Araştırma makalesi
* These authors contributed equally
Transkutan auriküler elektrostimülasyon ile Sunshi Dingtong karışımı, primer dismenore modelinde rahim patolojik hasarını ve iltihapla ilişkili değişiklikleri hafifletti; primer dismenore modelinde qi durgunluğu ve kan stazisi ile birlikte, PPAR-γ2 ve COX-2'nin mRNA ekspresyonu değişti.
Qi durgunluğu ve kan stazis deseniyle primer dismenore, rahim iltihabı ve ağrısıyla ilişkilidir ve mevcut farmakolojik tedaviler yan etkilere yol açabilir. Bu çalışma, qi durgunluğu ve kan stazis primer dismenoresinin fare modelinde transkutan auriküler nokta elektrostimülasyonu (TEAP) ve Sunshi Dingtong dekoksiyonunun (SDD) birleşik terapötik etkilerini değerlendirdi. Otuz altı dişi Sprague–Dawley sıçanı, blank, model, SDD, TEAP, TEAP artı SDD ve ibuprofen gruplarına rastgele dağıtıldı. Model, estradiol benzoat hassasiyeti, epinefrin hidroklorür kombine stres uyarısı ve oksitosin verilmesi kullanılarak indüklenmiştir. Sıçanlar, belirlenmiş kulak noktalarında yedi gün boyunca normal salin, SDD, ibuprofen veya TEAP aldı. Rahim morfolojisi hematoksilin ve eozin boyama ile incelendi. Rahimde IL-1β, IL-6, TNF-α, PGF2α ve PGE2 seviyeleri ELISA ile ölçüldü, rahim PPAR-γ2 ve COX-2 mRNA ekspresyonları ise gerçek zamanlı PCR ile nicelendirildi. Model sıçanlarda rahim epitelel dejenerasyonu, nötrofil sızması, IL-1β, IL-6, TNF-α, PGF2α ve COX-2 mRNA ekspresyonlarının arttığı ve PGE2 ile PPAR-γ2 mRNA ekspresyonunun azaldığı görüldü. TEAP veya SDD tek başına bu patolojik ve moleküler değişiklikleri kısmen tersine çevirirken, birleşik TEAP ve SDD daha belirgin iyileşmeler sağladı ve etkileri ibuprofen grubundaki etkilerle karşılaştırılabilirdi. Bu bulgular, TEAP'ın SDD ile birleşmesinin, qi durgunluğu ve kan stazis primer dismenore (QSBSPD) farelerindeki rahim patolojik yaralanması ve iltihapla ilişkili değişiklikleri hafiflettiğini ve bu etkilerin PPAR-γ2 ve COX-2 mRNA ekspresyonunun düzenlenmesiyle ilişkili olduğunu göstermektedir.
Birincil dismenore (PD), alternatif olarak fonksiyonel adet ağrısı olarak da adlandırılır, üreme organlarında tanımlanabilir organik patoloji olmayan dismenoreidenoluşur 1. Şiddetli dismenore yaşayan kadın hastalar genellikle günlük görevlerini yerine getirememektedir; bu durum yaşam kalitelerini önemli ölçüde etkiler ve semptomların hafifleği için farmakolojik müdahale gerektirir2. Mevcut literatür, prostaglandinler (PG), östrojen, progesteron, vazopressin, oksitosin (OT), bağışıklık sistemi, nöroendokrin etkiler ve mikroelement kalsiyumseviyelerindeki değişiklikler gibi çeşitli faktörlerle ilişkili olduğunu göstermektedir 3. Aynı zamanda, tümör nekroz faktörü (TNF) ve interlökin-6 (IL-6) gibi inflamatuar faktörler PG'lerin sentezini veya salgılanmasını tetikleyebilir. Bu süreç, rahim kaslarının aşırı kasılmasına yol açar ve ardından iskemik ağrı ilePD 4'e yol açar. Şu anda, çağdaş tıpta PD yönetimi öncelikle genel tedavi, farmakolojik tedavi ve cerrahi müdahale olarak kategorize edilmiştir. Farmakolojik seçenekler arasında, ibuprofen gibi steroid olmayan anti-enflamatuar ilaçlar (NSAID'ler) sıkça kullanılır. Buna rağmen, NSAID'lerin kullanımı önemli gastrointestinal yan etkilerle ilişkilidir ve uzun süreli veya yoğun kullanım peptik ülserler ve üst gastrointestinal kanama gibi komplikasyonlara yolaçabilir 5. Bu nedenle, PD tedavisi için daha güvenli ve etkili stratejilerin belirlenmesi ve geliştirilmesi zorunlu ve zorunludur.
Artan kanıtlar, birincil dismenorenin geleneksel Çin tıbbında genellikle aşırı bir desenle ilişkili olduğunu göstermektedir; bunlar arasında qi durgunluğu ve kan stazisi klinik olarak sıkçagözlemlenmektedir 6. Bu desende, qi hareketinin ve kan dolaşımının bozulması, rahim durgunluğu, aşırı rahim kasılması ve ağrıya katkıda bulunduğu düşünülür. Bu nedenle qi'yi düzenleyen, kan dolaşımını aktive eden, meridyenleri ısıtan ve ağrıyı hafifleten terapötik stratejiler bu durum için yaygın olarak kullanılır. Auriküler nokta tedavisi, geleneksel Çin tıbbında önemli bir farmakolojik olmayan müdahaledir. Uygulaması kolaydır ve nöroendokrin ve endojen analjezik yolları modüle ederek ağrıyı hafifletmekiçin kullanılmıştır 7. Fuzhou Geleneksel Çin Tıbbı Hastanesi Jinekoloji Bölümü tarafından geliştirilen klinik deneyime dayalı bir formül olan Sunshi Dingtong demlendirmesi (SDD), qi durgunluğu ve kan durgunluğu ile karakterize edilen dismenore için kullanılmıştır. Formül, qi ve kan düzenleme, kan dolaşımını teşvik etme, meridyenleri ısıtma ve adet ağrısını hafifletmek gibi terapötik prensibe dayanır. SDD, Polen tifi (Puhuang) ve dışkı Trogopterori (Wulingzhi) ile birlikte Rhizoma Cyperi (Xiangfu), Myrrh (Moyao), Ramulus cinnamomi (Guizhi), Radix ve Rhizoma Clematidis Chinensis (Weilingxian), Herba Salivae Chinensis (Shijianchuan), Rhizoma Corydalis Yanhusuo (Yanhusuo), Radix Angelicae Sinensis (Danggui), Herba Artemisiae Anomalae (Liujinu) ve Fructus foeniculi ile birlikte bulunur (Xiaohuixiang). Ancak, SDD'nin deneysel etkinliği, özellikle transkutan kulak noktası elektrostimülasyonu ile birleştiğinde, qi durgunluğu ve kan stazis primer dismenoresinin kontrollü hayvan modelinde sistematik olarak değerlendirilmemiştir.
Nükleer hormon reseptör ailesine ait peroksisom proliferatör-aktive reseptörler (PPAR'lar), çok sayıda hücre içi metabolik sürecin düzenlenmesinde önemli olan ligand-aktive reseptörlerdir. PPAR'ların üç farklı alt türü vardır: PPAR-α, PPAR-β/δ ve PPAR-γ8 olarak bilinir. Son bulgular, PPAR-γ2'nin çeşitli dokularda ekspresyona uğradığını ve inflamatuar süreçlerle önemli bir ilişkigösterdiğini göstermektedir 9. Rapora göre, PPAR-γ, IL-6, siklooksijenaz-2 (COX-2), endoten-1, nitrik oksit sintaz, matriks metalloproteinaz-9, jelatinaz ve adezyon moleküllerinin ifadesini nükleer faktör κB, aktive protein-1 ve transkripsiyon sinyal yollarının sinyal geçiricisi ve aktivatörü olarak inaktive ederek baskılar; böylece inflamatuaryanıt 10 inhibe edilir. Ayrıca, Huang ve ark.11 , COX-2 ve PPAR-γ2'nin qi durgunluğu ve kan stazis (QSBS) bozukluklarının patofizyolojisinde kritik hedefler olarak hizmet edebileceğini belirtmektedir.
Bu nedenle, bu çalışma transkutan kulak noktası elektrostimülasyonu (TEAP), SDD'nin terapötik etkilerini ve bunların qi durgunluğu ile kan stazis primer dismenoresinin fare modelinde birleşik uygulanmasını araştırdı. Rahim histopatolojisi, inflamatuar aracı profilleme, prostaglandin ölçümü ve PPAR-γ2/COX-2 ile ilgili mRNA analizini entegre ederek, bu çalışma iç ve dış geleneksel Çin tıp temelli terapinin dismenore ile ilişkili rahim iltihabına karşı daha fazla koruma sağlayıp sağlamayacağını değerlendirmeyi amaçladı. Bu çalışmanın yeniliği, TEAP'in deneysel olarak değerlendirilmesi, klinik deneyime dayalı bir SDD formülü ile kontrollü qi durgunluğu ve kan stazis primer dismenore (QSBSPD) modelinde ve bunun PPAR-γ2/COX-2 inflamatuar düzenleyici eksenle potansiyel ilişkisinin araştırılmasında yatmaktadır.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Etik ifade
Tüm hayvan prosedürleri Fujian Ambry Biyoteknoloji Laboratuvarı Hayvan Etik Komitesi onay numarası: IACUC FJABR2024031202) tarafından incelenip onaylanmıştır. Tüm hayvan deneylerini onaylı kurumsal hayvan bakım ve kullanım protokolüne uygun olarak gerçekleştirmek.
SDD ve ibuprofen hazırlığı
SDD, Shixiao San (9 g), Xiangfu (9 g), Moyao (6 g), Guizhi (9 g), Weilingxian (12 g), Shijianchuan (20 g), Yanhusuo (12 g), Danggui (9 g), Liujinu (15 g) ve Xiaohuixiang (5 g)dan oluşmaktadır. Shixiao San, Puhuang (4,5 g) ve Wulingzhi (4,5 g) karakterlerinden oluşur. Tüm bitkisel bileşenler konsantre granül olarak kullanıldı ve Malzeme Tablosu'nda listelenmiştir. SDD, 106 g konsantre granülleri 200 mL kaynar suda çözerek nihai konsantrasyon olarak 0,53 g/mL ham ilaç eşdeğeri elde ederek hazırlanır. Granüller tamamen çözünene kadar iyice karıştırın, çözeltiyi oda sıcaklığında soğutun ve her uygulamada 2,5 mL/kg gastrik garajla uygulanır. Ibuprofen süspansiyonunu intragastrik garaj için gerekli konsantrasyona göre hazırlayın. Pozitif kontrol tedavisi olarak 0.02 g/kg ibuprofen uygulanır.
Hayvanlar ve gruplaşma
Belirli patojensiz sınıfta, 2–3 aylık ve 200 ± 20 g ağırlığında, hamilelik veya çiftleşme öyküsü olmayan 36 sağlıklı yetişkin Sprague-Dawley faresi kullanın. Fareleri 22 ± 2 °C ve %50–70 göreli nemde 12 saat/12 saat ışık/karanlık döngüsünde tutun, standart yemek ve içme suyuna ücretsiz erişim. 1 haftalık aklimatizasyondan sonra, fareleri rastgele altı gruba (her grup başına n = 6) ayrıldırın: blank, model, SDD, TEAP, SDD + TEAP ve ibuprofen grupları.
QSBSPD model hazırlama ve yönetimi
Bu deneyde, yaygın olarak kabul gören OT kaynaklı dismenore modeli kullanıldı. Kısaca, sıçan estrous döngüleri vajinal smear ile değerlendirildi. Fareler, estros döngü süreleri 4–5 gün olarak belirlenirse çalışmaya dahil edilmeye uygun görüldü.
Boş grup hariç, deneysel gruplardaki farelere 10 gün boyunca günde bir gün boyunca deri altı estradiol benzoat ve epinefrin hidroklorür enjeksiyonu verildi. Günlük 0,9 mg/kg dozda epinefrin hidroklorür enjekte edildikten sonra, fareler çeşitli kombine uyarlamalara maruz kaldılar (A: Akustik uyarım: sıçanlar, günde 3–4 kez, 5 dakika boyunca akustik uyarıcılara (90 dB, 1 kHz) maruz kaldılar ve her seferinde 2 saat aralık bırakıldı. B: Işık uyarımı: Fareler günde 3–4 kez, 5 dakika boyunca yanıp sönen ışık uyarıcılarına maruz kaldılar, her sefer arasında 2 saat aralık verildi. C: Elektriksel uyarım: sıçanlara 30–35 V'da elektriksel uyarıma (iki fazlı kare dalga darbeleri) maruz bırakıldı, her 2 saniyede 0,3 saniye boyunca alternatif akım uygulandı. Bu uyarım her 2 saatte 5 dakika boyunca, günde 2–4 kez uygulandı. D: Kısıtlama: Fareler, yaklaşık 25 cm uzunluğunda ve 5 cm çapında dikenli telden yapılmış bir kısıtlama kafesine yerleştirildi. Kafese girdikten sonra, uçları sıkıldı, böylece fareler hareketsiz kaldıldı ve günde bir kez 2 saat boyunca hareketlerini kısıtladı). Ayrıca, 1. ve 10. günlerde sıçanlara deri altı yoluyla 5.0 mg/kg/gün estradiol benzoat enjekte edildi ve 2–9. günlerde 2.5 mg/kg (kg/gün) verildi.
Estradiol benzoat enjeksiyonunun 5. gününden itibaren, farelere 7 gün boyunca farklı in-gastrik ilaçlar verildi; günde iki kez sabah 10:00 ve 16:00'te ibuprofen grubu hariç; grup ise günde bir kez saat 10:00'da aldı. Blank, model ve TEAP gruplarında farelere 2,5 mL/kg normal salin verildi. SDD ve TEAP+SDD gruplarında, sıçanlar 2,5 mL/kg SDD aldı (200 mL suda çözünmüş 106 g ham ilaç olarak hazırlanmış, 0,53 g/mL); Bu doz, vücut yüzey alanı eşdeğerliğine göre yetişkin klinik günlük dozu olan 106 g'den dönüştürülerek fare eşdeğeri bir doz elde edilmiştir. İbuprofen grubunda, fareler 0,02 g/kg ibuprofen süspansiyonu aldı. TEAP ve TEAP+SDD gruplarında, fareler östradiol benzoat enjeksiyonundan sonraki 5. günden itibaren TEAP stimülasyonu aldı. Elektrotları, daha önce rapor edilen fare akupunktur lokalizasyonu standardına göre tanımlanan iki taraflı Jiaogan, Shenmen, Neishengzhiqi ve Neifenmi kulaknoktalarına bağlayın 12. Bu noktalar, vagus siniri tarafından innerve edilmiş iki taraflı kulak konksal boşluğunda yer alır. Elektrotlar, günde bir kez 20 dakika (frekans: 20 Hz; yoğunluk: 1 mA) sürekli dalga ileten elektronik iğne terapi cihazına bağlandı. TEAP+SDD grup fareleri, ilk SDD garajından sonra her gün TEAP tedavisi gördüler. Son TEAP uyarısı, OT'nin intraperitoneal enjeksiyonundan önce yapıldı.
Son estradiol benzoat enjeksiyonundan 24 saat sonra, yani 11. günde, son intragastrik uygulamadan 1 saat sonra, boş ve TEAP grupları hariç, diğer gruplardaki fareler intraperitoneal enjeksiyonla her sıçan başına 2 U OT aldı. TEAP grubundaki fareler, son TEAP uyarısından sonra her sıçan başına 2 U dozda intraperitoneal OT enjeksiyonu geçirdi. Boş gruptaki fareler OT enjeksiyonu almamıştı. Bu protokol, QSBSPD'nin bir fare modelini başarıyla oluşturdu. Genel hayvan seçimi, model hazırlığı, ilaç uygulama programı, TEAP uyarı parametreleri ve kulak noktası konumları Şekil 1'de özetlenmiştir.
Wright-Giemsa boyama
Estros döngüsü, vajinal lekelerin Wright-Giemsa boyamasıyla belirlenmiştir. Steril pamuklu çubuk %0,9 sodyum klorür çözeltisi ile nemlendirildi ve vajinal kanala nazikçe 0,5–1,0 cm derinlikte yerleştirildi. Sürüntü 1–2 kez döndürülerek vajinal eksfoliasyon hücreleri toplandı ve örnek bir yönde temiz bir cam slayt üzerine eşit şekilde sürüldü. Leke oda sıcaklığında hava kurutulmuştu. Lekeyi kapatmak için Wright-Giemsa boyama çözeltisi eklendi ve 5 dakika kuluçka edildi. Daha sonra boyama çözeltisine eşit hacimde fosfatla tamponlanmış tuzlu su eklendi ve boyama işlemi 5 dakika daha devam etti. Kaydırak, ultra saf suyla üç kez nazikçe durulandı, hava kurutuldu ve ışık mikroskobu altında incelendi. Estros döngüsünün aşaması, çekirdekli epitel hücreleri, kornifikasyon epitel hücreleri ve lökositler dahil olmak üzere baskın hücre tiplerine göre tanımlandı.
Örnek koleksiyonu
Fareler, %3 ila %5 arasında izofloran konsantrasyonu ayarlanmış anestezi indüksiyon kutusuna yerleştirildi. Fareler bilinçlerini kaybettikten sonra ameliyat masasına nakledildiler ve maske takarak anestezi altında tutuldular. Konsantrasyon %1,5'e %2,5'e indirildi. Farenin karın tüyleri makasla kesildi ve ardından topikal alkol uygulamasıyla dezenfekte edildi. Orta karın hattı boyunca 2–3 cm kesi yapıldı. Rahmin bir tarafı ve bağları dışa çıkarıldı ve rahim yüzeyine yapışan yağ dokusu kesildi. Rahim dokusu daha sonra dikkatlice izole edildi. Eğer fare örnekleme sonrası hâlâ yaşıyorsa, CO₂ asfiksiyle ötenazi yapın.
Hematoksilin ve eozin (HE) boyama
Rahim dokuları sabitlendi, parafine gömüldü ve 5 μm kalınlıkta kesitlendi. Bölümler iki kez ksilende, her biri 10 dakika boyunca mumdan arındırılmıştır. Bölümler ardışık olarak mutlak etanolde iki kez 5 dakika boyunca yeniden sulandırıldı, ardından 5 dakika boyunca %95, %90, %80 ve %70 etanol eklendi. Bölümler ultra saf suyla durulandı. Hematoksilin boyama işlemi 5 dakika boyunca yapıldı ve bölümler fazla boya kalmayana kadar suyla durulandı. Bölümler, mavrulaştırmak için 5 dakika boyunca fosfatla tamponlanmış tuzlu suyla daldırıldı. Bölümler 1 dakika boyunca eosin ile boyandı ve suyla durulandı. Daha sonra, bölümler %95 etanol ile 10 dakika ve mutlak etanol ile 10 dakika kurutuldu, 10 dakika ksilen ile temizlendi ve nötr reçine ile monte edildi. Temsil görüntüler ışık mikroskobu veya dijital slayt tarayıcısı kullanılarak alındı.
Enzimle bağlantılı immünosorbent testi (ELISA)
Taze rahim dokuları, kalan kan almak için önceden soğutulmuş fosfatla tamponlu tuzlu suyla durulandı. Her doku örneği tartıldı, küçük parçalara bölündü ve önceden soğutulmuş fosfatla tamponlanmış tuzlu sönümde doku-tampon oranı 1:9 ile homojenleştirildi. Homojenat, 5000 × g sıcaklıkta 4 °C'de 5–10 dakika boyunca santrifüjlendi ve üst yüzey sonraki analiz için toplandı. IL-1β, IL-6, TNF-α, PGF2α ve PGE2 seviyeleri, üreticinin talimatlarına göre sıçan ELISA kitleri kullanılarak ölçüldü. Tüm reaktifler ve mikroplaka şeritleri kullanımdan önce oda sıcaklığında dengelenmiştir. Belirlenen kuyulara standartlar veya örnekler (50 μL) eklendi. Boş kuyular hariç her kuyuya yaban turpu peroksidaz konjuge algılayıcı antikor (100 μL) eklendi ve plaka mühürlenip 60 dakika boyunca 37 °C'de kuluçka edildi. Sıvı atıldı ve her kuyu seyreltilmiş yıkama tamponu ile beş kez yıkandı. Daha sonra, her kuyuya 50 μL substrat A ve 50 μL substrat B eklendi, ardından 37 °C'de karanlıkta 15 dakika kuluçka yapıldı. Her kuyuya stop çözeltisi (50 μL) eklendi ve optik yoğunluk 15 dakika içinde 450 nm olarak ölçüldü. Örnek konsantrasyonları standart eğrilerden hesaplandı.
Nicel gerçek zamanlı PCR (qRT-PCR)
Toplam RNA, üreticinin talimatlarına göre rahim dokularından toplam RNA ekstraksiyon reaktifi kullanılarak çıkarıldı. Kısa süreliğine, doku sıvı azotla öğütüldü ve 1 mL RNA ekstraksiyon reaktifi eklendi. Lizat, oda sıcaklığında 5 dakika kuluçka edildi. Ardından kloroform (200 μL) eklendi ve karışım 15 saniye sertçe çalkalandı, oda sıcaklığında 5 dakika kuluçka edildi ve 12.000 × g sıcaklığında 4 °C'de 12 dakika santrifüjlendi. Sulu faz, yeni bir tüpe aktarıldı, eşit hacimde izopropanol ile nazikçe karıştırıldı ve −20 °C'de 15 dakika kuluçka edildi. Örnekler 12.000 × g sıcaklıkta 4 °C'de 10 dakika boyunca santrifüjlendi, süpernatant atıldı ve RNA pelleti %75 etanol ile yıkandı. Pellet hava ile kurutulup RNase içermeyen suda çözünürdü. RNA konsantrasyonu ve saflığı mikrohacimli spektrofotometre kullanılarak belirlendi. Genomik DNA çıkarıldı ve cDNA, ters transkripsiyon reaktif talimatlarına göre sentezlendi. Genomik DNA çıkarımı için, toplam RNA genomik DNA çıkarma reaktifiyle 42 °C'de 5 dakika boyunca kuluçka yapıldı ve ardından buz üzerine konuldu. Ters transkripsiyon 50 °C'de 15 dakika uygulandı, ardından 5 dakika boyunca 75 °C ile reaksiyonu sonlandırdı.
Gerçek zamanlı PCR, SYBR Yeşil bazlı qPCR karışımı kullanılarak gerçekleştirildi. Her 20 μL reaksiyonda 2 μL cDNA, 0,4 μL ön primer, 0,4 μL ters primer, 10 μL 2× SYBR qPCR karışımı ve 7,2 μL nükleaz içermeyen su içeriyordu. QPCR şu döngü programıyla yapıldı: 95 °C 1 dakika; 40 döngü: 20 saniye için 95 °C, 20 saniye için 56 °C ve 38 saniye için 72 °C; ardından erime eğrisi analizi yapılır. GAPDH iç kontrol olarak kullanıldı ve göreli mRNA ekspresyonu 2−ΔΔCt yöntemiyle hesaplandı. Her biyolojik örnek teknik üçlü olarak ölçüldü. Teknik üçlüklerin ortalama Ct değeri, her biyolojik replikasyon için ΔCt ve göreli mRNA ifadesi hesaplamak için kullanıldı. Primer dizileri şöyledir: PPAR-γ2, ileriye 5′-CGGAAGCCCTTGGTGACTT-3′ ve ters 5′-CTCGATGGGCTTCACGTTCA-3′; COX-2, ileriye 5′-AACCAGGTGAACTTCGTCTATTAG-3′ ve geri 5′-GGTCGGTTGATGTCACTGTA-3′; GAPDH, ileriye 5′-GGTTGTCTCCTGCGACTTCA-3′ ve ters 5′-GGTGGTCCAGGGTTCTTACTC-3′.
İstatistiksel analiz
Veriler istatistiksel yazılım kullanılarak analiz edildi. Tüm nicel veriler ortalama ± standart sapma olarak sunuldu. qRT-PCR analizi için, her biyolojik replikasyon için önce teknik üçlü ortalamalar yapıldı ve biyolojik kopyalama değerleri kullanılarak istatistiksel analiz yapıldı. Birden fazla grup arasında karşılaştırmalar, varyansın tek yönlü analizi ve verilerin normallik ve varyans homojenliği varsayımlarını karşıladığında Bonferroni sonrası testleri kullanılarak gerçekleştirildi. İstatistiksel anlamlılık P < 0.05 olarak tanımlandı.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Farelerde estrous döngüsünün taraması
Wright-Giemsa boyama sonuçları, preoestrustaki vajinal smearların ağırlıklı olarak çekirdekli epitel hücreleri ve az miktarda keratinosit bulunduğunu gösterdi. Bu epitel hücrelerinin çekirdekleri hafifçe lekelenmiş ve büyümüş ve çözünme belirtileri gösteriyordu. Östroslarda, smearlar büyük, yaprak döken keratinleşmiş epitel hücrelerinin baskınlığı ile karakterize edilmiştir. Postestrüste, keratinizlenmiş e...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
PD, adet öncesi ve sırasında genital veya pelvik bölgelerde herhangi bir tanımlanabilir organik hasar olmadan ortaya çıkan alt karınağrısıdır. Ankete göre, dünya genelinde kadınların yaklaşık %45–%90'ı dismenore yaşıyor ve %10 ila %25'i şiddetli dismenore13. Bu nedenle, PD için daha güvenli ve etkili müdahalelerin belirlenmesi ve bunların altında yatan mekanizmaların daha ayrıntılı açıklanması zorunludur.
Şu anda...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların beyan edecek çıkar çatışmaları yoktur.
Bu araştırma, Fuzhou Sağlık Bilimi ve Teknoloji İnovasyon Platformu-"Fuzhou Geleneksel Çin Tıbbı Mirası İnovasyon Platformu" (hibe no. 2021-S-wp3) ve Fujian Doğa Bilimleri Vakfı projesi tarafından desteklenmektedir-"PPAR-gamma-2/COX-2 sinyal yoluna dayanarak, qi durgunluğunda ve kan stazında primer dismenorede perkutan elektriksel uyarım mekanizması Sunshi Dingtong Decoction ile birleştirilmiştir" (hibe no. 2022J01121509).
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 0.9% sodium chloride solution | Heilongjiang Qiqin Animal Health Products Co., Ltd. | 240314A03 | Doku dokusu ve numune hazırlama |
| 1× phosphate-buffered saline (PBS) | Biosharp | BL601A | Doku dokusu, ELISA homojenizasyonu ve boyama prosedürleri |
| Acoustic and light stimulation system | Custom-built in animal facility | Custom-built | QSBSPD model yapımı sırasında birleşik stres stimülasyonu |
| Adhesive microscope slides | Jiangsu Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd. | 80312-3161 | Parafin kesitleri ve vajinal smear hazırlama |
| Automated digital slide scanner | Guangzhou Guangying Cell Technology Co., Ltd. | GCell-60 | HE boyamalı kesitlerin dijital görüntüleme |
| Automatic tissue dehydrator | Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd. | KH-TS | Parafin gömülmedenden önce doku kurutma |
| Biological microscope | Nikon | E200MV | Vajinal smear ve boyalı doku kesitlerinin gözlemlenmesi |
| CO2 gas cylinder and euthanasia chamber | Fuzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine Animal Center | Institutional CO2 system | Hayvan ötenazisi |
| Cold plate for embedding station | Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd. | KH-BL | Parafin gömülmes |
| Cryogenic grinder | Shanghai Jingxin Industrial Development Co., Ltd. | TISS-24 | Doku homojenizasyonu |
| Danggui (Radix Angelicae Sinensis) | Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd. | A1070343 | SDD içeriği; konsantre granüller |
| DEPC-treated water | Meilunbio | MA0018 | qRT-PCR reaktifi |
| Electronic acupuncture treatment instrument | Suzhou Medical Appliance Factory Co., Ltd. | SDZ-II | TEAP stimülasyonu ve elektrik stimülasyonu |
| Electronic analytical balance | Sartorius Balance Beijing Co., Ltd. | BS 224S | Numune ve reaktifin tartımı |
| Eosin | Epredia | 7111 | HE boyama |
| Epinephrine hydrochloride | TargetMol | 119091 | QSBSPD model yapımı |
| Estradiol benzoate | Sigma-Aldrich | E8515 | QSBSPD model yapımı |
| Ethanol | Xilong Scientific Co., Ltd. | 240403A1 | Doku işleme ve kurutma |
| Guizhi (Ramulus Cinnamomi) | Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd. | A2060533 | SDD içeriği; konsantre granüller |
| Hematoxylin | Epredia | 7211 | HE boyama |
| Ibuprofen suspension | Shanghai Johnson & Johnson Pharmaceutical Co., Ltd. | H20000359 | Pozitif kontrol ilacı; 20 mg/mL |
| Liujinu (Herba Artemisiae Anomalae) | Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd. | A210A413 | SDD içeriği; konsantre granüller |
| Low-speed mini centrifuge | Hunan Xiangyi Laboratory Instrument Development Co., Ltd. | WTL-4K | Numune hazırlama |
| Micro refrigerated centrifuge | Beckman Coulter | Microfuge 22R | RNA ekstraksiyonu ve doku homojenatı hazırlama |
| Microplate reader | Guangdong Danli Technology Co., Ltd. | K3 | 450 nm'de ELISA absorbans ölçümü |
| Microscope cover slips | Jiangsu Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd. | 80340-1630 | Mikroskopi slayt hazırlama |
| Mold incubator | Shanghai Lichen Bangxi Instrument Technology Co., Ltd. | W0704 | Boyama veya analiz prosedürleri sırasında inkübasyon |
| Moyao (Myrrh) | Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd. | 1107853 | SDD içeriği; konsantre granüller |
| Neutral balsam | Meilunbio | MB9899 | Boyalı doku kesitlerinin montajı |
| NovoScript Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix | Novoprotein | E047-01A | Ters transkripsiyon |
| NovoStart SYBR qPCR SuperMix Plus | Novoprotein | E096-01B | qRT-PCR amplifikasyonu |
| Oxytocin injection | Anhui Fengyuan Pharmaceutical Co., Ltd. | 220906-4 | QSBSPD model indüksiyonu |
| Paraffin wax | Hualing | 20220918 | Parafin gömülmes |
| PCR system | Bio-Rad | PTC-100 | PCR ile ilgili prosedürler |
| Puhuang (Pollen Typhae) | Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd. | A2092143 | SDD içeriği; konsantre granüller; Shixiao San'ın bir bileşeni |
| qRT-PCR primers for PPAR-γ2, COX-2, and GAPDH | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | Custom synthesis | qRT-PCR primerleri |
| Rat IL-1β ELISA kit | Meimian Biotechnology | MM-0047R2 | ELISA kiti |
| Rat IL-6 ELISA kit | Meimian Biotechnology | MM-0190R2 | ELISA kiti |
| Rat PGE2 ELISA kit | Meimian Biotechnology | MM-0068R2 | ELISA kiti |
| Rat PGF2α ELISA kit | Meimian Biotechnology | MM-0230R2 | ELISA kiti |
| Rat restraint cage | Custom-built in animal facility | Custom-built | QSBSPD model yapımı sırasında kısıtlama stresi |
| Rat TNF-α ELISA kit | Meimian Biotechnology | MM-0180R2 | ELISA kiti |
| Real-time PCR system | Applied Biosystems | 7300 | qRT-PCR analizi |
| RNAiso Plus | TaKaRa | 9109 | Toplam RNA ekstraksiyonu |
| Rotary microtome | Thermo Fisher Scientific | HM325 | Parafin kesme |
| Shijianchuan (Herba Salviae Chinensis) | Guangdong Yifang Pharmaceutical Co., Ltd. | A3052113 | SDD içeriği; konsantre granüller |
| Sprague–Dawley rats | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. | SCXK (Jing) 2019-0010 | Hayvan modeli yapımı |
| Tissue embedding cassette | Jiangsu Citotest Labware Manufacturing Co., Ltd. | 23033 | Parafin kesme sarf malzemesi |
| Tissue embedding machine | Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd. | KH-BL | Parafin gömülmes |
Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste
İzin iste