Vestibüler Schwannoma Fare Modelinde Tümör Kaynaklı Ataksiyanın Karakterizasyonu

Özet

Tümör kaynaklı ataksiyi incelemek ve vestibüler schwannoma fare modelinde nörolojik fonksiyonu koruyan tedavileri değerlendirmek için davranışsal testlerden oluşan bir panel geliştirdik.

Özet

NF2 ile ilişkili schwannomatoz (NF2-SWN), NF2 tümör baskılayıcı genindeki germline mutasyonlar nedeniyle oluşan otozomal dominant tümör yatkınlık sendromudur. Hastalık, giderek büyüyen ve işitme kaybı, dengesizlik ve hastaların yaşam kalitesini derinden etkileyen ataksi semptomlarına yol açan iki taraflı vestibüler şvannomların (VS) gelişimiyle karakterize edilir. Şu anda FDA onaylı farmakolojik tedavi mevcut değildir. Nörolojik eksiklikler arasında, ataksiya özellikle engelleyici ama az incelenen bir tezahür olarak kalır; bunun büyük nedeni olarak değerlendirmesi için sağlam preklinik modellerin eksikliği vardır. Bu çalışmada, VS ilişkili işitme kaybı ve ataksi ortotopik fare modelinde tümör kaynaklı ataksiyi sistematik olarak değerlendirmek için bir dizi davranışsal testler geliştirdik. Bu testler, tümör yükünden kaynaklanan denge ve motor koordinasyon eksikliklerinin nicel ölçülmesini sağlar. Bu deneysel platform, tümör kaynaklı serebellar disfonksiyonun mekanik çalışmalarını mümkün kılar ve terapötik stratejilerin klinik öncesi değerlendirmesi için değerli bir araç sağlar. Davranışsal değerlendirmeleri tümör biyolojisi ve işitme testleriyle entegre ederek, bu yaklaşım hem tümör baskılayıcı hem de nöroprotektif tedavi etkilerinin karakterizasyonunu kolaylaştırır. Sonuç olarak, bu testler ataksi ile karakterize edilen diğer nörolojik bozukluklara da uygulanabilecek çok yönlü bir çerçeve sunar ve NF2-SWN'nin ötesine kadar fayda sağlar.

Giriş

NF2 ile ilişkili schwannomatoz (NF2-SWN), sitoskelet proteini Merlin^1'i kodlayan NF2 tümör baskılayıcı genindeki mutasyonlar nedeniyle oluşan nadir, baskın olarak kalıtsal bir tümör yatkınlık sendromudur. Merlin fonksiyonunun kaybı, hücre çoğalması, yapışma ve hayatta kalma süreçlerini düzenleyen sinyal yollarını bozar ve etkilenen bireyleri sinir sisteminin birden fazla iyi huylu tümörünün gelişimine yatkın hale getirir. NF2-SWN'nin ayırt edici özelliği, vestibulocochlear sinirler boyunca ortaya çıkan iki taraflı vestibüler schwannomaların (VS) oluşumudur - malign olmayan Sc....

Protokol

Hayvan deneyleri, Massachusetts General Brigham (MGB) Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanan protokole uygun olarak gerçekleştirildi.

1. Hayvan modeli

1. Nf2^-/- hücrelerini (Gaussia luciferase raporlayıcı geni, Gluc) eksprese eden Nf2-/- Schwann hücrelerini immünokompetent C57/FVB farelerine aşılayın. Stereotaktik enjeksiyon cihazı kullanılarak (Şekil 1A), her fareye 2.500 tümör hücresinden 1 μL enjekte ederek sağ^{yarımküre 4,6'nın} CPA bölgesine e....

Sonuçlar

CPA tümör büyümesi, VS fare modelinde ataksiye neden olur

Tümör kaynaklı ataksiyi değerlendirmek için iki deneysel kohort oluşturduk. İlk olarak, hayvan cerrahisi ve tümör hücresi implantasyonunun ataxi üzerindeki etkilerini değerlendirmek için farelere sahte ameliyat ve CPA bölgesine salin enjeksiyonu yapıldı. Sahte grup farelerindeki ataxi semptomları, ameliyat edilmeyen kontrol farelerindeki semptomlarla karşılaştırıldı. İkinci kohortta, Nf2^-/- tümörleri.......

Tartışma

Burada açıklanan davranışsal testler, VS ve ilgili vestibüler bozuklukların fare modellerinde ataxi ve motor koordinasyon eksikliklerini değerlendirmek için sağlam ve nicel bir çerçeve sağlar. Huntington hastalığı ve spinoserebellar ataksi¹⁰ gibi nörodejeneratif hastalık modelleri için yerleşik protokollerden uyarlanan bu testler, NF2-SWN'de tümör kaynaklı vestibüler disfonksiyonu karakterize etmek için oldukça uygundur. B.......

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Fetal sığır serumu	ThermoFisher	A5670701
GloMax 96 Mikroplaka Luminometre	Promega	GM3000
McKesson mavi prosedürü alt alt paneli	McKesson	75402
Schwann hücre büyüme takviyesi	ScienCell	1752