Yöntem makalesi

Orta hat laparotomisi yoluyla farelerde segmental üreter striktürlerinin tel kalibrasyonlu indüksiyonu

235 görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/70726

⸱

17 Nisan 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Urology and Urosurgery, University Medical Center Mannheim, Medical Faculty of the University of Heidelberg, 2Department of General, Visceral, and Transplantation Surgery, Heidelberg University Hospital, 3Division of Intelligent Systems and Robotics in Urology (ISRU), German Cancer Research Center (DKFZ) Heidelberg, 4DKFZ Hector Cancer Institute at the University Medical Center Mannheim, 5Department of Urology, University Hospital Leipzig, 6Department of Plastic Surgery and Hand Surgery, TUM University Hospital Munich, 7ORSI Academy

Bu makalede

Özet

Bu protokol, orta hat laparotomi yoluyla tel kalibrasyonlu kısmi ligasyonu kullanarak gradasyonlu segmental üreter daraltmalarını indükleyen tekrarlanabilir bir fare modelini tanımlar. Üreter etrafında 6-0 bağlanma ve metal kalibrasyon teli, belirgin bir kalıntı lümen oluşturur ve tıkanıklığın şiddetinin anında fonksiyonel doğrulanmasını sağlar.

Özet

Ureteral daraltmalar, rekonstruktif ürolojide büyük bir zorluk olmaya devam eder ve iatrojenik yaralanma, kronik iltihap, travma, doğuştan anomaliler veya radyasyondan kaynaklanabilir. Bu lezyonlar sıklıkla ilerleyici obstrüktif üropatiye ve böbrek fonksiyonunun kaybına yol açar. Endoskopik ve cerrahi tekniklerdeki gelişmelere rağmen, üreter daraltmaları hâlâ ele almakta zordur ve böbrek parenximası üzerindeki yeniden şekillendirme etkileri devam eden araştırmaların konusu olup, sağlam preklinik modellere olan ihtiyacı vurgulamaktadır. Bu çalışma, orta hat laparotomisi yoluyla tel kalibrasyonlu kısmi ligasyonu kullanarak çeşitli derecelerde segmental üreter striktürlerinin kontrollü indüksiyonu için tekrarlanabilir bir fare modeli oluşturmaktadır. Protokol, üreterin segmental, kesici olmayan daralmasını sağlar; bu da fonksiyonel ve anatomik düzeyde fibrotik daralmayı yaklaşık olarak gösterirken, belirgin iskemik hasarı en aza indirmek ve üreter sürekliliğiyle makroskopik doku canlılığını korumayı amaçlar. Düşük hayvanlar arası ve cerrahlar arası değişkenliğe sahip güvenilir bir deneysel platform sunarak, bu yaklaşım üreter striktür hastalığı için biyomoleküler mekanizmalar, biyomalzemeler, görüntüleme yöntemleri ve rekonstrüksiyon teknikleri üzerine translasyonel araştırmaları destekler.

Giriş

Ureteral daraltmalar nispeten yaygındır ve ürolojide önemli bir zorluk oluşturur. Taş hastalığı 1,2,3 için endoskopik işlemler izleyen hastaların %4,9'una kadar şiddet bildirilmiştir; yüksek riskli popülasyonlarda, örneğin böbrek nakli alanlarda ise %7'ye kadar etkilenebilir. 4. Birçok kasılma cerrahi yaralanma veya tıbbi müdahalelerden kaynaklansa da, iatrojenik olmayan nedenler de önemli bir oranı oluşturur. Bunlar arasında kronik iltihap, idrar yolu enfeksiyonları, fiziksel travma, doğuştan gelen anormallikler ve radyasyon tedavisiyer alır 5,6. Bu etiyolojilerin her biri nihayetinde idrar tıkanıklığına, tekrarlayan enfeksiyonlara, ağrıya, taş oluşumuna ve tedavi edilmezse geri dönüşü olmayan böbrek fonksiyonu kaybına yol açabilir. Etkilenen hastalar sıklıkla hastalık ve yaşam kalitesinin düşmesi yaşar; bu, hem kurumsal kohortlarda hem de sistematikderlemelerde gösterilmiştir 5,7,8. Uzun vadeli yük oldukça büyüktür; Üreteroskopik taş ameliyatı sonrası üreter darlığı olan çok kurumlu hasta grubunda, etkilenen tarafın nefrektomisi vakaların %25'inde gerekli olmuştur ve bu durum bu durumun önemli morbiditesinivurgulamaktadır9.

Bu klinik yük, ilişkili biyomoleküler süreçler üzerinde araştırma yapılmasını mümkün kılabilecek ve tedavi optimizasyonunu bilgilendirebilecek sağlam preklinik modellere olan ihtiyacı vurgulamaktadır. En yaygın tedavi yöntemleri, genişletme veya lazer kesi gibi endoskopik yöntemler ve stentlemedir; cerrahi rekonstrüksiyon ise daha karmaşık durumlar içinayrılmıştır 10. Erken sonuçlar iyileşmesine rağmen, nüks ve restenoz sorunlu olmaya devam etmektedir. Müdahale sonrası bildirilen nükleme oranları %11 ile %40 arasında değişir ve birçok hasta kalıcı rahatlama ve organ koruması için çoklu operasyon veya uzun süreli stentleme gerektirir 11,12. Tedavi başarısı, striktür bölgesi, uzunluk, etiyoloji ve önceki tedavilerin detaylarından etkilenir; Birkaç yakın tarihli inceleme ve büyük kohort çalışmaları, geliştirilmiş tekniklere ve daha derin mekanik anlayışa ihtiyaçolduğunu vurgulamaktadır 4,5,13.

Etkili translasyonel araştırmalar, insan üreter daralma hastalığının fibrotik mekanizmalarını, histopatolojik özelliklerini, anatomik bağlamını ve yukarı akım böbrek süreçlerini yakından kopyalayan deneysel modeller gerektirir. Bunlar arasında, kemirgen modelleri üreter fibrozisi ve böbrek fonksiyonel kaybını incelemek ve anti-fibrotik müdahaleler ile rekonstruktif stratejileri değerlendirmek için güvenilir platformlarhaline gelmiştir 6,14,15,16,17. Bu modellerin patofizyolojik temeli, Chevalier ve ark. tarafından üreter tıkanıklığın farklı stratejilerini inceleyen ve sıçanlarda böbrek interstisyel fibrozisi ve obstrüktif nefropatinin tekrarlanabilir modeli olarak tek taraflı üreter tıkanıklığı (UUO)incelemiştir 6.

Bu temel üzerine inşa edilen çağdaş modeller, engel seviyesini ve desenini geliştirmiştir. Vroomen ve ark. geri dönmez elektroporasyon kullanarak kısmi tek taraflı idrar tıkanıklığı ve böbrek skarı indüksiyonunu tetikleyen teknik olarak güvenli bir yaklaşımsundular 14. Benzer şekilde, Chen ve ark. değişken hemodinamik koşullar altında fibroz regresyonunun dinamik incelenmesini mümkün kılan geri dönüşümlü UUOmodeli geliştirmiştir 15. Nan ve ark. ile Khater ve ark., kısmi tıkanıklıkta üreter fibroz ilerlemesini ve terapötik modülasyonu tetikleyen moleküler kaskadlarıdaha da açıklamıştır 16,17.

Tam üreter ligasyonu, segmental rezeksiyon, psoas kasına gömülme veya termal yaralanmaya dayanan önceki modeller genellikle kontrolsüz, standartlaştırılmamış tıkanıklık dereceleri, yaygın iskemi ve nekroza yol açarak dereceli tıkanıklık yerine şiddetli böbrek parenkimal atrofisi oluşuyordu. Chevalier ve ark. ile Thornhill ve ark. tarafından tanımlanan bu yaklaşımlar, obstrüktif nefropatiye dair değerli mekanik içgörüler sağladı, ancak klinik iyi huylu üreter daralma hastalığının lokalize fibrotik daralmaözelliğini tekrarlamadı 6,18. Korunmuş doku yaşama yeteneği ve belirli derecelerde böbrek idrar tıkanıklığı ile kalibre edilmiş, kesin olmayan segmental kırılmalar üreten basit, standart kemirgen modelleri eksiklik yaşamaktadır.

Bu boşluğu gidermek için, bu çalışma sıçanlarda kısmi üreter daraltmalarının kontrollü indüksiyonu için standart bir cerrahi protokol oluşturmaktadır. Model, tekrarlanabilir, anatomik olarak hassas ve preklinik araştırmalarda kullanılmak üzere tasarlanmış; bunlar arasında rekonstrüktif üroloji, intraoperatif görüntüleme değerlendirmesi ve doku mühendisliği uygulamalarını kapsamaktadır. Operatörler arası değişkenliği en aza indirerek ve klinik olarak ilgili fibrotik daralmayı çoğaltarak, bu model üreter striktür hastalığı için mekanik anlayışı ilerletmek ve terapötik gelişimi hızlandırmak için translasyonel bir platform sunar.

Pratik kullanımda, tıkanıklık derecesi, araştırma sorusuna uygun kalibrasyon tel çapı seçilerek ayarlanabilir. Daha büyük çaplar (örneğin, 0,65 mm) hafif kısmi tıkanıklık ve neredeyse fizyolojik idrar akışı ile yaklaşırken, daha küçük çaplar (0,30–0,20 mm) yüksek dereceli tıkanıklığı belirgin akış azalması ile modeller. Ayrıca, bu cerrahi yaklaşım ya anlık hemodinamik ve fonksiyonel değişiklikleri incelemek için akut terminal model olarak uygulanabilir ya da kronik doku yeniden modellenmesi, fibroz ilerlemesi ve uzun vadeli böbrek adaptasyonunu araştırmak için hayatta kalma deneylerine uyarlanabilir.

Bu modelde, kısmi tıkanıklık, üreter etrafında 6-0 bağının tanımlanmış çapta bir metal kalibrasyon teli ile bağlanması ve ardından telin çıkarılmasıyla elde edilir; böylece tel boyutuna uygun bir lümen kalmıştır. Bu tasarım, böbrek fonksiyonel idrar çıkışıyla doğrudan ilişkilendirilebilen dereceli, geometrik kontrollü daralmayı mümkün kılar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Burada açıklanan tüm hayvan faaliyetleri, akredite tesislerde yürütülmüş ve Almanya'nın Karlsruhe kentindeki Baden-Württemberg Bölge Konseyi'nin kurumsal hayvan bakım ve kullanım komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır. Deneysel hayvanlar, kurumsal protokollere uygun olarak ve hayvan refahını düzenleyen Alman mevzuatına, ayrıca Avrupa Topluluğu Konseyi (2010/63/EU) tarafından belirlenen yönergelere ve Hayvan Araştırmaları: In Vivo Deneylerin Raporlanması (ARRIVE) yönergelerine uygun olarak ele alındı. Erkek Sprague Dawley fareleri (ortalama ağırlık: 400 g) hayvan tesisinde standart koşullarda 7 günlük aklimatizasyon döneminden sonra kullanıldı. Reaktifler ve kullanılan ekipmanlar Malzeme Tablosu'nda listelenmiştir.

1. Anestezi ve analjezi

  1. %4 hacim isofluran kullanılarak indüksiyon odası aracılığıyla 5 L/dakika akış hızında %100 oksijenle uygulanır.
  2. Düzeltici refleks kaybedildiğinde, dissosiyatif anestezi, analjezi ve sedasyon için 100 mg/kg ketamin (%10 çözeltisi; yaklaşık 0,35 mL) ve 4 mg/kg ksilazin (%2 çözeltinin 1:10 seyrelti; yaklaşık 0,75 mL) deri altı enjeksiyonu uygulanın.
  3. Pens kullanılarak sert bir parmak sıkıştırma uyarıcısına yanıt vermemesiyle anestezik derinliğini doğrulayın.
  4. Korneanın kurumasını önlemek için her iki göze de oftalmik merhem uygulayın.
  5. 5 mg/kg karprofen (%5 çözeltinin 1:10 seyreltilmesi; yaklaşık 0,35 mL) deri altı enjeksiyonuyla ek analjezi elde edin.
  6. İşlem boyunca gerektiğinde yenidoğan yüz maskesi ile ek 4 vol isofluran ile anestezi sürdürün.
  7. İşlem boyunca termostatla kontrol edilen ısıtma pediyle vücut sıcaklığını 36,5–37,5 °C arasında tutun.

2. Çalışma alanı ve enstrüman hazırlığı

  1. Travmatik hazırlık pensleri, küt overholt kelepçeler, hazırlık makasları, resorbable olmayan monofilament 6-0 ligatürler, metal kalibrasyon telleri (elektrocilalı yüzeyli ve burklu uçlu alaşım; 0,65, 0,55, 0,30, 0,20 mm çapı; kullanımdan önce sterilize edilmiş (otoklavlanmış), nemlendirilmiş pamuk çubukları, gazlı bez çubukları, entegre 30 G iğneli 1 mL şırınga, metilen mavisi (%0,5 çözelti sulandırılmamış), izotonik sodyum klorür çözeltisi (%0,9 NaCl) ve kapiller tüpler.
  2. Önceki raporlarda tanımlandığı gibi hayvanı kemirgen cerrahi maruz kalmacihazına monte edin, 19,20.
  3. Karın bölgesini tıraş edin ve kesi yerinden dışa doğru konsantrik daireler halinde %70 etanol ve povidon-iyot veya klorheksidin bazlı antiseptik sürüntlerle dönüşümlü üçlü peeling yapın. Üç kez tekrarlayın.
  4. Hayvanı steril perdelerle örtün, sadece cerrahi alanı açık bırakın.
  5. Uçucu anestezikler, keskin maddeler ve kimyasal boyaları kurumsal biyogüvenlik düzenlemelerine uygun olarak, uygun gaz temizleyici sistemleri, koruyucu ekipmanlar ve onaylı keskin atık bertaraf kapları kullanarak kullanın.

3. Orta hat laparotomisi ile cerrahi erişim

  1. İnce makasla yaklaşık 3 cm ortaca karın deri kesisi yapın.
  2. Linea alba'yı orta hatta boylamasına keserek peritoneal boşluğa ulaşın.
  3. Karın duvarını geri çekmek ve retroperitoneumu açığa çıkarmak için hazırlık kancaları ve nemli kompresler kullanın.

4. Sol üreterin tanımlanması ve mobilizasyonu

  1. Böbrek ve retroperitoneal boşluğu tanımlayın ve çevredeki retroperitoneal yağı forseps ile kükle diseksiyon ve nemlendirilmiş pamuk çubuklarıyla nazikçe harekete geçirin (Şekil 1A).
  2. İnce bir 30 G iğneyle böbrek pelvisini böbrek parenkiminden delin (Şekil 1B).
  3. Ureterin görsel olarak tanımlanmasını kolaylaştırmak için 0,01–0,2 mL seyreltilmemiş metilen mavisi enjekte edin (Şekil 1B.5).
  4. Böbrek pelvisinden mesane doğrultusuna doğru üreter akışını görsel olarak izlemek için prodegrey boya ayırmasını gözlemleyin (Şekil 1B.6–10).
  5. Çevredeki bağlayıcı ve yağ dokusunu boya ile belirlenmiş üreterden ince forseps ve nemlendirilmiş pamuk çubuklarıyla nazikçe ayırın (Şekil 1C). Yırtılma veya fistülleri önlemek için ureteral duvarı doğrudan tutmak, sıkıştırmak veya aşırı çekmekten kaçının. Ureter, böbrek pelvisinden vezikoureteral birleşime doğru sürekli takip edilebilen şekilde hareket ettirin (Şekil 1D).

figure-protocol-1
Şekil 1: Sol üreter boyası destekli tanımlama ve mobilizasyonu. Yeşil ok, böbrek enjeksiyon yerini gösterir. Gri ok, saf üreteri tasvir eder. Mavi ok, boya ile belirlenmiş bir üreteri tasvir eder. Siyah kutu, sonrasında büyütülmüş bir alanı tasvir eder. (A) Orta hat laparotomisi sonrası sol retroperitoneal maruziyet. (B) Boyalı üreter ayırma. (C) Küt diseksiyon, üreteri çevredeki dokudan harekete geçirir. (D) Böbrek pelvisinden vezikoureter birleşime kadar tamamen açıkta olan sol üreter. (E) Tarif edilen adımların şematik çizimi, şırınga ve metilen mavisi dahil. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

5. Sol üreterin metal bir tel kullanılarak distal kalibrasyonlu kısmi ligasyonu

  1. Ureteri sıkıştırmadan travmatik forseps kullanarak distal üreterin hareketli bir segmentini yükseltin (Şekil 2A.1–2).
  2. Kör forseps kullanarak üreterin altına 6-0 monofilament dikişi geçirin (Şekil 2A.3).
  3. İstenilen çapta (0,65, 0,55, 0,30 veya 0,20 mm) metal kalibrasyon telini üreter ile paralel olarak ligatür döngüsü içine yerleştirin (Şekil 2B.1–6).
  4. Bağlamayı aynı yönde birkaç halka atışıyla bir kayar düğüm kullanarak kademeli olarak sıkılaştırın; dikiş sapanı üreç teli kompleksine sıkıca uyum sağlayana kadar gevşeme; bu da atışlar arasında dikişin yerleşmesini sağlamak için en az 4 atış ve yavaşça zıplayan parmak hareketleriyle gerekir.
    NOT: Dikiş gerilimi çekme kırılma dayanımının hemen altında olmalıdır; bu da 6-0 rezorbable olmayan dikiş için 5–7 N'dir, bu nedenle 3 N önerilir. Bu, yaklaşık 306 g çekme ağırlığı anlamına gelir ve yaylı bir teraziyle ölçülebilir ya da normal bir cep telefonunu iki parmakla tutunurken elde edilen dijital güçle karşılaştırılabilir. Temel özellik, dikişin tamamen üreter teli kompleksine kapalı olması ve o kadar çok halka atma olmasıdır ki, kilitleme atışları gelmeden önce gevşemeler. 6-0 dikişlerin kırılgan yapısı nedeniyle, "çok sıkı" bir şey yoktur; çünkü dikiş çok sıkı olmadan önce kırılır ve üreter dokusu dejenere olamaz. Şimdi hava düğümlerini önlemek için 3 karşı yönlü kilitleme halka atışı ile düğümü sabitleyin (Şekil 2B.7–10).
  5. Üreter duvarında kesme yaralanmalarını önlemek için kalibrasyon telini yavaş ve düz bir hareketle dikkatlice çekin, böylece tel çapına karşılık gelen standart bir üreter lümenini bırakın (Şekil 2C.1–5). Parlatılmış tel yüzeyi, çıkarma sırasında sürtünmeyi en aza indirir ve doku hasarı riskini azaltır.

figure-protocol-2
Şekil 2: Sol üreterin metal tel kullanılarak distal kalibrasyonlu kısmi bağlanması. (A) Distal üreter izole ve yukarıda kelepçelerle yükseltilmiş durumda; 6-0 dikiş altına yerleştirildi. (B) Ligatür ve bağlanma içinde üreter ile paralel konumlanmış kalibrasyon teli ve kayan düğüm kullanılarak. (C) Tel çekilmesi, standart bir kalıntı lümen bırakılır. (D) Tasvir edilen adımların şematik çizimi; üreter (mavi), kalibrasyon teli (gri) ve ligatür (siyah). Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

6. Sağ üreterin tanımlanması ve mobilizasyonu

  1. Adımları karşılıklı tarafa benzer şekilde tekrarlayın (Şekil 3).

figure-protocol-3
Şekil 3: Sağ üreterin boya destekli tanımlaması ve mobilizasyonu. (A) Sağ retroperitoneal maruziyet, boya destekli üreter demarkasyonu. (B) Çevre dokudan üreteri harekete geçiren küt diseksiyon. (C) Tarif edilen adımların şematik gösterimi. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

7. Tel olmadan sürgülü bir düğüm kullanarak sağ üreterin proksimal tam bağlanması

  1. Proksimal üreterin harekete geçmiş bir segmentini, üreteri sıkıştırmadan travmatik forseps kullanarak yükseltin (Şekil 4A.1–3).
  2. Küker forsepsle üreter altından 6-0 oranında rezorbasyon olmayan monofilament dikişi geçirin (Şekil 4A.4,5).
  3. Yukarıda açıklandığı gibi, aynı yönde birkaç halka atışı ile kaydıran bir düğüm kullanarak kademeli olarak bağlanın; dikiş sapanı üreti gevşemeden sıkıca bağlayana kadar. Daha sonra, neredeyse tam bir ışık kapanışı elde etmek için karşı yönlü kilitleme döngüleriyle sabitleyin (Şekil 4B.1–4).

figure-protocol-4
Şekil 4: Tel olmadan sürgülü düğüm kullanılarak sağ üreterin proksimal tam bağlanması. (A) Proksimal üreter Overholt kelepçeleriyle izole ve yükseltilmiş durumda; 6-0 dikiş altına yerleştirildi. (B) Tel olmadan tam bağlanma ve kaydırma düğümü. (C) Tarif edilen adımların şematik gösterimi. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

8. Kısmi ve tam üreter tıkanıklığının fonksiyonel doğrulaması

  1. Sol tarafta kısmi tıkanıklığın doğrulanması için, bir şırınga ile böbrek pelvisine transparankimatlı olarak 0,2 mL seyreltilmemiş metilen mavisi enjekte edin ve ligasyon bölgesine distal üreter dolayının antegrad dolgusu gözlemlenin (Şekil 5A.1–3).
  2. Böbrek pelvisine 1.0 mL salin enjekte ederek boya sinyalini yıkama yoluyla kademeli olarak temizleyin ve üreter açıklığının devam ettiğini doğrulayın (Şekil 5A.3). Eksik üreter tıkanıklığının kesinliğini artırmak için, mesane hacmi kapasitesi aşılana ve üretradan görünür sıvı çıkışı gözlemlenene kadar enjeksiyona devam edin (Şekil 5A.4–5).
  3. Sağ tarafta tam tıkanıklığın doğrulanması için, 0.2 mL seyreltilmemiş metilen mavisi transparenkimatlı olarak böbrek pelvisine enjekte edilecek ve distal boya geçişinin olmadığını doğrulayacak (Şekil 5B.1,2).
  4. Ligasyon bölgesinin yukarısında proksimal üreter kalibre genişlemesini tam çıkış bloğunun göstergesi olarak tanımlayın (Şekil 5B.3).
  5. Hayvan modelinin kullanılabilirliğinin ötesinde ek doğrulama için, her iki üreteri distal olarak kesin ve açık üreter uçlarını idrar toplama ölçümleri için cam kapillyarların hemen yanına yerleştirin (Şekil 5C).
  6. Bu modelin doğrulanması için, fizyolojik koşullarda ve kısmi ligasyon sonrası 30 dakikalık bir süre içinde böbrek başına idrar üretimini 0,65, 0,55, 0,30 ve 0,20 mm çapındaki kalibrasyon telleriyle niceliklendirilin (Şekil 5C.2).

figure-protocol-5
Şekil 5: Kısmi ve tam üreter tıkanıklığının fonksiyonel doğrulaması. (A) Kısmi tıkanıklık: boya renklenmesi ve tuzlu su yıkaması, distal üreter dolgusu ve üretral çıkışı göstererek, kalıntı açıklığı gösterir. (B) Neredeyse tam tıkanıklık: distal boya yokluğu, ligatürün önünde balonlu proksimal üreter bulunur. (C) Böbrek başına 30 dakikadan fazla bir tek taraflı idrar hacmi toplanması, fizyolojik koşullardan tam tıkanmaya kadar idrar çıkışında kademeli bir azalma göstermektedir. (D) (1) bağ çapı, (2) dış üreter çapı, (3) iç üreter çapı ve (4) üreter duvar kalınlığı mikroskobik ölçümler. Yıldız işaretleri keşif anlamlılık seviyelerini gösterir. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

9. Son adımlar ve dikkate alınanlar

  1. Karın duvarını, önceki raporlarda tanımlandığı gibi steril koşullarda birden fazla katman halindekapatın.
  2. Ameliyattan sonra, her hayvanı göğsüm yatması ve kendiliğinden hareket kabiliyeti kazanana kadar sürekli gözlemleyin. Hayvanları ancak tam uyanık olup koordineli hareket edebildiklerinde yeniden yerleştirin. Ameliyat sonrası analjezi ile günde iki kez 5 mg/kg oranında, 48 saat boyunca uygulanır ve veteriner personelinin iyileşmeyi izlemek ve olası komplikasyonları tespit etmek için günlük klinik değerlendirmeler yapmasını sağlar.
  3. Fare GrimaceScale 22 ve Body ConditionScore 23 gibi standart puanlama sistemleri kullanarak hayvan refahını belgeleyin. İnsani son noktalar arasında Fare Grimace Puanı 6 ≥ veya yeterli ağrı aljezisine rağmen 1 Vücut Durumu Puanı bulunur. Bu bulguları ortaya koyan hayvanları ve ameliyat sonrası yara enfeksiyonu veya karın duvarı açılması gösteren hayvanları, kurumsal bakım standartlarına uygun olarak derhal sonlandırın.
  4. Hayatta kalma deneyleri veya takip sonrası sonlandırma için, hayvanı derin anestezi altında keskin kardiektomi veya servikal dislokasyon yoluyla (kurumsal onaylı protokollere uygun olarak) ötenazi yapın. Isteğe bağlı olarak, sonraki anatomik inceleme, biyomoleküler analiz veya histopatolojik görüntüleme için böbrekler ve üreterler en bloc olarak rezeksiyon yapılabilir.
  5. Hayvan leşlerini, rezek edilen dokuları, keskin maddeleri ve kalan kimyasal çözeltileri kurumsal hayvan tesisleri ve biyogüvenlik yönergelerine uygun olarak bertaraf edin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Kalibre edilmiş ligasyon tekniği, tüm deneysel gruplarda idrar akışında çapa bağlı bir azalma sağladı. Her iki böbrek kullanılarak toplam 14 sıçanda idrar akışı değerlendirildi ve kısmi tıkanıklık seviyesi başına 5 organdan (0,65, 0,55, 0,30 ve 0,20 mm çap) ölçüldü. Ayrıca, bir tarafı Sham tedavisi gören 4 hayvan dahil edildi (üreter harekete geçirildi ve gevşek, sıkıltıcı olmayan bir hava düğümü bağlandı, diğer tarafta ise tam tıkanma (tam tıkanma için tel yerleştirilmemiş bir bağ) doğr...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu çalışma, orta hat laparotomisi ve kalibre edilmiş kısmi ligasyon yoluyla sıçanlarda tek taraflı üreter daraltmaları indükleyen tekrarlanabilir cerrahi bir yöntem kurmakta; bu yöntem, fonksiyonel ve anatomik olarak iyi huylu insan üreter daraltmalarına benzeyen makroskopik doku canlılığı korunmuştur.

Klinik olarak, üreter striktür hastalığı, iatrojenik yaralanma, travma veya iltihaplanmadan sonra ortaya çıkan uzun vadeli fonksiyonel kayıpla birlikte üst yol ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Çıkar çatışması ilan edilmedi. Özel bir fon alınmadı. Hayvan kullanımı Baden-Württemberg Bölge Konseyi tarafından onaylanmış (IACUC 35-9185.81/G-62/23).

Teşekkürler

Yazarlar, Baden-Württemberg Bilim, Araştırma ve Sanat Bakanlığı (MWK) ve Alman Araştırma Vakfı (DFG) tarafından INST 35/1314-1 FUGG ve INST 35/1503-1 FUGG hibeleri aracılığıyla desteklenen veri depolama hizmetini SDS@hd minnettarlıkla takdir etmektedir. Ayrıca, yazarlar NCT'nin (Heidelberg, Almanya'daki Ulusal Tümör Hastalıkları Merkezi) yapılandırılmış doktora sonrası programı ve Cerrahi Onkoloji programı aracılığıyla verdiği desteği minnettarlıkla takdir etmektedir. Ayrıca, Baden-Württemberg Eyalet Parlamentosu tarafından onaylanan Innovation Campus Health + Life Science Alliance Heidelberg Mannheim'a, Alexander Studier-Fischer için yapılandırılmış doktora sonrası programından: Sağlıkta Yapay Zeka (AIH) programından devlet fonlarıyla desteklenen desteği takdir ediyoruz - DKFZ, EMBL, Heidelberg Üniversitesi Hastanesi, Mannheim Üniversitesi Hastanesi, Merkezi Ruh Sağlığı Enstitüsü iş birliği, ve Max Planck Tıbbi Araştırma Enstitüsü'nde yer aldı. Ayrıca, Mannheim Üniversitesi Tıp Merkezi'ndeki DKFZ Hector Kanser Enstitüsü aracılığıyla verilen desteği takdir ediyoruz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Atravmatik hazırlık pençesleriEskülapFB395RDE BAKEY ATRAUMATA travmatik pensler, düz
Küt Overholt kelepçeleriEskülapBJ012RBABY-MIXTER hazırlığı ve bağlama kelepçesi, bükülmüş, 180 mm
KanülBD (Beckton, Dickinson)301300BD Microlance 3 kanül 20 G
Kapiller tüplerSigma AldrichP1174Mikrokapiller tüp, kalibre edilmiş 100 & mikro; L
karprofenCP Pharma115karprofen %0,5 (%50 mg/mL ile 1:10 seyreltilmiş %5) (Karprosol & regul;)
Pamuk Whool TakaslarıAmazonASIN: B0FPDB8ZGSSteril olmayan pamuk WHOOL Swaps
(Hayatta kalma deneyleri için otoklav)
Fiksasyon çubuklarıLegefirm‎ 500343896Y şeklinde metal sabitleme çubukları olarak kullanılan akort çatalları
gazlı bez takasıMedrullASIN: B09164D1JGSteril gazlı bez takası
Isıtma pediRoyal GardineerIP67Royal Gardineer Isıtma Pedi Boyutu S, 20 Watt
izofluranPiramal Kritik BakımPZN / EAN 09714675 / 4150097146757%100 izofluran 250 mL
İzofloran buharlaştırıcıUNO ROESTVASTSTAAL BV180000002İzofloran buharlaştırıcı
izotonik sodyumklorür çözeltisiB. BraunASIN: B007PZJOQ4%0,9 sodyumklorür çözeltisi
ketaminCP Pharma1202ketamin %10 (100 mg/mL)
Metal kalibrasyon teli
(0,20 mm çap)		QUARKZMANASIN: B0DCZBT4LWCr20Ni80-Nichrom metal tel
(0,20 mm çap)
Metal kalibrasyon teli
(0,30 mm çap)		Rayher4006166052859Cr20Ni80-Nichrom metal tel
(0,30 mm çap)
Metal kalibrasyon teli
(0,55 mm çap)		SKYPROUPC: 792138793816Cr20Ni80-Nichrom metal tel
(0,55 mm çap)
Metal kalibrasyon teli
(0,65 mm çap)		twippASIN: B07WFWNNRMCr20Ni80-Nichrom metal tel
(0,65 mm çap)
metilen mavisi %0,5ProvepharmPZN / EAN 10179678 / 4150101796787METILTIONINYUMKLORID Proveblue 5 mg/mL 10 ml şişelerde
Geri çekilmeyen monofilament 6-0 ligatürlerCOVIDIENVP-889-Xrezorbable olmayan poli-propilen monofilament cerrahi dikiş; iğne çıkarılabilir
Oftalmik MerhemBayer Vital GmbH1578681%5 dekspantenol
plastik perfüsör tüpüM. Schilling GmbHS702NC150bağlantı borusu COEX 150 cm
Hazırlık makasıEskülapBC177RJAMESON hazırlık makasları, bükülmüş, ince model, küt/küt, 150 mm (6")
çelik levhaMaschinenbau Feld GmbHC010206Galvanizli levha, 40 x 50 cm, kalınlık 4,0 mm
entegre iğneli şırıngaBLPRKOTBL2509L3yici081 ml enjektör ve entegre 30 G iğne
ksilazinCP Pharma1206ksilazin %0,2 (%2 ile 20 mg/mL 1:10 seyreltilmiş bir şekilde) (Xylavet)

Kaynaklar

  1. Moretto, S., et al. Ureteral stricture rate after endoscopic treatments for urolithiasis and related risk factors: systematic review and meta-analysis. World J Urol. 42 (1), 234(2024).
  2. Sahin, C., et al. Ureteral stricture formation after endoscopic removal of obstructing stones: could it be predicted with well-assessed radiological parameters. Urolithiasis. 52 (1), 34(2024).
  3. Sunaryo, P. L., et al. Ureteral strictures following ureteroscopy for kidney stone disease: A population-based assessment. J Urol. 208 (6), 1268-1275 (2022).
  4. Minkovich, M., et al. Ureteral strictures post-kidney transplantation: Trends, impact on patient outcomes, and clinical management. Can Urol Assoc J. 15 (10), E524-E530 (2021).
  5. Rosenfeld, J., et al. A review of complications after ureteral reconstruction. Asian J Urol. 11 (3), 348-356 (2024).
  6. Chevalier, R. L., Forbes, M. S., Thornhill, B. A. Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy. Kidney Int. 75 (11), 1145-1152 (2009).
  7. Reicherz, A., et al. Ureteral obstruction promotes ureteral inflammation and fibrosis. Eur Urol Focus. 9 (2), 371-380 (2023).
  8. Li, Z., et al. Health-related quality of life (HRQoL), anxiety and depression in patients with ureteral stricture: A multi-institutional study. World J Urol. 41 (1), 275-281 (2023).
  9. May, P. C., et al. The morbidity of ureteral strictures in patients with prior ureteroscopic stone surgery: multi-institutional outcomes. J Endourol. 32 (4), 309-314 (2018).
  10. Contreras, P., et al. Ureteral stricture: Endoscopic management. Eur Urol Focus. 11 (5), 730-732 (2025).
  11. Su, B., et al. Long-term outcomes of Allium ureteral stent as a treatment for ureteral obstruction. Sci Rep. 14 (1), 21958(2024).
  12. Kowalski, F., et al. Endourological treatment of ureteral strictures with the use of self-expanding stents: Is it possible to completely cure the stricture endoscopically? a retrospective study with two-year follow-up. World J Urol. 43 (1), 201(2025).
  13. Bourillon, A., et al. Robotic upper urinary tract reconstruction for ureteral stricture: A single-center series. J Robot Surg. 19 (1), 573(2025).
  14. Vroomen, L., et al. A new intrasurgical technique to safely and reproducibly induce partial unilateral urinary obstruction and renal scarring in a rat model. Int Urol Nephrol. 52 (7), 1209-1218 (2020).
  15. Chen, T., Zhang, Z., Lai, C. Improvement of the reversible unilateral ureteral obstruction model. Ren Fail. 47 (1), 2454721(2025).
  16. Nan, Q. Y., et al. Pathogenesis and management of renal fibrosis induced by unilateral ureteral obstruction. Kidney Res Clin Pract. 43 (5), 586-599 (2024).
  17. Khater, Y., Barakat, N., Shokeir, A., Samy, A., Karrouf, G. Renal fibrosis progression following partial unilateral ureteral obstruction: mechanisms and therapeutic insights. World J Urol. 43 (1), 229(2025).
  18. Thornhill, B. A., Burt, L. E., Chen, C., Forbes, M. S., Chevalier, R. L. Variable chronic partial ureteral obstruction in the neonatal rat: A new model of ureteropelvic junction obstruction. Kidney Int. 67 (1), 42-52 (2005).
  19. Studier-Fischer, A., et al. Endotracheal intubation via tracheotomy and subsequent thoracotomy in rats for non-survival applications. J Vis Exp. (205), e66684(2024).
  20. Studier-Fischer, A., et al. Controlled reversible visceral arterial ischemia, venous congestion and combined malperfusion via midline laparotomy in rats. J Vis Exp. (209), e67171(2024).
  21. Studier-Fischer, A., et al. 5/6 nephrectomy using sharp bipolectomy via midline laparotomy in rats. J Vis Exp. (218), e67322(2025).
  22. Sotocinal, S. G., et al. The rat grimace scale: A partially automated method for quantifying pain in the laboratory rat via facial expressions. Mol Pain. 7, 55(2011).
  23. Hickman, D. L., Swan, M. Use of a body condition score technique to assess health status in a rat model of polycystic kidney disease. J Am Assoc Lab Anim Sci. 49 (2), 155-159 (2010).
  24. Gild, P., et al. Adult iatrogenic ureteral injury and stricture-incidence and treatment strategies. Asian J Urol. 5 (2), 101-106 (2018).
  25. Luo, J., et al. marrow mesenchymal stem cells reduce ureteral stricture formation in a rat model via the paracrine effect of extracellular vesicles. J Cell Mol Med. 22 (9), 4449-4459 (2018).
  26. Maruschke, M., et al. Development of a rat model for investigation of experimental splinted uretero-ureterostomy, ureteral stenting and stenosis. In Vivo. 27 (2), 245-249 (2013).
  27. Demirhan, K., Saglam, H. S., Cimen, H. I., Elcin, B., Cokluk, E. Effect of the location and severity of partial ureteral obstruction on urinary system stone disease formation. Sci Rep. 15 (1), 11560(2025).
  28. Wen, J. G., Chen, Y., Frøkiaer, J., Jørgensen, T. M., Djurhuus, J. C. Experimental partial unilateral ureter obstruction I pressure flow relationship in a rat model with mild and severe acute ureter obstruction. J Urol. 160 (4), 1567-1571 (1998).
  29. Li, P., et al. An immature murine model of reversible unilateral ureteral obstruction. J Vis Exp. (218), e67238(2025).
  30. Martínez-Klimova, E., Aparicio-Trejo, O. E., Tapia, E., Pedraza-Chaverri, J. Unilateral ureteral obstruction as a model to investigate fibrosis-attenuating treatments. Biomolecules. 9 (4), 141(2019).
  31. Mohammadi, A., et al. Effects of the surgical ligation of the ureter in different locations on the kidney over time in the rat model. Adv Urol. 2024, 6611081(2024).
  32. Narváez Barros, A., et al. Reversal unilateral ureteral obstruction: A mice experimental model. Nephron. 142 (2), 125-134 (2019).
  33. Nakazawa, R., et al. Renal replacement strategies: dual benefits of hydrogen gas inhalation and hydrogen-enriched dialysate. Med Gas Res. 15 (3), 444-445 (2025).
  34. Cheng, J., Shi, M., Sun, X., Lu, H. Therapeutic effect of hydrogen and its mechanisms in kidney disease treatment. Med Gas Res. 14 (2), 48-53 (2024).
  35. Liu, B., et al. Hyperbaric oxygen therapy for male infertility: a systematic review and meta-analysis on improving sperm quality and fertility outcomes. Med Gas Res. 15 (4), 529-534 (2025).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Segmental reteral Strikt rS an ModeliTel ile Kalibre Edilmi LigasyonObstr ktif ropatiRenal FonksiyonRekonstr ktif rolojiPreklinik Modelreteral Konstriksiyon

İlgili makaleler