Araştırma, Dünya Tıp Birliği'nin Helsinki Bildirgesi'nde (Etik Kod) insan deneyleri için belirlenen etik yönergelere uydu. Etik onay (Onay No. Nan Bu Zhan Qu-LL-2020-047) Çin Halk Kurtuluş Ordusu'nun güney cephesi komutanlığının genel hastanesi etik komitesinden alındı ve katılımcı tüm hastalar ile ailelerinden bilgilendirilmiş onay alındı.
Araştırma nesnesi
Bu prospektif çalışma, dört yıl sürdü ve Çin Halk Kurtuluş Ordusu'nun denetimi altında güney cephesinin genel hastanesinin yatarak bölüm ve fizik muayene bölümünde gerçekleştirildi. 45 ila 70 yaş arası menopoz sonrası kadınlardan oluşan bir grupta, titiz kesitsel tasarım kullandı. Dışlama kriterleri arasında kemik metabolizmasını etkileyebilecek potansiyel durumlar yer alıyordu; bunlar arasında: a) ankilozan spondilit, sistemik lupus eritematozus ve romatoid artrit gibi bağışıklık sistemi bozuklukları; b) kemik tüberkülozu; c) adrenal fonksiyonu etkileyen bozukluklar, şiddetli karaciğer veya böbrek yetmezliği; d) paratiroid işlev bozukluğu, tiroid bozuklukları ve diyabet dahil endokrin bozukluklar; e) sigara ve alkol tüketiminin tarihsel alışkanlıkları; ve f) kemik metabolizması üzerinde potansiyel etkisi olan ilaçların (glukokortikoidler, kalsiyum preparatları, D vitamini takviyeleri, bisfosfonatlar, diuretikler, antikonvulsantlar ve florür ajanları gibi) son 12 ay içinde kullanılması.
Dünya Sağlık Örgütü tarafından belirlenen tanı kriterlerine uygun olarak, çalışmaya toplam 345 denek katıldı ve kemik sağlığı durumuna göre üç ayrı kohorta ayrıldı: kontrol grubu (normal BMD, t-skor ≥-1.0 SD, n = 99 ile karakterizedir), osteopeni grubu (-2.5 SD < t-skor < -1.0 SD, n = 153) ve osteoporoz grubu (t-skoru ≤-2.5 SD veya eşzamanlı kırılganlık kırığı), n = 93).
Klinik örnekler
Eylül 2020'den Haziran 2025'e kadar Çin Halk Kurtuluş Ordusu Güney Tiyatro Komutanlığı Genel Hastanesi'nde klinik teşhiste osteoporoz tanısı konan hastalar, aşağıdaki standartları karşılaması gerekir: DSÖ tanı kriterlerine uygun olarak osteopeni ve osteoporozlu hastalar; Doğal olarak menopozda, ≥1 yıl boyunca menopozda ve menopoz sonrası hastalıkları olan hastalar; Yaşları 45 ≤ 70 <; Soruşturmaya gönüllü katılım. Yukarıdaki tüm koşulları karşılayanlar deneysel vakalara dahil edilebilir. Normal kemik kütlesi grubu: Doğal olarak menopozda, ≥1 yıl boyunca menopozda olanlar ve normal fiziksel muayene göstergelerine sahip olanlar (kemik yoğunluğu ve hematolojik testler dahil).
Yukarıdaki kriterleri karşılayan klinik hastalar için, aşağıdaki diğer hastalıklara sahip hastalar dışlanmalıdır. Dışlama kriterleri şunlardır: Paratiroid işlev bozukluğu, tiroid hastalıkları, diyabet, adrenal hastalıklar ve şiddetli karaciğer ve böbrek fonksiyon bozukluğu, kötü huylu tümör öyküsü, ankilozan spondilit gibi bağışıklık sistemi hastalıkları, sistemik lupus eritematozus ve romatoid artrit, erken yumurtalık yetmezliği sendromu ve ooforektomi, omurga tüberkülozu, eklem tüberkülozu, suppüretif artrit, osteoliz vb. Son 12 ay içinde kemik metabolizmasını etkileyen glukokortikoidler, kalsiyum ilaçlar, D vitamini, bifosfonat preparatları, diüretikler, antikonvulsanlar, florür gibi ilaçlar kullanan hastalar da hariç tutulabilir. Yukarıdaki koşullardan herhangi birinin varlığı dışlanmaya yol açabilir.
Veri toplama
Katılımcı demografik özellikleri, yaş, menopozdan sonraki yıllar, boy ve kilo dahil olmak üzere belgelendi. Vücut kütle indeksi (BMI) şu formülle hesaplandı
BMI = Kilo (kg) / Boy (m 2).
Serum örnek koleksiyonu
Gece boyunca oruç tutmanın ardından tüm katılımcılardan kan örnekleri alındı. Daha sonra, serum yaklaşık 850 × g sıcaklığında 5 dakika boyunca santrifüjle hemen ayrıldı, alkotlandı ve sonraki analiz için -80 °C'de saklandı.
Örneklem büyüklüğü hesaplaması
Önceden güç analizi G*Power kullanılarak yapıldı. Normal kemik kitlesi, osteopeni ve osteoporoz gruplarında ortalama serum IGF-1 seviyeleri 89,46 ± 18,89, 72,52 ± 16,32 ve 60,23 ± 15,63 ng/mL olan ön verilere dayanarak, hesaplanan etki boyutu (Cohen'in f'si) 0,86 idi. Tek yönlü ANOVA için α = 0.05 ve güç = 0.80 olduğundan, her grup başına en az 9 katılımcı (toplamda 27) gerekiyordu. Kesitsel tasarımımızın sağlamlığını sağlamak için - çok değişkenli ayarlama, alt grup analizleri ve potansiyel veri sorunları için - daha büyük bir örneği hedefledik. Son kohortta, 345 menopoz sonrası kadındı (99'u normal kemik kütlesine, 153'ü osteopeni, 93'ü osteoporozlu), bu da hesaplanan gereksinimi çok aştı.
Klinik veri değerlendirmesi
Kemik mineral yoğunluğu ölçümü
Kemik mineral yoğunluğu (BMD), bel omurgasında (L 1-4), sol femur boynu ve femur boynun üst ucunda yapılan DEXA taraması kullanılarak değerlendirildi. Femoral boynu ve üst uç taramaları bükülmüş dizlerle yapıldı, lomber omurga (L 1-4) taramalarında ise sırtüstü pozisyon korundu. Çin Halk Kurtuluş Ordusu'nun Güney Cephesi Genel Hastanesi genel hastanesinin nükleer tıp bölümünden eğitimli profesyoneller tüm testleri gerçekleştirdi. Her ölçümden önce, katılımcı taramalarına devam etmeden önce titiz standartların karşılandığından emin olmak üzere kalite kontrol protez taraması yapıldı. Varyasyon katsayısı %0,40 olarak kaydedildi. BMD değerleri g/cm² cinsinden ifade edildi.
Serum göstergesi ölçümü
Serum göstergesi ölçümleri, Çin Halk Kurtuluş Ordusu'nun Güney Tiyatro Komutanlığı'nın genel hastanesinin laboratuvar bölümünde gerçekleştirildi. Değerlendirilen göstergeler paneli öncelikle GH, IGF-1, 25-hidroksivitamin D [25(OH)D], β-kolajen bozunma ürünleri (β-CTX), toplam kolajen tip I amino-terminal propeptid (PI.NP), paratiroid hormonu (PTH), N-terminal osteokalsin (BGP), kalsiyum (Ca) ve estradiol (E2) içeriyordu. İşlemler kit talimatlarına sıkı bir şekilde uyulmakta ve süreç laboratuvar departmanından (GE) otomatik ekipman kullanılarak gerçekleştirilir. Analiz sonuçlarının zamanında kaydedilmesi sağlandı.
İlgili göstergeler için kullanılan deneysel metodolojiler şöyleydi: GH niceliklendirmesi luminol elektrokemilyünsans immünoanaliziyle gerçekleştirildi; IGF-1 seviyeleri, enzimle bağlantılı immünosorbent testi ve kemilyüminsans teknikleriyle belirlendi. E2 seviyeleri ticari bir immünoanaliz kiti kullanılarak ölçüldü. Serum kalsiyum ölçümleri, otomatik bir biyokimya analizöründe kolorimetrik bir yöntemle gerçekleştirildi. 25(OH)D, β-CTX, PI.NP, PTH ve BGP analizi, elektrokemilyümlüminesans immünotesti (ECLIA) ve ticari test kitleri kullanılarak ölçüldü.
Aletler ve reaktifler
Bu çalışmada kullanılan ana ticari aletler, test kitleri ve reaktifler, Malzeme Tablosu'nda kapsamlı şekilde listelenmiştir.
İstatistiksel analiz
Veri analizi SPSS 20.0 istatistiksel yazılım paketi ve GraphPad Prism7 kullanılarak gerçekleştirildi. Sonuçlar ortalama SE ± olarak sunuldu. Tek değişkenli varyans analizi (ANOVA), Pearson korelasyon analizi, kısmi korelasyon analizi ve ROC analizi uygun şekilde uygulandı. P < 0.05 anlamlılık seviyesi benimsendi.