Yöntem makalesi

Sıçanlarda Egzersiz Sırasında Kardiyorespiratuar Adaptasyonun İzlenmesi İçin Ceketli Bir Telemetri Yöntemi

0 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/71616

⸱

25 Eylül 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1TIMC CNRS, UMR 5525, Vet Agro Sup, Grenoble INP, Universite Grenoble Alpes, 2Etisense SAS

Bu makalede

Özet

Bu invaziv olmayan ceketli telemetri protokolü, sıçanlarda egzersiz sırasında kardiyorespiratuar ve lokomotor adaptasyonun eş zamanlı olarak izlenmesini sağlar. Cerrahi implantasyonun önüne geçen bu yaklaşım, aynı hayvanlarda tekrarlayan fizyolojik ölçümler yapılmasına olanak tanıyarak egzersiz fizyolojisi araştırmaları ve eğitimi için güvenilir bir araç sunar.

Özet

Kardiyorespiratuar adaptasyonun değerlendirilmesi egzersiz sırasında yapılan ölçümler, fiziksel eğitime karşı fizyolojik adaptasyonun incelenmesi için kritik olmanın yanı sıra, istirahat halindeki ölçümler altta yatan fizyolojik fenomenleri maskeleyebileceği için preklinik araştırmalar için de esastır. Ancak, cerrahi olarak implante edilen telemetri veya hermetik odalar gibi geleneksel preklinik yöntemler, önemli kısıtlamalar beraberinde getirmektedir. Bu sınırlamaların üstesinden gelmek için, zorunlu koşu bandı egzersizi sırasında sıçanlarda kalp hızının (HR), solunum hızının (RespR) ve lokomotor aktivitenin (AL) eş zamanlı izlenmesine olanak tanıyan, ceketli bir telemetri sistemi kullanan cerrahi işlem gerektirmeyen bir metodoloji sunuyoruz. Protokol, hem hayvanların uygun koşu performansını hem de veri bütünlüğünü sağlamak için tasarlanmış iki aşamalı bir aklimatizasyon süreci uygulamaktadır: ilk olarak, solunumsal indüktif pletismografi sensörleri ve yüzey elektrokardiyogram elektrotlarını entegre eden telemetri ceketinin giyilmesine alışma süreci; ikinci olarak, koşu bandı egzersizine yönelik 2 haftalık (haftada beş gün) alışma süreci. Hayvan stresini minimize etmek ve güvenilir, düşük gürültülü fizyolojik veriler sağlamak için gerçek zamanlı sinyal doğrulamayı da içeren ekipman prosedürlerini ve temel kalite kontrol adımlarını detaylandırıyoruz. Ayrıca, kullanıcıların özellikle egzersiz protokollerinde, ancak diğer deneysel bağlamlarda da yüksek veri kalitesi elde etmelerine yardımcı olmak için temsili sinyal örnekleri sunuyoruz. Doğru şekilde uygulandığında bu protokol, 40 cm.s hızına kadar tutarlı izleme yapılmasına olanak tanır.⁻1bu sayede kalp hızındaki (HR), solunum hızındaki (RespR) ve AL'deki değişimlerin bazal değerlerle karşılaştırılarak nicelendirilmesine olanak tanınır. Cerrahi müdahale gereksinimini ortadan kaldıran bu protokol, 3R (azaltma, iyileştirme, değiştirme) etik ilkelerine sıkı bir şekilde bağlı kalmaktadır. Sunulan teknikler egzersize odaklanmış olsa da, kapsamlı kardiyorespiratuar karakterizasyon, hayvan yönetimi eğitimi, refah izlemi ve fizyoloji, farmakoloji veya eğitim dahil olmak üzere çeşitli alanlarda potansiyel uygulama alanlarına sahiptir.

Giriş

Egzersiz fizyolojisinin dinamik yapısına dair değerli bilgiler sunan modeller geliştirmek; antrenman ve performans veya hastalıkların önlenmesi ve rehabilitasyon gibi birçok alanda büyük önem taşımaktadır. Egzersizle ilişkili fizyolojik etkiler arasında, kardiyak ve solunum fonksiyonlarının adaptasyonlarını anlamak, spesifik ve kişiye özel antrenman/rehabilitasyon programları geliştirmek için spor (antrenman/performans) ve klinik (önleme/rehabilitasyon) bağlamlarda kritik bir unsurdur. Bu nedenle, egzersize karşı gelişen kardiyorespiratuar adaptasyon mekanizmalarını çözmeye devam etmek esastır. Bu amaçla, kemirgenler de dahil olmak üzere hayvan modelleri, egzersizin kardiyak ve solunum fonksiyonları üzerindeki etkilerini incelemek için tasarlanan preklinik araştırmalarda günümüzde yaygın olarak kullanılmaktadır. Nitekim bu modeller, yalnızca egzersize karşı gelişen kardiyorespiratuar adaptasyonların değerlendirilmesine olanak tanımakla kalmaz1, aynı zamanda dinlenme halindeyken potansiyel olarak gizli kalan patofizyolojik fenomenlerin incelenmesi için de gereklidir2,3. Bununla birlikte, egzersiz sırasında ilgili fizyolojik verilerin elde edilmesi önemli bir teknolojik zorluk teşkil etmektedir. Toplanan verilerin fizyolojik olarak anlamlı olması için, veri toplama sürecinin mümkün olduğunca non-invaziv olması gerekir. İdeal olarak, izleme işlemi hastanın veya hayvanın aktivitelerine müdahale etmeden yürütülmeli ve ölçümler hareket artefaktlarından etkilenmemelidir. Günümüzde preklinik araştırmalarda, bu temel gereksinimlerin tamamını karşılayan tek bir ölçüm cihazı bulunmamaktadır.

Ayrıca, ideal bir cihaz, preklinik hayvan araştırmalarına rehberlik eden 3R (azaltma, geliştirme, değiştirme) etik ilkelerine uygun olmalıdır4. Bu ilkeler, araştırma ve eğitimde hayvan kullanımının mevcut sosyo-ekonomik bağlamıyla birlikte, hayvanların daha verimli ve sorumlu kullanımını sağlayan araçların ve araştırma modellerinin geliştirilmesine duyulan ihtiyacı vurgulamaktadır. Bu amaçla, giyilebilir cihazların ve sensörlerin geliştirilmesi ve kullanımı bir öncelik olarak görünmektedir.

Günümüzde, kemirgenlerde kardiyak ve ventilatuar fonksiyonları doğrudan değerlendirmek için mevcut olan temel yöntemler, pratik kısıtlamalar nedeniyle egzersiz protokollerinde etkili bir şekilde kullanılamamaktadır. Örneğin, kısıtlanmamış tüm vücut pletismografi odaları, uyanık hayvanlarda ventilatuar fonksiyonun boylamsal ve tekrarlayan ölçümleri için doğru ve non-invaziv bir yaklaşım olarak kabul edilmektedir5. Dinlenme koşulları altında güvenilir ölçümler sağlasalar da, aktif lokomosyon, egzersiz sırasında solunum verilerinin yorumlanmasını tehlikeye atabilecek basınç artefaktları ve sinyal gürültüsü oluşturur. Benzer şekilde, implante radyotelemetri, serbestçe hareket eden kemirgenlerde kardiyak fonksiyonların incelenmesinde altın standart olarak kabul edilmektedir6 ve EKG ile hemodinamik parametrelerin izlenmesi için kullanılabilir2,7. Ancak bu yöntem, öncelikle sensörlerin ve vericinin cerrahi implantasyonu ile ilgili önemli kısıtlamalar getirmektedir. Özellikle, cerrahi yaradan veya implante edilen cihazın kendisinden kaynaklanan postoperatif ağrı ve fonksiyon bozukluklarının uygun bakım protokolleri ile yönetilmesi gerekmektedir6,8,9. Daha yakın zamanda, giderek artan sayıda çalışma non-invaziv yöntemlere odaklanmaktadır. Örneğin, guinea-piglerde harici olarak kullanılan giyilebilir EKG radyotelemetri cihazları10, temassız Doppler tabanlı solunum aktivitesi tespit cihazı11 veya giyilebilir biyosensörler12 ile çalışmalar yürütülmüştür. Ancak, bu izleme teknikleri şimdiye kadar kavram kanıtlama aşamasıyla sınırlı kalmış olup, daha geniş ölçekte kullanılabilmeleri için daha fazla geliştirilmeleri gerekmektedir. Köpekler veya primatlar gibi büyük hayvanlarda kardiyorespiratuar değerlendirme için non-invaziv bir çözüm olarak yaygınに kullanılan yelekli telemetri13,14, yakın zamanda laboratuvar sıçanlarına15,16,17 ve genç minipiglere18 uyarlanmıştır. Şekil 1A–F'de gösterilen sistem, hayvan tarafından giyilen bir yelek içinde tutulan, non-invaziv ve düşük kısıtlamalı bir radyo cihazından oluşur. Bu sistem; yüzey EKG ile kardiyak aktivitenin, Solunumsal İndüktif Pletismografi (RIP) ile solunum fonksiyonunun ve akselerometri ile lokomotor aktivitenin kombine izlenmesine olanak tanır. Önceki çalışmalar, bu sistemin kardiyorespiratuar değişkenleri invaziv yöntemlerle karşılaştırıldığında etkili bir şekilde izleme yeteneğini göstermiştir15,16. Daha yakın zamanda, sistemin tamamlayıcı bir cerrahi olmayan izleme yaklaşımı olarak kullanımı, sosyalleşmiş koşullarda farmakolojik değerlendirme17,19 veya kardiyak hastalık modelleri20 dahil olmak üzere çeşitli bağlamlarda bildirilmiştir.

figure-introduction-1
Şekil 1: Ceketli telemetri sisteminin ana bileşenlerinin görünümü. (A) Uygun tüpüne yerleştirilmiş enstrümante ceket, (B) EKG izleme için Ag/AgCl yamalar, (C) Veri toplama ve iletimi için radyo vericisi, (D) Ceketi ve vericiyi takan hayvan, (E) Veri depolama ve telemetri yazılımı yürütme için veri toplama sistemi, (F) Bir Ethernet kablosu aracılığıyla bağlanan ve telemetri yazılımını bir web kullanıcı arayüzü (UI) üzerinden görüntüleyen bilgisayar. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Önceki bir değerlendirme çalışmasına21 ve alışma protokolüne22 dayanarak, burada önerilen protokol, artımlı egzersiz sırasında sıçanlarda kalp atım hızının, solunum hızının ve lokomotor aktivitenin eş zamanlı olarak izlenmesine olanak tanıyan ceketli bir telemetri sistemi kullanan geliştirilmiş, non-invaziv bir metodoloji sunmaktadır.

Protokol

Tüm deneyler, laboratuvar hayvanlarının korunması ve kullanımına ilişkin Avrupa (L276-33 2010/63/EU) ve Fransa (AGRG1231951D) düzenlemelerine uygun olarak yürütülmüştür. Bu çalışmanın in vivo prosedürleri, Fransa Yükseköğretim ve Araştırma Bakanlığı tarafından akredite edilen Etik Kurulu #012 (Grenoble Alpes Üniversitesi) tarafından APAFIS#31347-2021042914221915 v2 ve APAFIS #52237-2024112821304952 v5 referansları altında onaylanmıştır.

figure-protocol-1
Şekil 2: Deneysel protokol özeti. (A) Alıştırma ve egzersiz aşamalarını içeren genel deneysel protokol. Program gösterge niteliğindedir ve gerçek zamanlı gözlemlere ve deney sırasındaki etkili alıştırma sürecine göre ayarlanmalıdır. Özellikle, hayvanlar “Hayvan Tesisi Aklimasyonu” sırasında tutulmaya alıştırılabilir. (B) Ekipman sonrası 60 dakikalık stabilizasyon, koşu bandında 3 dakikalık dinlenmenin ardından kaydedilen bazal değer, bir ısınma periyodu, artımlı egzersiz ve bir toparlanma aşamasını içeren tipik egzersiz protokolü. Veri analiz dönemleri açık kırmızı karelerle belirtilmiştir. Belirtilen hız aşamaları öneridir ve spesifik hayvan modeline ve deneysel hedeflere göre özelleştirilmelidir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

1. Hayvan modeli

  1. Onaylı tedarikçilerden temin edilen ve konut koşullarına (1 bar; 24 °C; %40–70 nem; 12 saatlik ışık/karanlık döngüsü) bir hafta boyunca, yiyecek ve suya serbest erişimi olan, zenginleştirilmiş (yuva malzemesi, kemirme nesneleri, karton tüneller) konvansiyonel kafeslerde çiftler halinde alıştırılmış sıçanlar kullanın.
  2. Hayvanları tek tek işaretleyin (kuyruğa mürekkep ile).

2. Ekipman prosedürü

  1. Tüy temizleme: Hayvan başına 1–2 dk
    1. Başarılı EKG kaydı sağlamak için hayvanın tüylerini haftada bir kez kısaltın.
    2. Deney günündeki stresi ve anestezi etkisini minimize etmek için bu prosedürü bir gün önce gerçekleştirin; aynı gün de yapılabilir.
    3. Yöntem A (Opsiyonel Anestezi): Gaz halindeki anestezi karışımını (1,5–5% izofluran, %20 oksijen ve hava) uygulayın ve sıçanı ventral rekumbens pozisyonuna (karın üstü yatış) getirin.
    4. Anestezi süresini, tipik olarak sadece tüy tıraşı için yeterli olacak şekilde, minimumda (genellikle 2–5 dk) tutun.
    5. Göğsün dorsal ve lateral kısımlarındaki tüyleri dikkatlice tıraş edin (Şekil 3A), bir kırpıcı kullanarak kesin ve kuyruğu mürekkeple işaretleyin.
      NOT: Tam iyileşme ve ambulasyon genellikle anestezinin kesilmesinden sonraki 5–10 dakika içinde gerçekleşir.
    6. Hayvanı ana kafesine geri döndürmeden önce bu duruma ulaştığından emin olun.
    7. Yöntem B (Anestezisiz): Alternatif olarak, sıçanı tüy tıraşlama işlemini tamamlamak için gerekli olan minimum süre boyunca (genellikle 2 dakikadan kısa) manuel olarak zapt edin.
    8. Hayvanı sıkıca ancak nazikçe sabitleyin ve göğüs bölgesine aşırı baskı uygulamaktan kaçının.
    9. Göğsün dorsal ve lateral bölgelerindeki tüyleri dikkatlice kesin (Şekil 3A), bir tüy kesici kullanarak tüyleri kesin ve kuyruğu mürekkep ile işaretleyin.
      NOT: Hayvan şiddetli stres belirtileri gösterirse, hayvanı derhal serbest bırakın ve prosedürü tekrar denemeden önce bir iyileşme süresine izin verin. Bu yöntem kullanılırken başka bir kişinin yardımı tavsiye edilir.
    10. Sıçanın ürettiği sebumu uzaklaştırmak için tıraş edilen bölgeyi suyla temizleyin’cildi temizleyin ve bölgenin tamamen kuruduğundan emin olun. Bölgeyi gazlı bezle kurulayın.
  2.  Hayvan ekipmanı: Hayvan başına süre 3–5 dk
    NOT: Sonraki adımlar; fiziksel kısıtlama ihtiyacını en aza indirerek hayvanın yelek, sensörler ve telemetrik cihaz ile donatılma sürecini özetlemektedir.
    1. Üreticinin seçim tablolarını ve boyutlandırma çizelgelerini takip ederek hayvanın ağırlığına, cinsiyetine ve spesifik suşuna göre uygun ceket boyutunu seçin23.
    2. Enstrümante edilmiş ceketi, ceket yerleştirme aparatının üzerine dikkatlice yerleştirin (sensörlere ve kablolara zarar vermemeye özen gösterin).
    3. Sırt çantasını, bağlantı aracının üst kısmında bulunan çentiğin üzerine yerleştirin (Şekil 4A). Montaj aletini dikdörtgen tabanına yerleştirin (Şekil 4B) ve sıçanı en geniş açıklığın (huni giriş tarafı) önüne yerleştirin (Şekil 4C).
    4. Sıçanın sabitleme aracından geçmek istememesi durumunda, çıkışın önüne bir zenginleştirme tüneli veya hayvanın kafesini yerleştirerek hayvanı motive edin.
    5. Hayvanın başı diğer taraftan çıkar çıkmaz ve ön patileri görünür hale geldiğinde: bir elinizle sıçanı ve yerleştirme aparatını birlikte tutun; diğer elinizle patileri, ceketin ön tarafında bulunan her bir delikten geçirerek ceketi hayvan üzerine uygun şekilde konumlandırın ve sabitleyin (Şekil 4D).
    6. Ceketi hayvanın üzerinden nazikçe aşağı doğru kaydırın, bu sırada uygulama aracını kademeli olarak çıkarın ve hayvanın araçtan tamamen geçerek çıkışa yönelmesini sağlayın.
    7. Ceketin, ciltte herhangi bir katlanma olmayacak şekilde doğru konumlandırıldığından emin olun ve boyutlandırmanın Ceket uyum doğrulama önerilerine uygun olduğunu teyit edin.
    8. Gerekirse, yeleceği uygun boyutla değiştirin. Boyut ayarına rağmen güvenli veya konforlu bir şekilde yelek giydirilemeyen hayvanlar çalışmadan hariç tutulmalıdır.
    9. Hayvan, sabitleme aracının istenen seviyesine ulaştığında, eğer kullanılmışsa motivasyon öğesini görüş alanından çıkarın.
      NOT: Bu, sıçanın araçtan geçmeye devam etmesini önleyecektir.
    10. Sıçağı laboratuvar tezgahına yerleştirdikten sonra, sırt çantasını çözün (Şekil 4E) ve kılıfı açın (Şekil 4F).
    11. Kırmızı artı (+) ile işaretlenmiş olan ceket sol açıklığından, kırmızı (pozitif) yapışkanlı ECG Ag/AgCl elektrodunu yerleştirin.Şekil 4G), ve siyah (negatif) elektrodu sağ açıklığa yerleştirin.
    12. Siyah (negatif) elektrodu sağ ön bacağın arkasına ve kırmızı (pozitif) elektrodu, tüyleri temizlenmiş bölgede, RIP göğüs bandının altında kalan sol lateral göğüs duvarına yerleştirerek elektrotları Lead II konumuna getirin.Şekil 3B,C).
    13. Hassas jel yerleştirme için şırınga ve kateter kullanarak, her bir elektrot üzerindeki siyah noktaya EKG jeli (0,1 ila 0,3 mL) uygulayın. Elektrotların hayvanın derisine tamamen yapışması için hafifçe bastırın (Şekil 4H).
    14. Kullanılan sensörleri (pletismografi/EKG elektrotları) yayıcıya bağlayın; telemetri vericisini ve pil paketini hayvanın sırtındaki sırt çantasına yerleştirin (Şekil 4I–J).
    15. Elektronikleri ve kabloları korumak, sürtünmeyi azaltmak ve güvenli kalmalarını sağlamak için ceketin arka kısmını aşağıya doğru katlayın. Sırt çantasını sıçanın sırtına doğru (katlanmış ceketin üzerine gelecek şekilde) katlayın ve kanca ile ceketin distal/posterior kısmına sabitleyin.Şekil 4K).
      NOT: Elektrotların ceket açıklıklarından yerleştirilmesi sırasında kaymasını önlemek için jel, elektrot yerleşiminden sonra uygulanır. Jelin önceden uygulanması, sürtünmeyi azalttığı ve elektrotların hassas şekilde konumlandırılmasını önemli ölçüde zorlaştırdığı için tavsiye edilmez.
  3. Sinyal alımının başlatılması ve sinyal kalitesinin doğrulanması
    1. Telemetri sistemini, kayıtla aynı odada (en fazla 10 metre mesafede) ve doğrudan görüş hattı üzerinde, ideal olarak ünitenin hayvanın üzerinde veya aynı düzlemde konumlandırılacağı şekilde yerleştirin.
    2. Sistemi başlatın ve telemetri yazılımını açın.
    3. Üretici prosedürüne uygun olarak veri toplama işlemini başlatın24EKG ve solunum sinyallerinin kalitesini kontrol edin ve gerekli düzenlemeleri yapın (bakınız Şekil 5).

figure-protocol-2
Şekil 3: Anestezize edilmiş bir sıçanın görünümleri. (A) Tüylerin hangi bölgelerden temizlenmesi gerektiğini gösteren dorsal ve lateral göğüs alanları (adım 2.1): 1) kesikli çizgi minimum üst sınırı belirtir ve 2) çift yönlü oklar tıraşlanan alanın minimum uzunluğunu belirtir. (B) Siyah (negatif) elektrodun sağ ön bacağın arkasına, kırmızı (pozitif) elektrodun ise tıraşlanmış alan içinde, RIP göğüs bandının altında, sol lateral göğüs duvarına yerleştirildiği önerilen Lead II elektrot yerleşimi. (C) Elektrotların göğüs boyunca yatay olarak yerleştirildiği, kırmızının (pozitif) sol ön bacağın arkasında ve siyahın (negatif) sağ ön bacağın arkasında olduğu Lead I elektrot yerleşimi. Lead II konfigürasyonu, sıçanlarda genellikle en yüksek QRS amplitüdünü ve en net P-dalgası çözünürlüğünü sağlar. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-3
Şekil 4: Bir sıçanın yelek, elektrotlar ve elektronik cihazla donatılmasına yönelik adım adım prosedür (bölüm 2). (A-B) Yeleği yerleştirme tüpünün üzerine yerleştirin. (C-D) Hayvanı yerleştirme tüpü aracılığıyla yeleğin içine yönlendirin. (E-F) Sırt çantasının kancasını çıkarın ve yeleği açın. (G) Kırmızı (pozitif) etiketi olan EKG elektrodunu, kırmızı artı ile işaretlenmiş yeleğin sol açıklığından geçirin ve (0.1 ila 0.3 mL iletken jel) yerleştirin. (H) Elektrotların hayvanın cildine tamamen yapışması için nazikçe masaj yapın. (I-J) Kullanılan sensörleri (pletismografi / EKG elektrotları) vericiye bağlayın ve vericiyi cebe yerleştirin. (K) Sırt çantasını kırmızı kanca kullanarak sabitleyin. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

3. Ekipman sökme ve depolama prosedürü​Süre - Hayvan başına 1 dk

  1. Sıçağı laboratuvar tezgahına yerleştirin veya elinizde tutun. Kancayı sırt çantasından ayırın. Çentiklere ve elektrotlara erişmek için ceketin arka kısmını açın. Bunları dikkatlice çıkarın.
  2. Verici-pil düzeneğini sırt çantasından çıkarın. Kabloları bu düzeneğe olan bağlantısından ayırın.
  3. Ön patileri açıklıklardan çıkarın. Ceketi ve sırt çantasını tutarken sıçağın ileri doğru hareket etmesine izin verin.
  4. İşlem tamamlandığında, jelin kurumasını önlemek için elektrotların üzerindeki plastik kapakları tekrar yerleştirin. Kablo sensörlerini kontrol edin; ceketler hasarlı veya yıpranmışsa değiştirin. Saklama poşetine koymadan önce ceketin kurumasını bekleyin.
  5. Donanımı alkolsüz bir dezenfektan ve bez kullanarak temizleyin; tüm parçaların kuru olduğundan emin olun. Boşalmayı önlemek için yayıcıyı pilden ayırın.
    NOT: Boyut hayvanın ağırlığına uygunsa ve sensörler hasar görmemişse, ceket aynı hayvan üzerinde tekrar kullanılabilir (daha fazla bilgi için tartışma kısmındaki ilgili bölüme bakınız).

4. Telemetri yeleği giymeye alıştırma

NOT: Oturumlar aşağıdaki prosedüre göre düzenlenmiştir.

  1. Hayvanı, şurada detaylandırılan prosedürleri takip ederek donatın: "Hayvan Ekipmanları" bölüm
  2. Ceketin oturuşunun güvenli ancak konforlu olduğundan emin olun. Kaydı başlatın ve hayvanı kendi kafesine geri koyun.
  3. İlk alıştırma gününde, hayvanın ekipmanı taşıma süresini birkaç saatle sınırlayın. Hayvanı izlemek için sık klinik kontroller gerçekleştirin.’durum. Hayvanın ekipmanı taşıdığı günlük süreyi kademeli olarak artırın.
  4. Herhangi bir rahatsızlık belirtisi gözlenmemesi durumunda, gözlem sıklığını kademeli olarak azaltın. Alışma süresi, çalışmanın hedef kayıt süresine ulaşana kadar bu ilerlemeye devam edin.
  5. Kaydı durdurun ve hayvanın üzerindeki ekipmanları önerilen prosedüre uygun olarak çıkarın. Kaydedilen veri kalitesini inceleyin ve hayvanı değerlendirin.’hayvana konaklama odasına geri götürmeden önce toparlanma ve genel sağlık durumunun kontrol edilmesi.
    NOT: Daha önce açıklanan adımlar, çalışmanın özel ihtiyaçlarına göre uyarlanacak standart bir çerçeve sunmaktadır.

5.  Koşu bandı egzersizine alıştırma

  1. Hayvanı (daha önce tanımlanmış olan şekilde) donatın "hayvan ekipmanları" bölüm). Kaydı başlatın.
  2. Ceket yerleştirme işlemini takiben, önceden belirlenmiş öneriler uyarınca tam fizyolojik stabilizasyonu sağlamak amacıyla, hayvanı 60 dakikalık bir ekipman sonrası stabilizasyon süresi için kafesine geri koyun17,18,19.
  3. Hayvanı durdurulmuş koşu bandına aktarın ve 3 dakika bekleyin. 5 veya 10 cm.s hızında ilk düşük hız aşamasını başlatın.-1 1,5 dakika boyunca.
  4. Hayvanı, 5 cm/s artışlarla kademeli olarak yükseltilen koşu hızlarına tabi tutun.-1 her 2 dakikada bir ve erken aşamalarda hayvanı, koşu bandının 0,2 mA'lik tipik şiddetteki elektrik şoklarını kullanarak koşmaya teşvik edin.
  5. Çalışmanın sonunda hayvanı kafesine geri koyun. Hayvanın ekipmanlarını çıkarmadan önce 30 dakika bekleyin.
  6. Bu koşu bandı egzersiz alıştırma protokolünü, koşu hızını ve egzersiz süresini kademeli olarak artırarak, haftada 5 gün olmak üzere 2 hafta boyunca tekrarlayın.
    NOT: Bu işlemin toplam süresi 5 dakika (alıştırmanın ilk gününde) ile başlayıp kademeli olarak 25 dakikaya (alıştırmanın son gününde) ulaşmalıdır.
  7. 2 haftalık alıştırma süresi boyunca, egzersizin yoğunluğunu ve süresini ayarlamak için ulaşılan koşu hızının yanı sıra şok sayısını takip edin.
  8. İnsani son nokta olarak, hayvan 10 şoka ulaştığında veya toplam şok süresi 10 saniyeye ulaştığında oturumu sonlandırın. Hayvanı kafesine geri koyun ve davranışlarını görsel olarak izleyin.
    NOT: Ceketli telemetri sistemi takılı halde koşu bandında koşan bir sıçanın temsilci görüntüsü şurada gösterilmiştir: Şekil 6.

figure-protocol-4
Şekil 5: Sinyal kalitesi doğrulaması (adım 2.3) sırasındaki tipik EKG ve solunum izleri. EKG'ler 500 Hz/24-bit ve solunum hacimleri 200 Hz/32-bit hızında kaydedilmiştir, (A) Grafik, yüksek kaliteli bir EKG'yi göstermektedir (çözünür P, QRS, T dalgaları, düşük gürültü, genliği > 0.5 mV olan 3 s'lik pencere). (B) Grafik, yüksek kaliteli bir solunum sinyalini göstermektedir (istirahat halindeki çözünür döngüler, genliği > 0.5 arb.u. olan 20 s'lik pencereler). (C) Grafik, düşük kaliteli bir EKG'yi göstermektedir (genliği > 0.5 mV olan 50/60 Hz gürültüsü gibi yüksek girişim, baz çizgisi kayması veya küçük/düz QRS, 1.5 s'lik pencereler). (D) Grafik, düşük kaliteli bir solunum sinyalini göstermektedir (tanımlamayı engelleyen, genliği > 5 arb.u. olan yüksek baz çizgisi kayması, 12 s'lik pencereler). Solunum sinyali, solunum indüktans pletismografisi (RIP) ile ölçülen torasik ve abdominal çevredeki göreceli değişimleri yansıtır; bu protokolde hacim kalibrasyonu yapılmadığı için keyfi birimler (arb.u.) cinsinden ifade edilmiştir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

6. Üçgen Protokolü sırasında fizyolojik izleme

  1. Hayvanı donatın (daha önce açıklanan "hayvan donatımı" bölümüne göre). Kaydı başlatın ve ana kafeste ekipman sonrası stabilizasyon için bekleyin (önerilen: 60 dk), ardından bazal (BL) ölçümlerden önce koşu bandında 3 dk'lık bir dinlenme süresi tanıyın (Şekil 2B).
  2. Egzersiz testinin başlangıcından önce, düşük hızda bir ısınma süresiyle (5 cm.s-1 hızında 5 dk) hayvanın adapte olmasını sağlayın.
  3. Hayvanı, tipik olarak seviye başına 5 dk süreyle 10, 20, 30 ve 40 cm.s-1 olan ardışık hız seviyelerine tabi tutun.
  4. Egzersiz sonrası, hayvanları donanımları üzerindeyken kafeslerine geri götürün; böylece toparlanma dönemi boyunca kardiyak ve solunum fonksiyonlarının sürekli izlenmesine olanak tanıyın.
    NOT: Maksimal hızı değerlendirmek için kullanılan tipik bir egzersiz protokolü, üçgen protokoldür. Bu protokol, Qin et al.25 çalışmasından uyarlanmış olup, her 5 dk'da bir hızın kademeli olarak artırılmasından (örneğin, 10'dan 40 cm.s-1 max'a) oluşur. Aşama sayısı ve spesifik aralıklar dahil olmak üzere hız seviyelerinin seçimi, deneycinin hedeflerine ve istenen fizyolojik strese göre ayarlanmalıdır.

7. Fizyolojik değişken kaydı ve veri analizi

  1. Hayvana ceketli telemetri cihazını yerleştirin ve ECG kaydından hesaplanan, dakikadaki atım sayısı (bpm) cinsinden ifade edilen kalp hızını (HR), dakikadaki soluk sayısı (brpm) cinsinden solunum hızını (RespR) veya mG  cinsinden lokomotor aktivite seviyesini (AL) içeren ancak bunlarla sınırlı olmayan farklı değişkenleri izlemek için telemetri yazılımını kullanın.
  2. Toparlanma döneminden sonra, deneyin sonunda kaydı durdurun.
    NOT: mG,  figure-protocol-5   değerine karşılık gelir ve ivmelenmenin dinamik bileşenleri olan  figure-protocol-6 ile figure-protocol-7  olarak tanımlanır.
  3. Otomatik bir iş akışının, manuel müdahale olmaksızın güvenilir fizyolojik veriler sağladığının gösterildiği, önceden valide edilmiş yaklaşımı21 izleyin.
  4. Operatöre bağlı kararları sınırlamak amacıyla, manuel düzenleme gerektirmeyen tam otomatik bir veri temizleme iş akışı sağlamak için RR aralığı (85 ms ile 6 s arası) ve solunum döngüsü süresi (0.15 ile 10 s arası) dışlama eşiklerinin telemetri yazılımında geniş ayarlandığını kontrol edin.
  5. Sinyal kalitesini gözden geçirin ve gerekirse, münferit döngüleri manuel olarak düzenlemeden, belirli bir hayvan için döngü tespitini optimize etmek amacıyla yazılım içindeki tespit parametrelerini ayarlayın.
  6. Her hayvan için değişkenlerin ortalamasını her 10 s'de bir alın ve sonuçları ortalama ± SEM olarak raporlayın. Telemetri yazılımı içinde ilgi çekici spesifik dönemleri işaretleyin.
  7. Bazal seviyeyi, hayvan koşu bandına yerleştirildikten sonra lokomotor aktivite seviyesinin 10 mG altına düştüğü 3 dakikalık dinlenme döneminin son 30 saniyesi olarak tanımlayın.
  8. Egzersiz Protokolü için, başarıyla tamamlanan her hız seviyesinin son 30 saniyesini etiketleyin. Başarısız olunan herhangi bir seviyeden ve sonraki tüm seviyelerden elde edilen verileri hariç tutun.
    NOT: Başarısız seviyelerin hariç tutulması, daha yüksek hız aşamalarında örneklem boyutunun kademeli olarak azalmasına neden olur.

Sonuçlar

“Temsili sonuçlar” bölümünde açıklanan sonuçlar, 20 yetişkin Wistar sıçanında (Erkek; 250–400 g) elde edilmiştir.

Şekil 5 dinlenme halindeki bir hayvandan kaydedilen tipik yüksek ve düşük kaliteli telemetrik sinyaller arasındaki farkı göstermektedir. Şekil 5A ve Şekil 5B örneklerini sunmak yüksek-kaliteli veri. Elektrokardiyogram (EKG) şunları içermektedir: Şekil 5A yüksek kalitededir; minimum baz çizgisi kayması veya şebeke gürültüsü ile birlikte iyi çözümlenmiş P, QRS ve T dalgaları/kompleksleri sergilemektedir. Benzer şekilde, ... içindeki Solunum sinyali Şekil 5B net ve iyi çözünürlüklü solunum döngüleri ile beklenen kaliteyi sergilemektedir. Buna karşın, Şekil 5C ve Şekil 5D düşük kaliteli sinyal örneklerini gösterin. Şuradaki düşük kaliteli EKG Şekil 5C yüksek elektriksel girişim ile karakterize edilir, örneğin belirgin 50/60 Hz şebeke gürültüsü veya önemli baz çizgisi kayması şeklinde. Sinyal ayrıca sönümlenmiş veya yok denecek kadar az kompleksler (küçük veya düz QRS kompleksleri) göstermekte, bu da kardiyak döngülerin doğru şekilde ayrılmasını zorlaştırmaktadır. Şunlardaki düşük kaliteli solunum sinyali... Şekil 5D benzer şekilde, yüksek baz hattı kayması ve zayıflamış döngülerden etkilenmektedir; bu durum, hayvan sabit olduğunda bile solunum döngülerinin güvenilir şekilde tanımlanmasını ciddi şekilde engellemektedir.

figure-results-1
Şekil 6: Egzersiz yapan bir Wistar sıçanın fotoğrafı (adım 6). Sıçan; telemetri ceketi, elektrotlar ve elektronik cihazla donatılmış tek şeritli koşu bandında (koşu bandı hız seviyesi = 20 cm.s-1) egzersiz yapmaktadır. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 7A–C'de sunulan veriler, varışta 330 ile 340 g arasında ağırlığa sahip ve 10 haftalık olan dört erkek Wistar sıçanından elde edilmiştir. Sıçanlara 5 ardışık gün boyunca (1. Gün'den 5. Gün'e kadar) telemetri ceketi giydirilmiştir. Her oturum, hayvanın donatılmasını ve ardından ana kafeste 3 saatlik bir kayıt işlemini kapsamıştır. Fizyolojik varyasyonlarla ilişkili davranışları belirlemek için video analizi manuel olarak gerçekleştirilmiştir.

İlk iki alıştırma seansı, yerleştirme sonrası ilk saat boyunca artan kalp hızı (HR) (400 ile 500 bpm arası) ve solunum hızı (RespR) ile karakterize olan, daha belirgin bir strese neden olmuştur. Yüksek fizyolojik aktivasyonun yaşandığı bu dönemler, kamera aracılığıyla gözlemlendiği üzere yoğun keşif faaliyetleri (koklama, sık şahlanma) ve tımar davranışları ile örtüşmüştür. Buna karşılık, daha önce açıklanan 3–5 günlük alıştırma protokolünün doğru şekilde uygulanması durumunda, bu başlangıç uyarılmasının azalması beklenmektedir.

Alıştırmanın üçüncü gününde, HR ve RespR bazal değerlerine daha hızlı döndü ve yerleştirme işleminden yaklaşık 35 dk sonra sırasıyla yaklaşık 350 bpm ve 100 brpm değerlerinde stabilize oldu.

figure-results-2
Şekil 7: Ardışık alıştırma günleri boyunca fizyolojik stabilizasyon (Adım 4). Paneller, telemetri ceketi takıldıktan sonraki 1 saatlik stabilizasyon süresince (A) kalp hızını (HR; bpm), (B) solunum hızını (RespR; brpm) ve (C) aktivite seviyesini (AL; mG) göstermektedir. Veriler, ardışık 5 alıştırma günü boyunca toplanmıştır (n=4; erkekler, bağımsız kohort). Veriler, her 5 dakikada bir hesaplanan ortalama ± SEM olarak temsil edilmiştir. Kalın çizgiler, ilk alıştırma gününü (mor dairesel işaretleyiciler) ve son alıştırma gününü (yeşil üçgen işaretleyiciler) vurgulamaktadır. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Sonuçlar, koşu bandı alıştırma prosedürünü başarıyla tamamlayan sekizer sıçandan oluşan iki deneysel gruptan elde edilmiştir. Bu hayvanlar, farklı araştırmacılar tarafından yürütülen iki bağımsız deneye dahil edilmiştir. İlk grupta (Grup 1; mavi çizgiler), tüm hayvanlar ceketle 30 cm.s-1 hıza kadar koşabilmiş, 8 hayvanın 7'si maksimum elektrik şoku sayısına ulaşmadan en yüksek hız olan 40 cm.s-1 hızını tamamlamıştır. Buna karşılık, ikinci grupta (Grup 2; turuncu çizgiler), 8 hayvanın 7'si 10 elektrik şoku şeklindeki insani etik bitiş kriterine ulaştıkları için 20 cm.s-1 hızda durdurulmak zorunda kalmıştır.

Şekil 8, iki gruptan bireysel örnekleri göstermektedir. Sıçan 0'ın egzersiz protokolü vaktinden önce sonlandırılmıştır. Recovery dönemi, hayvan 20 cm.s-1 hız aşamasını tamamlayamadan koşu bandının durdurulmasıyla başlamıştır. Buna karşılık, Sıçan 1 egzersiz protokolünü başarıyla tamamlamış ve koşu bandı egzersizinin başlangıcındaki ilk artıştan sonra kademeli bir fizyolojik adaptasyon göstermiştir. Bu adaptasyon, farklı hız aşamaları boyunca HR (Şekil 8A), RespR (Şekil 8B) ve AL'de (Şekil 8C) meydana gelen progresif bir artışla karakterize edilmiş olup, yükselen fizyolojik aktivite 40 cm.s-1 aşamasının başarıyla tamamlanmasına kadar sürdürülmüştür. Koşu bandı durdurulduğunda, HR (Şekil 8A), RespR (Şekil 8B) ve AL'nin (Şekil 8C) kademeli olarak bazal seviyelere döndüğü recovery fazı başlamıştır.

figure-results-3
Şekil 8: Üçgen egzersiz protokolü sırasındaki bireysel fizyolojik yanıtlar (Adım 6). Paneller iki denek için (A) kalp atım hızı (HR; bpm), (B) solunum hızı (RespR; brpm) ve (C) aktivite seviyesini (AL; mG) göstermektedir: Maksimum hız aşamasını tamamlayarak uygun eğitimi kanıtlayan Sıçan 1 (erkek) ve 20 cm.s-1 hız aşamasında aktiviteyi durduran Sıçan 0 (erkek). Düz çizgiler hayvanın koştuğu dönemleri, noktalı çizgiler ise koşu bandı aktivitesinin durmasının ardından gelen toparlanma dönemini temsil eder. Isınma, koşu bandının başlatılmasından sonra ve testin asıl başlangıcından önce 5 cm.s-1 hızındaki 5 dakikalık süreyi ifade eder. Veriler, her 30 saniyede bir hesaplanan ortalama olarak sunulmuştur. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 9'da bildirildiği üzere, 1. grup için temel çizgi ölçümleri koşu bandında şu şekilde kaydedilmiştir: HR 395±14 bpm, RespR 177±15 brpm ve AL 15±2 mG. İzleme cihazı, temel çizgiyle karşılaştırıldığında koşu bandının başlatılmasıyla tetiklenen başlangıç fizyolojik artışını şu şekilde ölçmüştür: HR (+%26, +101 bpm) (Şekil 9A), RespR (+%46, +82 brpm) (Şekil 9B) ve AL (+%1210, +189 mG) (Şekil 9C). 1. grup için 40 cm.s-1 hızındaki egzersizin tetiklediği fizyolojik artış, BL ile karşılaştırıldığında şu şekilde ölçülmüştür: HR (+%28, +110 bpm) (Şekil 9A), RespR (+%71, +126 brpm) (Şekil 9B) ve AL (+%2839, +443 mG) (Şekil 9C). 2. grup için benzer BL değerleri kaydedilmiştir: HR 399±18 bpm, RespR 150±15 brpm ve AL 11±3 mG. İzleme cihazı, Temel Çizgi ile karşılaştırıldığında 20 cm.s-1 hıza kadar olan egzersizin tetiklediği fizyolojik artışı şu şekilde ölçmüştür: HR (+%23, +90 bpm), RespR (+%81, +122 brpm) ve AL (+%1555, +171 mG). Bu grup için yalnızca bir hayvanın söz konusu hız aşamalarına ulaşması nedeniyle, daha yüksek hızlar için değerler karşılaştırılmamıştır (Şekil 9D).

Bu farklılıklara rağmen, her iki grup da koşu bandı kullanımının başlangıcında HR, RespR ve AL değerlerinde büyük bir başlangıç artışı göstermiş, ardından koşu bandı hızı arttıkça bu parametrelerde progresif ve karşılaştırılabilir bir artış kaydedilmiştir.

figure-results-4
Şekil 9: Bağımsız deneysel gruplar genelindeki fizyolojik parametreler ve toparlanma profilleri. Paneller, üçgen protokolün zorlanmış egzersiz hız aşaması (Adım 6) ve ardından gelen toparlanma evresi sırasındaki (A) kalp atım hızını (HR; bpm), (B) solunum hızını (RespR; brpm) ve (C) aktivite düzeyini (AL; mG) göstermektedir. Veriler, farklı deneyciler tarafından farklı zamanlarda yürütülen iki bağımsız denemeden elde edilen Grup 1 (mavi; n = 8 erkek) ve Grup 2 (turuncu; n = 8 erkek) için gösterilmiştir. (D) Hız aşamasını tamamlayan hayvan sayısı. Panel D'deki hayvan sayıları hariç, veriler ortalama ± SEM olarak temsil edilmiştir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Tartışma

Bu protokol, artan egzersiz testi (AET) sırasında kemirgenlerde kardiyorespiratuvar sistem adaptasyonunun izlenmesi için basit ve invaziv olmayan bir yöntem sunar.25Bu yaklaşım, yalnızca egzersiz fizyolojisini incelemek açısından değil, aynı zamanda istirahat halinde belirgin olmayan, patolojik modellerin neden olduğu işlevsel değişiklikleri ortaya çıkarmayı amaçlayan protokoller açısından da özellikle önemlidir.2,3.

Protokol kolay uygulanacak şekilde tasarlanmış olsa da, uygun yelek boyutunun seçilmesine özel dikkat edilmelidir. Yelek ve koşu bandına alıştırma aşamaları en kritik adımlardır. Ayrıca, kayıt başlamadan önce sinyal kalitesinin kontrol edilmesi esastır. Veri güvenilirliğini sağlamak için bu çeşitli noktaların ayarlanması veya sorun giderilmesi gerekebilir. Bu kontrol noktaları aşağıda ayrıntılı olarak açıklanmıştır.

Ceket uygunluk doğrulaması

Eğer bir hayvan alıştırma dönemi boyunca kılıfını çıkarabiliyorsa ya da rahatsız görünüyorsa, üretici firmanın önerilerine başvurarak doğru boyutun seçildiğinden emin olmak amacıyla kılıfın oturumunu yeniden kontrol edin.'s boyutlandırma önerileri23. Hayvana ceket takılabilir ancak uyum konusunda şüpheler varsa, ceket ile hayvan arasında bir parmak geçirmeyi deneyin’hayvanın göğüs bandlarının aşırı sıkıştırıp sıkmadığını kontrol etmek için omzuna dokunun’s gövdesi. Bir parmak kolayca içinden geçebilmeli ve ceket hafifçe gerildiğinde kumaş yumuşak kalmalıdır. Eğer bir parmak sokmak zor oluyorsa veya kumaştan dolayı aşırı basınç hissediliyorsa, hayvanın sıkışmış olma ihtimali nedeniyle ceket çıkarılmalıdır. Tersine, çok büyük olan bir ceket takıldıktan sonra uzun süre yerinde kalmaz ve hayvanın çıkarması kolay olur. Büyük bir ceket takılabiliyor olsa bile genellikle omuz küreklerinin gerisine doğru kayma eğilimindedir. Eğer ceket hafifçe bile hareket ederse, hayvan dış kenardan bir pençesini sokabilir ve sonunda tüm cihazı çıkarabilir.

Aklimatizasyon & Ceket uyumu

Adaptasyon aşaması, deneyin yapılacağı gün stresin en aza indirilmesi açısından kritik bir adımdır. Aslında invaziv olmayan prosedürler veya rutin işlemler bile geçici stres tepkileri oluşturabilir.26,27Aklimatizasyon süresi, hem hayvanların hem de deney yapan kişilerin prosedüre alışmasını sağlar ve hayvanların telemetri cihazının ekstra ağırlığına (yaklaşık 15 g) kademeli olarak adapte olmasını mümkün kılar; bu ağırlık, önerilen ağırlık aralığındaki bir yetişkin sıçanın vücut ağırlığının %10'undan azdır.

Beş günlük bir alıştırma süresi bu protokolde kullanılmış olsa da bu süre gösterge niteliğindedir ve ihtiyaç duyulursa ayarlanabilir. Gerçekten de sonuçlar, Şekil 7A–C 1 saatlik dengelemeden sonra kaydedilen HR, RespR ve AL değerlerinin üç gün sonra platoya ulaştığını gösterir, daha önceki çalışmaları doğrular niteliktedir17,19,21 başarıyla üç günlük bir protokol kullanmıştır. Her durumda, alıştırma seansı sırasında kalp ve solunum fonksiyonlarının normalleşmemesi, hayvanın rahatsızlığının güçlü bir göstergesi olarak kabul edilmeli ve bu nedenle yetersiz alıştırma olarak değerlendirilmelidir. Eğer bu tür bir durum yeleğin oturumu ne olursa olsun meydana gelirse, sıçanların kontrol edilmesi şiddetle önerilir' stres faktörlerini ortadan kaldırmak için çevre ve barınma koşulları28,29Ayrıca, tanıdık olmayan bir duruma maruz kalmanın neden olduğu başlıca geçici davranışlar olan kılıfı kemirmeye çalışma veya porfirin salgılama (kırmızı gözyaşı) gibi davranışları ayırt etmek esastır.26, ceketi giymekteki sürekli isteksizlikten kaynaklanabilir ki bu durum hâlâ olağandışıdır. İlk durumda, bu tür davranışların sıklığı alışma ilerledikçe azalmalıdır ve bu durum hayvanın’prosedürün kademeli kabulüne. İkinci durumda, yeleği giymeye karşı isteksizlik azalmaz ve tekrarlanan maruziyet olumsuz pekiştirme oluşturabilir. Bu makalede sunulan deneylerde, 16 sıçandan yalnızca biri alıştırma döneminin ilk gününde yeleği kemirmeye çalıştı ve bu davranış sonraki oturumlarda gözlemlenmedi. Tüm hayvanlar nihayetinde yeleği tolere etti ancak bireylerden belirli birinin yeleği giymeyi sürekli reddetmesi olasılığı devam etmekte olup bu durum, hayvanın deneyden çıkarılmasını gerektirebilir.

Treadmill alıştırma ve üçgen protokolü

Her ne kadar önerilen alışma protokolü yaygın olarak kullanılır30,31; iki ayrı deneyden elde edilen zıt sonuçlar, bireyler ve kohortlar arasında doğal değişkenliği yansıtmaktadır. Aynı standart alıştırma protokolünden geçmelerine rağmen, Grup 2 daha düşük hız aşamalarında etik şok sınırına ulaşmıştır ki bu, hedeflenen egzersiz hızlarına ulaşmak için yetersiz uyumun bir göstergesidir. Özellikle dikkat çekici olanı, 20 cm/s hızında Grup 2'deki ortalama kalp atış hızının Grup 1'e kıyasla daha yüksek olmasıdır.⁻1 benzer temel değerlerine rağmen bu aşamada olabilir ve artmış stres yanıtı, düşük kardiyovasküler uygunluk veya bireysel değişkenliğe yansıyabilir; ancak sınırlı örneklem büyüklüğü (bu hızın ötesinde Grup 2'de n=1) kesin bir yorum yapılmasını engeller. Bu, alışma süreci boyunca sürekli izlemenin gerekliliğini vurgular ve deneyler arası değişkenliği etkileyen çevresel faktörleri ya da grup özelliklerini dikkate almak amacıyla protokolün dinamik olarak ayarlanmasını gerektirir. Yeterli hazırlığı sağlamak için her bir hayvan'Habituasyon dönemi boyunca, gelişim ve on günlük süre içinde alınan şok sayısı izlenmelidir ve bireylerin artımlı testte hedeflenen maksimum hıza ulaşma süreçlerinin düzenli olarak yeniden değerlendirilmesine dayalı protokol ayarlamalarına olanak tanınmalıdır. Genel bir gösterge olarak, hayvanların düşük hızlarda (10'un altında) koşu bandında koşmaya alışması genellikle ilk iki ile üç seansını alır–20 cm.s⁻1), daha yüksek hızlara (20–30 cm/s⁻1) orta oturumlar (3. gün ile 6. gün) sırasında. Son alıştırma oturumlarına gelindiğinde, iyi uyum sağlamış hayvanlar hedef hızı (yaklaşık 40 cm/s) sürdürebilecek duruma gelmelidir.⁻1) 10. gün öncesine kadar, şok sınırına ulaşmadan oturumun tam süresi boyunca. Her hayvanı doğrulamak için ön test artan oturumu önerilir'hedef hıza ulaşma kabiliyetini ölçer. Bu adım, bu aşamayı tatmin edici bir şekilde tamamlayamayan hayvanlar için habituasyon süresinin uzatılmasına olanak tanıyan nihai bir kontrol görevi görür. Sonuç olarak habituasyon seanslarının maksimumun altında kalması kritik öneme sahiptir; bu seanslar fiziksel antrenman oluşturmamalı ve ardından yapılacak IET sırasında performansı etkilememelidir30,31. Yöntemsel bir başarısızlık olarak değil, burada her iki sonucun da yer alması kasıtlıdır ve kullanıcıya uygulamada beklenen tepkilerin aralığını gerçekçi bir şekilde gösterir. Bu protokol iki amaç için kullanılır: hayvanları ekipmana alıştırmak ve gerekli egzersizi yapamayacak olanları belirlemek. Ancak 'koşmayanlar' yayınlanan raporlarda sıkça bahsedilmese de, literatür verileri sıçanların %10'dan fazlasının habituasyon sürecini tamamlayamayabileceğini göstermektedir32Sonuç olarak, bu bireyler erken tanımlanmalı ve çalışmaya dahil edilmemelidir. Treadmill'e uymama ve ceket reddetme nedeniyle hayvanların çıkarılma potansiyeli göz önünde bulundurularak, istatistiksel olarak güçlü bir örneklem büyüklüğünü korumak amacıyla her kohorte bir veya iki ek hayvan dahil edilmesi önerilir.

Sinyal kalitesi

Başka bir sık karşılaşılan sorun giderme senaryosu, kaydedilen sinyal kalitesinin düşük olmasına çözüm bulmayı içerir (Şekil'de gösterildiği gibi) Şekil 6, "temsili sonuçlar"). EKG kalitesi 2 dakika sonra hâlâ kötüyse–3 dakika (jelin cilt ile elektrotlar arasında uygun teması sağlayabilmesi için gereken süre) sonra aşağıdaki düzeltici önlemler alınabilir: 1. Girişim kontrolü: Cilt kıvrımlarının, ceket kıvrımlarının veya tüylerin yeniden çıkmasının elektrot temasını engellemediğinden emin olun. 2. İletkenliği artırma: Elektrotların üzerindeki cilde hafifçe masaj yapın. Gerekirse, elektrotların yapışkan yüzeyinin ortasındaki siyah noktalara doğrudan ek iletken jel uygulayın. 3. Ekipmanı inceleme: Elektrotları ve kabloları hasar belirtileri açısından dikkatlice inceleyin ve sinyal kalitesi hâlâ kötüyse veya hasar görünürse elektrotların değiştirilmesini düşünün. RIP sinyali gürültülüyse, öncelikle ceketin boyutunu ve içine dikili sensörlerin bütünlüğünü doğrulayın. Boyut uygun değilse veya sensörler hasar görmüşse, sinyal kalitesini geri kazanmanın tek etkili çözümü olarak ceketin değiştirilmesi gerekir. Genel sinyal kalitesi, hareketten kaynaklanan mekanik gürültünün artan baz çizgisi salınımı ve hareket artefaktları şeklinde ortaya çıkması nedeniyle, temel kayıt seviyelerine kıyasla daha yüksek hızlarda azalabilir. Bu artefaktların etkisi ve buna karşılık gelen azaltma stratejileri başka bir yerde kapsamlı bir şekilde tanımlanmıştır.21.

Bu çalışma, bir koşu bandında artan egzersiz sırasında çok modlu fizyolojik değerlendirmeleri (kardiyak, ventilatuvar ve aktigrafi) gerçekleştirmek amacıyla kemirgenlere özgü bir ceket kullanır. Önceki çalışmalarda bu cihazın, kardiyak değerlendirmelerde invaziv yöntemlerle karşılaştırılabilir sonuçlar verdiği gösterilmiştir.16,33,34 ve ventilasyon15 fonksiyonlarıdır ve bu yöntemler altın standart olarak kabul edilir. Ancak bu invaziv yöntemlerin çoğu, serbestçe hareket eden hayvanlarda uygulanan egzersiz protokolleriyle genellikle uyumsuzdur. Yalnızca implant edilebilir telemetri sensörlerinin kullanılması (bir derleme için bkz.35) bu tür deneylerin yapılmasını mümkün kılar. Ancak bu sensörlerin yerleştirilmesi, hayvan refahını postoperatif ağrı, cerrahi yaraların konumu veya cihazın hacminden kaynaklanan rahatsızlık yoluyla olumsuz etkileyebilecek kapsamlı bir cerrahi işlem gerektirir ve nihayetinde hayvanı değiştirme's fenotipi veya egzersiz yapabilme yeteneği8,9,36. Bu bağlamda, hayvanın korunması’araştırmalar sırasında fiziksel bütünlüğünü koruması bu yöntemin önemli bir avantajıdır. Ayrıca, özel metabolik koşu bandı cihazları oksijen tüketiminin ölçülmesine olanak sağlarken (figure-discussion-1) ve karbon dioksit üretimi (figure-discussion-2), kalp veya solunum performansının doğrudan işlevsel göstergelerini sağlamazlar. Bu protokolde kullanılan dış telemetri sistemi bu ekipmanla uyumludur ve bu eksikliği, bu yöntemlerle erişilebilen son noktaları etkili bir şekilde tamamlayarak giderir. Son olarak, koşu bandı hızı sıklıkla IET sırasında yapılan mekanik işin bir göstergesi olarak kullanılsa da, bir ivmeölçer entegrasyonu aktigrafinin doğrudan ölçülmesine olanak tanır ve böylece hayvan aktivitesiyle ilgili daha zengin veriler sunar ve basit lokomotor hızın ötesinde hareket analizine imkân verir.

Egzersiz fizyolojisi ötesinde, bu ceketli telemetri sistemi cerrahi dışı, yürüyen kardiyorespiratuvar izleme gerektiren deneysel ortamlarda daha geniş bir uygulama alanına sahip olabilir. Uygun alıştırma süresinin ardından, 48 saate kadar uzun süreli kayıtlar uygulanmıştır.33, bu da sirkadiyen veya uykuyla ilgili fizyoloji çalışmalarına ve uzun süreli izleme protokollerine yönelik yeni olanaklar sunar. Burada sunulan egzersiz protokolünün yanı sıra, bu teknoloji daha önce iskemik kardiyomiyopati modellerinde EKG'den elde edilen parametrelerin ve kalp atış hızı değişkenliğinin raporlandığı hastalıklara ait kardiyovasküler fenotipleme gibi diğer alanlarda da uygulanmıştır.20 ve kronik böbrek hastalığı ile ilişkili kardiyovasküler disfonksiyonun37, akut egzersiz ortamları dışındaki alanlarda da uygulanabilirliğini göstermektedir. Bu yaklaşım, spontan veya tetiklenen aktiviteyi içeren diğer preklinik uygulamalar için de ilgi çekici olabilir ve bunlara nöbet veya epilepsi modelleri, güvenlik farmakolojisi çalışmaları dahildir17,19ve ameliyat sonrası iyileşme izlemi38. Bu uygulamalar mevcut çalışmada özel olarak değerlendirilmese de, bu cerrahi olmayan izleme platformunun çok yönlülüğünü ve translasyonel potansiyelini göstermektedir. Mevcut yöntem birkaç sınırlamaya sahiptir ve bunların dikkate alınması gerekir. İlk olarak, önerilen protokol genel amaçlıdır ve sağlıklı hayvanlar için tasarlanmıştır. Bu nedenle, yeleğin oturması ve hayvan tarafından tolere edilmesi, hayvanın büyüklüğüne, vücut kompozisyonuna, ırkına, cinsiyetine ve fizyolojik durumuna bağlı olarak değişebilir ve bu da çok küçük, obez ya da hastalıklı hayvanlarda uygulanabilirliğini sınırlayabilir. Ayrıca, özel modellerle (örneğin obez hayvanlar) çalışan araştırmacılar, ölçüm sisteminin bağımsız olarak uyarlanması gereken egzersiz programını kendileri ayarlamalıdır.

Ana deneyi yapmadan önce potansiyel kısıtlamaları kapsamlı bir şekilde değerlendirmek amacıyla küçük bir hayvan grubu üzerinde ön test yapılması şiddetle önerilir. Ayrıca bu protokolün ticari bir ceketli telemetri sistemi kullanılarak geliştirildiği belirtilmelidir. Burada açıklanan genel ilkeler geniş ölçüde uygulanabilir olsa da sinyal kalitesi, ceket uyumu ve veri çıktısı formatı gibi performans özellikleri diğer telemetri platformlarından farklılık gösterebilir. Bu nedenle araştırmacıların ana deneyi yapmadan önce kendi sistemlerini doğrulamaları önerilir. Ek olarak, klinik öncesi araştırmaların etik ve toplumsal yönleri dikkate alındığında, burada sunulan egzersizi kontrol etmek amacıyla hafif itici bir uyaran (düşük yoğunluklu elektriksel stimülasyon) kullanılması tartışmaya açık olabilir. Düzenleyici denetimin artmasına rağmen bu yaklaşım hâlâ en yaygın kullanılan yöntemdir. Yakın zamanda Okamoto tarafından yapılan incelemede belirtildiği gibi ve diğerleri39, kesin bir şekilde egzersiz yoğunluğu ve süresinin kontrol edilmesi gerektiğinde hâlâ tercih edilen seçenektir. Bunun aksine, egzersizin katı bir şekilde kontrol edilmesi gerekli olmadığında bazı çalışmalarda elektriksel uyarımın, potansiyel olarak daha az olumsuz etkili uyaranlarla—örneğin sıkıştırılmış hava, dokusal ipuçları veya gürültüyle—değiştirilmesi önerilmektedir (bir gözden geçirme için bakınız40). Benzer şekilde, kaçındırıcı uyaranlara alternatif olarak ödül temelli paradigmaların kullanımı da on yıldan fazla bir süredir araştırılmaktadır41; ancak yalnızca olumlu pekiştirmeye dayalı standartlaştırılmış egzersiz protokolleri henüz geliştirilmemiştir. Bu yöntemin potansiyel uygulamaları oldukça geniştir ve hem özel araştırma alanlarını hem de eğitim ortamlarını kapsar. Araştırma alanlarında, bu yaklaşım kardiyorespiratuvar fonksiyonu değerlendirmek için kontrollü bir egzersiz protokolü gerektiren çalışmalara geniş ölçüde uygulanabilir. Ana uygulamaları şunları içerir: i) Sağlıklı ve patolojik durumlarda kardiyorespiratuvar sistemin adaptif kapasitesini doğru bir şekilde değerlendirmek amacıyla insanlarda kullanılan testlere karşılaştırılabilir egzersiz testleri yapmak; ii) Deneysel hastalıkların çeşitli hayvan modelleri arasında eğitim veya rehabilitasyon protokollerini standartlaştırmak; iii) Uzun süreli dönemler boyunca eğitim veya rehabilitasyonun neden olduğu fizyolojik etkilerin uzunlamasına izlenmesini kolaylaştırmak; iv) Dinlenme halinde hayvanlarda belirgin olmayan kalp yetmezliğiyle ilişkili değişiklikler gibi fizyolojik bozuklukları tespit etmek. Pedagojik açıdan değerlendirildiğinde, bu model üniversite uygulamalı eğitimine önemli katkılar sunar ve böylelikle 3R ilkelerine doğrudan ya da dolaylı olarak uyum sağlar.4 : “İyileştirme”, “İndirgeme” ve “Değişim” hayvan kullanımında. Bu, “İyileştirme” tamamen invaziv olmayan yapısı sayesinde, hayvanın korunmasını sağlar’fiziksel bütünlüğünü korur, bu da kardiyorespiratuvar fizyolojiyi incelemek için geleneksel yöntemlerden farklıdır. Ayrıca, bu çok modlu yaklaşım, öğrencilerin tek bir oturumda tek bir sistem kullanarak kardiyak ve respiratuvar fizyolojiyi incelemesine olanak tanıyarak fizyolojik homeostazın entegre bir gösterimini sağlar. Bu durum dolaylı olarak bir “İndirgeme” hayvan sayısında. Eğitim bağlamında bu sistem aynı zamanda destekleyebilir “Değişim” fizyoloji eğitimi kapsamında pratik eğitim ve simülasyon temelli öğrenmeyi desteklemek ve çeşitli fizyolojik senaryoları göstermek amacıyla gerçekçi fizyolojik veri tabanlarının oluşturulmasını sağlayarak42Gerçekten de eğitim amaçları için bu protokolde açıklanan sorun giderme senaryoları özellikle değerlidir çünkü bireyler arası değişkenliğin ve teknik zorlukların gösterilebileceği gerçek deneysel koşullardan türetilmiş örnekler sunar. Üniversitelerin hayvan kullanımını artan oranda simülasyon araçlarıyla desteklemesi veya değiştiriyor olması nedeniyle bu tür örneklerin kullanılabilir olması önemlidir. Ayrıca, bu protokol sırasında elde edilen video verileriyle fizyolojik kayıtların zenginleştirilmesi, tepkisiz hayvan örnekleri de dahil olmak üzere öğrencilere görsel bağlam sağlayarak yorumlama ve öğrenmeyi artırabilir.

Açıklamalar

Timothé FLENET ve Charles EYNARD, ETISENSE SAS'nin çalışanları ve hissedarlarıdır. Agathe CAMBIER, ETISENSE SAS'nin bir çalışanıdır. ETISENSE SAS, bu protokolde kullanılan ceketli telemetri sistemini üreten şirkettir.

Teşekkürler

Bu sonuçlar, FC3R "Dijital Araçlar" hibe desteğiyle42 yürütülen LEARN projesinin (23FC3R-001) bir parçası olarak elde edilmiştir. Inserm tarafından yönetilen fonlar kullanılarak GIS FC3R'den sağlanan bu finansal destek, deneysel fizyolojiye yönelik yükseköğretim için dijital bir platformun geliştirilmesini desteklemiştir.

Netliği ve okunabilirliği artırmak amacıyla dil düzenlemesi ve taslak optimizasyonu için üretken yapay zekadan yararlanılmıştır. Yazarlar, çıktıyı gerektiği şekilde inceleyip düzenlemiş olup taslağın nihai içeriğinin tüm sorumluluğunu üstlenmişlerdir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
6 MPX balıkgözü kameraReolink, Hong Kong, ChinaFE-WAlıştırma süresince hayvanları gözlemlemek için kullanılır.
Tüy tıraş makinesiAesculap Schermaschinen, Suhl, GermanyClipper Aesculap Exacta GT416Tüylerin temizlenmesi için kullanılır. 0,1 mm tıraş kapasitesine sahip alternatif kablolu veya pilli bir tüy tıraş makinesi de uygundur.
Web tarayıcılı bilgisayarHerhangi bir tedarikçiN/ATelemetri yazılımını açmak ve video kaydetmek için kullanılır. Güncel bir web tarayıcısına sahip herhangi bir bilgisayar kullanılabilir.
Tek kullanımlık yapışkan yüzey ECG elektrotlarıETISENSE, Lyon, FranceELEC-R-1PAIRECG kaydı için ceketin altına yerleştirilecek yüzey Ag/AgCl elektrotları. 
ECG kontak jeli ASEPT INMED, QUINT-FONSEGRIVES, FranceUni Gel ECG, 251005ECG elektrotlarının temasını ve tutunmasını artırmak için kullanılır. Herhangi bir ECG kontak jeli kullanılabilir.
Gaz anestezisi istasyonuTEM SEGA, Saint-Médard-en-Jalles, FrancePortico veterinary gas anesthesia station with ISOTEC 3 evaporatorTüy tıraşı sırasında hayvan anestezisi için kullanılır. Herhangi bir eş değer kemirgen anestezi istasyonu kullanılabilir.
Gazlı bezHerhangi bir tedarikçiN/ATemizleme işleminden sonra tıraş edilen bölgeyi kurulamak için kullanılır. Herhangi bir steril veya steril olmayan emici gazlı bez uygundur.
Enstrümante ceket ETISENSE, Lyon, FranceJKT-RAT-T1Elektrotları ve vericiyi yerinde tutmak için kullanılan, solunum sensörlü telemetri ceketi. Hayvanların ağırlığına ve suşlarına göre farklı boyutlarda mevcuttur; uygun boyut seçimi için üretici seçim tablolarına bakınız23.
İğnesiz intravenöz kateterTERUMO, Laguna, PhilippinesSURFLO 22G 0,85x25 SR+OX2225C1Hassas jel uygulaması için kullanılır. Yeniden kullanılabilir. Herhangi bir eş değer şırınga ve kateter kombinasyonu kullanılabilir.
İzofluranVirbac, Santé Animale, FranceVetflurane, 401346Tüy tıraşı sırasında gaz anestezisi için kullanılan izofluranın veteriner formülasyonu (%20 oksijen ve hava içinde 1,5–5%). Herhangi bir diğer eş değer veteriner izofluranı kullanılabilir. Yerel düzenlemelere uygun olarak kullanın.
Ceket yerleştirme aracı ETISENSE, Lyon, FranceFTUB-R-BDOpsiyonel araç; ceketin minimum kısıtlama ile hayvana yerleştirilmesini kolaylaştırmak için kullanılır.
Motorlu koşu bandı BIOSEB, Vitrolles, FranceBX-TM0,2 mA elektrik şoku veren tek veya çok şeritli motorlu koşu bandı.
Kalıcı mürekkep markörüHerhangi bir tedarikçiN/ABireysel hayvan tanımlaması için kuyruğu işaretlemek amacıyla kullanılır. Herhangi bir toksik olmayan, suya dayanıklı kalıcı markör uygundur.
Yüzey dezenfektanıFranklab, Montigny le Bretonneux, FranceFB Spray, 10515Kullanım sonrası donanımı temizlemek için kullanılır. Alkol içermeyen herhangi bir yüzey dezenfektanı kullanılabilir.
İğnesiz şırınga (1 veya 5 mL)BD, Pont-de-Claix, FranceBD Plastipak,303172Hassas jel uygulaması için kullanılır. Yeniden kullanılabilir. Herhangi bir eş değer şırınga ve kateter kombinasyonu kullanılabilir.
Telemetri yazılımıETISENSE, Lyon, FranceLASA software v2.17 or later versionWeb tabanlı fizyolojik veri toplama ve analiz yazılımı.
Fizyolojik veri toplama için telemetri sistemiETISENSE, Lyon, FranceDECRO systems : SYS-NANOACQ4, SYS-S2, SYS-S1 or equivalent Hayvan sayısına bağlı olarak farklı konfigürasyonlarda mevcuttur.
Fizyolojik veri toplama için telemetri vericisi ve batarya paketiETISENSE, Lyon, FranceEMET-HD-ACQ-REVGECG, solunum sinyalleri ve 3D ivmelenmeyi kaydeden, şarj edilebilir bataryalı (12 saat sürekli batarya ömrü) telemetri vericisi. 
Video kayıt yazılımıReolink, Hong Kong, ChinaReolink Client v8.17.6 or later versionVideoyu kaydetmek için kullanılır. Windows veya Mac versiyonları mevcuttur.

Kaynaklar

  1. Yan Z, et al. Cardiac effects of treadmill running at different intensities in a rat model. Front Physiol. 2021;12:774681.
  2. Kuczmarski JM, Unrath K, Thomas GD. Exaggerated cardiovascular responses to treadmill running in rats with peripheral arterial insufficiency. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2018;314(1).
  3. Dellavechia-De-Carvalho C, Rebelo MA, De-Moraes C, Papoti M. Aerobic capacity evaluation of Sprague Dawley rats in treadmill running: comparison between protocols. Braz J Med Biol Res. 2025;58.
  4. Russell W, Burch R. The principles of humane experimental technique. Methuen & Co. Ltd.; London; 1959.
  5. Hoymann HG. Lung function measurements in rodents in safety pharmacology studies. Front Pharmacol. 2012;3:156.
  6. Kramer K, Kinter LB. Evaluation and applications of radiotelemetry in small laboratory animals. Physiol Genomics. 2003;13(3):197-205.
  7. Brown MB, et al. Novel assessment of haemodynamic kinetics with acute exercise in a rat model of pulmonary arterial hypertension. Exp Physiol. 2015;100(6):742-754.
  8. Hale E, et al. The rat telemetry assay and venous catheter access buttons for use in cardiovascular safety pharmacology assessments - surgical methods, refinements and colony maintenance. J Pharmacol Toxicol Methods. 2024;127:107517.
  9. Schuler B, et al. Optimized surgical techniques and postoperative care improve survival rates and permit accurate telemetric recording in exercising mice. BMC Vet Res. 2009;5:28.
  10. Amrani A-IE, et al. Jacketed external telemetry in the guinea-pig. Toxicol Lett. 2012;211.
  11. Zeng T, Mott C, Mollicone D, Sanford LD. Automated determination of wakefulness and sleep in rats based on non-invasively acquired measures of movement and respiratory activity. J Neurosci Methods. 2012;204(2):276-287.
  12. Cotur Y, et al. Bioinspired stretchable transducer for wearable continuous monitoring of respiratory patterns in humans and animals. Adv Mater. 2022;34(33):2203310.
  13. Chui RW, et al. Assessment of two external telemetry systems (PhysioJacketTM and JETTM) in beagle dogs with telemetry implants. J Pharmacol Toxicol Methods. 2009;60(1):58-68.
  14. Authier S, et al. Safety pharmacology investigations in toxicology studies: an industry survey. J Pharmacol Toxicol Methods. 2013;68(1):44-51.
  15. Flenet T, et al. High-resolution respiratory inductive plethysmography in rats: validation in anesthetized conditions. Physiol Meas. 2017;38(7):1362-1372.
  16. Fontecave-Jallon J, et al. Inductive plethysmography in rats: towards a new standard for longitudinal non-invasive cardiac output monitoring in preclinical studies. Physiol Meas. 2018;39(9):095006.
  17. Fares R, et al. Non-invasive jacketed telemetry in socially housed rats for a combined assessment of respiratory system, electrocardiogram and activity using the DECRO system. J Pharmacol Toxicol Methods. 2022;117:107195.
  18. Penard L, et al. Implementation of cardiorespiratory monitoring in the juvenile minipig using a noninvasive jacketed telemetry system. Birth Defects Res. 2021;113(10):806.
  19. Fares R, Champeroux P. Simultaneous assessment of central nervous and respiratory systems using jacketed telemetry in socially housed rats: application of the 3Rs principles in core battery safety pharmacology studies. J Pharmacol Toxicol Methods. 2023;121:107268.
  20. Detrait M, et al. Cardiac sympathetic denervation mitigated ischemic cardiomyopathy progression in a rat model of sleep apnea. J Am Heart Assoc. 2025;14(11).
  21. Tanguy S, et al. Jacketed telemetry in rats: a novel non-invasive method for cardiorespiratory phenotyping during treadmill exercise. Lab Anim. 2025;59(2):215-225.
  22. Fares RP, Boire A, Eynard C, Flenet T. Simultaneous non-invasive telemetric electrocardiogram and respiratory measurement with a connected jacket (DECRO system) in rats. Research Square. 2020:10.21203/rs.3.pex-860/v1.
  23. ETISENSE. DECRO - Rat jacket specification and size selection. Lyon: ETISENSE; 2026:https://support.etisense.com/portal/en/kb/articles/rat-table-selection-of-jackets.
  24. ETISENSE. DECRO - How to start and stop a data acquisition. Lyon: ETISENSE; 2026:https://support.etisense.com/portal/en/kb/articles/make-and-stop-a-data-acquisition.
  25. Qin F, et al. Maximum oxygen consumption and quantification of exercise intensity in untrained male Wistar rats. Sci Rep. 2020;10(1):11520.
  26. Mason G, et al. Non-invasively assessing disturbance and stress in laboratory rats by scoring chromodacryorrhoea. Altern Lab Anim. 2004;32(1 Suppl):153-159.
  27. Delaunois A, Dedoncker P, Hanon E, Guyaux M. Repeated assessment of cardiovascular and respiratory functions using combined telemetry and whole-body plethysmography in the rat. J Pharmacol Toxicol Methods. 2009;60(2):117-129.
  28. National Research Council Committee on Recognition and Alleviation of Distress in Laboratory Animals. Recognition and alleviation of distress in laboratory animals. National Academies Press; Washington, DC; 2008.
  29. Conour LA, Murray KA, Brown MJ. Preparation of animals for research--issues to consider for rodents and rabbits. ILAR J. 2006;47(4):283-293.
  30. Reboul C, et al. Cardiac remodeling and functional adaptations consecutive to altitude training in rats: implications for sea level aerobic performance. J Appl Physiol. 2005;98(1):83-92.
  31. Goret L, et al. Training does not affect the alteration in pulmonary artery vasoreactivity in pulmonary hypertensive rats. Eur J Pharmacol. 2005;527(1-3):121-128.
  32. Garrigos D, et al. A handful of details to ensure the experimental reproducibility on the forced running wheel in rodents: a systematic review. Front Endocrinol. 2021;12:638261.
  33. Scorrano F, Stuber N, Dreessen K, Cordier V. Evaluation of a new telemetry jacket system for rats. Lab Anim. 2022;56(1):155.
  34. Fontana-Pires L, et al. Continuous non-invasive extraction of hemodynamic variables from thoracocardiographic signals using the ensemble averaging technique: validation in anesthetized rats without ventilatory support. Physiol Meas. 2025;46(12):125002.
  35. Laske TG, Garshelis DL, Iles TL, Iaizzo PA. An engineering perspective on the development and evolution of implantable cardiac monitors in free-living animals. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2021;376(1830):20200217.
  36. Helwig BG, Ward JA, Blaha MD, Leon LR. Effect of intraperitoneal radiotelemetry instrumentation on voluntary wheel running and surgical recovery in mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 2012;51(5):600-608.
  37. Soulie M, et al. Altered ECG parameters with loss of cardiac variability and prolonged QTc in a non-diabetic chronic kidney disease rat model. Arch Cardiovasc Dis. 2024;117(6-7).
  38. Cambier A, et al. Refining the implementation of surgical protocols: benefits of non-invasive cardiorespiratory monitoring in rat. Lab Anim. 2022;56(1):152.
  39. Okamoto M, Hata T, Hiraga T, Soya H. Treadmill running model for rodents as a translational approach based on human physiological responses. In: Soya H, editor. Exercise Brain Stimulation for Cognitive Function and Mental Health. Singapore: Springer Nature Singapore; 2025.
  40. Poole DC, et al. Guidelines for animal exercise and training protocols for cardiovascular studies. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2020;318(5).
  41. Fantegrossi WE, Xiao WR, Zimmerman SM. Novel technology for modulating locomotor activity as an operant response in the mouse: implications for neuroscience studies involving exercise in rodents. J Neurosci Methods. 2013;212(2):338-343.
  42. FC3R. Digital tools - Call for project FC3R - LEARN (L3Rn) (23FC3R-001): development of an innovative platform for teaching experimental physiology in higher education. France: FC3R; 2024:https://www.fc3r.com/en/digital-tools-3-2023.html.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Koşu Bandı EgzersiziSıçan FizyolojisiKalp Atım Hızı İzlemeSolunum HızıLokomotor Aktiviteİnvaziv Olmayan İzlemeFizyolojik AklimatizasyonHayvan Refahı

Bu makale yayımlandı

Video yakında

Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.