Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
* These authors contributed equally
Bu sunulan protokolün amacı, arterializasyonsuz bir fare karaciğer nakli modeli oluşturmak için optimize edilmiş cerrahi deneyimi paylaşmaktır; özellikle 100 günden sonra uzun vadeli hayvan hayatta kalmasını sağlayan teknik iyileştirmelere odaklanmaktadır.
Deneysel karaciğer naklinde, fare modeli nakil immünolojisi ve metabolik süreçlerin araştırılmasında altın standarttır; Ancak, son derece ince karaciğer arterinin (~0,5 mm) yeniden inşası büyük bir teknik zorluk teşkil eder. Bunu aşmak için, basitleştirilmiş arterializasyonsuz fare karaciğer nakli (NArLT) modeli yaygın olarak kullanılmaktadır. Ne yazık ki, arteriyel yoksunluktan kaynaklanan safra kaçağı ve iskemik kolanjit gibi ciddi safra komplikasyonları, alıcıların uzun vadeli hayatta kalmalarını sıklıkla kısıtlamaktadır. Bu engel, uzun vadeli konak-greft immünuyumluluğu ve kronik reddetme gibi önemli konularda araştırmaları önemli ölçüde sınırlar. Burada, bu iskemik safra yaralanmalarını başarıyla aşmak için kritik teknik iyileştirmeleri içeren NArLT modeli için optimize edilmiş bir protokol sunuyoruz. Önemli iyileştirmeler arasında önemli ölçüde kısaltılmış bir anhepatik faz, "dokunmasız" safra diseksiyon tekniği, kapsamlı safra yolu yıkaması ve optimize edilmiş iç safra stentleme yöntemi yer almaktadır. Bu geliştirilmiş prosedür uygulandıktan sonra, alıcının sağ kalma oranı 100 günlük gözlem döneminde %94'ü aşmıştır. Sonuç olarak, bu optimize edilmiş protokol, uzun vadeli nakil toleransının altında yatan mekanizmaları araştırmak için son derece tekrarlanabilir ve sağlam bir platform sağlar ve böylece nakil tıbbında yeni terapötik stratejilerin geliştirilmesini destekler.
Fare karaciğer nakli modeli, temel nakil araştırmaları için en yaygın kullanılan deneysel platform olarak hizmet vermektedir. Ancak, daha geniş kullanımı genellikle kötü şöhretli derecede dik bir öğrenme eğrisi nedeniyle engellenmektedir; bu da sonraki deneysel çalışmaların ilerlemesini önemli ölçüdeengelleyebilir 1,2. Ayrıca, geleneksel fare karaciğer nakli modelleri genellikle cerrahi başarının altında ve düşük uzun vadeli sağkalım oranlarından muzdariptir. Cerrahi işlemleri kritik bir şekilde kolaylaştırarak, operatif detayları titizlikle inceleyerek ve damar ile safra reko....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışmadaki tüm hayvan deneyleri ve ameliyatları, Qingdao Üniversitesi Deneysel Hayvan Etik Komitesi (No. 20260301SD5020260401065) tarafından onaylandı. Hayvanların acısını en aza indirmek için tüm çabaları gösterin.
1. Ameliyat Öncesi Hazırlık
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
NArLT modellerinde tutarlı cerrahi kalite ve tekrarlanabilirliği sağlamak için tüm işlemler aynı deneyimli mikrocerrah tarafından gerçekleştirildi. Çalışma döneminde toplam 50 fare karaciğer nakli gerçekleştirildi. Cerrahi işlemlerin ortalama süreleri şöyleydi: donör ameliyatı ortalama 25,3 ± 2,6 dakika, ex vivo greft hazırlığı ortalama 13,1 ± 2,1 dakika, alıcı ameliyatı ortalama 43,0 ± 1,6 dakika ve anhepatik faza ortalama 15,7 ± 1,2 dakika.
Optimize edilmiş .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
NArLT modeli, karmaşık mikrovasküler arterial anastomoz11'den kaçındığı için deneysel nakil araştırmalarının temel taşlarından biridir. Ancak, geleneksel NArLT yöntemleri tarihsel olarak %30'a kadar olan yüksek safra komplikasyonları ile boğuşur ve bu da uzun vadeli hayatta kalmayı ciddi şekilde sınırlar ve kronik immünolojik çalışmalarıengeller 2. Önerilen yöntemin önemi, bu iskemik safra hastalıklarını aşabilme yeteneğinde yatmaktadır. Bu.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarlar çıkar çatışması belirtmemektedir.
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No.82370666), Çin'in Shandong Eyaleti Ana Ar-Ge Programı (No.2025KJHZ016) ve Fujian eyalet sağlık teknolojisi projesi (No. 2023CXA014) tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 4-0 Emilebilir Dikiş | Etikon | W9109H | Muskülofasyal tabakanın (linea alba) kapanması için kullanılır |
| 4-0 İpek Dikiş | Etikon | VCP304H | Deri kapatma için kullanılır |
| 7-0 veya 8-0 Dikiş / İpek Kravat | Etikon | Z1711E | Damarların bağlanması için kullanılır (örneğin, sol frenik veni) |
| 22G Damar İçi Kateter | B. Braun | 4252098B | 5&ntire olarak kısaltılmış; 7 mm eğimli uçlarla safra stent hazırlamak için |
| 23G Saç Derisi Damarı İğnesi | Shandong Qinkai Tıp Endüstrisi Şirketi, Ltd. | MDLSSVS | Karaciğer perfüzyonu için abdominal aortaya yerleştirme amacıyla kullanılır |
| Buprenorfin | Tianjin İlaç Araştırma Enstitüsü İlaç Şirketi, Ltd. | H12020275 | Ameliyat sonrası subkutan analjezi olarak uygulanır |
| Pamuk Çubuk | Aoocn | 216-236 | Diseksiyon sırasında karaciğeri nazikçe yükseltmek için kullanılır |
| Ezilmiş Buz | Yok | Yok | Ex vivo hazırlık sırasında greft sıcaklığını korumak için kullanılır |
| Elastik Retraktorlar | Yok | Yok | Laparotomi sırasında karın duvarını geri çekmek için kullanılır |
| Epidural Kateter Kılıfları | Jiangsu Maichuang Tıbbi Cihaz Şirketi, Ltd. | 20173084015 | Bedenler 5F ve 6F; PV ve IHIVC için kelepçe olarak kullanıldı |
| Gazlı bez | Central Medical Technology Co., Ltd. | CH-1001 | Tuzlu su ile ıslanmış; Bağırsakları kapatmak ve korumak için kullanılır |
| Glikoz Çözeltisi (%5) | Sichuan Kelun İlaç Şirketi, Ltd. | H20044307 | Alıcı hepatektomi sırasında intrahepatik kan yıkamak için kullanılır |
| Heparin Salin | Shenzhen Life Biotechnology Co., Ltd. | H2012003 | 100 IU/mL; safra stentini ıslatmak için kullanılır |
| İç İğne | B. Braun | 4254074B | Anastomoz tamamlanmadan önce havayı almak için SHIVC'yi yuyub temizlemek için kullanılır |
| İzofluran | Jinan Guangshengyuan Biyoteknoloji Şirketi, Ltd. | 153107015 | %5 konsantrasyon; anestezi indüksiyonu ve NBSP için kullanılır; |
| Mikrovasküler Kelepçeler | Şanghay Tıbbi Cihazlar Şirketi, Ltd. | JCZ200 | Ameliyat sırasında damar tıkanması için kullanılır |
| Sivrisinek Pensetleri | Şanghay Tıbbi Cihazlar Şirketi, Ltd. | J31010 | İnce manipülasyon ve manşet hazırlama için kullanılır |
| Normal Salin (%0,9) | Sichuan Kelun İlaç Şirketi, Ltd. | H20044304 | Sulama ve gazlı bez için kullanılır (37°C; C) |
| Pentobarbital (%1) | Şanghay Yuansi Teknoloji A., Ltd. | P0500000 | 40– 45 mg/kg; Cerrahi Anestezi için Kullanım |
| Çevresel Takılan Venöz Kateter (PIVC) | Covidien | 8888145015 | Manşetli PV'yi yıkamak ve açıklığı doğrulamak için kullanılırdı |
| Povidon-İyot | Shanxi Trinda Biyoteknoloji A., Ltd. | 41836054 | Cerrahi bölge dezenfeksiyonu için kullanılır |
| Rubber Band (Surgical Glove'dan) | Ansell | Yok | Alıcı ameliyatı sırasında SHIVC traksiyonu için kullanılır |
| Sprague– Dawley Rats | Huafukang (Pekin) Biyoteknoloji Şirketi, Ltd. | 22001A | Yetişkin erkek fareler, 8– 10 hafta, 220– 250 g |
| Steril Petri Kabı (10 cm) | Shandong Enyou Biyoteknoloji A., Ltd. | H905001 | Ex vivo hazırlık sırasında UW çözeltisinde greft tutmak için kullanılır |
| Şırınga (20 mL) | Shandong Weigao Group Tıbbi Polimer Ürünleri A., Ltd. | 20163141593 | Kontrollü karaciğer perfüzyonu için kullanılır (3&ntir; 3.5 mL/min) |
| UW Koruma Çözümü | Hayata Köprü | BTL-UW-1L | 4°° olarak bakımı yapıldı; C; Donör karaciğer perfüzyonu ve greft koruma için kullanılır |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu makale yayımlandı
Video yakında