Burada, zebrafish kovanlarının yeniden dolaşımı için yeni, kolay inşa edilebilir ve düşük maliyetli bir protokol sunuyoruz.
Method Article
* These authors contributed equally
Burada, zebrafish kovanlarının yeniden dolaşımı için yeni, kolay inşa edilebilir ve düşük maliyetli bir protokol sunuyoruz.
Zebra balıkları, barındırılması ve bakımı ucuz kabul edildiği için in vivo çalışmalar için popüler bir model organizmadır. Ancak, ticari konut sistemleri genellikle küçük araştırma grupları için maliyet açısından yüksek maliyetlidir. Birden fazla özel yapım zebrafish konut sistemi mevcuttur, ancak tutarsız su koşulları, kötü su döngüsü hızları ve hassas konut tankları sorunları yaşamaktadır. Bu tasarım sorunları, bu sistemlerin uzun vadeli araştırma programları için uygulanabilirliğini azaltır. Bu makalede, yeni, uygun fiyatlı ve kolayca inşa edilmesi olan, özel yapım, geri dönüşümlü bir zebrafish konut rafını sunuyoruz. Bu sistem, daha önce yayımlanmış konut tankı tasarımıyla birleştiğinde, zebrabalıkların gelişimin herhangi bir aşamasında barındırılmasına olanak tanır. Birçok filtreleme ve sterilizasyon seviyeleri vardır; bu da stabil su koşulları sağlar ve zebra balıklarının araştırma ve öğretim için uzun vadeli kullanımının kurulmasına olanak tanır. Aşağıda açıklanan sistem, laboratuvarımız tarafından 9 yıldır zebra balıklarını barındırmak için kullanılıyor; bu, birçok nesil barındırılan balıkları ve yüzlerce deneyi temsil ediyor.
Zebra balığı, biyolojik araştırmalarda kullanılan yaygın bir model organizmadır. Birçok çevresel kohale toleranslıdırlar ve yüksek sayıda yavruyla kolaycaürerler 1. İnsan sağlığı, iltihaplanma, genetik ve toksikoloji 1,2,3,4,5,6,7 dahil olmak üzere geniş biyolojik araştırmalar için harika bir model oluştururlar. Ayrıca, nispeten düşük bakım gereksinimleriyle maliyet etkin bir seçenek sunarlar. Ancak, zebrafish konut sistemi oluşturmak, özellikle daha az deneyime sahip olanlar için göz korkutucu olabilir - geri dönüşüm oranları, su kalitesi ve zebrabalıkların gelişiminin birden fazla aşamasında barındırma zorlukları gibi birçok faktör göz önünde bulundurulmalıdır.
Ticari zebrafish konut sistemleri genellikle pahalıdır ve bu da daha küçük laboratuvarlar veya sınırlı fon alanlar için önemli bir engel oluşturabilir. Bu sistemler, özellikle otomatik besleyiciler ve otomatik temizleme gibi eklemelerle on binlerce dolara mal olabilir, ancak bu eklemeler bütçe konusunda bilinçli laboratuvarlar ve zebrabalıkları sınıf ortamında kullanmayı umanlar için gereksizdir. Bu tür tesisler için, zebrafish konut sistemi inşa etmek çok daha makul bir yöntemdir. Özel inşaat planlarıyla ilgili başka makaleler de yayımlandı, ancak her birinin kendi dezavantajları var. Kim ve ark. kolayca inşa edilebilen, 80 tanklı bir sistem oluşturmanın biryöntemini göstermiştir 8. Yayınlandığı dönemde inşaat yaklaşık 500 dolardı, ancak günümüzde çok daha pahalı olacaktı. Paige ve arkadaşları, daha önce bahsedilen yönteme bir iyileştirme amacıyla bir plan hazırladılar, ancak inşaat maliyeti 1500$9 idi. Ayrıca, 150 balıklık bir koloninin bakımının her 3 ayda 1000 dolar olarak tahminedildiği tahmin ediliyordu 9.
Bu makalede, daha önce yayımlanan konut tankıtasarımı 10 ile eşleştirildiğinde, ticari olarak mevcut sistemlere göre önemli ölçüde daha ucuz olan bir zebrafish yuvası ve filtrasyon sistemi inşa etme yöntemini oluşturduk. Ayrıca, birkaç yaygın araçla inşa etmek kolaydır. Sistem, 30 ayrı tank (~%70 kapasite) kullandığında da nispeten sessizdir ve yaklaşık 60 dBA ses üretir; bu normal bir konuşma veya televizyon11'e eşdeğerdir. Birkaç basit modifikasyonla veya daha az tankla çalıştırarak, sistemin öğrencilerin dikkatini dağıtmadan doğrudan sınıf ortamında kullanılabileceğine inanıyoruz. Yeniden sirkülasyon sisteminin genel tasarımı şöyledir: Isıtılmış ve koşullandırılmış su, bir sump havzasından ana su besleme hattı aracılığıyla pompalanır ve bu hatt, gövde rafının ortasından yukarı taşınır. Ana besleme hattındaki küryalı vanalar, her seviyedeki tanklara ayarlanabilir akış hızlarında su sağlayan bir baffle'a su sağlar. Ana besleme hattında aşırı basınç birikmesini önlemek için, sistem fazla suyu kartere geri döndürmek için ayarlanabilir bir küryeli valfli bir basınç bırakma hattı kullanır. Tanklara baffle'dan giren su, tanklar içinde tekrar dolaşır ve "taşma" her seviyede gövde rafının ortasından geçen hafif açılı bir çukur tarafından yakalanır. Çukurdan çıkan su dikey bir geri dönüş borusuna akar, burada su karter havuzuna geri döner; burada çok aşamalı bir kutu filtresiyle temizlenir ve UV ışığı ile sterilize edilir.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Burada açıklanan protokol, daha önce hem Kuzey Michigan Üniversitesi hem de Shenandoah Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komiteleri tarafından kullanıma onaylanmıştır.
NOTLAR: Sistemin su geri dönüş kısmı için PVC boruları kesmek için bir testere gerekecek. Bu protokol döner bir alet kullanıyordu, ancak tank dönüş boruları için gereken kesimler dışında diğer testere türleri yeterli olurdu. Su tedarik hatları için şeffaf vinil boru kesmek için bir yardımcı bıçak kullanıldı. Hortum kelepçelerini sıkmak için bir tornavida gereklidir. PVC tank geri dönüşlerini PVC dönüş tutucusuna bağlamak için 3/16" (0,47 cm) uçlu bir matkap gereklidir (biraz daha büyük/küçük uçlar da işe yarar). Yaralanmayı önlemek için, elektrikli aletler kullanılırken dikkatli olunmalıdır. Aşağıdaki protokol, daha önce yayımlanmış tank tasarımı10 ile eşleşecek bir konut rafının üretimini tanımlar. Alternatif bir tank kullanılacaksa, tank su temini ve su iade talimatlarında tank spesifikasyonlarına uygun değişiklikler yapılması gerekecek.
1. Gövde rafının montajı (Şekil 1A)
2. Tank geri dönüş sistemi için destek braketi (Şekil 1A)
3. Su geri dönüş sisteminin montajı (Şekil 1B-D)
NOT: Su dönüş boruları bireysel tanklardan su alır ve suyu karteriye taşıyan dikey dönüş borusuna taşır; burada su filtrelenir ve nihayetinde sisteme geri döner.
4. Sump havzasının montajı
NOT: Sump havzası, su rezervi olarak işlev görerek iletkenlik, pH, nitrat/nitrit seviyeleri ve sıcaklık dalgalanmalarını sınırlar (Şekil 1A). Sump havzasında ayrıca filtrenin birden fazla aşaması da gerçekleşir.
5. Ana su tedarik hattının montajı (Şekil 1A,F)
NOT: Ana besleme hattı, yapıştırıcı eksikliği nedeniyle hızla kurulabilir ve temizlik için parçalanabilir. Sızıntıyı önlemek için, tüm vinil borulara hortum kelepçeleri takılabilir. Bunlar, sistemi ilk kez başlattıktan ve sızıntı açısından değerlendirildikten sonra eklenebilir.
6. Basınç bırakma hattının montajı (Şekil 1A, Sol panel)
7. Tank su besleme hatlarının montajı (Şekil 1E)
NOT: Tank su tedarik hatları, suyu ana besleme hattından bireysel tanklara iletir.
8. Sistemi çalışmaya hazırlamak
NOT: Sistemde barındırılacak balıkların sağlığı ve hayatta kalmasını sağlamak için sonraki adımlar atılmalıdır. Bu süreç, balıkların sisteme eklenmesinden en az bir hafta önce gerçekleşmelidir.
9. Rutin bakım
10. Yaygın sorun giderme
11. Ek Hususlar
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Burada sunulan protokol, üç seviyeli bir zebrafish konut sistemi oluşturacaktır (Şekil 1). Daha önce yayımlanmış modüler zebrafish tanktasarımı 10 ile eşleştirildiğinde, sistem kolayca 30-36 bireysel tankı barındırabilir ve her büyük tank, 10 yetişkin balık/litre 1 altında yoğunlukta ~40 balık tutabilir. Toplamda, konut sistemi küçük bir genel alana (~5' x 7') (~1,52 m x 2,13 m) sahip 1.200'den fazla yetişkin zebrafish barındırabilir. Filtrenin...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Burada tanımlanan dolanım konut sistemi toplamda 1500 doların altında inşa edilebilir. Yıllık maliyet, büyük bir bileşen değişimine ihtiyaç duyulmazsa sadece 75 dolar olarak tahmin ediliyor ve tüm bileşenler yerel ve çevrimiçi perakendecilerden temin ediliyor. Bu projenin inşasını tamamlamak için özel bir araç veya beceriye ihtiyaç yoktur; bu da çoğu kişinin montajına erişilebilir olmasını sağlar; ancak burada tanımlanan protokolde kullanılan tam metal standı kullanmıyorsanız, malzemeler...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.
Yazarlar, son 9 yılda konut sisteminin sürdürülmesine ve değiştirilmesine yardımcı olan birçok öğrenciye teşekkür etmek ister.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 0.17" iç çap şeffaf vinil boru 20 ft | Lowes | 814315 | |
| 1-1/2" PVC boru kapağı x3 | Lowes | 23899 | |
| 2" PVC boru kapağı x1 | Lowes | 23900 | |
| 3/4" iç çap şeffaf vinil boru 5 ft | Lowes | 879267 | |
| 3/4" ila 1/2" dişli dirsek ve 1/2" adaptör | Lowes | 23931 | |
| 3/4" x 3/4" x 1/2" Tx4 | Lowes | 3311539 | |
| 3/8" hortum barb naylon T kuplör x3 | Lowes | 877110 | |
| 3/8" iç çap şeffaf vinil boru 5 ft | Lowes | 879263 | |
| 40 galon sünek havuzu | Tractor Supply | 2229846 | |
| 5/8" iç çap şeffaf vinil boru 10 ft | Lowes | 814320 | |
| AAwipes 8'i 1 Arada Akvaryum Test Kiti | Amazon | B0D2RG3LXR | |
| Attmu 50 adet yeniden kullanılabilir bağlantı kelepçeleri | Attmu | 8350503624091 | |
| Bacto-sure yüksek yoğunluklu köpük filtre (2'li paket) | Pets Warehouse | 8729780257055 | |
| Cascade CCF3UL Kutu Filtresi, 100 Galon, 265sph | Aquatic Warehouse | 30172015946 | Amazon'dan satın alındı |
| Charlotte boru 10 ft PVC boru 1-1/2" çap x2 | Lowes | 23830 | |
| Charlotte boru 2-in x 2-in PVC DWV sıhhi T | Lowes | 23395 | |
| Charlotte boru 5 ft PVC boru 1-1/4" çap | Lowes | 23982 | |
| Charlotte boru 5 ft PVC boru 2" çap | Lowes | 23832 | |
| Charlotte boru 5 ft PVC boru 3/4" çap | Lowes | 23990 | |
| Honeforest TDS ölçer | Walmart | B073713G5F | |
| Endüstriyel güçlü raf 48 x 24 x 72 | Lowes | 23395 | |
| Ispinner 28 adet sonsuz dişli hortum kelepçeleri | Home Depot | 313206783 | |
| JoyTube plastik hortum barb azaltıcı boru bağlantıları 5/8" ila 3/8" 3'lü paket | Amazon | B08DNJY57G | |
| LASCO 2-in x 2-in x 2-in çaplı PVC dirsek bağlantısı | Lowes | 23910 | |
| Gözlem havuzu dalgıç pompası (2100 GPH) | Amazon | B004DFMZME | |
| Qmseller paslanmaz çelik akvaryum valfi x6 | Amazon | B07PDSVH3N | |
| Dalgıç akvaryum ısıtıcısı | Amazon | B0DLG8VSL8 | |
| Akvaryumlar için Tetra whisper kullanımı kolay hava pompası | Amazon | B0009YF4FI | |
| UV ışık sterilizatörü Coralife Turbo Twist UV sterilizatör, 6x | Coralife | 96316156005 | Amazon'dan satın alındı |
| Uxcell 5/8" çift erkek barb valf akvaryum su akışı kontrolü için dikme sulama dişli değeri - 3 adet x2 | Harfington | 1003460 | Amazon'dan satın alındı |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission