MIR30C rs928508 Polimorfizmi ile Epidural Doğum Analjezi Sonuçları Primipar Kadınlarda Sonuçlar: Gözlemsel Bir Çalışma

Özet

Bu gözlemsel çalışma, vajinal doğum yapan primipar kadınlarda MIR30C rs928508 polimorfizmi ile epidural doğum analjezi sonuçları, ağrı puanları, doğum süresi ve yan reaksiyonlar arasındaki ilişkiyi araştırmıştır.

Özet

Genetik polimorfizmler, doğum ağrısı algısı ve analjezik etkinliğindeki bireysel değişkenliği etkileyebilir. MicroRNA-30c (MIR30C) ağrı modülasyonunda rol oynar, ancak doğum analjezi ile ilişkisi belirsizdir. Bu çalışma, primipar kadınlarda MIR30C rs928508 polimorfizması ile epidural doğum analjezi arasındaki ilişkiyi araştırmıştır. Toplam 202 sağlıklı Çinli Han primiparous kadın, ropivakain ve sufentanil ile standartlaştırılmış epidural analjezi aldırmıştır. rs928508 genotipleri (GG, GA ve AA) TaqMan testleriyle tespit edildi ve popülasyon genetik dağılımını değerlendirmek için Hardy–Weinberg denge analizi yapıldı. Ağrı yoğunluğu, analjeziden önce başlangıçta, analjeziden 30 dakika, 1 saat sonra ve analjezi durdurulduktan sonra Görsel Analog Ölçeği (VAS) kullanılarak değerlendirildi. Doğum analjezi sonuçlarını etkileyen faktörler, çok değişkenli regresyon analiziyle değerlendirildi. GG genotipini taşıyanlar, GA ve AA taşıyıcılarına kıyasla analjeziden önce, analjeziden 30 dakika sonra ve analjezi bıraktıktan sonra VAS puanları ve birinci evre doğum süresi uzadı. Çok değişkenli regresyon analizi, GG genotipini daha yüksek analjezi sonrası VAS puanlarıyla ilişkili bağımsız bir faktör olarak tanımladı. Neonatal sonuçlar ve çoğu yan reaksiyon genotipler arasında karşılaştırılabilirdi, ancak GG taşıyıcılarında ponksiyon bölgesi ağrısı daha yüksek görülürdü. MIR30C rs928508 G alleli, primipar kadınlarda başlangıç ağrısının artması, epidural doğum analjezi etkinliğinin potansiyel olarak azalması ve birinci evre doğum süresinin uzaymasıyla ilişkilendirildi. Bu bulgular, MIR30C genetik varyasyonunun doğum analjezisinde potansiyel farmakogenomik önemi üzerine daha fazla araştırmayı destekler.

Giriş

Doğum ağrısı, insan ağrısının en yoğun türlerinden biri olarak kabul edilir ve sadece doğumlu kadınlarda şiddetli fizyolojik strese yol açmakla kalmaz, aynı zamanda nöroendokrin mekanizmalar aracılığıyla anne ve yenidoğan sonuçlarını da olumsuz etkileyebilir. Bu, anormal rahim kasılmaları, fetal sıkıntı ve doğum sonrası depresyon gibi^{komplikasyonlara yol açabilir 1,2}. Doğum analjezisi, anne ağrı ve stres tepkilerini etkili bir şekilde hafifletir, doğum deneyimini iyileştirir ve uygun şekilde uygulandığında hem anne hem de bebek için olumlu bir güvenlik profili^{gösterir 3}. Klinik uygulamada doğum analjezi için tercih edilen yöntem olan epidural analjezi, Görsel Analog Ölçeği (VAS) ağrı puanlarını etkili bir şekilde azalttığı gösterilmiştir. Ayrıca, kombinasyon ilaç rejimlerinin araştırılması, analjezik etkinliği artırırken yan etkileri^{azaltmıştır 4}.

Önemli kanıtlar, genetik polimorfizmlerin ana genetik varyasyon biçimi olarak doğum analjezisinin sonuçlarını etkileyebileceğini göstermektedir. Bir çalışma, μ-opioid reseptör geni (OPRM1) polimorfizmasının G allelini taşıyan doğumlu kişilerin RS1799971 doğum analjezi için AA genotipine sahip bireylere kıyasla belirgin şekilde daha yüksek opioid dozları gerektirdiğini ve daha düşük analjezik tatmin bildirdiğini gösterdi. Bu lokustaki mutasyonlar, reseptör membran ifadesini azaltabilir ve böylece opioid analjezik etkinliği^azaldır. Ayrıca, katekol-O-metiltransferaz (COMT) genindeki polimorfizmler, dopamin metabolizmasını modüle ederek merkezi ağrı hassasiyetinin derecesini etkileyebilir ve doğum sırasında anne ağrı eşiğini ve analjezik ilaçlara yanıt vermeyi^{değiştirebilir 6}. Sitokrom P450 3A4 (CYP3A4) genindeki polimorfizmlerin de ilaç metabolik^{hızlarını etkileyerek analjezik sonuçları modüle ettiği bildirilmiştir 7,8}. Ayrıca, Zhang ve ark. MDR1 1236C>T TT genotipine sahip hastaların sezaryen sonrası CC veya BT^{genotipi 9'a} sahip hastalara göre anlamlı derecede daha fazla fentanil gerektirdiğini bildirdi. Bu bulgular birlikte, ağrı algısındaki bireylerarası değişkenliğin genetik temelini kavrayarak¹⁰.

Epigenetik araştırmalardaki ilerlemelerle, kodlamayan RNA gen polimorfizmlerinin ağrı modülasyonundaki rolü giderek daha fazla kabul edilmektedir. MikroRNA'lar (miRNA'lar), ana epigenetik düzenleyiciler olarak, translasyonel baskılama veya bozulma için haberci RNA'yı (mRNA) hedef alarak gen ifadesini modüle eder; böylece ağrı sinyalinin iletiminde ve ağrı duyarlılığının gelişiminde kritik rol^oynarlar. Birçok çalışma, miRNA'ların nöropatik ağrı, inflamatuar ağrı ve diğer ağrı koşullarında farklı şekilde eksprese edildiğini ve çoklu sinyal yollarının düzenlenmesiyle merkezi ağrı duyarlılığına katıldığını^{göstermiştir 12,13}. miRNA'lardaki polimorfizmler, hedef genlere ekspresyon seviyelerini veya bağlanma verimliliğini etkileyebilir, böylece ağrıyla ilişkili sinyal zincirlerini^{modüle edebilir 14}. Önceki araştırmalar, miRNA polimorfizmlerini meme kanserinde karmaşık bölgesel ağrı sendromunun (CRPS) fenotipik heterojenliği ve patolojik ağrı ile^{ilişkilendirmiştir 15,16}. Birçok ağrı ile ilgili miRNA arasında, miR-30 ailesi, nöropatik ağrı düzenlemesindeki rolü nedeniyle giderek daha fazla ilgi^{görmüştür (17,18}). Özellikle, miR-30c-5p'nin düzenleyici rolü kapsamlı şekilde incelenmiştir. Hayvan çalışmaları, siyatik sinir hasarı sonrası ağrıya bağlı sinir yapılarında miR-30c-5p ekspresyonunun belirgin şekilde artırıldığını, sentetik inhibitörün uygulanmasının ise sıçanlarda nöropatik ağrı aşırı duyarlılığını sürekli tersine çevirdiğini gösterdi. Daha fazla mekanik çalışmalar, miR-30c-5p'nin DNA metiltransferaz 3a (DNMT3a) ve DNMT3b'nin haberci RNA'larını hedef aldığını, epigenetik düzenleme yoluyla sinir hücrelerindeki DNA metilasyon seviyelerini etkilediğini ve ağrının uzun vadeli korunmasına katkıda bulunduğunu^{ortaya koymuştur.} Klinik çalışmalar ayrıca miR-30c-5p seviyeleri ile nöropatik ağrı yoğunluğu arasında bir korelasyon göstermiştir^{; hastalarda 20,21}. Özellikle, son araştırmalar miR-30c rs928508'deki G allelinin iş yerinde zorbalığa maruz kalan bireylerde ağrı riskini^{artırdığını göstermiştir 22}. Başka bir çalışmada ise G allelinin, birincil miR-30c'nin (pri-miR-30c) olgun miR-30c'ye işlenmesini etkileyerek miR-30c ifadesini azalttığını göstermiştir. Ancak, miR-30c polimorfizmalarının doğum ağrısı hassasiyetini veya epidural doğum analjezi sonuçlarını etkileyip etkilemediği belirsizdir.

Doğum analjezi teknikleri sürekli optimize edilmiş olsa da, miRNA'ların ağrı modülasyonundaki düzenleyici mekanizmaları giderek daha belirgin hale gelmiştir. Ayrıca, miR-30c-5p nöropatik ağrıda önemli bir düzenleyici faktör olarak tanımlanmış ve polimorfizmleri ağrıya bağlı fenotiplerle ilişkilendirilmiştir. Ancak, miR-30c polimorfizmalarının doğum analjezisinin düzenlenmesinde rol açıp tutmadığı henüz açıklanmamıştır. Bu nedenle, bu çalışma, epidural analjezi alan primipar kadınlarda doğum analjezi sonuçlarıyla ilişkisini incelemek amacıyla MIR30C rs928508 polimorfizmine odaklanmıştır. Bulgular, genetik varyasyonun bireysel doğum analjezi stratejilerinde potansiyel rolü üzerine gelecekteki araştırmalar için teorik destek sağlayabilir.

Protokol

Bu çalışma, Shijiazhuang Altıncı Hastanesi Tıbbi Etik Komitesi'nin etik standartlarına uygun olarak yapılmış ve komite tarafından onay tanımlayıcı No. 2022111709 altında onaylanmıştır. Kayıttan önce tüm katılımcılardan yazılı bilgilendirilmiş onay alındı. Çalışma tasarımı ve deneysel iş akışının şematik bir genel özeti Şekil 1'de sunulmaktadır.

Şekil 1. Çalışma tasarımının iş akışı şemaları ve temel bulgular. Şekil, primipar kadınlarda MIR30C rs928508 polimorfizmi ile epidural doğum analjezi sonuçları arasındaki ilişkiyi inceleyen çalışmanın genel iş akışını özetlemektedir. İş akışı katılımcı alımı, MIR30C rs928508 genotipleme, genotip tabanlı tabakalama, standart epidural doğum analjezisinin uygulanması, sonuç değerlendirmesi ve istatistiksel analizleri içerir. Değerlendirilen sonuçlar arasında Görsel Analog Ölçeği (VAS) ağrı puanları, doğum aşaması süresi, yenidoğan sonuçları ve analjezi ile ilişkili advers reaksiyonlar yer aldı. Şematik ayrıca daha yüksek ağrı puanları, uzun süren ilk evre doğum ve GG genotipini taşıyanlar arasında delin bölgesi ağrısı sıklığının artması gibi temel bulguları da vurgulamaktadır. VAS, Görsel Analog Ölçek; SNP, tek nükleotid polimorfizması. Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.

Klinik Veriler
Shijiazhuang Altıncı Hastanesi'nde, Ocak 2022 ile Ocak 2025 arasında doğum yapan boş kadınlar, hastanenin elektronik tıbbi kayıt sistemi üzerinden ardışık olarak çalışma denekleri olarak kaydedildi ve toplamda 202 vaka dahil edildi. Gebeliğin 28 ile 36. haftaları arasındaki antenatal ziyaretlerde, uygun sıfır ipare kadınlar çalışmaya dahil edildi ve yazılı önceden bilgilendirilmiş onay verildi. Analize nihayetinde dahil edilen hastalar, gebeliğin 37–41. haftalarında doğum, tek hamilelik olan ve cephalik prezentasyonu olan hastalardı.

Dahil etme kriterleri şu şekildeydi: 1) 20–35 yaş arası sağlıklı primipar kadınlar; 2) Çinli Han etnik kökeni; 3) gebelik yaşı 37 ile 41 hafta arasında olan tek kişilik gebelik; 4) epidural analjezi için belirtiklerle planlanmış spontan veya yardımlı vajinal doğum. Epidural analjezi için göstergeler şunlardı: (a) imzalı bilgilendirilmiş onayla anne talebi; (b) aktif doğum (servikal genişleme ≥2 cm ve düzenli rahim kasılmaları); ve (c) vajinal doğum için uygunluğu doğrulayan kadın doğum değerlendirmesi.

Dışlama kriterleri şunları içeriyordu: 1) gebelik hipertansiyonu, diyabet veya şiddetli kardiyovasküler hastalık gibi gebelikle birlikte görülen hastalıklar; 2) çoklu gebelik; 3) doğum analjezisinin başlanmasından sonra sezaryen bölümüne dönüşüm; 4) omurgadaki yapısal anormallikler; ve 5) doğum analjezisine karşı endikasyonlar. Doğum analjezisine karşı kontrendikasyonlar şunları içeriyordu: (a) annenin işbirliği reddi veya çalışamaması; (b) delme bölgesinde artan intrakraniyal basınç, omurilik deformitesi veya lokal enfeksiyon; (c) pıhtılaşma bozuklukları (trombosit sayısı <70 × 10⁹/L veya bilinen koagülasyon faktörü anormallikleri); (d) düzeltilmemiş hipovolemi veya şok; (e) yerel anesteziklere veya opioidlere alerji; ve (f) doğum acil durumları (örneğin, acil sezaryen gerektiren fetal sıkıntı, göbek kordonu prolapsu veya aktif kanamalı plasenta previyası gibi).

Sonradan istatistiksel güç 0.91 olarak hesaplandı; bu da örneklem büyüklüğünün, çalışma popülasyonu ile referans popülasyon arasındaki genotip ve allel frekanslarındaki farkları tespit etmek için yeterli olduğunu gösterdi.

Analjezi ve Anestezi
Epidural anestezi öncesi, tüm primiparoz kadınlar hayati belirtilerin sürekli izlenmesinden geçti. Solunum depresyonu, solunum hızı <10 nefes/dakika veya oksijen doygunluğu (SpO₂) <90%, hipotansiyon olarak sistolik tansiyon <90 mmHg veya başlangıç seviyesinden %>20 azalma ile idrar tutma olarak tanımlanmıştır; doğum sonrası 6 saat içinde kendiliğinden boşalmanın yapılamaması ve kateterizasyonu gerektiren idrar tutma durumu olarak tanımlanmıştır. Rahim ağzının açılması, görevli kadın doğum uzmanı veya sertifikalı ebe tarafından yapılan dijital vajinal muayene ile değerlendirildi. Tüm muayene görevlileri, servikal muayene simülatörü kullanılarak servikal genişleme değerlendirmesinde standart eğitim aldılar; düzenli kalite kontrol değerlendirmeleri yapılarak değerlendiriciler arası tutarlılık sağlandı. Servikal muayeneler, aktif doğum sırasında veya doğum ilerleyişindeki anormalliklerden şüphelenildiğinde daha sık her 2 saatte bir yapılırdı. Epidural analjezi, servikal genişleme belgelenmiş ≥2 cm'ye ulaştığında başlandı; bu, görevdeki doğum uzmanı tarafından kaydedildi.

Standart bir epidural analjezi protokolü uygulandı. Doğum organı sol lateral dekübütüs pozisyonuna yerleştirildiğinde, epidural boşluğa L3–L4 omurgalar arası boşluğu üzerinden tuzlu suya direnç kaybı tekniği kullanılarak erişildi. Epidural kateter epidural boşluğa 3–4 cm ilerletildi. Herhangi bir ilaç uygulanmadan önce, kateter üzerinden hafif aspirasyon yapıldı. Beyin omurilik sıvısı veya kan eksikliği, kateterin doğru yerleştirilmesini doğruladı ve intratekal veya damar içi pozisyonu hariç tuttu. Daha sonra epidural olarak 5 mL %1 lidokain hidroklorür test dozu verildi.

Bunu, doğum sahibi önceden belirlenmiş güvenlik kriterlerine göre yakından izlenen 10 dakikalık bir gözlem dönemi izledi. Bu kriterler arasında lokal anestezik sistemik toksisite belirtilerinin olmaması (örneğin, perioral uyuşma, metalik tat, kulak çınlaması veya ajitasyon), yüksek veya tam omurga blok belirtilerinin olmaması (örneğin, motor blokadanın hızlı ilerlemesi, disfoni, disfoni veya değişmiş zihinsel durum) ve hemodinamik stabilitenin korunması (örneğin, kalp atışı ve kan basıncının başlangıç değerlerinin %20'si içinde kalması olarak tanımlanır. Tüm güvenlik kriterlerinin karşılandığı doğrulandıktan sonra, %0,1 ropivakain hidroklorürat ve 0,4 μg/mL sufentanil sitrat içeren 10 mL yük dozu verildi.

Sonuç Ölçütleri
Primipar kadınların temel demografik ve doğum özellikleri, yaş, vücut kitle indeksi (BMI), gebelik yaşı, analjezi bırakma anındaki vücut ısı, doğumun birinci, ikinci ve üçüncü aşamalarının süreleri ve toplam doğum süresi dahil olmak üzere kaydedilmiştir. Vücut ısısı, analjezi kesildiğinde eğitimli hemşireler personel tarafından sağ aksillere 5 dakika boyunca yerleştirilen standart dijital aksiller termometre kullanılarak ölçüldü. Doğum evresi süreleri, önceden tanımlanmış standart kadın doğum kriterlerine göre görevli ebe veya kadın doğum uzmanı tarafından perspektif olarak kaydedilmiştir. Doğumun ilk aşaması, düzenli rahim kasılmalarından servikal genişleme ≥4 cm'ye kadar olan tam servikal genişleme (10 cm) arasındaki aralık olarak tanımlandı; ikinci aşama tam servikal genişlemeden fetal doğuma kadar uzandı; üçüncü aşama ise fetal doğumdan tam plasenta doğuma kadar uzanıyordu. Toplam çalışma süresi, üç aşamanın toplamı olarak hesaplandı. Tüm ölçümler partogram ve elektronik tıbbi kayıtta gerçek zamanlı olarak kaydedildi. İşgücü yönetiminde yer alan tüm klinik personel, çalışmaya başlamadan önce bu tanımlar üzerinde eşit bir eğitim aldı.

Ağrı şiddeti, Görsel Analog Ölçeği (VAS) kullanılarak değerlendirildi. Her doğum uzmanı, 10 cm uzunluğunda bir çizgi işaretleyerek ağrı seviyesini kendiliğinden bildirmiş, ardından eğitimli araştırma personeli skoru ölçüp kaydetmiştir. Değerlendiriciler, tüm klinik sonuç verileri, VAS skorları dahil olmak üzere toplandıktan sonra genotipleme yapıldığı için genotip bilgilerine kör edildi. Ağrı puanları dört zaman noktasında kaydedildi: analjezi başlatılmadan önce (servikal genişleme 2 cm'ye ulaştığında), analjezi başlatıldıktan 30 dakika, 1 saat sonra ve doğumdan 30 dakika sonra (analjezi bırakma zamanına karşılık). Tekrarlanan VAS ölçümlerinden kaynaklanan konuyla ilgili korelasyonları hesaba katmak için, dört değerlendirme zaman noktası boyunca iki yönlü tekrarlanmış ölçüm analizi (ANOVA) yapıldı. VAS puanları 0 ile 10 arasında değişirken, 0–3 puanları hafif ağrını, 4–6 orta ağrıyı ve 7–10 şiddetli^{ağrıyı 23} gösteriyordu.

Birincil analjezi sonucu analjezi başlandıktan 30 dakika sonra değerlendirildi. Ağrı şiddeti VAS kullanılarak ölçüldü; 0 ağrı yok, 10 ise hayal edilebilecek en kötü ağrıyı gösterdi. Önceden tanımlanan bir VAS skoru >3, zayıf bir analjezik etki olarak sınıflandırıldı (ikili bağımlı değişken 1 olarak kodlandı), VAS skoru ≤3 ise yeterli bir analjezik etki olarak sınıflandırıldı (0 olarak kodlandı). Bu tanım analiz boyunca tutarlı şekilde uygulandı ve birincil lojistik regresyon modeli bu ikili sonucu bağımlı değişken olarak kullandı.

Doğumdan 1 dakika ve 5 dakika sonra Apgar skorları kullanılarak neonatal sonuçlar değerlendirildi. 8–10 puanlar normal, 5–7 puanlar hafif boğulma ve 0–4 puanlar ise şiddetli^{asfiksi 24} olarak değerlendirildi. Apgar değerlendirmeleri, Amerikan Pediatri Akademisi ve Amerikan Kadın Doğum Uzmanları ve Jinekologlar Koleji tarafından ortaklaşa yayımlanan Yenidoğan Yeniden Canlandırma Programı (7. Baskı) ile hastanenin Neonatoloji Bölümü tarafından belirlenen standart değerlendirme yönergelerine uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Tüm değerlendirmeler, eğitim alan yenidoğan hemşireler veya çalışma grubu dağılışına kör olan asistanlı hekimler tarafından yapıldı.

Analjezi başlandıktan sonra yan etkilerin insidansı kaydedildi. Yan reaksiyonlar arasında solunum depresyonu, hipotansiyon, idrar tutma, delin bölgesi ağrısı, baş dönmesi, bulantı veya kusma ve kaşıntı yer alıyordu. Solunum depresyonu, <10 nefes / dakika veya SpO₂ %<90 olarak tanımlandı; sistolik tansiyon olarak hipotansiyon <90 mmHg veya başlangıçtan %20 >20 azalma; idrar tutma, doğumdan sonra 6 saat içinde kendiliğinden boşalmama nedeniyle kateterizasyon gerektiriyor; Hasta tarafından bildirilen ponkin bölgesinde ağrı olarak Sayısal Derecelendirme Ölçeği (NRS) puanı ≥4; bulantı ve kusma, bulantı veya en az bir kez kusma vakası olarak görülür; ve hasta tarafından bildirilen cilt kaşınması olarak başka tanımlanabilir bir neden olmadan kaşıntı var. Epidural analjeziye başlayıp hastaneden taburcu olana kadar yan etkiler izlendi ve tedavi eden klinik ekip tarafından prospektif olarak kaydedildi.

Kan Örneği Toplama ve Genotipleme
Prenatal muayeneler sırasında, her primipar kadından perifer venöz kan (2 mL) oruç koşullarında (minimum 8 saat oruç süresi) ve standart bir toplama süresi ile 08:00 ile 10:00 arasında etilenediaminetetraasetik asit (EDTA) antikoagülan tüplere toplanarak sonraki nuklein asit ekstraksiyonu yapıldı. Tüm örnekler analiz ile kadar hemen −80°C'de saklandı. DNA çıkarımı öncesi depolama süresi 1 ila 6 ay arasında değişiyordu. DNA bozulmasını en aza indirmek için, örnekler depolamadan önce alitât edildi ve çalışma boyunca donma–erime döngüleri en aza indirildi. Donmuş örnekler işlenmeden önce buz üzerinde yavaşça çözüldü.

DNA, genomik DNA arıtma kiti kullanılarak tam kandan çıkarıldı. Genotiplemeden önce, DNA konsantrasyonu ve saflığı A260/A280 oranı kullanılarak ultraviyole spektrofotometri ile değerlendirildi ve DNA bütünlüğü agaroz jel elektroforezi ile değerlendirildi. Sonraki analizlere yalnızca önceden tanımlanmış kalite kontrol kriterlerini karşılayan örnekler dahil edilmiştir.

rs928508 polimorfizmasının genotiplenmesi TaqMan tek nükleotid polimorfizması (SNP) genotipleme testleri kullanılarak gerçekleştirildi (Cat. No. 4351379). A allelinin (5′-CAGGCCTGAGAGGGATTTTG-3′) tespit için VIC etiketli problar ve allel G (5′-TAGCATCTTCCCAACACTTGCAATTG-3′) için FAM etiketli problar kullanıldı. Toplam polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) hacmi 10 μL olup, 5,0 μL 2× TaqMan Genotipleme Master Karışımı, 0,25 μL önceden formüle edilmiş TaqMan SNP Genotipleme Testi (primer-prob karışımı), 10–20 ng genomik DNA şablonu ve nihai reaksiyon hacmine kadar nükleaz içermeyen sudan oluşuyordu.

Amplifikasyon, standart TaqMan test prosedürlerine göre nicel bir PCR cihazı kullanılarak gerçekleştirildi. Termal döngü koşulları, 95°C'de 10 dakika boyunca ilk enzim aktivasyon adımı, ardından 95°C'de 15 saniye boyunca 40 döngü denatürasyon ve 60°C'de 60 saniye tavlama/uzatma aşamasından oluşuyordu. Amplifikasyonun ardından, floresans sinyal alımı ve allel ayırt etme analizi enstrüman yazılımı kullanılarak otomatik olarak yapılarak örnek genotipleri belirlenmiştir.

Tüm örnekler ikili olarak analiz edildi. Uyumsuz sonuçlar için üçüncü bağımsız analiz yapıldı ve uyumlu sonuç benimsendi. SNP çağrı oranı %≥95 olup, rastgele seçilen örneklerin %10'u tekrar testlerde %100 uyum gösterdi. Her test plakasında pozitif kontroller, negatif kontroller ve şablonsuz kontroller yer aldı. Genotip ataması kör bir şekilde gerçekleştirildi ve genotiplemede yer alan tüm laboratuvar personeli çalışma boyunca klinik sonuç verilerine kör kaldı.

İstatistiksel Analiz
Çalışma popülasyonunda rs928508 allelinin Hardy–Weinberg dengesi (HWE) değerlendirildi. Sürekli değişkenlerin normalliği Shapiro–Wilk testi kullanılarak değerlendirildi. Normal dağılımlı veriler ortalama ± standart sapma (SD) olarak sunulurken, normal dağılım olmayan veriler medyan ve çeyreklerarası (IQR) olarak bildirildi.

Üç grup arasındaki karşılaştırmalar için, normallik varsayımları sağlandığında tek yönlü varyans analizi (ANOVA) veya iki yönlü tekrarlanan ölçümlü ANOVA uygulandı; ardından Tukey'nin dürüstçe anlamlı fark (HSD) testi sonradan çoklu karşılaştırmalar için yapıldı. Normallik varsayımları karşılanmadığında, Kruskal–Wallis H testi kullanıldı, ardından Dunn'un Bonferroni düzeltmesiyle yapılan sonradan testi yapıldı. Kategorik değişkenler sıklık ve yüzdeler olarak özetlenerek ki-kare (χ²) testi kullanılarak analiz edildi. Beklenen hücre sayıları analiz öncesi değerlendirildi ve Fisher'ın tam testi herhangi bir hücre frekansı <5 olduğunda kullanıldı.

Birden fazla zaman noktasında toplanan tekrarlayan VAS ölçümleri, konuyla ilgili korelasyonları hesaba katmak için iki yönlü tekrarlanan ölçümlü ANOVA kullanılarak analiz edilmiştir. Sonradan yapılan karşılaştırmalar, birden fazla karşılaştırmayı kontrol etmek için Bonferroni ile ayarlanmış testler kullanılarak gerçekleştirildi.

Kötü doğum analjezi sonuçlarıyla ilişkili faktörleri belirlemek için ikili lojistik regresyon analizi yapıldı. Birincil sonuç değişkeni, epidural analjezi başlandıktan 30 dakika sonra analjezik etkililik olarak tanımlandı. VAS puanları, önceden tanımlanmış 3 eşik kullanılarak ikiye bölündü; VAS >3 zayıf bir analjezik etki olarak sınıflandırıldı, VAS ise ≤3 yeterli bir analjezik etki olarak sınıflandırıldı. Değişkenler, çok değişkenli modele klinik öneme göre girildi. Çok kollineerlik, varyans enflasyon faktörü (VIF) kullanılarak değerlendirildi ve değişkenler arasındaki potansiyel etkileşimler incelendi. Çok değişkenli modele dahil edilen tüm değişkenler için VIF değerleri Ek Tablo 1'de sunulmuştur. Model kalibrasyonu Hosmer–Lemeshow uygunluk testi kullanılarak değerlendirildi.

İki taraflı P değeri <0.05 istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edildi. İstatistiksel analizler SPSS yazılımı (Sürüm 23.0) kullanılarak gerçekleştirilmiştir.

Sonuçlar

Klinik Veriler

202 kayıtlı primipar kadın arasında MIR30C rs928508 polimorfizmasının analizi, GA genotipinin en yaygın olduğunu (%49,51, n = 100) gösterdi; ardından GG (%26,73, n = 54) ve AA (%23,76, n = 48) geldi. İlgili allel frekansları G için %51,49, A için %48,51 idi. Tablo 1'de gösterildiği gibi, genotip ve allel dağılımları genel olarak Ansambl veritabanında Doğu Asya popülasyonu için bildiril...

Tartışma

Bu çalışma, 202 sağlıklı Çinli Han primiparous kadınından oluşan bir kohortta miR-30c rs928508 polimorfizması ile epidural doğum analjezi sonuçları arasındaki ilişkiyi araştırdı. Bulgular, anne rs928508 genotipinin doğum analjezi sırasında ağrı algısı ve doğumun ilk aşamasının süresiyle ilgili farklılıklarla ilişkili olduğunu gösterdi. Ayrıca, bu çalışmada kullanılan epidural analjezi rejimi, genotip grupları arasında yenidoğan sonuçları ve çoğu anne yan reaksiyonu açısından genel olarak...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Agarose	Sigma-Aldrich	A2929-250G	DNA bütünlüğü değerlendirmesi
Cervikal Muayene Simülatörü	Erler-Zimmer	R16160	Muayeneci eğitimi ve kalite kontrolü
Dijital Aksiller Termometre	Terumo	ETC207S	Vücut sıcaklığı ölçümü
DNA Jel Boyası	Biotium	41020	Nükleik asitlerin görselleştirilmesi
EDTA Kan Alma Tüpleri	Greiner Bio-One	22040161	Periferik venöz kan alımı
Elektronik Tıbbi Kayıt Sistemi	Shijiazhuang Altıncı Hastanesi	N/A	Klinik veri toplama
Epidural Kateter Kiti	Teleflex (Arrow)	FlexTip Plus	Epidural kateter yerleşimi
Epidural İnfüzyon Cihazı / PCEA Pompası	Eitan Medical	17000-031-0035	Epidural analgezi uygulaması
Epidural İğne (Tuohy)	Medline	N/A	L3–L4'te epidural erişim için kullanılan 17G × 3.5 inç Tuohy iğnesi
Jel Görüntüleme Sistemi	Thermo Fisher Scientific	iBright FL1500	DNA bantlarının görselleştirilmesi
Genomik DNA Saflaştırma Kiti	Thermo Fisher Scientific	K0512	Periferik tam kan örneklerinden DNA ekstraksiyonu
Yatay Jel Elektroforez Sistemi	Labmate	LMHES-A201	DNA kalite kontrolü
Buz Kovası ve Ezilmiş Buz	Corning	N/A	Örnek çözülmesi ve işleme
Lidokain Hidroklorür Enjeksiyonu (%1)	Pfizer	0409-4713-65	Epidural test dozu
Mikrosantrifüj Tüpleri (1.5 mL / 2 mL)	Corning	430909 (1.5 mL); 430915 (2 mL)	Örnek depolama ve işleme
Mikropipetler (Değişken Hacimli)	Eppendorf	3125000044	PCR ve örnek hazırlama
Çok Parametreli Hasta Monitörü	Lepu Creative Medical	PC-3000	Kan basıncı, kalp hızı ve oksijen doyumu izleme
Nükleaz-Serbest Su	Promega	P1195	PCR reaktifi hazırlanması
Partogram Formları veya Elektronik Partogram Sistemi	GrowthXP (PC PAL)	N/A	Doğum aşaması dokümantasyonu
Kişisel Bilgisayar İş İstasyonu	Lenovo (ThinkStation)	P2	Veri işleme ve analizi
PLINK Yazılımı	Purcell Laboratuvarı	Sürüm 1.9	Hardy–Weinberg dengesi analizi
Puls Oksimetre	Microlife	OXY 500 BT	Oksijen doyumu izleme
Kantitatif PCR Cihazı	Thermo Fisher Scientific (Applied Biosystems)	QuantStudio Dx (4470660)	Alel ayrımı ve floresan tespiti
Soğutmalı Mikrosantrifüj	Thermo Fisher Scientific (Heraeus)	Fresco 21 (75002425)	Örnek hazırlama
Ropivakain Hidroklorür Enjeksiyonu	Hikma Pharmaceuticals (Naropin)	0143-9265-10	Epidural analjezik ajan
SPSS İstatistiksel Yazılımı	IBM Corp.	Sürüm 23.0	İstatistiksel analiz
Steril Aerosole Dirençli Pipet Uçları	Thermo Fisher Scientific (ART)	2149P-05	Moleküler biyoloji uygulamaları
Steril Salin Solüsyonu	Baxter Healthcare Corporation	2B1301X	Direnç kaybı tekniği
Steril Şırıngalar (5 mL, 10 mL)	Becton, Dickinson and Company (BD)	309646; 309695	İlaç hazırlama ve uygulama
Süfentanil Sitrat Enjeksiyonu	Hospira, Inc. (Pfizer)	0409-3382-11	Opioid analjezik bileşeni
TaqMan Genotipleme Ana Karışımı (2×)	Thermo Fisher Scientific (Applied Biosystems)	4371353	PCR amplifikasyon reaktifi
TaqMan SNP Genotipleme Analizi (rs928508)	Thermo Fisher Scientific	4351379	MIR30C rs928508 polimorfizminin genotiplenmesi
Ultra-Düşük Sıcaklık Dondurucu (-80 °C)	Thermo Fisher Scientific	FDE30086FV	Uzun süreli örnek depolama
UV Spektrofotometre / NanoDrop Spektrofotometre	Thermo Fisher Scientific (NanoDrop)	ND-1000	DNA konsantrasyonu ve saflık değerlendirmesi
Görsel Analog Ölçek (VAS) Değerlendirme Formu	N/A	N/A	Ağrı değerlendirmesi için kullanılan standart 10 cm'lik Görsel Analog Ölçek formu