Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Fare İntalı MCAO Modelinin Standartlaştırılması: Kalite Kontrol Ölçümleriyle Detaylı Bir Protokol

121 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/69573

⸱

7 Ağustos 2026

 ,  ,  ,  , 
1Department of Neurology, Xuanwu Hospital, Capital Medical University

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Bu protokol, farelerde optimize edilmiş 60 dakikalık orta beyin arter tıkanması (MCAO) tekniğini gösterir. Protokol, çok modlu yaklaşımlarla doğrulanmış, minimum ölüm oranı ile %87,5 başarı oranı sağlanmış ve inme araştırmaları için tekrarlanabilir enfarkt ve davranışsal sonuçlar elde etmektedir.

Özet

Fare orta beyin arter tıkanması (MCAO) modeli, iskemik inme patofizyolojisini açıklamak ve nöroprotektif tedavileri doğrulamak için referans standart olarak kalmaktadır. Ancak ince cerrahi sapmalar, enfarkt hacmini ve davranış sonuçlarını derinden değiştirebilir. "Görselleştir, sonra sistematikleştir" çerçevesi kullanarak, model kurulumu ve doğrulamasının her adımını yeniden inceledik. Anatomik yönüm ve filament yerleşimini standartlaştırmak için önemli cerrahi işaretlerin ve kritik adımların ayrıntılı fotoğraf dokümantasyonu gerçekleştirildi. 2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür (TTC) boyama, reperfüzyondan sonraki 24 saat ve 72 saat içinde infarktların hacmi ve topolojisini hassas şekilde haritalamak için kullanılmıştır. Nörolojik eksiklikler Zea-Longa, Bederson ve modifiye Garcia ölçekleriyle derecelendirildi. Yirmi dört erkek Sprague-Dawley faresi 60 dakikalık geçici MCAO geçirdi; İnfarkt hacmi ve nörolojik skorlar 24 saat ve 72 saat arası değerlendirildi. Hayvanların yaklaşık %87,50'si başarılı beyin kan akışı blokajı (Zea-Longa ≥ 1 ve kesin TTC tanımlı enfarkt) elde etti, genel ölüm oranı %12,50 oldu; bu da modelin yüksek isayetini kanıtlıyor. Bu standartlaştırılmış protokol, preklinik inme araştırmaları için teknik olarak geliştirilmiş, tekrarlanabilir bir temel sağlar ve inme patofizyolojisi ile terapötik müdahaleleri araştıran çalışmalarda laboratuvarlar arası tutarlılığı kolaylaştırır.

Giriş

İnme, dünya genelinde ölüm nedenlerinin ikinci ve engelliliğin üçüncü en yaygınnedenidir 1,2. İnme, düşük ve orta gelirli ülkeleri orantısız şekilde etkiler; burada ortalama olarak yüksek gelirli ülkelerden 15 yıl erkengerçekleşir 1. İki ana tip iskemik inme (%85) ve intraserebral kanamadır (%15)3. İnmelerin büyük çoğunluğunu oluşturan iskemik felç, beyin kan akışı tıkanıklığından kaynaklanır ve hücre ölümüne ve beyinenfarktüsüne yol açar 4. İskemik zincirleme, önemli prooksidatif süreçler dahil olmak üzere birden fazla biyokimyasal olayiçerir 5,6.

Kapsamlı preklinik ve klinik çabalara rağmen, yalnızca birkaç tedavi — özellikle doku plazminogen aktivatörü ile damar içi tromboliz ve mekanik trombektomi — etkili olduğunu kanıtlamış olup, bu tedaviler dar terapötik aralıklar ve katı hasta seçim kriterleriyle sınırlıdır. Bu nedenle, iskemik yaralanma, nörovastik onarım ve inme sonrası iyileşmenin altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaların aydınlatılması acil bir ihtiyaç vardır. Bu hedefe ulaşmak için tekrarlanabilir, klinik olarak önemli bir hayvan modeli vazgeçilmezdir.

Orta beyin arter tıkanması (MCAO) modeli, kemirgenlerde iskemik felçincelemek için geniş çapta kullanılır 7,8. İntraluminal filament tıkanma yöntemi, MCAO'nun en klasik ve yaygın kullanılantekniklerinden biridir 9. Bu teknik, kraniektomi gerektirmeden hem kalıcı hem de geçici tıkanıklıkları modelleyebilir. Endovasküler teller kullanılarak kullanılan daha yeni bir transfemoral teknik, sıçanlarda geçici MCAO indükleme konusunda umut vermiş ve daha tutarlı sonuçlarsunmaktadır 10. Bu model, genellikle intraluminal filamenttekniği 11 kullanılarak orta serebral arterin tıkanmasını içerir. MCAO, fokal serebral hipoperfüzyona neden olur ve bu da iskemiye ve reperfüzyon yaralanmasınayol açar 12.

MCAO, inme patofizyolojisi ve olası tedavileri araştırmak için değerli olsa da, değişken lezyonhacimleri üretebilir 7. Bu nedenle, MCAO modelindeki iyileştirmeler—örneğin reperfüzyon tekniklerinin geliştirilmesi, standart işletim protokollerinin oluşturulması ve birleşik değerlendirme kriterlerinin geliştirilmesi—enfarkt konumu ve hacmindeki değişkenliği azaltarak iskemik felç araştırmalarında faydasını artırabilir.

Bu protokol, tutarlı sonuçlar elde etmek için yaklaşık 10–15 ameliyat öğrenme eğrisi gerektirir13. Başarı oranları, operatör deneyimine ve faresuşuna göre değişebilir. Model, akut iskemik inme çalışmaları için uygundur ancak hipertansiyon veya diyabet15 gibi insan eş hastalıklarını tam olarak kopyalamayabilir. Buna göre, deneysel değişkenliği standartlaştırılmış prosedürler ve titiz kalite kontrol önlemleriyle azaltmayı amaçlayan optimize edilmiş bir MCAO protokolü geliştirmeye ve titizlikle doğrulamaya çalıştık. Standartlaştırma ve veri güvenilirliğinde çift kazanım sağlamak için dört tamamlayıcı yenilik entegre edildi: (1) İki zaman noktası boylamasına değerlendirme—Zea-Longa, Bederson ve Modified Garcia ölçeklerinden nörolojik puanlar, reperfüzyon sonrası 24 saat ve 72 saat içinde 2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür (TTC) türetilen enfarkt hacimleriyle paralel olarak alındı; bu da ödem çözümlülüğü ile fonksiyonel iyileşme arasındaki zamansal ilişkiyi belirledi; (2) Üç ölçekli çapraz doğrulama—entegre üç ölçekli kalibrasyonla kör çift araştırmacı puanlama, davranışsal değerlendirmenin hassasiyetini ve hassasiyetini önemli ölçüde artırdı; (3) Tüm kurs hipotermik hızlı kesit—"90 saniyelik buz banyosu çıkarımı ve ardından önceden soğutulan kalıplarda tek adımlı 2 mm koronal dilimleme" standart bir çalışma prosedürü (SOP) kurulmuş, bu da otolizi ve insan hatasını en aza indirerek yüksek isabetli hacimsel ölçümler sağlanmıştır; (4) Entegre kalite kontrol çerçevesi—ameliyat öncesi oruç, anestezi derinliği kontrolü, ameliyat öncesi termoregulasyon ve çapraz kontaminasyon önlemeyi kapsayan kapsamlı bir SOP, tekrarlanabilir ve kolayca aktarılabilir bir MCAO standart işletim prosedürü sunmak için oluşturulmuş, laboratuvarlar arası tutarlılık ve çapraz karşılaştırılabilirlik için sağlam bir temel oluşturmuştur.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Deney, Capital Medical Üniversitesi'nin Kurumsal Hayvan Deneyleri ve Deneysel Hayvan Refahı Komitesi tarafından onaylandı ve denetlendi. Tüm protokoller, NIH Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Rehberi'ne (NIH Yayını 80-23, 1996 rev.) uygun olmakla birlikte, steril ekipman ve aseptik teknikler gereklidir.

1. Hayvan seçimi

  1. Sertifikalı bir laboratuvar hayvanı tedarikçisinden (Lisans No. SCXK (Pekin) 2021-0011) ve MCAO'nun bir modelini oluşturmak amacıyla oluşturuldu.
  2. Hayvanları geleneksel olarak imtiyazlı yiyecek ve su ile barındırır; tüm prosedürler Uluslararası Etik Koduna uyguluyordu.
  3. Filament boyutu seçiminde hayvan vücut ağırlığına dayalı aşağıdaki kriterleri kullanarak tutarlı tıkanmayı sağlayasınız:
    - 220–250 g: 0,33–0,35 mm çapında
    - 250–280 g: 0,35–0,38 mm çapında
    - 280–310 g: 0,38–0,40 mm çapı
    NOT: Bu spesifikasyonlar, damar çapındaki yaşa bağlı artışları hesaba katır ve SAH veya eksik tıkanma13 insidansını azaltır.

2. Örneklem büyüklüğü

  1. Örneklem büyüklüğünü hesaplama yazılımı kullanarak hesaplayın. MCAO grubunda %35 ± %10 ±(ortalama SD) infarkt hacmi ile SHAM grubunda %0 ± %2 olduğunu gösteren ön verilere dayanarak, bir etki büyüklüğü (Cohen's d) tahmin edin. İki kuyruklu bir Mann-Whitney U testi için (t-testine parametrik olmayan alternatif), α = 0.05 ve kuvvet (1-β) = 0.80 ile minimum örneklem büyüklüğü hesaplanın.
    NOT: Etki büyüklüğü 3.5 olarak tahmin edildi ve minimum örneklem büyüklüğü grup başına 6 hayvandı.
  2. Beklenen ölüm oranını (%12,5) ve dışlanma oranını (%5–10) hesaba katmak için, MCAO grubundan 24 fare ve SHAM grubundan 6 fare dahil edilsin; bu da birincil son nokta için yeterli güç (>0,90) sağlar (24 saat infarkt hacmi).

3. Dahil etme ve dışlama kriterleri

  1. Aşağıdaki kriterleri karşılayan hayvanlar dahil edilsin: (1) erkek Sprague-Dawley sıçanları, 240–270 g, 6–8 haftalık; (2) önceden var olan nörolojik eksikliklerin olmaması (ameliyat öncesi nörolojik puan = 0); (3) anesteziyi komplikasyonsuz başarılı bir şekilde indüksiyon.
  2. Eğer hayvanlar şu örnekleri gösteriyorsa, analizden dışlanın: (1) nekropsi sırasında görülen subaraknoid kanama (SAH); (2) deneysel müdahaleyle ilgisi olmayan erken ölüm (NOT: Bu kriterler, çalışma başlamadan önce seçilme yanlılığını en aza indirmek için önceden belirlenmiştir.
  3. Hayvan iplasma politikası: Teknik cerrahi başarısızlık veya ameliyat dışı ölüm nedeniyle istismarcı gücü korumak için yalnızca hariç tutulan hayvanları değiştirin. Başarısız modellemelerle (başarısız tıkanma) hayvanları değiştirmeyin, ancak varyantlığı yapay olarak azaltmaktan kaçınmak için başarı oranı hesaplamasının bir parçası olarak rapor edin.

4. Ameliyat öncesi hazırlıklar

  1. Otoklavlı aletler, steril filament ve örtülü bir alan hazırlayın.
  2. Rutin oruç zorunlu değildir; Gerekirse, oruç süresini 2–4 saat ile sınırlayın. İzofluran (%3–4) ile anestezi başlatın ve işlem sırasında %30–40 O₂ oranında 1,5–2 oranında tutulun. Anestezi derinliğini, düzeltme refleksinin kaybı ve ayak parmağı sıkıştırma ile doğrulayın.
  3. Rektal sıcaklık izleme ile geri besleme kontrollü ısıtma pediyle vücut sıcaklığını 37 ± 0,5 °C arasında tutun.
  4. Boynu ve saç derisini tıraş edin, ardından bölgeyi povidon-iyot ve %70 etanol ile temizleyin.
  5. Ameliyattan 30 dakika önce ve ameliyat sonrası her 12 saatte bir 48 saat boyunca buprenorfin (0,05 mg/kg, deri altı) veya günde bir kez 3gün boyunca meloksikam (1 mg/kg, deri altı) verin. Ağrıyı bakım davranışı, duruş ve spontan aktivite izleyerek değerlendirmek; Rahatsızlık belirtileri devam ederse ek ağrı aljezi verin.

5. MCA'nın Tıkanması

  1. Fareyi sırt yatağı pozisyonuna yerleştirin, başı hafifçe uzatarak ventral boynu açığa çıkarın.
  2. Iris makası ile orta çizgi servikal kesi (1,5–2,0 cm) yapın.
  3. Sternomastoid ve omohyoid kasları kesin bir şekilde ayırın; forseps kullanılarak sol ortak karotis arter (CCA) bifurkasyonunu ortaya çıkarır.
  4. Dış karotis arteri (ECA) distal olarak kalıcı 4-0 ipek dikiş ile ve proksimalda geçici bir ligaturla bağlanın. Mikromakas kullanarak iki ECA ligatürü arasında küçük bir kesi oluşturun.
  5. CCA ve iç karotis arteri (ICA) geçici olarak mikrovasküler kelepçelerle (60 g basınç) kapatın.
  6. ECA kesisinden 4-0 silikon kaplı monofilament (0,35–0,40 mm çapında) yerleştirin. Onu CCA'ya geriye doğru ilerlet, sonra CCA ikişlenmesinin ötesine yönlendir.
    NOT: Filamentin ICA'ya kranial tabana doğru girdiğinden emin olun, pterygopalatine arteri (PPA) değil, yansal dallanan. <10 mm mesafede dirençle karşılaşılırsa, filamenti geri çekin, hayvanın başını karşı tarafa 30° döndürün ve PPA orijinasının ötesine yönlendirmek için tekrar ilerleyin.
  7. Filamenti CCA bifurkasyonundan 18–20 mm ilerleterek hafif direnç MCA kökeninin tıkandığını gösterene kadar. Derinliği, filament üzerindeki önceden işaretlenmiş referans çizgisi ile (silikon stoper'a 2 mm yakın konumda) doğrulayın ve ECA kütüğü yerleştirme noktasından kaliper ile ölçülür. Filament yere geldiğinde CCA kelepçesini bırakın.

6. Reperfüzyon

  1. 60 dakika tıkanıklıktan sonra kesiyi tekrar açın ve geçici ECA ligatürünü gevşedin.
  2. Filamenti nazikçe çekerek ucu ECA kütüğünden geçene kadar kan akışını yeniden sağlayın. Sırt kanamasını önlemek için derhal bir kalıcı ligatür kalıbın proksimal kısmına yerleştirin. Yarayı katmanlar halinde kapatın.
  3. Fareyi sürekli izleme için ısıtılmış bir kurtarma kafesine nakledin.

7. Sahte ameliyat

  1. Hayvanı, yukarıda MCAO için tarif edilen prosedürle (oruç, anestezi, sıcaklık kontrolü, steril örtük) hazırlayın.
  2. Yukarıda belirtildiği gibi servikal kesi ve CCA bifurkasyon maruziyeti yapılsın.
  3. Gemiyi disek edin ve açığa çıkarın. Filamenti sokmayın.
  4. Arterler serbest kalsın; Beyin iskemiyi indükleme.
  5. 10 dakikalık pozlamadan sonra kesiyi katmanlar halinde kapatın. Hayvanı izleme için ısıtılmış bir kurtarma kafesine nakledin.

8. Ameliyat sonrası nörolojik skorlar

  1. Reperfüzyondan 24 saat ve 72 saat sonra, infarkt hacmi ölçümü için fedakarlıktan hemen önce değerlendirin.
  2. Hayvanı sessiz bir odada, 25 °C'de 30 dakika boyunca alıştırın.
  3. İki bağımsız araştırmacının grup dağılışına kör olmasını sağla. Her araştırmacının skorlarını ayrı sayfalara ayrı sayfalara yazdırın; Herhangi bir puan farkı ≥1 puan yeniden değerlendirmeyi tetikler.
  4. Ölçekler (uygulama sırasıyla birlikte):Zea-Longa 17 (Tablo 1), Bederson18 (Tablo 2) ve Modified Garcia19 (Tablo 3) puanlamaları, tutarlı kriterler için en son yayımlanmış protokollere uygun şekilde gerçekleştirilin.
  5. İstatistiksel analiz için iki gözlemcinin ortalamasını kullanın. Ortalama puanlar %>10 farklıysa, herhangi bir hayvandan veri hariç tutulun ve yerine yeni bir denek ekleyin.

9. Beyin enfarkt hacminin ölçümü

  1. Reperfüzyon sonrası 24 saat ve 72 saat sonra, sıçanları %5 izofluran ile derin bir anestezi altına alın. Devam etmeden önce derin anestezi, düzeltici refleks kaybı ve ayak sıkıştırma tepkisi ile stabil solunumu doğrulayın.
  2. Derin anestezi onayından sonra 90 saniye içinde beyni hızla çıkarın, buz gibi PBS ile durulayın ve soğutulmuş fare beyin matrisi kullanarak 2 mm koronal dilimlere kesin. Dilimleme sırasında aşağıdaki önlemlere uyun
    1. Tüm işlemi buzda 0–4 °C sıcaklıkta tutun; Beyni 90 saniye içinde toplap önceden soğutulmuş bir matrikse düz konumlandır.
    2. Kesin bir bıçak kullanarak kesit, kesin ve temiz kesimler yapın; her dilimi rostro-kaudal sırayla buz gibi soğuk PBS'ye toplayın.
    3. Çapraz kontaminasyonu önlemek için hayvanlar arasında matris ve bıçağı %75 etanol ile hemen temizleyin.
  3. %2 TTC'yi 37 °C'ye kadar önceden ısıttıktan sonra, dilimleri tamamen batırın ve 20 dakika boyunca karanlıkta kuluçka yapın, her 5 dakikada bir 20 dakikada nazikçe döndürün.
  4. Reaksiyonu hemen durdurun, 4 °C PBS ile üç kez durulayın. Sonra gece boyunca 4 °C'de %4 paraformaldehit sabitlensin.
  5. 300 dpi'da, her dilimi bir kez her iki tarafı fotoğraflayın.
    1. Gölgeleri ve yansımaları ortadan kaldırmak için beyaz bir arka plana sabit aydınlatma kullanın.
    2. Dilimleri örtüşmeden düz yerleştirin ve her çerçeveye bir ölçek çubuğu ve kimlik etiketi ekleyin. Kamerayı bölümlere dik tutun ve odak uzaklığı ile beyaz dengesini sürekli tutun.
  6. ImageJ kullanarak enfarkt hacmini nicelikle ölçe.
    1. 300 dpi'lik görüntüyü (RGB formatı) içe aktarın ve 8 bitlik gri tonlamaya dönüştürün (Görüntü > Tip > 8-bit).
    2. Otsu'nun otomatik eşik işaretini uygulayın (Görsel > Otomatik Eşik >Ayarla > Otsu'yu seçin) infarktı (beyaz) canlı dokudan (kırmızı) ayırın.
    3. İpsilateral yarımküre sınırını çizmek için Freehand seçimleri aracını kullanın.
    4. Alanı ölç (Analiz > Ölç) ve piksel sayısını kaydet.
    5. İnfarkt hacmi hesaplanın: Σ (infarkt alanı × dilim kalınlığı [2 mm]) × (kontralateral yarımküre hacmi/ipsilateral yarımküre hacmi), kontralateral yarımkürenin yüzdesi olarak ifade edilir.

10. İstatistiksel analiz

  1. Verileri uygun ± ortalama standart sapma (SD) veya medyan [çeyreklerarası aralık] olarak sunun.
  2. Normal dağılım olmayan veriler için eşleşmemiş Student's t-testi veya Mann-Whitney U testi kullanılarak gruplar arası karşılaştırmalar yapın.
  3. İstatistiksel anlamlılığı P < 0.05'e ayarlayın. Tüm analizleri uygun istatistiksel analiz yazılımı kullanarak gerçekleştirin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Hayvanlar, terminal TTC boyama için reperfüzyon sonrası 24 saat (n = 10) veya 72 saat (n = 10) hayatta kalma gruplarına rastgele olarak dağıtıldı. Ek 4 sıçan MCAO geçirdi ancak planlanan son noktadan önce öldü (ölüm oranı %12,5). SHAM grubu n = 6'dan oluşuyordu. Böylece kullanılan toplam hayvan sayısı 30 (24 MCAO + 6 SHAM) oldu.

Fareler, serebral iskemiyi indüklemek için 60 dakikalık MCAO geçirdi (Şekil 1). Reperfüzyon intralumina...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu çalışmanın temel amacının biyolojik keşif değil, metodolojik standartlaştırma olduğunu netleştirmek önemlidir. Standartlaştırılmış bir MCAO protokolü geliştirmek, laboratuvarlar arası değişkenliği azaltmak ve iskemik inme araştırmalarında tekrarlanabilirliği artırmak için hayati öneme sahiptir. Bu protokol, titiz kalite kontrol önlemleriyle prosedürel şeffaflığı artırır ve standart filament yerleştirme, sıcaklık düzenlemesi ve histolojik işlem gibi MCAO modellemesinde yaygın teknik ek...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma, Pekin Doğa Bilimleri Vakfı (No.7232269) ve Pekin Geleneksel Çin Tıbbı Bilim ve Teknoloji Geliştirme Fonu Projesi (No. JJ-2023-93).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
2% TTC boyama solüsyonuBeijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.T817025 g/şişe, ≥98 % saflık
4% PFABeijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.P1110500 mL kullanıma hazır
Emici sütürShandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd.VCP345H5-0 Vicryl
Adson forsepsShanghai Jinzhong Surgical Instrument Co., Ltd.JD-110101×2 diş, 12 cm
Dumont kavisli forsepsShanghai Jinzhong Surgical Instrument Co., Ltd.JD-1105211 cm uzunluğunda, 0.05 mm ince uç
Geri beslemeli ısıtma pediShenzhen Reward Life Science & Technology Co., Ltd.6900137 ± 0.3 °C kapalı döngü
ImageJNational Institutes of Healthsürüm 1.53k
Iris makasShanghai Jinzhong Surgical Instrument Co., Ltd.JD-14060Kavisli uç, 10 cm
Mikro-vasküler klipslerShenzhen Ruiwode Lift Technology Co.,Ltd.JD-160101.5 cm kavisli klips
Emici olmayan ipekShanghai Pudong Jin-Huan Medical Products Co., Ltd.S-23046-0 Siyah ipek iplik
PASS yazılımı NCSS, LLC, Kaysville, UT, USAsürüm 15.0 Örnek boyutu hesaplama yazılımı 
Sıçan beyin matrisiShenzhen Ruiwode Lift Technology Co.,Ltd.686102 mm koronal yuvalar
Silikon kaplı naylon filamentShenzhen Ruiwode Lift Technology Co.,Ltd.60-12500.35 mm OD, 30 mm silikon uç, EO-steril
Küçük hayvan anestezi makinesiShenzhen Ruiwode Lift Technology Co.,Ltd.R500IEIsofluran buharlaştırıcı, indüksiyon odası & maske dahil
SPSSIBM Corp., Armonk, NY, USAsürüm 26.0 İstatistiksel analiz yazılımı
Vannas mikro makasShanghai Jinzhong Surgical Instrument Co., Ltd.JD-14058Kavisli uç, 8 cm

Kaynaklar

  1. Walter, J., Oyere, O., Mayowa, O., Sonal, S. Stroke: a global response is needed. Bull World Health Organ. 94 (9), 1816-1834 (2016).
  2. Mira, K., Andreas, L. Global burden of stroke. Semin Neurol. 38 (2), 1649-2211 (2018).
  3. Stephen, J. M., David, J. W. Stroke: causes and clinical features. Medicine (Abingdon). 48 (9), 1561-1566 (2020).
  4. Narayanaswamy, V. Ischemic stroke: new insights from risk factors, mechanisms and outcomes. J Cardiovasc Dev Dis. 10 (12), 472(2023).
  5. Chao, L., Tao, S., Chen, J. Recent advances in nanomedicines for the treatment of ischemic stroke. Acta Pharm Sin B. 11 (7), 1767-1788 (2021).
  6. Marcelo, F., Leonardo, E. V., Brigitta, B., Elisabetta, P., Luciano, S. The nrf2 pathway in ischemic stroke: a review. Molecules. 26 (16), 5001(2021).
  7. Melissa, T. -L., Claire, L. G. A review of experimental models of focal cerebral ischemia focusing on the middle cerebral artery occlusion model. F1000Res. 10, 51752(2021).
  8. Lang, Z., et al. Animal models of ischemic stroke with different forms of middle cerebral artery occlusion. Brain Sci. 13 (7), 1007(2023).
  9. Rosalia, C., Rosanna, D. P., Emanuela, E., Salvatore, C. Middle cerebral artery occlusion by an intraluminal suture method. Methods Mol Biol. 1727, 1393-1401 (2018).
  10. Afshin, A. D., et al. Transfemoral approach to induce transient middle cerebral artery occlusion in rats: the use of commercially available endovascular wires. Neurocrit Care. 32 (2), 575-585 (2020).
  11. Seunghoon, L., et al. Middle cerebral artery occlusion methods in rat versus mouse models of transient focal cerebral ischemic stroke. Neural Regen Res. 9 (7), 1315-1318 (2014).
  12. Kitti, T., Nipon, C., Siripron, C. C. The effects of hyperbaric oxygen therapy on the brain with middle cerebral artery occlusion. J Cell Physiol. 236 (3), 21677-21694 (2021).
  13. Gary, P. M., et al. A comparative study of variables influencing ischemic injury in the longa and koizumi methods of intraluminal filament middle cerebral artery occlusion in mice. PLoS One. 11 (2), e0148503(2016).
  14. J, S., et al. Strain differences in intraluminal thread model of middle cerebral artery occlusion in rats. Physiol Res. 68 (1), 933937-933948 (2019).
  15. Chang, L., Xiaoqing, W., Yueru, Z., Songli, Y., Xiangshi, T. Study on the efficacy and pharmacological mechanism of innate immune sting pathway regulators in the treatment of ischemic brain injury. Pharmaceuticals. 18 (12), 1775(2025).
  16. Pei-Kang, L., et al. Neuroprotective effects of low-dose G-CSF plus meloxicam in a rat model of anterior ischemic optic neuropathy. Sci Rep. 10 (1), 66977(2020).
  17. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 1184-1191 (1989).
  18. Bederson, J. B., et al. Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination. Stroke. 17 (3), 1472-1476 (1986).
  19. David, W. H., et al. Different strokes for different folks: the rich diversity of animal models of focal cerebral ischemia. J Cereb Blood Flow Metab. 30 (8), 1412-1431 (2010).
  20. Kudret, T., Raghu, V., Kurt, A. S., Robert, J. D. Ideal suture diameter is critical for consistent middle cerebral artery occlusion in mice. Neurosurgery. 56 (1 Suppl), 196-200 (2005).
  21. Ilya, L. G., et al. MRI guiding of the middle cerebral artery occlusion in rats aimed to improve stroke modeling. Transl Stroke Res. 9 (4), 12417-12425 (2018).
  22. Nathalie, P. D. S., et al. The IMPROVE guidelines (Ischaemia models: procedural refinements of in vivo experiments). J Cereb Blood Flow Metab. 37 (11), 17703488-17703517 (2017).
  23. Chintamani, N. J., Swatantra, K. J., Puvvada, S. R. M. An optimized triphenyltetrazolium chloride method for identification of cerebral infarcts. Brain Res Protoc. 13 (1), 1011-1017 (2004).
  24. Huaxin, S., Lihong, D., Xuan, L., Zhong, Y., Wei, Y. A modified transcranial middle cerebral artery occlusion model to study stroke outcomes in aged mice. J Vis Exp. (195), e65345(2023).
  25. Maria, S., et al. Modified middle cerebral artery occlusion model provides detailed intraoperative cerebral blood flow registration and improves neurobehavioral evaluation. J Neurosci Methods. 358, 109179(2021).
  26. Clemens, J. S. Ischemic stroke: experimental models and reality. Acta Neuropathol. 133 (2), 245-261 (2017).
  27. Bharti, M., Louise, D. M. Sexual dimorphism in ischemic stroke: lessons from the laboratory. Womens Health (Lond). 7 (3), 2222-2239 (2011).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

SinirbilimSay 234Say 234Bu Ay JoVE deSayAnahtar Kelimeler skemik inmeorta serebral arter okl zyonuReperf zyonintral minal filamentintral minal s t r
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.