Yöntem makalesi

Oligoasthenozoospermia fare modelinde izofloren destekli elektroakupunktur

DOI:

10.3791/71878

⸱

16 Haziran 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Ningxia Medical University School of Traditional Chinese Medicine, 2Medical College of Acu-Moxi and Rehabilitation, Guangzhou University of Chinese Medicine, 3Key Laboratory of Dryness Syndrome in Chinese Medicine, Ministry of Education, Ningxia Regional Key Laboratory of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine for Prevention and Treatment of Regional High Incidence Disease, Ningxia Medical University

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, farelerde adenin kaynaklı oligoastenozümü modelinin kurulmasını ve izofloran anestezisi altında CV3, CV4, ST36 ve SP6'da elektroakupunktur uygulanmasını detaylandırır. Sonuçlar, sayım ve hareketlilik için bilgisayar destekli sperm analizi ile hematoksilin ve eozin boyama ile testis histolojisi kullanılarak doğrulandı.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Oligoasthenozoospermi, erkek üreme bozukluğunun en yaygın türlerinden biridir. Kemirgen çalışmalarında, elektroakupunktur (EA) uygulanması özellikle karın orta hattı ile arka uzuv akupunktur noktalarının birleştirildiğinde, stabil elektrot teması kritik olduğunda, teknik bir zorluk teşkil eder. Zhongji (CV3), Guanyuan (CV4), Zusanli (ST36) ve Sanyinjiao (SP6) seçildi; çünkü bu noktalar kısırlık ve menlik anormallikleri için akupunktur protokollerinde sıkça kullanılır ve karın orta hattı ile arka uzuv konfigürasyonu standart elektrot eşleşmesine uygundur. Bu rapor, oligoasthenozoospermi için adenin kaynaklı fare modeli oluşturmak ve izofloran destekli EA ile CV3–CV4 ile ST36–SP6 çift uyarımı ile uygulanması için pratik bir protokolü tanımlar. Erkek Sprague-Dawley fareleri, üreme bozukluğuna neden olmak için 28 gün boyunca günlük garajla adenin aldı. Daha sonra, EA 28 gün boyunca inhalasyon anestezi altında günlük olarak uygulandı; indüksiyon için %3 izofluran ve maske bakımı için %1,5 izofluran kullanıldı; böylece stabil iğne yerleştirme ve elektrot eşleşmesi (CV3–CV4 ve ST36–SP6) ile tanımlanmış uyarı parametreleri (2 Hz, 1,5 mA, 30 dakika) mümkün oldu. Tedavi etkileri, sperm sayısı ve hareketliliği için bilgisayar destekli sperm analizi ile değerlendirildi; testis hematoksilin ve eozin (HE) histolojisi ile desteklendi. Temsilci sonuçlar, adenin maruziyetinin sperm sayısını ve hareketliliğini azalttığını ve seminifer tübül mimarisini bozduğunu gösterirken, EA hem sperm parametrelerinde hem de testis morfolojisinde kısmi iyileşme ile ilişkilendirilmiştir. Bu protokol, oligostonospermi fare modelinde tutarlı EA teslimatı ve men/histolojik doğrulama gerektiren çalışmalar için hazır bir referans sunar.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Erkek faktörler, kısırlığa önemli ölçüde katkıda bulunur ve tüm kısır çiftlerin yaklaşık yarısını oluşturur; sperm sayısı ve motilitedeki anormallikler en yaygın klinik bulgulararasındadır 1,2. Azalmış sperm konsantrasyonu ve bozulmuş hareketlilikle karakterize edilen oligoasthenozoospermi, erkek üreme bozukluğunun en yaygıntürlerinden biridir 3,4. Yardımlı üreme teknikleri ve ampirik tıbbi tedavilerin mevcut olmasına rağmen, sperm kalitesini iyileştirmek için etkili stratejiler sınırlıdır ve bu da daha fazla preklinik araştırmaya ihtiyaç olduğunu vurgulamaktadır 5,6,7. Bu klinik ve translasyonel ihtiyaçlar, kontrollü koşullar altında erkek üreme bozukluğunu incelemek için tekrarlanabilir deneysel iş akışlarının geliştirilmesini teşvik etmektedir.

Akupunktur müdahaleleri, hem klinik hem de deneysel bağlamlarda menin anormallikleri ve erkek kısırlığı içinincelenmiştir 8. Klinik çalışmalar belirli sperm parametreleri için potansiyel faydalar gösterse de, tasarımları, müdahale protokolleri ve sonuç ölçütleri oldukçafarklılık gösterir 9. Elektroakupunktur (EA), kontrollü uyarı parametreleri ve manuel akupunkturdan daha düzgünlü düzenleme sunduğu için laboratuvar araştırmaları için özellikle uygundur; bu da ölçülebilir üreme sonuçlarında tedaviyle ilgili değişikliklerin değerlendirilmesinikolaylaştırır 10,11,12. Bu prosedürel avantaj, EA'yı erkek üreme araştırmalarında yapılandırılmış preklinik iş akışlarına iyi uygun kılar.

Hayvan modelleri bu tür değerlendirmelerde merkezi bir konumdadır, ancak model seçimi oligoasthenozoospermi araştırmalarında temel metodolojik bir konu olmaya devam etmektedir. Son zamanlarda yapılan bir sistematik inceleme, busülfan kaynaklı modelleme yöntemlerinin tartışmalı olduğunu ve değerlendirme indekslerinde önemli bir heterojenlik sergilediğini belirterek, daha net prosedürlere ve daha tutarlı okumalara ihtiyaç olduğunuvurguladı 13. Adenin tabanlı modeller, adenin gavaji sıçalarda üreme bozukluğuna yol açabilir; bunlar arasında spermle ilgili son noktaların azalması ve testis dokusunda histolojik hasar da dahil olmak üzere, pratik deneysel bir yaklaşımsunar 14,15. Önceki çalışmalarımızda, adenin kaynaklı oligoasthenozoospermia fare modeli, EA ile Shu-Mu beyin-böbrek akupunktur setinde (Epangsanxian, BL23, GB25 ve KI3) tedavi edildi; ayrıca akupunktur dışı ve pozitif ilaç kontrol koşulları ile birlikte organ katsayıları ve serum hormon seviyeleri ELISA16 ile nicelendirildi. Bu deneysel temel üzerine inşa ederek ve mevcut EA çalışmalarında akupunktur noktası seçimi, kontrol tasarımı, uyarılma parametreleri ve sonuç ölçümlerindeki heterojenliği kabul eden mevcut protokol, stabil EA sunumu için metodolojik iş akışını geliştirmek ve genişletmek amacıyla tasarlanmıştır.

Buna göre, mevcut protokol teslimata odaklanmakta olup, kemirgenlerde tekrarlayan EA seansları için kritik olan iki pratik değişkeni ele almaktadır. İlk olarak, hayvan hareketi ve kurşun-tel çekişiyle oluşan iğne yer değiştirme ve aralıklı elektrot temasını önlemek için, uyarı sırasında konumu stabilize eden ve seanslar arasında güvenilir elektrot teması sağlayan izofluran ile korunan bir prosedür tanımlıyoruz; Bu özellikle karın orta çizgisi noktaları ile arka uzuv noktalarının birleştirildiğinde önemlidir. İkinci olarak, önceki incelemeler ve aküpunktur reçetesianalizleri 9,17 temelinde, CV4, SP6, ST36 ve CV3'ü kısırlık ve menin anormalliği protokollerinde yaygın üreme akupunktur noktaları olarak tespit ettik; CV3, CV4, ST36 ve SP6'yı seçtik ve CV3-CV4 ile ST36-SP6'ya eşleştirilmiş uyarım uyguladık. Karın orta hattı ve arka uzuv noktalarını birleştiren bu konfigürasyon, elektrot bağlantılarını standartlaştırır, kararsız kurşun tutuşmasından kaynaklanan değişkenliği en aza indirir ve tekrarlanan tedavi seanslarında tekrarlanabilir EA ilemini destekler. Protokol odaklı bir kapsam sağlamak ve daha önce bildirilen endokrin, mekanik veya pozitif kontrol modüllerinin tekrarlanmasını önlemek için, sonuç doğrulaması sadece birincil sperm ve testis okuma setiyle sınırlıdır. Bu set, bilgisayar destekli sperm analizi ve testis HE boyamalarını içerir; bunlar, fenotip indüksiyonu ve tedaviyle ilgili değişikliklerin bu iş akışında gerçekleşmesini doğrulamak için yeterlidir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm hayvan prosedürleri, laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için kurumsal yönergelere uyuyordu ve Ningxia Tıp Üniversitesi Etik Komitesi tarafından onaylandı (onay no. IACUC-NYLAC-2021-130). 8 haftalık ve 180–220 g ağırlığında erkek Sprague-Dawley fareleri, Ningxia Tıp Üniversitesi Deneysel Hayvan Merkezi'nden (lisans no. SYXK (Ning) 2020-0001). Hayvanlar, standart laboratuvar koşullarında, 22–24 °C ve %52–%56 göreli nemde, 12 saat ışık/12 saat karanlık döngüyle tutuldu ve serbest yiyecek ve suya erişimleri oldu.

1. Hayvan hazırlığı, grup atanması ve adenin kaynaklı model oluşturma

  1. Deneyden önce fareleri 7 gün boyunca alıştırın ve genel durumlarını günlük olarak izleyin.
  2. Aklimatizasyondan sonra, dokuz fareye benzersiz tanımlama numaraları atayın ve bilgisayar tarafından oluşturulan rastgele bir rastgele diziyle 1:1:1 oranında üç gruba rastgele dağıtın: kontrol grubu (n = 3), model grubu (n = 3) ve EA grubu (n = 3). Her sıçayı deneysel birim olarak kullanın ve önceden tanımlanmış dışlama kriterleri karşılanmadıkça tüm hayvanları ve örnekleri nihai analizde dahil edin.
  3. Bilgisayar destekli sperm analizi ve histolojik değerlendirme yapan araştırmacıların grup dağılımı konusunda kör tutulmasını sağlamak.
    NOT: EA sunan araştırmacılar kör edilemez çünkü müdahale görünür grup özgül prosedürleri içerir.
  4. Normal tuzlu sunda %0,5 (w/v) gum arabik içeren 20 mg/mL adenin süspansiyonu hazırlayın ve hem garaj öncesi hem de sırasında dikkatlice karıştırarak tortunun oluşmasını önleyin.
  5. Kontrol grubuna normal salin ve model ile EA gruplarına adenin süspansiyonu 10 mL/kg, yani 1 mL/100 g vücut ağırlığına eşdeğer garaj ile günde bir kez 28 gün ardışık olarak verilmelidir. Adenin dozunu 200 mg/kg/gün kullanın.
  6. Model süreci boyunca vücut ağırlığını ve genel durumu kaydedin.
    NOT: Adenin asma olarak verilir ve işlem sırasında tortulmaya eğilimlidir. Yağıntıyı en aza indirmek için gavaj sırasında sürekli tahrikasyon sürdürün; aksi takdirde doz tutarsızlığı ve iğnenin tıkanmasına yol açabilir. Tıkanma olursa, çözeltiyi iyice tekrar askıya alın ve devam etmeden önce gavaj iğnesini değiştirin.

2. Elektroakupunktur teslimatı için izofluran anestezisi (Şekil 1)

  1. İndüksiyon odası, burun maskesi ve ısıtma pediyle izofluran anestezi sistemi hazırlayın.
  2. İndüksiyon odasında %3 isofluran ile anestezi indükleyin, spontan aktivite belirgin şekilde azalana kadar.
  3. Fareyi sırtüstü pozisyonda ısıtma pedine transfer edin ve EA boyunca burun maskesi aracılığıyla %1,5 isofluran ile anestezi uygulanmasını sürdürün.
  4. Düzenli solunumu sürdürürken spontan hareketleri azaltarak ve göz kırpma refleksini kaybederek yeterli anestezi doğrulayın.

3. Uyarımın teslimat doğruluğu ve kalite kontrolü

  1. Seans boyunca vücut sıcaklığını korumak ve hipotermi nedeniyle fizyolojik değişkenliği azaltmak için bir ısıtma pedi kullanın.
  2. Tüm hayvanlar ve seanslar için tutarlı anestezi ayarları uygulayın; indüksiyon için %3 isofluran, bakım için %1,5 isofluran kullanın. Anestezi derinliğini mücadeleyi önlemek için minimum düzeyde tutun ve düzenli solunumu koruyun.
  3. Seçilen akupunktur noktalarına dikey olarak steril tek kullanımlık akupunktur iğneleri (0,25 mm × 13 mm) yerleştirin. İğneleri CV3 ve CV4'te yaklaşık 2 mm, ST36'da 7 mm ve SP6'da 5 mm derinliklere sokun.
  4. İğne yerleştirildikten ve elektrot bağlandıktan sonra, her iğneyin sabit konumda kaldığını ve solunum veya uzuv hareketi nedeniyle gözlenen gevşeme olmadığını görsel olarak doğrulayın. Yer değiştirme olursa, iğneyi dikey olarak orijinal derinliğe yeniden yerleştirin ve stabil elektrot teması kontrol edilerek uyarıya devam edin.
  5. Elektrot kablolarını iğne sapının proksimal ucuna yakın bir şekilde kesin, ardından çekiş için yönlendirip sabitleyin; çünkü kurşun ağırlığı ve çekme genellikle ayrılma nedenleridir.
  6. Etkili uyarımızı, aküpozu noktasında hafif bir lokal kas titremesi gözlemleyerek ve kaba vücut hareketi olmadan doğrulamak için yeterli ol. Eğer titreme yoksa, elektrot temasını ve iğne yerleşmesini tekrar kontrol edip onaylayın.
  7. Seansın ortasında 15 dakikada tek bir standart kontrol yapın. Gerekirse, iğneleri yeniden ayarlayın ve hayvanlar arasında uyarı verimindeki değişkenliği azaltmadan önce hafif yerel titremeyi tekrar doğrulayın.
    NOT: EA cihazını bağlarken, kablo ağırlığından kaynaklanan çekişi azaltmak için kabloları iğne sapının proksimal ucuna kesin. Gerekirse, seans sırasında ayrılmayı önlemek için kurşun ve/veya iğneyi bantla sabitleyin.

4. Elektroakupunktur tedavisi (Şekil 2)

  1. EA'yı 28 günlük adenin gavaj döneminden sonraki gün başlatın ve 28 gün ardışık olarak günde bir kez uygulayın.
  2. İzofluran anestezisi altında, alt karın ve arka uzuvları açığa çıkarın ve yüzey anatomik işaretleri kullanarak Zhongji (CV3), Guanyuan (CV4), Zusanli (ST36) ve Sanyinjiao (SP6) bulun.
  3. Steril tek kullanımlık akupunktur iğnelerini (0,25 mm × 13 mm) dikey olarak CV3 ve CV4'te 2 mm, ST36'da 7 mm ve SP6'da 5 mm derinliklere yerleştirin.
  4. Bir çift elektrot CV3 ve CV4'e, diğer çifti ise ST36 ve SP6'ya bağlayın.
  5. 2 Hz ve 1.5 mA'da 30 dakika boyunca elektriksel uyarım verin. Bu parametreleri, adenin kaynaklı oligoastenozoospermi16'da daha önce kullanılanlarla eşleştirmek için kullanın.
  6. Bölüm 3'te belirtilen kalite kontrol kontrollerini uygulayın; bunlar arasında 15 dakikalık tek bir oturum ortası kontrolü de var.
    NOT: Fare akupunktur noktalarını Yong Tang'ın Deneysel Akupunktur ve MöksîbüssiyonBilimi 18, Ek II ("Deneysel Hayvanlarda Yaygın Kullanılan Akupunktur Noktaları") ve karşılaştırmalı anatomik işaretlerle birlikte lokalize edin. Fare akupunktur noktaları sabit geometrik noktalar yerine ayrık anatomik bölgeleri temsil ettiğinden, hayvanlar ve seanslar arasında tutarlı vücut pozisyonu, sabit anatomik referans noktaları ve milimetre tabanlı yüzey ölçümleri kullanın. Zhongji'yi (CV3) ventral orta hattında, göbek gövdesinin merkezine yaklaşık 33 mm kuyruksal konumlandırın. Guanyuan (CV4) kuyruklu göbek orta hattında, karın duvarının deri altı yüzeysel arterlerine yakın yaklaşık 25 mm kuysal mesafede konumlandırılır. Zusanli (ST36) dizin posterolateral kısmında, fibular baştan yaklaşık 3 mm distal olarak konumlandırılır. Sanyinjiao (SP6)'yı arka uzuvun medial tarafında, medial malleolusun ucuna yaklaşık 10 mm proksimal olarak konumlandırın. Tüm hayvanlar ve tedavi seansları boyunca aynı lokalizasyon referanslarını, vücut pozisyonunu, yerleştirme açısını ve yerleştirme derinliğini tutarlı şekilde uygulayın.

5. Örnek toplama

  1. Son EA oturumundan sonra fareleri 24 saat oruç tutun.
  2. Doku toplamadan önce %2 pentobarbital sodyum enjeksiyonu ile intraperitoneal enjeksiyonla 2 mL/kg oranında derin anestezi indükte edin. Pedal çekilme refleksi ve kendiliğinden hareket olmadan derin anestezi doğrulan.
  3. Kurumsal onaylı protokollere uygun olarak, derin anestezi altında kafasının kesilmesiyle sıçanı ötenazi yapın.
  4. Üreme organlarını hemen asteptik olarak açığa çıkarın. Sperm analizi için bir cauda epididimis izole edin ve histolojik muayene için bir testisi çıkarın.
  5. Histolojik işlemden önce testisi %4 paraformaldehit ile en az 24 saat sabitleyin.

6. Sperm analizi

  1. Cauda epididiminden çevredeki yağı çıkarın ve dokuyu hemen 37 °C'ye kadar ısıtılmış 2 mL normal tuzlu silete yerleştirin.
  2. Dokuyu 37 °C'lik su banyosunda 5 dakika kuluçka edin, göz makası ile doğrayın, süspansiyonu 200 ağlık bir ekrandan geçirin ve filtratı nazikçe karıştırın.
  3. Sperm süspansiyonunun 10 μL aliquotunu önceden ısıtılmış bir sayma odasına yükleyin ve bilgisayar destekli sperm analizi (CASA) sistemi kullanarak sperm sayısı ve hareketliliği analiz edin.
  4. Belirli bir deneydeki tüm örnekler için aynı oda tipi, ısıtma koşulları ve toplama ayarları kullanın.

7. Testis dokusunun histolojik muayenesi

  1. Testis dokusunu %4 paraformaldehit ile en az 24 saat sabitleyin. Hedef alanı kesin ve etiketli kasetlere yerleştirin.
  2. Numuneleri derecelendirilmiş etanol serisi ile kurutun, ksilenle temizleyin, parafinle sızdırın, gömülüp 4 μm aralığında kesimler.
  3. Bölümleri 40 °C su banyosunda yüzdürün, slaytlara monte edin ve 60 °C fırında kurutun.
  4. Hematoksilin ve eozin boyama için, bölümleri ksilen ile mumdan arındırın, derecelendirilmiş etanolle yeniden nemlendirin, 5–10 dakika ve 1–5 dakika boyunca eosin ile boyanın, ardından kurutulun, temizleyin ve monte edin.
  5. Tüm gruplar arasında tutarlı büyütme ayarlarında seminifer tübüllerin organizasyonunu ve spermatojenik hücre düzenini inceleyin.

8. Model oluşturma ve tedaviyle ilgili değişikliklerin değerlendirilmesi

  1. Kontrol grubuna göre sperm sayısı ve motilitesinin azalması ile birlikte düzensiz seminifer tübül yapısı ile model kurulmasını doğrulayın.
  2. EA grubunda, model grubuna göre sperm sayısı ve hareketliliğinin artması ile birlikte seminifer tübül morfolojisinin kısmi restorasyonu ile tedaviye bağlı değişiklikleri doğrulayın.
  3. Teknik olarak zayıf olan örnekleri, örneğin sperm işleme gecikmesi, oda-yükleme arızası veya modellemeyle ilgisi olmayan düşük kaliteli kesitler gibi örnekleri dışlama kriterleri olarak önceden tanımlayın. Analiz sırasında herhangi bir istisna edilen şeyi belgeleyin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Sperm analizi (Şekil 3)
Epididimsel sperm süspansiyonları, bilgisayar destekli bir sperm analiz sistemi kullanılarak analiz edilerek sperm sayısı ve hareketliliği nicelendirilmiştir. Bu temsilci veri setinde, adenin uygulaması kontrol grubuna göre her iki parametri de belirgin şekilde azaltmış ve başarılı model kurulmasını doğrulamıştır. EA müdahalesi daha sonra model grubuna kıyasla sperm sayısını ve motilitesini artırmıştır (Şekil 3). Tek yönlü ANOVA, sperm sayısı (F = ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Oligoastenozoospermi'nin çok faktörlü etiyolojisi ve mevcut farmakolojik tedavilerin sınırlı etkinliği göz önüne alındığında, akupunktur ve EA tekrarlanabilir, farmakolojik olmayan müdahaleler olarak dikkatçekmiştir 19. Mevcut klinik ve preklinik literatür, akupunktur veya EA'nın erkek üreme fonksiyonunu etkileyebileceği birkaç makul mekanizmayı önermektedir; bunlar arasında nöroendokrin regülasyonun modülasyonu, üreme organı mikrosirkülasyonunun iyileştirilmesi v...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar, rekabet eden finansal veya finansal olmayan çıkarlar belirtmemektedir.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, 2024 Ulusal Çin Doğa Bilimleri Vakfı Bölgesel Bilim Fonu (82460972) ve 2022 Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı Bölgesel Bilim Fonu (82260967) tarafından desteklendi; Ningxia Hui Özerk Bölgesi'nin 2022 Temel Araştırma ve Geliştirme Programı (2022BEG02040); Ningxia Tıp Üniversitesi Geleneksel Çin Tıbbı Okulu'nun Birinci Sınıf Disiplin İnşaat Projesi (ZY0019110305); Yanchi County 2023 Ana Araştırma ve Geliştirme Programı (2023YCYDCT003); ve Ningxia Hui Özerk Bölgesi'nin Halka Fayda Sağlayan Bilim ve Teknoloji Özel Programı (2024CMG03054).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
AdenineBeijing Solarbio Science & Technology Co.Ltd.A8330
CASA bilgisayar destekli semen analiz sistemiNanning Songjing Tianlun Biotechnology Co.,Ltd.VICOS-SPERM
SantrifüjSartoriusA-14C
Ayırt edici sıvıShanghai Biyuntian Biotechnology Co.,LtdC0163M
Tek kullanımlık steril akupunktur iğneleriHanyi marka0.25 mm ´ 13 mm
Kurutma makinesiLeicaHI1220
Elektrikli stimülasyon cihazıChangzhou Yingdi Electronic Medical Device Co., LtdKWD-808I
Elektronik teraziHangzhou Youheng Weighing Equipment Co.,LtdHLD-6002
Eozin Y Boya ÇözeltisiLanke BiotechBS248
Hematoksilin boyama çözeltisiZhuhai Beso Biotechnology Co. LTDBA-4041
IzofluranRWD Life Science Co., Ltd.R510-22-10
MikrotonLeicaRM2255
Nötr balzamBeijing Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co.,LtdZli-9555
Parafin gömme makinesiLeicaHistoCore Arcadia H
SD sıçanNingxia Tıp Üniversitesi Hayvan Merkezi8 haftalık, Erkek, 180-220 g
Kaydırma tarayıcıLeicaAperio LV1
Küçük Hayvan Anestezi MakinesiRWD Life Science Co., Ltd.R500
Vorteks osilatörHaimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co.,LtdQL-902
Isıtma pediDongguan Hongda Electronics Co., Ltd.45W-80X28CM

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Björndahl, L., et al. The sixth edition of the WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen: ensuring quality and standardization in basic examination of human ejaculates. Fertil Steril. 117 (2), 246-251 (2022).
  2. Agarwal, A., et al. Male infertility. Lancet. 397 (10271), 319-333 (2021).
  3. Abu-Halima, M., et al. Sperm motility annotated genes: are they associated with impaired fecundity? Cells. 12 (9), 21(2023).
  4. Li, S. L., et al. Mechanisms of traditional Chinese medicine in regulating Nrf2-related signaling pathways for the treatment of oligoasthenozoospermia: a review. J Ethnopharmacol. 360, 21(2026).
  5. Pathak, U. I., Gabrielsen, J. S., Lipshultz, L. Cutting-edge evaluation of male infertility. Urol Clin North Am. 47 (2), 129(2020).
  6. Kimmins, S., et al. Frequency, morbidity and equity - the case for increased research on male fertility. Nat Rev Urol. 21 (2), 102-124 (2024).
  7. Assidi, M. Infertility in men: advances towards a comprehensive and integrative strategy for precision theranostics. Cells. 11 (10), 29(2022).
  8. Feng, J. X., et al. The efficacy and mechanism of acupuncture in the treatment of male infertility: a literature review. Front Endocrinol. 13, 14(2022).
  9. You, F., Ruan, L. G., Zeng, L., Zhang, Y. Efficacy and safety of acupuncture for the treatment of oligoasthenozoospermia: a systematic review. Andrologia. 52 (1), 9(2020).
  10. Wei, J. Q., et al. Bibliometric and visualized analysis of electroacupuncture in the past 10 years. Complement Ther Med. 69, 10(2022).
  11. Yu, Y., et al. Effects and mechanism of action of transcutaneous electrical acupuncture point stimulation in patients with abnormal semen parameters. Acupunct Med. 37 (1), 25-32 (2019).
  12. Jia, W., Wang, C. A., Yin, Y. Acupuncture for oligospermia and asthenozoospermia: a systematic review and meta-analysis. Medicine. 100 (48), 8(2021).
  13. Pu, R. Y., et al. Modeling methods for busulfan-induced oligospermia and asthenozoospermia in mice: a systematic review and meta-analysis. J Assist Reprod Genet. 40 (1), 19-32 (2023).
  14. Yu, Z. Z., Chen, J., Shou, P. Q., Feng, L. Effects of micronutrients on the reproduction of infertility rat model induced by adenine. Int J Clin Exp Med. 7 (9), 2754-2762 (2014).
  15. Zhu, C. Z., et al. Short-term oral gavage administration of adenine induces a model of fibrotic kidney disease in rats. J Pharmacol Toxicol Methods. 94, 34-43 (2018).
  16. Li, K. Y., et al. Mechanism of Shu-Mu brain-kidney acupoint in treating oligoasthenospermia in rats via the hypothalamic-pituitary-testicular axis. J Vis Exp. (219), e67912(2025).
  17. Liu, J., et al. Exploration of acupoint compatibility patterns in acupuncture treatment for infertility based on data mining. Int J Womens Health. 18, 15(2026).
  18. Tang, Y. Experimental Acupuncture and Moxibustion Science. , Shanghai Science and Technology Press. Shanghai. (2021).
  19. Wang, Z., et al. Efficacy and safety of nonpharmacological strategies for the treatment of oligoasthenozoospermia: a systematic review and Bayesian network meta-analysis. Eur J Med Res. 28 (1), 16(2023).
  20. He, Y., et al. Acupuncture treatment of male infertility: a systematic review. Zhonghua Nan Ke Xue. 21 (7), 637-645 (2015).
  21. Napadow, V., et al. Effects of electroacupuncture versus manual acupuncture on the human brain as measured by fMRI. Hum Brain Mapp. 24 (3), 193-205 (2005).
  22. Grimm, H., et al. Advancing the 3Rs: innovation, implementation, ethics and society. Front Vet Sci. 10, 13(2023).
  23. Rinwa, P., Eriksson, M., Cotgreave, I., Backberg, M. 3R-refinement principles: elevating rodent well-being and research quality. Lab Anim Res. 40 (1), 11(2024).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Oligoasthenozoospermia ModelElectroacupuncture ProtocolIsoflurane AnesthesiaRat Reproductive DysfunctionAdenine Induced ModelSperm MotilitySperm CountAcupuncture AcupointsSemen AnalysisTesticular Histology

İlgili makaleler