Yöntem makalesi

Kawasaki Hastalığı ile İlişkili Koroner Arteritin Candida albicans Suda Çözünür Ekstrakt ile İndüklenen Murin Modelinin Oluşturulması ve Değerlendirilmesi

DOI:

10.3791/69041

⸱

7 Kasım 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Medical Laboratory, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 2Department of Anesthesiology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 3Department of Pathology, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University, 44Department of Pediatrics, Huai'an First People's Hospital, Huai'an Clinical College of Xuzhou Medical University, 5Department of Pediatrics, The Affiliated Huai'an NO.1 People's Hospital of Nanjing Medical University

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

CAWS ile indüklenen fare modeli, Kawasaki hastalığının akut inflamasyondan kronik fibrozise ilerlemesini etkili bir şekilde simüle ederek temel patolojik ve immünopatolojik özellikleri ortaya çıkarır ve Kawasaki hastalığı için hedefe yönelik terapötik stratejilerin geliştirilmesini kolaylaştırabilir.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kawasaki hastalığı (KD), primer olarak çocukları etkileyen sistemik bir vaskülittir ve en ciddi komplikasyonu koroner arter lezyonlarıdır. Bu çalışmada, Candida albicans'ın (CAWS) suda çözünür ekstraktı kullanılarak optimize edilmiş bir fare KD modeli oluşturulmuştur. Miyokard enflamasyonu ve buna bağlı patolojik değişiklikler HE boyaması ve Masson trikrom boyaması kullanılarak değerlendirildi. İmmünofloresan tekniği, kalp dokusundaki bağışıklık hücrelerinin infiltrasyonunu tespit etti. VDAC1 proteininin miyokardiyal dokudaki ekspresyonu ve lokalizasyonu immünohistokimya ile tespit edildi. İn vitro olarak, RAW264.7 makrofajlarının Candida albicans sporları ile birlikte kültürlenmesiyle fagositik bir model oluşturuldu ve otofagolizozomların oluşumu ve işlevi, LC3 immünofloresan boyama ve bir Lyso-Tracker Red probu kullanılarak değerlendirildi. Doz taraması sonucunda, koroner arter inflamasyonunu indüklemek için en uygun modelleme dozunun 8 mg olduğu ve bu dozda orta derecede bir ölüm oranı olduğu belirlendi. HE boyama, CAWS enjeksiyonunun farelerde insan Kawasaki hastalığının özellikleriyle tutarlı koroner arter lezyonlarını stabil bir şekilde indüklediğini gösterdi. Masson boyama, CAWS fare grubunda koroner arterler ve aort çevresinde önemli kollajen lifi birikimi olduğunu doğruladı ve bu da inflamatuar alanla yakından örtüştü ve 14 günde kontrol grubundan istatistiksel olarak anlamlı bir fark gözlendi (p < 0.001). İmmünofloresan, modellemenin 14. gününde, CAWS grubunun kalp dokusunda çoklu immün hücrelerin infiltrasyonunun önemli ölçüde arttığını ortaya koydu (p < 0.001). İmmünohistokimyasal sonuçlar, modellemenin 28. gününde, CAWS grubunun miyokardiyal dokusunda VDAC1 proteininin ekspresyonunun önemli ölçüde yukarı regüle edildiğini gösterdi (p < 0.001). İn vitro deneyler, Candida albicans sporları ile enfekte makrofajlarda erken evrede otofagolizozom oluşumunun arttığını, daha sonraki evrede otofajik akışın engellendiğini ve fonksiyonel bir bozukluğu düşündürdüğünü göstermiştir.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mukokutanöz lenf nodu sendromunun bir formu olan Kawasaki hastalığı (KD), 5 yaşın altındaki çocuklarda ortaya çıkan ve ateşli vaskülit 1,2,3'ün eşlik ettiği otoimmün bir hastalıktır. Çalışmalar, tedavi edilmeyen veya 10 günlük şiddetli KD'yi aşan tedavi kurslarının, esas olarak koroner anevrizmalar ve koroner arter stenozu dahil olmak üzere ciddi kardiyovasküler komplikasyonlara neden olma eğiliminde olduğunu göstermektedir 4,5. Koroner anevrizmaların yırtılması, çocuklarda edinilmiş kalp hastalığının ana nedeni olan kardiyojenik şoka ve hatta ani ölüme yol açabilir 6,7. İntravenöz immünoglobulin uygulaması prognozu önemli ölçüde iyileştirmiş olsa da, etiyolojisi ve patogenezi belirsizliğini korumaktadırve bu da hedefe yönelik terapötik stratejilerin geliştirilmesini kısıtlamaktadır 8,9. Bu nedenle, insan hastalıklarının özelliklerini doğru bir şekilde simüle edebilen hayvan modellerinin oluşturulması, mevcut araştırmalar için acil bir ihtiyaç haline gelmiştir.

Şu anda, Kawasaki hastalığı araştırmalarındaki en büyük engel, insan hastalığı patolojisini tam olarak özetleyen iyi karakterize edilmiş hayvan modellerinin olmamasıdır. Şu anda geliştirilen çeşitli modeller arasında, Lactobacillus casei hücre duvarı ekstresi (LCWE) tarafından indüklenen vaskülit modeli nispeten olgun bir sistemdir ve bu model koroner arterite neden olabilir. KD benzeri vaskülitlerde immün düzensizlik mekanizmasını ve spesifik sitokinleri incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır10,11. Candida albicans'ın (CAWS) suda çözünür ekstraktının neden olduğu vaskülit modeli, insan Kawasaki hastalığınınpatolojik özelliklerine yüksek benzerliği nedeniyle de büyük ilgi görmüştür 12,13. Birden fazla araştırma ekibi tarafından sistematik optimizasyon ve iyileştirmeden sonra, CAWS kaynaklı model, Kawasaki hastalığı araştırmaları için önemli bir araç haline geldi14. CAWS, intraperitoneal enjeksiyon yoluyla koroner arter inflamasyonunu indükleyebilse de, insan KD vaskülitinin tam patolojik sürecini tam olarak yeniden üretememesi nedeniyle sınırlamaları vardır. Örneğin, insan KD15'in geç patolojisinde hiçbir nötrofil bulunmadı, ancak bu modelde CAWS enjeksiyonundan 16 hafta sonrasına kadar nötrofil infiltrasyonu meydana geldi16. Ayrıca, CAWS'nin neden olduğu vaskülit mekanizması şu anda tam olarak açıklığa kavuşturulmamıştır, bu da model9'un derinlemesine anlaşılmasını ve uygulanmasını sınırlamaktadır. Bu çalışma, KAWS'nin indüksiyon protokolünü optimize ederek, hastalık mekanizmasını aydınlatarak ve hedefe yönelik tedavilerin geliştirilmesini kolaylaştırarak KD'nin standartlaştırılmış bir hayvan modelini oluşturmayı amaçlamaktadır.

Bu çalışma, Kawasaki hastalığının daha standart bir hayvan modelini oluşturmak için CAWS'yi kullandı. Sistematik doz optimizasyon deneyleri sayesinde, art arda beş gün boyunca günde 8 mg intraperitoneal enjeksiyonun optimal uygulama rejimi olduğu belirlendi. Bu rejim, hayvanlarda yüksek bir hayatta kalma oranını korurken koroner arter lezyonlarını stabil bir şekilde indükleyebilir. Ek olarak, inflamasyondan fibrozise geçiş sırasında mitokondriyal apoptozu düzenleyen önemli bir protein olan voltaja bağlı anyon kanalı 1'in (VDAC1) olası mekanizmasına odaklanarak, KD'nin kronik fazı sırasında fibroz oluşumunda mitokondriyal disfonksiyonun rolünü daha da araştırdık17. Bu çalışmada otofagozom/lizozom ortak lokalizasyon analizi ile bu modelde anormal otofaji fonksiyonunun gözlemlendiğini belirtmekte fayda var. Bu optimize edilmiş model, Kawasaki hastalığında koroner arter lezyonlarının patogenezini sistematik olarak incelemek ve yeni tedavi stratejilerini değerlendirmek için önemli bir araç sağlar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hayvan verilerini içeren tüm araştırma deneyleri, Nanjing Tıp Üniversitesi Bağlı Huai'an No.1 Halk Hastanesi'nin etik kurulu tarafından onaylanmıştır (KY-2024-250-01). Kullanılan reaktifler ve ekipman Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

1. CAWS'nin Hazırlanması

  1. Candida albicans'ı Sabouraud dekstroz suyuna Duong ve ark.18 tarafından belirlenen protokole göre aşılayın. Daha sonra, aşılanmış suyu 37 °C'de 48 saat boyunca bir gaz karışımı ile kapalı bir anaerobik odada anaerobik olarak kültürleyin.
    NOT: Kültür ortamının sterilitesini sağlamak için, çeşitli bakteriler tarafından kontaminasyonu önlemek için 37 ° C'deki anaerobik kültür koşulu sıkı bir şekilde kontrol edilmelidir.
  2. C sınırlayıcı ortamla tekrar tekrar durulayın ve 37 °C'de 48 saat boyunca 4,5 x g dönme hızında inkübe edin.
  3. Eşit hacimde susuz etanol ekleyin ve gece boyunca 4 °C'de bekletin.
  4. 4 °C'de 15 dakika boyunca 4.5 x g'da santrifüjleyin, süpernatanı çıkarın, çökeltiye eşit hacimde susuz etanol ekleyin ve gece boyunca 4 °C'de bırakın.
  5. Santrifüjlemeden sonra süpernatanı atın, çökeltiye 50 mL aseton ekleyin, santrifüjleyin ve çökeltiyi kurutun. Çökeltiyi daha sonra kullanmak üzere steril normal salin içinde çözün.

2. Kawasaki hastalığının fare modelinin oluşturulması

  1. 4-6 haftalık seksen SPF dereceli erkek C57BL/6 fareyi seçin ve onları yiyecek ve suya ücretsiz erişimle kontrollü koşullar altında barındırın.
    NOT: Östrojen seviyesi dalgalanmalarının bağışıklık ve enflamatuar yanıtlar üzerindeki potansiyel etkileşimini en aza indirmek için, bu ön model oluşturma ve karakterizasyon çalışmasında19 sadece erkek fareler kullanılmıştır.
  2. Fareleri, her grupta 20 fare olmak üzere 3 farklı doz CAWS enjeksiyon grubu (4 mg, 8 mg, 12 mg) ve 1 normal salin kontrol grubu dahil olmak üzere rastgele sayı tablosu yöntemiyle eşit olarak 4 gruba ayırın.
  3. CAWS tozunu steril normal salin (% 0.9 NaCl) kullanarak 40 mg / mL, 80 mg / mL ve 120 mg / mL olmak üzere üç konsantrasyonda hazırlayın. Deney grubuna deneyin 1. gününden 5. gününe kadar sabahları 0.1 mL CAWS enjekte edin ve aynı programda kontrol grubuna eşit hacimde normal salin uygulayın.
    NOT: İntraperitoneal enjeksiyon 1 mL'lik bir insülin şırıngası kullanılarak yapıldı. Çalıştırırken, şırınga yerleştirildiğinde kalın ve ince bağırsaklar gibi organlara zarar vermemek için fareyi başı aşağıda ve kuyruğu daha yukarıda olacak şekilde konumlandırın.
  4. Besleyicide kalan yemi aynı anda tartmak ve her fare kafesi için 24 saatlik yiyecek tüketimini hesaplamak için her gün sabah 9'da bir elektronik terazi kullanın.
  5. Son enjeksiyondan sonraki 3., 7., 14. ve 28. günlerde, her zaman noktasında her gruptan rastgele 3 fare seçin ve kurban edin.
  6. Fareleri önceden oda havasıyla doldurulmuş kapalı bir odaya yerleştirin. Dakikada hazne hacminin %30'u kadar bir akış hızında sıkıştırılmışCO2 ekleyin. 5 dakika sonra ölümü doğrulamak için servikal çıkık yapıldı.
  7. Kalp örneklerini toplayın ve tartın. HE boyama ile kalp ve kan damarlarının enflamatuar lezyonlarını gözlemleyin.

3. HE boyama ve derecelendirme standartları

  1. Kalp ve arkus aortik (yaklaşık 3 mm × 3 mm) hızla izole edildi. Açıklanan yönteme göre medyan sternotomi yapın20. Kalbi aort arkından hızla ayırın (yaklaşık 3 mm × 3 mm). Toplanan dokular 24 saat boyunca %10 nötr tamponlu formalin içinde sabitlendi.
  2. Fiksasyondan sonra, dokuları kademeli bir etanol serisi (1 saat boyunca %70 etanol, 1 saat boyunca %80 etanol, 1 saat boyunca %95 etanol ve 1 saat boyunca %100 etanol) ile dehidre edin, ksilen içinde berraklaştırın ve parafine gömün. Son olarak, blokları 5 μm sürekli dilimler halinde bölün.
  3. H&E boyama için, bölümleri hematoxylin ile 5 dakika boyayın, akan suda 10 dakika durulayın, eozin ile 2 dakika karşı boyama yapın ve ardından dehidrasyon ve montaj21 ile devam edin.
    NOT: Vasküler intimal hasarın derecesine göre üç dereceye ayrılır: Derece I esas olarak endotelyal şişlik ve nötrofil agregasyonu ile karakterizedir; Derece II, düz kas dejenerasyonu, inflamatuar hücre infiltrasyonu ve organel hasarı olarak kendini gösterir; Derece III, endotelyal nekroz ve dökülme ve fibrin birikimi gibi ciddi lezyonlarla kendini gösterir.

4. Masson trikrom boyama

  1. Fiksasyondan sonra, doku örneklerini dereceli bir etanol serisinden dehidre edin, ksilen içinde berraklaştırın ve parafine gömün.
  2. Mum alma işleminden sonra, boyamaya hazırlık olarak bölümleri kademeli bir etanol serisinden damıtılmış suya hidratlayın.
  3. Çekirdekleri 5 dakika boyunca Weigert'in demir hematoksilini ile boyayın, akan su altında iyice durulayın ve ardından sitoplazmayı 5 dakika boyunca Lichun Kırmızı asit fuksin ile boyayın.
  4. 1 dakika boyunca %1 fosfomolibdik asit ile farklılaştırın, ardından kollajen liflerini 3 dakika boyunca doğrudan anilin mavisi ile boyayın. %1 buzlu asetik asit ile hızlıca durulayın.
    NOT: Boyama özgüllüğünü sağlamak için farklılaşma adımının zamanlamasını kesinlikle kontrol edin.
  5. Etanol ve ksilen ile dehidrasyondan sonra şeffaf hale geldikten sonra nötr filmi kapatın.
  6. Fazla boyayı çıkarmak için lekeli bölümleri akan su altında durulayın.
  7. Bölümleri kademeli bir etanol serisinden kurutun, ksilen içinde berraklaştırın ve nötr sakızla monte edin.
  8. Kesitleri ışık mikroskobu altında tutarlı büyütmede gözlemleyin. Kollajen lifleri mavi, kas lifleri ve sitoplazma kırmızı ve çekirdekler koyu mavi görünmelidir.

5. İmmünofloresan boyama

  1. Hücre veya doku bölümlerini sabitleyin ve spesifik olmayan bağlanmayı azaltmak için 1 saat boyunca %5 BSA ile bloke edin.
  2. İkincil antikorla aynı tür kökenli normal serumu kullanın, PBS ile 1:10 oranında seyreltin ve numunenin üzerine bırakın. Oda sıcaklığında 30 dakika kapatın. Kapattıktan sonra PBS ile iki kez hafifçe durulayın.
  3. Bölümleri birincil antikorla gece boyunca 4 °C'de inkübe edin. PBS ile yıkadıktan sonra floresan sekonder antikoru ekleyin ve karanlıkta 1 saat inkübe edin.
  4. Çekirdeğin DAPI ile boyanması, söndürme önleyici montaj maddesi ile kapatılması ve konfokal mikroskopi altında gözlemlenmesi.

6. İmmünohistokimya

  1. Parafin bölümlerinin mumu alındıktan ve hidrasyonundan sonra, antijen onarımı yapın ve endojen peroksidazı bloke edin.
  2. Antikor İnkübasyonu ve Renk Gelişimi: Önce normal serumla bloke edin, ardından birincil antikoru ve HRP etiketli ikincil antikoru sırayla inkübe edin ve son olarak DAB renk gelişimi. Reaksiyon derecesini mikroskop altında kontrol edin.
  3. Hücre çekirdeklerini hematoksilin ile yeniden boyayın. Dehidrasyon ve şeffaflıktan sonra plakaları kapatın ve kahverengimsi sarı pozitif sinyali mikroskop altında gözlemleyin.
    NOT: Deneyin kontrolleri ayarlaması ve restorasyon ve renk geliştirme koşullarını sıkı bir şekilde kontrol etmesi gerekir.

7. Otolizozom tespiti

  1. RAW264.7 makrofajlarını Candida albicans sporları ile uygun bir oranda (10:1) birlikte kültürleyin ve 37 °C'de inkübe edin ve% 5 CO2 4 saat, 8 saat, 12 saat, 16 saat, 20 saat, 24 saat, 28 saat, 32 saat, 36 saat, 40 saat, 44 saat ve 48 saat fagositik bir model oluşturmak için.
  2. Fagositik olmayan sporları çıkarmak için önceden soğutulmuş PBS ile üç kez yıkayın.
  3. İlk olarak, numuneleri 30 dakika boyunca% 5 BSA ile bloke edin. Daha sonra, LC3'e karşı birincil antikor (1:200 seyreltme) ile oda sıcaklığında 1 saat boyunca art arda inkübe edin, ardından Alexa Fluor 488 etiketli ikincil antikor oda sıcaklığında 30 dakika boyunca inkübe edin.
  4. Lizozomal lokalizasyonu görselleştirmek için Lyso-Tracker Red lizozom probunu doğrudan hücrelere ekleyin. Son olarak, çekirdekleri 5 dakika boyunca DAPI (1 μg/mL) ile boyayın.
    NOT: Antikorun inkübasyon süresinin ve konsantrasyonunun doğru bir şekilde kontrol edilmesini sağlamak için tüm operasyon süreci karanlıkta gerçekleştirilmelidir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Başlangıçta, farelerde farklı dozlarda CAWS'nin neden olduğu miyokardiyal patolojik değişiklikleri sistematik olarak değerlendirdik. PBS kontrol grubunda, 4 mg CAWS grubunda ve 8 mg CAWS grubunda (her grupta n=20) ölüm gözlenmedi. Buna karşılık, 4 mg grubundaki inflamatuar yanıt hafifti ve modelleme gereksinimlerini karşılamıyordu. Mortalite oranı 12 mg CAWS grubunda daha yüksekti (9/20, %45) ve ölümler enjeksiyondan sonraki 3. ila 10. günler arasında mey...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

KD'de koroner arter anevrizmaları (KAA) ve miyokardiyal fibrozis, uzun süreli kardiyovasküler olayların ana nedenleridir. Akut faz tedavisinde kaydedilen ilerlemeye rağmen, hastaların yaklaşık %5'inde hala kalıcı CAA gelişmektedir 28,29. Bu gecikmiş patolojik değişimin mekanizması hala belirsizdir ve dinamik sürecini ortaya çıkarmak için hayvan modellerine acil ihtiyaç vardır30. İnsan KD hastalarının son d...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu deneye destekleri ve katkıları için ekip üyelerine teşekkür ederiz. Araştırma şu projelerle desteklendi: Xuzhou Tıp Üniversitesine Bağlı Hastane (XYFM202234) Geliştirme Fonu genel projesi ve Huai'an Şehrinin Yaşamı ve Sağlığı Üzerine Doğa Bilimleri Uzmanlaşmış Yumuşak Projesi (2023KX0006).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Tavşan IgG Alexa Fluor 488'e karşı bir keçi ikincil antikoruabcamab15081Tavşan IgG Alexa Fluor 488'e karşı bir keçi ikincil antikoru
Anaerobik odaTermo BilimselTermo BilimselAnaerobik oda
Anilin mavisiSolarbioG3668Anilin mavisi
anti-LC3abcamab192890LC3'e karşı birincil antikor
Biyolojik güvenlik kabiniTermo Bilimsel1500Biyolojik güvenlik kabini
BSASolarbioA8020BSA
Candida albicans (sırt)NBRC1385Candida albicans (sırt)
CD3eBD Bioscience561827FITC Hamster Fare Karşıtı CD3e(145-2C11)
CD86BD Bioscience105013CD86
CD8aBD Bioscience100713CD8a
Hücre kültürü kuluçka makinesiTermo Bilimsel311Hücre kültürü kuluçka makinesi
MerkezkaçTermo BilimselST4R PlusMerkezkaç
Konfokal mikroskopOlympusIX73Konfokal mikroskop
DAPIBeyotime Biotechnology P0131-25mlDAPI
DMEMGibco11965126DMEM
Gömme makinesiNOT: TIBBIBM450AGömme makinesi
EozinSolarbio  G1100Eozin
F4/80BD Bioscience123109F4/80
FBSGibco16000044FBS
FormaldehitSolarbio  P1110Formaldehit
Tam otomatik doku kurutucuLeica BiosystemsASP3005Tam otomatik doku kurutucu
Cam mikroskop slaytlarıCitotest250124A1Cam mikroskop slaytları
H& E boyasıBeyotime Biotechnology C0105MH& E boyası
IHC KitiAbsin Biyoteknolojisiabs996-5mlIHC Kiti
LC3 probBeyotime Biotechnology C3018MLC3 prob
Düşük Profilli Mikrotom BıçaklarıThermo Fisher3052835Düşük Profilli Mikrotom Bıçakları
Lizozom probuBeyotime Biotechnology C1046Lizozom probu
Kalem kalemiDeliSK109Kalem kalemi
Masson boyasıBeyotime Biotechnology C0189MMasson boyası
MikrotomLeica BiosystemsHistoCore BIOCUTMikrotom
Nötr sakızSolarbi  G8590Nötr sakız
NK1.1BD Bioscience561117NK1.1
Optik mikroskopNikonNikonOptik mikroskop
ParafinSolarbio  YA0012Parafin
Parafin balmumuSolarbioYA0012Parafin balmumu
PBSSolarbioP1020PBS
Fosfomolibdik asitSolarbioG3472Fosfomolibdik asit
VDAC1AbcamAB34726Anti-VDAC1

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jone, P. -N., et al. Update on diagnosis and management of Kawasaki disease: A scientific statement from the American Heart Association. Circulation. 150 (23), e481-e500 (2024).
  2. Goel, A. R., Yalcindag, A. An update on Kawasaki disease. Curr Rheumatol Rep. 27 (1), 4(2024).
  3. Sapountzi, E., et al. disease: An update on genetics and pathophysiology. Genet Test Mol Biomarkers. 28 (9), 373-383 (2024).
  4. Beltran, J. V. B., Lin, F. -P., Chang, C. -L., Ko, T. -M. Single-cell meta-analysis of neutrophil activation in Kawasaki disease and multisystem inflammatory syndrome in children reveals potential shared immunological drivers. Circulation. 148 (22), 1778-1796 (2023).
  5. Assempoor, R., et al. Different antithrombotic strategies to prevent cardiovascular complications in Kawasaki patients: A systematic review and meta-analysis. BMC Pediatr. 24 (1), 738(2024).
  6. Noval Rivas, M., Arditi, M. Kawasaki disease and multisystem inflammatory syndrome in children: Common inflammatory pathways of two distinct diseases. Rheum Dis Clin North Am. 49 (3), 647-659 (2023).
  7. Li, W., et al. Impact of platelet glycoprotein Ia/IIa C807T gene polymorphisms on coronary artery aneurysms of KD patients. Cardiol Res Pract. 2021, 4895793(2021).
  8. Gorelik, M., et al. American College of Rheumatology/Vasculitis Foundation guideline for the management of Kawasaki disease. Arthritis Care Res (Hoboken). 74 (4), 538-548 (2022).
  9. Noval Rivas, M., Arditi, M. Kawasaki disease: Pathophysiology and insights from mouse models. Nat Rev Rheumatol. 16 (7), 391-405 (2020).
  10. Li, R., et al. Lactobacillus casei cell wall extract and production of galactose-deficient IgA1 in a humanized IGHA1 mouse model. J Am Soc Nephrol. 36 (1), 60-72 (2025).
  11. Wei, K., et al. Mitochondrial DNA release via the mitochondrial permeability transition pore activates the cGAS-STING pathway, exacerbating inflammation in acute Kawasaki disease. Cell Commun Signal. 22 (1), 328(2024).
  12. Xu, H., et al. Characterization of inflammatory factors and T cell subpopulations in a murine model of Kawasaki disease induced by Candida albicans cell wall extracts (CAWS). Med Sci Monit. 28, e936355(2022).
  13. Miyabe, C., Miyabe, Y., Miyata, R., Ishiguro, N. Pathogens in vasculitis: Is it really idiopathic. JMA J. 4 (3), 216-224 (2021).
  14. Sato, W., Ishibashi, K. -I., Yamanaka, D., Adachi, Y., Ohno, N. Effects of natural and chemically defined nutrients on Candida albicans water-soluble fraction (CAWS) vasculitis in mice. Med Mycol J. 58 (2), E47-E62 (2017).
  15. Takahashi, K., Oharaseki, T., Yokouchi, Y. Histopathological aspects of cardiovascular lesions in Kawasaki disease. Int J Rheum Dis. 21 (1), 31-35 (2018).
  16. Lombardi Pereira, A. P., et al. Long-term cardiovascular inflammation and fibrosis in a murine model of vasculitis induced by Lactobacillus casei cell wall extract. Front Immunol. 15, 1411979(2024).
  17. Tian, G., et al. Voltage-dependent anion channel 1 (VDAC1) overexpression alleviates cardiac fibroblast activation in cardiac fibrosis via regulating fatty acid metabolism. Redox Biol. 67, 102907(2023).
  18. Duong, T. T., Silverman, E. D., Bissessar, M. V., Yeung, R. S. M. Superantigenic activity is responsible for induction of coronary arteritis in mice: An animal model of Kawasaki disease. Int Immunol. 15 (1), 79-89 (2003).
  19. Miller, L. R., et al. Considering sex as a biological variable in preclinical research. FASEB J. 31 (1), 29-34 (2017).
  20. Miyamoto, H. D., et al. Iron overload via heme degradation in the endoplasmic reticulum triggers ferroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury. JACC Basic Transl Sci. 7 (8), 800-819 (2022).
  21. Ding, J., et al. Myeloid-specific blockade of Notch signaling ameliorates nonalcoholic fatty liver disease in mice. Int J Biol Sci. 19 (6), 1941-1954 (2023).
  22. Xie, Z., et al. Atlas of circulating immune cells in Kawasaki disease. Int Immunopharmacol. 102, 108396(2022).
  23. Menikou, S., Langford, P. R., Levin, M. Kawasaki disease: The role of immune complexes revisited. Front Immunol. 10, 1156(2019).
  24. Xu, S., et al. Ketogenic diets inhibit mitochondrial biogenesis and induce cardiac fibrosis. Signal Transduct Target Ther. 6 (1), 54(2021).
  25. Peng, F., et al. 2-APQC, a small-molecule activator of Sirtuin-3 (SIRT3), alleviates myocardial hypertrophy and fibrosis by regulating mitochondrial homeostasis. Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 133(2024).
  26. Lin, L. -C., et al. Mitochondrial quality control in cardiac fibrosis: Epigenetic mechanisms and therapeutic strategies. Metabolism. 145, 155626(2023).
  27. Yuan, M., et al. IP3R1/GRP75/VDAC1 complex mediates endoplasmic reticulum stress-mitochondrial oxidative stress in diabetic atrial remodeling. Redox Biol. 52, 102289(2022).
  28. Kim, J. -J., et al. Sex-specific susceptibility loci associated with coronary artery aneurysms in patients with Kawasaki disease. Korean Circ J. 54 (9), 577-586 (2024).
  29. Anzai, F., et al. Crucial role of NLRP3 inflammasome in a murine model of Kawasaki disease. J Mol Cell Cardiol. 138, 185-196 (2020).
  30. Ohashi, R., et al. Characterization of a murine model with arteritis induced by Nod1 ligand, FK565: A comparative study with a CAWS-induced model. Mod Rheumatol. 27 (6), 1024-1030 (2017).
  31. Wang, Z., et al. Single-cell RNA sequencing of peripheral blood mononuclear cells from acute Kawasaki disease patients. Nat Commun. 12 (1), 5444(2021).
  32. Yang, J., et al. VSTM2L protects prostate cancer cells against ferroptosis via inhibiting VDAC1 oligomerization and maintaining mitochondria homeostasis. Nat Commun. 16 (1), 1160(2025).
  33. Niu, B., et al. Protecting mitochondria via inhibiting VDAC1 oligomerization alleviates ferroptosis in acetaminophen-induced acute liver injury. Cell Biol Toxicol. 38 (3), 505-530 (2022).
  34. Shoshan-Barmatz, V., Krelin, Y., Chen, Q. VDAC1 as a player in mitochondria-mediated apoptosis and target for modulating apoptosis. Curr Med Chem. 24 (40), 4435-4446 (2017).
  35. Ham, S. J., et al. Decision between mitophagy and apoptosis by Parkin via VDAC1 ubiquitination. Proc Natl Acad Sci U S A. 117 (8), 4281-4291 (2020).
  36. Prabhu, S. D., Frangogiannis, N. G. The biological basis for cardiac repair after myocardial infarction: From inflammation to fibrosis. Circ Res. 119 (1), 91-112 (2016).
  37. Lin, M., et al. MCM8-mediated mitophagy protects vascular health in response to nitric oxide signaling in a mouse model of Kawasaki disease. Nat Cardiovasc Res. 2 (8), 778-792 (2023).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Candida Albicans EkstraktKoroner Arter LezyonlarMiyokardiyal nflamasyonHE BoyamaMasson Trikrom Boyamamm nofloresan BoyamaVDAC1 Ekspresyonu

İlgili makaleler