Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Zebrabalıkta (Danio rerio) 3 odalı açık tankta serbest yüzme görevi kullanılarak sosyal tercihi incelemek için düşük maliyetli alternatif

194 görüntülenme

DOI:

10.3791/70610

7 Ağustos 2026

Bu makalede

Özet

Çok odalı sosyal tercih görevleri, kemirgenlerden zebra balıklarına uyarlanmış ve model organizmalarda sosyal davranışın incelenmesini kolaylaştırmıştır. Bu protokol, web kameraları ve açık kaynak yazılımları kullanarak zebrafishin sosyal tercihlerini ölçmek için düşük maliyetli 3 odalı açık tank görevini doğrularak lisans araştırma ve öğretimine erişilebilir hale getirir.

Özet

Sosyal davranışı anlamak, nörodavranışsal araştırmaların temel bir amaçıdır ve genellikle sosyal tercih görevleri kullanılarak incelenir. Bu görevler, başlangıçta kemirgenler için geliştirilen ve daha sonra zebra balıkları için uyarlanmış olup, sosyal dinamikleri ve tepkileri incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. 3 odalı açık tanklı serbest yüzme görevi (OTFST), merkezi tankın iki uyarıcı tankla çevrili bir kameradan oluşur; kamera ise video kalitesini ve geçerliliğini artırmak için polarize film ve arka aydınlatmadan oluşur. Bu protokol, USB web kameraları ve kolayca erişilebilir malzemelerle düşük maliyetli bir kurulum kullanır. DeepLabCut adlı açık kaynaklı, işaretsiz poz tahmin aracı kullanıyoruz; bu araç hayvan hareketlerinin doğru video takibi sağlayacak ve çeşitli metrikler için analiz edilebilecek konumsal zaman serisi verileri sağlıyor. Pilot oturumlar, sistemin sağlam sosyal tercih davranışlarını yakalama yeteneğini doğrular. Bu bütçe dostu yaklaşım, zebrabalıklarda sosyal etkileşimi araştıran laboratuvarlar için erişilebilir ve ölçeklenebilir bir platform sunar ve 3 Oda OTFST'nin çok yönlülüğü ve göreceli sadeliği, lisans öğretim laboratuvarları ve araştırma projeleri için uygun hale getirir.

Giriş

Sosyal tercih, bireyin sosyal uyaranlara katılma, arama veya kaçınma eğilimidir ve hayvan grupları içinde, insanlar da dahil olmak üzere, bağlar ve hiyerarşiler kurmada kritik rol oynayan sosyal davranışın temel biryönüdür 1,2,3,4. Sosyal tercihi anlamak, sosyal etkileşimin altında yatan sinir ve davranışsal mekanizmaları tanımlamak için gereklidir. Önceki araştırmalar, sosyal tercihlerdeki eksikliklerin nörogelişimsel ve psikiyatrik bozukluklarla ilişkili olabileceğinigöstermektedir 5,6,7,8. Hayvan modelleri, sosyal davranışın biyolojik temeli hakkında içgörüler sağlayabilir ve sosyal bozuklukların teşhisi ve tedavisi için translasyonel araçların geliştirilmesine yardımcı olabilir. Bu hayvan modelleri,kemirgenlerden 9,10'dan sucultürleri 11,12'ye kadar değişen, keşif için faydalı çerçeveler sağlar.

Kemirgenler, insanlara fizyolojik benzerlikleri nedeniyle davranışsal araştırmalar için ilk kez 19. yüzyılınbaşlarında kullanılmıştır 13. Saldırı gibi davranışlar başlangıçta incelenmiş olsa da, sosyal tercih ölçümleri sistematik olarak minimal kaldı. Araştırmacılar, Nadler ve ark.16 tarafından tanıtılan üç odalı sosyal tercih görevini geliştirerek bu boşluğu doldurdular. Cihaz, birbirine bağlı üç odadan oluşur. Genellikle, bir yan odada yeni bir türdeş bulunurken, diğer oda boş kalır. Katılımcı, her odadaki zamanın kaydedildiği ve tercih göstergesi olarak değerlendirildiği tüm odaları serbestçe keşfetmesine izin verilir. Bu cihaz ve prosedür, çeşitli varyasyonlarıyla birlikte geniş çapta popülerlik kazanmış ve otizm spektrum bozukluğu için kemirgen modellerinde sosyal performansın çeşitli yönlerini incelemek için kullanılmıştır (17,18,19). Ancak, kemirgenlerle yapılan çalışmalar daha maliyetlidir ve oldukça fazla alan gerektirir. Bu nedenle, birçok araştırmacı nörodavranışsal araştırmalar için su türlerini kullanmaya yönelmiştir.

Su türleri, özellikle zebrabalıklar (Danio rerio), karmaşık sosyal etkileşimleri içeren karmaşık bir davranışsal repertuara sahiptir22. Biyomedikal araştırma modeli olarak kullanışları ve davranışsal ekolojilerinde sosyal etkileşimin önemi nedeniyle, zebra balıkları insanlarla karşılaştırıldığında kullanılabilecek anlamlı bir sosyal tepki çerçevesisağlar 23. Zebra balıkları, bakımı ucuz ve nispeten küçük bir tutma alanı gerektirdikleri için davranışsal sinirbilim araştırmalarında giderek daha popüler hale gelmiştir; bu da bu türü, sosyal davranış ve tercih üzerine büyük ölçekli çalışmalar için maliyet etkin ve pratik bir modelhaline getirmektedir 24. Bazı çalışmalarda, sucul türlerde sosyal etkileşimleri incelemek için bitişik bir tankkonfigürasyonu kullanılmıştır 25,26; ancak bu düzen, yalnızca bir teşvik sunulduğundan sosyal tercihi değerlendirmede sınırlı bir verimlilik sağladı. Bu sınırlama, 2018'de zebrabalık için fare üç odalı görevin uyarlanmasıylaele alınmıştır 27. 3 odalı açık tanklı serbest yüzme görevi (OTFST) için modifiye edilen cihaz, sabit akrilamid bariyerlerle bölünmüş tek bir akrilamid tankından oluşuyordu; bu da nötr bir başlangıç bölgesi sağlıyordu; ayrıca her iki yan odada ya tanıdık ya da yeni bir türden biri bulunuyordu. Sosyal tercihi ölçmek için, her iki yan odaya yakın birikimli zaman kaydedildi ve etanol maruziyeti ile sam2 etkisinin zebrabalıklarda yenilik tercihini azalttığınıgösterdi 27. Kemirgen 3-odalı sosyal etkileşim testi, denek ile test tür(leri) arasında görsel, kimyasal, dokunsal ve akustik modaliteler aracılığıyla karmaşık çok modal etkileşimlere izin verirken, sucul 3-odalı OTFST için ayrı odaların kullanılması, denek ile uyarıcı hayvanlar arasındaki etkileşimi sadece görsel modaliteye indirir. Bu tek modaliteli etkileşim ekolojik geçerlilikte daha düşük olabilir, ancak daha fazla deneysel kontrol sağlar ve lisans araştırmacıları tarafından yürütülen projeler için sadelik sağlar. Literatürde, çeşitli araştırmacılar o zamandan beri zebra balıklarında sosyal davranışı etkileyen genetik ve çevresel faktörleri incelemek için 3 odalı OTFST'nin adaptasyonlarınıincelemiştir (28,29,30,31,32).

Mevcut 3 odalı OTFST uyarlaması, çok yönlü ve lisans öğrencileri için uygun bir model cihaz olarak tasarlanmıştır. Tamamen lisans düzeyinde bir laboratuvar olan FishLab, bu düzeni oluşturmuş ve kullanmıştır; zebrabalıklarda sosyal tercihleri araştırmak için yüksek verimli bir araç olarak etkinliğini göstermiştir. Bu düzeni kullanan çalışmalar, çeşitli bağımsız değişkenlerin manipülasyonlarına yanıt olarak zebrafish sosyal tercihinin birçok yönünü incelemiştir. İlk çalışma, zebra balığının canlı ve simüle edilmiş sosyaluyarıcıları 33 tespit edebildiğini gösterirken, ikinci çalışmada yeni oluşmuş sığlıklara kıyasla yerleşik sığlıklar tercihiniinceledi 34. En son çalışma, zebra balıklarının kimyasal alarma sahip ve alarmsız sığlıkları ayırt etmeyeteneğini inceledi 35. Bu çalışmalar birlikte gerçekçilik, aşinalık ve tehdit tespiti gibi sosyal davranışın farklı yönlerini ele alırken, sürüş tercihlerinde ortak noktalar gösterir ve yırtıcı riskine tepkileri değerlendirir. Ancak, önceki çalışmalarda kullanılan kurulum, profesyonel kamera donanımına monte edilmiş dijital IP kameralar, özel bir su taşıma rafı sistemi ve hem video alımı hem de analizler için özel yazılım kullanıyordu; toplam maliyet, küçük operasyonel bütçeli araştırmacılar/eğitmenler için çok yüksek olabilirdi. Açık kaynak yazılım ve yüksek kaliteli USB tabanlı web kameralarının ortaya çıkmasıyla birlikte, bu tekniği lisans araştırmacılarıyla kullanmak isteyen araştırmacılar için düşük maliyetli bir versiyon artık mümkün olmuştur; toplam maliyeti (yaklaşık 2.000 ABD doları; bilgisayar hariç) yüksek maliyetli sistemin maliyetinden (bilgisayar hariç yaklaşık 20.000+ ABD doları) oldukça düşüktür.

Aşağıdaki protokol, zebrabalık için 3 odalı OTFST'nin düşük maliyetli bir versiyonunun geliştirilmesi ve uygulanmasını özetlemektedir. Uygun fiyatlılığı, sadeliği ve çok yönlülüğü, sınırlı finansmanı olan küçük laboratuvarlar veya eğitim ortamları için faydalı bir araç haline getirir. Yaygın olarak bulunan 10 galonluk akvaryumlar gibi düşük maliyetli konutlarla birleştiğinde, mevcut kurulumun kurulumu ve bakımı çok daha az maliyetlidir. Ayrıca, deneysel oturumların kaydı için açık erişim yazılımları (OBS) ve çeşitli takip uygulamaları (örneğin, DeepLabCut, SLEAP vb.) kullanımı, zebrabalıkların sosyal etkileşimlerinin video yakalaması ve zaman serisi verileri üretmek için düşük maliyetli ve erişilebilir bir çerçeve sağlar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm deneysel prosedürler, Christopher Newport Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı (Protokol #2025-23).

1. Hayvanlar

  1. Yetişkin kısa yüzgeçli vahşi tipzebrafish 23,36,37 elde edinin, ancak başka suşlar da kullanılabilir. Alternatif olarak, embriyoları edinip kendi içinde yetiştirin.
  2. Balıkları, yaklaşık galon başına (3,8 L) su başına iki balık yoğunluğunda serbest duran 10 galonluk (38 L) tanklarda barındırır. Tankları aktif biyo-filtreler, hava taşları ve batırılabilir ısıtıcılarla donatın. Alternatif olarak, su raketi sisteminde ev balığı yapabilirsiniz.
  3. Su kalitesi parametreleri aşağıdaki aralıklarda korun: pH 7.0–8.0, iletkenlik 400–700 μS, sıcaklık 25–27 °C, <40 ppm nitrat, <0.2 ppm nitrit ve 0.01–0.1 ppm amonyak.
  4. Hayvanları 12 saat ışık: 12 saat karanlık bir fotoperiyot altında tutun ve günde bir kez ticari pullarla besleyin.
  5. Bu tanklardan rastgele olarak deneysel atamak için hayvanlar seçilir.
  6. Deney tamamlandıktan sonra, hayvanları başka araştırma/öğretim amaçları için yeniden amaç haline getirmek veya 250-500 mg/mL tamponlu trikaine 30 dakika boyunca batırılarak ötenazi yapın, ardından fiziksel bir yöntemle (örneğin kafa kesme) uygulanarak ölümü garanti altına alın. Ötanazi yapılan hayvanları sonraki biyotestler ve/veya nörokimyasal analizler için kullanın.

2. 3 odalı açık tanklı serbest yüzme görev cihazı ve yazılımı

  1. Test odalarının inşası
    1. Her 5,5 galonluk tankın altındaki plastik süsleri dikkatlice çıkarın. Köşelerde plastikleri keserek çıkarmak için kesim çarklı döner bir alet kullanın. Plastik trim yarıldıktan sonra, plastikten silikon yapışkanı ortak bir macun bıçağıyla ayırın.
    2. Arka aydınlatmayı yüngülleştirmek için, üç tankın arkasını, bir tankın sol ucunu ve diğer tankın sağ ucunu beyaz yapıştırıcı raf astarıyla örtün. Uçları orta oda olarak kullanılacak tankın üzerinde açık bırakın.
    3. Her odanın önünde, dolgu seviyesini üst kenarın 4,5 cm altında göstermek için siyah bir yatay çizgi yerleştirin; bu çizgi emaye işaretleyici veya siyah grafik yerleşim bandı ile kullanılır.
    4. Her yan tankın açık uç tarafına uyacak şekilde bir sayfa polarizasyon filtresi kesin. Filtre levhalarını birbirine 90° doğru yönlendirin. Akvaryum camı ile filtre malzemesi arasındaki boşluğa suyun girmesini önlemek için dört kenarda şeffaf bant kullanın.
      NOT: Polarizasyon filtrelerinin kaydırılmış yönelimi, bir yan uyaran odadaki uyarıcı hayvanların diğer yan uyaran odasındaki hayvanları (veya diğer uyaranları) görmesini engeller ve yine de konuyu görmelerini sağlar. Merkezdeki tanktaki denek, her iki yan odadaki görsel uyarıcını görebiliyor.
    5. Polivinil klorür (PVC) tabanını, tankların kurulum tezgahındaki tam konumunu hizalamak için inşa edin. Tabanın altını 1/4 inç (0,635 cm) kalınlığında beyaz PVC levhadan 21 cm x 122,5 cm boyutlarında kesin ve uç parçaları 21 cm uzunluğunda 1 x 2 PVC kaplama tahtasından kesin.
    6. Uçları tabana test edin, üç tankın tamamı yerinde oturdu. Bölücü panellerin (aşağıda) kolay takılması ve çıkarılması sağlanır ve yan tankların merkez tankın yanlarına sıkıca bitişmediğinden emin olun. Test montajı tamamlandıktan sonra, uç parçaları PVC tabana PVC çimento ile birleştirin.
    7. Her odanın şeffaf kapaklarını yapmak amacıyla, polikarbonat levhayı 5,5 galonluk tankın üst kenarının dış boyutlarına (40 cm × 21 cm) üç parça halinde kesin. Her kapağın kenarına 6 mm × 4 mm uzunluğunda bir kanal kesin, böylece kapağın kamyasının üstüne güvenli şekilde yerleştirilmesini sağlayın.
    8. Odalarda hayvanlar tutulduğunda odaları kapaklarla kapatın. Akvaryum hava pompasına bağlı bir sualtı ısıtıcı ve hava taşı yerleştirin; hayvanlar ise kendi odalarında tutularak sıcaklık kontrolü ve havalandırma sağlanır. Üç hava taşı arasında hava akışını dengelemek için üç yollu bir hava valfi kullanın.
    9. Orta oda ile her yan odası arasında yerleştirmek için basit opak bölücüler yapın; böylece test deneklerinin sosyal uyarıcılara görsel olarak maruz kalmasını kontrol etmek için iki yaprak A4 açık renkli karton laminasyonu yapılabilir.
    10. Bölücüleri asmak ve uzaktan kaldırmak için hazırlayın; her laminat tabakanın bir kenarı boyunca 85 mm ve 125 mm boyutlarında iki delik açarak hazırlanın.
    11. İki adet 75 cm uzunluğunda yüksek dayanıklılığa sahip ip kesin ve ipi her delikten geçirin ve kalan uçları birbirine bağlayarak iki levhayı ortada bir boyunduruk olarak birleştirin.
    12. 6 m uzunluğunda bir ip kesin. 6 metrelik ipin bir ucunu yoke ile bağlayarak merkezi bir bağlanmış hat oluşturun ve ipin serbest ucunu döner bir göz kasnakından geçirin.
    13. Döner göz kasnağını en ortadaki tankın üzerindeki tavana monte edin ve ipin ucunun deneysel kurulumun dışına asılı olduğundan emin olun (Şekil 1A).
  2. Aydınlatma kurulumunun inşası
    1. Panel ışığı için 1/4 inç (0,635 cm) kalınlığında beyaz PVC levhadan bir çerçeve yapın. İki uç parça (10 cm × 31,5 cm) ve bir üst ve bir alt (10 cm × 122 cm) kesin. Çerçeve parçalarını panelin çerçevenin içine sığacak şekilde bir şekilde test edin. Uyum test edildikten sonra, çerçeve parçalarını PVC çimento ile birleştirin.
    2. Nitelikli bir elektrikçiye panel ışığına 3 iletken bir kablo eklemesini sağla.
    3. Su geçirmez muhafazada çıkış prizini kontrol etmek için kaydırıcı dimmer'i nitelikli bir elektrikçiye bağlayın. Panel ışığını bu prize takın.
    4. Arka aydınlatmanın parlaklığını 350 lük'e ayarlamak için kaydırıcı dimmer'i ayarlayın. Odaları suyla doldurun ve ön taraftaki parlaklığı 15 lüks'e ayarlamak için kaydırıcı dimmer'i hareket ettirin.
      NOT: Araştırmacılar, parlaklık ayarlarının korunduğundan emin olmak için çalışmadan önce, sırasında ve sonrasında aydınlatmayı doğrulamalıdır.
  3. Perde ve kamera çerçevesinin inşası
    1. Test tezgahını panel ışığı, tank taban paneli ve üç odayla kurun. İki branda direğini dikey olarak konumlandırın ve ayarlayın, her biri yerden tavana, tankların önünden en az 75 cm mesafeye tam oturacak.
    2. Her perde için bir üst cep oluşturun; çarşaftın bir ucunu 60 cm'den fazla katlayıp üst katlamadan 6 cm mesafede düz bir dikiş dikerek çerçeve parçasının içine kayabileceği bir cep oluşturun.
    3. Çerçeve kurulumu için çapraz birleştirme ve stabilizasyon bölümlerinin boyutlarını, kurulum için kullanılacak alanın genişliği ve derinliğine göre ölçün.
      NOT: The FishLab'daki mevcut kurulumda, dikey branda çubukları laboratuvarın köşesindeki arka duvardan 146,5 cm mesafeye yerleştirildi. İçteki branda direği yan duvardan 6,5 cm uzakta, dış branda direği ise yan duvardan 142,5 cm mesafede konumlandırılmıştır.
    4. Çerçevenin yanları için stabilizasyon bölümleri olarak kullanılmak üzere 143 cm yüksekliğinde üç adet elektrik metal boru (EMT) borusu kesin. Bir bölümü hareketli perdenin üst cebinden geçirin ve yatay olarak yerden 190 cm yukarıya yerleştirin.
    5. Bölümü dış branda direğine bir ucunda T-kelepçe, diğer ucunda ise özel 3D baskılı soket ile bağlayın. 3D baskılı soketi arka duvara vidalarla takın. Diğer iki bölümü iç branda direğine takın.
    6. Üst bölümü sabit perdelerden birinin üst cebinden geçirin ve yerden 190 cm yukarıya konumlandırın. İç branda direğine bir ucunda T-kelepçe, diğer ucunda ise 3D baskılı soket ile takın.
    7. 3D baskılı soketi yan duvara vidalarla takın. Son stabilizator bölümü yerden 120 cm yukarıya yerleştirin ve diğer iki stabilizator bölümle benzer şekilde takın.
    8. Çerçevenin ön kısmı için dengeleyici olarak kullanılmak üzere 127 cm uzunluğunda EMT kanalının başka bir bölümü kesin. Bu bölümü ikinci sabit perdenin üst cebinden geçirin ve her iki ucunu branda direklerine T-kelepçe ile takarak yerden 193 cm yukarıya monte edin.
    9. Kalan EMT boru parçasını 145 cm derinlikte keserek kamera montaj çubuğu olarak kullanın. Bu bölümü, kameraları tankların ortasına hizalamak için yerden 88 cm yükseklikte yatay olarak yerleştirin. Bir ucunu duvara vidalanmış 3D baskılı bir sokete yerleştirin ve özel 3D baskılı çapraz kelepçelerle kamera çubuğunu branda direklerine sıkıca tutun (Şekil 1B).
  4. Kamera kurulumunun inşası
    1. Kamera çubuğuna bir kamera montajını sıkıştırın, böylece kameranın yatay ve dikey merkezleri orta odanın yatay ve dikey merkezleriyle hizalansın.
      NOT: Araştırmacılar görsel uyarıcı olarak kullanılan canlı hayvanların tepkilerinin dijital videosunu almak isterse, her yan odanın önüne ek kameralar monte edilebilir. En basit kurulum, merkezdeki deney odasının videosunu yakalamak için tek bir kamera yerleştirmektir. Uyarıcı odalarındaki canlı sosyal uyarılar için, araştırmacılar odaların videosunu da toplamak isteyebilirler.
    2. Her kamerayı her kamera montajının dişli direğine monte edin. Her kamerayı görüntünün ilgili odasının gözlem bölgesine odaklanması için ayarlayın.
    3. Her kameranın USB kablolarını, kabloların sarkmasını önlemek için kayışlar veya bağlarla kamera çubuğuna sabitleyin; bu da kameraların hizalanmasının yanlış hizalanmasına neden olabilir.
    4. Tel raf raflarının bir bölümünü 140 cm uzunluğunda kesin ve kameraların hizasından sapmasını önlemek için çerçevenin ön dışına dikey olarak takın. "Kamera kafesi"ni, branda direklerine bağlı T-kelepçelerle monte edin.
      NOT: Kameraların hizasından çıkmasını önlemek için çerçevenin içine ikinci bir kamera kafesi monte edilebilir; Tankın görüntülerinin kapanmasını önlemek için kameraların önü "kafesli" ise, küçük bir tel ızgara bölümü çıkarılabilir.
  5. Satın alma yazılımını yükle ve yapılandırma - Açık yayıncı stüdyosu (OBS)
    1. OBS'yi indirin ve Windows işletim sistemiyle çalışan bir yerel bilgisayara kurun. OBS Studio'yu başlatın ve özel kayıt ihtiyaçları, donanım kaynakları ve ağ koşulları için ayarları optimize etmek için Otomatik Yapılandırma Büyücüsü'nü çalıştırın.
      NOT: Bu araç Araçlar > Otomatik Yapılandırma Büyücüsü altında mevcuttur.
    2. Kamerayı yapılandırmadan önce temel ayarları doğrulayın. Temel (Canvas) çözünürlüğünü ekran çözünürlüğüyle eşleştirin ve Çıktı (Ölçekli) çözünürlüğünü kayıt çözünürlüğüne (örneğin, 720 piksel) ayarlayın.
    3. Sahneler kutusuna sağ tıklayarak (veya alttaki haçı kullanarak) bir sahne oluşturun. Sahneye bir isim verin. Akış düzenini tanımlamak için sahneyi kullanın.
    4. Kaynaklar kutusuna sağ tıklayarak (veya alttaki artı sembolünü kullanarak) yeni bir kaynak ekleyin. Web kamerası eklemek için Video Yakalama Cihazı'nı seçin. Her kameraya ayrı bir isim atayın (örneğin, "kamera-sol", "kamera-merkez", "kamera-sağ"). Gerekirse ek kameralar veya kaynaklar için bu işlemi tekrarlayın.
    5. Önizleme penceresinde kaynakları konumlandırın ve boyutunuzu değiştirin. Kameranın görünür olduğundan emin olmak için Kaynaklar listesinde diğer kaynakların üzerinde listelendiğini doğrulayın. Kamera görünümünü tuvalde ortalamak için, Kaynaklar listesinden kaynağı seçin (kırmızı bir sınırlı kutu belirecek) ve CTRL+D (Ortadan Ekrana) tuşlarına basın.
    6. İsterseniz CTRL+F (Ekrana Uydur) veya CTRL+S (Ekrana Uzatma) tuşlarına basarak tüm ekranı bir kaynakla doldurun. Kaynağı Alt tuşunu basılı tutup sınırlayıcı kutuyu sürükleyerek kırp. Kırpımı doğrulayın, kenarların yeşile döndüğünü kontrol edin.
    7. Seçilmiş kameraya Kaynaklar listesinde çift tıklayarak ve Videoyu Yapılandır seçeneğini seçerek parlaklık ve kontrast gibi video özelliklerini ayarlayın. Ayarları özellikler menüsünü kullanarak değiştirin.

3. Davranışsal testler

  1. Uyum
    1. Tüm 3 odayı depo tanklarından gelen suyla doldurun. Her odanın arasına opak bariyerler yerleştirin ve tüm uyum süreci boyunca bunları yerinde bırakın. Bir denek merkez deney odasına aktarın ve test öncesi en az 1 saat alışmasına izin verin.
      NOT: Temsil eden sonuçlar için uyum süresi 3 saat olarak belirlendi. Alışma dönemi, hayvanların herhangi bir anlık transfer stresinden iyileşmesi ve davranışsal testlerden önce oda ortamına uyum sağlaması için gereklidir.
    2. Uyum döneminin başında, sosyal uyarıcılar yan uyarıcı odalarına yerleştirilir. Yapay sosyal uyarıcıları sol uyarı odasına merkezleyin ve benzer büyüklük, yaş ve tanıdık özelliklere sahip 4 balık sürüsünü (2 erkek ve 2 dişi) sağ uyarık odasına aktarın.
      NOT: Yapay sosyal uyarıcının ve canlı sosyal uyarıcının konumları mevcut protokolde sabit ve dengelenmemişti; çünkü öncekiçalışmalar 33,34 OTFST kullanılarak uyarıcı pozisyonunun etkisini tespit etmemiştir. Bu durumda denge kaldırmak, araştırma için kullanılan hayvan sayısının gereksiz yere iki katına çıkarılmasını gerektirir ki bu da hayvan araştırmalarının "3R"lerine aykırıdır. Bu protokol, test edilecek uyarıların doğasında esneklik sağlar; örneğin, statik modeller, simpatrik veya yeni türler vb.
    3. Alışma sırasında, canlı hayvanların bulunduğu tüm odalara 26 °C ayarlanmış bir sualtı ısıtıcı, akvaryum hava pompasına bağlı bir bubbler taşı ve stabil tutma koşullarını sağlamak için bir tank kapağı verin. Deneysel bir oturuma başlamadan önce ısıtıcıları ve bubbler taşlarını çıkarın.
  2. Deneysel testler
    1. Merkez tanktaki her bir yan tankta ve test denekte test edilen sosyal uyarıcıların aktivite durumunu doğrulayın. Her test denesi için video kaydetmek için merkezdeki tanktaki tek kamerayı kullanın.
      NOT: Bu protokoldeki temsil edici sonuçlar, Velkey ve ark.33'ün tek bir koşulunun tekrarlanmasıdır; bu durum zebrafish tercihini düşük isayetli (mobil modeller) ile yüksek isabetli (canlı sığlık) sosyal uyaranlar arasında test etmektedir.
    2. OBS Studio'yu açın ve bir oturum kaydına başlayın. Videonun köşelerine tıklayıp sürükleerek ekranı dolduracak şekilde orta kamera görünümünü boyutlandırın. Ekranın sağ alt köşesindeki Kontroller bölümünden Kayıt Başlat'ı seçin.
    3. Kayıt başlatıldıktan hemen sonra, opak engeller kasnak teli sistemi aracılığıyla kaldırılır. 10 dakika kayda devam edin ve deneğin merkez deney odasında serbestçe hareket ederken aynı anda her iki sosyal uyarana maruz kalmasına izin verin.
    4. Oturumu Kontroller bölümünden Kaydı Durdur seçeneğini seçerek bitirin. Kayıtlı oturumlara erişim için sol üst menüden Dosya seçeneğini seçip açılır menüden Kayıtları Göster seçeneğini seçebilirsiniz.
      NOT: Ortaya çıkan videolar, çeşitli analizler için uygun yapılandırılmamış veriler sunar.
    5. Canlı balıkları depolama tanklarına nakledin, üç odadan suyu çıkarın, iyice suyla durulayın (polarize filmler arasında su bulaşmasını önlemeyin), her odaya %5 limrik asit püskürtün, odaların gece boyunca hava ile kurumasına izin verin ve sonraki deneysel günün başında durulayın, ardından tekrar test masasına kondurun.

4. Analizler için yapılandırılmış veri elde etmek

  1. Bir hareket analizi yazılımı uygulaması seçin (örneğin, DeepLabCut; bkz. https://www.mackenziemathislab.org/deeplabcut). Bilgisayara DeepLabCut'u kurun, https://deeplabcut.github.io/DeepLabCut/docs/installation.html'daki kullanıcı rehberini takip edin. DeepLabCut kullanmıyorsanız, daha fazla yön için seçilen yazılımın bilgileri ve kullanıcı rehberine bakabilirsiniz.
  2. Model eğitimi için DeepLabCut'a dört ila beş video yükleyin ve her video için 20–30 kare çıkarın. En az üç ana takip noktası (örneğin, baş, gövde, kuyruk) tanımlanır ve ağı bu noktaları çerçeveler arasında takip etmesi için eğitir.
    NOT: Daha fazla bilgi için https://deeplabcut.github.io/DeepLabCut/docs/standardDeepLabCut_UserGuide.html adresindeki DeepLabCut kullanıcı rehberine bakabilirsiniz. Temsil eden sonuçlar, beş videodan etiketlenmiş 22 kare ve 3 takip noktası kullanılarak gerçekleştirilmiştir.
  3. Modeli eğitmek için ResNet-101 tabanlı bir sinir ağı kullanın. Eğitimi tamamlamak için gereken yineleme sayısını belirleyin (100.000 ile 200.000 arasında önerilmektedir). 0.5 ile 1 arasında bir p-kesme değeri belirleyin.
    NOT: Temsilci sonuçlar için, modeli 0.7 p-kesme oranıyla eğitmek için 150.000 iterasyon kullanıldı. Eğitilen ağ 0.7 p-kesme sınırının altına düşerse, video kontrastını artırmak veya etiketleme konvansiyonunu değiştirmek bu sorunu çözecektir.
  4. Kalan deneysel videolara tam eğitilmiş DeepLabCut modelini uygulayın. Her deneme için konumsal veriler çıkarın. https://deeplabcut.github.io/DeepLabCut/docs/beginner-guides/Training-Evaluation.html kullanıcı rehberini takip edin.
    NOT: Temsilci sonuçlar için 2 karıştırma ile doğrulama yaptık ve test hatasının 2 piksel:tren 4 piksel (1600 x 820 piksel boyutunda) olduğunu belirledik. Ağ, mevcut deneysel kurulumdan elde edilen deneysel videoları analiz etmek için kullanıldı.
  5. Python gibi kodlama yazılımlarını kullanarak eşit genişlikteki üç dikey arena bölgesi boyunca hareketi tanımlayıp analiz ederek tercihi nicelikle ölçebilirsiniz. İzleme gürültüsünü azaltmak için belirlenen bölgedeki en az iki vücut noktası ile bölgedeki zamanı ölçün. Şu formülü kullanın: Bölgedeki toplam zaman = (Bölgedeki toplam kare)/(Toplam kare sayısı).
  6. Eğer bir tigmotaksis ölçüsü isteniyorsa, bölgeleri tank duvarlarından bir zebrafish'in tam vücut uzunluğuyla nicelikle ölçün; bu, deneklerin dikey sınıra yakın kalma pasif eğilimini ölçecektir. Bu ölçüm en uygun olanı nispeten daha büyük deneysel tanklar için uygundur.
  7. Hareketsiz kalan zamanı tanımlamak ve ölçmek için aynı kodlama yazılımını kullanın (örneğin, donma). Hareket eşiğini kare başına 2–5 piksel olarak tanımlayın ve ardışık kare sayısı minimum 15 kare olsun.
    NOT: Temsil eden sonuçlar için, dondurma eşiği 15 kare için kare başına 3 piksel eşik olarak belirlendi.
  8. İstatistiksel analiz ve görselleştirme için ölçümleri derleyip dışa aktarmak.
    NOT: Veri analizi için https://github.com/farhanaugustine/DeepLabCut-Analysis-Jupyter-Scripts. Biz

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Yukarıda belirtilen düşük maliyetli yöntemleri doğrulamak için, Velkey ve S. AL.33, mevcut düşük maliyetli kurulumla çoğaltıldı. Denekler (N = 23, 11 erkek ve 12 kadın) solda yapay hareketli mobil (düşük isayetli) sosyal uyaranlar ve sağda canlı sığ (yüksek isayetli) sosyal uyaranlar sunuldu (Şekil 2); öncekiçalışmalar 33,34 OTFST kullanılarak uyarıcı pozisyonunun herhangi bir...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Mevcut protokol, 3 odalı OTFST'nin mevcut düşük maliyetli adaptasyonunun, yetişkin zebrabalıklarda bölgede geçirilen zamanla ölçülen sosyal tercihleri güvenilir şekilde karakterize etmek için kullanılabileceğini göstermektedir. Ucuz yapı malzemeleri, USB bağlantılı web kamerası ve açık kaynak edinim ve analiz yazılımı uygulamaları kullanılarak, mevcut sistem, zebra balığının daha düşük isabetli hareketli modellere tercih ettiği canlı eş türlerinin kalabalığını tercih ettiği bulgusunu baş...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar çıkar çatışması belirtmemektedir. Fon sağlayıcıların çalışmanın tasarımında hiçbir rolü yoktu; veri toplama, analiz veya yorumlama; el yazması yazımında; veya sonuçların yayımlanma kararında.

Teşekkürler

Yazarlar, Christopher Newport Üniversitesi'ndeki TheFishLab ekibinden Rommel Pagkalinawan, Robby Buck, Elizabeth Hiltz, Haley Dewitt, Maia Tankersley, Alexis Thai-Nguyen, Grady Fleming, Jacob Young ve Jack Medlin'e doğrulama deneyi için hayvancılık ve veri toplama konusundaki katkıları için teşekkür etmek ister. Yazarlar ayrıca Samantha Commons'a Topluluk Kaptanları Yaz 2025 Programı sırasında verdiği yardımlar, mevcut yüksek maliyetli kurulumun tüm bileşenlerinin envanterini ve düşük maliyetli kurulumun envanterini yapması için teşekkür etmek isterler. Yazarlar ayrıca Christopher Newport Üniversitesi Öğrenci Araştırma ve Yaratıcı Aktivite Ofisi'ne, lisans Yaz Bilginleri Programı kapsamında K.K.'ye sağlanan fon için teşekkür etmek isterler. Şekil 2, Kinslow, K. (2025) tarafından BioRender'da oluşturulmuştur. https://BioRender.com/wbf0wph.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

```html
Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
10-Gallon AquariumAqueon, Inc. Franklin, WI, USA#100110010yerel evcil hayvan malzeme mağazasından satın alındı (1 ila 4)
12 Adet 1-inç T-Boru KelepçeleriJoyHua Trade, ChinaASIN #B0DF19DJF1Amazon.com'dan satın alındı (1)
2-gang elektrik kutusuSigma Engineered Solutions, Raleigh, NC, USA# 14350yerel hırdavattan satın alındı (1)
3/4" Gümüş-Metalik elektriksel metal(EMT) Boru - 10-fitWheatland Tube, Inc., Wheatland, PA, USA#0550110000yerel hırdavattan satın alındı (3)
3-iletken kabloUtilitech, Inc., Charlotte, NC, USAUT010710yerel hırdavattan satın alındı (1)
3-dişli prizEaton, Inc., Beachwood, OH, USA#270W-SP-LWyerel hırdavattan satın alındı (1)
3-yollu Hava ValfiPenn-Plax, Inc. 35 Marcus Blvd. Hauppauge, NY, USAModel VN3yerel evcil hayvan malzeme mağazasından satın alındı (1)
A4 Kart Stoku (beyaz), laminedeğişkendeğişkenkampüs kitapçısından satın alındı (2)
Aktif biyo-filtre Penguen 100Spectrum Brands Pet, LLC, Blacksburg, VA, USA#PF00100Byerel evcil hayvan malzeme mağazasından satın alındı (1 ila 4)
Akvaryum Hava TüpleriPenn-Plax, Inc. 35 Marcus Blvd. Hauppauge, NY, USAModel AS6Qyerel evcil hayvan malzeme mağazasından satın alındı (3)
Akvaryum Hava TüpleriPenn-Plax, Inc. 35 Marcus Blvd. Hauppauge, NY, USAModel STD8yerel evcil hayvan malzeme mağazasından satın alındı (1)
Siyah Kumaş İkiz Çarşaflar (167,6 cm X 243,8 cm)Royale Linens, Inc., Melville, NY, USA#00011342258875Amazon.com'dan satın alındı (3)
Brio 4k Web KamerasıLogitech International S.A., Lausanne, Switzerland960-001419Amazon.com'dan satın alındı (1 ila 3)
Bilgisayar (Open Broadcaster Studio & 1-3 Web Kamerası çalıştırmak için yeterli)Dell, Inc., Round Rock, TX, USAOptiPlex Micro 7010dell.com'dan satın alındı (1)
Aydınlatılabilir ışık yayan diyot (LED) düz panel ışığıLithonia Lighting-Acuity Brands, Inc. Conyers, GA, USACTCL-153P-WHAmazon.com'dan satın alındı (1)
E-Z Up Toz Kapsamı Direk (2 Paket)Trimaco, Inc., Cary, NC, USA# 00047034547330Amazon.com'dan satın alındı (1)
Ayakkabı Donanım İplikdeğişkenDeğişkenyerel hırdavattan satın alındı (1)
Lineer polarize filtrelerB&H Foto & Elektronik, Inc., New York, NY USARosco #7300çevrimiçi olarak satın alındı (7)
Open Broadcaster YazılımOBS Projectv32.0.0https://obsproject.com adresinden indirildi (1)
Polikarbonat Levha (0,38"/9,6mm kalınlığında)Spectraglass, ltd., Perth, ScotlandUPC # 608037376817Amazon.com'dan satın alındı (1)
polivinil klorür (PVC) Çimento, 4 oz kutusuThe AZEK Co, Chicago, IL, USA#ARAD0004OZyerel hırdavattan satın alındı (1)
Çerçevesiz 5,5-Galon AkvaryumAqueon, Inc. Franklin, WI, USA#100541424yerel evcil hayvan malzeme mağazasından satın alındı (3)
Kendiliğinden yapışkan beyaz plastik filmCON-TACT Marka, La Miranda, CA, USA#16F-C9A952-06yerel hırdavattan satın alındı (1)
Kaydırma Dimmer anahtarıLutron, Inc., Cooperburg, PA, USA#LECL-150H-WHyerel hırdavattan satın alındı (1)
küçük kasnakdeğişkenDeğişkenyerel hırdavattan satın alındı (1)
Su altı 50W ısıtıcılar (26C'ye ön ayarlanmış)Aqueon, Inc. Franklin, WI, USA#100106251yerel evcil hayvan malzeme mağazasından satın alındı (3 ila 7)
Süper Kelepçe Kamera MontajıJINSUI, ChinaX0040GEYLRAmazon.com'dan satın alındı (1 ila 3)
Tetra Whisper 10 Akvaryum Hava PompasıSpectrum Pet, Home & Garden, Inc., Middleton, WI, USAUPC #046798778516yerel evcil hayvan malzeme mağazasından satın alındı (1)
Hava koşullarına dayanıklı 2-gang elektrik muhafazasıHubbell, Inc., Shelton, CT, USA#MM2420Cyerel hırdavattan satın alındı (1)
Beyaz PVC Levha 1/4" x 24" 48"Royal Building Products, Bristol, TN, USA#3101yerel hırdavattan satın alındı (2)
Beyaz PVC Döşeme Levhası, nominal 1 x 2 (0,75" x 1/5" x 96")Royal Building Products, Bristol, TN, USA#7832-8yerel hırdavattan satın alındı (1)
```

Kaynaklar

  1. Seo, H., Lee, D. Neural basis of learning and preference during social decision-making. Curr Opin Neurobiol. 22 (6), 990-995 (2012).
  2. Bray, J., et al. Social bonds predict dominance trajectories in adult male chimpanzees. Anim Behav. 179, 339-354 (2021).
  3. Tibbetts, E. A., Pardo-Sanchez, J., Weise, C. The establishment and maintenance of dominance hierarchies. Philos Trans R Soc B. 377 (1845), 20200450(2022).
  4. Chase, I. D., Tovey, C., Spangler-Martin, D., Manfredonia, M. Individual differences versus social dynamics in the formation of animal dominance hierarchies. Proc Natl Acad Sci U S A. 99 (8), 5744-5749 (2002).
  5. DeLorey, T. M., et al. Gabrb3 gene deficient mice exhibit impaired social and exploratory behaviors, deficits in non-selective attention and hypoplasia of cerebellar vermal lobules: a potential model of autism spectrum disorder. Behav Brain Res. 187 (2), 207-220 (2008).
  6. Lee, J., Green, M. F. Social preference and glutamatergic dysfunction: underappreciated prerequisites for social dysfunction in schizophrenia. Trends Neurosci. 39 (9), 587-596 (2016).
  7. Fortier, A. V., et al. Prefrontal circuits guiding social preference: implications in autism spectrum disorder. Neurosci Biobehav Rev. 141, 104803(2022).
  8. Weiner, J. Social Relationships of Individuals with ADHD Across the Lifespan. Clinical Handbook of ADHD Assessment and Treatment Across the Lifespan. Matson, J. , Springer. Cham. (2023).
  9. Toth, I., Neumann, I. D. Animal models of social avoidance and social fear. Cell Tissue Res. 354, 107-118 (2013).
  10. Guo, M., Sun, L. From rodents to humans: rodent behavioral paradigms for social behavioral disorders. Brain Circ. 9 (3), 154-161 (2023).
  11. Geng, Y., Peterson, R. T. The zebrafish subcortical social brain as a model for studying social behavior disorders. Dis Model Mech. 12 (8), dmm039446(2019).
  12. Ogawa, S., Pfaff, D. W., Parhar, I. S. Fish as a model in social neuroscience: conservation and diversity in the social brain network. Biol Rev. 96 (3), 999-1020 (2021).
  13. Moss, S. M. Notes on the habits of a domesticated white rat, and a terrier dog (Flora), that lived in harmony together. Mag Nat Hist. 9, 182-185 (1836).
  14. Kietzman, H. W., Gourley, S. L. How social information impacts action in rodents and humans: the role of the prefrontal cortex and its connections. Neurosci Biobehav Rev. 147, 105075(2023).
  15. Bryda, E. C. The mighty mouse: the impact of rodents on advances in biomedical research. Mo Med. 110 (3), 201-211 (2013).
  16. Nadler, J. J., et al. Automated apparatus for quantitation of social approach behaviors in mice. Genes Brain Behav. 3 (5), (2004).
  17. Yang, M., Silverman, J. L., Crawley, J. N. Automated three-chambered social approach task for mice. Curr Protoc Neurosci. 56, 8.26.1-8.26.16 (2011).
  18. Zhao, C., Gammie, S. C. The circadian gene Nr1d1 in the mouse nucleus accumbens modulates sociability and anxiety-related behaviour. Eur J Neurosci. 48 (3), 1924-1943 (2018).
  19. Arakawa, H. Revisiting sociability: factors facilitating approach and avoidance during the three-chamber test. Physiol Behav. 272, 114373(2023).
  20. Crawley, J. N. Designing mouse behavioral tasks relevant to autistic-like behaviors. Ment Retard Dev Disabil Res Rev. 10 (4), 248-258 (2004).
  21. Ehninger, D., et al. Gestational immune activation and Tsc2 haploinsufficiency cooperate to disrupt fetal survival and may perturb social behavior in adult mice. Mol Psychiatry. 17 (1), 62-70 (2012).
  22. Ward, A. J. W., Kent, M. I. A., Webster, M. M. Social recognition and social attraction in group-living fishes. Front Ecol Evol. 8, 15(2020).
  23. Gerlai, R. Misbehaving fish: the role of these simple vertebrates in the analysis of human brain function and dysfunction. Brain Res. 1863, 149795(2025).
  24. Norton, W., Bally-Cuif, L. Adult zebrafish as a model organism for behavioural genetics. BMC Neurosci. 11 (1), 90(2010).
  25. Faustino, A. I., Tacão-Monteiro, A., Oliveira, R. F. Mechanisms of social buffering of fear in zebrafish. Sci Rep. 7, 44329(2017).
  26. Akinrinade, I. D., Varela, S. A. M., Oliveira, R. F. Sex differences in social buffering and social contagion of alarm responses in zebrafish. Anim Cogn. 26 (4), 1307-1318 (2023).
  27. Ariyasiri, K., et al. Pharmacological (ethanol) and mutation (sam2 KO) induced impairment of novelty preference in zebrafish quantified using a new three-chamber social choice task. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 88, 53-64 (2018).
  28. Angiulli, E., et al. Increase in environmental temperature affects exploratory behaviour, anxiety and social preference in Danio rerio. Sci Rep. 10 (1), 5385(2020).
  29. Lindeyer, C. M., et al. Nonapeptide influences on social behaviour: effects of vasotocin and isotocin on shoaling and interaction in zebrafish. Behaviour. 152 (7-8), 897-915 (2015).
  30. Landin, J., et al. Oxytocin receptors regulate social preference in zebrafish. Sci Rep. 10 (1), 5435(2020).
  31. Aslanzadeh, M., et al. The body size of stimulus conspecifics affects social preference in a binary choice task in wild-type, but not in dyrk1aa mutant, zebrafish. Zebrafish. 16 (3), 262-267 (2019).
  32. Ribeiro, D. Oxytocin receptor signalling modulates novelty recognition but not social preference in zebrafish. J Neuroendocrinol. 32 (4), e12834(2020).
  33. Velkey, A. J., et al. High fidelity: assessing zebrafish (Danio rerio) responses to social stimuli across several levels of realism. Behav Processes. 164, 100-108 (2019).
  34. Velkey, A. J., Koon, C. H., Danstrom, I. A., Wiens, K. M. Female zebrafish (Danio rerio) demonstrate stronger preference for established shoals over newly-formed shoals in the three-tank open-swim preference test. PLoS One. 17 (9), e0265703(2022).
  35. Velkey, A. J., et al. Zebrafish (Danio rerio) prefer undisturbed shoals over shoals exposed to the synthetic alarm substance hypoxanthine-3N-oxide (C5H4N4O2). Biology. 14 (3), 233(2025).
  36. Canzian, J., Fontana, B. D., Quadros, V. A., Rosemberg, D. B. Conspecific alarm substance differently alters group behavior of zebrafish populations: putative involvement of cholinergic and purinergic signaling in anxiety- and fear-like responses. Behav Brain Res. 320, 255-263 (2017).
  37. Do Nascimento, B. G., Maximino, C. Social investigation and social novelty in zebrafish: roles of salience and novelty. Behav Processes. 210, 104903(2023).
  38. Bolgan, M., O’Brien, J., Gammell, M. The behavioural repertoire of Arctic charr (Salvelinus alpinus (L.)) in captivity: a case study for testing ethogram completeness and reducing observer effects. Ecol Freshw Fish. 25 (2), 318-328 (2016).
  39. Thomsen, H., Jensen, T. H., Ydesen, K., Madsen, N. Use of ethograms to analyse shoaling behaviour of mackerel (Scomber scombrus) in an aquarium. Genet Biodivers J. , (2020).
  40. Rodriguez, A., et al. ToxTrac: a fast and robust software for tracking organisms. Methods Ecol Evol. 9 (3), 460-464 (2018).
  41. Pereira, T. D., et al. SLEAP: a deep learning system for multi-animal pose tracking. Nat Methods. 19 (4), 486-495 (2022).
  42. Mathis, A., et al. DeepLabCut: markerless pose estimation of user-defined body parts with deep learning. Nat Neurosci. 21 (9), 1281-1289 (2018).
  43. Gerlai, R. Social behavior of zebrafish: from synthetic images to biological mechanisms of shoaling. J Neurosci Methods. 234, 59-65 (2014).
  44. Collar, D. C., Thompson, J. S., Ralston, T. C., Hobbs, T. J. Fast-start escape performance across temperature and salinity gradients in mummichog Fundulus heteroclitus. J Fish Biol. 96 (3), 755-767 (2020).
  45. Collar, D. C., Hobbs, T. J., Thompson, J. S. Scaling of fast-start performance and its thermal dependence in mummichog Fundulus heteroclitus. J Fish Biol. 104 (3), 611-623 (2024).
  46. Collar, D. C., Stanley, K. L., Thompson, J. S. Fast-start performance and its dependence on temperature and salinity in sheepshead minnow (Cyprinodon variegatus). Environ Biol Fishes. 108 (10), 1515-1530 (2025).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Zebrafish Sosyal DavranışıÜç Odalı GörevDeepLabCut Takibiİşaretçisiz Poz TahminiDavranışsal Video AnaliziDüşük Maliyetli KurulumSosyal EtkileşimNörodavranışsal Araştırma