Bu çalışma, orta dereceli akne vulgaris hastalarında bileşik asit ile yapılan kimyasal peeling işlemini değerlendirmektedir. 30 hastanın katıldığı split-face (yüzün ikiye ayrıldığı) deneyinde, tedavinin Global Akne Derecelendirme Sistemi skorlarını, cilt kızarıklığını, porfirinleri ve IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β ve TLR2 ekspresyonlarını azalttığı görülmüştür. Özellikle Staphylococcus olmak üzere cilt mikrobiyom çeşitliliği azalmış ve takip süresince herhangi bir yan etki bildirilmemiştir.
Araştırma makalesi
Orta Dereceli Akne Hastalarında Bileşik Asit Kimyasal Peelingin Etkinliği: Kapsamlı Yüz Değerlendirmesi ile Prospektif Bir Çalışma
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Bileşik asit kimyasal peeling, akne vulgaris (AV) tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır, ancak klinik etkilerinin altında yatan biyolojik mekanizmalar henüz tam olarak anlaşılamamıştır. Bileşik asit kimyasal peelingin akne şiddetini iyileştireceğini, cilt mikrobiyotasındaki değişikliklerle ve orta dereceli AV hastalarında lokal enflamatuar yanıtların azalmasıyla ilişkili olacağını hipotez ettik. Bu çalışma, söz konusu popülasyonda bileşik asit peelingin klinik, mikrobiyolojik ve enflamatuar etkilerini araştırmayı amaçlamıştır. Orta dereceli AV olan 30 hastanın dahil edildiği prospektif, split-face (yüzün iki yarısı karşılaştırmalı), randomize bir çalışma yürüttük. Yüzün bir yarısına 3 hafta boyunca haftada iki kez bileşik asit peeling (toplam 6 seans) uygulandı ve bunu 9 haftalık bir gözlem süreci takip etti. Karşı taraftaki yüz yarısına ilk 3 hafta boyunca hiçbir tedavi uygulanmadı ve ardından aynı peeling protokolü 3 hafta boyunca uygulandı ve 6 haftalık bir takip yapıldı. Sonuç ölçütleri arasında Global Akne Derecelendirme Sistemi (GAGS), hastanın kendi değerlendirmesi, standardize yüz görüntüleme, immünohistokimya ile cilt biyopsisi, bakteriyel DNA ekstraksiyonu, PCR amplifikasyonu ve 16S rRNA gen dizilemesi yer aldı. Hastalar GAGS skorlarında istatistiksel olarak anlamlı bir iyileşme gösterdi (P < 0.001). Yüz görüntüleme analizi, kızarıklıkta ve porfirin değerlerinde azalma olduğunu ortaya koydu. İnterlökin (IL)-1α, IL-6, IL-17, transforme edici büyüme faktörü-β (TGF-β) ve toll-benzeri reseptör 2 (TLR2) için immünohistokimyasal boyama azaldı. Cilt mikrobiyotasının alfa çeşitliliği azaldı ve Staphylococcus göreceli bolluğunda belirgin bir düşüş gözlendi (P < 0.05). Çalışma boyunca herhangi bir yan etki rapor edilmedi. Bileşik asit peeling, gözlem süresi boyunca etkili ve iyi tolere edildi; ayrıca cilt mikrobiyotasındaki değişiklikler ve lokal enflamatuar belirteç boyamalarıyla ilişkili bulundu.
Giriş
Yaygın olarak akne olarak bilinen acne vulgaris (AV), öncelikle kıl foliküllerini ve sebum bezlerini etkileyen kronik inflamatuar bir deri hastalığıdır. Temel olarak yüz, göğüs ve sırtta papüller, püstüller, nodüller ve kistlerin gelişimi ile karakterize edilir. Akne çoğunlukla gençleri ve genç yetişkinleri etkilese de her yaşta ortaya çıkabilir ve 12 ila 24 yaş arasındaki bireylerde küresel yaygınlığının %70 ile %87 arasında olduğu tahmin edilmektedir1,2. Özellikle kadınlarda akne yetişkinlik dönemine kadar sürebilir ve 25 yaş ve üzeri bireylerde artan bir insidans gözlenmektedir. Aknenin gelişimi; artmış sebum üretimi3, foliküler hiperkeratoz4, bakteriyel kolonizasyon5 ve inflamasyon6 dahil olmak üzere çok sayıda faktörden etkilenir. Cutibacterium acnes (C. acnes) ve Staphylococcus epidermidis (S. epidermidis), cilt mikrobiyotasında inflamatuar yanıtın düzenlenmesinde kritik roller oynayan iki temel bakteridir. C. acnes ve S. epidermidis arasındaki dengenin, ciltte normal bir inflamatuar yanıtın sürdürülmesi için kritik olduğu saptanmıştır5. Bu ikisi arasındaki denge bozulduğunda, akneyi tetikleyen inflamasyonla ilişkili belirteçler aktive olur.
Güncel akne tedavi stratejileri, durumun farklı yönlerini ele almayı amaçlayan hem topikal hem de sistemik seçenekleri içerir. Bunlar arasında topikal retinoidler, benzoil peroksit7, topikal antibiyotikler ve daha şiddetli vakalar için oral antibiyotikler ve izotretinoin gibi sistemik ajanlar yer alır8. Son yıllarda, kimyasal peeling akne için gelecek vadeden bir tedavi olarak ortaya çıkmıştır. Bu teknik, cildi eksfoliye etmek, cilt dokusunu iyileştirmek, akne lezyonlarının ve skar görünümünü azaltmak için belirli asitlerin uygulanmasını içerir9. Kimyasal peelingde yaygın olarak kullanılan asitler arasında glikolik asit gibi alfa-hidroksi asitler (AHA'lar) ve salisilik asit gibi beta-hidroksi asitler (BHA'lar) bulunur. Bu asitler, inflamasyonu azaltmak ve komedon oluşumunu önlemek dahil olmak üzere çeşitli mekanizmalar aracılığıyla etki ederler. Özellikle birden fazla asit tipini veya tek bir asidin farklı konsantrasyonlarını birleştiren bileşik asit formülasyonları, potansiyel terapötik faydaları nedeniyle dikkat çekmiştir. Bileşik asitlerin temel avantajı, akne patogenezinde yer alan birden fazla yolu eş zamanlı olarak hedefleme yetenekleridir10.
Sivilce tedavisinde bileşik asit peelinginin etkinliğini inceleyen klinik araştırmalar, tedavi gören hastalarda sivilce şiddetinde ve lezyon sayılarında önemli azalmaların yanı sıra cilt dokusunda iyileşmeler dahil olmak üzere gelecek vaat eden sonuçlar göstermiştir11. Önceki çalışmalar sivilce için kimyasal peelinglerin klinik faydalarını bildirmiş olsa da, mevcut kanıtların çoğu tekli asit formülasyonlarına veya lezyon sayıları ve sivilce şiddeti gibi klinik sonuçlara odaklanmıştır. Bu asitlerin eksfoliye edici, anti-inflamatuar ve antimikrobiyal özelliklerinin kombinasyonunun etkinliğe katkıda bulunduğu varsayılsa da, ilgili kesin moleküler yolaklar henüz tam olarak aydınlatılmamıştır. Bildiğimiz kadarıyla bu çalışma, bileşik asitlerin orta dereceli sivilcesi olan bireylerde cilt mikrobiyota kompozisyonu ve inflamatuar yanıtlar üzerindeki etkisini araştıran ilk çalışmadır.
Protokol
Çalışma protokolü, Chongqing Tıp Üniversitesi Birinci Bağlı Hastanesi Etik Kurulu tarafından incelenmiş ve onaylanmıştır (No. 2024-020-01). Çalışma, Çin Ulusal Tıbbi Araştırma Kayıt Sistemi'ne prospektif olarak kaydedilmiştir (kayıt numarası: MR-50-24-036087; kayıt tarihi: 6 Eylül 2024). Kimliksizleştirilmiş yüz fotoğraflarının yayınlanmasıyla ilgili onay da dahil olmak üzere, tüm katılımcılardan kayıt öncesinde yazılı bilgilendirilmiş onam alınmıştır. Çalışma, Helsinki Deklarasyonu ile uyumlu olarak yürütülmüştür.
Çalışma tasarımı
Bu çalışma, 12 haftalık, yüzün iki yanının karşılaştırıldığı (split-face), randomize, prospektif bir klinik çalışmaydı. Bu çalışmada kullanılan bileşik asit peelingi, yaklaşık %7,5 toplam asit konsantrasyonuna sahip AHA (%4), salisilik asit (%2) ve azelaik asit (%1,5) içeriyordu. Formülasyonun pH değeri 3,6 idi. Çalışma başlatılmadan önce, katılımcıların tedavi ve kontrol kollarına atanması, körleme yöntemiyle çalışan bir istatistikçi tarafından bir hesap tablosunda oluşturulan rastgele bir dizi kullanılarak belirlenmiş ve yine körleme yöntemiyle çalışan bir doktor tarafından uygulanmıştır. Tedavi tarafına 3 hafta boyunca haftada iki kez bileşik asit peelingi uygulanmıştır (toplam altı seans). Tedavi bölgesi, hafif, yağsız bir temizleyici ile nazikçe temizlenmiş ve tamamen kurutulmuş, ardından peeling ince ve düzgün bir tabaka halinde uygulanmıştır (~2 mL her bir yüz yarısı için). Formülasyon; göz kapakları, dudaklar, mukoza yüzeyleri ve hasarlı cilt bölgeleri dışarılarak alın ve şakaklardan yanaklara, burna, perioral bölgeye ve çeneye doğru standart bir sıra ile uygulanmıştır. Ürün ciltle 15 dk boyunca temas ettirilmiş, ardından su ile nötralize edilmiştir. Klinik son nokta; tolerans düzeyinde karıncalanma veya sıcaklık hissi olan, ancak aşırı yanma, ödem, vezikül veya yaygın frosting (beyazlama) görülmeyen hafif, homojen bir eritemdir. Temizleme işleminden sonra 15 dk boyunca yatıştırıcı ve nemlendirici bir maske uygulanmıştır.
Katılımcılara tahriş edici topikal ürünlerden, eksfolyasyondan, ciltle oynamaktan ve doğrudan güneş maruziyetinden kaçınmaları ve gündüzleri geniş spektrumlu güneş koruyucu kullanmaları talimatı verilmiştir. Bu 3 haftalık tedavi aşamasını 9 haftalık bir izlem süreci takip etmiştir. Kontrol tarafına ilk 3 hafta boyunca herhangi bir müdahale yapılmamıştır. Bu ilk bekleme süresinin ardından, kontrol tarafına aynı 3 haftalık bileşik asit peeling kürü uygulanmış ve ardından 6 haftalık bir izlem yapılmıştır. Her bir hemifas için beş seans hastanedeki eğitimli tıbbi personel tarafından uygulanırken, her bir hemifas için bir seans katılımcı tarafından araştırmacılar tarafından sağlanan standart talimatlar doğrultusunda evde gerçekleştirilmiştir. Katılımcıya ürün miktarı ve dağılımı, uygulama sırası ve tedavi alanı, reçete edilen maruziyet süresi ve temizleme prosedürü hakkında standart yazılı ve sözlü talimatlar verilmiştir. Çalışma tasarımının ve deneysel iş akışının şematik bir özeti Şekil 1'de sunulmuştur.
Hasta alımı
Klinik olarak orta şiddette acne vulgaris (AV) tanısı konmuş, 18–60 yaş arası otuz hasta çalışmaya dahil edildi. Uygun katılımcılar herhangi bir cinsiyetten olup, grade 2 (komedonlar, papüller ve püstüller dahil 31–50 lezyon) veya grade 3 (çok sayıda papül ve püstül, ara sıra büyük inflamatuar lezyonlar ve üçten az nodül dahil 51–100 lezyon) ile uyumlu orta şiddette AV tanı kriterlerini karşılamaktaydı. Fotosensitif cildi olan veya önceki 4 hafta içinde fotosensitize edici ilaçlar kullanmış olanlar; önceki ay içinde yoğun güneş maruziyeti öyküsü olan veya tedaviden sonraki 1 ay içinde önemli ölçüde güneş maruziyeti öngörülenler; tedavi bölgesinde skar, aktif enfeksiyon veya iyileşmeyen yaraları olanlar; tanı konulmuş bir immünodeficiency bozukluğu olanlar; şiddetli kardiyak, hepatik veya renal disfonksiyonu olanlar veya belgelenmiş bir psikiyatrik rahatsızlığı olanlar çalışma dışı bırakıldı. Uygun olan 30 katılımcının tamamı çalışmayı tamamladı ve final analizine dahil edildi.
Sonuç değerlendirmeleri
Objektif değerlendirmeler
Eritem ve porfirin analizi
Standartlaştırılmış çevresel koşullar altında (sabit sıcaklık, nem ve aydınlatma), başlangıç aşamasında ve her takip ziyaretinde bilateral alın, yanaklar, çene hattı ve etkilenen diğer bölgelerin görüntülerini yakalamak için bir yüz görüntüleme sistemi kullanılmıştır. Bu sistem, eritem yoğunluğunun ve porfirin seviyelerinin objektif olarak kantifikasyonuna olanak sağlamıştır.
Mikrobiyota örneklemesi ve immünohistokimya
Cilt mikrobiyom profillemesi, tedavi öncesinde ve 3. haftada tedavi edilen taraftan alınan mikrobiyal sürüntülerle gerçekleştirilmiştir. Mikrobiyal DNA, üretici protokolü takip edilerek belirtilen ekstraksiyon kiti ile sürüntülerdenle izole edilmiş ve ardından geri kazanılan DNA miktarı belirlenmiştir. Bakteriyel 16S rRNA bölgesi, 341F (5’-CCTACGGGNGGCWGCAG-3’) ve 805R (5’-GACTACHVGGGTATCTAATCC-3’) evrensel primerleri ile amplifiye edilmiştir. Amplifikasyon, 98 °C'de 30 saniye süren denatürasyon ile başlamış, ardından 98 °C'de 10 saniye, 54 °C'de 30 saniye ve 72 °C'de 45 saniye şeklinde 32 döngü uygulanmıştır. Son uzama aşaması 72 °C'de 10 dakika boyunca gerçekleştirilmiştir.
PCR amplikonları belirtilen boncuklar kullanılarak saflaştırıldı ve kütüphane değerlendirmesi öncesinde miktarları belirlendi. Ürün kalitesi bir bioanalyzer ve kantitatif PCR kiti kullanılarak değerlendirildi; ardından uygun amplikonlar sekanslama için havuzlandı. Demultipleks edilmiş ham okumalar, önce Cutadapt ile primer dizilerinin kaldırılmasıyla işlendi. Paired-end okumalar FLASH ile birleştirildi ve kalite puanı 20'den düşük, uzunluğu 100 bp'den kısa veya belirsiz bazların dizinin %5'inden fazlasını oluşturduğu okumaları dışlamak için fqtrim kullanıldı. Kalite filtrelemesinden geçen temiz tagler alt analizler için saklandı. Kimeralar Vsearch ile kaldırıldı ve kalan okumaları gürültüsüz hale getirmek ve amplikon dizi varyantları (ASV'ler) oluşturmak için DADA2 kullanıldı.
Tür anotasyonu, QIIME2'de feature-classifier eklentisi kullanılarak SILVA ve NT-16S veri tabanlarına karşı gerçekleştirildi. Alfa ve beta çeşitliliğinin hesaplanması için de QIIME2 kullanıldı. Bakteriyel kompozisyon, göreli bolluk profillerinden değerlendirildi. Cins düzeyindeki bolluk farklılıkları, P < 0.05 değeri anlamlı kabul edilerek Wilcoxon testi ile test edildi. Lineer diskriminant analiz etki boyutu, eşik değerler olarak LDA ≥3.0 ve P < 0.05 kullanılarak nsegata-lefse ile gerçekleştirildi.
Kaydedilen katılımcılar arasından, IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β ve TLR2 dahil olmak üzere enflamatuar mediyatörlerin immünohistokimyasal analizi için 10 hasta rastgele seçilmiştir. Cilt biyopsi örnekleri (2 mm), iyodofor ile dezenfeksiyon sonrası başlangıçta (0. hafta) ve 3. haftada aktif akne lezyonlarından toplanmıştır. Örnekler %4 paraformaldehit ile fikse edilmiş, parafine gömülmüş ve 4‑μm kalınlığında kesitler alınmıştır. Parafine gömülü kesitler (4 μm) deparafinize edilmiş ve yeniden hidrate edilmiştir. Antijen geri kazanımı, mikrodalga ısıtma ile EDTA tamponu (pH 9.0) kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Endojen peroksidaz %3 H2O2 ile söndürülmüş, ardından spesifik olmayan antikor bağlanmasını azaltmak için kesitler %3 keçi serumu ile işlenmiştir. Kesitler daha sonra 4 °C'de gece boyunca primer antikorlarla inkübe edilmiştir: IL-1α (1:400), IL-6 (1:400), IL-17A (1:400), TGF-β (1:400) ve TLR2 (1:300). Sonrasında kesitler, oda sıcaklığında 30 dakika boyunca bir Polymer-HRP sekonder antikor kiti ile inkübe edilmiş, ardından DAB kromojen saptaması ve hematoksilin karşıt boyaması yapılmıştır. Negatif kontroller, primer antikorlar yerine PBS ile inkübe edilmiştir. Görüntüler, dijital bir tarayıcı kullanılarak 400× büyütmede elde edilmiştir. Kesit başına beş alan rastgele seçilmiş ve skorlama, körleme yöntemiyle iki dermatolog tarafından gerçekleştirilmiştir.
Sübjektif değerlendirmeler
Araştırmacı küresel değerlendirmesi
Başlangıçta ve 12. haftada, tedaviye dair körleme uygulanmış bir dermatolog, tüm yüzdeki akne şiddetini Global Akne Derecelendirme Sistemi (GAGS) kullanarak değerlendirmiştir.
Hasta öz değerlendirmesi
Tedavi ve takip döneminin sonunda, katılımcılar algıladıkları klinik iyileşmeyi dört puanlı bir öz değerlendirme ölçeği kullanarak puanladılar. Puanlar şu şekilde tanımlanmıştır: 0, iyileşme yok veya kötüleşme; 1, hafif iyileşme; 2, orta derecede iyileşme ve 3, belirgin iyileşme.
Körleme sonuç değerlendirmesi
Değerlendirme yanlılığını azaltmak için, tedavi dağılımından habersiz bir dermatolog, başlangıç fotoğraflarını kullanarak klinik iyileşmeyi bağımsız olarak değerlendirdi.
Güvenlik izlemi
Tedavi güvenliğini değerlendirmek amacıyla her takip ziyaretinde advers olaylar değerlendirildi.
İstatistiksel analiz
Çalışma başlatılmadan önce, örneklem büyüklüğü, tüm yüz GAGS skorundaki başlangıçtan 12. haftaya kadar olan değişimi tespit etmek için tahmin edilmiştir. Örneklem büyüklüğü hesaplaması, bileşik asit peelingi üzerine yapılan bir pilot çalışmaya dayanarak; 0.60'lık standartlaştırılmış katılımcı içi etki büyüklüğü, 0.05'lik çift taraflı anlamlılık düzeyi ve %80 güç varsayıldığında, 24 değerlendirilebilir katılımcının gerekli olduğu belirlenmiştir. %20'lik bir yıpranma payı gözetilerek, hedef kayıt sayısı 30 katılımcı olarak belirlenmiştir.
İstatistiksel analizler, istatistiksel yazılım ve grafik çizim yazılımı kullanılarak gerçekleştirilmiştir (bakınız Malzemeler Tablosu). Sürekli veriler, dağılımlarına göre tanımlanmıştır. Yaklaşık olarak normal dağılım gösteren değişkenler ortalama ± standart sapma olarak raporlanırken, normal dağılım göstermeyen değişkenler, duruma göre medyan ile birlikte çeyrekler arası aralık veya aralık olarak özetlenmiştir. Kategorik veriler sayı ve yüzde olarak ifade edilmiştir.
Veri dağılımı Shapiro-Wilk testi ile değerlendirilmiş ve histogramlar ile Q-Q grafiklerinin görsel incelemesiyle desteklenmiştir. Örneklem boyutunun küçük olması ve bazı değişkenlerin normal dağılım göstermemesi nedeniyle, birincil analizler nonparametrik testler kullanılarak gerçekleştirilmiştir. GAGS skorları, kırmızı alan ve porfirin seviyeleri dahil olmak üzere birincil sonuçlar, eşleştirilmiş Wilcoxon işaretli sıralama testi ile analiz edilmiştir.
Birincil klinik sonuçlar için etki büyüklükleri ve %95 güven aralıkları hesaplandı. Eşleştirilmiş parametrik olmayan karşılaştırmalar için, etki büyüklüğü ölçüsü olarak eşleşmiş çiftler sıra-biseriyal korelasyonu kullanıldı. Sürekli veya sıralı değişkenler arasındaki ilişkileri değerlendirmek için Spearman sıra korelasyonu uygulandı. İstatistiki testler çift yönlüydü ve sonuçlar P < 0.05 değerinde anlamlı kabul edildi.
Mikrobiyom analizleri, aynı katılımcılardan toplanan tedavi sonrası örneklere uygulanmıştır. Alfa çeşitliliği, Shannon ve Simpson indeksleri kullanılarak değerlendirilmiştir. Bazal ve tedavi sonrası örnekler arasındaki alfa-çeşitlilik indekslerindeki değişiklikler, eşleştirilmiş Wilcoxon işaretli sıra testi kullanılarak analiz edilmiştir.
Bakteriyel topluluk kompozisyonu; filum, familya ve cins düzeylerindeki göreceli bollukla özetlenmiştir. Düşük bolluğa veya düşük yaygınlığa sahip taksonlar tanımlayıcı analizler için saklanmıştır. Bazal ve tedavi sonrası örnekler arasındaki spesifik taksonların göreceli bolluklarındaki farklar, eşleştirilmiş parametrik olmayan testler kullanılarak değerlendirilmiştir. Mikrobiyom analizleri için takson düzeyindeki testler keşifsel niteliktedir ve düzeltilmemiş P değerleri raporlanmıştır. Tüm testler çift yönlü olup, anlamlılık eşiği P < 0.05 olarak belirlenmiştir.
Sonuçlar
Başlangıç hasta özellikleri
Otuz hasta çalışmaya dahil edilmiş ve tüm çalışma prosedürlerini tamamlamıştır. Başlangıç demografik ve klinik özellikleri Tablo 1'de özetlenmiştir.
VISIA cilt analizi
Bileşik asit peeling uygulaması, her iki yüz yarısında da akne lezyonlarında gözle görülür iyileşme sağlamıştır. VISIA analizi, 12. hafta takibinde eritem ve porfirin seviyelerinde anlamlı azalmalar olduğunu doğrulamıştır. Kırmızı alan skoru, başlangıçtaki 32,34 ± 6,32 değerinden 12. haftada 18,34 ± 8,32 değerine düşerek kutanöz inflamasyonun azaldığını göstermiştir. Porfirin değerleri 34,24 ± 9,53'ten 17,34 ± 8,43'e gerilemiştir (P < 0,05). Eritemdeki temsili değişiklikler Şekil 2'de gösterilmektedir.
Klinik etkinlik sonuçları
12. haftada, tüm yüz GAGS skorları başlangıca kıyasla anlamlı derecede düşük bulunmuştur (P < 0.01; Şekil 3). Hasta öz değerlendirme sonuçları, hastaların %3,3'ünün iyileşmeyi hafif (skor 1), %83,3'ünün orta (skor 2) ve %13,3'ünün belirgin (skor 3) olarak değerlendirdiğini göstermiştir (Tablo 2). Kör araştırmacı değerlendirmesi ise neredeyse aynı sonuçları vermiştir: %83,3 orta düzeyde iyileşme ve %16,7 belirgin iyileşme. Post-enflamatuar hiperpigmentasyon, vezikül oluşumu, kabuklanma, pullanma, hipertrofik skar veya keloid oluşumu dahil olmak üzere herhangi bir advers olay gözlemlenmemiştir.
Cilt mikrobiyotası α-çeşitliliğindeki değişiklikler
Bileşik asit peelingi, Shannon ve Simpson indekslerinde anlamlı bir azalma ile ilişkilendirilmiştir (P < 0.05; Şekil 4), bu durum işlem sonrası örnek içi mikrobiyal çeşitliliğin azaldığını göstermektedir.
Cilt mikrobiyota yapısının modülasyonu
16S rRNA geni sekanslaması, AV'li hastalardaki cilt mikrobiyotasının temel olarak beş ana filumdan oluştuğunu göstermiştir: Proteobacteria, Actinobacteria, Firmicutes, Bacteroidetes ve Cyanobacteria (Şekil 5A). Proteobacteria'nın göreceli bolluğu, tedavi sonrası anlamlı bir artış eğilimi göstermiştir (P < 0.05).
Aile düzeyinde, baskın taksonlar arasında Burkholderiaceae, Staphylococcaceae, Corynebacteriaceae ve Neisseriaceae yer almıştır (Şekil 5B). Cutibacterium (eskiden Propionibacterium) ve Staphylococcus cinslerinin göreli bollukları tedavi sonrası anlamlı derecede azalmıştır (P < 0.05). En bol bulunan ilk 30 cins için yapılan Spearman korelasyon analizi Şekil 6'da gösterilmektedir.
İnflamatuar marker ekspresyonu
İmmünohistokimyasal boyama, tedavi edilen cilt lezyonlarında IL‑1α, IL‑6, IL‑17, TGF‑β ve TLR2 boyanmasının başlangıca kıyasla daha düşük olduğunu göstermiştir (Şekil 7).
Bileşik asit peelingi, gözlem süreci boyunca orta dereceli akne vulgaris için etkili ve iyi tolere edilen bir müdahale olmuştur. Klinik iyileşmeye, cilt mikrobiyomundaki değişiklikler ve inflamatuar belirteç boyanmasındaki azalma eşlik etmiştir. Rutin klinik kullanım için terapötik protokolleri geliştirmek amacıyla, peeling sonrası mikrobiyal modülasyon ile immün düzenleme arasındaki kesin moleküler etkileşimi açıklığa kavuşturmak için daha fazla araştırma yapılması gereklidir.
Veri Erişilebilirliği:
Mevcut çalışma sırasında oluşturulan ve/veya analiz edilen veri setleri, katılımcı gizliliği ve etik kısıtlamalar nedeniyle kamuya açık değildir; ancak makul bir talep üzerine sorumlu yazardan temin edilebilir.
Şekil 1Çalışma tasarımının ve deneysel iş akışının şematik genel görünümü. Kısaltmalar: GAGS = Global Akne Derecelendirme Sistemi; IHC = immünohistokimya. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2Sol ve sağ hemifasların eritem değerlendirmesi. (A) Baz hattı ve (B25 yaşındaki kadın hastada 12. hafta. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3Başlangıç ve 12. haftadaki tüm yüz GAGS skorları (n = 30). Gruplar, eşleşmiş Wilcoxon işaretli sıra testi kullanılarak karşılaştırılmıştır; ***P < 0.01. Kısaltma: GAGS = Global Akne Derecelendirme Sistemi. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 4Tedavi öncesi ve sonrası çeşitlilik indeksleri. (A) Shannon ve (B) Simpson çeşitlilik indeksleri (n = 30). Veriler medyan olarak sunulmuştur ve hata çubuklarıle çeyrekler arası aralıkları (IQR) temsil etmektedir. Gruplar, eşleştirilmiş Wilcoxon işaretli sıra testi kullanılarak karşılaştırılmıştır; P = 0,021. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 5Tedavi öncesi ve sonrası bakterilerin bağıl bolluğu (n = 30). (A) Bakteriyel filumlar ve (B) tedavi öncesi ve sonrası aileler. Göreceli bolluktaki farklar, eşleştirilmiş Wilcoxon işaretli sıra testi kullanılarak değerlendirilmiştir. Proteobacteria'nın göreceli bolluğu tedavi sonrası anlamlı şekilde artmıştır (P = 0,024). Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 6En bol bulunan 30 cins için Spearman korelasyon ısı haritası. Renk ölçeği -1 ile 1 arasında değişmektedir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 7Temsili immünohistokimyasal boyama (A) Bazal ve (B10 hastadan oluşan biyopsi alt grubunda tedaviden sonraki 3. hafta. Satırlar IL-6, IL-17, TGF-β, TLR2 ve IL-1α'yı göstermektedir. Ölçek çubukları = 100 µmKısaltmalar: IL = interlökin; TGF-β = transforme eden büyüme faktörü-β; TLR2 = toll benzeri reseptör 2. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
| Parametre | Ortalama ± SD (medyan; aralık) veya n (%) |
| Yaş (yıl) | 23.77 ± 6.50 (18–42) |
| Cinsiyet | |
| Dişi | 18 (62%) |
| Erkek | 12 (38%) |
| Fitzpatrick cilt tipi | |
| III | 22 (73%) |
| IV (İntravenöz) | 8 (27%) |
| Hastalık süresi (ay) | 29.80 ± 9.56 |
Tablo 1: Akne vulgaris hastalarının başlangıç özellikleri. Değerler ortalama ± SS (aralık) veya n (%) olarak gösterilmiştir. Kısaltmalar: n = katılımcı sayısı; SS = standart sapma.
| Ölçüm yapın | 0 (iyileşme yok veya daha kötü) | 1 (hafif iyileşme) | 2 (orta düzeyde iyileşme) | 3 (belirgin iyileşme) | Ortalama ± SS |
| Hastalar (n) | 0 | 1 | 25 | 4 | 2.10 ± 0.40 |
Tablo 2: Hasta öz değerlendirme puanları. Kısaltmalar: n = katılımcı sayısı; SD = standart sapma.
Tartışma
Bulgularımız, orta şiddetli AV yönetiminde bileşik asit peeling tedavisinin terapötik etkilerine dair yeni bakış açıları sunmaktadır. Tedavi sonrası hastalarda GAGS skorlarında belirgin bir iyileşme görülmüştür. VISIA skorlarında, özellikle kırmızı alan ve porfirin açısından da iyileşmeler kaydedilmiştir. Ayrıca, tedavi sonrası cilt dokusunda IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β ve toll-like receptor 2 dahil olmak üzere temel enflamatuar belirteçlerin ekspresyon seviyeleri azalmıştır. Dahası, cilt mikrobiyomunun hem zenginliğinde hem de düzgünlüğünde bir düşüş yaşanmış ve buna Staphylococcus oranında anlamlı bir azalma eşlik etmiştir. Özellikle, çalışma boyunca herhangi bir yan etki gözlemlenmemiştir. Bu iyileşmeler, bileşik asit peeling tedavisinin sadece görünür akne lezyonlarını etkili bir şekilde azalttığını, aynı zamanda akneye sıklıkla eşlik eden alttaki enflamasyonu da giderdiğini göstermektedir.
Kutanöz mikrobiyota, akne gelişiminde kritik bir rol oynar ve bu mikrobiyal topluluktaki dengesizlik akneyi şiddetlendirebilir. Önceki çalışmalar, akneye meyilli ciltte sıklıkla C. acnes aşırı büyümesi ve faydalı bakterilerde azalma olduğunu göstermiştir. Bu mikrobiyal dengesizlik, enflamasyona ve sebum üretimine katkıda bulunarak akne progresyonunu daha da hızlandırır. Mevcut literatür, akneden etkilenmiş ciltte Proteobacteria artışına ve bunun akne gelişimiyle olan potansiyel ilişkisine dikkat çekmektedir. Proteobacteria, enflamatuar yolakları tetikleme yetenekleri nedeniyle cilt durumlarıyla ilişkilendirilmektedir ve böylece akneyi şiddetlendirmektedir12,13. Bu bakteri grubundaki bir artış, cilt mikrobiyotasındaki bir değişimi yansıtabilir ve bu durum potansiyel olarak akne ile ilişkili bakterileri hedefleyen tedavi kaynaklı değişikliklere veya akne lezyonlarının azalmasını takiben cilt ortamındaki değişimlere bağlı olabilir.
Ayrıca, tedavi sonrası Shannon ve Simpson indekslerindeki azalma, bileşik asit peelinginin cildin mikrobiyal karmaşıklığını etkili bir şekilde sadeleştirebileceğini göstermektedir. Daha stabil bir mikrobiyal ortama doğru gerçekleşen bu kayma, tedavinin terapötik başarısına katkıda bulunabilir. Belirli bakteri filalarının gözlemlenen baskınlığı, akne tedavisinin mikrobiyal modülasyonla birlikte seyredebileceği görüşünü daha da desteklemektedir14. Proteobacteria artışı, önceki çalışmalarla uyumlu olarak, tedavi etkilerine bağlı mikrobiyal topluluk yapısındaki bir değişimi yansıtıyor olabilir15,16. Bu filum, bazıları cilt durumlarıyla ilişkili olduğu bilinen çeşitli bakterileri içerir. Bu gruptaki bir artış, tedaviye verilen bir yanıtı gösterebilir veya akne lezyonlarının azalmasının ardından cilt ortamında meydana gelen değişikliklerle ilgili olabilir17.
İnflamasyon, akne patogenezinde merkezi bir rol oynar. Cutibacterium acnes (eskiden Propionibacterium acnes) kıl foliküllerinde aşırı çoğaldığında, IL-1α, IL-6 ve IL-17 gibi pro-inflamatuar sitokinlerin salınımıyla sonuçlanan bir immün yanıtı tetikler7,18. Bu inflamasyon; papüller, püstüller ve kistler gibi akne lezyonlarının oluşumuna katkıda bulunur. Kronik inflamasyon ayrıca skar oluşumuna ve cilt hasarına yol açabilir, bu da onu akne tedavisinde temel bir hedef haline getirir. TGF-β çeşitli cilt onarım süreçlerinde yer alırken19, TLR-2 cilt patojenlerine karşı verilen immün yanıtla ilişkilidir20. Analiz, tedavi sonrası bu inflamatuar faktörlerin boyama yoğunluğunun anlamlı derecede daha düşük olduğunu göstermiş ve bu durum ekspresyon seviyelerindeki bir azalmaya işaret etmiştir21. Bu anti-inflamatuar etki, cildin iyileşme yanıtını artırabilir ve bileşik asit peelinginin terapötik faydalarını sağladığı temel bir mekanizma olabilir22,23.
Akne vulgaris'in patogenezi, C. acnes ile konakçı bağışıklık yanıtları arasındaki düzensiz etkileşimlerle yakından bağlantılıdır. Özellikle, C. acnes'in virülan suşları, keratinositlerde ve sebositlerde TLR-2/4 sinyal yolunu aktive ederek inflamasyonun temel mikrobiyal tetikleyicileri olarak görev yapar24,25; bu durum, yükselmiş IL-1α, IL-6, IL-17 ve TGF-β ile karakterize pro-inflamatuar kaskadları tetikler. Bu mekanizma ile uyumlu olarak, sonuçlarımız kombine kimyasal peeling tedavisi sonrası C. acnes bolluğunda anlamlı bir azalma olduğunu ortaya koymuştur. Önemli bir nokta olarak, bu mikrobiyal değişime, lezyon çevresi deri biyopsilerinde TLR-2 ve onunla ilişkili sitokinlerin (IL-1α, IL-6, IL-17, TGF-β) doku ekspresyonundaki azalma eşlik etmiştir; bu durum, kombine kimyasal peelingin terapötik etkinliğinin kısmen C. acnes aracılı TLR-2/4 hiperaktivasyonunun baskılanmasına bağlanabileceğini düşündürmektedir. Bu bulgular, tedavi sonrası mikrobiyal ve inflamatuar değişikliklerin paralel olarak gerçekleştiğini göstermektedir; nedensel ilişkiler daha ileri çalışmayı gerektirmektedir.
Düşük GAGS skoru, hastalarda akne şiddetinin azaldığını gösterir. Bu sonuçlar, tedavinin AV yönetimindeki etkinliğini desteklemekte ve hastalar tarafından iyi karşılandığını göstermektedir. Öz değerlendirme ile klinik değerlendirme arasındaki uyum, ölçümün gelecek çalışmalar için geçerli ve güvenilir olduğunu gösterebilir.
Bileşik asit peeling tedavilerinin mekanizmasına gelince, bu tedaviler akne yönetimine çok yönlü bir yaklaşım sunar. Aktif bileşenleri arasında α-hidroksi asit, salisilik asit ve azelaik asit bulunan bileşik asit formülasyonları, birden fazla patojenik faktörü hedefleyerek tamamlayıcı anti-akne etkiler gösterebilir. α-hidroksi asit, epidermal eksfoliasyonu teşvik edebilir, korneosit adezyonunu azaltabilir ve anormal foliküler keratinizasyonu iyileştirebilir, böylece foliküler obstrüksiyonun ve komedon oluşumunun giderilmesine yardımcı olabilir24. Salisilik asit, foliküler birime girebilen ve keratolitik, komedolitik ve anti-inflamatuar etkiler gösteren lipofilik bir beta-hidroksi asittir. Azelaik asit ise keratinizasyon, mikrobiyal büyüme ve kutanöz inflamasyon üzerindeki etkileriyle sürece daha fazla katkıda bulunabilir. AV'de, anormal keratinosit deskuamasyonu foliküler obstrüksiyona yol açarak komedon ve inflamatuar lezyon oluşumuna elverişli bir ortam yaratır. Bileşik asit tedavileri, eksfoliasyonu teşvik ederek ve aşırı sebum üretimini azaltarak bu tıkanıklıkların hafifletilmesine yardımcı olabilir. Ek olarak, bu asitlerin anti-inflamatuar özellikleri, TLR2 ve TGF-β'yi içerenler de dahil olmak üzere sitokin ekspresyonunu azaltır ve inflamatuar yolakları inhibe eder25. Bu durum, inflamasyonun azalması ve cilt görünümünün iyileşmesiyle sonuçlanır. Ayrıca, bileşik asit epidermal hücre döngüsünü teşvik ederek ölü cilt hücrelerinin temizlenmesine ve cilt dokusunun yenilenmesine yardımcı olur. Bu süreç, cildin genel dokusunu ve pürüzsüzlüğünü iyileştirerek akne lezyonlarının yaygın bir sonucu olan post-inflamatuar hiperpigmentasyonun azaltılmasına yardımcı olur. Tedavinin ayrıca C. acnes aşırı büyümesini azaltarak mikrobiyal dengeyi yeniden tesis etmeye, mikrobiyal disbiyozu ve bunun inflamatuar etkilerini gidermeye yardımcı olduğu görülmektedir.
Bununla birlikte, bu çalışmanın küçük örneklem büyüklüğü, kısa takip süresi ve bulgular üzerindeki olası "zaman etkisi" dahil olmak üzere bazı kısıtlamaları vardır. İlk 3 hafta boyunca tedavi almayan kontrol grubu, zamanla doğal bir iyileşme yaşamış olabilir ve bu durum sonuçları potansiyel olarak etkilemiş olabilir. Çaprazlama öncesinde yüzün yarısına özgü klinik şiddet verileri kaydedilmemiştir; bu nedenle, tüm yüz GAGS sonuçları, doğrudan tedavi edilen yüz yarısı ile kontrol yüz yarısının karşılaştırması olarak yorumlanamaz. Bu tedavinin uzun vadeli etkinliğini ve güvenliğini onaylamak için, daha uzun takip sürelerine ve daha kapsamlı kontrol gruplarına sahip ileri araştırmalar gereklidir.
Açıklamalar
Yazarların beyan edilecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.
Teşekkürler
Bu araştırma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No. 82573987) tarafından desteklenmiştir.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Agilent 2100 Bioanalyzer | Agilent, ABD | ||
| AMPure XP boncukları | Beckman Coulter Genomics, Danvers, MA, ABD | ||
| Biyopsi punchu | 2 mm | ||
| Bileşik asit peelingi | XIMEIEN | A363 | %4 alfa-hidroksi asit, %2 salisilik asit ve %1,5 azelaik asit; toplam nominal aktif asit konsantrasyonu yaklaşık %7,5; pH: 3,6, 12 g |
| cutadapt (v1.9) | sekanslama primerlerinin uzaklaştırılması | ||
| DADA2 | gürültü giderme ve amplikon sekans varyantlarının oluşturulması | ||
| DNA temizleme boncukları | Vazyme | VAHTS DNA Clean Beads; PCR ürünlerini saflaştırmak için kullanılır | |
| DNA ekstraksiyon kiti | TIANGEN | DP302-02 | Cilt dokusu için DNA kiti |
| DNA miktar tayini analiz kiti | Invitrogen | Quant-iT PicoGreen dsDNA Analiz Kiti | |
| Yüz görüntüleme sistemi | VISIA sistemi; model/versiyon belirtilmemiştir | ||
| FLASH (v1.2.8) | eşleşmiş uç okumaların birleştirilmesi | ||
| fqtrim (v0.94) | içeren okumaların kırpılması >%5 N kayıtları | ||
| Illumina kütüphane kantitasyon kitleri | Kapa Biosciences, Woburn, MA, ABD | ||
| İmmünohistokimya antikorları | Proteintech; Youpin Biology | 66148-1-Ig; YP-Ab-01185; YP-Ab-04780; YP-Ab-16022; YP-Ab-01522; YP-Ab-15931 | Sağlanan tanımlamalar: IL-17A monoklonal antikoru; TLR2 poliklonal antikoru; TGF-β fare monoklonal antikoru (1F12); IL-6 poliklonal antikoru; IL-1α poliklonal antikor |
| İyodofor | Lierkang, Shandong, Çin | Biyopsi bölgelerini dezenfekte etmek için kullanılır | |
| KF-PRO-120 dijital tarayıcı | Jiangfeng Bio | ||
| Işık mikroskobu | İmmünohistokimyasal kesitleri incelemek için kullanılır | ||
| nsegata-lefse | LDA etki büyüklüğü | ||
| NT-16S | hizalama veri tabanı | ||
| Çift uçlu sekanslama platformu | Illumina (LC-Bio Technology Co., Ltd., Hangzhou, Çin) | NovaSeq 6000 SP Reaktif Kiti | Eş uçlu 250-bp sekileme |
| Parafin | Biyopsi örneklerini gömmek için kullanılır | ||
| Paraformaldehit | Biyopsi örneklerini sabitlemek için kullanılan %4'lük çözelti | ||
| PCR primerleri 338F ve 806R | 338F: 5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3′; 806R: 5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′ | ||
| Peel sonrası maske | XIMEIEN | C85Y | Yatıştırıcı ve nemlendirici maske; 28 mL × 6 adet |
| QIIME2 | tür anotasyonunun sekans hizalaması | ||
| Qubit | Invitrogen, ABD | DNA kantifikasyonu | |
| Sekanslama reaktif kiti | Illumina | NovaSeq 6000 SP Reaktif Kiti | Çift uçlu dizileme için kullanılır |
| SİLVA | hizalama veri tabanı | ||
| Yazılım, grafik çizimi | Origin Software Inc. | Origin 2021 | Grafik çizim yazılımı |
| Yazılım, istatistiksel | IBM | SPSS 27.0 | İstatistiksel analiz yazılımı |
| Vsearch yazılımı (v2.3.4) | kimerik dizilerin filtrelenmesi |
Kaynaklar
- Machiwala AN, Kamath G, Vaidya TP. Knowledge, belief, and perception among youths with acne vulgaris. Indian J Dermatol. 2019;64(5):389-91.
- Tayel K, Attia M, Agamia N, Fadl N. Acne vulgaris: prevalence, severity, and impact on quality of life and self-esteem among Egyptian adolescents. J Egypt Public Health Assoc. 2020;95(1):30.
- Cong TX, et al. From pathogenesis of acne vulgaris to anti-acne agents. Arch Dermatol Res. 2019;311(5):337-49.
- Erdei L, et al. TNIP1 regulates Cutibacterium acnes-induced innate immune functions in epidermal keratinocytes. Front Immunol. 2018;9:2155.
- Grech I. Susceptibility profiles of Propionibacterium acnes isolated from patients with acne vulgaris. J Glob Antimicrob Resist. 2014;2(1):35-8.
- Podwojniak A, et al. Acne and the cutaneous microbiome: a systematic review of mechanisms and implications for treatments. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2025;39(4):793-805.
- Argenziano G, et al. Review: expert opinion on antibiotics and antibiotic resistance in dermatology. Dermatol Pract Concept. 2024;14(4):e2024282.
- Li Y, et al. Acne treatment: research progress and new perspectives. Front Med (Lausanne). 2024;11:1425675.
- Măgerușan ȘE, Hancu G, Rusu A. A comprehensive bibliographic review concerning the efficacy of organic acids for chemical peels treating acne vulgaris. Molecules. 2023;28(20):7219.
- Calvisi L. Efficacy of a combined chemical peel and topical salicylic acid-based gel combination in the treatment of active acne. J Cosmet Dermatol. 2021;20 Suppl 2:2-6.
- Shao X, et al. Effect of 30% supramolecular salicylic acid peel on skin microbiota and inflammation in patients with moderate-to-severe acne vulgaris. Dermatol Ther (Heidelb). 2023;13(1):155-68.
- Kistowska M, et al. Propionibacterium acnes promotes Th17 and Th17/Th1 responses in acne patients. J Invest Dermatol. 2015;135(1):110-8.
- Jahns AC, et al. An increased incidence of Propionibacterium acnes biofilms in acne vulgaris: a case-control study. Br J Dermatol. 2012;167(1):50-8.
- Thompson KG, et al. Comparison of the skin microbiota in acne and rosacea. Exp Dermatol. 2021;30(10):1375-80.
- Li CX, et al. Skin microbiome differences relate to the grade of acne vulgaris. J Dermatol. 2019;46(9):787-90.
- Guo Z, et al. New insights into the characteristic skin microorganisms in different grades of acne and different acne sites. Front Microbiol. 2023;14:1167923.
- Boyanova L. Cutibacterium acnes, formerly Propionibacterium acnes: friend or foe? Future Microbiol. 2023;18:235-44.
- ElAttar Y, et al. Study of interleukin-1 beta expression in acne vulgaris and acne scars. J Cosmet Dermatol. 2022;21(10):4864-70.
- Tan JKL, Stein Gold LF, Alexis AF, Harper JC. Current concepts in acne pathogenesis: pathways to inflammation. Semin Cutan Med Surg. 2018;37(3S):S60-2.
- Rodighiero E, et al. Do acne treatments affect insulin-like growth factor-1 serum levels? A clinical and laboratory study on patients with acne vulgaris. Dermatol Ther. 2020;33(3):e13439.
- Huang L, et al. Association of different cell types and inflammation in early acne vulgaris. Front Immunol. 2024;15:1275269.
- Platsidaki E, Dessinioti C. Recent advances in understanding Propionibacterium acnes (Cutibacterium acnes) in acne. F1000Res. 2018;7:1953.
- Esen M. Effect of isotretinoin treatment on inflammatory and hematological parameters in patients with acne vulgaris. Cutan Ocul Toxicol. 2024;43(1):27-32.
- Handog EB, Datuin MS, Singzon IA. Chemical peels for acne and acne scars in Asians: evidence-based review. J Cutan Aesthet Surg. 2012;5(4):239-46.
- Lekakh O, et al. Treatment of acne vulgaris with salicylic acid chemical peel and pulsed dye laser: a split-face, rater-blinded, randomized controlled trial. J Lasers Med Sci. 2015;6(4):167-70.