Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Araştırma makalesi

Pediatrik Mycoplasma pneumoniae pnömonisinde stres-inflamasyon düzensizliği ve biyobelirteç dinamikleri

468 görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/69153

⸱

24 Ekim 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Pediatrics, The Second Affiliated Hospital of Anhui Medical University, 2Department of Pediatric Respiratory Disease, Anhui Provincial Children's Hospital, 3Department of Pediatric Psychology, Anhui Provincial Children's Hospital

Bu makalede

Özet

Pediatrik Mycoplasma pneumoniae pnömonisinde yüksek LDH ve D-dimer seviyeleri sistemik inflamasyon, psikolojik stres ve prognostik sonuçlarla bağlantılıydı. Yüksek MP-DNA yükleri daha uzun hastanede kalış süresini öngördü. Bulgular, LDH ve D-dimer'in erken risk sınıflandırması için değerli biyobelirteçler olduğunu ve yüksek riskli pediatrik hastaların daha iyi klinik yönetimine ve tanımlanmasına olanak sağladığını vurgulamaktadır.

Özet

Mycoplasma pneumoniae pnömonisi (MPP), sıklıkla sistemik inflamasyon ve psikolojik stresin eşlik ettiği yaygın bir pediatrik enfeksiyondur; ancak potansiyel çift yönlü ilişkisi tam olarak tanımlanmamıştır. Hastanede yatan 5-12 yaş arası 120 çocuğu Çocuk Stres Anketi (CSQ), inflamatuar mediatörler (CRP, IL-6) ve üç klinik biyobelirteç (LDH, D-dimer, MP-DNA yükü) kullanarak retrospektif olarak analiz ettik. Yüksek LDH ve D-dimer, daha yüksek CSQ skorları (r = 0.67, p < 0.01) ve daha şiddetli inflamatuar yanıtlarla önemli ölçüde ilişkiliydi. Uzun süreli hastalığı (>7 gün) ve yüksek MP-DNA yükü olan çocukların stres puanları belirgin şekilde daha yüksekti (ortalama 38'e karşı 25, p < 0.01). LDH ≥ 450 U/L bağımsız olarak uzun süreli hastanede kalış süresini öngördü (OR = 2.1, %95 GA: 1.2-3.7) ve ROC analizi ciddi komplikasyonlar için güçlü ayırt edici güç gösterdi (AUC = 0.89, %95 GA: 0.83-0.95; duyarlılık = %82, özgüllük = %81). Bu bulgular, pediatrik MPP'de psikolojik stres ve immün düzensizlik arasında çift yönlü bir bağlantıyı desteklemekte ve LDH ve D-dimer'in yüksek riskli çocukların erken tanımlanması için pratik biyobelirteçler olduğunu vurgulamaktadır.

Giriş

Mycoplasma pneumoniae (MP), çocuklarda toplum kökenli pnömoninin en yaygın nedenleri arasındadır ve dünya çapında solunum yolu nedeniyle hastaneye yatışların önemli bir bölümünü oluşturmaktadır 1,2. Akciğer tutulumunun ötesinde, MP enfeksiyonu sıklıkla ekstrapulmoner komplikasyonlara ve gecikmiş iyileşmeye neden olabilecek sistemik immün yanıtları ortaya çıkarır3. Pediatrik popülasyonlarda, akut hastalık ve hastaneye yatış, endokrin-immün dengeyi bozan kronik stres tepkilerini tetikleyebileceğinden, immün fonksiyon psikolojik iyi oluşla yakından bağlantılıdır 4,5. Hipotalamik-hipofiz-adrenal (HPA) ekseninin aktivasyonu, bağışıklık savunmasını baskılayabilir veya proinflamatuar sinyali güçlendirebilir, bu da iltihaplanma ve psikolojik stresin karşılıklı olarak güçlendirici süreçler olduğunu düşündürür. Ek kanıtlar ayrıca, strese bağlı mikrobiyom değişikliklerinin ve artan bağırsak geçirgenliğinin sistemik inflamasyonu teşvik edebildiğibağırsak-beyin ekseninin aracılık rolünü vurgulamaktadır 6,7, MP pnömonisi 8,9 olan çocuklarda bazen gözlenen orantısız hepatik veya kardiyak semptomları kısmen açıklamaktadır.

Klinik olarak, bazı hastalar zamanında tedaviye rağmen daha yavaş iyileşme veya bozulma yaşarlar ve genellikle solunum örneklerinde kalıcı MP-DNA ile birlikte yüksek doku hasarı veya pıhtılaşma belirteçleri10,11 ve yüksek stres skorları gösterirler. Bu modeller, stres ve iltihaplanma arasında kendi kendini idame ettiren bir döngü olasılığını artırır. Bununla birlikte, mevcut klinik kılavuzlar, psikolojik ve inflamatuar dinamiklerin karar verme sürecine çok az entegrasyonu ile büyük ölçüde patojen odaklı olmaya devam etmektedir12. C-reaktif protein (CRP) ve interlökin-6 (IL-6) gibi geleneksel belirteçler bilgilendiricidir ancak spesifik değildir 3,14.

Buna karşılık, laktat dehidrojenaz (LDH) ve D-dimer hızla ölçülebilir, klinik olarak erişilebilir ve mekanik olarak anlamlıdır: LDH doku hasarını ve hipoksiyi yansıtırken, D-dimer pıhtılaşma dengesizliğini ve vasküler stresi işaret eder15,16. Önceki gözlemler, 450 U/L ≥ LDH düzeylerinin ve 0.5 mg/L> D-dimer düzeylerinin, uzun süreli hastanede yatışla ilişkili klinik olarak anlamlı eşikleri temsil ettiğini ve prognostik faydalarının altını çizdiğini göstermektedir17. Benzer şekilde, MP-DNA yükü, öncelikle tanısal olmakla birlikte, patojen yükü ve bunun konakçı yanıtları ile ilişkisi hakkında doğrudan bilgi sağlayabilir18. CRP ve IL-6 gibi geleneksel belirteçlerle karşılaştırıldığında, LDH ve D-dimer mekanik olarak spesifik ve klinik olarak yorumlanabilir sinyaller sağlarken, MP-DNA yükü patojen yükünün doğrudan bir ölçümünü sunar, böylece mevcut tanı araçlarını tamamlar ve genişletir19.

Bu nedenle bu çalışma, LDH, D-dimer ve MP-DNA yükünün pediatrik MP pnömonisinde hastalık şiddetini güvenilir bir şekilde tahmin edip edemeyeceğini incelemek ve bu popülasyonda risk sınıflandırmasını ve klinik yönetimi iyileştirmek amacıyla bu biyobelirteçlerin psikolojik stresle nasıl ilişkili olduğunu araştırmak için tasarlanmıştır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu çalışma Anhui İl Çocuk Hastanesi Kurumsal Etik Kurulu tarafından onaylandı. Veri toplamadan önce tüm katılımcıların ebeveynlerinden veya yasal vasilerinden yazılı bilgilendirilmiş onam alındı. Hasta numunelerini içeren tüm prosedürler, kurumsal biyogüvenlik yönetmeliklerine ve uluslararası kabul görmüş etik standartlara uygun olarak yürütülmüştür. Kullanılan ekipman ve yazılımlar Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

1. Çalışma tasarımı

Bu retrospektif kohort çalışmasına, üçüncü basamak bir pediatri merkezinde Haziran 2021 ile Aralık 2024 arasında doğrulanmış Mycoplasma pneumoniae (MP) pnömonisi olan 5-12 yaş arası çocuklar dahil edildi. Tanı, boğaz sürüntülerinden veya bronkoalveoler lavaj sıvısından (BALF) MP-DNA'nın PCR tespiti ile doğrulandı20,21. Bilinen immün yetmezliği, kronik akciğer hastalığı (örn. astım) veya eksik klinik kayıtları olan çocuklar hariç tutuldu22.

2. Klinik veri toplama

Aksiller sıcaklık günde iki kez (07:00 ve 19:00) kaydedildi ve ortaya çıktıkça ek ateş atakları belgelendi. Başlangıç periferik oksijen satürasyonu bir nabız oksimetresi kullanılarak değerlendirildi. İnflamatuar biyobelirteç analizi23,24 için başvurudan sonraki 24 saat içinde venöz kan örnekleri toplandı. Tam kan ve serum 2-8 °C'de saklandı ve toplandıktan sonra 2 saat içinde işlendi; serum/plazma alikotları daha sonra analize kadar -80 °C'de donduruldu.

3. Bronkoskopi ve numune toplama

Pediatrik fiberoptik bronkoskop kullanılarak sedasyon altında lavajlı fleksibl bronkoskopi yapıldı. İşlem sırasında oksijen satürasyonu ve kalp hızı sürekli olarak izlendi25. Emiş basıncı 2,0 mm'lik bir çalışma kanalı ile 100-120 mmHg'de tutuldu. Segment başına üç ila beş mililitre steril salin damlatıldı ve geri kazanım hacmi aşılanan salinin en az %50'sine ulaştığında lavaj kalitesi yeterli kabul edildi. BALF hemen buz üzerine yerleştirildi, hücreleri ve kalıntıları uzaklaştırmak için 10 dakika boyunca 1.500 g'da santrifüjlendi ve süpernatanlar, MP-DNA testi ve sitokin ölçümlerine kadar -80 °C'de saklandı.

4. İnflamatuar biyobelirteç testleri

CRP, partikül takviyeli kullanılarak analiz edildi. IL-6, kemilüminesan immünolojik test ile ölçüldü. LDH aktivitesi, piruvat-laktat dönüşümü26 ile spektrofotometrik olarak belirlendi. D-dimer, lateksle güçlendirilmiş immünotürbidimetri kullanılarak ölçüldü. Üretici tarafından önerilen inkübasyon süreleri, kalibrasyon ve dahili kalite kontrollerine sıkı bir şekilde uyuldu; Dış kalite değerlendirmesi, laboratuvarın akreditasyon çizelgesine göre yapılmıştır. Birimler mg/L (CRP), pg/mL (IL-6), U/L (LDH) ve mg/L FEU (D-dimer) ve MP-DNA kopya/μL olarak rapor edildi.

5. Psikometrik değerlendirme

Psikolojik stres, kabulden sonraki 72 saat içinde ebeveyn tarafından bildirilen Çocuk Stres Anketi kullanılarak değerlendirildi. Toplam puan aralığı 0-80 idi ve ≥30 puan orta-şiddetli stres olarak yorumlandı. Eğitimli hemşireler, hatırlama yanlılığını en aza indirmek için standartlaştırılmış talimatlar ve madde düzeyinde örnekler sağladı ve eksik anketler, veri bütünlüğünü sağlamak için aynı gün yeniden kontrol edildi.

6. Güvenlik hususları

Tüm kan ve BALF numuneleri, uygun kişisel koruyucu ekipmanla (eldiven, önlük, maske/solunum cihazı ve göz koruması) sertifikalı bir Sınıf II biyogüvenlik kabininde işlendi. Kesici aletler delinmeye dayanıklı kaplara atıldı. Sıvı biyolojik tehlike atıkları, bertaraf edilmeden önce 30 dakika boyunca %10 çamaşır suyu ile ön işleme tabi tutuldu. Yüzeyler her seanstan sonra dekontamine edildi ve tüm prosedürler kurumsal ve ulusal düzenlemelere (örneğin, DSÖ Laboratuvar Biyogüvenlik El Kitabı; BMBL).

7. İstatistiksel analiz

Analizler IBM SPSS Statistics kullanılarak yapıldı. Veri normalliği Shapiro-Wilk testi ile test edildi. Sürekli değişkenler ortalama ± standart sapma veya çeyrekler arası aralıkta medyan olarak ifade edilirken, kategorik değişkenler sayı ve yüzde olarak özetlendi (Tablo 1). CSQ skorları, inflamatuar mediatörler ve klinik göstergeler arasındaki ilişkiler Pearson veya Spearman korelasyonları kullanılarak incelendi. Akciğer konsolidasyonu, plevral efüzyon, atelektazi veya solunum yetmezliği olarak tanımlanan uzun süreli hastanede kalış (>7 gün) ve şiddetli pnömoninin öngörücülerini değerlendirmek için lojistik regresyon kullanıldı27. ROC eğrileri, model ayrımcılığını, AUC'yi, duyarlılığı, özgüllüğü ve %95 GA'yı raporlamayı değerlendirmek için oluşturulmuştur. Sağlamlığı değerlendirmek için on kat çapraz doğrulama uygulandı. Eksik veriler (%<5) medyan atama ile ele alındı. Biyobelirteç değerleri, modellemeden önce z-skoru standardize edildi. İstatistiksel anlamlılık p < 0,05 (iki taraflı) olarak belirlendi (Tablo 2).

8. Görsel sonuçlar ve tekrarlanabilirlik kontrol noktaları

Yeterli BALF, berrak, kansız bir görünüme sahip ≥50 oranında aşılanmış salinin geri kazanılması olarak tanımlandı. Kabul edilebilir CSQ uygulaması, alan başına ≤1 eksik öğe ile kabulden sonraki 72 saat içinde tamamlanma olarak tanımlandı. Test çalıştırmaları, hasta sonuçları açıklanmadan önce üretici hedeflerine göre dahili QC'yi geçmeyi gerektiriyordu.

Bu protokol, pediatrik Mycoplasma pneumoniae pnömonisinde psikolojik stres, inflamatuar mediatörler ve klinik biyobelirteçler arasındaki etkileşimi değerlendirmek için tekrarlanabilir bir çerçeve sağlar ve merkezler arasında güvenilir uygulamayı desteklemek için pratik kontrol noktaları (BALF kalitesi, CSQ zamanlaması, tahlil QC) oluşturur.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Genel çalışma tasarımı ve iş akışı Şekil 1'de


figure-results-1

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Çocuklarda Mycoplasma pneumoniae (MP) pnömonisi, şiddet ve iyileşmenin merkezi belirleyicisi olarak hareket eden immünoinflamatuar düzensizlik ile heterojen bir hastalıktır. Bu düzensizlik, konakçı bağışıklık tepkileri ile MP virülans faktörleri arasındaki etkileşimlerden kaynaklanır ve hem hastalığın seyrini hem de tedavi yanıtlarını şekillendirir. Bu nedenle klinik biyobelirteçler hasta sınıflandırması, tedavi rehberliği ve prognoz için vazgeçilmez araçları temsil eder.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Teşekkürler

Anhui İl Çocuk Hastanesi'nin klinik ve hemşirelik personeline hasta kaydı ve veri toplama konusundaki yardımlarından dolayı teşekkür ederiz. Ayrıca katılımcı çocuklara ve ailelerine çalışma boyunca gösterdikleri işbirliği için minnettarız.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Çocuk Stres Anketi (CSQ)BelirtilmemişStresin psikometrik değerlendirmesi
CRP test kitiSiemens Sağlık Çalışanları11537224 (Atellica CH hCRP2, 720 test)C-reaktif protein ölçümü
D-dimer test kitiTeşhis Stago00515 (STAÂ- Liatest D-Di kiti)Plazma D-dimer seviyelerinin ölçümü
IBM SPSS Statistics sürüm 28.0IBM Corp., Armonk, NY, ABDVeri analizi
IL-6 test kitiRoche Arıza Tespit09015612190 (cobas e 801 paketi); 09015612500 (100 test)İnterlökin-6 ölçümü
LDH test kitiBelirtilmemişMAK066 (MilliporeSigma LDH Aktivite Test Kiti)Laktat dehidrojenaz aktivitesinin ölçümü
Pediatrik fleksibl bronkoskop (örn. BF-P190)OlympusBF-P190 (model/sipariş no.)Bronkoalveoler lavaj toplama
Nabız oksimetresiBelirtilmemişSağlanmadıOksijen doygunluğunun ölçümü

Kaynaklar

  1. Wang, X., et al. Mycoplasma pneumoniae triggers pneumonia epidemic in autumn and winter in Beijing: A multicentre, population-based epidemiological study between 2015 and 2020. Emerg Microbes Infect. 11 (1), 1508-1517 (2022).
  2. Sun, Y., et al. Characterizing the epidemiology of Mycoplasma pneumoniae infections in China in 2022-2024: A nationwide cross-sectional study of over 1.6 million cases. Emerg Microbes Infect. 14 (1), 2482703(2025).
  3. Zhu, Y., et al. Immune response plays a role in Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Front Immunol. 14, 1189647(2023).
  4. Li, J., et al. Metabolomic analysis reveals potential biomarkers and the underlying pathogenesis involved in Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Emerg Microbes Infect. 11 (1), 593-605 (2022).
  5. Rowlands, R. S., Meyer Sauteur, P. M., Beeton, M. L. On Behalf of the ESCMID study group for mycoplasma and chlamydia infections ESGMAC n. Mycoplasma pneumoniae: Not a typical respiratory pathogen. J Med Microbiol. 73 (10), 1910(2024).
  6. Li, X., Li, T., Chen, N., Kang, P., Yang, J. Changes of Mycoplasma pneumoniae prevalence in children before and after the COVID-19 pandemic in Henan, China. J Infect. 86 (3), 256-308 (2023).
  7. Cryan, J. F., et al. The microbiota-gut-brain axis. Physiol Rev. 99 (4), 1877-2013 (2019).
  8. Marwaha, K., et al. Exploring the complex relationship between psychosocial stress and the gut microbiome: Implications for inflammation and immune modulation. J Appl Physiol Bethesda, MD 1985. 138 (2), 518-535 (2025).
  9. Deng, Y., et al. Involvement of the microbiota-gut-brain axis in chronic restraint stress: Disturbances of the kynurenine metabolic pathway in both the gut and brain. Gut Microbes. 13 (1), 1-16 (2021).
  10. Li, X., et al. The immune modulatory role of surfactants in Mycoplasma pneumoniae infection. J Inflamm Res. 18, 2909-2922 (2025).
  11. Shao, L., Yu, B., Lyu, Y., Fan, S., Gu, C., Wang, H. The clinical value of novel inflammatory biomarkers for predicting Mycoplasma pneumoniae infection in children. J Clin Lab Anal. 39 (3), e25150(2025).
  12. Wang, P., Yao, J., Li, Y., Huang, X., Deng, C. Analysis of clinical characteristics and laboratory examination data of 112 cases of Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children. Medicine (Baltimore). 103 (47), e40628(2024).
  13. Shashidhara, A. K., Bala, S., Browne, S., Cliff, M., Mallia, P. Post-infectious Inflammatory motor-predominant neuropathy following Mycoplasma infection. Cureus. 16 (11), e74657(2024).
  14. Jiang, C., Bao, S., Shen, W., Wang, C. Predictive value of immune-related parameters in severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children. Transl Pediatr. 13 (9), 1521-1528 (2024).
  15. Wang, C., et al. Suppressing neutrophil itaconate production attenuates Mycoplasma pneumoniae pneumonia. PLOS Pathog. 20 (11), e1012614(2024).
  16. Yi, X., Jia, W., Li, W., Jia, C., Song, C. Diagnostic value of cytokines in severe childhood Mycoplasma pneumoniae pneumonia combined with Adenovirus infection. Ital J Pediatr. 50 (1), 92(2024).
  17. Lu, D., et al. Clinical characteristics and immune responses in children with primary ciliary dyskinesia during Pneumonia episodes: A case-control study. Child Basel Switz. 10 (11), 1727(2023).
  18. Cheng, J., et al. Proteomic profiling of urinary small extracellular vesicles in children with pneumonia: a pilot study. Pediatr Res. 94 (1), 161-171 (2023).
  19. Wei, D., Zhao, Y., Zhang, T., Xu, Y., Guo, W. The role of LDH and ferritin levels as biomarkers for corticosteroid dosage in children with refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Respir Res. 25 (1), 266(2024).
  20. Li, J., et al. Biomarkers of Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children by urine metabolomics based on Q Exactive liquid chromatography/tandem mass spectrometry. Rapid Commun Mass Spectrom RCM. 36 (5), e9234(2022).
  21. Zhou, X., et al. Using random forest and biomarkers for differentiating COVID-19 and Mycoplasma pneumoniae infections. Sci Rep. 14 (1), 22673(2024).
  22. Liu, J., et al. Proteomics study of Mycoplasma pneumoniae pneumonia reveals the Fc fragment of the IgG-binding protein as a serum biomarker and implicates potential therapeutic targets. Front Med. 16 (3), 378-388 (2022).
  23. Huang, F., et al. Ribosomal RNA-depleted RNA sequencing reveals the pathogenesis of refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children. Mol Med Rep. 24 (5), 761(2021).
  24. Xu, W., et al. Clinical and CT characteristics of human metapneumovirus-associated severe pneumonia in children in Beijing. Ital J Pediatr. 51 (1), 136(2025).
  25. Ye, Y., et al. A machine learning model for predicting severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia in school-aged children. BMC Infect Dis. 25 (1), 570(2025).
  26. Liu, J., et al. Comparative analysis of the clinical characteristics of severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia and severe bacterial pneumonia in children. BMC Pediatr. 25 (1), 439(2025).
  27. Li, X., et al. Development and validation of a nomogram for predicting necrotizing pneumonia in children with refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Ital J Pediatr. 51 (1), 150(2025).
  28. Fu, R., et al. DNA and RNA detection of inactivated Mycoplasma pneumoniae in different microenvironments. Pediatr Pulmonol. 60 (3), e71040(2025).
  29. Feng, W., Lin, Y., Wang, Q., Qian, X. The correlation between positive rate of antibody or DNA and children's age with suspected Mycoplasma pneumoniae infection. Ital J Pediatr. 51 (1), 156(2025).
  30. Huang, X., et al. Neutrophils are involved in the development and outcomes of plastic bronchitis associated with Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Respir Res. 26 (1), 92(2025).
  31. Xiao, Y., et al. Interpretation of pathogenicity and clinical features of multiple pathogens in pediatric lower respiratory tract infections by tNGS RPTM analysis. Eur J Clin Microbiol Infect Dis Off Publ Eur Soc Clin Microbiol. 44 (6), 1313-1324 (2025).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Pediatrik Pn moniLDH SeviyeleriD DimerMP DNA Y knflamatuar Medyat rlerPsikolojik Stresocuk Stres Anketi
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.