Bu çalışma Ordu Üniversitesi Klinik Araştırma Etik Komitesi tarafından onaylandı (Onay No: 09/11/2017–138). Çalışma, Helsinki Bildirgesi dahil olmak üzere ilgili kurumsal ve ulusal etik yönergeler doğrultusunda gerçekleştirildi. Çalışmaya dahil edilen tüm katılımcılardan yazılı bilgilendirilmiş onay alındı. Alınan onay, ev ziyaretleri yapmayı ve konutlardan toz örnekleri toplamayı açıkça kapsamaktadır.
1. Çalışma tasarımı
Bu, Türkiye'nin Ordu ilinde yapılan ev tozu akarlarının yaygınlığını kesitsel ve betimleyici bir incelemedir. Ev tozu örnekleri, akar birikiminin yaygın olarak beklendiği belirli iç yüzeylerden toplandı. Yatak odaları ve oturma odalarında bulunan yatak malzemeleri, yatak malzemeleri (yastık ve yorganlar), halılar ve döşemeli mobilyalardan örnekler alındı. Toz, taşınabilir bir elektrikli süpürge ile toplandı ve aynı evdeki farklı noktalardan alınan örnekler toplanarak bileşik bir ev tozu örneği oluşturuldu.
2. Çalışma popülasyonu ve klinik kohort tanımı
Çalışma popülasyonu, astım ve/veya alerjik şikayetler nedeniyle Ordu Üniversitesi Tıp Fakültesi Eğitim ve Araştırma Hastanesi'ndeki Kulak, Burun ve Boğaz ve Dahiliye Hastalıkları Ayakta Tedavi Kliniklerini ziyaret eden bireylerden oluşmaktadır. Katılımcıların dahil etme kriterleri 18 yaş ve üzeri olmak, ev ortamlarından toz örnekleri toplamaya rıza göstermek ve anketi yanıtlamayı kabul etmekti. Ev ziyaretine rıza vermeyen, yazılı onay vermeyen veya yeterli ev tozu örneği alınamayan kişiler çalışmadan çıkarıldı. Klinik tanılar, hastaların kendi bildirimleri ve ayaktan klinik ziyaretlerinin nedenlerine dayanarak değerlendirildi; Klinik doğrulama veya tanı testi yapılmadı. Her hasta bir hane ile eşleştirildi ve analizler hane düzeyinde yapıldı. Ordu Eyaleti, Türkiye'nin Doğu Karadeniz bölgesinde yer almakta olup, yıl boyunca yüksek nemli nemli nemli, nemli bir iklime sahiptir; bu koşullar ev tozu akarlarının hayatta kalması ve çoğalmasını kolaylaştırabilir.
3. Örnekleme birimi ve örnekleme yöntemi
Bu çalışmanın birincil örnekleme birimi hane halkıydı. Her evdeki farklı kapalı mekanlardan, özellikle yatak odaları ve yaşam alanlarına odaklanarak birden fazla alt toz örneği alındı. Bu alt örnekler ayrı ayrı toplanmış olsa da, laboratuvarda tek bir bileşik ev tozu örneği olarak toplanıp analiz edilerek genel kapalı akar maruziyetini temsil etmiştir. Akar yoğunluğunu tahmin etmek için, her kompozit ev örneğinden yaklaşık 1 g toz laktik asit çökeltme yöntemiyle işlendi. Bu toz örneğinden türetilen hazırlanmış mikroskobik slaytlarda gözlemlenen tüm akarlar sayıldı. Tespit edilen akarların toplam sayısı, ev tozunun gramı başına akar sayısı olarak ifade edildi.
Her hane sadece bir kez numune alındı ve tekrarlanan örnekleme yapılmadı. Evdeki toz örnekleri, her örnekleme alanına atanmış tek kullanımlık toz torbaları ve 1200 W emiş gücüne sahip taşınabilir bir elektrikli süpürge kullanılarak toplandı. Tüm hanelerde tutarlılık ve tekrarlanabilirlik sağlamak için yaklaşık 2 dakika/m 2 standart bir hızda örnekleme yapıldı.
4. Laboratuvar prosedürleri ve akar tanımı
Örnekler laboratuvara getirildikten sonra, kaba parçacıklar çıkarmak için elek yapıldı. Örnekler laktik asit çökeltme yöntemiyle incelendi. Laktik asit çökeltme yöntemi, organik kalıntıları çözerek toz örneklerini aydınlaştırmak için kullanıldı; akarların ayrılması ve görselleştirilmesini kolaylaştırdı ve güvenilir mikroskobik tespit ile morfolojik tanımlamayı mümkün kıldı. Test tüplerinde %90 laktik asit içeren 5 mL ev tozuna bir gram ev tozu eklendi. Tüpler nazikçe karıştırıldı ve 1 saat kuluçka içinde. İnkubasyon sonrası, sıvının yüzeyinden ve altından toplanan örnekler bir kaydırak ile örtü kıvılcımı arasına monte edildi ve ışık mikroskobu altında 100×, 200× ve 400× büyütme15 ile incelendi. Daha sonra toz örneklerinde tür tanımı yapıldı ve akarlar tespit edildi.
Akarların tespit edildiği örnekler "akar pozitif" olarak tanımlandı. Bir evde herhangi bir gelişim evresinde (larva, nimf veya yetişkin) en az bir akarın bulunması, evin akar pozitif olarak kabul edilmesi için yeterli kabul edildi. Pozitif örneklerde tür tanımlaması için, stereomikroskop altında görülen akarlar, süpernatantan filtre kağıdına süzüldükten sonra ince uçlu bir insülin şırıngası iğnesi kullanılarak toplandı ve Hoyer ortamına monte edildi. Hazırlanan örnekler, morfolojik tanımlama için ışık mikroskobu altında incelendi. İstatistiksel analizler, istatistiksel analizyazılımı 16,17,18,19,20 kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Örnekler, gelişim aşamasına ve tanısal özelliklerin bulunabilirliğine bağlı olarak tür, cins veya daha yüksek taksonomik seviyelerde tanımlandı. Dermatophagoides türleri, tür düzeyinde güvenilir şekilde tanımlanamayan larval, protonimf ve deutonymph evrelerini içerir. Oribatida, takım düzeyinde tanımlanan akarları temsil eder. Tanımlanamayan larva ve nimfler, olgunlaşmamış örneklere, tanımlanamayan imago ise yetkin veya zarar görmüş morfolojik özellikler nedeniyle taksonomik olarak sınıflandırılamayan yetişkin örneklere atıfta bulunur. Toplam sayı, pozitif örneklerde tespit edilen tüm akar bireylerinin kümülatif sayısını temsil eder.
5. Anket uygulaması ve değişken tanımları
Katılımcılara demografik özellikler, konut yapısı, çevresel faktörler ve alerjik şikayetler hakkında sorular içeren bir anket uygulandı. Veriler katılımcıların ifadelerine göre değerlendirildi ve klinik olarak doğrulanmadı.
6. İstatistiksel analiz
Kategorik değişkenler arasındaki ilişki ki-kare testi kullanılarak incelendi ve demografik ve hayati özelliklere göre akar yoğunluğundaki değişim Mann-Whitney U veya Kruskal-Wallis testleriyle incelendi. İkili lojistik regresyon, bağımlı değişken (akar pozitifliği) ile bağımsız değişkenler arasındaki ilişkiyi incelemek için kullanıldı. %95 güven aralıklı (CI) olasılık oranları (OR) hesaplandı.