Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

OS-DCE OAI kullanılarak kanser ve yara iyileşmesinin pre-klinik modellerinde oksijenasyon ve damar perfüzyonun değerlendirilmesi

276 görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/70689

⸱

7 Nisan 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Medical Physics, University of Wisconsin, 2University of Texas MD Anderson Cancer Center

Bu makalede

Özet

Burada, kanser ve yara iyileşmesinin klinik öncesi modellerini değerlendirmek için Oksijen Duyarlı – Dinamik Kontrastlı Optoakustik Görüntüleme (OS-DCE OAI) uygulamak için bir protokol sunuyoruz. OS OAI, oksi ve deoksihemoglobini görüntüleyebilir, doku oksijenlenmesini haritalayabilir. DCE-OAI, dıştan bir kontrast ajanın farmakokinetiklerini görebilir, böylece damar perfüzyonu haritalanır.

Özet

Oksijene duyarlı optoakustik görüntüleme (OS OAI) ve dinamik kontrastla artırılmış optoakustik görüntüleme (DCE OAI), doku fizyolojisinin tamamlayıcı, invaziv olmayan okumalarını sağlar. OS OAI, endogen oksihemoglobin ve deoksihemoglobinin multispektral tespitini kullanarak kan oksijen doygunluğu (%sO₂) haritalarını oluştururken, DCE OAI neredeyse kızılötesi absorberin in vivo farmakokinetiklerini takip ederek vasküler perfüzyon ve geçirgenliği nicelikle ölçülür. Bu protokolün amacı, oksijenasyon ve perfüzyonun eşzamanlı olarak değerlendirilmesini sağlayan birleşik bir OS-DCE OAI iş akışı sunmaktır: ortotopik meme kanseri tümörleri ve tam kalınlıktaki deri yaraları.

Bu protokolde, meme kanseri veya kesik yarası fare modellerinin OAI'sini gösterdik. OS OAI için, spektral karışıklık ve %sO₂ tahmini sağlamak için 700–875 nm aralığında çok dilimli multispektral taramalar elde edilir. DCE OAI için, ≤5-s zamansal çözünürlükte tekrar yapılan alımlar, indosiyanin yeşilinin (ICG) intravenöz bolus enjeksiyonundan önce ve sonra yapılır; bu yöntem 700-875 nm'de multispektral numuneleme veya 800 nm'de tek dalga boylu örnekleme kullanılarak OA sinyal genlik eğrilerine karşı zaman oluşturulur. Hayvan modellerinin geliştirilmesi, OA görüntüleme için hazırlık, OS OAI ve DCE OAI edinimleri ve oksijenasyon ile damar perfüzyon özelliklerini ölçmek için analizler detaylandırılmıştır; ayrıca hareket artefaktları, yüzeysel emiciler ve başarısız enjeksiyonlar için temel sorun giderme rehberliği yer almaktadır.

Bu OS-DCE OAI protokolü birlikte, hipoksi ve damar taşınımının entegre fonksiyonel portresini sunar; bu portre, tümör ve yaralardaki fizyolojik değişiklikleri genel anatomik ölçümlerden daha önce tespit edebilir. OS-DCE OAI, diğer hastalık modellerine kolayca uyarlanabilir.

Giriş

Optoakustik görüntüleme (OAI), fotoakustik görüntüleme veya multispektral optoakustik tomografi olarak da adlandırılır, optik uyarılmayı ultrason (US) algılamayla birleştirerek derin doku görüntülemesini mümkün kılan nispeten yeni birmodalitedir 1,2. OAI'de, kısa nanosaniyelik lazer darbeleri, oksi ve deoksihemoglobin gibi endogen kromoforları uyarır; bu da ABD dönüştürücüleri tarafından tespit edilen lokal termoelastik genleşme ve geniş bant akustik dalgalar üretir. Bu sinyaller, OAI'nin ultrason benzeri uzamsal çözünürlükte optik kontrastlı görüntüler üretmesini sağlarken, in vivo santim ölçeğinde görüş derinliği elde eder. Veriler birden fazla dalga boyunda toplanıp spektral karıştırma ile analiz edildiğinde, Oksijen Duyarlı (OS) OAI oksi ve deoksihemoglobin konsantrasyonlarını tahmin edebilir ve böylece doku oksijen doygunluğunu (%sO₂)2 çıkarabilir. Kan oksijen doygunluğu, diğer yöntemlerle invaziv olmayan şekilde erişilmesi zor olan mikrovasküler fizyolojinin fonksiyonel bir değerlendirmesini sağlar.

Damar perfüzyonu ayrıca mikrovasküler fizyolojinin değerlendirilmesinde de faydalıdır. Damar perfüzyon, damar akışı, geçirgenlik ve damar yüzeyalanının bir kombinasyonunu temsil eder 3. Perfüzyonu niceliklendirmek için, OAI dışsal kontrast maddesiyle birlikte Dinamik Kontrast Artırılmış OAI (DCE OAI) uygulanabilir. Bu yaklaşımda, kontrast madde enjeksiyonundan önce, sırasında ve sonrası zamansal görüntüleme, ajanın farmakokinetik (PK) özelliklerini izler. Bu sonuçlar, kan plazma bölmesinden tümör ekstravasküler bölmesine wash-in oranını (NKtrans) ve tümör ekstraselüler ekstravasküler bölmesinden plazma bölmesine yıkama oranını (kep) ölçmek için modellenebilir. Işık akıcılığı (yani, dokuda değişken radyant enerjiye neden olan dokularda saçma ve emilim) kötü şöhretli sorunundan kaçınan bir PK modelleme yöntemi geliştirdik.4. Yöntemimiz, dinamik OAI sinyalindeki değişimi %0'dan (enjeksiyon öncesi) %100'e (maksimum artırma) normalleştirir ve ardından diferansiyel denklemler kullanarak NKtrans yıkama oranını ve kep'i tahmin eder. Diğer DCE OAI çalışmaları, ışık akıcılığının doku genelinde uniform olduğu varsayımından etkilenen standart PK modellemeyöntemleri kullanmıştır 5,6.

DCE OAI sonuçları, Maksimum Sinyal Artışı (MSE), MSE'ye ulaşmak için Zirve Zamanı (TTP), eğim (genellikle TTP'ye enjeksiyon için) ve Eğri Altındaki Başlangıç Alanı (IAUC; yine genellikle enjeksiyon sonrası TTP'ye enjeksiyon için) ampirik ölçümleri yapılarak yıkama oranlarını değerlendirmek için kullanılabilir. TTP PK eğrisinin ilerleyen dönemlerinde gerçekleşirse, eğim veya IAUC eğrinin lineer kısmında veya enjeksiyon zamanından enjeksiyondan 1 dakika sonrasına kadar alınabilir. Ampirik ölçümlerin, tümör modellerine uygulanan tedavileri değerlendirirken veya yara iyileşmesinideğerlendirirken de faydalı olabileceğini gösterdik 8,9. Diğer çalışmalar da tümör damar geçirgenliği ve karaciğer fibrozisini değerlendirmek için ampirik ölçümlerin kullanılmasınındeğerini göstermiştir 10,11. PK eğrisinin şekli, tümör vasküler perfüzyonu yüksek veya düşük 12,13,14 olarak niteliksel olarak kategorize etmek için de kullanılabilir.

Ayrıca, enjeksiyon sonrası tek bir zaman noktasında OAI sinyali, perfüzyonun ampirik bir değerlendirmesi olarak kullanılabilir; bu da dinamik olmayan Kontrastlı OAI (CE OAI) olarak bilinir.15. Parlak bir tümör veya yarayı gösteren CE OA görüntüsü basit ve oldukça görseldir, ancak genellikle sadece yüksek ve düşük perfüzyonun niteliksel değerlendirmesi için kullanılır. Genel olarak, TTP sonrası OAI sinyallerindeki dinamik değişim, tümörlerde vasküler perfüzyonun ampirik olarak değerlendirilmesi için analiz edilmez. Ancak aşağıda gösterildiği gibi, yaralarda yıkama oranları son derece hızlıdır, bu yüzden NKtrans, TTP, eğim ve IAUC ölçülmesi zordur. Bu nedenle, yıkama fazının doğrusal veya üstel eğimi, yaralarda vasküler perfüzyonun ampirik ölçüsüolarak kullandık 9.

Çoğu OAI ajanı, dokulara daha derin nüfuz edebilen yakın kızılötesi (NIR) dalga boyluğuaralığında emilir; bu da dokulara daha derinlemesine nüfuz edebilir. Ancak, 900 nm'den büyük dalga boylarında su emilimi çoğu uygulama için kullanılabilir in vivo OAI dalga boyu aralığını 700–900 nm ilesınırlar. 2. Indocyanine green (ICG), 780–800 nm aralığında güçlü NIR emilimi sunması, orta derecede güçlü bir OAI sinyali üretmesi ve klinik kullanım için FDA onayıyla avantajlı biyouyumluluk sağlaması nedeniyle prototipik bir DCE OAI ajanıdır. Bu özellikler, intravasküler kontrast ve yorumlanabilir PK eğrilerini mümkün kılar.

Katı tümör ve yaraların pre-klinik modellerinde oksijenasyon ve vasküler perfüzyonu değerlendirmek için birleşik bir OS-DCE OAIprotokolü geliştirdik 8,9. Bu protokolün işletim sistemi kısmı, fare modellerinde tüm tümör ve yara hacimlerini kapsayabilen birden fazla görüntüleme diliminde oksijenasyonu değerlendirebilir. Protokolümüzün DCE kısmı, birden fazla lazer dalga boyu kullanarak tümör veya yaranın tek bir dilimini görüntüleme (kontrast maddesi algılama doğruluğunu artırmak) veya tek bir lazer dalga boyuyla 5 dilimi görüntülemek (mekânsal kapsamayı artırma) seçeneğine sahiptir. Tümör modelini radyoterapi veya damar bozucumadde olan combretastatin A4 fosfat ile tedavi edildikten sonra oksijenasyon ve damar perfüzyonundaki değişimi izlemek için OS-DCE OAI kullandık. Ayrıca yara iyileşmesini izlemek için OS-DCEOAI kullandık 9. DCE OAI, OAI'ye çeşitli hastalıklara uygulanabilecek damar perfüzyonu yoluyla ilerlemeyi izleme yeteneği verir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm işlemleri kurumunuzun Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi'nin (IACUC) onayı altında yürütün. Aşağıdaki protokoldeki tüm prosedürler kurumumuzun IACUC tarafından onaylanmıştır.

1. Anestezi (sonraki işlemler için)

  1. Anestezi başlatın. Başlangıçta %5 isofluran ile %100 oksijen taşıyıcı gazda anestezi indükte ve sürdürün, ta ki fare artık uyanık olmayana kadar.
  2. Anestezi sürdürün. Fareyi %100 oksijen taşıyıcı gazda %1,5–2 izofluran ile anestezi etmeye devam edin. Pedal refleksinin olmadığını doğrulayın.
  3. Norotermiyi koruyun. Hayvanları sıcak bir yüzeyde tuttuğuna ve anestezi süresi boyunca sıcaklığı takip ettiğinden emin olun.
    NOT: (Duraklama noktası) Hayvan tamamen anestezi edildikten sonra tümör implantasyonuna veya yara oluşumuna devam edin.

2. Modelin hazırlanması

NOT: Tüm hücre çalışmaları, maruziyet ve potansiyel kontaminasyonu önlemek için biyogüvenlik dolabında yapılmalıdır.

  1. 4T1 ortotopik tümör modeli oluşturun (Şekil 1).
    1. Hücreleri buz üzerinde hazırlayın: 4T1 hücrelerini buz gibi soğuk PBS'ye 2 ×10 7 hücre/mL konsantrasyonda yeniden süzülür.
    2. Hücreleri matriksle karıştırın: Hücre süspansiyonunu 1:1 (v/v) ile buz gibi soğuk biyolojik hidrojel ile birleştirin; bu hidrojel zengin bir ekstrasellüler matrisine sahip. Bu kombinasyon, 1 ×10 7 hücre/mL oranında hücrelerden oluşan bir çözelti elde etmelidir.
    3. Şırıngayı yükleyin: Hücre karışımını, hacmi 1.0 mL'den büyük olmayan steril bir laboratuvar şırıngasına yükleyin. Hacmi enjeksiyon başına 100 μL ile sınırlayın (1 × 106 hücre). Seçenek olarak, şırıngayı nazikçe 30 °C'ye ısıtın; böylece biyolojik hidrojel biraz viskoz hale gelir ve enjeksiyon noktasında daha odaklı tutulur.
      DIKKAT: Şırıngaların keskin olduğuna dikkat edin ve kap değiştirmeden kaçının.
    4. Fareyi bölüm 1'de anetize edildiği gibi anestezi edin.
    5. Varsa tüylerini çıkarın: Göğüs pedini depilasyon yapın. Athimik çıplak fare kullanıyorsanız bu adımı atlayın.
    6. İğneyi konumlandırın ve enjekte edin: 4. inguinal meme yağ pedini sterilize edin. İğne eğimini yerleştirin ve reflü önlemek için yağ pedine yavaşça 100 μL enjekte edin.
    7. Hayvanı anesteziden kurtarın: Fareyi ısıtılmış bir kafese geri götürün ve fareyi ambulatorize hale gelene kadar izleyin.
    8. Tümörün büyümesine izin verin: 4T1 tümörlerin görüntülemeden önce en az 0,3 cm çapına ulaşması için 8-10 gün bekleyin.
      NOT: Daha büyük çaplı tümörler de görüntülenebilir. Tümörün çapı, kalibre edilmiş vernier kaliper ile ölçülebilir. IACUC (veya eşdeğer bir kurumsal komite) tarafından onaylanan maksimum çapı aşan tümörler ötenazi yapılmalıdır. Ortotopik enjeksiyonu takip edin ve hücre sayı/hacmini istenen naklet protokolüne göre uyarlayın.
  2. Bir farede eksizyon yarasının oluşumu (Şekil 2)
    1. Cerrahi alanı hazırlayın: Çalışma alanını ve aletleri sterilize edin.
    2. Fareyi bölüm 1'de anetize edildiği gibi anestezi edin.
    3. Varsa tüyleri çıkarın: Dorsal bölgeyi depilize edin. Athimik çıplak fare kullanıyorsanız bu adımı atlayın.
    4. Analjezi uygulayın: Faresi steril cerrahi yüzeye sabitleyin. Dorsal bölgeye buprenorfin 0,05–0,1 mg/kg deri altına (SC) enjekte edin.
    5. Yara bölgesini dezenfekte edin: Sırt cildini povidon-iyot ile dezenfekte edin ve ardından %70 etanol ekleyin.
    6. Bir eksizyon yara oluşturun: Bölgeyi çizmek için 6 mm biyopsi punch kullanın. Deriyi ve panniculus carnosus'u keserek tam kalınlıkta bir kusur oluşturun.
    7. Silikon atelin yerine oturtuğu:
      1. Yaranın etrafına donut şeklinde silikon bir atel merkezlendirin. Yarığın iç çapının sarının çapından 2–4 mm büyük olduğundan ve atel genişliğinin ~5 mm olduğundan emin olun.
      2. Silikon malzemeden yapılmış bir levhadan donut şeklinde silikon bir atel kesin. Ateli, yerine dikmek için şeffaf bir dikiş malzemesi kullanın. Gerekirse, halkayı yerleştirmek için ince bir yapışkan film kullanın.
        NOT: Pigmentli dikiş malzemeleri NIR ışığını emebilir ve bu nedenle kullanılmamalıdır.
    8. Ateli dikin: Atelin çevresindeki cilde boğulmadan sabitlenmesi için sekiz eşit aralıklı kesinti dikişi yerleştirin.
    9. Oklüzyon pansman uygulayın: Yatağı korumak ve yara ortamını standartlaştırmak için yarayı ve atelini kapatmak için oklüzyon bir pansman ile örtün.
    10. Hayvanı anesteziden kurtarın: Fareyi ısıtılmış bir kafese geri götürün ve fareyi ambulatorize hale gelene kadar izleyin.
    11. Hayvanın iyileşmesine izin verin: Çalışma tasarımına göre veya yara tamamen iyileşene kadar günlük bakım ve değerlendirmelere devam edin.
    12. Pansumanı her gün değiştirin: Kontaminasyonu sınırlamak ve sterilliği korumak için görüntüleme veya fotoğraf sonrası her gün oklüzyon pansmanı değiştirin.
      NOT: (Kritik adım) Yarayı atel ile kasılmayı bastırmak ve yeniden epitelizasyonu teşvik etmek, böylece insan iyileşmesine translasyonel önemi artırmak. (Duraklama noktası) Sarıyı uyguladıktan sonra, bir sonraki planlanan değerlendirme veya görüntüleme seansına kadar durun.

3. OS-DCE OAI edinim protokolleri

  1. OAI taraması için bir fare ve kontrast maddesini hazırlayın.
    1. Kontrast maddesini hazırlayın.
      1. Steril suda 1,62 mM ICG kontrast maddesi çözeltisi hazırlayın. Çözeltiyi 0.3 μm şırınga filtresiyle filtreleyin. Steril bir laboratuvar şırıngasını bu çözeltinin 100 μμL ile doldurun.
        NOT: Bu doz, 775 g/mol ICG moleküler ağırlığına göre 162 nmol veya 125,5 μμg'dir. Doz, fare vücut ağırlığının yaklaşık 20 g ağırlığında olduğu düşünüldüğünde fare vücut ağırlığının 6,28 mg/kg'ıdır. Hayvan eşdeğeri dozu, insan eşdeğeridoz 18'in 12,3 katıdır. Bu nedenle, insan eşdeğer dozu 0,51 mg/kg vücut ağırlığıdır. İnsanlar için maksimum tolere edilen doz 2 mg/kg 19'dur. Bu nedenle, bu pre-klinik çalışmada kullanılan doz, insanlarda maksimum tolere edilen dozun yaklaşık dörtte bir parçasıdır.
    2. OAI tarayıcısını hazırla.
      1. Görüntüleme tankını deiyonize ve damıtılmış su ile doldurun. <25 g vücut ağırlığına sahip bir fare için tankın sıcaklığını 36 °C'ye ayarlayın.
        NOT: Bu tank sıcaklığı, fare beşikte plastik bir poşetle sarıldığı için çekirdek vücut sıcaklığını yaklaşık 37 °C civarında tutar. Daha büyük bir fare için >25 g vücut ağırlığına sahip bir farede tankın sıcaklığı 35 °C'ye ayarlanmalıdır; çünkü daha büyük bir farede daha fazla deri altı yağ dokusu bulunur ve bu da yalıtım katmanı olarak görev yapar.
    3. Fareyi bölüm 1'de anetize edildiği gibi anestezi edin. Alım protokolünün geri kalanında farenin %100 oksijen taşıyıcı gazda %1,5–2 isofluran ile anestezi altında kalmasını sağlayın.
    4. DCE OAI yapıyorsan, venöz erişim koyun.
      1. 27 G'lik kuyruk ven kateterini hepparinli tuzlu suyla yuyun. Kateteri lateral kuyruk damarına yerleştirin ve kateteri kuyruk veninden ayrılmasını önlemek için sabitleyin (Şekil 3A). Hava kabarcıkları olmadığından emin olun.
        NOT: (Kritik adım) Kateter açıklığını korumak için heparinizlenmiş salin kullanın.
      2. Ayrıca, katetere bağlanabilecek hacmi 500 μL'den fazla olmayan steril bir laboratuvar şırıngası hazırlayın. Şırıngada 100 μL 2.14 mM ICG (~322 nmol; 20 g fare için ~16 μmol/kg) bulunduğundan emin olun.
    5. Fareyi kapayın ve beşikle ultrason jeli kullanın (Şekil 3B).
      1. Tümör veya yara bölgesine ince bir şeffaf ultrason jeli tabakası uygulayın (Şekil 3C). Ayrıca, beşik ile tümör veya yara bölgesi arasında bir mühür oluşturmak için beşiğe ultrason jeli uygulayın.
        NOT: Hava kabarcıklarını ortadan kaldırın. Bir seçenek olarak, ultrason jeli kullanılmadan önce havayı uzaklaştırmak için santrifüj yapılabilir. Ayrıca, kalın jel katmanlarında oluşan kabarcıkları önlemek için minimum miktarda ultrason jeli kullanın.
    6. Fareyi beşiğe yerleştirin (Şekil 3D): Enstrüman için üretici talimatlarına bakınız. Fareyi bir tutucuya yerleştirin, farenin burnu burun konusunun içine sıkıca girin. Farenin ellerini ve ayaklarını tutmak için manşet kullanın. Kafayı stabilize etmek için diş halkasını kullanın.
      1. (ISTEĞE BAĞLI) Fare görmezden gelirken beşiği fare burun konisi ile kullanın. Fare burnu koni, fare başını beşiğin altından kaldırır; bu, beşiğe az miktarda su sızması durumunda kazara boğulmayı önleyebilir.
    7. Fare ve beşiği OAI enstrümanına yerleştirin. Enstrüman için üreticinin talimatlarına bakın.
      1. Fare beşiğinde herhangi bir sızıntı olup olmadığını gözlemleyin. Eğer sızıntı varsa, fare ve beşiği cihazdan çıkarın ve kazara boğulmaları önlemek için fareyi beşiğe yeniden kapatın.
      2. Eğer DCE OAI isteniyorsa, kateteri kontrast maddesi ile şırıngaya bağlayın.
    8. Görüntülemeden önce fareyi dengeleyin: Görüntü alınmadan önce sıcak su tankında fare fizyolojisinin stabilizasyonu için 10 dakika bekleyin (Şekil 3E).
    9. Fareyi OAI dönüştürücüye göre konumlandırın:
      1. Üreticinin talimatlarına göre fareyi veya OAI dönüştürücüyü hareket ettirerek tümör veya yara çoklu dilimli görüntü setinde konumlandırılsın.
      2. Görüntü seti için ses hızını optimize edin. Bu adımı, görüntülemeden önce fare dengelenirken tamamlayın (adım 3.1.7).
      3. (Kritik adım) Tüm fareler için ve her zaman zaman hayvan yönelimi/dilim pozisyonunu tutarlı şekilde koruyarak titiz sonuçlar elde edin
  2. OS OAI parametrelerini ayarlayın.
    1. Görüntü dilimi parametrelerini seçin, böylece tüm tümör veya yara alanını 1 mm kalınlıkta kapsayacak şekilde birden fazla dilim görüntülenir.
    2. Soğurma dalga boylarını seçin. OS OAI için 700, 730, 760, 800, 850 ve 875 nm soğurma dalga boylarını seçin.
    3. Sinyal ortalamasını kullanın: Bir sonraki dalga boyunu elde etmeden önce ve bir sonraki görüntüleme dilime geçmeden önce her dalga boyu başına 10 ortalama elde etmek için parametreleri seçin. Dalga boyu başına 10 ortalama, her görüntü diliminin sinyal-gürültü oranını artırır.
    4. Tekrar sayısını belirleyin:
      1. Tekrar sayısını, Tablo 1'de gösterildiği gibi ayarlayarak toplam edinim süresini yaklaşık 2 dakika olarak koruyun. 10 Hz tekrar hızına sahip bir enstrüman kullanıcıları için, toplam alım süresi görüntü dilimi başına 6.0 s'dir.
      2. Fareyi bir sonraki görüntüleme dilime taşıyıp ardından ilk dilim pozisyonuna geri dönmek ortalama 0.2 saniye gerektirir, böylece her dilim 6.2 saniye sürer.
      3. Ölçüm kararlılığını sağlamak için en az 3 tekrar yapın. Daha fazla tekrar isteniyorsa toplam 2 dakikadan uzun bir alım süresi kabul edilebilir.
  3. OS OA görüntülerini edinin.
  4. DCE OAI parametrelerini ayarlayın.
    1. Birden fazla dalga boylu tek dilimli görüntüleme protokolü için DCE OAI alım parametrelerini ayarlayın.
      1. Görüntüleme dilimlerini konumlandırın. Tümör veya yara bölgesine merkezlenmiş ve 1 mm dilim kalınlığında ≤5 görüntüleme dilimini seçin.
      2. Kontrast maddesi için optimal soğurma dalga boyunu seçin. In vivo ortamda indocyanine green için dalga boyunu 800 nm olarak ayarlayın.
      3. Ortalama ve tekrar sayısını Tablo 2'de gösterildiği gibi ayarlayın. Bu öneriler, 10 Hz görüntüleme tekrarlama hızına sahip OAI cihazının kullanıcıları için zamansal çözünürlük ≤ 5 saniye ve toplam 11,0–11,2 dakika toplama süresi sağlayacaktır.
        NOT: Farklı görüntüleme tekrarlama oranına sahip diğer aletlerin kullanıcıları, her görüntü seti için zamansal çözünürlüğü ≤ 5 saniye sürdürmek için ortalama sayısını ayarlamalıdır.
    2. 3.4.1. adıma alternatif olarak, tek dalga boylu çok dilimli görüntüleme protokolü için DCE OAI alım parametreleri ayarlanabilir.
      1. Görüntüleme dilimlerini konumlandırın. Tümör veya yara bölgesine merkezli 1 mm dilim kalınlığında 5 görüntüleme dilimini ≤ seçin.
      2. Kontrast maddesi için optimal soğurma dalga boyunu seçin. In vivo ortamda indocyanine green için dalga boyunu 800 nm olarak ayarlayın.
      3. Ortalama ve tekrar sayısını Tablo 2'de gösterildiği gibi ayarlayın. Bu öneriler, 10 Hz görüntüleme tekrarlama hızına sahip OAI cihazının kullanıcıları için zamansal çözünürlük ≤ 5 saniye ve toplam 11,0–11,2 dakika toplama süresi sağlayacaktır.
        NOT: Farklı görüntüleme tekrarlama oranına sahip diğer enstrümanlar kullanıcıları, her görüntü seti için zamansal çözünürlüğü ≤ 5 saniye sürdürmek için ortalama sayısını ayarlamalıdır.
  5. DCE OA görüntülerini edinin.
    1. Temel görüntüleri kaydedin: Alıma başlayın ve 12 görüntü seti (~1 dakika) toplayın.
    2. Kontrast maddesini enjekte edin: Kateter aracılığıyla 100 μL verin ve alım devam eder.
      NOT: Bolus enjeksiyonu, kırılgan kuyruk damarındaki kateterde basınç birikmesini önlemek için yaklaşık 10–15 saniye tutarlı olmalıdır. Bu tutarlılık, manuel enjeksiyon sırasında şırınganın pistona sürekli basınçla veya otomatik enjektör kullanılarak kontrol edilebilir. Önemli olarak, 10–15 saniyelik enjeksiyon oranları, daha hızlı enjeksiyon zamanlamalarından kaynaklanan PK eğrisinde ilk geçiş kinetik yükselmeleri yaratmak yerine tümöre ilk geçiş kinetik yükselmelerini sağlar; bu da PK modellemesini ve ampirik ölçümlerin analizini iyileştirir.
      1. (Kritik adım) Enjeksiyon bölgesindeki çevre dokulara kontrast maddelerinin sızmasını önlemek için bolus zamanlamasını korursunuz.
    3. Görüntülemeye devam edin: Kalan 128 görüntü setini enjeksiyondan sonra 10,2 dakika boyunca elde ederek yıkama/yıkama kinetiklerini yakalayın.
    4. Görüntülerin alındığından emin olmak için görüntüleme sürecini izleyin: Fare fizyolojisinin taramalar sırasında stabil olmasını sağlamak için fare nefes alma hızını izleyin.
    5. Fare ve beşiği aletten çıkarın: Fareyi beşikten çıkarın. Faresin anesteziden iyileşmesine izin verin. Fareyi ısıtılmış bir kafese koyun ve fare harekete geçene kadar izleyin.
      NOT: Uygun yazılımı kullanın ve OAI enstrümanı için üreticinin talimatlarına bakın. Aşağıdaki adımlar, viewMSOT v4.0 yazılımı ve Matlab R2019b veya daha yeni bir Matlab yazılımı kullanan bir OAI cihazının yeniden yapılandırma ve analiz adımlarını açıklar.

4. OS-DCE OAI sonuç analizi

  1. OA görüntülerini yeniden oluştur.
    1. Görüntü yeniden yapılandırma parametrelerini seçin: Görüntü yeniden yapılandırmasını 50 kHz–6,5 MHz bant geçiş filtresiyle filtrelenmiş bir geri projeksiyon yöntemi ile ayarlayın ve otomatik darbe-darbe enerji düzeltmesini etkinleştirin.
    2. Tüm görüntüleri yeniden oluştur: Tüm lazer dalga boylarında, tüm görüntü dilimi pozisyonlarında ve tüm zaman noktalarında görüntüler elde edin. Bu veri hacmi, görüntü yeniden yapılandırması için önemli bir zaman gerektirebilir.
  2. OS OA görüntülerini analiz edin.
    1. Kromoforları karıştırma: Spektral karıştırma işlemi yapılarak oksihemoglobin (HbO2), deoksihemoglobin (Hb), toplam hemoglobin (burada HbT = HbO2 + Hb) ve %sO2 (%sO2 = HbO2/HbT) parametrik haritaları oluşturulur.
    2. Yatırım getirisi tınılıyor:
      1. Her görüntü dilimindeki tümörü veya yarayı temsil eden bir yatırım getirisi manuel olarak çizin. Tümör çevresinin veya yara çevresinin piksellerini hariç tutan muhafazakar bir yatırım getirisi oluşturun, çevresel normal doku için pikselleri dahil etmek yerine muhafazakar bir yatırım getirisi oluşturun.
      2. Bunun yerine, tümör kenarını temsil eden bir yatırım getirisi ve tümör çekirdeğini temsil eden ikinci bir ROI ile manuel olarak çizebilirsiniz. Tümör kenarı, tümör çekirdeğinden daha fazla vaskülerleşmeye sahip olabilir ve bu da potansiyel olarak faydalı bir alt bölge analizi sağlar.
        NOT: Tümör veya yara alt bölgelerinin ek yatırım getirisi (ROI) alınabilir veya HbO2, Hb, HbT veya %sO2 piksel değerleri değerlendirilebilir (ROI gerektirmez), ancak bu küçük bölgeler daha düşük sinyal-gürültü oranına sahiptir ve bu da kesin ölçümlere yol açar.
      3. Her dalga boyu ve zaman noktasındaki tüm görüntülerde ROI pozisyonlarını tutarlı tutun.
    3. Tüm tümör için ortalama parametreleri hesaplayın.
      1. Her görüntüleme dilimi ve her zaman noktası için tümör ROI'si veya yara ROI'sinde HbO2, Hb, HbT ve %sO2 ortalama değerini hesaplayın.
      2. Çok dilimli OS OAI için, tüm görüntüleme dilimlerinden HbO2, Hb, HbT ve %sO2 ortalama değerini hesaplayarak tüm tümör veya yara için her parametre için tek bir ortalama değer elde edin.
    4. Parametre kararlılığını değerlendirin. Her tekrar için %sO2 değerini çizin (bkz. adım 3.2.4). %sO2 değerinin taramalar sırasında %10'dan fazla değişip değişmediğini değerlendirin; bu da zamansal olarak istikrarsız bir ölçümü gösterir.
  3. DCE OA görüntülerini analiz edin.
    1. Çok dalga boylu DCE OA görüntülerinde kromoforları karıştırın: HbO2, Hb ve kontrast ajanının parametrik haritaları oluşturmak için spektral karıştırma gerçekleştirin. Bu adım tek dalga boylu DCE OAI için gerekli değildir.
    2. Yatırım getirisi (ROI) tanımlayın.
      1. Her görüntü dilimindeki tümörü veya yarayı temsil eden bir yatırım getirisi manuel olarak çizin. Tümör çevresinin veya yara çevresinin piksellerini hariç tutan muhafazakar bir yatırım getirisi oluşturun, çevresel normal doku için pikselleri dahil etmek yerine muhafazakar bir yatırım getirisi oluşturun.
      2. Bunun yerine, tümör kenarını temsil eden bir yatırım getirisi ve tümör çekirdeğini temsil eden ikinci bir ROI ile manuel olarak çizebilirsiniz. Tümör kenarı, tümör çekirdeğinden daha fazla vaskülerleşmeye sahip olabilir ve bu da potansiyel olarak faydalı bir alt bölge analizi sağlar.
        NOT: Tümör alt bölgelerinin ek yatırım getirisi (ROI) alınabilir veya kontrast maddenin piksel değerleri değerlendirilebilir (ROI gerektirmez), ancak bu küçük bölgelerde sinyal-gürültü oranı daha düşüktür ve bu da kesin ölçümlere yol açar.
      3. Her dalga boyu ve zaman noktasındaki tüm görüntülerde ROI pozisyonlarını tutarlı tutun.
    3. DCE OA görüntülerinden PK eğrilerini çıkarın.
      1. Her görüntü dilimindeki yatırım getirisi için, zaman noktalarını ortalama ICG sinyali (çok dalga boylu DCE OAI'den) veya tek seçilen dalga boyunda (tek dalga boylu DCE OAI için) OAI sinyali karşılaştırın.
      2. Tüm görüntü dilimleri için ortalama sinyali hesaplayın. Tümör veya yara boyunca ortalama sinyalin zamana karşı gösterdiği bir grafik, PK eğrisi olarak bilinir.
      3. Her zaman noktasındaki tüm görüntü dilimlerinin ortalama sinyalini, aşağıda listelenen ampirik parametreleri değerlendirebilen bir bilgisayar programına aktarın. Örneğin, Microsoft Excel ve Graphpad Prism grafiklerin basit analizlerini gerçekleştirebilir.
    4. 4.3.5–4.3.11 adımlarında açıklandığı gibi ampirik parametreleri hesaplayın.
    5. PK eğrisini normalleştirin: Enjeksiyon öncesi zaman noktalarının ortalama değerini, yani temel sinyal olarak bilin. Enjekte sonrası tüm sinyal değerlerinden temel sinyal değerini çıkarın.
    6. Maksimum Sinyal Artışını (MSE) Belirleyin: PK eğrisinde enjeksiyon sonrası en yüksek sinyal değerini belirleyin.
    7. Zirveye Ulaşma Süresini (TTP) Belirleyin: MSE'nin zaman puanı değerini belirleyin.
    8. PK eğrisinin başlangıç eğimini hesaplayın.
      1. Bu başlangıç eğimi, ilk enjeksiyon zamanından TTP'ye kadar elde edin. Alternatif olarak, eğri şekli çok dikse veya TTP çok geç kalırsa enjeksiyondan 1 dakika sonra eğimi hesaplayın.
      2. Bu senaryoda, enjeksiyon öncesi görüntüleri 1 dakika alın ve bu eğimi PK eğrisinde Dakika 1.0'dan Dakika 2.0'a kadar hesaplayın.
    9. Eğri Altındaki Başlangıç Alanını Hesaplayın (IAUC): PK eğrisinde ilk enjeksiyon zamanından TTP'ye kadar sinyal değerlerinin ortalama değerini hesaplayın.
    10. Yıkama fazının ampirik bir oranını hesaplayın.
      1. TTP'den 1 dakika sonra son zaman noktasına kadar olan PK eğrisinin bu kısmını düz bir çizgi veya sabit bir ofset terimiyle monoeksentik olarak azalan bir fonksiyonla eşleştirin.
      2. Düz çizginin eğimi veya üsal çöküş sabitini yıkama fazının PK oranının ampirik ölçüsü olarak kullanın.
    11. Kontrast artırılmış OAI hesaplayın.
      1. TTP'den daha uzun bir zaman noktası seçin. Bu zaman noktasındaki sinyal değerini kontrast artışının bir ölçüsü olarak belirleyin.
        NOT: Enjeksiyondan sonraki 10 dakika zaman noktası genellikle seçilir, ancak gerektiğinde başka zaman noktaları da seçilebilir.
      2. Alternatif olarak, TTP'den seçilen zaman noktasına ortalama sinyali, TTP'den son zaman noktasına ortalama sinyali veya gerektiğinde başka bir zaman aralığı hesaplayabilirsiniz.
      3. Ortalama sinyalin bu iki zaman noktası için PK eğrisinin altındaki alana eşdeğer olduğunu unutmayın; teknik olarak bu sinyal yoğunluğu ölçüsü olarak bilinir, sinyal genliğinin ölçüsü değil.
    12. 4.3.13–4.3.20 adımlarında açıklandığı şekilde PK modelleme yapılacaktır.
      NOT: Aşağıdaki adımlar, inVision OAI enstrümanıyla elde edilen DCE OA görüntülerini analiz eder. Diğer OAI enstrümanları farklı veri formatında görüntüler üretebilir. Aşağıdaki adımlar, diğer cihazların veri formatı MatLab'a aktarılabilirse ve veri formatı yazılım paketiyle sağlanan örnek veri dosyalarına uyarlanarak ayarlanırsa, diğer OAI araçlarıyla DCE OA görüntülerini analiz etmek için hâlâ takip edilebilir.
    13. Yazılımı indirin.
      1. Çok dalga boylu DCE OAI için, Github'daki CAMEL-MartyPagel deposundan OE-DCE_MSOT_Matlab veya https://github.com/CAMEL-MartyPagel/OE-DCE_MSOT_Matlab'den indirin.
      2. Tek dalga boylu DCE OAI için, Github'daki CAMEL-MartyPagel deposundan DCE-MSOT_SingleWavelength_Matlab indirin veya https://github.com/CAMEL-MartyPagel/DCE_MSOT_SingleWavelength_Matlab.
      3. Sıkıştırılmış dosyayı açın. Doc klasöründeki SOP dosyasını açın ve yazılımı kurma ve kullanma için standart işletim prosedürünü izleyin.
    14. Yazılım bileşenlerini farklı klasörlere düzenleyin. Aşağıdaki yazılım dosyalarını tek bir klasörde sakla:
      Ana kod: run_MSOT_nonneg.m
      Alt kodlar: run_DCE_MSOT_MSP.m ; run_OE_MSOT_AK_nonneg.m
      Diğer kodlar: Negative_pixel_count.m ; Voxel_count.m ; ROI_modification.m
      Klasör başlığı: com.itheramedical.msotlib_beta_rev723_20221128_M2022b
      Veriler, yeniden yapılandırma ve spektral karıştırmadan sonra ViewMSOT'tan dışa aktarıldı.
    15. Programı MatLab'ta başlatın.
      1. Programı Matlab'da başlatmak için run_MSOT_nonneg.m tuşuna çift tıklayın. Matlab penceresinin üstündeki "Run" butonuna tıklayın. Kod, mevcut klasörde veya MATLAB yolunda bulunmayan run_OE_MSOT_AK_nonneg hata bildirebilir.
      2. Bu hatayı düzeltmek için addpath yazın, ardından dosya konumunu tırnak içinde (örneğin addpath 'C:\Users\yourname\Documents\Non negative analysis') koyarak kod çalıştırın.
    16. Analiz türünü seçin: OE analizi için N , DCE analizi için Y girin.
      NOT: Program, bu protokolde tanımlanan OS-DCE OAI çalışmaları için kullanılmayan %21 O2 solunum gazı (tıbbi derecede hava) veya %100 O2 solunum gazı ile elde edilen %sO 2 haritalarından oluşan Oksijenli (OE) OA görüntülerini analiz edebilmektedir.
    17. Verileri seçin:
      1. DCE OAI dosyalarını içeren klasörü seçin. MSP alt klasörünü değil, ana tarama klasörünü seçin.
      2. Sonra taramanın adını doğrulayın. Son olarak, analiz edilen verileri kaydetmek için klasörü seçin.
    18. Kromofor sayısı için 3 girin. Kromoforlar Hb, HbO2 ve kontrast maddesidir.
      NOT: Program, gerekirse fare modeline birlikte enjekte edilen birden fazla kromoforun DCE OAI analizini karşılayacak şekilde tasarlanmıştır. Ancak, bu protokolteki DCE OAI protokolü yalnızca bir kromofor kullanır.
    19. Yatırım getiriciliklerini 4.3.19.1–4.3.19.4 adımlarında açıklandığı şekilde çizin.
      1. Analiz için Arterial Giriş Fonksiyonu olarak hizmet edecek kan damarının ROI'sini çizin: Taramanın gri tonlu görüntüsü görünecektir. Kan damarını temsil eden yatırım getirisini manuel olarak takip edin.
        NOT: Fotoğrafın sağ üst köşesinin hemen üstünde artı işareti olan büyüteç üzerine tıklayarak yakınlaştırın. Büyüteğe tekrar tıklayarak ROI almak için moda geri dönün. Omurga yakınındaki alt vena kava genellikle AIF olarak tanımlanabilir ve kullanılabilir.
      2. Tümörün yatırım getirisini çizin: Taramanın gri tonlu bir görüntüsü görünecektir. Tüm tümörü, tümör kenarını veya çekirdeği temsil eden yatırım getirisini takip edin. Birden fazla yatırım getirisi analiz etmek için, ek bir yatırım getirisi için bu PK modelleme prosedürünün tamamını (Adım 4.3.12) tekrarlayın.
      3. Bir kas bölgesinin yatırım getirisini çizin: Bu yatırım getirisini DCE OAI hesaplamasında kullanmayın. Bu raporda kullanılmayan Lineer Referans Bölge Modeli kullanılarak kas OAI analizi için kasın ROI'sini kullanın. Programın devam etmesi için bu adım hâlâ yapılmalıdır.
      4. Doğru yatırım getirisi (ROI) alındığından emin olun. PK eğrisinin modellemesi başlayacak.
    20. Analiz edilen DCE OAI sonuçlarını görselleştirin.
      1. Analiz edilen DCE verilerini yüklemek için tarayıcı çubuğuna gidin ve DCE_MSOT_MSP'i seçin.
      2. Komut penceresinde her şeyi temizle.
        NOT: Mevcut klasör sekmesi artık analiz edilen DCE OAI verileriyle doldurulmuş ve bunlar şunları içerir:
        Average_signal_Wavelength_ICG.mat: Tümör ROI'si için NKtrans ve kep tablolanmış değerlerini görmek için buna çift tıklayın. Kinetik parametreler 3 şekilde tablolanır:
        NKtrans_avg: Her piksel için hesaplanan NKtrans ortalaması.
        NKtrans _avg_signal: Tüm tümör için sinyallerin ortalaması alındıktan sonra hesaplanan tek NKtrans değeri
        NKtrans _nz: NK trans_avg sadece sıfır olmayan piksel değerleri ile hesaplanır.
        Benzer şekilde, kep değerleri de görüntülenebilir.
        NKtrans.fig: NKtrans _avg haritasını gri tonlu bir görüntünün üzerine bindirilmiş olarak gösterir.
        kep.fig: kep_avg haritasını gri tonlu bir görüntünün üzerine bindiriyor.
        Maps_Wavelength_ICG.mat: Diğer NKtrans veya kep haritalarını görselleştirmek için bu yüklenmeli. Bu matrisi yükledikten sonra, istenen parametreyi görüntülemek için ayrı ayrı dahil edilen "örtüşme kodu" kullanılacaktır.
        Muscle_Average_signal_Wavelength_ICG.mat ve Muscle_Maps_Wavelength_ICG.mat : Kas ROI'leri için parametreleri gösterin.
        ICG için normalize edilmiş sinyal. fig: ICG'nin üç yatırım getirisi içindeki ortalama sinyalini maksimum sinyale normalleştirilmiş şekilde gösterir.
        ICG için sinyal. fig: ICG'nin zaman içindeki ortalama sinyalini üç yatırım getirisi açısından gösterir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

OAI sinyali, tümörlerde ve yaralarda oksijen doygunluğunun haritalarını oluşturabilir
Multispektral OAI veri setlerinin edinilmesi ve yeniden yapılandırılmasının ardından, tümörler veya yara yatakları içinde ilgi çekici bölgeler (ROI'lar) tanımlanarak farklı dalga boylarında sinyal yoğunluğunu niceleyebilir. Daha sonra oksihemoglobin (HbO2) ve deoksihemoglobin (Hb) katkılarını bileşik optoakustik sinyalden ayırmak için spektral karıştırma algoritmaları uygu...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

DCE OAI PK eğrileri, PK analizinin güvenilirliğini azaltan çeşitli artefaktlardan etkilenebilir. Yaygın bir tuzak, görüntüleme alanında yüzeysel yaralar, kabuk veya kurumuş kan olmasıdır; bu da cilt yüzeyinde güçlü, spesifik olmayan emilimi tetikleyebilir ve derin sinyalleri gizleyebilir (Şekil 8). Tümör içinde yatırım roi'ları çizilirken, çıkarılan eğrilerin yüzey artefaktları yerine intratümör kontrast dinamiklerini yansıtmasını sağlamak için bu yüzeysel y...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların bu çalışmayla ilgili çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Yazarlar, danışmanlık için iThera Medical, GmbH'den Dr. Neal Burton'a teşekkür etmek ister. Bu çalışma, UW-Madison Radyoloji NRSA hibi (2T32CA009206-46), ITPT Radyolojik Bilimler Stajyeri Pilot Bürü, Klinik ve Translasyonel Bilim Ödülü (CTSA) programı, Ulusal Translasyonel Bilimleri İlerleme Merkezi (NCATS), UL1TR002373 ve TL1TR002375 hibesi, NIH R43 CA265603, NIH R01 EB034261, NIH R21 EB037731 ve Falk Tıbbi Araştırma Vakfı'ndan Falk Katalizör Ödülü tarafından finanse edilmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
20 G İğneINT'i Çıkar26417Hipodermik iğne; 20G x 1", heparin çözeltilerinin hazırlanmasında kullanılır
4T1 hücreleriATCCCRL-2539Üçlü negatif meme kanseri hücre hattı
Anti-Anti (100x)Gibco15240-062Antibiyotik kokteyli
Biyopsi punchuIntegra 33-366 mm tek kullanımlık biyopsi punch 
Hücre kültürü kalitesinde suCorning25-055-CV500 mL; inction spesifikasyonları ve nbsp için USP steril sater'e test edildi;
Kolajen Matris ÇözümüCorning354262Tümör fomasyonu ve enjeksiyon için kolajen matrisi
EtanolDeacon Laboratuvarı2701Genel amaçlı antiseptik
Göz Kayganlaştırıcı Optixcare 50-218-844220 g/.70 oz; sadece hayvan kullanımı için 
Gazlı bez Fisherbrand22-415-468Pamuklu gazlı bez; 3" x 3" (7,6 x 7,6 cm); 12 katlı
EldivenlerVWR76457-130Nitril muayene eldivenleri
HeparinMeithealNDC71288-402-1010.000 USP birimi 10 mL, 1000 USP birimi ml başına 1000 birim; 10 mL Çok dozlu şişe
İndosiyanin yeşiliTCII0535Optoakustik Kontrast Ajanı
İzofluranIsospire17033-091-25Atlar ve köpeklerde kullanılmak için yanmayan, patlayıcı olmayan bir solunma anestezi; 250 mL 
Laboratuvar FilmiParafilm PM-9922" x 250'; 1" çapında çekirdek
Nair vücut çipurası Saç çıkarıcı NairLL4038Saptırıcı Krem; Zengin kakao tereyağı & E vitamini
Needle TerumoNN2732R27G x 1 1/4" (6.40 mm x 32 mm); R.W. Reg. Bevel 
Optoakustik Görüntüleme MakinesiiTheraMedical MSOT inVision 512Optoakustik tarayıcı
PBS, 1xCorning 21-040-CV500 mL; Kalsiyum ve magnezyum içermeyen fosfatla tamponlanmış tuzlu suyun;
RPMICorning 10-040-CVHücre kültürü ortamı
SalinHospiraNDC0409-4888-0210 mL tek doz; %0,9 sodyum klorür enjeksiyonu, USP
KronometreiTheraMedical 4135333Dakikalar ve saniyeler kaydetmek için kullanılırdı 
ŞırıngalarKardinal Sağlık11881280121 mL İnsülin Şırıngası; Sadece U-100 İnsülin; 27G x 1/2" (0,35 x 12,7 mm)
Şeffaf Yara PansıTegaderm1624Wşeffaf film sarma çerçeve stili; 2 3/8" x 2 3/4" (6 cm x 7 cm)
CizbitTermo Electron 7626Farelere hücre enjekte ederken deriyi geri çekmek için kullanılır
Ultrason jeliEcoVue28332 g paket, prpilen glikol içermemiş, suda çözünebilici, paraben ve boya içermeyen
Boyasız DikişlerEtikonVR49318" kesme; P-3 3/8 13 mm; boyasız ve örgülü, sentetik emilebilir dikiş, USP olmayan
Isıtma PediRepti Therm UTH120VAC 60Hz 8W Anestezik altındayken hayvanları ısıtmak için kullanılır;  
AtellerGrace Bio-Labs476684Şeffaf Silikon, 14 mm OD x 10 mm ID 0.5 kalınlıkta, dikiş yerleriyle birlikte 
Yara klipleriRefleks 7203-1000Refleks deri kapatma sistemi, 7 mm, paslanmaz sap

Kaynaklar

  1. Wang, L. V., Hu, S. Photoacoustic tomography: In vivo imaging from organelles to organs. Science. 335 (6075), 1458-1462 (2012).
  2. Ntziachristos, V., Razansky, D. Molecular imaging by means of multispectral optoacoustic tomography (MSOT). Chem Rev. 110 (5), 2783-2794 (2010).
  3. Sourbron, S. P., Buckley, D. L. Classic models for dynamic contrast-enhanced MRI. NMR Biomed. 26 (8), 1004-1027 (2013).
  4. Hupple, C. W., et al. A light-fluence-independent method for the quantitative analysis of dynamic contrast-enhanced multispectral optoacoustic tomography (DCE MSOT). Photoacoustics. 10, 54-64 (2018).
  5. Xiao, T. G., et al. Applying dynamic contrast-enhanced MSOT imaging to intratumoral pharmacokinetic modeling. Photoacoustics. 11, 28-35 (2018).
  6. Han, Z., et al. Dynamic 2-deoxy-D-glucose-enhanced multispectral optoacoustic tomography for assessing metabolism and vascular hemodynamics of breast cancer. Photoacoustics. 32, 100531(2023).
  7. Pickles, M. D., Manton, D. J., Lowry, M., Turnbull, L. W. Prognostic value of pre-treatment DCE-MRI parameters in predicting disease-free and overall survival for breast cancer patients undergoing neoadjuvant therapy. Eur J Radiol. 71 (3), 498-505 (2009).
  8. Goel, S., et al. Evaluations of radiotherapy in small animal models of pancreatic cancer with oxygen-enhanced–dynamic contrast-enhanced multispectral optoacoustic tomography (OE-DCE MSOT). Photons Plus Ultrasound: Imaging and Sensing 2023, 12379, (2023).
  9. Yang, E., et al. Evaluations of a cutaneous wound healing model using oxygen-enhanced dynamic contrast-enhanced photoacoustic imaging (OE-DCE PAI). Mol Imaging Biol. 26 (6), 995-1004 (2024).
  10. Longo, D. L., et al. Water-soluble melanin derivatives for dynamic contrast-enhanced photoacoustic imaging of tumor vasculature and response to antiangiogenic therapy. Adv Healthcare Mater. 6 (1), 1600550(2017).
  11. Ermolayev, V., Dean-Ben, X. L., Mandal, S., Ntziachristos, V., Razansky, D. Simultaneous visualization of tumour oxygenation, neovascularization and contrast agent perfusion by real-time three-dimensional optoacoustic tomography. Molec Imaging. 26, 1843-1851 (2016).
  12. Chen, Z., et al. Concurrent fluorescence and volumetric optoacoustic tomography of nanoagent perfusion and bio-distribution in solid tumors. Biomed Opt Express. 10 (10), 5093-5102 (2019).
  13. Taruttis, A., Morscher, S., Burton, N. C., Razansky, D., Ntziachristos, V. Fast multispectral optoacoustic tomography (MSOT) for dynamic imaging of pharmacokinetics and biodistribution in multiple organs. PLoS One. 7 (1), e30491(2012).
  14. Tomaszewski, M. R., Gehrung, M., Joseph, J., Quiros-Gonzalez, I., Disselhorst, J. A., et al. Oxygen-enhanced and dynamic contrast-enhanced optoacoustic tomography provide surrogate biomarkers of tumor vascular function, hypoxia, and necrosis. Cancer Res. 78 (20), 5980-5991 (2018).
  15. Choi, W., Park, B., Choi, S., Oh, D., Kim, J., et al. Recent advances in contrast-enhanced photoacoustic imaging: and practical challenges. Chem Rev. 123 (11), 7379-7419 (2023).
  16. Weber, J., Beard, P. C., Bohndiek, S. E. Contrast agents for molecular photoacoustic imaging. Nat Methods. 13 (8), 639-650 (2016).
  17. Fu, Q. R., Zhu, R., Song, J. B., Yang, H. H., Chen, X. Y. Photoacoustic imaging: Contrast agents and their biomedical applications. Adv Materials. 31 (6), 1805875(2019).
  18. Nair, A. B., Jacob, S. A simple practice guide for dose conversion between animals and human. J Basic Clin Pharm. 7 (2), 27-31 (2016).
  19. Alander, J. T., et al. A review of indocyanine green fluorescent imaging in surgery. Int J Biomed Imaging. 2012, 940585(2012).
  20. Xia, J., Chen, W. Y., Maslov, K., Anastasio, M. A., Wang, L. H. V. Retrospective respiration-gated whole-body photoacoustic computed tomography of mice. J Biomed Opt. 19 (1), 016003(2014).
  21. Liu, S., Wang, T., Zheng, X., Zhu, Y., Tian, C. On the imaging depth limit of photoacoustic tomography in the visible and first near-infrared windows. Optics Express. 32 (1), 5460-5480 (2024).
  22. Oraevsky, A., Clingman, B., Zalev, J., Stavros, A., Yang, W., et al. Clinical optoacoustic imaging combined with ultrasound for coregistered functional and anatomical mapping of breast tumors. Photoacoustics. 12, 30-45 (2018).
  23. Cox, B., Laufer, J. G., Arridge, S. R., Beard, P. C. Quantitative spectroscopic photoacoustic imaging: a review. J Biomed Opt. 17 (6), 061202(2012).
  24. Khodaverdi, A., et al. Two photoacoustic spectral coloring compensation techniques adapted to the context of human in-vivo oxygenation measurements. Biomed Optics Express. 16 (6), 2217-2231 (2025).
  25. Reinhart, M. B., Huntington, C. R., Blair, L. J., Heniford, B. T., Augenstein, V. A. Indocyanine green: Historical context, current applications, and future considerations. Surg Innov. 23 (2), 166-175 (2016).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Optoakustik G r nt lemeOksijenasyon De erlendirmesiDinamik Kontrast G r nt lemeMeme Kanseri ModelleriKan Oksijen Saturasyonundosiyanin Ye iliMultispektral G r nt leme
OS-DCE OAI kullanılarak kanser ve yara iyileşmesinin pre-klinik modellerinde oksijenasyon ve damar perfüzyonun değerlendirilmesi
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.