Burada, eğitim ve erişim için yüksek kaliteli, reçine gömülü artropodların yaratılması sürecindeki temel adımları gösteriyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Burada, eğitim ve erişim için yüksek kaliteli, reçine gömülü artropodların yaratılması sürecindeki temel adımları gösteriyoruz.
Önceki çalışmalarımız, eğitim ve sosyal etkinliklerde kullanılmak üzere tıbbi öneme sahip reçine gömülü artropodların oluşturulmasına yönelik bir protokol yayımladı. Bu protokol, artropodluğa zarar vermeyi en aza indiren, kullanış için güvenli bir ürün oluşturan ve tanımlama için morfolojik özellikleri koruyan bir montaj tekniği yaratmayı amaçlayan çeşitli girişimler tarafından benimsenmiştir. Protokolümüz gelişti ve ek ekipman alımları ve süreç değişiklikleri sayesinde reçine gömülü artropodlar geliştirilmiş kaliteye sahip artykümler yaratmaktadır. Bu geliştirilmiş protokolü, baloncukları en aza indirme, farklı artropod türlerine uyum sağlama ve altı taraftan görünür hale gelen son cilalanmış bloklar oluşturmak için adımlarla sunuyoruz. Ayrıca, reçine kürleme, elektrikli aletler kullanımı sırasında çıkan dumanlar ve reçine bloklarının zımparalanması ve parlatılması sırasında oluşan tozdan kaynaklanan biyolojik güvenlik endişelerini de belirtiyoruz. Bu görselleştirilmiş protokol, eklembodların şeffaf reçine dökümünün daha geniş bir topluluğa ulaşmasını kolaylaştıracaktır. Yıllarca deneme yanılma yoluyla benimsediğimiz ekipman ve tüketim malzemeleri listesi, diğer programların bu protokolün benimsenmek için geçerli bir seçenek olup olmadığını değerlendirmesini sağlayacak.
Hasar görmemiş, yüksek kaliteli örnekler, artropodlu tanım becerilerini stajyerlereöğretmek için kritik kaynaklardır 1,2. Çoğu zaman, öğretim koleksiyonlarında temel özellikler sıkça kullanıldığı için eksik olabilecek veya anahtar tanımlayıcı özelliklerin mekansal ilişkilerini anlamak için birkaç açıdan görülmesi zor olan hassas sabitlenmiş veya sivri örneklerbulunur 3. Bunlar hem öğrenciler hem de öğretmenler için sinir bozucu olabilir ve nadir, toplanması zor ve yerel olmayan türler, örneklerin yok olma korkusuyla ders koleksiyonlarında kısıtlanabilir veya tamamen yok edilebilir.
Resmi kurumsal öğrenmenin yanı sıra, halkın eğitimi birçok akademik ve uzatma programı, tıp ve veterinerlik uygulamaları, parklar ve doğa merkezleri, müzeler ve sivrisinek/vektör kontrolbölgeleri 4,5 için misyonunun bir parçasıdır. Bu durumlarda, dayanıklı korunmuş örnekler kritik öneme sahiptir ve çocukların uygulamalı incelemesinden, kazara hasar veya düşmeden ayakta kalabilen örnekler göstermek en iyisidir. Saplanmış veya sivri böcek örnekleri bu eğitim ortamları için gereken dayanıklılığı sağlamaz; etanol gibi sıvı koruyucu örnekler ise kaplardan görülmesi zor, çıkarılıp ele alınması zordur. Böcek 3D modellerinin öğrenci eğitimini geliştirdiğigösterildiği göz önüne alındığında, reçinede korunmuş yüksek kaliteli artropodlar sunmak da fayda sağlamalıdır. Bron ve ark. tarafından yapılan yakın tarihli bir çalışmada, reçine içine gömülü keneler ve diğer artropodlar kullanılarak halkın kene vektör türlerini tanıma yeteneğideğerlendirildi 7. Başka bir proje, yabancı orman zararlıları hakkında farkındalık yaratmak için reçine gömülü egzotik orman böceklerini ('seyahat böcekleri') geocache bölgelerineyerleştirerek kullandı 8. Bu çalışma, böcekleri reçineye yerleştirme protokollerini onlarca yıldır geliştiren önceki entomologlarınüzerine inşa edilmiştir (9,10). Protokolümüzü geliştirirken çeşitli eklembodlularla çalışırken, pullu hassas böceklerin (örneğin sivrisinekler) reçineye gömülmesinin daha zor olduğunu gördük; çünkü reçine dökme aşamalarında pullar ve uzuvlar genellikle kayboluyor. Ayrıca, etanolde uzun süre depolanan örnekler, reçine gömme için daha az idealdir çünkü etanol, tanımlama için önemli olan renk değişimini azaltır (örneğin, kene skutalarında süslü desenler gibi).
Hem sınıflarda resmi eğitim (örneğin, tıbbi ve veteriner entomolojisi) hem de halkı bilgilendiren bilgilendirme ve genişletme programları için artropodların öğretim koleksiyonlarımızı genişletmek amacıyla, artropodların temiz şekilde dökülmesi içinbir protokol geliştirdik 11. Bu yöntemleri yayımladık çünkü reçine gömülü böcekler üreten çoğu ticari şirket protokollerini gizli tutmaktadır. 2018 yayınımızdan bu yana, ek ekipman satın aldık ve protokolü daha da optimize ettik; protokol şimdi burada sunuluyor. Malzeme Tablosu'nda bu protokolde kullanılan tüm ekipman ve tüketim malzemelerini sunuyoruz.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
DIKKAT: Reçine üretim protokolüyle ilgili tehlikeler arasında, kürlenmemiş reçineden kaynaklanan zehirli buharlara maruz kalma, kürlenmemiş reçine ve katalizörle temas, elektrikli aletlerin kullanımı ve kesme/zımparalama/parlatma aşamalarında toz oluşumu yer alır. Kürlenmemiş reçine ile çalışırken bir buhar davlumbazı veya iyi havalandırılan alan ve nitril eldiven gereklidir. Reçine veya katalizör cildle temas ederse, bölgeyi hemen sabun ve suyla yıkayın. Kürlenmiş reçine blokları keserken/zımparalama/parlatma yaparken, düzgün oturan yarım yüzlü bir solunum cihazı giyilmelidir.
1. Numune ve etiket hazırlama
NOT: Örneklerin hazırlanması, kullanılan artropodluya bağlıdır. Örnekler ve etiketler, reçine katmanı 1 hazırlanmadan önce kullanılmak üzere bir kenara ayrılmalıdır.
2. Reçine katman 1
DIKKAT: Kürlenmemiş reçine ile ilgili tüm adımlar, zararlı dumanlar üretildiği göz önüne alındığında, dışarıda havalandırılan bir duman kaputu içinde yapılır. Bu adımları iyi havalandırılan bir ortamda, örneğin açık havada yapmak da başka bir seçenektir.
3. Reçineli örnekler
4. Reçine katman 2
5. Basınç potası
6. Son ürün hazırlığı
DIKKAT: Kesme, zımparalama ve parlatma adımları, toz oluşumu ve solunum cihazı koruması ihtiyacı nedeniyle ayrı bir binada atölye süpürgesi ile yapılır. Bir solunum cihazı, kesilen, zımparalanan veya parlatılan kişinin yüzüne sağlam şekilde oturacak şekilde ayarlanmalı, sonra aşağıdaki adımlardan herhangi biri yapılacak. Texas A&M Üniversitesi'nde, Çevre Sağlığı ve Güvenliği programımız, her çalışanın Ulusal İş Sağlığı ve Sağlığı Enstitüsü'nün P100 partikül filtresiyle birlikte yarı yüz solunum cihazı kullanılarak bir solunum cihazı uyum testini geçmesini gerektirir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Başarılı şekilde gömülen örnekler, her tarafı pürüzsüz ve berrak ve renksiz reçineyle çevrilidir. Örnek, reçine bloğunun herhangi bir tarafından net görünür olacaktır. Renk desenleri, ölçek şekli ve boyutu gibi tanımlama açısından önemli olan örnek özellikleri, diseksiyon mikroskobu kullanılarak görülecektir. Reçinede ortaya çıkan artropodların daha az arzu edilen özellikleri, örneğin hava kabarcıkları tabakasının üzerini kaplaması, pulların eksik, vücut ...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Örneklerin hazırlanması
Koruma yöntemleri, işlenen numuneye bağlı olabilir. Yaygın örnek koruma yöntemleri arasında %70 etanol veya dondurma bulunur; her ikisi de reçine gömülmesiyle uyumludur. Bu yöntemler, örneğin renk, pullar, tüyler ve diğer fiziksel özellikler gibi temel özelliklerin korunmasında faydalıdır.
Reçine katmanlarının hazırlanması ve numunenin yerleştirilmesi
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların açıklamak zorunda kalacak bir çıkar çatışması yoktur.
Reçine üretim hattına katkıda bulunan geçmiş ve mevcut lisans öğrenci çalışanlarını takdir ediyoruz; bunlar arasında Jake Host, Katelyn Humlicek, Erik Aguirre Cordero, Isaac Luna, Michael Riley, Elise Hoffman, Megan Nicholson, Allison Speed ve Jesus Rene Garcia Lunar da var. Finansman desteği Texas A&M Üniversitesi Entomoloji Bölümü ve Texas EcoLab Programı (GLH, RCR) tarafından sağlandı. Bu çalışma sırasında reçine içine monte edilen aşağıdaki artropodlar, BEI Resources, NIAID, NIH tarafından dağıtım için Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezleri tarafından sağlanmıştır: Yetişkin Rhodnius prolixus, Strain CDC, NR-44077; NIAID, NIH: Yetişkin Haemaphysalis longicornis, NR-51846; NIAID, NIH: Yetişkin Rhipicephalus sanguineus, NR-42512; NIAID, NIH: Yetişkin Dermacentor variabilis, NR-42513; NIAID, NIH: Yetişkin Ixodes scapularis, NR-42510; ve NIAID, NIH: Yetişkin Amblyomma americanum, NR-42514. Lutzomyia longipalpis, BEI Resources, NIAID, NIH tarafından dağıtılmak üzere Walter Reed Ordu Araştırma Enstitüsü tarafından sağlanmıştır: Adult Lutzomyia longipalpis, Strain Jacobina, Brazil (LLJB), NR-44015. Bu çalışmada kullanılan Simulium vittatum , NIH Görev Emri C-08, Sözleşme No. HHSN2722017000351, Görev Emri No. 75N93020F00002 ve BEI Resources, NIAID, NIH aracılığıyla alındı: Simulium vittatum, Yetişkin, NR-53893.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Hava kompresörü | California Air Tools CAT-1P1060S Light & Sessiz Taşınabilir Hava Kompresörü, Gümüş | California Air Tools | https://a.co/d/07y4iGha |
| Hava kompresörü hortumu | California Air Tools HFH25.25 Hybrider Flex 1/4in 25ft Hibrit Hava Hortumu Hızlı Bağlantı Hava Fitingleriyle, Mavi | California Air Tools | https://a.co/d/0cboxu7J |
| Bandsaw | G0803 9" Tezgah Üstü Bandsaw | https://www.grizzly.com/products/grizzly-9-benchtop-bandsaw-w-laser-guide-quick-release/g0803z (Analog Makine) | |
| Belt Zımpara | Bucktool 1 x 30 inç, 5 inç disk ile Anahtar Depolama ve Kolay Kemer Kapağı Çıkarılmış Tezgah Kemer Zımpara | Bucktool | https://a.co/d/017GmVQI |
| Parlatma tekerlesi | 6 inç tezgah üstü tampon ağır hizmet 1/2 HP; İki parlatıcı tekerlek içerir | Merkezi Makineler | https://a.co/d/0iGsbSCu |
| Disk zımpara makinesi | BUCKTOOL 5.0A Belt Disk Zımpara 4 inç x 36 inç Belt ve 6 in Disk Zımpara ile 3/4HP Doğrudan Tahrik Motoru ve Taşınabilir El Tabanı ile | Bucktool | https://a.co/d/08AsKXva |
| Tekerlek pedinin parlatılması x2 | Parlatma Tekerleği Değiştirme Pedleri | Enkay | https://a.co/d/07WajxZ5 |
| Basınç potası | CALIFORNIA AIR TOOLS 255C 2.5 Galon döküm için basınç potusu, mavi | California Air Tools | https://a.co/d/0j3vGi3P |
| Toz toplamak için elektrikli süpürge | BUCKTOOL 1.2 HP Otomatik Başlatma 750CFM Toz Toplayıcı, 3 Toz Toplama Torbası, 5.4 Kübik Torba Kapasitesi ve 5 PCS Ahşap İşi İçin DC50 Azaltıcı | Bucktool | https://a.co/d/0cEA39ii |
| Su banyosu | JOANLAB dijital termostatik su banyosu | JoanLab | https://a.co/d/0gJLNyWG |
| tüketilebilir | |||
| Tekerlek cilası, kırmızı | SCOTTCHEN Kırmızı Parlatma Parlatma Kesim Bileşik Kaba, Takı Kırmızı | Scottchen | https://a.co/d/caLtcNL |
| Parlatıcı tekerlek cilası, beyaz | D2903 1 Pound Parlatma Bileşiği | Woodstock | https://a.co/d/061T4kWU |
| Yarım yüz solunum cihazı | 3M Rugged Comfort Hızlı Mandallı Yarım Yüz Aksesuarı Yeniden Kullanılabilir Solunum Cihazı 6502QL, NIOSH | 3M | https://a.co/d/0g3wMldi |
| Yarım yüz solunum cihazı filtreleri | 3M Partikül Filtre P100 Solunum Koruma, 2097/071184 (AAD) | 3M | https://a.co/d/05a6ydbM |
| Reçine | Şeffaf Lite Dökme Reçine, Musluk Plastik | Musluk Plastiği | https://www.tapplastics.com/product/mold_making_materials/casting_products/tap_clear_lite_casting_resin/75 |
| Reçine katalizörü | MEKP Sıvı Katalizör, Musluk Plastiği | Musluk Plastiği | https://www.tapplastics.com/product/fiberglass/polyester_resins/tap_mekp_liquid_catalyst/40 |
| Reçine & Reçine katalizörü (Alternatif) | Şeffaf Döküm UV Reçinesi, Solarez (MEKP Katalizörü dahil) | Solarez | https://solarez.com/solarez-clear-casting-uv-resin.html |
| Zımpara kamarları | Kırmızı Etiketli Aşındırıcı 4 x 36 600 Grit silikon Karbid | Kırmızı Etiketli Aşındırıcı Ürünler | https://a.co/d/0hkYmjI7 |
| Zımpara diskleri | 1 x 30 2000 Grit 9 Micron Mavi Parlatma Kemeri ve Yastıklı Ultra Esnek Mylar Arka Kaplama | Pro Sharpening Supply | https://a.co/d/01pCnNnN |
| Zımpara diskleri | Norton Metalite R228 PSA Disk, Basınca Duyarlı Yapıştırıcı, Alüminyum Oksit, 5' ’ Çap, Kum 80 | Norton | https://a.co/d/0cqqdpMq |
| Silikon kalıplar | Reçine için kare silikon kalıplar, büyük reçine kalıplar Parlak derin kare kalıplar 6.6''x 2'' w (2 küçük kare veya dikdörtgen kalıp ile) | https://a.co/d/06Qasc1G | |
| Şeffaflık sayfaları | Ohp Şeffaf Baskılanabilir Şeffaf Film 8.5 x 11 inç, Üst Projektörler ve Lazer Yazıcılar için | Craftiff | https://a.co/d/07L2g0AT |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.