Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Araştırma makalesi

Polikistik Over Sendromunda MikroRNA ve Besin Metabolizma Proteini İmzaları ile Bunların İnsülin Direnci ve İnflamasyonla İlişkileri

87 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/71928

⸱

8 Eylül 2026

 , 
1Department of Gynecology, Ganzhou Municipal Hospital of Traditional Chinese Medicine, 2Department of Gynecology, Ganzhou Women and Children's Health Care Hospital

Bu makalede

Özet

Bu retrospektif vaka-kontrol çalışması, polikistik over sendromlu kadınlarda serum miR-146a, miR-642a, miR-2861 ve metabolik belirteçleri değerlendirmiştir. miRNA'lar, adipokinler, insülin direnci, inflamasyon ve testosteronda koordineli değişiklikler gözlemlenmiş; kombine bir biyobelirteç modelinin, bireysel belirteçlere göre daha güçlü bir ayırt edici performans sergilediği görülmüştür.

Özet

Polikistik over sendromu (PKOS), üreme çağındaki kadınlarda yaygın görülen bir endokrin ve metabolik bozukluktur, ancak dolaşımdaki mikroRNA'lar (miRNA'lar) ile beslenme ile ilişkili proteinler arasındaki ilişkiler henüz tam olarak anlaşılamamıştır. Bu çalışma, PKOS'ta serum miR-146a, miR-642a ve miR-2861 ile metabolik ve inflamatuar belirteçler arasındaki ilişkileri incelemiştir. Çalışmaya PKOS'lu 62 kadın ve 71 sağlıklı kontrol dahil edilmiştir. Serum miR-146a, miR-642a ve miR-2861 kantitatif real-time PCR ile ölçülürken; adiponektin (ADPN), leptin (LEP), retinol bağlayıcı protein 4 (RBP4), insülin direncinin homeostaz model değerlendirmesi (HOMA-IR), interlökin-6 (IL-6) ve testosteron (T) düzeyleri de değerlendirilmiştir. Metodolojik doğrulama ile örnek işleme koşulları, analiz hassasiyeti ve analitik yöntemler arasındaki uyum değerlendirilmiştir. Kontrollerle karşılaştırıldığında, PKOS'lu kadınlarda miR-146a ekspresyonunun arttığı, miR-642a ve miR-2861 ekspresyonunun ise azaldığı görülmüştür. ADPN seviyeleri düşük çıkarken; LEP, RBP4, HOMA-IR, IL-6 ve T seviyeleri yüksek bulunmuştur. miR-146a, ADPN ile negatif korelasyon, LEP, RBP4, HOMA-IR, IL-6 ve T ile pozitif korelasyon göstermiştir. miR-642a; RBP4, HOMA-IR ve IL-6 ile negatif korelasyon gösterirken, miR-2861 ADPN ile pozitif korelasyon göstermiştir. Metodolojik doğrulama, kabul edilebilir analiz stabilitesi, hassasiyeti ve yöntemler arası uyum ortaya koymuştur. Üç miRNA'yı ADPN, LEP, RBP4, HOMA-IR, IL-6 ve T ile birleştiren model, %82,26 duyarlılık ve %94,37 özgüllük ile 0,929'luk bir eğri altı alan değerine ulaşmıştır. Bu bulgular, PKOS'ta dolaşımdaki miRNA'lar ve metabolik belirteçlerde koordineli değişiklikler olduğunu göstermekte ve bunların kombine tanısal potansiyellerinin daha fazla değerlendirilmesini desteklemektedir.

Giriş

PKOS, üreme çağındaki kadınlarda en yaygın endokrin ve metabolik bozukluktur. Küresel yaygınlığının %6 ile %20 arasında olduğu tahmin edilmektedir. Etkilenen kadınların yaklaşık %70'inde insülin direnci vardır ve yarısından fazlası fazla kilolu veya obezdir1. PKOS; ovulasyon bozukluğuna, infertiliteye, tip 2 diyabete, kardiyovasküler hastalıklara ve diğer uzun vadeli komplikasyonlara yol açarak üreme sağlığını ve yaşam kalitesini ciddi şekilde etkileyebilir2. Patogenezi henüz tam olarak aydınlatılmamış olsa da, PKOS'un genel olarak genetik yatkınlık, kronik düşük dereceli inflamasyon, insülin sinyal yolaklarındaki anomaliler ve lokal over mikroçevresinin bozulması dahil olmak üzere çok sayıda faktörü içerdiği düşünülmektedir. Bu arka plan ışığında, hastalık progresyonunu yansıtan spesifik moleküler belirteçlerin tanımlanması, PKOS'un erken teşhisi ve hassas müdahalesi açısından açık bir değere sahiptir3,4.

MiRNA'lar, yaklaşık 22 nükleotid uzunluğunda olan bir kodlamayan RNA sınıfıdır. Bu moleküller, mRNA'nın yıkımını teşvik ederek veya translasyonu inhibe ederek transkripsiyon sonrası gen ekspresyonunu düzenlerler. Bu nedenle, söz konusu moleküller; hücre büyümesi, farklılaşması, inflamasyona verilen yanıtlar ve metabolik düzenleme dahil olmak üzere birçok hücresel süreç için kritik öneme sahiptir5,6. Önceki çalışmalar, PCOS'lu hastaların serumunda miR-146a, miR-642a ve miR-2861'in karakteristik bir disregülasyon sergilediğini göstermiştir. miR-146a'nın artışı, TLR4/NF-κB yolağının hedeflenmiş düzenlemesi aracılığıyla kronik inflamatuar yanıtları etkileyebilir7; öte yandan, miR-642a ve miR-2861 ekspresyonundaki azalma, insülin direnci ve bozulmuş over granüloza hücresi fonksiyonu ile yakından ilişkilendirilmiştir8,9. Beslenmeyle ilişkili proteinler olan ADPN, LEP ve RBP4, metabolik dengenin düzenlenmesinde kritik bir rol oynarlar. Bu proteinlerin seviyelerindeki değişiklikler; lipidlerin nasıl işlendiğini, vücudun insüline karşı hassasiyetini ve inflamasyon durumunu doğrudan etkileyebilir. Bu durum, PCOS'ta görülen metabolik problemlerin moleküler temelinin ana bir parçası olarak kabul edilmektedir10,11. Ancak, yayınlanan çalışmaların çoğu PCOS ile ilişkili olarak ya miRNA'ları ya da beslenme ile ilişkili proteinleri ayrı ayrı incelemiştir12,13 ve ikisi arasındaki moleküler ilişki henüz sistematik bir şekilde açıklığa kavuşturulmamıştır.

Bu çalışmada, PCOS'lu hastalarda üç miRNA ve altı temel biyobelirtecin ekspresyon seviyelerini ölçtük, bu belirteçler arasındaki korelasyonları ve klinik biyokimyasal indekslerle olan ilişkilerini analiz ettik ve ayrıca miRNA'ların beslenme ile ilgili proteinlerle olan ilişkileri aracılığıyla PCOS'nin patolojik sürecine katılıp katılmadığını araştırdık. Bu çalışmanın bulguları, PCOS'nin moleküler temeline ilişkin mevcut anlayışı zenginleştirebilir, beslenme ve metabolik düzenlemeye yönelik tedaviler için potansiyel hedefler sağlayabilir ve PCOS'nin erken taraması, etkinlik izlemi ve bireyselleştirilmiş yönetimi için laboratuvar kanıtları sunabilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Etik beyanı
Çalışma, Helsinki Deklarasyonu'na uygun olarak yürütülmüş ve Ganzhou Geleneksel Çin Tıbbı Hastanesi Tıbbi Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır (onay no. GZSZYYKYLL20240092, Tarih: 2024-12-20).

Bu protokolde kullanılan tüm materyaller, reaktifler, analiz kitleri ve ekipmanlar Materyal Tablosu'nda listelenmiştir.

Çalışma tasarımı
Bu retrospektif vaka-kontrol çalışmasına, Haziran 2024 ile Ağustos 2025 tarihleri arasında Ganzhou Geleneksel Çin Tıbbı Hastanesi kadın hastalıkları polikliniğinde tanı alan 62 PCOS'lu hasta ve aynı dönemde hastanenin sağlık yönetim merkezinde muayene edilen üreme çağındaki 71 sağlıklı kadın dahil edilmiştir. Kontroller, grup düzeyinde yaş karşılaştırılabilirliğini sağlamak için seçilmiştir; BMI eşleştirme değişkeni olarak kullanılmamış ve temel bir özellik olarak değerlendirilmiştir.

Çalışma özneleri
Dahil edilme kriterleri: PCOS grubunun dahil edilme kriterleri şu şekildeydi: (1) yaş >18 yıl; (2) ilgili bozuklukların dışlanmasının ardından, 2023 Uluslararası Kanıta Dayalı Kılavuz tarafından onaylanan modifiye Rotterdam kriterlerine göre PCOS tanısı; bu tanı için aşağıdaki üç özellikten en az ikisinin bulunması gerekir: 35 günden daha uzun adet döngüleri veya yılda sekizden az döngü olarak tanımlanan oligo-ovülasyon veya anovülasyon; klinik hiperandrojenizm ve/veya biyokimyasal hiperandrojenizm (biyokimyasal hiperandrojenizm, serum toplam T konsantrasyonunun analiz spesifik üst referans limitinin üzerinde olması olarak tanımlanmıştır); ve tam folikül sayımının mümkün olmadığı durumlarda, tek bir yumurtalıkta en az 20 folikül veya en az 10 mL yumurtalık hacmi olarak tanımlanan polikistik over morfolojisi14; (3) eksiksiz elektronik tıbbi kayıtlar; (4) önceki 3 ay boyunca hormon replasman tedavisi, hipoglisemik ajanlar veya immünosupresanlar kullanmamış olmak; ve (5) kayıt sırasında toplanan ve kurumsal biyobankada saklanan açlık serum örneğinin mevcut olması.

Kontrol grubu için dahil edilme kriterleri şunlardı: (1) aynı dönemde sağlık taraması için başvurmuş olmak; (2) düzenli menstrüel döngülere sahip olmak; (3) transvajinal ultrasonografide normal over morfolojisi; (4) endokrin bozukluk, jinekolojik hastalık, infertilite veya klinik olarak anlamlı hepatik ya da renal disfonksiyon öyküsü bulunmaması; ve (5) muayene gününde toplanmış ve kurumsal biyobankada saklanmış açlık serum örneğinin mevcut olması.

Dışlama kriterleri şunlar olurdu: (1) endometriozis, uterin miyomlar, over tümörleri, pelvik inflamatuar hastalık veya diğer jinekolojik bozukluklar; (2) tiroid disfonksiyonu, Cushing sendromu, hiperprolaktinemi, konjenital adrenal hiperplazi veya ovülasyon disfonksiyonu ya da hiperandrojenizmi açıklayabilecek diğer endokrin bozukluklar; (3) şiddetli kardiyak, hepatik, renal veya pulmoner disfonksiyon, malign tümörler, otoimmün hastalıklar veya hematolojik bozukluklar; (4) önceki 6 ay içinde gebelik, doğum veya abortus; (5) önceki 3 ay boyunca glukokortikoidlerin, oral kontraseptiflerin veya glukoz ya da lipid metabolizmasını etkileyen diğer ilaçların kullanımı; (6) psikiyatrik bozukluklar veya bilişsel bozulma; (7) temel klinik bilgilerin eksikliği; ve (8) hemoglobin konsantrasyonu >2.0 g/L olarak tanımlanan şiddetli serum hemolizi, lipemi, sarılık, birden fazla dondurma-çözme döngüsü veya kesintili numune saklama. Tiroid disfonksiyonu, hiperprolaktinemi ve klasik olmayan konjenital adrenal hiperplazi; sırasıyla tiroid uyarıcı hormon, serum prolaktin ve 17-hidroksiprogesteron ölçümleri kullanılarak dışlandı; uygun durumlarda folikül uyarıcı hormon incelenirken, klinik olarak endike olduğunda Cushing sendromu veya adrenal tümör araştırıldı. Tüm klinik numunelere aynı pre-analitik prosedür uygulandı ve birincil analize dahil edilen hiçbir numune birden fazla dondurma-çözme döngüsüne maruz kalmadı.

Serum örneği toplama ve saklama
Açlık venöz kanı (10 mL), sabah saatlerinde antikoagülan içermeyen tüplere toplandı, oda sıcaklığında 30 dk boyunca pıhtılaşmaya bırakıldı ve 4 °C'de 15 dk boyunca 1,505 x g hızda santrifüj edildi. Serum, 200 µL'lik alikotlara ayrıldı ve analiz edilene kadar −80 °C'de saklandı. Tüm klinik örneklere aynı pre-analitik prosedür uygulandı ve birincil analize dahil edilen hiçbir örnek birden fazla dondurma-çözme döngüsüne maruz kalmadı.

Metodik validasyon için numunelerin hazırlanması
Santrifüj hızının (15 dakika boyunca 1,505, 3,000 ve 4,000 x g), dondurma-çözdürme sıklığının (0, 1, 3 ve 5 döngü), saklama sıcaklığının (7 gün boyunca 4 °C, −20 °C ve −80 °C), saklama süresinin (−80 °C'de 1, 3, 6 ve 12 ay) ve hemolizin (<0.1, 0.1–0.5 ve 0.5–2.0 g/L hemoglobin) etkilerini değerlendirmek için sağlıklı gönüllülerden alınan on adet havuzlanmış serum numunesi kullanılmıştır.

Laboratuvar testleri
Tüm laboratuvar analizleri, aynı eğitimli teknisyen tarafından, standartlaştırılmış çevresel koşullar altında ve önceden belirlenmiş çalışma prosedürlerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Serum miRNA'ları qRT-PCR ile kantifiye edilmiştir; ADPN, LEP ve RBP4 sandwich ELISA ile ölçülmüştür; T ve IL-6 kemilüminesans tabanlı immünolojik testlerle ölçülmüştür; glukoz metabolizma değişkenleri ise rutin otomatik laboratuvar yöntemleri kullanılarak elde edilmiştir.

qRT-PCR ile serum miRNA kantifikasyonu
Toplam RNA, TRIzol reaktifi kullanılarak 200 µL serumdan ekstre edilmiştir. Arşivlenmiş serum RNA preparatları için spektrofotometrik RNA konsantrasyonu ve A260/A280 saflık verileri mevcut değildi. Bu nedenle, qRT-PCR analizi kabul edilebilirliği, tek bir spesifik erime eğrisi piki varlığına ve üç teknik tekrarlanabilirlik arasındaki uyuma göre değerlendirilmiştir. Kloroform faz ayrımı, izopropanol çöktürmesi ve %75 etanol ile iki yıkama işleminden sonra, RNA peleti enzim içermeyen suda çözülmüştür. 20 µL'lik reaksiyon sistemi 4 µL 5x tampon, 1 µL ters transkriptaz, 1 µL 10 µM stem-loop primeri ve 5 µL RNA kalıbı içermiştir. Reaksiyon koşulları 30 dk boyunca 16 °C, 30 dk boyunca 42 °C ve 5 sn boyunca 85 °C olarak uygulanmıştır. Ters transkripsiyon ürünleri −20 °C'de saklanmıştır. Kantitatif PCR, TaKaRa SYBR Premix Ex Taq II kiti kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Her 20 µL'lik reaksiyon 10 µL 2× SYBR karışımı, her birinden 0.8 µL ileri ve geri primer (10 µM) ve 2 µL cDNA kalıbı içermiştir. Amplifikasyon, Applied Biosystems 7500 gerçek zamanlı PCR sistemi üzerinde şu koşullarda gerçekleştirilmiştir: 95 °C'de 30 sn ön-denatürasyon; 95 °C'de 5 sn ve 60 °C'de 30 sn şeklinde 40 döngü; ardından amplifikasyon spesifikliğini doğrulamak için erime eğrisi analizi yapılmıştır. U6 snRNA iç referans gen olarak kullanılmış ve miR-146a, miR-642a ve miR-2861'in bağıl ekspresyon seviyeleri 2-ΔΔCt yöntemi kullanılarak hesaplanmıştır. Her örnek üç kez test edilmiştir. Bu çalışmada kullanılan tüm primerlerin dizileri Tablo 1'de listelenmiştir.

Serum protein belirteçlerinin saptanması
Serum ADPN, LEP ve RBP4 konsantrasyonları, sırasıyla Human Total ADPN/Acrp30 Quantikine ELISA Kit (analitik hassasiyet, 0.891 ng/mL; ölçüm aralığı, 3.9–250 ng/mL), Human Leptin Quantikine ELISA Kit (analitik hassasiyet, 7.8 pg/mL; ölçüm aralığı, 15.6–1,000 pg/mL) ve Human RBP4 Quantikine ELISA Kit (analitik hassasiyet, 0.628 ng/mL; ölçüm aralığı, 1.56–100 ng/mL) kullanılarak çift antikorlu sandviç ELISA yöntemiyle ölçülmüştür. Her bir analiz ilgili insan analiti için spesifiktir ve serum örnekleri üreticinin talimatlarına göre dilüe edilmiştir. Absorbans 450 nm'de ölçülmüş ve konsantrasyonlar dört parametreli lojistik standart eğriler kullanılarak hesaplanmıştır. Analiz içi veya analizler arası CV değerleri ADPN için %2.5 veya %3.2, LEP için %2.7 veya %3.4 ve RBP4 için %2.6 veya %3.3 olarak belirlenmiştir.

T ölçümü
Serum T seviyeleri, Roche Cobas e601 otomatik immünassay analizörü kullanılarak elektrokemilüminesans immünassay ile ölçülmüştür.

Glikoz metabolik ve inflamatuar ölçümler
Açlık plazma glikoz, açlık insülin ve HbA1c değerleri, miRNA ve metabolik protein analizleri için kullanılan arşivlenmiş serum alikotlarından ziyade, aynı güne ait rutin klinik laboratuvar kayıtlarından elde edilmiştir. Açlık plazma glikozu glikoz oksidaz yöntemiyle, açlık insülini immunoturbidimetri ile ve HbA1c yüksek performanslı sıvı kromatografisi ile ölçülmüştür. HOMA-IR, [açlık plazma glikozu (mmol/L) × açlık insülini (mIU/L)]/22.5 şeklinde hesaplanmıştır. Serum IL-6, kemilüminesans immünassay ile ölçülmüştür.

Metodolojik doğrulama
Alternatif yöntem karşılaştırmaları, birincil ölçümlerin analiz platformuna karşı dayanıklı olup olmadığını belirlemek amacıyla gerçekleştirilmiştir ve gruplar arası temel sonuçların oluşturulmasında kullanılmamıştır. Üç miRNA ve beş biyokimyasal belirtecin ekspresyon seviyeleri, yukarıda açıklanan farklı işlem koşulları altında ölçülmüş ve her bir gösterge için varyasyon katsayısı CV = (standart sapma/ortalama) x 100% şeklinde hesaplanmıştır. Bir CV <Farklı örnek işleme ve saklama koşulları altında analiz sonuçlarının stabilitesini değerlendirmek için %15 kabul edilebilir olarak belirlenmiştir. Gün içi kesinlik, aynı havuzlanmış serum örneğinin tek bir günde 10 kez tekrarlanan ölçümleriyle değerlendirilmiş; günler arası kesinlik ise beş ardışık gün boyunca günde bir kez gerçekleştirilen ölçümlerle belirlenmiştir. Her bir gösterge için ortalama, standart sapma ve ilgili CV hesaplanmıştır. Analitik uyum testi için beş biyokimyasal analit (ADPN, LEP, RBP4, IL-6 ve T), validasyon örneklerinde birincil analiz yöntemi ve Roche kemilüminesans tabanlı bir immünassay platformu kullanılarak ölçülmüştür. %95 uyum sınırlarını hesaplamak için Bland-Altman analizi kullanılmıştır. Tüm klinik miRNA ölçümleri için birincil qRT-PCR analizi kullanılmış, miScript SYBR Green PCR Kit ise yalnızca analitik uyum deneyinde ortogonal bir yöntem olarak kullanılmıştır; iki qRT-PCR sistemi arasındaki Pearson korelasyon katsayıları hesaplanmıştır.

İstatistiksel analiz
Veri analizi istatistiksel yazılım kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Tüm sürekli değişkenler öncelikle Shapiro-Wilk testi ile normallik açısından test edilmiştir. Normal dağılım gösteren veriler ortalama ± standart sapma olarak ifade edilmiştir. İki grup arasındaki karşılaştırmalar bağımsız örneklemler t testi ile yapılırken, çoklu gruplar arasındaki karşılaştırmalar tek yönlü varyans analizi ve ardından ikili karşılaştırmalar için LSD-t testi kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Normal dağılıma uymayan veriler medyan (çeyrekler arası aralık) [M (P25, P75)] olarak sunulmuştur. Bu durumda iki grup arasındaki karşılaştırmalar Mann-Whitney U testi, çoklu gruplar arasındaki karşılaştırmalar ise Kruskal-Wallis H testi ile yapılmıştır. Kategorik veriler frekans ve yüzde olarak sunulmuştur. Grupları karşılaştırmak için χ2 testi veya Fisher'ın kesin testi kullanılmıştır. Değişkenler arasındaki korelasyonlar, veri dağılımına göre Pearson korelasyon analizi veya Spearman sıra korelasyon analizi kullanılarak değerlendirilmiştir. Keşifsel bir analiz olarak, her bir miRNA ile altı metabolik belirteç arasındaki Pearson korelasyonları, obez olmayan (BMI <28 kg/m2) ve obez (BMI ≥28 kg/m2) PCOS alt grupları içerisinde tekrarlanmıştır. Korelasyon katsayıları Fisher r-to-z dönüşümü kullanılarak karşılaştırılmış ve ortaya çıkan alt gruplar arası p değerleri Benjamini–Hochberg yanlış keşif oranı prosedürü ile düzeltilmiştir. Tanısal performans, alıcı işletim karakteristik (ROC) eğrileri ve eğri altındaki alan (AUC) kullanılarak değerlendirilmiştir. Ayrıca, kombine tespit lojistik regresyon modeli kullanılarak analiz edilmiştir. Tüm testler çift yönlüydü ve p < 0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Çalışma popülasyonunun temel özellikleri
Bu çalışmaya toplam 62 PCOS'lu hasta ve 71 sağlıklı kontrol dahil edilmiştir. İki grup yaş, etnik yapı ve diğer temel özellikler açısından karşılaştırılabilir düzeydeydi (p > 0.05). Buna karşın, PCOS grubunda adet döngüleri kontrol grubuna göre anlamlı derecede daha uzundu (p < 0.001); bu durum PCOS'un tipik klinik tablosu ile uyumludur (Tablo 2).

Serum miRNA ekspresyon düzeyleri<...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Standartlaştırılmış serum biyokimyasal analizleri ve qRT-PCR kullanılarak yapılan bu çalışmada, PCOS'lu 62 hasta ve 71 sağlıklı kontrolden alınan serum örnekleri analiz edilmiştir. PCOS'ta, miRNA ve beslenme ile ilişkili protein ekspresyonunda karakteristik bir disregülasyon örüntüsünün yanı sıra bu ikisi arasında anlamlı post-transkripsiyonel ilişkiler saptanmıştır. Tüm deneyler titiz bir metodolojik doğrulamadan geçirilmiştir. Tespit sisteminin hassasiyeti, stabilitesi ve yöntemler arası uyumu, yüksek kaliteli bir labo...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
-80 °C ultra düşük sıcaklık dondurucusuThermo Fisher (USA)Forma 900Serum örneklerinin uzun süreli düşük sıcaklıkta saklanması
Adiponektin (ADPN) ELISA kitiR&D Systems (USA)DY1065Serum ADPN konsantrasyonunun kantitatif tespiti
Otomatik biyokimya analizörüBeckman Coulter (USA)AU5800Açlık kan glukozu, insülin ve glikozillenmiş hemoglobin tespiti
Otomatik mikroplaka okuyucuTecan (Switzerland)Infinite M200 ProELISA deneyleri için 450 nm'de absorbans ölçümü
Kan glukozu tespit kitiBeckman Coulter (USA)A11A01Glukoz oksidaz yöntemiyle serum açlık glukozunun tespiti
Cobas e601 kemilüminesans immünassay analizörüRoche (Germany)Cobas e601Serum testosteron ve IL-6'nın elektrokemilüminesans tespiti
Enzimsiz kriyoprezervasyon tüpüAxygen (USA)MCT-150-CSerum örneği alikotlama, -80 °C ultra düşük sıcaklıkta saklama
Eppendorf Research plus PipetEppendorf (Germany)Research plus 0.5-1,000 μLSerum aspirasyonu, RNA/reaktif pipetleme, örnek alikotlama
Glikozillenmiş hemoglobin (HbA1c) kitiBeckman Coulter (USA)A11A03Yüksek performanslı sıvı kromatografisi ile serum HbA1c tespiti
IL-6 tespit kitiRoche (Germany)5200057190Serum interlökin-6 kantifikasyonu
İnsülin tespit kitiBeckman Coulter (USA)A11A02İmmünotürbidimetri ile serum açlık insülini tespiti
Leptin (LEP) ELISA kitiR&D Systems (USA)DY398Serum LEP konsantrasyonunun kantitatif tespiti
Düşük sıcaklıklı yüksek hızlı santrifüjXiangyi Instrument (China)TDZ5-WSÖrneklerin belirtilen santrifüj kuvvetlerinde santrifüjlenmesi
miScript SYBR Green PCR KitiQiagen (Germany)218073miRNA tespiti için metodolojik tutarlılık doğrulaması
PrimeScript RT Ters Transkripsiyon KitiTaKaRa (Japan)RR036AcDNA sentezlemek için miRNA ters transkripsiyonu
Real-time floresan kantitatif PCR cihazıApplied Biosystems (USA)7500miRNA qRT-PCR amplifikasyonu ve floresan tespiti
Retinol bağlayıcı protein 4 (RBP4) ELISA kitiR&D Systems (USA)DY6005Serum RBP4 konsantrasyonunun kantitatif tespiti
SPSS istatistik yazılımıIBM (USA)25Veri normallik testi, gruplar arası karşılaştırma, korelasyon ve ROC analizi
SYBR Premix Ex Taq II KitiTaKaRa (Japan)RR420AmiRNA floresan kantitatif PCR amplifikasyonu
Testosteron (T) tespit kitiRoche (Germany)5200067190Serum testosteron seviyelerinin kantifikasyonu
TRIzol toplam RNA ekstraksiyon reaktifiInvitrogen (USA)15596026Serum örneklerinden toplam RNA ekstraksiyonu
Antikoagülan içermeyen vakumlu kan toplama tüpüBD Biosciences (USA)367812Serum ayrımı için açlık kubital ven kanı toplama

Kaynaklar

  1. Stener-Victorin E, et al. Polycystic ovary syndrome. Nat Rev Dis Primers. 2024;10(1):27.
  2. Dokras A, Luque-Ramírez M, Escobar-Morreale HF. Polycystic ovary syndrome: origins and implications: Long-term health outcomes in polycystic ovary syndrome. Reproduction. 2025;170(2):e250118.
  3. Ma YC, Law KS, Wang WS, Chang HM. Phenotypic variations in polycystic ovary syndrome: metabolic risks and emerging biomarkers. J Endocrinol. 2025;267(1):e250226.
  4. Nandi A, Singh K, Sharma K. Advancement in early diagnosis of polycystic ovary syndrome: biomarker-driven innovative diagnostic sensor. Mikrochim Acta. 2025;192(5):331.
  5. Qu J, Lin Z. Autophagy regulation by crosstalk between miRNAs and ubiquitination system. Int J Mol Sci. 2021;22(21):11912.
  6. Bell-Hensley A, Das S, McAlinden A. The miR-181 family: wide-ranging pathophysiological effects on cell fate and function. J Cell Physiol. 2023;238(4):698-713.
  7. Wei R, et al. Qingfei Litan decoction alleviated Klebsiella pneumoniae-induced pneumonia by targeting the TLR4/MyD88/NF-κB axis via miR-146a-5p. J Ethnopharmacol. 2025;349:119947.
  8. Beveridge DJ, et al. The tumor suppressor miR-642a-5p targets Wilms tumor 1 gene and cell-cycle progression in prostate cancer. Sci Rep. 2021;11(1):18003.
  9. Yu K, Cui S, Xue T. LncRNA MIR22HG is downregulated in adenomyosis and upregulates miR-2861 through demethylation to inhibit endometrial cell proliferation. J Obstet Gynaecol Res. 2021;47(5):1837-1845.
  10. Orszulak D, et al. Adipokines as biochemical marker of polycystic ovary syndrome in adolescents - review. Front Endocrinol (Lausanne). 2025;16:1475465.
  11. Koleva-Tyutyundzhieva D, Ilieva-Gerova M, Deneva T, Orbetzova M. Metabolic and inflammatory adipokine profiles in PCOS: a focus on adiposity, insulin resistance, and atherogenic risk. Int J Mol Sci. 2025;26(19):9702.
  12. Dymanowska I, et al. MicroRNAs as biomarkers for metabolic disorders in polycystic ovary syndrome (PCOS): a review. Med Sci Monit. 2024;30:e946480.
  13. Ramaswamy P, et al. Circulating cell-free microRNAs in women with polycystic ovary syndrome: advancing towards biomarker discovery and therapeutic targets. Reprod Sci. 2025;32(7):2137-2179.
  14. Teede HJ, et al. Recommendations from the 2023 international evidence-based guideline for the assessment and management of polycystic ovary syndrome. J Clin Endocrinol Metab. 2023;108(10):2447-2469.
  15. Szukiewicz D, Trojanowski S, Kociszewska A, Szewczyk G. Modulation of the inflammatory response in polycystic ovary syndrome (PCOS): searching for epigenetic factors. Int J Mol Sci. 2022;23(23):14663.
  16. Kim JJ. Obesity and polycystic ovary syndrome. J Obes Metab Syndr. 2024;33(4):289-301.
  17. Gu X, Wang L, Liu S, Shan T. Adipose tissue adipokines and lipokines: functions and regulatory mechanism in skeletal muscle development and homeostasis. Metabolism. 2023;139:155379.
  18. Abdalla MMI. Therapeutic potential of adiponectin in prediabetes: strategies, challenges, and future directions. Ther Adv Endocrinol Metab. 2024;15:20420188231222371.
  19. Yang Q, et al. Serum retinol binding protein 4 contributes to insulin resistance in obesity and type 2 diabetes. Nature. 2005;436(7049):356-362.
  20. Ost A, et al. Retinol-binding protein-4 attenuates insulin-induced phosphorylation of IRS1 and ERK1/2 in primary human adipocytes. FASEB J. 2007;21(13):3696-3704.
  21. Zhu F, et al. MiR-146a alleviates inflammatory bowel disease in mice through systematic regulation of multiple genetic networks. Front Immunol. 2024;15:1366319.
  22. Aydin S, et al. An overview of ELISA: a review and update on best laboratory practices for quantifying peptides and proteins in biological fluids. J Int Med Res. 2025;53(2):3000605251315913.
  23. Candia J, et al. Effects of in vitro hemolysis and repeated freeze-thaw cycles in protein abundance quantification using the SomaScan and Olink assays. J Proteome Res. 2025;24(5):2517-2528.
  24. Liang X, et al. Quality assessment from biobank plasma and serum specimens: a systematic review. PeerJ. 2025;13:e20122.
  25. Singh I, Moar K, Maurya PK. Diagnostic and prognostic biomarkers in polycystic ovary syndrome. Clin Chim Acta. 2025;576:120425.
  26. Hadi S, et al. Extracellular fluid miRNAs in PCOS. Clin Chim Acta. 2025;576:120404.
  27. Insenser M, et al. Validation of circulating microRNAs miR-142-3p and miR-598-3p in women with polycystic ovary syndrome as potential diagnostic markers. Hum Reprod. 2023;38(5):951-960.
  28. Schofield LC, Dialpuri JS, Murshudov GN, Agirre J. Post-translational modifications in the Protein Data Bank. Acta Crystallogr D Struct Biol. 2024;80(Pt 9):647-660.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

MikroRNA İmzalarıİnflamatuar BelirteçlerBesin Metabolizma ProteinleriSerum MikroRNA'larıKantitatif Real-Time PCRAdiponektin SeviyeleriLeptin SeviyeleriRetinol Bağlayıcı Protein
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.