Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Araştırma makalesi

Kronik Egzersiz Kaynaklı Fizyolojik Stresin Fare Modelinde Hirudoterapinin Biyokimyasal ve Histopatolojik Etkileri

124 görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/70494

⸱

22 Mayıs 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Faculty of Medicine, Department of Medical Parasitology, Kırşehir Ahi Evran University, 2Faculty of Medicine, Department of Histology and Embriyology, Kırşehir Ahi Evran University, 3Faculty of Sports Sciences, Department of Coaching Education, Kırşehir Ahi Evran University, 4Faculty of Medicine, Department of Medical Biochemistry, Kırşehir Ahi Evran University, 5Faculty of Medicine, Department of Physiology, Kırşehir Ahi Evran University

Bu makalede

Özet

Bu protokol, stres yanıtlarını incelemek için kronik egzersiz kaynaklı fizyolojik stresin fare modelini oluşturur. Serum biyokimyasal profilleme ve histopatolojik analiz yoluyla hirudoterapi-egzersiz etkileşimlerinin kontrollü değerlendirilmesini sağlar. Egzersiz sonrası iyileşme mekanizmalarını incelemek için tekrarlanabilir bir çerçeve sağlar.

Özet

Kronik egzersiz, kas hasarı, oksidatif dengesizlik ve hormonal değişikliklerle karakterize edilen fizyolojik strese yol açabilir; bu da iyileşme ve performansı potansiyel olarak olumsuz etkileyebilir. Anti-inflamatuar, antioksidan ve dolaşım güçlendirici bileşenler içeren geleneksel bir biyoterapevtik müdahale olan Hirudoterapi, potansiyel bir doğal iyileşme stratejisi olarak ilgi çekmiştir. Bu çalışma, egzersiz kaynaklı fizyolojik stres içeren bir fare modelinde kronik egzersiz sonrası hirudoterapinin biyokimyasal ve histopatolojik etkilerini değerlendirmeyi amaçladı. Otuz iki erkek fare dört gruba ayrıldı: kontrol, hirudoterapi, egzersiz ve hirudoterapi artı egzersiz. Serum biyokimyasal parametreleri ve oksidatif stres belirteçleri analiz edildi, iskelet kası ve karaciğer dokuları histopatolojik olarak incelenerek egzersiz kaynaklı değişiklikler ve hirudoterapinin potansiyel modülatör etkileri değerlendirildi. Kronik egzersize maruz kalan fareler, fizyolojik stresin biyokimyasal ve yapısal göstergeleri göstermiştir. Hirudoterapi, özellikle histopatolojik bulgularda bu değişikliklerin kısmi azalmasıyla ilişkilendirilmişti; oksidatif stres belirteçlerindeki değişiklikler ise istatistiksel olarak anlamlı değildi. Bu bulgular, hirudoterapinin egzersiz sonrası iyileşme süreçlerinde modülatör bir etki yaratabileceğini göstermektedir; Ancak, oksidatif stres yolları üzerindeki etkisini netleştirmek için daha fazla çalışma gereklidir.

Giriş

Geleneksel tıbbi uygulamalar, çeşitli akut ve kronik hastalıkların yönetimi için çok çeşitli klinik bağlamlardakullanılmıştır 1,2. Bunlar arasında, tıbbi sülük terapisi (hirudotherapy) farklı kültürler ve tıbbi sistemlerde uzun süredir kullanılmaktadır. Son yıllarda, bu geleneksel yaklaşım, iltihap hastalıklar, osteoartrit ve damar bozuklukları gibi çeşitli klinik durumlarda potansiyel terapötik etkileri nedeniyle bilimsel ilgiyeniden kazanmıştır 1,2,3. Bu etkiler, esas olarak sülük tükürüğünde bulunan ve antikoagülant, anti-inflamatuar ve antimikrobiyal özellikler sergileyen karmaşık biyoaktif molekülkarışımına atfedilir 3,4,5. Ayrıca, hayvan modellerinde yapılan deneysel çalışmalar, hirudoterapinin antioksidan, anti-inflamatuar ve anti-apoptotik mekanizmalar aracılığıyla doku hasarına karşı koruyucu etkilergösterebileceğini göstermiştir 6.

Terapide en yaygın kullanılan tür olan Hirudo verbana'nın tükürüğü, hirudin, bdellin, eglin ve calin gibi çeşitli biyoaktif bileşenlerin yanı sıra hyaluronidase ve çeşitli düşük moleküler ağırlıklı metabolitler gibi enzimler içerir. Bu bileşenler antikoagülan, anti-inflamatuar, antioksidan, fibrinolitik, analjezik ve antikanser aktivitelerigösterir 2,7. Bu geniş biyolojik aktivite profili, sülük tükürüğünün (LS) modern biyomedikal uygulamalarda tamamlayıcı bir terapötik araç olarak hizmet edebileceğini öne sürmektedir; Ancak, belirli fizyolojik stres koşulları altındaki sistemik etkileri hâlâ tam olarakanlaşılmamıştır 3.

Yoğun veya uzun süreli fiziksel aktivite, kas zarlarında mikrostruktural hasara yol açabilir ve kreatin kinaz (CK), laktat dehidrojenaz (LDH) ve aspartat aminotransferaz (AST) gibi enzimlerin serum seviyelerinde önemli artışlara yol açabilir. Alanin aminotransferaz (ALT) da kas hasarına yanıt olarak artabilir, ancak genellikle AST 5,8,9'dan daha az bir derecede. Ayrıca, yüksek yoğunluklu veya uzun süreli egzersiz, önemli bir stres hormonu olan kortizol artışlarını tetikler; yanıtlar egzersiz yoğunluğu, süresi ve bireysel fizyolojik duruma göre değişir 10,11. Egzersiz sonrası kan şekeri artışları da olabilir; bu da büyük ölçüde kortizol aracılı glukoneogenez nedeniyle metabolik stres yanıtının bir özelliğinitemsil eder 12. Bu bulgular toplamda, kas hasarının biyokimyasal belirteçleri ve metabolik stres göstergelerinin yoğun egzersizden sonra artma eğiliminde olduğunugöstermektedir 5.

Masaj, soğuk suya batırma ve antioksidan açısından zengin besin takviyeleri (örneğin, polifenoller, turş kiraz ekstraktı ve kurkumin) gibi çeşitli stratejiler, egzersiz sonrası iyileşmeyi destekleme potansiyeli açısından incelenmiştir. Sistematik incelemeler, bu müdahalelerin oksidatif stres ve kas hasarı parametrelerini etkileyebileceğini göstermektedir; ancak etkinlikleri bireyler arasında önemli ölçüde farklılık gösterir ve sürekli olarak yeterli biyokimyasal korumasağlamayabilir 13,14,15. Buna göre, egzersiz kaynaklı fizyolojik stres koşullarında ek faydalar sağlayabilecek alternatif veya tamamlayıcı yaklaşımların keşfedilmesine yönelik ilgi artmaktadır. Bu bağlamda, sülük tükürüğünde bulunan biyoaktif bileşiklerin oksidatif stres ve inflamatuar yanıtları modüle ettiğibildirilmiştir 7. Ayrıca, klinik gözlemler hirudoterapinin özellikle kas-iskelet ve damar hastalıklarında ağrı ve iltihapı azaltabileceğinigöstermektedir 1.

LS'de tanımlanan flavonoidler, fenolik moleküller ve diğer biyoaktif bileşenler dahil olmak üzere birkaç bileşik, oksidatif stres yollarının modülasyonu yoluyla inflamatuar yanıtların zayıflamasına katkıda bulunur. Bu antioksidan özellikler, diğer tükürük bileşenleriyle sinerjik olarak hareket ederek hirudoterapinin genel anti-enflamatuarpotansiyelini artırabilir 7,16. Ayrıca, bdellin ve eglin gibi proteaz inhibitörlerinin nötrofil kaynaklı enzimlerin aktivitesini azalttığı ve böylece doku hasarınısınırladığı gösterilmiştir 4. Ayrıca, sülük dokularında tanımlanan çeşitli peptitler ve lipid kökenli moleküllerin, inflamatuar sinyal yolları üzerinde inhibitör etkiler yarattığıbildirilmiştir 17.

Bu bulgulara rağmen, hirudoterapinin egzersiz kaynaklı fizyolojik stresteki potansiyel rolü, özellikle kontrollü deneysel modeller 1,2,4 içinde yeterince araştırılmamıştır. Önceki çalışmalar anti-inflamatuar, antikoagülan ve mikro sirkülatör etkilerini göstermiş olsa da ve egzersizin kas hasarı ve oksidatif stres yanıtları tetiklediğiiyi bilinse de, biyokimyasal, hormonal ve histopatolojik sonuçları tek bir deneysel çerçevede entegre eden çalışmalar sınırlıdır.

Bu nedenle, mevcut çalışma, biyokimyasal, hormonal ve histopatolojik sonuçların entegre edilmesiyle egzersiz kaynaklı fizyolojik stresin kontrollü modelinde hirudoterapinin kapsamlı deneysel değerlendirmesini sağlamak üzere tasarlanmıştır. Bu çok boyutlu yaklaşım, hirudoterapinin potansiyel modülatör etkilerinin anlaşılmasına katkıda bulunmayı ve tamamlayıcı biyoterapi müdahalelerinin değerlendirilmesi için tekrarlanabilir bir çerçeve sağlamayı amaçlamaktadır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm deneysel prosedürler ARRIVEyönergelerine uygun olarak gerçekleştirildi 19. Çalışma protokolü, Kırşehir Ahi Evran Üniversitesi Hayvan Deneyleri Yerel Etik Komitesi tarafından incelenip onaylandı (Onay No: 06/03/2025-05-1, Türkiye). Tüm prosedürler, laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için kurumsal yönergelere uygundu. Reaktifler ve kullanılan ekipmanlar Malzeme Tablosu'nda listelenmiştir.

1. Hayvan seçimi ve barınma

Otuz iki erkek Wistar albino sıçan (RRID: RGD_2308852; 8–12 haftalık, 200–250 g) kullanıldı. Hayvanlar, ahşap tıraş yataklı polikarbonat kafeslerde (40 cm × 25 cm × 20 cm) bireysel olarak tutulurdu. Çevresel koşullar 12 saat ışık/12 saat karanlık döngü ile 22–24 °C olarak korundu. Yiyecek ve su ima edilirdi.

Deneylerden önce 1 haftalık bir alışma dönemi gerçekleştirildi. Bu dönemde hayvanlar günlük olarak gıda alımı, su tüketimi, bakım davranışı ve hareket aktiviteleri açısından izlendi. Çalışmaya sadece normal fizyolojik davranış gösteren hayvanlar dahil edildi.

2. Deneysel gruplar ve rastgeleleştirme

Hayvanlar, bilgisayar tarafından oluşturulan bir randomizasyon dizisi kullanılarak dört deneysel gruba (n = 8 grup) atandı. Tahsis gizlenmesi, grup tahsisinden önce hayvanlara sayısal tanımlayıcılar atanarak sağlandı. Deneysel gruplar, müdahale edilmeden kontrol grubu (C) şeklindeydi; sadece koşu bandı egzersizi yapan egzersiz grubu (E); haftada üç kez yalnızca hirudoterapi alan hirudoterapi grubu (H); ve çalışma protokolüne göre her iki müdahaleyi de gerçekleştiren birleşik hirudoterapi ve egzersiz grubu (HE) ile birlikte çalışmaya devam etti. Tüm müdahaleler 2 haftalık bir süre içinde gerçekleştirildi. Sirkadiyan değişkenliği en aza indirmek için tüm işlemler 09:00 ile 11:00 arasında gerçekleştirildi.

3. Kronik egzersiz protokolü

Egzersiz, ayarlanabilir elektrikli uyarım ızgarası ile donatılmış motorlu kemirgen koşu bandı kullanılarak gerçekleştirildi. Hayvanlar, koşu bandı cihazının ayrı şeritlerine yerleştirildi (Şekil 1). 2 günlük bir adaptasyon aşaması, 15 m/dakika hızda günde 15 dakika sürdü. Uyum döneminin ardından egzersiz yoğunluğu 20 m/da'ya çıkarıldı ve hayvanlar 2 hafta boyunca günde 45 dakika koşu seanslarına maruz kaldı. Sürekli çalışmayı sürdürmek için gerekli olduğunda ızgara üzerinden hafif bir elektriksel uyarı (1.0 mA ) uygulandı .

  1. Tükenme kriterleri
    Yorgunluk, üç ardışık uyarımda (~5 saniye) şok ızgarasından çıkamamak olarak tanımlandı. Bu eşiğe ulaşan hayvanlar hemen çıkarıldı. Bu protokol, önceden belirlenmiş kemirgen koşu bandı egzersiz modellerinden uyarlanmıştır; tanımlanmış adaptasyon, yoğunluk ilerlemesi ve yorgunlukkriterleri 20.
  2. Hirudoterapi uygulaması
    Tıbbi sülükler (Hirudo verbana, ~2 g) kurumsal olarak onaylanmış bir kaynaktan temin edilmiştir. Uygulamadan önce, her hayvanın sırt bölgesi elektrikli makas ile tıraş edildi ve deri, sülük yapışmasını önlemek için antiseptikler içermeyen steril tuzlu su ile nazikçe temizlendi. Hayvanlar, hareketi sınırlamak ve stresi en aza indirmek için şeffaf bir akrilik tutucu tüpe yerleştirildi. Dorsal orta hattına tek bir sülük yerleştirildi ve başarılı tutunma oral emici fiksasyonuyla görsel olarak doğrulandı. 10 dakika beslenmeye izin verildi (Şekil 2). Uygulama süresinin ardından, sülükler yaklaşık 1–2 cm mesafede tutulan pamuk aplikatörü kullanılarak yapışma alanı %70 etanol buharına maruz bırakarak ayrıldı. Ayrıldıktan sonra, yerel kanama steril gazlı bezle yaklaşık 1–2 dakika boyunca hafif basınçla kontrol edildi ve dikiş uygulanmadı. Uygulamalar haftada üç kez, 2 hafta boyunca yapıldı. Bu işlem, daha önce tanımlanmış deneysel ve klinik hirudoterapi protokollerine ve standart uygulamaparametrelerine dayanarak gerçekleştirilmiştir 21.

4. Ötenazi ve kan toplama

Deneyin sonunda (son müdahaleden 24 saat sonra)6, hayvanlar intraperitoneal olarak ketamin (75 mg/kg) ve ksilazin (10 mg/kg) ile anestezi edildi. Pedal yoksunluğu ve kornea reflekslerinin olmaması yeterli derinlikteki anestezi olarak doğrulandı. Intrakardiyak kan alımı, sol ventriküler ponksiyon yoluyla steril 5 mL bir şırınga kullanılarak gerçekleştirildi. Ötenazi, ardından kan dışlanması ve ardından torakotomi ile tamamlandı. Daha sonra, medial gastroknemius kas ve karaciğer dokuları daha fazla analiz için toplandı. Kan örnekleri toplandıktan sonra 1 saat içinde pıhtı aktivatör tüplerine aktarılıp 1.000 × g sıcaklığında 4 °C'de 15 dakika santrifüj edilerek işlendi. Ayrılmış serum daha sonra 200 μL porsiyonlara ayrıldı ve analiz yapılana kadar −80 °C'de saklandı.

5. Biyokimyasal ve ELISA analizleri

ALT, AST, LDH, CK, glikoz, elektrolitler ve kortizol gibi biyokimyasal parametreler, standart laboratuvar prosedürlerine uygun olarak otomatik biyokimyasal analizör kullanılarak analiz edildi. CAT, SOD, MDA ve GPX için yapılan tüm ELISA testleri, üreticinin talimatlarına uygun olarak standart koşullarda gerçekleştirilmiştir. Serum örnekleri, kit protokolü gerektirdiğinde örnek tamponu ile 1:5 oranında seyreltilmiştir. Daha sonra, belirlenen kuyulara 50 μL standart ve 50 μL serum örnekleri eklendi ve 37 °C'de 60 dakika kuluçka edildi. İnkubasyon sonrası, plakalar beş kez yıkanarak bağlanmamış bileşenleri çıkarmak için verilen yıkama tamponu kullanıldı. Tespit antikoru (50 μL) her kuyuya eklenip 37 °C'de 30 dakika kuluçka edildi. Daha sonra, alt tabaka çözeltisi eklendi ve reaksiyon karışımı, renk gelişimi için karanlık koşullarda 10–15 dakika kuluçka altına alındı. Reaksiyon, 50 μL stop çözeltisi eklenerek sonlandırıldı ve optik yoğunluk mikroplaka okuyucu kullanılarak 450 nm olarak ölçüldü. Tüm örnekler, analitik güvenilirlik ve tekrarlanabilirlik sağlamak için ikili olarak analiz edildi.

6. Histopatolojik analiz

Histopatolojik değerlendirme için, doku örnekleri standart histopatolojik prosedürlere göreişlenmiştir 22. Dokular başlangıçta %10 nötr tamponlu formalinde 72 saat sabitlenmiş, ardından her konsantrasyonda 1 saat kuluçka ile %50, 70%, 80%, %96 ve %100 etanolden oluşan derecelendirilmiş etanol serisi ile dehidrasyon uygulanmıştır. Susuz kaldıktan sonra, dokular iki ardışık 30 dakikalık dönem boyunca ksilen ile temizlendi ve ardından parafin bloklarına gömüldü. 5 μm kalınlığında kesitler, döner mikrotom kullanılarak alındı ve histolojik inceleme için Hematoxylin ve Eosin (H&E) ile Masson Trikromu ile boyandı. Son olarak, lekelenmiş slaytlar dijital görüntüleme sistemiyle donatılmış bir ışık mikroskobu kullanılarak incelendi.

7. İstatistiksel analiz

Veri analizi istatistiksel yazılım kullanılarak gerçekleştirildi. Veri dağılımı Kolmogorov–Smirnov testi kullanılarak değerlendirildi. Normal dağıtılmış veriler için tek yönlü ANOVA ve ardından Tukey'nin sonradan yaptığı test uygulandı. Normal dağılım olmayan veriler için Kruskal–Wallis testi ve ardından Mann–Whitney U testi kullanıldı. P < değeri 0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Kas hasarı ve yorgunluk parametreleri

Serum kas hasarı belirteçleri, kreatin kinaz (CK) seviyelerinin gruplar arasında anlamlı şekilde farklı olduğunu gösterdi (p < 0.05). LDH, AST ve ALT değerleri egzersiz (E) grubunda yukarı eğilimler gösterse de, bu değişiklikler istatistiksel olarak anlamlı değildi (p > 0.05). CK konsantrasyonları E grubunda en yüksekken, HE grubu belirgin şekilde daha düşük seviyeler göstermiş, kontrol v...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu çalışma, hirudoterapinin egzersiz kaynaklı fizyolojik stresle ilgili seçilmiş parametrelerde ölçülebilir değişikliklerle ilişkili olduğunu göstermiştir. Egzersiz grubunda gözlemlenen CK, LDH, AST ve ALT seviyelerindeki yükselmeler, sarkolemmal bozulma ve enzim sızıntısını yansıtır; bu da önceki raporlarda bu belirteçlerin kas gerilmesiningöstergeleri olarak tanımlandığı 23,24,25 ile uyumludur.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Teşekkürler

Kırşehir Ahi Evran Üniversitesi Deneysel Araştırma Laboratuvarı personeline hayvan bakımı ve örnek toplama konusundaki destekleri için teşekkür ediyoruz. Ayrıca, doku işleme ve biyokimyasal analizler sırasında Histoloji ve Biyokimya Laboratuvarları tarafından sağlanan değerli teknik desteği takdir ediyoruz. Bu çalışma, Kırşehir Ahi Evran Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Koordinasyon Birimi (BAP) tarafından TIP Projesi kapsamında desteklenmiştir. A2.25.004.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
-80 ve derece; C Derin Dondurucu (Model DF590)Nü veDF590Örnek depolama noktası & eksi; 80 ve derece; C
Akrilik tutucu tüpYokYokHirudoterapi sırasında immobilizasyon için kullanılan şeffaf akrilik sıkıştırıcı (çapı 6 cm, uzunluğu 20 cm)
Otomatik Biyokimyasal Analizör (Alinity)AbbottYokSerum biyokimyasal parametre analizinde kullanılır
Otomatik Doku İşlemciLeica BiosystemsYokDoku dehidrasyonu ve parafin infiltrasyonu
Santrifüj (Model FC5706)OHAUS ŞirketiFC5706Maksimum hız: 6000 rpm/(≈ 4.000 & times g, rotor yarıçapına bağlı olarak)
Dijital Mikroskop Kamerası (Axiocam 208 renkli)Carl ZeissAxiocam 208 renkHistopatoloji için görüntü edinimi
Eosin Y (sarımsı)Merck / Sigma-Aldrich1.15935.0025H& E boyama (eosin bileşeni)
Etanol Mutlak (%99,5)Tekkim KimyaTK.200655.05001Etanol dehidratasyon serisi için kullanılır
Formaldehit Çözeltisi (~37%)Merck / Sigma-Aldrich1.04002.2500Doku fiksasyonu için kullanılır
Harris Hematoksilin ÇözeltisiBESTLABBS-002H& E boyama (hematoksilin bileşeni)
Ketamin hidroklorürİlaç sınıfı (ticari kaynak belirtilmemiştir)Yokİntraperitoneal anestezi için kullanılır (75 mg/kg)
Işık Mikroskobu (Primo Star)Carl ZeissPrimo StarHistopatolojik görüntüleme
Masson' s Trikrom Boyama KitiGBLREF 5022Bağ dokusu boyama için kullanılır
Motorlu Kemirgen Koşu BandıColumbus InstrumentsExer-3/6Kontrollü hız ve elektriksel uyarımla standartlaştırılmış koşu bandı egzersizlerinde kullanılır
Fare Katalaz (CAT) ELISA KitiBT LABE0869Ra96 kuyu plakası; Serum CAT aktivite ölçümü
Fare Glutatyon Peroksidaz (GPX1) ELISA KitiReed BiotechRE2557R96 kuyu plakası; Serum CAT aktivite ölçümü
Fare Malondialdehit (MDA) ELISA KitiBT LABE0156Ra96 kuyu plakası; Serum CAT aktivite ölçümü
Fare Süperoksit Dismutaz (SOD) ELISA KitiBT LABE0168Ra96 kuyu plakası; Serum CAT aktivite ölçümü
Döner Mikrotom (Otomatik Kesim)Leica BiosystemsRM AutocutCutting 5 μ m parafin kesitleri
Kaydırma IsıtıcıLeica BiosystemsHI1210Kurutma histoloji slaytları
Ksilazin hidroklorürİlaç sınıfı (ticari kaynak belirtilmemiştir)Yokİntraperitoneal anestezi için kullanılır (10 mg/kg)
Ksilen (izomer karışımı)Tekkim KimyaTK.090270.05003Parafin gömülmeden önce doku temizlenmesi

Kaynaklar

  1. Hosseini, M., Jadidi, A., Derakhshan Barjoei, M. M., Salehi, M. Applications of leech therapy in medicine: A systematic review. Front Med. 11, 1-7 (2024).
  2. Shakouri, A., Wollina, U. Time to change theory: medical leech from a molecular medicine perspective; leech salivary proteins playing a potential role in medicine. Adv Pharm Bull. 11 (2), 261-270 (2021).
  3. Alaama, M., et al. Development of leech extract as a therapeutic agent: A chronological review. Pharmacol Res - Mod Chin Med. 10, 100355(2024).
  4. Sig, A. K., Guney, M., Uskudar Guclu, A., Ozmen, E. Medicinal leech therapy–an overall perspective. Integr Med Res. 6 (4), 337-343 (2017).
  5. Brancaccio, P., Lippi, G., Maffulli, N. Biochemical markers of muscular damage. Clin Chem Lab Med. 48 (6), 757-767 (2010).
  6. Davoodi, F., et al. Leech therapy (Hirudo medicinalis) attenuates testicular damages induced by testicular ischemia/reperfusion in an animal model. BMC Vet Res. 17 (1), 1-15 (2021).
  7. Bilden, A., et al. Investigating the therapeutic potential of crude leech saliva based on its anticancer, antioxidant, and anti-inflammatory effects. Curr Issues Mol Biol. 47 (5), 328(2025).
  8. Ozkan, I., Ibrahim, C. H. Dehydration, skeletal muscle damage and inflammation before the competitions among the elite wrestlers. J Phys Ther Sci. 28 (1), 162-168 (2016).
  9. Röcker, L., Kiesewetter, H. Effect of physical exercise on laboratory test results. Clinical Laboratory Diagnostics. Thomas, L. , Frankfurt. Available from: https://clinical-laboratory-diagnostics.com/k51.html 51(2020).
  10. Torres, R., Koutakis, P., Forsse, J. The effects of different exercise intensities and modalities on cortisol production in healthy individuals: A review. J Exerc Nutr. 4 (4), 19(2021).
  11. Soslu, R., et al. Effects of high-intensity interval training program on pituitary function in basketball players: A randomized controlled trial. Front Physiol. 14, 1-10 (2023).
  12. Gordon, B. A., Taylor, C. J., Church, J. E., Cousins, S. D. A comparison of the gluco-regulatory responses to high-intensity interval exercise and resistance exercise. Int J Environ Res Public Health. 18 (1), 1-11 (2021).
  13. Zhang, X., Zhong, Y., Rajabi, S. Polyphenols and post-exercise muscle damage: A comprehensive review of the literature. Eur J Med Res. 30 (1), 260(2025).
  14. Martin, J. An evidence-based approach for optimising sports recovery practices following DOMS-inducing exercise: A systematic review and meta-analysis. , (2023).
  15. Wang, H., Wang, L., Pan, Y. Impact of different doses of cold water immersion (duration and temperature variations) on recovery from acute exercise-induced muscle damage: A network meta-analysis. Front Physiol. 16, 1-15 (2025).
  16. Cuevas-Cianca, S. I., Romero-Castillo, C., Gálvez-Romero, J. L., Juárez, Z. N., Hernández, L. R. Antioxidant and anti-inflammatory compounds from edible plants with anti-cancer activity and their potential use as drugs. Molecules. 28 (3), 1488(2023).
  17. Meriaux, C., et al. Multiple changes in peptide and lipid expression associated with regeneration in the nervous system of the medicinal leech. PLoS One. 6 (4), e18359(2011).
  18. Nédélec, M., et al. Recovery in soccer: Part 1. Sports Med. 42 (12), 997-1015 (2012).
  19. Kilkenny, C., Browne, W. J., Cuthill, I. C., Emerson, M., Altman, D. G. Improving bioscience research reporting: The ARRIVE guidelines for reporting animal research. PLoS Biol. 8 (6), 6-10 (2010).
  20. Liu, Y., et al. Treadmill exercise alleviates neuroinflammation, demyelination, and apoptosis induced by hyperactivation of microglia in the hippocampus of senescent mice by regulating the SIRT1/PPARγ pathway. Neurochem Res. 50 (6), 330(2025).
  21. Bilden, A., et al. Effects of hirudotherapy on liver functions, lipid profile, and insulin sensitivity in rats with metabolic syndrome. BMC Complement Med Ther. 26 (1), 34(2026).
  22. Henderson, M. X. Hematoxylin and eosin stain for paraffin-embedded tissue sections. , (2023).
  23. Tiller, N. B., Wills, W. S. Exercise-induced increases in “liver function tests” in a healthy adult male: Is there a knowledge gap in primary care? J Fam Med Prim Care. 6 (2), 169-170 (2017).
  24. Chen, R., Ma, X., Ma, X., Cui, C. The effects of hydrotherapy and cryotherapy on recovery from acute post-exercise induced muscle damage: A network meta-analysis. BMC Musculoskelet Disord. 25 (1), 749(2024).
  25. Xiao, F., Kabachkova, A. V., Jiao, L., Zhao, H., Kapilevich, L. V. Effects of cold water immersion after exercise on fatigue recovery and exercise performance: Meta-analysis. Front Physiol. 14, 1-15 (2023).
  26. Gholami, M. The effect of massage on the exhausted aerobic exercise-induced muscle damage indicators in healthy young men. J Heal Reports Technol. 9 (4), e137253(2023).
  27. Bayram, S. Ş, Kızıltan, G. The role of omega-3 polyunsaturated fatty acids in diabetes mellitus management: A narrative review. Curr Nutr Rep. 13 (3), 527-551 (2024).
  28. Ni, C., et al. Effect of exercise and antioxidant supplementation on cellular lipid peroxidation in elderly individuals: Systematic review and network meta-analysis. Front Physiol. 14, 1113270(2023).
  29. Lamichhane, G., et al. Twelve-week curcumin supplementation improves glucose homeostasis and gut health in prediabetic older adults: A pilot, double-blind, placebo-controlled trial. Nutrients. 17 (13), 1-15 (2025).
  30. Zinkow, A., Grodzicki, W. Molecular mechanisms linking omega-3 fatty acids and the gut–brain axis. Molecules. 30, 71(2025).
  31. Ihsan, M., Abbiss, C. R., Allan, R. Adaptations to post-exercise cold water immersion: Friend, foe, or futile? Front Sports Act Living. 3, 2013-2020 (2021).
  32. Jackson, M. J. Exercise-induced adaptations to homeostasis of reactive oxygen species in skeletal muscle. Free Radic Biol Med. 225, 494-500 (2024).
  33. Powers, S. K., Jackson, M. J. Exercise-induced oxidative stress: Cellular mechanisms and impact on muscle force production. Physiol Rev. 88 (4), 1243-1276 (2008).
  34. Mason, S. A., Trewin, A. J., Parker, L., Wadley, G. D. Antioxidant supplements and endurance exercise: Current evidence and mechanistic insights. Redox Biol. 35, 101471(2020).
  35. Reed, E. L., et al. Cardiovascular and mood responses to an acute bout of cold water immersion. J Therm Biol. 118, 103727(2023).
  36. Ahmed, V., Marinova, D. Study of the effect of massage therapy on serum cortisol concentration in a patient with chronic stress. Eurasia Proc Heal Environ Life Sci. 16, 35-41 (2024).
  37. Wang, L., Meng, Q., Su, C. H. From food supplements to functional foods: Emerging perspectives on post-exercise recovery nutrition. Nutrients. 16 (23), 1-29 (2024).
  38. Hatakeyama, N., et al. Mechanical stimulation of the lower extremities with a textile-based pneumatic massager increases parasympathetic activity and lowers blood glucose levels. J Soc Fiber Sci Technol. 80 (2), 23-32 (2024).
  39. Hackney, A. C., Walz, E. A. Hormonal adaptation and the stress of exercise training: The role of glucocorticoids. Trends Sport Sci. 176 (5), 139-148 (2018).
  40. Hill, E. E., et al. Exercise and circulating cortisol levels: The intensity threshold effect. J Endocrinol Invest. 31 (7), 587-591 (2008).
  41. Kuo, T., Harris, C. A., Wang, J. C. Metabolic functions of glucocorticoid receptor in skeletal muscle. Mol Cell Endocrinol. 380 (1-2), 79-88 (2013).
  42. McKenna, M. J., et al. A century of exercise physiology: Effects of muscle contraction and exercise on skeletal muscle Na+,K+-ATPase, Na+ and K+ ions, and on plasma K+ concentration—historical developments. Eur J Appl Physiol. 124, 681-751 (2024).
  43. Baker, L. B., et al. Mild dehydration does not alter acute changes in sweat electrolyte concentrations during exercise. Physiol Rep. 12, 1-11 (2024).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Biyokimyasal EtkilerOksidatif Stres Belirte leriKas HasarEgzersiz Sonras ToparlanmaAnti inflamatuar Terapi
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.