Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Araştırma makalesi

Gut Artritinin Tedavisinde Rhizoma Drynariae'nin toplam flavonoidlerinin mekanizması ve deneysel doğrulaması

111 görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/70849

⸱

5 Haziran 2026

 ,  , 
1School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine, 2Quality department, Beijing Tongrentang Kangyang Industry Development Co., Ltd, 3Engineering Research Center of Good Agricultural Practice for Chinese Crude Drugs, Ministry of Education

Bu makalede

Özet

Rhizoma Drynariae'nin (TFRD) toplam flavonoidleri, enflamatuar hücre infiltrasyonunu bastırarak ve TNF-α, IL-6 ve IL-17A seviyelerini düşürerek, öncelikle AKT, MAPK ve NF-κB sinyal yollarının inhibisyonu yoluyla gut artritini (GA) hafifleder; bu da anti-inflamatuar ve immünomodülatör terapötik potansiyelini vurgular.

Özet

Gut artriti (GA), eklem boşluğunda ve çevresindeki dokularda monosodyum ürat (MSU) kristallerinin birikmesiyle oluşan bir iltihaplı eklem hastalığıdır. Geleneksel Çin tıbbında, Rhizoma Drynariae (Gusuibu) uzun süredir GA'nın klinik tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır ve flavonoidler onun temel biyoaktif bileşenleri olarak kabul edilir. Bu araştırma, GA'ya karşı Rhizoma Drynariae (TFRD) toplam flavonoidlerinden oluşan bir bileşen-hedef ağı oluşturmak için ağ farmakolojisini kullandı ve böylece ana bileşenleri, temel hedefleri ve ilgili yolları belirledi. Fare modelleri, monosodyum ürat kristal süspansiyonunun eklem içi enjeksiyonu ile oluşturulmuş ve oral garajla TFRD veya pozitif kontrol olan kolşisin ile tedavi edilmiştir. Örnek topladıktan sonra, ağ farmakolojisine dayalı tahmin sonuçları fare serumu metabolomikleri, enzim bağlantılı immünosorbent testi (ELISA) ve Western blot analiziyle doğrulandı. Ağ farmakoloji analizi, TFRD'nin anti-GA etkilerinin IL6, AKT1, TNF, EGFR, JUN ve PTGS2 gibi önemli hedefler aracılığıyla aracılık ettiğini ve esas olarak IL-17, TNF, NF-κB, MAPK, PI3K-AKT, JAK-STAT ve T-hücre reseptör sinyal yolları gibi iltihap, bağışıklık ve apoptozla ilişkili yollarla ilişkilendirildiğini göstermiştir. Benzer şekilde, metabolomikler inflamatuar yanıtın kritik rollerini de ortaya koydu. Hematoksilin ve eosin (H&E) boyama, TFRD'nin inflamatuar hücrelerin infiltrasyonunu azalttığını doğruladı. ELISA testi, TFRD grubunun sinovial dokuda inflamatuar faktörler TNF-α, IL-6 ve IL-17A'nın ifadesini anlamlı şekilde inhibe ettiğini doğruladı. Western blot analizi, TFRD'nin sıçan sinovial dokusunda AKT, MAPK p38 ve NF-κB p65'in GA kaynaklı hiperfosforilasyonunu inhibe ettiğini ortaya koydu. TFRD, GA sıçanlarında iltihaplanma kaynaklı değişiklikleri, ilgili inflamatuar faktörleri ve yolları doğrudan modüle ederek etkili bir şekilde hafifletebilir.

Giriş

Gut artriti (GA), eklemlerin içinde ve çevresinde monosodyum ürat (MSU) kristallerinin birikmesiyle tetiklenen ve eklembölgesini uyaran inflamatuar bir eklem hastalığıdır 1,2. GA'nın patogenezi, genetik yatkınlık, çevresel etkiler ve metabolik düzensizlik arasında karmaşık bir etkileşim içerir; bu bozukluk, esas olarak aşırı ürik asit üretimi veya yetersiz böbrek dışımı nedeniyle hiperürikemiile karakterize edilir 3,4. Bu, urat kristallerinin böbrek dokularında ve eklem boşluklarında sistematik olarak birikimine yol açar; burada doğuştan gelen bağışıklık sistemini aktive eder ve yoğun inflamatuar zincirleritetikler 5,6. Son yıllarda, bir dizi çalışma, GA'nın küresel yaygınlığının obezite ve metabolik sendromun artan sıknlığı ile paralel olarak arttığını, bunun fonksiyonel bozulmaya yol açtığını ve etkilenen bireyler üzerinde önemli bir sosyoekonomik yükoluşturduğunu göstermiştir 7. Gut artritinin tedavi stratejisi, akut lokal eklem iltihabını kontrol etmek ve uzun vadeli ürik asitseviyelerini 8,9 yönetmeye odaklanır. Buna rağmen, mevcut farmakoterapilerin faydası genellikle yan etki profilleri ve spesifik kontrendikasyonlarıyla sınırlanır. Örneğin, kronik böbrek hastalığı olan hastalarda genellikle akut böbrek hasarını tetikleme veya şiddetlendirme riski nedeniyle steroid olmayan anti-enflamatuar ilaçlarkaçınılır 10,11. Benzer şekilde, ürat düşüren allopurinol Stevens–Johnson sendromu gibi ciddi deri yan reaksiyonları için iyi belgelenmiş bir risk taşırken, benzbromaron önemli hepatotoksisite(11,12,13,14,15) oluşturabilir. Bu nedenle, GA'nın etkili yönetimi için daha güvenli, daha geniş uygulanabilir ve mekanik olarak hedeflenmiş tedavilerin geliştirilmesine yönelik güçlü bir ihtiyaç vardır.

Geleneksel Çin tıbbında (TCM) GA, "Lijie Hastalığı" (eklem koşma ağrısı), "Gut bi" (gut engeli) ve "Yu Zhuo bi" (staz-bulanıklık engeli) gibi tanısal kategorilere girer. GA için TCM müdahaleleri, anti-inflamatuar ve analjezik etkiler, ürik asit metabolizmasının modülasyonu, mikro sirkülasyonun iyileştirilmesi ve eklem fonksiyonunun korunması yoluyla sinerjik etkiler sunar; bu da onu çağdaş araştırmaların önemli bir alanıyapar 16,17,18,19. Drynaria fortunei (Kunze) J.Sm.'nin kurutulmuş köksapından türetilen Rhizoma Drynariae (Gusuibu), Polypodiaceae ailesine ait çok yıllık bir eğrelti otu agajıdır ve klinik uygulamada GA tedavisinde yaygın olarak kullanılır. Rhizoma Drynariae'nin biyoaktif bileşikleri öncelikle flavonoidler, fenilpropanoidler, triterpenoidler, fenolik asitler ve bunlarınglikozidlerini içerir 20,21. Bunlar arasında, flavonoidler son yıllarda en kapsamlı incelenen bileşiksınıfını temsil etmektedir (22,23,24). Önceki çalışmalar, flavonoidlerin belirgin anti-inflamatuar ve antioksidan özelliklere sahip olduğunugöstermiştir 25.

Ön araştırmalar, Rhizoma Drynariae (TFRD) toplam flavonoidlerinin osteoartrit, romatoid artrit ve diğer iltihap eklem hastalıklarında inflamatuar yanıtları etkili bir şekilde bastırabildiğiniortaya koymuştur 26,27,28. Ancak, TFRD'nin GA'ya karşı temel mekanizmaları henüz kapsamlı şekilde araştırılmamıştır. Bu nedenle, bu çalışma, GA tedavisinde TFRD'nin spesifik mekanizmalarını ve terapötik etkinliğini keşfetmek ve doğrulamak için ağ farmakolojisi, metabolomik ve moleküler biyoloji deneylerini birleştiren entegre bir yaklaşım kullanmayı amaçlamaktadır. GA karşısında TFRD tedavisinin altında yatan çok bileşenli, çok hedefli ve çok yollu mekanizmaların sistematik olarak incelenmesinin, ilaç keşfini ilerletmesi ve GA klinik yönetimi için yenilikçi seçenekler ve pratik çözümler sunması beklenmektedir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu çalışma, Çin-Japonya Dostluk Hastanesi Hayvan Etik Komitesi tarafından incelenip onaylandı (Onay No: zryhyy21-22-08-10) ve laboratuvar hayvanlarının etik bakımı ve kullanımı için kurumsal yönergelere uygun şekilde yürütüldü.

TFRD ile ilgili ve GA ile ilgili hedeflerin tahmini ve taraması
Rhizoma Drynariae'nin kimyasal bileşenleri, Geleneksel Çin Tıp Sistemleri Farmakoloji Veritabanı ve Analiz Platformu'ndan (TCMSP) "Rhizoma Drynariae" aramaterimi 29 kullanılarak alınmıştır. Potansiyel biyoaktif bileşenler için tarama, oral biyoerişilebilirlik (OB) ≥% %30 ve ilaç benzerliği (DL) kriterlerine göre yapıldı≥ 0.1830,31,32. Ortaya çıkan bileşik havuzundan, flavonoid bileşenler kimyasal yapılarına göre tanımlandı ve seçildi. Bu flavonoid bileşenler, bundan sonra Rhizoma Drynariae'nin toplam flavonoidleri (TFRD) olarak adlandırılacak olup, aşağı akış analizine dahil edilmiştir. TFRD ile ilişkili hedef genler TCMSP veritabanından alındığında, onların standartlaştırılmış gen sembolleri UniProtveritabanı 33 kullanılarak notlandı. "Gut" kelimesi arama terimi olarak kullanılarak, hastalıkla ilgili hedefler GeneCards veritabanından alınarak adaygenler seti oluşturuldu 34.

Bileşik hedef ağının kurulması
TFRD ile GA ile ilgili hedefler arasındaki kesişim, TFRD'nin anti-GA etkilerini aracılık eden ana terapötik hedefler olarak tanımlandı ve örtüşen küme Venn diyagramı kullanılarak görselleştirildi. Ayrıca, Cytoscapeyazılımı 35 kullanılarak "TFRD - hedefler - GA" düzenleyici ağı oluşturuldu ve analiz edildi.

Protein-protein etkileşim ağı
TFRD'nin GA'ya karşı temel terapötik hedefleri, protein-protein etkileşimi (PPI) ağı oluşturmak için çevrimiçi bir veritabanına aktarıldı ve minimum gerekli etkileşim puanı "yüksek güven (0.700)" olarak belirlendi. PPI ağı Cytoscape yazılımı kullanılarak optimize edildi ve derece merkeziliğine göre sıralanan ilk 30 çekirdek hedef,37,38 çubuk grafik oluşturmak için seçildi.

KEGG yol zenginleştirme analizi
Bu çekirdek hedefler üzerinde KEGG yol zenginleştirme analizi R yazılımı ve Bioconductorveritabanı 38,39 kullanılarak gerçekleştirildi. P-değeri 0,05 < olan yollar istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edildi. Hastalık ve metabolizma ile ilgili yollar hariç tutulduktan sonra, Cytoscape'te bir yol-hedef etkileşim ağı görselleştirildi. Bu yollar arasında, artan P değeriyle sıralanan ilk 20 yol bir çubuk grafikinde sunuldu.

İlaç hazırlığı
Monosodyum ürat (MSU) kristal süspansiyonu hazırlamak için, 500 mg MSU kristali analitik bir trafik kullanılarak tartıldı, 10 mL normal tuzlu suyla ve 2 mL Tween 80 içinde dağıtıldı ve manyetik olarak karıştırılırken ısıtıldı. Karışım daha sonra normal tuzlu suyla 20 mL nihai hacme ayarlanarak 25 mg/mL süspansiyon elde edildi. Otoklavlama sonrası süspansiyon 4 °C'de saklandı ve kullanıma kadar saklandı. TFRD için yaygın klinik doz, 70 kg ağırlığındaki bir yetişkin için günde 750 mg'dır; bu da fare dozu 67,5 mg/kg vücut ağırlığına karşılık gelir. TFRD, damıtılmış suda 6,75 mg/mL konsantrasyonuna kadar çözüldü ve daha sonra kullanılmak üzere 4 °C sıcaklıkta saklandı. Vücut yüzey alanı normalizasyon yöntemine göre, klinik insan dozundan (0,6 mg/60 kg) dönüştürülen farelerde oral oral doz kolşisin (pozitif ilaç) 0,062 mg/kg'dır. Kolşisin çözeltisi, 0.0062 mg/mL konsantrasyonda damıtılmış suda hazırlanır ve daha sonra kullanılmak üzere 4 °C'de saklanır.

Hayvanlar
Bu çalışmada toplam 36 altı haftalık erkek Sprague–Dawley (SD) sıçan (220 ± 10 g) kullanıldı (hayvan lisansı No. SCXK [Jing] 2025-0008). Hayvanlar, Çin-Japonya Dostluk Hastanesi Laboratuvar Hayvan Merkezi'nde standart diyet koşullarında, 22–24 °C sıcaklıkta ve %50–70 nem içinde barındırıldı.

Model oluşturma ve müdahale
Bir haftalık alışmanın ardından, fareler rastgele dört gruba (n = 9 her biri) ayrıldı: kontrol, model, TFRD ve pozitif ilaç. Rastgele hesaplama, rastgele sayı tablosu kullanılarak gerçekleştirildi. Veri toplama ve analiz kör koşullarda gerçekleştirildi. Tüm tedaviler günde bir kez ağızdan yapılan garajla verildi. Tüm müdahaleler, yedi gün ardışık olarak saat 08:00'de oral garajla günde bir kez uygulandı. Boş kontrol ve model gruplara normal salin (10 mL/kg) verildi, TFRD ve pozitif ilaç gruplarına ise eşdeğer hacimde (10 mL/kg) ilgili ilaç askılama verildi. Müdahalelerin dördüncü gününde, boş kontrol grubuna eklem içi steril normal salin enjeksiyonu verildi, modeldeki fareler TFRD ve pozitif ilaç gruplarına ise akut gut artriti indüklemek için MSU kristal süspansiyonu enjekte edildi. Enjeksiyondan önce, fareler izofloran anestezi sistemi kullanılarak anestezi edildi. Modeldeki her fare, TFRD ve pozitif ilaç grupları, sol ayak bileği boşluğuna 200 μL MSU süspansiyonu aldı. İğne çekildikten sonra, sızıntıyı önlemek için enjeksiyon yerine steril pamuk çubuğuyla birkaç saniye hafif baskı uygulandı.

Örnek toplama ve işleme
Model indüksiyondan 72 saat sonra fareler anestezi edilip sırtüstü konumlandırıldı. Karın dezenfeksiyonunun ardından periton boşluğu açıldı ve bağırsaklar nazikçe geri çekilerek karın aortası ortaya çıktı. Damara paralel olarak bir kan toplama iğnesi yerleştirilerek karın aort kanı alındı ve kan hemen buzlu su banyosunda önceden soğutulmuş heparinli tüplere aktarıldı. Örnekler, 3000 × g sıcaklıkta 4 °C'de 10 dakika boyunca santrifüj edilerek serum elde edildi; serum alikotasyonla -80 °C'de depolandı ve sonraki metabolomik profilleme için saklandı. Hayvanlar daha sonra CO₂ asfiksiyle ötenazi edildi. Sol ayak bileği eklemi çevresindeki tüy tıraş edildi ve çevresindeki deri ile kas dikkatlice çıkarılarak sağlam eklem yapısı ortaya çıktı. Sinovial doku, eklem kapsülünü kaplayan ince beyazmsı bir zar olarak görüner ve ince forseps kullanılarak bitişik fasyadan nazikçe izole edilmiştir. Toplanan eklem örnekleri %4 paraformaldehit ile 4 °C'de 72 saat boyunca sabitlendi. Daha sonra, eklem dokusunun bir kısmı EDTA dekalsifikasyon çözeltisiyle kalsifiye edildi ve çözelti 8 hafta boyunca haftalık olarak yenilendi. Tam kalsifikasyon iğne delme testiyle doğrulandı: direnç tespit edilirse, dekalsifikasyon doku tamamen penetre edilene kadar devam etti.

Kireçsizleştirmenin ardından, ayak bileği eklemleri sagittal olarak kesitlenmiş, işlem kasetlerine yerleştirilmiş ve gradyan etanol dehidrasyonuna maruz bırakılmıştır. Dokular ksilenle temizlendi, parafin ile infiltrasyon yapıldı ve parafin bloklarına gömüldü. 6 μm kalınlığındaki bölümler otomatik bir mikrotom kullanılarak kesilmiş, 40 °C su banyosu üzerinde yüzdürülmüş ve yapıştırıcı slaytlara monte edilmiştir. 60 °C'de 30 dakika kuruduktan sonra, bölümler deparafinize edilip, standart protokollere göre hematoksilin ve eozin (H&E) ile boyanmış ve sonunda nötr balsamla örtülmüştür. Tüm slayt görüntüleri dijital slayt tarayıcı kullanılarak alındı.

Serum metabolomik analizi
Model ve TFRD gruplarından alınan serum örnekleri, işlemeden önce 4 °C'de çözüldü. Her örnek için, 100 μL serum mikrosantrifüj tüpüne aktarıldı ve iç standartlar içeren 400 μL önceden soğutma çözücüsü (metanol: acetonitrile, 1:1, v/v) ile birleştirildi. Karışım 1 dakika girdabla tutuldu, ardından 10 dakika buzlu su banyosunda sonikasyon yapıldı. Daha sonra protein çökelmesini kolaylaştırmak için 1 saat boyunca -40 °C'de kuluçka yapıldı ve ardından 12.000 × g'de 4 °C'de 15 dakika boyunca santrifüjlendi. Santrifüjlemeden sonra elde edilen süpernatant, dikkatlice toplanıp UHPLC–MS analizi için otosampler şişelerine aktarıldı. Ayrıca, aynı gruptaki her örnekten eşit hacimli süpernatan bir topa toplanarak kalite kontrol (QC) örnekleri oluşturuldu.

İki gruptan serum örneklerinde metabolit tespit edilmesinin ardından, ham kütle spektrometrisi verileri otomatik zirve tespiti, çıkarma, hizalama ve entegrasyon için özel yazılım tarafından işlendi ve iyon spektral özelliklerinden oluşan yapılandırılmış bir veri matrisi ortaya çıktı. Tespit edilen spektral özellikler, sistemik dolaşıma girmiş TFRD'den türetilen metabolitleri belirlemek için yerleşik metabolomik spektral kütüphanelerle eşleştirildi. Tanımlanamayan özellikler ve aşırı eksik değerler içeren özellikler veri setinden çıkarıldı. Seçilmiş veri seti yeniden indekslendi ve standartlaştırılmışbir formatta yapılandırıldı.

İki grup arasındaki metabolitlerin diferansiyel ifadesi, hem katlanma değişimi (FC, gruplar arası oran olarak ifade edilir) hem de istatistiksel anlamlılık (p-değeri) hesaplanarak değerlendirildi. |log₂FC| eşiğini karşılayan metabolitler ≥ 1 ve P < 0.05 farklı ekspresyonel metabolitler (DEM) olarak tanımlandı. Tarama sonuçları, volkan grafikleri gibi yöntemlerle görsel olarak özetlendi. Elenen diferansiyel metabolitler, kanonik tanımlayıcıları (CID'ler) elde etmek için PubChem veritabanına aktarıldı.41. Karşılık gelen KEGG ID'leri CID'lere göre alındı. Son olarak, KEGG ID'leri metabolik yol zenginleştirme analizi yapmak ve DEM'lerle önemli ilişkili sinyal yollarını belirlemek için metabolomik analiz platformuna aktarıldı.

ELISA
Sinovial doku örnekleri sıvı azotta fırlanıp dondurularak ince bir toz haline getirildi. Yaklaşık 100 mg toz, elektronik hassas bir tereziyle tartıldı, 1 mL buz gibi soğuk PBS ile karıştırıldı ve cam homojenizatör kullanılarak buz üzerinde homojenleştirildi. Homojenat, 10.000 × g sıcaklıkta 4 °C'de 5 dakika boyunca santrifüjlendi ve süpernatant daha sonra ELISA tespiti için toplandı. Analiz öncesi, ELISA kiti 30 dakika boyunca oda sıcaklığında dengelenmesine izin verildi. Tüm reaktifler, seri seyreltilmiş standartlar, yıkama tamponu, biotin etiketli antikor çalışma çözeltisi ve enzim konjuge çözeltisi dahil olmak üzere üreticinin talimatlarına uygun olarak hazırlanmıştır. Daha sonra, önceden kaplanmış mikroplakanın belirlenmiş kuyruklarına farklı konsantrasyonlarda ve örneklerde 100 μL standart eklendi. Plaka mühürlenip 37 °C'de 90 dakika kuluçka altına alındı. Kuluçkadan sonra içindekiler atıldı ve kuyular dört kez yıkandı. Daha sonra, her kuyuya 100 μL biyotinillenmiş antikor çalışma çözeltisi eklendi, ardından 37 °C'de 60 dakika kuluçka ve başka bir yıkama adımı yapıldı. Sonrasında 100 μL enzim konjugat çalışma çözeltisi eklendi ve plaka 37 °C'de 30 dakika kuluçka geçirildi, ardından ek yıkama yapıldı. Daha sonra kromojenik bir alt eklendi ve plaka karanlıkta 37 °C'de 10 dakika kuluçka edildi. Reaksiyon, 100 μL stop çözeltisi eklenerek sonlandırıldı ve mikroplaka okuyucu kullanılarak 450 nm soğurgunluk ölçüldü. Standart bir eğri, standartların optik yoğunluk (OD) değerlerinin karşılık gelen konsantrasyonlarına göre eşleştirilmesiyle oluşturuldu ve örnek konsantrasyonları buna göre hesaplandı.

Western Blot
Sinovial dokular hızla dondurulur ve mekanik olarak ince bir toz haline getirilirdi. Ölçülen tozun bir kısmı, uygun miktarda buz gibi soğuk RIPA tamponunda proteaz ve fosfataz inhibitörleriyle desteklenerek (1:100, v/v) lizize edildi ve ardından 30 dakika boyunca buz üzerinde kuluçka yapıldı. Lizatlar daha sonra 10.000 × g sıcaklıkta 4 °C'de 5 dakika boyunca santrifüjlendi ve süpernatantlar dikkatlice toplandı. Protein konsantrasyonları BCA testi kullanılarak nicelendirildi ve tüm örnekler RIPA tamponu ile eşit konsantrasyonlara ayarlandı. Proteinler SDS-PAGE ile ayrılarak PVDF membranlarına aktarıldı. Zarlar bloklandı ve ardından birincil antikorlarla (1:1000 seyreltme) kuluçka edildi, ardından ikincil antikorlar (1:5000 seyreltme) uygulandı. Protein sinyalleri ECL algılama sistemi kullanılarak görselleştirildi ve bant yoğunlukları Image Lab yazılımı (Sürüm 5.2.1) kullanılarak nicelendirildi. Göreli ekspresyon seviyeleri β-aktine karşı normalleştirildi.

İstatistiksel analiz
İstatistiksel analizler SPSS yazılımı (sürüm 20.0) kullanılarak gerçekleştirildi. Veriler ortalama ± standart sapma (SD) olarak sunulur. Birden fazla grup arasındaki karşılaştırmalar için, varyansın homojenliği varsayımı sağlandığında tek yönlü varyans analizi (ANOVA) kullanıldı, ardından sonradan çift karşılaştırmalar için LSD testi yapıldı. Varyans homojenliği sağlanmadıysa, Welch'in ANOVA testi yapıldı, ardından Dunnett'in T3 testi yapıldı ve çoklu karşılaştırmalar yapıldı. P < değeri 0.05 istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

TFRD'nin temel bileşenleri
Rhizoma Drynariae'nin potansiyel biyoaktif bileşenleri TCMSP veritabanından alındı ve 71 aday ortaya çıktı. Bu 71 aktif bileşen daha sonra ağızdan biyoerişilebilirlik (OB ≥% %30) ve ilaç benzerliği (DL ≥ 0.18) temelli bir tarama sürecine tabi tutuldu ve 18 bileşik tespit edildi. Bu listenin daha ayrıntılı incelenmesi, bu aktif bileşiklerden 10'unun flavonoid olduğunu ortaya koydu; bunlar arasında: (2R)-5,7-dihidroksi-2-(4-hidroksife...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

GA, yaygın bir inflamatuar artrit türüdür. Şu anda klinik yönetim ağırlıklı olarak steroid olmayan anti-inflamatuar ilaçlara (NSAID'ler), kortikosteroidlere ve urat düşürücüajanlara dayanmaktadır 42. Ancak, bu ilaçların birlikte uygulanması hastalar üzerinde çeşitli olumsuz etkiler yaratır ve karaciğer ile böbrekler üzerinde önemli bir metabolik yükoluşturur 43. Bu durum özellikle önceden var olan karaciğer veya böbrek yetmezliği olan hasta...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar, bu çalışmada çıkar çatışması olmadığını bildirmektedir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
%4 ParaformaldehitSolarbioP1110
5X Protein Yükleme TamponuSolarbioP1040
AKT AntikorHücre Sinyal Teknolojisi4691S
Antikor Sulaştırıcı ÇözeltisiBeyotime BiyoteknolojisiP0268
Biyoiletken veritabanı https://www.bioconductor.org/
KolşisinŞanghay Yuanye Şirketi, Ltd
GeneCards veritabanı https://www.genecards.org/
Hematoksilin ve Eosin (H& E) Boyama KitiSolarbioG1120
MetaboAnalyst 6.0 çevrimiçi platform https://www.metaboanalyst.ca/
Fare IL-17A ELISA Kiti4a Biotech Co LtdCME0041
Fare IL-6 ELISA Kiti4a Biotech Co LtdCME0006
Fare TNF-α ELISA Kiti4a Biotech Co LtdCME0004
NF-Κ B p65 AntikorHücre Sinyal Teknolojisi8242T
Yağsız Kuru SütSolarbioD8340
p38 MAPK AntikorAbklonalA14401
Fosfataz İnhibitörü KokteyliBeyotime BiyoteknolojisiP1081
Fosfo-AKT (Ser473) AntikorHücre Sinyal Teknolojisi4060S
Phospho-NF-κ B p65 AntikorHücre Sinyal Teknolojisi3031S
Fosfo-p38 MAPK AntikorAbklonalAP0526
Fenilmetilsülfonil florür (PMSF)SolarbioR0010
Poliviniliden florür (PVDF) MembranıMilliporeIPVH00010
PubChem databashttps://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/
R software www.r project.org/
RIPA Liz TamponuSolarbioR0010
RNase-içermeyen suAmbionAM9937
SD fareleriPekin Vital River Laboratuvarı Hayvan Teknolojisi Co., Ltd. 
SDS-PAGE Elektroforez TamponuServicebioG2144
STRING Veritabanıhttps://string-db.org/
TBST Buffer (10X)SolarbioT1085
TCMSPhttps://old.tcmsp-e.com
Tris-Glisin Transfer TamponuServicebioG2017
TFRDPekin Qihuang İlaç Şirketi, Ltd.
UniProt veritabanı https://www.uniprot.org/
β-Aktin AntikorZhongshan Jingqiao BiyoteknolojisiTA-09

Kaynaklar

  1. Keller, S. F., Mandell, B. F. Management and cure of gouty arthritis. Rheum Dis Clin North Am. 48 (2), 479-492 (2022).
  2. Ma, C., et al. Metabolic reprogramming of macrophages by biomimetic melatonin-loaded liposomes effectively attenuates acute gouty arthritis in a mouse model. Adv Sci (Weinh). , e2410107 (2024).
  3. Li, C., et al. Targeting neutrophil extracellular traps in gouty arthritis: insights into pathogenesis and therapeutic potential. J Inflamm Res. 17, 1735-1763 (2024).
  4. Zhang, Y., Chen, S., Yuan, M., Xu, Y., Xu, H. Gout and diet: a comprehensive review of mechanisms and management. Nutrients. 14 (17), 3525 (2022).
  5. Wang, R., et al. Sulforaphane-driven reprogramming of gut microbiome and metabolome ameliorates the progression of hyperuricemia. J Adv Res. 52, 19-28 (2023).
  6. Zhang, S., et al. Mechanism of reactive oxygen species-guided immune responses in gouty arthritis and potential therapeutic targets. Biomolecules. 14 (8), 978 (2024).
  7. GBD 2021 Gout Collaborators. Global, regional, and national burden of gout, 1990-2020, and projections to 2050: a systematic analysis of the Global Burden of Disease Study 2021. Lancet Rheumatol. 6 (8), e507-e517 (2024).
  8. Towiwat, P., Li, Z. Long-term remission in gout: challenges and future opportunities. Rheumatol Autoimmun. 6, 7-15 (2026).
  9. Chen, S., Li, Z., Deng, X., Gao, L. Advances in understanding the mechanisms of treatment for gouty arthritis: a comprehensive review. Physiol Res. 74 (5), 693-710 (2025).
  10. LaForge, J. M., et al. Non-steroidal anti-inflammatory drugs: clinical implications, renal impairment risks, and AKI. Adv Ther. 40 (5), 2082-2096 (2023).
  11. Klomjit, N., Ungprasert, P. Acute kidney injury associated with non-steroidal anti-inflammatory drugs. Eur J Intern Med. 101, 21-28 (2022).
  12. Anis, T. R., Meher, J. Allopurinol-induced Stevens-Johnson syndrome (SJS). Clin Pharmacol. 15, 99-105 (2023).
  13. Hasegawa, A., Abe, R. Stevens-Johnson syndrome and toxic epidermal necrolysis: updates in pathophysiology and management. Chin Med J (Engl). 137 (19), 2294-2307 (2024).
  14. Gupta, S. S., Sabharwal, N., Patti, R., Kupfer, Y. Allopurinol-induced Stevens-Johnson syndrome. Am J Med Sci. 357 (4), 348-351 (2019).
  15. Sun, W., et al. Risk of hepatotoxicity in patients with gout treated with febuxostat or benzbromarone: a propensity score-matched cohort study. Arthritis Care Res (Hoboken). 77 (9), 1149-1156 (2025).
  16. Guo, J. W., et al. Therapeutic potential and pharmacological mechanisms of traditional Chinese medicine in gout treatment. Acta Pharmacol Sin. 46 (5), 1156-1176 (2025).
  17. Jiang, Z., et al. The correlation between traditional Chinese medicine constitution and hyperuricemia and gout: a systematic review and meta-analysis. Evid Based Complement Alternat Med. 2023, 5097490 (2023).
  18. Wang, S., et al. Traditional herbal medicine: therapeutic potential in acute gouty arthritis. J Ethnopharmacol. 330, 118182 (2024).
  19. Wang, Y. B., Jin, C. Z. Roles of traditional Chinese medicine extracts in hyperuricemia and gout treatment: mechanisms and clinical applications. World J Gastroenterol. 30 (47), 5076-5080 (2024).
  20. Jingying, G., et al. A comprehensive review of Drynariae Rhizoma: botany, traditional applications, and active flavonoid components. J Pharm Pharmacol. 77 (10), 1319-1337 (2025).
  21. Chen, G. Y., et al. Prediction of Rhizoma Drynariae targets in the treatment of osteoarthritis based on network pharmacology and experimental verification. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5233462 (2021).
  22. Zhang, Y., et al. Total flavonoids from Rhizoma Drynariae (Gusuibu) for treating osteoporotic fractures: implication in clinical practice. Drug Des Devel Ther. 11, 1881-1890 (2017).
  23. Yu, X. B., et al. Chondroprotective effects of Gubitong Recipe via inhibiting excessive mitophagy of chondrocytes. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 8922021 (2022).
  24. Zhang, F., et al. Total flavonoids of Drynariae Rhizoma improve glucocorticoid-induced osteoporosis of rats: UHPLC-MS-based qualitative analysis, network pharmacology strategy and pharmacodynamic validation. Front Endocrinol (Lausanne). 13, 920931 (2022).
  25. Liu, F., et al. Mechanism of flavonoids in the treatment of gouty arthritis (review). Mol Med Rep. 30 (2), 132 (2024).
  26. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology analysis and experimental validation to investigate the mechanism of total flavonoids of Rhizoma Drynariae in treating rheumatoid arthritis. Drug Des Devel Ther. 16, 1743-1766 (2022).
  27. Chen, G. Y., et al. Total flavonoids of Rhizoma Drynariae restore the MMP/TIMP balance in models of osteoarthritis by inhibiting the activation of the NF-λB and PI3K/AKT pathways. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 6634837 (2021).
  28. Chen, G. Y., et al. Total flavonoids of Rhizoma Drynariae treat osteoarthritis by inhibiting arachidonic acid metabolites through AMPK/NFλB pathway. J Inflamm Res. 16, 4123-4140 (2023).
  29. Ru, J., et al. TCMSP: a database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines. J Cheminform. 6, 13 (2014).
  30. Chen, G. Y., et al. Mechanisms of total glucosides of paeony in alleviating methotrexate-induced liver injury. Drug Des Devel Ther. 19, 3407-3423 (2025).
  31. Zhang, P., et al. Network pharmacology: towards the artificial intelligence-based precision traditional Chinese medicine. Brief Bioinform. 25 (1), bbad518 (2023).
  32. Luo, W., et al. Integration of molecular docking, molecular dynamics, and network pharmacology to explore the multi-target pharmacology of fenugreek against diabetes. J Cell Mol Med. 27 (14), 1959-1974 (2023).
  33. UniProt Consortium. UniProt: the universal protein knowledgebase in 2023. Nucleic Acids Res. 51 (D1), D523-D531 (2023).
  34. Stelzer, G., et al. The GeneCards suite: from gene data mining to disease genome sequence analyses. Curr Protoc Bioinformatics. 54, 1.30.1-1.30.33 (2016).
  35. Chen, G. Y., et al. Integrating network pharmacology and experimental validation to explore the key mechanism of Gubitong Recipe in the treatment of osteoarthritis. Comput Math Methods Med. 2022, 7858925 (2022).
  36. Szklarczyk, D., et al. The STRING database in 2023: protein-protein association networks and functional enrichment analyses for any sequenced genome of interest. Nucleic Acids Res. 51 (D1), D638-D646 (2023).
  37. Chen, G. Y., et al. Network pharmacology-based strategy to investigate the mechanisms of Cibotium barometz in treating osteoarthritis. Evid Based Complement Alternat Med. 2022, 1826299 (2022).
  38. Robinson, M. D., McCarthy, D. J., Smyth, G. K. edgeR: a Bioconductor package for differential expression analysis of digital gene expression data. Bioinformatics. 26 (1), 139-140 (2010).
  39. Jin, Q., et al. Network and experimental pharmacology to decode the action of Wendan Decoction against generalized anxiety disorder. Drug Des Devel Ther. 16, 3297-3314 (2022).
  40. Pang, Z., et al. MetaboAnalyst 6.0: towards a unified platform for metabolomics data processing, analysis, and interpretation. Nucleic Acids Res. 52 (W1), W398-W406 (2024).
  41. Kim, S., et al. PubChem in 2021: new data content and improved web interfaces. Nucleic Acids Res. 49 (D1), D1388-D1395 (2021).
  42. Pillinger, M. H., Mandell, B. F. Therapeutic approaches in the treatment of gout. Semin Arthritis Rheum. 50 (3S), S24-S30 (2020).
  43. Yao, T. K., et al. Advances in gouty arthritis management: integration of established therapies, emerging treatments, and lifestyle interventions. Int J Mol Sci. 25 (19), 10853 (2024).
  44. Li, W., et al. Effects of total flavonoids of Rhizoma Drynariae on biochemical indicators of bone metabolism: a systematic review and meta-analysis. Front Pharmacol. 15, 1443235 (2024).
  45. Mohammed, H. S., et al. Investating the involvement of the NLRP3/ASC/caspase-1 and NF-λB/MAPK pathways in the pathogenesis of gouty arthritis: insights from irradiated and non-irradiated Trifolium alexandrium L. extracts and some metabolites. J Ethnopharmacol. 334, 118566 (2024).
  46. Shi, M. F., et al. Study on the effect and mechanism of Zexie Decoction in treating MSU-induced acute gouty arthritis model through PI3K-AKT-mTOR signaling pathway. Int Immunopharmacol. 150, 114214 (2025).
  47. Cui, L., et al. Selenium suppressed the LPS-induced inflammation of bovine endometrial epithelial cells through NF-λB and MAPK pathways under high cortisol background. J Cell Mol Med. 27 (10), 1373-1383 (2023).
  48. Balakin, E., et al. Regulation of stress-induced immunosuppression in the context of neuroendocrine, cytokine, and cellular processes. Biology (Basel). 14 (1), 76 (2025).
  49. Chen, L., et al. AMPK signaling in osteoarthritis: from mechanisms to targeted therapeutics. Front Pharmacol. 16, 1681610 (2025).
  50. FitzGerald, J. D., et al. 2020 American College of Rheumatology guideline for the management of gout. Arthritis Care Res (Hoboken). 72 (6), 744-760 (2020).
  51. Limbachia, V., et al. The effect of different types of oral or intravenous corticosteroids on capillary blood glucose levels in hospitalized inpatients with and without diabetes. Clin Ther. 46 (2), e59-e63 (2024).
  52. Xue, Y., et al. Association of serum glucocorticoids with various blood pressure indices in patients with dysglycemia and hypertension: the Henan Rural Cohort Study. Biomed Environ Sci. 34 (12), 952-962 (2021).
  53. Uson, J., et al. EULAR recommendations for intra-articular therapies. Ann Rheum Dis. 80 (10), 1299-1305 (2021).
  54. Lucenti, L., et al. Do preoperative corticosteroid injections increase the risk of infection after shoulder arthroscopy or shoulder arthroplasty? A systematic review. Healthcare (Basel). 12 (5), 543 (2024).
  55. Feng, W., Cui, D., Yang, T. Interpretation of key points of Chinese guidelines for diagnosis and management of hyperuricemia and gout (2019). J Clin Intern Med. 37 (07), 528-531 (2020).
  56. Lin, Y., et al. Luteolin-4'-O-glucoside and its aglycone, two major flavones of Gnaphalium affine D. Don, resist hyperuricemia and acute gouty arthritis activity in animal models. Phytomedicine. 41, 54-61 (2018).
  57. Wang, Y., et al. A luteolin-loaded electrospun fibrous implantable device for potential therapy of gout attacks. Macromol Biosci. 16 (11), 1598-1609 (2016).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

A FarmakolojisiS an ModeliSerum Metabolomi iEnzim Ba l mm nosorbentWestern Blotnflamatuar YolaklarSinovyal Doku
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.