Yapay Diyet Deney kullanarak Yaprak bitleri Nikotin Tolerans Testi

Özet

Bu video test gösterilmiştir nikotin değil saha ve bir tütün bitkileri infests aphids bir iki tür tolerans testleri.

Özet

Bitkiler çok farklı Seconday metabolitlerin üretimi böcek besleme yanıt upregüle olabilir. Bu metabolitlerin, nikotin, böcek öldürücü özellikleri de var biliyorum. Bir herbivory tütün bitkilerin yanıt, ya da böcekler tarafından üzerine kemiren bu nörotoksik alkaloid üretim artışı. Burada, yeşil şeftali yaprak biti, Myzus persicae, tütün adapte gerginlik içinde istila tütün değil bu böcek bir yük daha yüksek nikotin seviyeleri tolere edip edemeyeceğini, bu soruya cevap için bir deney kurmak için nasıl göstereceğiz alanında.

Protokol

Bu deneyde, 4 yetişkin aphids, küçük bir plastik kap içine alınır. Onlar fincan üst gerilir parafilm 2 katmanları arasında sıvı diyet pipetlenir besleme. Beslenme 3 gün sonra, farklı konsantrasyonlarda nikotin içeren diyetler toksisitesi Her fincan erişkin ve larva aphids sayarak diyetler kontrol etmek için karşılaştırılır.

1. Sakaroz ve 20 amino asit içeren solüsyonlar olun. Yaprak bitleri, normal seviyelere az üreyen en az 1 hafta boyunca, bu diyet geçinmeye yapabilirsiniz. Yapay beslenme için ekli dosyayı bakınız.
2. Bu diyet 1 ml, nikotin içeren 6 farklı Eppendorf tüpleri içine kısım. 0-500μM değişen çeşitli konsantrasyonlarda kullanılan nikotin bakımından etiketleyin.
3. Kırmızı ya da yeşil ya 4 aphids seçin ve bu deneysel bardak koymak.
4. Aphids seçerken, tutarlı bir yaş olması önemlidir. Tipik olarak, benzer bir boyut ve renk (kırmızı aphids onlar büyüdüklerinde bunun da koyu olsun) Aphids için bakın.
5. Fincan parafilm bir parça ile kaplayın. Parafilm 2 adet arasındaki diyet içine alın. Kısmen fincan kenarlarında ikinci parafilm germek. Kısım katmanları arasında sıvı diyet, üst tabaka aşağı mühür.
6. Deneme için veri toplamak mümkündür ve bu bir süre sonra 3 gün, böcek oda bu bardak için uzun bir gün fotoperiyodun ışıkları altında tutun.

Bitki Biyoloji Yıllık Yorumları ziyaret ediniz böcek herbivory bu protokol ve bitki bağışıklık hakkında daha fazla bilgi için.