Bu protokol, farelerde diz altı amputasyonun nasıl yapılacağını ve amputasyonla ilişkili ağrıyı tedavi etmek ve önlemek stratejilerini araştırmak ve amputasyonla ilişkili ağrı mekanizmalarını daha iyi anlamak için hemen hedefli kas reinnervasyonu (iTMR) yapılmasını gösterir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Fare Arka Diz Altı Amputasyon Modeli ve Hemen Hedeflenmiş Kas Reinnervasyonu
Bu makalede
Özet
Özet
Amputasyonla ilgili ağrı, hasta yaşam kalitesini düşürür, opioid kullanımına katkıda bulunur ve fonksiyonel rehabilitasyon ile protez kullanımını azaltabilir. Amputasyon sonrası ağrıyı güvenilir şekilde üreten ve hareketliliği koruyan preklinik modeller, bu sonuçların altında yatan biyolojik mekanizmaların incelenmesi için gereklidir. Burada, Sprague-Dawley sıçanlarını arka diz altı amputasyonu modellemek için kullanan ayrıntılı, tekrarlanabilir kemirgen cerrahi protokolü sunuyoruz. Bu işlem, siyatik sinir dallarının, tibial, yaygın peroneal ve sural sinirlerin izole edilmesini ve kesmesini içerir; böylece amputasyon sonrası sinir patolojisi ve ağrıyla ilişkili davranışlar devam eder. Fareler bu işlemden iyi iyileşir ve ameliyattan hemen sonra yemek ya da içme konusunda zorluk yaşamadan, hareket edebilirler. Hayvanlar daha sonra refleksif ve spontan ağrı ölçümleriyle değerlendirilebilir. Bu işlemden kaynaklanan ağrı davranışları zamanla sağlamdır ve standart refleksif ağrı davranışları kütükten elde edilebilir. Önemli olarak, korunan hareketlilik motor bozukluğu karıştırmadan boylamasına davranışsal testler yapmayı sağlar. Bu protokol amputasyon üzerine odaklansa da, kesilmiş sinirlerin yakınlardaki motor dallara, oradan biceps femoris ve semimembranosus'a aktarılmasıyla, reinnervasyon müdahalelerinin ve amputasyon sonrası ağrı üzerindeki etkilerinin incelenmesini mümkün kılarak hedefli kas reinnervasyonu (TMR) kolayca entegre edilebilir. Bu modeli daha önce amputasyon sonrası ağrı davranışlarındaki cinsiyete özgü farklılıkları değerlendirmek ve TMR'nin etkilerini incelemek için başarıyla kullandık. Bu protokol, amputasyonla ilişkili ağrı, nöroma oluşumu ve fonksiyonel sonuçların araştırılması için sağlam ve esnek bir platform sağlar ve amputasyon sonrası ağrıyı iyileştirmeye yönelik translasyonel çalışmalara uygulanabilir.
Giriş
Kronik ağrı, büyük uzuv amputasyonundan sonra en sakat edici komplikasyonlardan biridir ve hastaların %70'ine kadar etkilenir 1,2,3. Farmakolojik müdahaleler, fizyoterapi, sinir blokları ve psikolojik terapiler gibi geleneksel ağrı yönetimi stratejileri genellikle sınırlı veya geçici bir rahatlama sağlar4. Bu nedenle, etkili uzun vadeli ağrı yönetimi stratejilerine yönelik önemli klinik ihtiyaç devam etmektedir.
Hedefli kas reinnervasyonu (TMR), başlangıçta miyoelektrik protezlerin kontrolün....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm hayvan prosedürleri, Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmış olmalı ve Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Rehberi'ne uygun olmalıdır.
1. Ameliyat öncesi hazırlık
NOT: 8–10 haftalık ve 250–300 g ağırlığında erkek ve dişi Sprague-Dawley fareleri (Charles River Laboratories) kullanıldı.
- Isıtıcı pedi açın ve steril bir cerrahi alan hazırlayın. Optimal maruziyet için farenin vücuduna dik steril bir ped yerleştirin.
- Tüm cerrahi alet ve malzemeleri düzenleyin: steril t....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bu arka uzuv amputasyon modeli, sıçanlarda ambulasyon ve keşif kapasitesini korurken, nöropatik ağrı ile ilgili davranışları güvenilir şekilde indüklemiştir. Şekil 2'de gösterildiği gibi, amputasyon sırasında periferik sinirin distal hedef olmadan kesilmesi nedeniyle ligasyon bölgesinde düzensiz aksonal büyüme ve nöroma oluşumu ile sonuçlanır; bu durum B-tubulin ve kalsitonin genine bağlı peptid (CGRP) immünboyaması ile görselleştirilir. Buna karşılık, TMR i.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu protokol, arka uzuv amputasyon modelinin tekrarlanabilirliğini sağlamak için temel cerrahi adımları detaylandırır ve amputasyon sonrası testlerde ambulasyon ve davranışsal katılımın korunduğunu gösterir. Cerrahlar arasında tutarlılık ve tekrarlanabilirlik sağlamak için dikkatli anatomik tanımlama, minimal sinir manipülasyonu ve kesilmiş sinirlerin gerilimsiz yönetimi gibi temel cerrahi ilkeler vurgulanmaktadır. Bu teknik hususlar, amputasyon sonrası sinir patolojisini güvenilir şekild.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar çıkar çatışması belirtmemektedir.
Teşekkürler
Bu araştırma, Wisconsin Tıp Fakültesi Sinirbilim Araştırma Merkezi, Rita Allen Vakfı ve Plastik Cerrahi Vakfı tarafından desteklenmiştir. Yazarlar, hayvan bakımı ve desteği için Karşılaştırmalı Tıp Birimi'ne teşekkür ediyor.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 10-0 nylon microsuture (Arosurgical) | AROSurgical | T04A10N07-13 | İnce sinir koaptasyon sütürü. 10-0 mikro sütür. |
| 4-0 poliglikolik asit sütür | Ethicon | AQ1268 | Kası ve deri için kapatma sütürü. Emilebilir 4-0 sütür. |
| 5-0 ipek cerrahi sütür | Generic | Generic | Sinir ligasyon sütürü |
| Yetişkin Sprague-Dawley sıçanları | Charles River Laboratories | Generic | Deney hayvanı |
| Alkol hazırlık pedleri | Dukal Corporation | Generic | Deri antiseptiği |
| Betadine 10% | Avrio Health LP | Generic | Antiseptik |
| Kemiğe özel makas | FST | 16030 | Kemik kesme aleti |
| Kavter cihazı | FST | 18010-00 | Kanamayı durdurma cihazı |
| Pamuk uçlu aplikatör (ProAdvantage) | ProAdvantage | Ref 76100 | Dokuya müdahale |
| Eğri mikrodiseksiyon makası | FST | 15019-10 | Nerolizin için ince makas |
| Forseps (ince Dumont) | FST | 11254-20 | Sinir taşıma aleti |
| Forseps (düğüm bağlama Dumont) | FST | 11063-07 | Sütür taşıma aleti |
| Gaoz USP tip VII (Cardinal Health) | Cardinal Health | Ref 2146 | Steril alanın korunması |
| Isıtmalı yastık (TC1000 sıcaklık kontrol cihazı) | Generic | TC1000 | Sıcaklık kontrol cihazı |
| İndüksiyon odası (Braintree Scientific) | Braintree Scientific Inc. | Generic | Anestezi indüksiyonu için |
| Izofluran (Isospire) | Phoenix | Generic | Anestezik ajan |
| Meloksikam (Ostilox) | VetONE | 5 mg/mL | Ağrı kesici ajan |
| Ölçü | Generic | Generic | Anatomik noktalar için ölçü aracı |
| Steril salin | Baxter | 0.9 Sodyum Lot Y425131 | Sulama çözeltisi |
| Cerrahi bıçak 15 | FST | 10015-00 | Deri kesimi aracı |
| Tüberkülin şırınga | Generic | Generic | İlaç uygulama |
| Buharlaştırıcı (Surgivet model 100) | Surgivet | Model 100 S/N W2211123 | Anestezi sürdürme için |
| Vetbond doku yapıştırıcı | World Precision Instruments | Generic | Deri yapıştırıcı |
Kaynaklar
- Balakhanlou, E., Webster, J., Borgia, M., Resnik, L. Frequency and severity of phantom limb pain in veterans with major upper limb amputation: results of a national survey. PM R. 13 (8), 827-835 (2021).
- Resnik, L., Ekerholm, S., Borgia, M., Clark, M.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
