Bu çalışma, trombositten zengin fibrinden (PRF) büyüme faktörlerinin salınımına adet döngüsü aşamalarının etkilerini değerlendirmektedir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Araştırma makalesi
Bu çalışma, trombositten zengin fibrinden (PRF) büyüme faktörlerinin salınımına adet döngüsü aşamalarının etkilerini değerlendirmektedir.
Trombosit açısından zengin fibrin (PRF), diş cerrahisinde rejeneratif işlemler için yaygın olarak kullanılır; ancak biyolojik içeriğindeki değişkenlik, standartlaşma için önemli bir sınırlama olarak kalmaktadır. Bu çalışma, adet döngüsü aşamalarının PRF'den büyüme faktörlerinin salınımını nasıl etkilediğini değerlendirmek için sıkı kontrollü bir deneysel iş akışı uygulamayı amaçladı. Venöz kan örnekleri, üç önceden tanımlanmış adet evresinde (adet dönemi: 1–5. günler; foliküler: 6–14. günler; luteal: 15–28. günler) alındı ve tüm toplamalar sabit bir zaman aralığı içinde (11:00–11:30) gerçekleştirilerek sirkadiyen varyasyonu en aza indirdi. Her faz için, tam kan sayımı, hormon analizi (östrojen, progesteron, folikül uyarıcı hormon [FSH] ve luteinizasyon hormonu [LH]) ve PRF hazırlama için ayrı tüpler ayrıldı. PRF, standart koşullarda (708 × g 12 dakika; sabit açılı rotor, 40°; yarıçapı 88 mm; antikoagülan yok) hemen santrifüjle üretildi. Pıhtılar makroskopik olarak doğrulandı (homojen, elastik yapı), kırmızı kan hücresi tabakasından dikkatlice ayrıldı ve tek tek tartıldı. Büyüme faktörü salınımını standartlaştırmak için, her pıhtı RPMI-1640 ortamında ağırlık bazlı oranla (1 g PRF: 1 mL ortam) kuluçka edildi, ardından 37 °C'de kontrollü kuluçka ve yörge çalkalama (100 rpm) yapıldı. Süpernatantlar analiz öncesi -80 °C'de toplanıp saklandı. Büyüme faktörleri (IGF-1, PDGF, FGF-2, VEGF ve TGF-β1) enzimle bağlantılı immünosorbent testi (ELISA) kullanılarak uniform test koşullarında nicelendirildi. Bu standart protokol kapsamında, FGF-2 seviyeleri foliküler fazda adet ve luteal fazlara kıyasla anlamlı şekilde daha yüksekti. Bu aşamada FGF-2 ile östrojen seviyeleri arasında orta derecede pozitif bir korelasyon gözlemlenmiş, diğer büyüme faktörleri için ise istatistiksel olarak anlamlı farklar tespit edilmemiştir. Bu bulgular, adet döngüsü aşamasının PRF'den türetilen büyüme faktörü profillerindeki değişkenliğe katkıda bulunabileceğini göstermektedir. Özetlenen protokol, PRF çalışmalarında ön analitik ve analitik değişkenliği en aza indirmek için tekrarlanabilir bir çerçeve sağlar. Faz ile ilgili farklılıkların klinik sonuçları, daha büyük kohortlar ve tedavi sonuçlarını içeren çalışmalarda daha fazla araştırma gerektirir.
Tarihsel olarak, trombosit konsantrelerinin kullanımı fibrin yapıştırıcılarının geliştirilmesiyle başlamış ve çeşitli formülasyon ve hazırlık protokollerine evrilmiştir. Trombosit açısından zengin fibrin (PRF), ilk olarak Choukroun ve ark. tarafından 2001 yılında tanıtılmıştır ve diş hekimliğinde yaygın olarak kullanılan ikinci nesil trombositkonsantresidir 1. Bu otolog biyomateryal, antikoagülanlar olmadan santrifüjleme yoluyla elde edilir ve trombositler, lökositler ve dolaşımdaki bağışıklık bileşenleriyle zenginleştirilmiş bir fibrin matrisioluşturur 2. Fibrin ağı, doku onarımı ve yenilenmesi için gerekli büyüme faktörlerinin kademeli olarak serbest bırakılmasını sağlayan biriskele olarak işlev görür 3.
Trombositler, aktivasyon sırasında sitokinler ve büyüme faktörleri salgılayarak yara iyileşmesi ve hemostazda merkezi bir roloynar 4. PRF'de bu süreç, vasküler endotel büyüme faktörü (VEGF), fibroblast büyüme faktörü-2 (FGF-2), trombosit kökeni büyüme faktörü (PDGF), insülin benzeri büyüme faktörü (IGF) ve dönüşüm büyüme faktörü-beta1 (TGF-β1)5 dahil olmak üzere önemli aracıların sürekli salınımını sağlar. Yaygın klinik kullanımına rağmen, PRF'nin rejeneratif etkinliğiyle ilgili bulgular çalışmalar arasında tutarsızkalmaktadır 3,6. Değişkenliğin başlıca kaynaklarından biri, hem teknik hem de biyolojik faktörlerden etkilenen PRF preparatlarının heterojenliğidir.
Metodolojik açıdan, santrifüj protokollerindeki farklılıklar (örneğin, göreli santrifüj kuvveti, süre, rotor tipi), tüp malzemeleri ve koleksiyon sonrası kullanım, PRF mimarisini ve hücresel dağılımını önemli ölçüdedeğiştirebilir 7. Ayrıca, pıhtı işlemede standartlaştırmanın eksikliği, tutarsız normalizasyon stratejileri ve ELISA öncesi kuluçka koşullarındaki farklılıklar gibi analitik değişkenlik, bildirilen büyüme faktörüseviyelerinde önemli tutarsızlıklara yol açabilir 8. Bu tutarsızlıklar, çalışmalar arasındaki karşılaştırılabilirliği sınırlar ve PRF araştırmalarının translasyonel güvenilirliğini azaltır.
Biyolojik değişkenlik yorumu daha da karmaşıklaştırır. Yaş, cinsiyet, trombosit sayısı, trombosit dağılım genişliği (PDW) ve ortalama trombosit hacmi (MPV) gibi hastaya bağlı birkaç faktörün PRF bileşiminietkilediği bilinmektedir 9. Ayrıca, hormonal, genetik ve çevresel etkiler trombosit davranışını ve sitokinsalınımını 10 değiştirebilir. Cinsiyet hormonlarının trombosit biyolojisini etkilediğine dair hem doğrudan hem de dolaylıkanıtlar vardır 11. Özellikle östrojenin, trombositlerin fizyolojik agonistlere karşı yanıtını artırdığı ve reseptör aracılı yollar aracılığıyla trombin kaynaklı agregasyonuartırdığı gösterilmiştir 12. Östrojen seviyeleri adet döngüsü boyunca dalgalandığı için, trombosit fonksiyonu ve ilişkili biyolojik çıktılar da buna göredeğişebilir 13. Ancak, literatür tutarsız kalır; bazı çalışmalar trombosit aktivasyonunun arttığını bildirirken, diğerleri nötr veya inhibitör etkilergöstermektedir 14.
Bu birleşik teknik ve biyolojik değişkenlik göz önüne alındığında, PRF'den türetilen büyüme faktörleri değerlendirilirken ön analitik ve analitik önyargıyı en aza indiren metodolojik olarak kontrol edilen iş akışlarına açık bir ihtiyaç vardır. Tek zaman noktası örneklemesi, standart olmayan pıhtı işleme veya normalleşmemiş büyüme faktörü nicelleştirmesine dayanan önceki birçok çalışmanın aksine, bu çalışma faza özel, zaman kontrollü kan toplama protokolü, sabit santrifüj parametreleri ve kuluçka ile ELISA analizinden önce PRF pıhtılarının ağırlık bazlı normalizasyonunukullanır 8. Bu yaklaşım, tekrarlanabilirliği artırmak ve fizyolojik durumlar arasında büyüme faktörü salınımının daha güvenilir karşılaştırılmasını sağlamak için tasarlanmıştır.
PRF araştırmalarına alternatif yaklaşımlar arasında, advanced-PRF7 ve enjeksiyon-PRF15 gibi gelişmiş formülasyonların kullanımı, yatay santrifüjsistemleri 7 veya ex vivo analiz olmadan doğrudan zar implantasyonu yer alır. Bu yöntemler hücresel verimi veya klinik uygulanabilirliği artırabilir, ancak genellikle büyüme faktörünün niceliğinde ek değişkenlik getirir veya belirli biyolojik etkileri izole etme yeteneğini sınırlar. Buna karşılık, mevcut iş akışı analitik standartlaştırma ve kontrollü karşılaştırmaya öncelik veriyor; bu da özellikle hormonal dalgalanmalar gibi fizyolojik modifikatörlerin araştırılması için uygun hale geliyor.
Önerilen protokol, standart koşullarda büyüme faktörünün salınımını niceltmeyi amaçlayan kontrollü deneysel veya translasyonel çalışmalar için en uygundur. Yalnızca klinik sonuçlara odaklanan, basitleştirilmiş sandalye başı hazırlık veya işlem olmadan hemen PRF uygulaması gerektiren çalışmalarda daha az uygulanabilir. Araştırmacılar, birincil amaç değişkenliği azaltmak ve PRF ile ilgili ölçümlerin tekrarlanabilirliğini artırmak olduğunda bu iş akışını benimsemeyi düşünmelidir.
Bu nedenle, bu çalışmanın amacı, farklı adet döngüsü aşamalarında hormon seviyeleri ile PRF'den büyüme faktörlerinin salınımı arasındaki korelasyonu standartlaştırılmış ve tekrarlanabilir bir metodolojik çerçeve kullanarak değerlendirmekti.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışma, Türkiye'nin Adana kentindeki Çukurova Üniversitesi Diş Hekimliği Fakültesi Periodontoloji Bölümü'nde 21 kadın gönüllünün katılımıyla gerçekleştirilmiştir. Tüm katılımcılara çalışmanın amacı, tasarımı ve prosedürleri ayrıntılı şekilde bildirildi ve dahil edilmeden önce yazılı bilgilendirilmiş onayı alındı. Çalışma protokolü, Çukurova Üniversitesi Tıp Fakültesi Etik Komitesi tarafından incelenip onaylandı (Onay No: 125/56, 16.09.2022 tarihli). Tüm prosedürler, insan deneklerle ilgili araştırmalar için Helsinki Bildirgesi'nin ilkelerine uygun olarak yürütülmüştür.
İnsan kanını içeren tüm prosedürler, biyogüvenlik önlemleri ve biyotehlike ile kimyasal atıkların işlenmesi ve bertaraf edilmesi dahil, Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezleri ile Ulusal SağlıkEnstitüleri 16 tarafından belirlenen biyogüvenlik yönergelerine uygun olarak yürütülmüştür. Personel, eldiven, laboratuvar önlüğü, koruyucu gözlük gibi uygun kişisel koruyucu ekipman (PPE) kullandı. Tüm örnek işleme kontaminasyon ve maruziyeti önlemek için belirlenmiş laboratuvar alanlarında gerçekleştirilmiştir. Biyolojik atıklar (kan kalıntıları, PRF kalıntıları, tüketim malzemeleri) Cukurova Üniversitesi Tıbbi Atık Yönetimi Protokolü ve ulusal biyomedikal atık düzenlemelerine uygun olarak bertaraf edilmiştir. Keskin nesneler delinmeye dayanıklı kaplara yerleştirildi; Sıvı atıklar bertaraf edilmeden önce kimyasal olarak dezenfekte edildi ve katı biyolojik tehlikeli atıklar lisanslı bertaraf edilmeden önce otoklavlandı.
Katılımcı seçimi
Aşağıdaki kriterleri karşılayan bireyler çalışmaya dahil edildi: Herhangi bir sistemik hastalığın olmaması, 27–30 günlük düzenli adet döngüsü ve 18–25 yaş arası yaş
Aşağıdaki kriterleri karşılayan kişiler çalışmadan dışlandı: Sistemik hastalık varlığı, düzensiz adet döngüsü, herhangi bir ilaç veya hormonal preparat kullanımı, endokrin veya kanama bozuklukları ve adet sırasında aşırı kanama öyküsü
Kan toplama ve grup dağıtımı
Her katılımcının adet döngüsünün ilk günleri, bir planlama protokolü oluşturmak için kullanıldı. Yaygın kabul gören fizyolojik sınıflandırmalara dayanarak, döngü üç aşamaya ayrıldı: 1–5. günler adet evresi (endometriyal dökülme ile ilişkili), 6–14. günler foliküler faz olarak (östrojen seviyeleri yükselen ve foliküler gelişimle karakterizedilen) ve 15–28. günler luteal faz olarak (yumurtlama sonrası progesteron salgılanmasının artmasıyla işaretlenen) olarak belirlenmiştir.12,13. İlgili aşamalarda her katılımcıdan kan örnekleri alındı. Tek bir döngü boyunca, denek başına toplam dokuz kan tüpü toplandı: tam kan sayım için üç (her faz başına bir), üçü cinsiyet hormonu analizi için (östrojen, progesteron, luteinizasyon hormonu (LH), folikül uyarıcı hormon (FSH), ve üçü PRF hazırlama ve ELISA tabanlı büyüme faktörü analizi için. Tüm kan örnekleri, biyolojik değişkenliği en aza indirmek için her gün aynı saatte 11:00 ile 11:30 arasında alındı. Antekubital ven kan örnekleri, steril vakum tabanlı kan toplama sistemi ve 21G kelebek iğneleri kullanılarak travmatik örnekleme sağlanarak alındı. Kan, standart PRF hazırlama protokollerine uygun olarak, antikoagülan (PRF tüpleri) olmadan steril 10 mL cam tüplere doğrudan toplandı. Ön analitik değişkenliği en aza indirmek için, tüm örnekler aynı eğitimli hemşire tarafından standart koşullarda toplanmıştır.
Toplandıktan hemen sonra, tüpler çalkalanmadan nazikçe tutulur ve erken pıhtılaşmayı önlemek ve tutarlı fibrin polimerizasyonunu sağlamak için 60–90 saniye içinde santrifüja aktarılırdı. Tüpler, dengeyi korumak ve santrifüj sırasında titreşimle ilgili değişkenliği önlemek için rotor içinde simetrik olarak konumlandırıldı. İşlemin hiçbir aşamasında katkı maddesi veya antikoagülan kullanılmadı.
Sonuç olarak, üç çalışma grubu oluşturuldu: Grup 1: Menstrual faza örnekleri, Grup 2: Foliküler faz örnekleri ve Grup 3: Luteal faz örnekleri
PRF hazırlık adımları:
Kan örnekleri, sabit açılı rotor (40°; yarıçap: 88 mm) ile donatılmış tezgah üstü santrifüj kullanılarak antikoagülanlar olmadan hemen santrifüj edildi. Santrifüj, standart koşullarda 708 × g sıcaklığında oda sıcaklığında (22°C–24 °C) 12 dakika boyunca gerçekleştirildi. Göreli santrifüj kuvveti (RCF) değerleri, rotor yarıçapı (88 mm) dikkate alınarak, Choukroun ve ark.17 ve sonraki standartlaştırmaçalışmaları 1,3,18 tarafından tanımlanan belirlenmiş PRF protokollerine uygun olarak standart formül (RCF = 1.118 × 10⁻5 × r × g2) kullanılarak hesaplandı. Santrifüjlemenin ardından üç farklı tabaka tanımlandı: alt kırmızı kan hücresi tabakası, üst trombositten yoksun plazma tabakası ve ara PRF pıhtısı. PRF pıhtısı steril cımbızla nazikçe çıkarıldı, böylece eritrosit arayüzü bozuldu. Kalan kırmızı kan hücresi bileşenleri steril makasla dikkatlice kesildi.
PRF pıhtıları, önceden tanımlanmışkriterlere göre pürüzsüz ve homojen yüzey, elastik silindirik yapı ve yoğun, sıkı tutarlılık için makroskopik olarak değerlendirildi. Bu kriterleri karşılamayan pıhtılar atıldı ve gerektiğinde yeni kan örnekleri alındı. Tüm örnekler standart koşullarda işlendi ve toplandıktan sonra 30 dakika içinde -80 °C'de dondurularak proteolitik bozulmayı en aza indirdi. Örnekler, analizler arası değişkenliği azaltmak ve büyüme faktörü ölçümlerinin karşılaştırılabilirliğini sağlamak için parti analizinden önce kontrollü, eşit bir süre (4 haftaya kadar) saklandı.
Büyüme faktörü ELISA analiz adımları:
PRF pıhtıları, steril cerrahi makas kullanılarak aseptik koşullarda kırmızı kan hücresi fraksiyonundan dikkatlice ayrıldı ve kalibre edilmiş analitik bir tartı kullanılarak tek tek tartıldı. RPMI-1640 kültür ortamı, büyüme faktörünün çıkarımını standartlaştırmak ve pıhtı kütlesi farklarıyla ilişkili değişkenliği en aza indirmek için pıhtı ağırlığına (1 g PRF: 1 mL ortam) sabit bir oranda eklendi. Örnekler, PRF matrisinden kültür ortamına çözünür büyüme faktörlerinin homojen difuzyonunu kolaylaştırmak için 100 × g olan bir orbital sallayıcıda 37 °C'de kuluçka alındı. İnkubasyon sonrası süpernatanlar toplanıp -80 °C'de depolanarak analiz yapılana kadar saklandı.
İnsülin benzeri büyüme faktörü-1 (IGF-1), trombosit kökeni büyüme faktörü (PDGF), fibroblast büyüme faktörü-2 (FGF-2), damar endotelial büyüme faktörü (VEGF) ve dönüşümlü büyüme faktörü-β1 (TGF-β1) dahil olmak üzere büyüme faktörü konsantrasyonları, üreticinin talimatlarına göre ticari olarak mevcut enzim bağlantılı immünosorbent test (ELISA) kitleri kullanılarak nicelendirilmiştir. Aşağıdaki kitler kullanılmıştır: İnsan IGF-1 ELISA Kiti, İnsan PDGF ELISA Kiti, İnsan FGF-2 ELISA Kiti, İnsan VEGF ELISA Kiti ve İnsan TGF-β1 ELISA Kiti. Tüm örnekler ve standartlar ikili olarak analiz edildi ve mikroplaka okuyucu kullanılarak 450 nm soğurgunluk ölçüldü. Kalibrasyon eğrileri, analiz konsantrasyonlarını belirlemek için dört parametreli lojistik (4-PL) regresyon kullanılarakoluşturuldu 5.
ELISA adımları
Örnek seyreltme, beklenen konsantrasyon aralığına ve her ELISA kiti için üreticinin talimatlarına göre belirlendi. Standart eğri aralığında olması beklenen örnekler seyreltme olmadan analiz edildi. Ön ölçümler veya beklenen analit konsantrasyonları standart eğrinin üst sınırını aştığında, örnekler kitte sağlanan numune sulandırıcı kullanılarak seyreltilip yeniden analiz ediliyordu. Son konsantrasyonlar, ölçülen değerlerin ilgili seyreltme faktörü ile çarpılmasıyla hesaplandı.
FineTest kiti talimatlarına göre seri seyreltme ile hazırlanan Standards (100 μL) ve seyreltilmemiş veya uygun şekilde seyreltilmiş örnekler, önceden kaplanmış 96 kuyruklu mikroplakanın her kuyusuna eklendi. Plaka, antijen bağlanmasına izin vermek için 90 dakika boyunca 37 °C'de kuluçka altına alındı. Tüm örnekler ve standartlar ikili olarak analiz edildi. İnkubasyon sonrası, sıvı yıkamadan çıkarıldı ve her kuyuya 100 μL biyotin etiketli tespit antikor çalışma çözeltisi eklendi. Plaka 37 °C'de 60 dakika kuluçka içinde tutuldu. Kuluçkadan sonra, kuyular 350 μL 1× yıkama tamponu kullanılarak aspirasyon edilip üç kez yıkandı. Yıkama tamponu her yıkama döngüsü sırasında yaklaşık 1 dakika boyunca kuyularda bırakıldı ve böylece bağlanmamış bileşenlerin yeterince çıkarılmasını sağladı. Sonrasında, her kuyuya 100 μL yapara peroksidazı (HRP)–streptavidin konjugat çalışma çözeltisi eklendi ve plaka 37 °C'de 30 dakika boyunca kuluçka edildi. Kuyular, arka plan sinyalini en aza indirmek için her kuyu başına 350 μL yıkama tamponu kullanılarak beş kez yıkandı. Daha sonra, her kuyuya 90 μL tetrametilbenzidin (TMB) substrat çözeltisi eklendi ve plaka, renk gelişimi için karanlıkta 37 °C'de 10–20 dakika kuluçka altına alındı, reaksiyon ise görsel olarak izlendi. Enzimatik reaksiyon, her kuyuya kit ile sağlanan 50 μL stop çözeltisi eklenerek sonlandırıldı ve bu da maviden sarıya renk değişimine yol açtı.
Durdurma çözeltisi eklendikten sonra 5 dakika içinde mikroplaka okuyucu ile 450 nm olarak absorbans ölçüldü. Kitte sağlanan bilinen konsantrasyonlar kullanılarak standart bir eğri oluşturuldu ve eğri dört parametreli lojistik (4-PL) regresyon modeliyle uyduruldu. Örnek konsantrasyonları buna göre hesaplandı ve herhangi bir seyrelme faktörleri açısından düzeltildi.
İstatistiksel analiz
Sayısal değişkenler, normal dağılımlı veriler için ortalama ± standart sapma olarak ve normallik varsayımları karşılanmadığında minimum-maksimum değerlerin medyanı olarak özetlenmiştir. Kategorik değişkenler sıklık ve yüzdeler olarak ifade edildi. Sayısal verilerin normalliği Shapiro–Wilk testi kullanılarak değerlendirildi. Aynı bireylerden farklı zaman noktalarında elde edilen tekrarlanan sayısal ölçümlerin karşılaştırılması için, parametrik varsayımlar sağlandığında tekrar edilen varyans analizi (ANOVA) uygulandı; aksi takdirde Friedman testi kullanıldı. Normal dağılım olmayan sayısal değişkenler arasındaki korelasyonlar, Spearman'ın rütbe korelasyon katsayısı kullanılarak değerlendirildi. İstatistiksel analizler istatistiksel yazılım kullanılarak (IBM SPSS İstatistik sürüm 26.0) yapıldı ve iki taraflı p değeri < 0.05 istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edildi.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Eksik veri gözlemlenmedi, çünkü tüm katılımcılar üç adet evresinde de numune almayı tamamladı. Tam kan sayısı parametreleri, tüm örnekler için fizyolojik referans aralıkları içindeydi ve örnek kalitesinin tutarlılığını ve PRF hazırlamanın güvenilirliğini destekledi.
Kan parametrelerinin adet evreleri arasında değerlendirilmesi
Menstrual döngü fazları boyunca hematolojik parametrelerin karşılaştırması Tablo 1...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Adet döngüsü, kadın vücudundaki çeşitli sistemlerde değişiklikleri tetikleyen hormonal dalgalanmalarla organize edilen karmaşık bir fizyolojik süreçtir. Bu çalışmada, adet döngüsünün farklı evrelerinde toplanan kan örneklerinden elde edilen PRF içeriğini inceledik ve bu PRF içindeki büyüme faktörlerinin seviyelerini analiz ettik.
Adet döngüsü, yaygın olarak kabul gören fizyolojik sınıflandırmalara dayanarak üç aşamaya ayrılmıştır: adet evresi (endometriyal dök...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok. ChatGPT yapay zeka programı dil düzenleme için kullanıldı.
Yazarlar, ELISA analizini yürütmelerine verdikleri destek için Cukurova Üniversitesi Tıp Fakültesi Biyokimya Bölümü'ne teşekkür etmek isterler.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Analitik denge | Hassas denge (0.001 g okunabilirlik) | Sartorius | Giriş |
| Kan toplama tüpleri | Cam tüpler, antikoagülan (10 mL) içermeyen | BD | Vacutainer sistemi |
| Santrifüj | Tezgah üstü santrifüj | Hettich | Universal 320R |
| ELISA kiti – FGF | İnsan FGF ELISA kiti | FineTest | EH0541 |
| ELISA kiti – IGF-1 | İnsan IGF-1 ELISA kiti | FineTest | ER0030 |
| ELISA kiti – PDGF | İnsan PDGF ELISA kiti | FineTest | ER1240 |
| ELISA kiti – TGF-β 1 | İnsan TGF-β 1 ELISA kiti | FineTest | EH0287 |
| ELISA kiti – VEGF | İnsan VEGF ELISA kiti | FineTest | EH0327 |
| HRP– streptavidin konjugatı | ELISA reaktifi (kit içinde dahil) | FineTest | Kit içinde |
| Kuluçka makinesi | Sıcaklık kontrollü kuluçka makinesi (37 derece ve derece; C) | Memmert | — |
| Mikrosantrifüj tüpleri | Steril tüpler (1.5&n'n' krize; 2 mL) | Eppendorf | — |
| Microplate okuyucu | 450 nm absorbans okuyucu | BioTek | ELx800 |
| İğne | 21G steril tek kullanımlık iğne | BD | — |
| Yörünge sallayıcısı | Ayarlanabilir sallayıcı (100 rpm) | IKA | KS 3000 i kontrolü |
| Kişisel koruyucu ekipman | Eldiven, laboratuvar önlüğü, koruyucu gözlükler | Çeşitli | — |
| RPMI-1640 orta | Hücre kültürü ortamı | Gibco (Termo Balıkçı Bilimci) | 11875-093 |
| İstatistiksel analiz yazılımı | Veri analiz yazılımı (Sürüm 26.0) | IBM | SPSS İstatistikleri |
| Stop çözümü | ELISA stop reaktifi | FineTest | Kit içinde |
| TMB substratı | ELISA için kromojenik substrat | FineTest | Kit içinde |
| Yıkama tamponu | ELISA yıkama tamponu (1& kez;) | FineTest | Kit içinde |