Yöntem makalesi

Anjiyotensin II Kullanarak Hipertansif Miyokard Fibrozisinin Fare Modelini Oluşturmak İçin Bir Protokol

DOI:

10.3791/69409

⸱

14 Kasım 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The Affiliated Traditional Chinese Medicine Hospital, Southwest Medical University, 2Shenzhen Traditional Chinese Medicine Hospital, 3Guangdong-Macao In-Depth Cooperation Zone in Hengqin, Chinese Medicine Guangdong Laboratory (Hengqin Laboratory), 4State Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Syndrome, Guangdong Provincial Hospital of Chinese Medicine, Guangdong Provincial Academy of Chinese Medical Sciences, The Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, 5School of Pharmacy, Southwest Medical University

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Anjiyotensin II'nin (Ang II) ozmotik pompalar yoluyla sürekli infüzyonu, hipertansif miyokardiyal fibrozun hayvan modellerini oluşturmak için klasik yöntemlerden biridir. Bu protokol, bu modeli oluşturma sürecini sistematik olarak optimize etti ve ozmotik pompa implantasyonu, konumlandırma ve Ang II konsantrasyon ayarının kilit noktalarını detaylandırdı.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Anjiyotensin II'nin (Ang II) ozmotik pompalar yoluyla sürekli infüzyonu, hipertansif miyokardiyal fibrozun hayvan modellerini oluşturmak için yaygın olarak kullanılan bir yaklaşımdır. Bununla birlikte, bu teknik mevcut raporlarda Ang II'nin kararsızlığı, yanlış pompa yerleşimi ve standart bir prosedürün olmaması gibi bazı sınırlamalar sergilemektedir. Kuruluş metodolojisine ilişkin mevcut raporlar nispeten sınırlı kalmaktadır. Bu protokol, Ang II çözeltisinin standartlaştırılmış hazırlanması, dozajın kalibrasyonu, ozmotik pompaların hassas deri altı implantasyonu ve model değerlendirme göstergeleri için nicel standartlar dahil olmak üzere farelerde Ang II ozmotik pompa kaynaklı hipertansif miyokardiyal fibroz modellerinin oluşturulmasını sistematik olarak optimize etmiştir. Deneysel sonuçlar, yüksek sağkalım oranlarına sahip farelerde Ang II ozmotik pompa kaynaklı hipertansif miyokardiyal fibrozun olduğunu göstermiştir. Sistolik kan basıncı (SBP) seviyeleri, yedi günlük deri altı implantasyondan sonra 160 mmHg'de sabitlendi. Model fareler, sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonlarını önemli ölçüde azaltmış ve sol ventrikülün diyastol sonu boyutlarını artırmıştır. Sham cerrahi grubu ile karşılaştırıldığında, hipertansif miyokardiyal interstisyel doku ve perivasküler bölgelerde kollajen birikimi arttı. Küçük bir örneklem büyüklüğüne (n = 6) dayanan bu çalışma, ozmotik bir pompa ile birleştirilmiş Ang II kullanılarak hipertansif miyokardiyal fibrozun bir fare modelinin oluşturulmasının fizibilitesini ön olarak doğruladı ve nicel bir fenotip doğrulama sistemi kurdu.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Hipertansiyonun önemli bir patolojik sonucu olan miyokardiyal fibrozis (MF), hasarlı veya sıkışmış miyokard içinde aşırı kollajen lif birikimi ile karakterizedir. Hipertansiyon aracılı hedef organ hasarının en önemli biçimlerinden birini temsil eder ve ilerleyici kalp fonksiyon bozukluğuna katkıda bulunur 1,2. Mekanik araştırmaları ilerletmek ve hipertansif miyokardiyal fibroz için yeni terapötik stratejiler geliştirmek için uygun hayvan modellerinin oluşturulması esastır. Renin-anjiyotensin sisteminin merkezi bir efektörü olan anjiyotensin II (Ang II), hipertansiyon patogenez....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm deneysel prosedürler, Ulusal Sağlık Enstitüleri'nin Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Yönergelerine göre gerçekleştirildi ve deneysel protokoller Southwest Tıp Üniversitesi Hayvan Araştırma Komitesi tarafından onaylandı (onay numarası SWMU2020317).

1. Ang II çözeltisinin hazırlanması ve ozmotik pompanın doldurulması

  1. Yaşa bağlı karıştırıcıları kontrol etmek için gelişimsel tekdüzelikleri için 8 haftalık hayvanları seçerek 20 ± 1 g ağırlığındaki 12 SPF dereceli erkek C57BL / 6J faresi seçin ( Malzeme Tablosuna bakınız). Fareleri, her grupta 6 fare ....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

On iki fareye ozmotik pompalarla deri altına implante edildi ve hayatta kaldı. Model grubunun hepsinde hipertansiyon gelişti (n = 6). İmplantasyondan yedi gün sonra, model grubundaki ortalama SBP 160 mmHg'yi aştı (Şekil 1A). 14, 21 ve 28. günlerde, model grubundaki SBP sürekli olarak 160 mmHg'nin üzerinde kaldı. Buna karşılık, sahte cerrahi grubu, deney boyunca önemli bir yükselme olmaksızın normal SBP seviyelerini (yaklaşık 90-110 mmHg) korudu.

Ozmotik pompanın i.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, ozmotik bir pompa kullanarak hipertansif miyokardiyal fibrozu indüklemek için Ang II'nin sürekli infüzyonunda yer alan temel adımları optimize etti ve ozmotik pompanın implantasyon konumlandırması ve Ang II konsantrasyonunun ayarlanması gibi kritik hususları detaylandırdı. Model 2004 pompası, 4 haftalık süresi için seçildi ve Ang II dozu, minimum partiler arası değişkenliği hesaba katarak nominal infüzyon hızına göre hesaplandı. Bu modelin etkinliği SBP izleme, kardiyak renk.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm yazarlar bu makalenin herhangi bir çıkar çatışması olmadığını beyan eder.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82074378), Sichuan Eyaleti Bilim ve Teknoloji Departmanı Projesi (2022YFS0618), Luzhou Bilim ve Teknoloji Ofisi Projesi ve yetenek çalışması (2023JYJ029), 2024 Geleneksel Çin Tıbbı Guangdong İl Laboratuvarı Projesi (HQCML-C-2024005), Shenzhen Bilim ve Teknoloji Programı (JCYJ20230807094603007, JCYJ20240813152440051), Shenzhen Tıbbi Araştırma Fonu (A2403028), Sichuan Tabipler Birliği Projesi (Q2025014) ve Güneybatı Tıp Üniversitesi Projesi (2024ZKZ007, 2024ZKY073, 2023ZYYQ04). Fon sağlayıcının çalışma tasarımında, veri analizinde veya yayınlama kararında hiçbir rolü yoktu.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Ang IISigma-Aldrich ŞirketiSigma, A9525
Hayvan anestezi makinesiShenzhen Ödül Yaşam Bilimleri Şirketi, LtdR530
Hayvan ventilatörüShenzhen Ödül Yaşam Bilimleri Şirketi, LtdR415
GraphPad Prism GraphPad Software Inc.Sürüm 9.0
Zeki, invaziv olmayan kan basıncı monitörüNippon Soft Dragon Co., LtdSoftron, BP-98A
Işık mikroskobuYijingtong Optik Teknolojisi (Şanghay) Şirketi, LtdOLYMPUS, SZ61TR
Masson Tricolor Boyama Çözeltisi ve KitiPekin Soleibao Teknoloji Şirketi, LtdSolarbio, G1340
FareChengdu Dossy Exprimental Animals CO., LtdC57BL/6J
Osmotik pompalarALZA ŞirketiAlzet, Model 2004
Ultrason görüntüleme sistemleriFUJIFILM VisualSonics Şirketi, KanadaFUJIFILM, Vevo 3100

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhao, D., Liu, J., Wang, M., Zhang, X., Zhou, M. Epidemiology of cardiovascular disease in China: current features and implications. Nat Rev Cardiol. 16 (4), 203-212 (2019).
  2. Czubryt, M. P., Hale, T. M. Cardiac fibrosis: pathobiology and therapeutic targets. Cell Sign....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Ozmotik PompaKollajen BirikimiSubk tan mplantasyonSistolik Kan Bas ncSol Ventrik l FonksiyonuFenotip Do rulamaModel De erlendirmesi
Video yakında

İlgili makaleler