ile renklendirin. Slaytları 5 dakika boyunca hematoksilen ile boyayın.

11. RNAScope kromojenik in situ hibridizasyon

  1. Üreticinin protokolüne göre uygun bir kit ve polimer rafine kırmızı algılama kiti ile otomatik bir sistem kullanarak boyama gerçekleştirin.
  2. Bölümleri 60 °C'de 30 dakika pişirin, ardından 72 °C'ye ısıtılmış bir mum giderme solüsyonunda 30 saniye mumdan arındırın.
  3. Dokuları mutlak etanol yıkamaları ve yıkama solüsyonu ile yeniden sulandırın.
  4. Bölümleri 95 ° C'de 15 dakika boyunca epitop alma solüsyonu 2 ile tedavi edin ve bölümleri 40 ° C'de 15 dakika boyunca bir enzim solüsyonu ile inkübe edin.
  5. Numuneleri hedef genler için uygun RNAScope probları ile hibritleştirin.
  6. Yeterli RNA bolluğunu ve bütünlüğünü doğrulamak için orta eksprese eden bir temizlik gen probu (örneğin, peptidilprolil izomeraz B) kullanın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

İnsan omental dokuları, klinik olarak belirtilen abdominal cerrahi geçiren hastalardan elde edildi. Küçük dirençli arterler (100-300 μm çapında) diseksiyon mikroskobu altında çevre yağ ve bağ dokularından titizlikle izole edildi (Şekil 1A-C). İzole arterler temizlendi, başarılı bir şekilde kanüle edildi ve basınçlandırma için kültür miyograf odasındaki cam kanüllere monte edildi (Şekil 1D-F). Ar...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Tıbbi görüntüleme, cerrahi teknikler ve araştırma metodolojilerindeki gelişmeler, 3D vasküler mimari anlayışımızı geliştirerek teşhis, cerrahi planlama ve araştırmada devrim yaratmıştır 17,18,19,20. Bu yeniliklere rağmen, izole insan direnç arterlerinin 3D yapısını korumak, anatomik ve fizyolojik özelliklerinin kapsamlı çalışmasını sınırlayan, izolasyon ve görü...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

NIAID GenAI, doğruluğu ve tutarlılığı sağlamak için insan yazarlar tarafından kapsamlı bir şekilde yazılmış, gözden geçirilmiş ve düzenlenmiş olan el yazmasının ilk taslağını ve taslağını oluşturmak için kullanıldı.

Teşekkürler

Bu araştırma, Ulusal Alerji ve Bulaşıcı Hastalıklar Enstitüsü'ndeki İntramural Araştırma Bölümü tarafından finanse edildi ve HCA'ya AI001150 numaralı proje yapıldı. Eski laboratuvar üyemiz Dr. Steven Brooks'a ve mevcut laboratuvar üyelerimiz Mohamed Ibrahim, Mary Jackson ve Sıtma Fonksiyonel Genomik Bölümü'nden Jian Wu'ya süreç boyunca görüntü yakalamadaki yardımları için teşekkür ederiz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
%1 Focus Asit AlkolStatLab  SL89-1
%10 NBSLeica Biosystems3800598
4K Mikroskopi HDMI KameraHitech Instruments, Inc.HT-XP4K8MA
Antikor Sulandırıcı - Arka Plan AzaltmaDakoS3022
Otomatik Doku İşlemcisi Leica BiosystemsHistoCore PEGASUS/Cat# 14048858005
Bond Dewax ÇözümüLeica BiosystemsAR9222
Bağ Epitopu Geri Alma Çözümü 1Leica BiosystemsAR9961
Bağ Epitopu Geri Alma Çözümü 2Leica BiosystemsAR9640
Bağ Polimeri Rafinasyon TespitiLeica BiosystemsDS9800
Bağ Polimeri Kırmızı TazminatıLeica BiosystemsDS9390
Bond Wash Solution (10x)Leica BiosystemsAR9590
Kanül Paketi (cam), 80 ve çizgi; 100 μ mDMTÜrün Kodu: 300407
CD31AbcamAB28364
Diseksiyon Tabakları, Büyük (pyrex cam), 93 mmYaşayan Sistemler EnstrümantasyonuSKU: DD-90
Küçük Diseksiyon TabaklarıYaşayan Sistemler EnstrümantasyonuSKU: DD-50
Diseksiyon MikroskobuHitech Instruments, Inc.ZEISS SteREO Discovery.V8 
Dumont #5 PensetlerGüzel Bilim AraçlarıMadde No. 11295-10
Dumont #5SF PensetiGüzel Bilim AraçlarıMadde No. 11252-00
EcoMountBioCare MedicalEM897L
EozinIHC DünyaIW-3100B
HematoksilenBioCare MedicalCathe-MM
Kamera YanımdaOlyumpusDP28
Görüntüleme MikroskobuOlyumpusBX51
Krebs Henseleit Tamponu (2 mM Kalsiyum Klorür ile)Boston BioProducts, Inc.SKU: C-10625N-200mL
Krebs-Henseleit Tamponu (Kalsiyumsuz)Boston BioProducts, Inc.SKU: C-9906W-200mL
Montaj MedyasıThermoFisher Scientific4111
Miyograf odası ve ünitesiDMT202/204CM
PBS (fosfat tamponlu tuzlu sindir)Thermofisher Scientific10010023
PPIB  ACDBio313908
RNAscope 2.5 LS Reaktif Kit-REDACDBio322150
StainerLeicaLeica Bond RX otomatik sistemi
Paslanmaz çelik diseksiyon pinleriYaşayan Sistemler EnstrümantasyonuSKU: PIN 0.1MM | PİN-0.2MM | PİN-#3 | PIN-VP-1
Cerrahi ParaplastLeica Biosystems39601006
Tissue Guard JeliStatLab  TissueGuard/SKU: TG12
Vannas Yay Makasları - 2 mm Kesim KenarıGüzel Bilim AraçlarıMadde No. 15000-03
Vannas Yay Makasları - 2.5 mm Kesme KenarıGüzel Bilim AraçlarıMadde No. 15000-08
Vannas Yay Makası - 3 mm Kesici KenarGüzel Bilim AraçlarıMadde No. 15000-00
α-SMAAbcamAB5694

Kaynaklar

  1. Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. Vascular remodeling in hypertension: Roles of apoptosis, inflammation, and fibrosis. Hypertension. 38 (3 Pt 2), 581-587 (2001).
  2. Mulvany, M. J. Small artery remodelling in hypertension. Basic Clin Pharmacol Toxicol. 110 (1), 49-55 (2012).
  3. Petrie, J. R., Guzik, T. J., Touyz, R. M. Diabetes, hypertension, and cardiovascular disease: Clinical insights and vascular mechanisms. Can J Cardiol. 34 (5), 575-584 (2018).
  4. Schiffrin, E. L. Vascular remodeling in hypertension: Mechanisms and treatment. Hypertension. 59 (2), 367-374 (2012).
  5. Zieman, S. J., Melenovsky, V., Kass, D. A. Mechanisms, pathophysiology, and therapy of arterial stiffness. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (5), 932-943 (2005).
  6. Bell, J. S., et al. Microstructure and mechanics of human resistance arteries. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 311 (6), H1560-H1568 (2016).
  7. Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. Structure and mechanical properties of resistance arteries in hypertension: Role of adhesion molecules and extracellular matrix determinants. Hypertension. 36 (3), 312-318 (2000).
  8. Rajendran, P., et al. The vascular endothelium and human diseases. Int J Biol Sci. 9 (10), 1057-1069 (2013).
  9. Chistiakov, D. A., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. Endothelial barrier and its abnormalities in cardiovascular disease. Front Physiol. 6, 365(2015).
  10. Gurina, T. S., Simms, L. Histology, Staining. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).
  11. Hillman, H. Limitations of clinical and biological histology. Med Hypotheses. 54 (4), 553-564 (2000).
  12. Taylor, A. M., Bordoni, B. Histology, Blood Vascular System. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).
  13. Nolte, P., et al. Spatial correlation of 2D hard-tissue histology with 3D microCT scans through 3C printed phantoms. Sci Rep. 13 (1), 18479(2023).
  14. Taqi, S. A., Sami, S. A., Sami, L. B., Zaki, S. A. A review of artifacts in histopathology. J Oral Maxillofac Pathol. 22 (2), 279(2018).
  15. Torii, S., et al. Histopathologic characterization of peripheral arteries in subjects with abundant risk factors: Correlating imaging with pathology. JACC Cardiovasc Imaging. 12 (8 Pt 1), 1501-1513 (2019).
  16. Brooks, S. D., et al. Sickle trait and alpha thalassemia increase nos-dependent vasodilation of human arteries through disruption of endothelial hemoglobin-enos interactions. Circulation. 151 (1), 8-30 (2025).
  17. Chatzizisis, Y. S., et al. Role of endothelial shear stress in the natural history of coronary atherosclerosis and vascular remodeling: Molecular, cellular, and vascular behavior. J Am Coll Cardiol. 49 (25), 2379-2393 (2007).
  18. Li, S., Liu, S., Wang, X. Advances of 3D printing in vascularized organ construction. Int J Bioprint. 8 (3), 588(2022).
  19. Rengier, F., et al. 3D printing based on imaging data: Review of medical applications. Int J Comput Assist Radiol Surg. 5 (4), 335-341 (2010).
  20. Solanki, R., et al. The importance of three dimensional coronary artery reconstruction accuracy when computing virtual fractional flow reserve from invasive angiography. Sci Rep. 11 (1), 19694(2021).
  21. Tucker, W. D., Arora, Y., Mahajan, K. Anatomy, Blood Vessels. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).
  22. Choi, J., Lee, E. J., Jang, W. B., Kwon, S. M. Development of biocompatible 3D-printed artificial blood vessels through multidimensional approaches. J Funct Biomater. 14 (10), 497(2023).
  23. De Graaf, M. N. S., et al. Multiplexed fluidic circuit board for controlled perfusion of 3D blood vessels-on-a-chip. Lab Chip. 23 (1), 168-181 (2022).
  24. Lapierre-Landry, M., Liu, Y., Bayat, M., Wilson, D. L., Jenkins, M. W. Digital labeling for 3D histology: Segmenting blood vessels without a vascular contrast agent using deep learning. Biomed Opt Express. 14 (6), 2416-2431 (2023).
  25. Abdul Sisak, M. A., et al. A near-infrared organic fluorescent probe for broad applications for blood vessel imaging by high-throughput screening via 3D-blood vessel models. Small Methods. 5 (8), e2100338(2021).
  26. Yu, T., Yang, Q., Peng, B., Gu, Z., Zhu, D. Vascularized organoid-on-a-chip: Design, imaging, and analysis. Angiogenesis. 27 (2), 147-172 (2024).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

İnsan Arter AnaliziMikrodissection TekniğiKültür Miyograf OdasıArteriyel Basınçlandırmaİmmünohistokimyasal BoyamaIn Situ HibridizasyonEndotel Hücre MarkörleriDüz Kas Hücreleri
In Vitro İntraluminal Jel İnfüzyonu: İnsan Dirençli Arterlerin Mikroskobik Analizi İçin İleri Bir Yaklaşım
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.