Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Tek taraflı iskemi-reperfüzyon hasarı ve gecikmiş kontralateral nefrektomi yoluyla fare fare modelinin oluşturulması

384 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/70598

⸱

22 Mayıs 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pulmonary and Critical Care Medicine, Guangzhou Chest Hospital, Institute of Tuberculosis, Guangzhou Medical University, 2Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Shandong First Medical University & Shandong Provincial Qianfoshan Hospital, 3Department of Transplantation, Nanfang Hospital, Southern Medical University

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Burada, tek taraflı iskemi-reperfüzyon yaralanması ve ardından gecikmiş kontralateral nefrektomi kullanılarak fare böbrek fibrozisi modeli oluşturulan bir protokol sunulmaktadır. Bu strateji, AKI-CKD'ye geçişin uzunlamasına çalışmalarını ve son noktada kalan böbrek fonksiyonunun hassas değerlendirilmesini sağlar.

Özet

Böbrek iskemisi-reperfüzyon yaralanması (IRI), akut böbrek hasarına (AKI) katkıda bulunur ve kronik böbrek hastalığına (KBH) ilerlemenin önemli bir nedenidir. Tekrarlanabilir bir hayvan modeli, uyumsuz onarım ve fibroz mekanizmalarının değerlendirilmesini kolaylaştırmak için gereklidir. Burada, tek taraflı iskemi-reperfüzyon yaralanması (uIRI) ve ardından kontralateral nefrektomi (CNx) ile belirlenen standart bir fare fare böbrek fibrozisi modeli bildirilmiştir. Bu strateji, hastalığın ilerlemesi sırasında hayvanların uzun vadeli hayatta kalmasını sağlarken, hasat sırasında yaralı böbreğin kalıntı böbrek fonksiyonunun hassas şekilde değerlendirilmesini sağlar. Erkek C57BL/6 fareleri, 37 °C'de 28 dakika boyunca sıcak iskemiye maruz kaldı ve her çalışma son noktasından 24 saat önce CNx yapıldı. Fareler, histolojik ve immünohistokimyasal değerlendirmeler için şu zaman noktalarında feda edildi: IRI'den sonraki 2 gün, 5 gün, 1 hafta, 2 hafta, 3 hafta ve 4 hafta. Ameliyat sonrası 2. ve 5. günlerde, böbrekler özellikle kortikomedüller birleşimde tübüler nekroz gösterdi ve interstisyel fibroz belirtisi olmadı. Ameliyattan bir hafta sonra bu patolojik özellikler inflamatuar hücre infiltrasyonu ve erken tübüler atrofi ile değiştirildi; Interstisial fibroz da ortaya çıktı ve ikinci haftada en şiddetli seviyesine ulaştı. Ameliyattan sonraki üçüncü ve dördüncü haftalarda, böbreklerde kullanımın devre dışı atrofisiyle uyumlu yaygın tübüler atrofi görüldü. Dikkat çekici olarak, interstisyel fibroz ikinci haftaya göre azalmıştı ve bu da hareketsiz, hiposellüler skarlaşma evresine ilerlediğini gösteriyor. Bu model, AKI-CKD geçişinin klinik senaryolarını etkili bir şekilde yeniden üretir ve fibrotik mekanizmaları incelemek ve terapötik müdahaleleri taramak için güvenilir bir platform sağlar.

Giriş

Böbrek iskemisi-reperfüzyon hasarı (IRI), klinik ortamda akut böbrek hasarına (AKI) yol açan kritikfaktörlerden biridir 1. Yaygın etiyolojiler arasında böbrek nakli (soğuk ve sıcak iskemi ve ardından donör böbreğin reperfüzyonu dahil), geçici damar tıkanması gerektiren kardiyovasküler veya böbrek ameliyatları ve şiddetli travma, büyük kanama veya sepsis2 nedeniyle oluşan sistemik hipoperfüzyon durumları bulunur.

IRI'nin patofizyolojisi karmaşık bir bifazik süreci içerir. Başlangıçta, iskemik aşamada, oksijen ve besin tedarikinin kesilmesi, metabolik bozulmaya, ATP tükenmesine ve böbrek tübüler epitel hücrelerinde (TEC) sitoskelet bozulmasına yol açar. Sonrasında, reperfüzyon sırasında kan akışının yeniden sağlanması, iskemik dokunun kurtarılması için gerekli olsa da, daha karmaşık bir "ikincil hakaret" tetiklenir. 4 Bu yaralanma aşaması, reaktif oksijen türlerinin (ROS) patlamasından kaynaklanan oksidatif stres, endotel işlev bozukluğu, inflamatuar hücrelerin (örneğin nötrofiller ve makrofajlar gibi) yoğun infiltrasyonu ve komplement sistemininaktivasyonu gibi bir dizi olay zinciri tarafından yönlendirilir 3. Bu karmaşık kaskadlar TEC'lerin apoptozu ve nekrozunu topluca kötüleştirir ve AKI'nin birincil patolojik sunumunu oluşturur.

Özellikle, IRI sadece akut, geri döndürülebilir hasarlarla sınırlı değildir. Önemli kanıtlar, böbrek IRI sonrası eksik veya uyumsuz onarımın, uzun vadeli kronik patolojiye geçişi tetikleyen temel bir mekanizma olduğunu göstermektedir. Fizyolojik koşullarda, böbrek AKI sonrası bir onarım programı başlatır; bu program, hasarlı hücreleri etkili bir şekilde temizler ve hayatta kalan TEC'lerin çoğalmasını ve farklılaşmasını teşvik ederek hasar görmüş tübülerin yapısını ve işlevini yeniden kazandırır. Ancak, şiddetli veya tekrarlayan bir IRI hakaretinden sonra, bu onarım süreci düzensiz hale gelebilir ve nihayetinde tübüler atrofi, böbrek interstisyel fibrozis'e ve kronik böbrek hastalığının (CKD) gelişimi ve ilerlemesini hızlandırabilir5,6.

Bu nedenle, AKI-CKD'ye geçiş mekanizmalarını aydınlatmak ve terapötik müdahaleler geliştirmek acil ihtiyaçlardır. Kemirgen modelleri, özellikle fare modelleri, in vivo için vazgeçilmez ve vazgeçilmez hale gelmiştir. iyi tanımlanmış genetik geçmişleri ve insan hastalık ilerlemesiyle benzerlikleri nedeniyle IRI sonrası fibrozisi incelemek için araçlar. Ancak, mevcut IRI metodolojilerinde (örneğin, iskemi süresi, sıcaklık kontrolü, tek taraflı ve çift taraflı yaralanma) önemli bir heterojenlik vardır ve bu da kötü tekrarlanabilirliğe ve sınırlı çalışmalar arası karşılaştırılabilirliğeyol açar 7.

Bu zorlukları ele almak için, mevcut çalışma modifiye edilmiş tek taraflı iskemi-reperfüzyon yaralanması (uIRI) modeli için standartlaştırılmış bir protokolü detaylandırmaktadır. Ayrıca, bu protokol çalışma noktasından 24 saat önce yapılan kontralateral nefrektomi (CNx) içerir. Bu strateji, bilateral iskemi ile ilişkili yüksek ölüm oranını aşar ve yaralı böbrekteki kalıcı böbrek fonksiyonu ile fibrotik ilerlemenin hassas değerlendirilmesini sağlar. Bu model, dinamik AKI-CKD geçişini doğru şekilde özetleyerek mekanik keşif ve terapötik tarama için sağlam bir in vivo platform sağlar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan deneyleri, Deneysel Hayvanlarla İlgili İşlerin İdaresi Yönetmeliklerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Deneysel protokol, Guangzhou Jennio Biotech Co., Ltd.'nin Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı (Onay No. JENNIO-IACUC-2025-A053). Tüm prosedürler, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Rehberi ve kurumsal yönergelere sıkı sıkıya uygun olarak, 3R ilkelerine tam olarak uyulmuştur. Çalışmanın zaman çizelgesi, fedakarlık ve örnek toplama noktaları dahil olmak üzere, Şekil 1'de özetlenmiştir.

1. Hayvan ve alet hazırlığı

  1. Çalışma için belirli patojensiz (SPF) tesislerde tutulan erkek C57BL/6 fareleri (8 haftalık, 20–25 g ağırlığında) kullanın.
  2. Fareleri rastgele olarak uIRI grubu ve Sham grubuna ayırın. Belirlenen altı zaman noktasının her biri için (2 gün, 5 gün, 1 hafta, 2 hafta, 3 hafta ve 4 hafta) her grup için n = 4 fare ayrılır.
    NOT: Fareler 12 saat ışık/12 saat karanlık döngüde tutuldu ve yiyecek ve suya ücretsiz erişim sağlandı. Deneylerden önce en az bir hafta laboratuvar ortamına alışmışlardı.
  3. Tüm cerrahi aletleri sterilize edin.Kullanımdan önce yüksek basınçlı buhar otoklavlaması.
  4. Çekirdek vücut sıcaklığını kesin şekilde 37,0 °C ± 0,5 °C arasında tutun; sürekli sıcaklık izleme için rektal probla donatılmış homeotermik izleme sistemi kullanılmıştır. Anestezi indüksiyonundan hemen sonra yağlanmış probu rektuma yerleştirin ve işlem boyunca yerinde tutun.
  5. Fareleri, küçük hayvan gazı anestezi sistemi ile anestezi yapın; izofluran (%5 indüksiyon, %1,5 bakım için, oksijen akışı 1,0 L/ dakika kalibre edilmiş bir buharlaştırıcı aracılığıyla).
    NOT: Derin anestezi pedal çekilme refleksinin olmaması ile doğrulan. Tüm cerrahi işlemler ancak fare derin anestezi aşamasına ulaştıktan sonra yapılmalıdır.
  6. Sol sırt yan bölgesindeki kürkleri tıraş edin.

2. Cerrahi işlem

  1. uIRI modeli (0. Gün)
    1. Fareyi sağ lateral dekubitusa konumlandırarak sol kanadı açığa çıkarın.
    2. Sol sırtta 1 cm ila 1,5 cm uzunluğunda bir cilt kesisi yapın, ardından retroperitoneal boşluğa girmek için kas kesisi yapın.
    3. Sol böbreği steril pamuk çubukla nazikçe dışarı iterek tuzlu su ile nemlendirin.
      NOT: Böbrek sadece peri-renal yağ pedinin manipüle edilmesi veya steril pamuk çubukları kullanılarak hareket ettirilmelidir. Pensetler asla böbrek yüzeyine değmemelidir.
    4. İnce uçlu forseps kullanarak böbrek pedikili dikkatlice diseksiye edilip çevredeki bağ dokusundan böbrek arteri ve ven izole edilsin.
    5. Sol böbrek pedikilini, travmatik olmayan bir damar mikroklipsi kullanarak iskemiyi indükleyerek klepçeleyin.
      NOT: Böbrek pedikülü diseksiyonu temiz ve eksiksiz yapılmalıdır. İşlem, üreteri kelepçe uygulamasından açıkça dışlamalıdır. Yanlışlıkla üreter klepçe, hibrit bir IRI/Tek taraflı Ureteral Tıkanıklık (UUO) yaralanmasına yol açabilir ve kalıcı bir obstrüktif bileşen oluşturabilir.
    6. Klemleri açar hemen zamanlayıcı başlatın. Iskeminin süresi kesin olarak 28 dakika olarak belirlenmiştir.
    7. Iskemiyi görsel olarak doğrulayın: böbrek rengi birkaç saniye içinde parlak kırmızıdan koyu mora dönüşmelidir.
    8. Böbreği sıcak salinle ıslatılmış steril gazlı bezle örtün.
    9. 28 dakika sonra, reperfüzyonu başlatmak için kelepçeyi çıkarın.
    10. Reperfüzyonu görsel olarak doğrulayın: böbrek rengi birkaç dakika içinde pembe/kırmızıya dönmelidir.
    11. Böbreği nazikçe karın boşluğuna geri götürün.
    12. Kas katmanını 5-0 emilebilir dikişlerle kapatın ve cilt kesisini 5-0 naylon dikişlerle kapatın.
  2. Sahte operasyon (0. Gün)
    1. Adım 2.1'de tarif edilen aynı anestezi, kesi ve böbrek dıştısı adımlarını uygulayın.
    2. Böbrek pedikulu disseksiye yapın ama damarları sıkıştırmayın.
    3. Böbreği aynı süre boyunca (28 dakika) dışa çıkardıktan sonra karın boşluğuna geri götürüp kesiyi kapatın.
  3. CNx ameliyatı
    NOT: Her belirli grup için planlanan numune toplama noktasından 24 saat önce CNx uygulayarak yaralı böbreğin kalıntı fonksiyonunu değerlendirin.
    2 günlük grup için: IRI sonrası 1. günde CNx performansı yapın.
    5 günlük grup için: IRI sonrası 4. günde CNx performansı yapın.
    1 haftalık grup için: IRI sonrası 6. günde CNx performansı yapın.
    2 haftalık grup için: IRI sonrası 13. günde CNx performansı yapın.
    3 haftalık grup için: IRI sonrası 20. günde CNx performansı yapın.
    4 haftalık grup için: IRI sonrası 27. günde CNx performansı yapın.
    1. Fareyi 1.5. adımda açıklandığı gibi anestezi edin. Sonra, sağ dorsal yanını tıraş edin ve dezenfekte edin.
    2. Sağ tarafta küçük bir yan kesi yapın ve sağ böbreği ortaya çıkarın.
    3. Sağ böbreği dışa çıkarın ve nazikçe böbrek pedikulu diseksiyona yapın.
    4. Böbrek pedikulu (arter, ven ve üreter) 4-0 emilemez ipek dikiş kullanarak sıkıca bağlanın.
    5. Sağ böbreği ligatüre distal olarak çıkarın.
      NOT: Kütükten aktif kanama olmadığından emin olun.
    6. Pedikül kütüğünü karın boşluğuna geri getirin ve 2.1.12'de tarif edildiği gibi kesiyi kapatın.
    7. Farenin ısıtıcı pedde toparlanmasına izin verin.

3. Ameliyat sonrası bakım ve izleme

  1. Fareleri tam olarak bilinç ve hareket kabiliyetine gelene kadar ısıtma pedinde tutun.
  2. Fareleri, kolayca erişilebilen yiyecek ve su olan temiz kafeslere geri getirin.
  3. Farelerin sağlık durumunu günlük olarak takip edin.
    1. Her gün ölüm oranını kontrol et.
    2. Bakım değişikliklerini, sıkıntı veya ağrı belirtilerini ve duruşunu takip edin.
    3. Kesilerde enfeksiyon, iltihap veya açılma belirtileri kontrol edin.

4. Ameliyat sonrası değerlendirmeler

  1. Örnek koleksiyonu
    NOT: Sıçanlar, IRI sonrası 2 gün, 5 gün, 1 hafta, 2 hafta, 3 hafta ve 4 hafta içinde yaralanma ve fibrozis ilerlemesini değerlendirmek için belirlenmiş zaman noktalarında feda edildi.
    1. Fareleri %3 izofluran ile anestezi edin.
    2. Serum biyokimyasal analizi için kan örnekleri alın (gerekirse).
    3. Fareleri servikal dislokasyon ile ötenazi yapın.
    4. Sol (yaralı) böbreği hızlıca al.
    5. Böbrek dokusunu kesimle: bir kısmını ticari %4 paraformaldehit ile histolojik analiz için sabitleyin, kalan dokuyu sıvı azotta dondurup moleküler analiz için -80 °C'de saklayın.
  2. Doku işleme ve kesitleme
    1. Sabit dokuları kurutun, temizleyin ve parafin mumuna gömülsün, Feldman veWolfe 8 tarafından tanımlanan doku işleme protokolünü sıkı bir şekilde takip ederek.
    2. Parafin bloklarını 4 μm kalınlıkta döner mikrotom kullanarak kesimleyin.
    3. Doku bölümlerini cam slaytlara monte edin ve doku yapışmasını sağlamak için 60 °C'de 2 saat pişirin.
  3. Hematoksilin ve Eozin (H&E) boyama
    1. Doku slaytlarını ksilenle deparaffize edip onları aşağı inen dereceli etanol serisinden distile suya yeniden nemlendirin.
    2. Morfolojik hasarı değerlendirmek için H&E boyama işlemi yapılabilir. Boyama ve yıkama adımlarını, Feldman veWolfe 8 tarafından hazırlanan standart protokolde ayrıntılı olarak tam olarak uygulanır.
    3. Lekelenmiş kaydırakları reçineli bir montaj ortamı kullanarak kurutun, temizleyin ve örtün.
  4. Masson'ın Trikrom boyama
    1. Doku bölümlerini deparaffize edip damıtılmış suya yeniden nemlendirin.
    2. Mordant, nükleer, sitoplazmik ve kolajen boyalarını sıralı olarak uygulayarak kolajen birikintisi ve böbrek fibrozunu değerlendirin. İslam ve Kumar9'un belirttiği reaktif kuluçka sürelerini ve yıkama adımlarını tam olarak takip edin.
    3. Mikroskobik değerlendirme için slaytları durulayın, kurutun, temizleyin ve örtü slip'i yapın.
  5. İmmünohistokimya (IHC)
    1. Doku kesitlerini deparafinize edin ve yeniden nemlendirin.
    2. Magaki ve ark.10 tarafından belirtildiği gibi, %0,05 Tween-20 (pH 6,0) içeren 10 mM sodyum sitrat tamponu kullanılarak ısı kaynaklı epitop alımı gerçekleştirilin.
    3. Endogen peroksidaz aktivitesini %3 hidrojen peroksit içinde inkubasyon ederek bloklayın.
    4. Oda sıcaklığında %5 sığır serum albümini kullanarak 30 dakika boyunca PBS ile spesifik olmayan bağlanma noktalarını bloklayın.
    5. Kesitleri anti-alfa-smooth kas aktini (α-SMA) birincil antikoru (1:400 seyreltme) ile gece boyunca 4 °C'de inkubasyon yapın.
    6. Slaytları yıkayın ve oda sıcaklığında ikincil antikorla 1 saat kuluçka yapın.
    7. Hedef antijeni DAB kullanarak görselleştirin ve hematoksilin ile karşı boyama yapın; Magaki ve ark.10 tarafından sağlanan prosedürel adımlara uyarak.
    8. Susuz bırakın, temizleyin ve slaytları son görüntüleme için örtü slip'i kullanın.

5. İstatistiksel analiz

  1. Tüm nicel verileri ortalama ± standart sapma (SD) olarak sunun.
    NOT: İstatistiksel analizler ve grafik üretimi GraphPad Prism yazılımı 10.0 sürümü kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Birden fazla grup arasındaki farklar, tek bir kontrol grubuna (Sham) kıyasla Sıradan Tek Yönlü Varyans Analizi (ANOVA) kullanılarak analiz edildi ve ardından Dunnett'in çoklu karşılaştırma testi yapıldı. < P-değeri istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edildi (*P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ****P. < 0.0001). NS önemli bir fark göstermez.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Tüm deneysel dönem boyunca, hem Sham grubu hem de uIRI grubu için genel hayatta kalma oranı %100 idi (n = her zaman noktası başına 4). İlk uIRI ameliyatı veya sonraki gecikmeli CNx işlemi sırasında ölüm tespit edilmedi. Bu sonuç, genellikle önemli üremiye bağlı ölüm oranı yaşanan iki aşamalı protokolün yüksek güvenlik profilini ve güvenilirliğini doğrulamaktadır.

Böbrek patolojisindeki dinamik değişiklikleri incelemek için H&E boyama, Masson trikrom boyama ve ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Mevcut çalışma, uIRI kullanılarak fare modeli oluşturmak için standart bir protokolü açıklıyor; ardından CNx çalışmanın son noktasından 24 saat önce gerçekleştirilmiştir. Dinamik histopatoloji taraması, belirgin patolojik evreler ortaya koydu: akut tübüler nekroz, 2–5. günler içinde zirve insidansıyla karakterize edilir, ardından aktif fibrogenez ve miyofibroblast aktivasyonu 1–2 haftada zirveye ulaşır ve özellikle, 3–4. haftalarda doku, stabil kollajen birikimiyle karakterize edilen anc...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar, rekabet eden çıkarları olmadığını belirtirler.

Teşekkürler

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82373042), Klinik ve Temel Araştırmalar için Ortak İnovasyon Ekibi (202409) ve Shandong Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı (ZR2022QH291, ZR2025MS1199) tarafından desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Anti-&alfa;-SMA AntikorProteintech14395-1-APIHC'de &alfa;-SMA ekspresyonunu tespit etmek ve miyofibroblast aktivasyonunu değerlendirmek için kullanılan birincil antikor
Kan Urea Azotu (BUN) Analiz KitiNanjing Jiancheng Biyoteknoloji Araştırma Enstitüsü A., Ltd.C013-2-1Serum BUN seviyelerini nicelleştirmek için kullanılan ve kalıntı böbrek fonksiyonunu değerlendirmek için kullanılır
Kreatinin (CRE) Analiz KitiNanjing Jiancheng Biyoteknoloji Araştırma Enstitüsü A., Ltd.C011-2-1Rezidual böbrek fonksiyonunu değerlendirmek için serum kreatinin seviyelerini nicelendirmek amacıyla kullanılır
Gaz Anestezi SistemiNanjing Calvin Biyoteknoloji Şirketi, Ltd.KW-MZJ-4Genel anestezi için izofluran ile donatılmıştı
GraphPad Prizma YazılımıGraphPad Yazılımı, Inc.Yokİstatistiksel analiz ve verilerin grafiksel temsili için kullanılır (https://www.graphpad.com)
Homeotermik İzleme SistemiDavranış BilimiCS-HS-0001Kapalı döngülü, sürekli çekirdek vücut sıcaklığı izleme ve düzenleme için rektal prob ile donatılmıştır
ImageJ YazılımıUlusal Sağlık EnstitüleriYokFibrotik alanlar ve IHC sinyalinin morfometrik nicelenmesi için kullanılan açık kaynak yazılım
İzofluranRWD Life Science Co., Ltd R510-22Cerrahi işlemler sırasında kullanılan inhalant anestezik madde
Masson' s Trikrom Boyama KitiBeyotimeC0189MKolajen birikimini niceliklendirmek için
Travmatik olmayan Vasküler Mikro-klipsROBOZ CERRAHI ALET ŞIRKETIRS-5481T28 dakika boyunca böbrek pedikülünü kelepçelemek için kullanılır
Paraformaldehit (%4)Beyotime Biotech IncP0099-100mlToplanan böbrek dokusu örneklerinin hızlı fiksasyonu için kullanılır
Sodyum Sitrat Tamponu (10 mM, pH 6.0)Thermo Fisher Scientific Inc. 005000İmmünohistokimyasal boyamadan önce ısı kaynaklı epitop çıkarımı için kullanılır
Stereotaksik Cerrahi MikroskopPekin Zhongtian Guangzheng Teknoloji Şirketi, Ltd.TS-39NKIRI cerrahisi için kullanılır

Kaynaklar

  1. Lameire, N. H., et al. Acute kidney injury: An increasing global concern. Lancet. 382 (9887), 170-179 (2013).
  2. Sharfuddin, A. A., Molitoris, B. A. Pathophysiology of ischemic acute kidney injury. Nat Rev Nephrol. 7 (4), 189-200 (2011).
  3. Eltzschig, H. K., Eckle, T. Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation. Nat Med. 17 (11), 1391-1401 (2011).
  4. Bonventre, J. V., Yang, L. J. T. Cellular pathophysiology of ischemic acute kidney injury. J Clin Invest. 121 (11), 4210-4221 (2011).
  5. Venkatachalam, M. A., Weinberg, J. M., Kriz, W., Bidani, A. K. Failed tubule recovery, AKI-CKD transition, and kidney disease progression. J Am Soc Nephrol. 26 (8), 1765-1776 (2015).
  6. Ferenbach, D. A., Bonventre, J. V. J. N. R. N. Mechanisms of maladaptive repair after AKI leading to accelerated kidney ageing and CKD. Nat Rev Nephrol. 11 (5), 264-276 (2015).
  7. Wei, Q., Dong, Z. J. Mouse model of ischemic acute kidney injury: Technical notes and tricks. Am J Physiol Renal Physiol. 303 (11), F1487-F1494 (2012).
  8. Feldman, A. T., Wolfe, D. Tissue processing and hematoxylin and eosin staining. Methods Mol Biol. 1180, 31-43 (2014).
  9. Islam, M. A., Kumar, S. Masson's trichrome staining technique to evaluate tissue fibrosis. Methods Mol Biol. 2983, 91-100 (2026).
  10. Magaki, S., Hojat, S. A., Wei, B., So, A., Yong, W. H. An introduction to the performance of immunohistochemistry. Methods Mol Biol. 1897, 289-298 (2019).
  11. Marschner, J. A., Schäfer, H., Holderied, A., Anders, H. J. Optimizing mouse surgery with online rectal temperature monitoring and preoperative heat supply: Effects on post-ischemic acute kidney injury. Plos One. 11 (2), e0149489(2016).
  12. Lu, X., et al. C57BL/6 and 129/Sv mice: genetic difference to renal ischemia-reperfusion. J Nephrol. 25 (5), 738-743 (2012).
  13. Wei, Q., Wang, M. H., Dong, Z. J. Differential gender differences in ischemic and nephrotoxic acute renal failure. Am J Nephrol. 25 (5), 491-499 (2005).
  14. Skrypnyk, N. I., Harris, R. C., de Caestecker, M. P. Ischemia-reperfusion model of acute kidney injury and post injury fibrosis in mice. J Vis Exp. (78), e50495(2013).
  15. Chou, Y. H., et al. Methylation in pericytes after acute injury promotes chronic kidney disease. J Clin Invest. 130 (9), 4845-4857 (2020).
  16. La Russa, A., et al. Kidney fibrosis and matrix metalloproteinases (MMPs). Front Biosci (Landmark Ed). 29 (5), 192(2024).
  17. Fu, Y., et al. Rodent models of AKI-CKD transition. Am J Physiol Renal Physiol. 315 (4), F1098-F1106 (2018).
  18. Soranno, D. E., et al. Matching human unilateral AKI, a reverse translational approach to investigate kidney recovery after ischemia. J Am Soc Nephrol. 30 (6), 990-1005 (2019).
  19. Lourenço, B. N., et al. Development of a model of tubulointerstitial fibrosis using transient unilateral renal ischemia and delayed contralateral nephrectomy in domesticated cats. Comp Med. 74 (4), 274-283 (2024).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Akut Böbrek HasarıKronik Böbrek HastalığıTübüler Atrofiİntersitisyel FibrozHistolojik Değerlendirmeİmmünohistokimyasal Değerlendirme
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.