Bu çalışma, miR-146a rs2910164 polimorfizmi ile alerjik rinit (AR) yatkınlığı arasındaki ilişkiyi açıklamayı amaçlamaktadır. Düşük plazma miR-146a seviyeleri ve rs2910164 GG genotipi, AR hastalarında artmış AR riski, güçlenmiş inflamatuar yanıtlar ve daha şiddetli klinik belirtilerle ilişkilidir.
Araştırma makalesi
Mir-146a Rs2910164 ile Alerjik Rinit Duyarlılığı Arasındaki İlişkinin İncelenmesi
Bu makalede
Özet
Özet
Alerjik rinit (AR), hastaların yaşamı için bir tehdit oluşturmasa da yaşam kalitelerini ciddi şekilde bozar. MicroRNA-146a (miR-146a), bağışıklık düzenlemesi ve inflamatuar yanıtlar için kritiktir; ancak, miR-146a rs2910164 polimorfizmi ile AR duyarlılığı arasındaki ilişki henüz tam olarak anlaşılamamıştır. Bu vaka-kontrol çalışması, miR-146a rs2910164 polimorfizminin AR duyarlılığı üzerindeki etkisini araştırmak için tasarlanmıştır. Bu çalışmaya toplam 180 AR dışı gönüllü ve 211 AR hastası dahil edilmiştir. Plazma miR-146a ekspresyonu RT-qPCR ile ölçülmüş; rs2910164 genotipi TaqMan-qPCR yöntemi kullanılarak tespit edilmiştir. Serum IgE, IL-4, IL-6 ve IL-10 seviyelerini belirlemek için ELISA kullanılmıştır. Pearson korelasyon analizi ile miR-146a ekspresyonu ile TNSS skoru, RQLQ skoru ve serum faktör konsantrasyonları arasındaki doğrusal korelasyonlar değerlendirilmiştir. AR'nin risk faktörleri lojistik regresyon aracılığıyla belirlenmiştir. miR-146a rs2910164'ün GG genotipi ve G aleli, AR hastalarında sağlıklı kontrollere göre anlamlı derecede daha yaygındı. Plazma miR-146a seviyesi AR hastalarında azalmıştı. GG genotipine sahip AR hastalarında plazma miR-146a seviyesi daha düşük olup, daha aktif alerjik ve inflamatuar yanıtlar sergiledikleri görülmüştür. miR-146a ekspresyonu, alerjik semptomlarla ve klinik belirtilerin şiddetiyle yakından ilişkiliydi. Lojistik regresyon, serum IgE ve IL-4 seviyelerinin AR için bağımsız risk faktörleri, IL-10 ve miR-146a ekspresyonunun ise bağımsız koruyucu faktörler olduğunu göstermektedir. AR hastalarında düşük plazma miR-146a seviyeleri gözlemlenmekte ve miR-146a rs2910164'ün GG genotipi AR duyarlılığını artırmaktadır.
Giriş
Alerjik rinit (AR), nazal mukozanın alerjen aracılı, enfeksiyöz olmayan inflamatuar bir bozukluğudur. AR'nin tipik klinik semptomları arasında burun kaşıntısı, burun tıkanıklığı, şeffaf burun akıntısı ve sık hapşırma yer alır1. Daha şiddetli vakalarda hastalar koku duyusunda azalma yaşayabilir ve hatta uyku kalitesi etkilenebilir. Epidemiyolojik veriler, AR'nin küresel yaygınlık oranının yıldan yıla artarak %10 ile %25'e ulaştığını göstermektedir2. AR hastaların hayatını tehlikeye atmasa da uykuyu, öğrenmeyi ve çalışmayı ciddi şekilde bozar, yaşam kalitesini önemli ölçüde düşürür ve bireyler ile toplum üzerinde ağır bir ekonomik yük oluşturur3. Çalışmalar, AR'nin astım için bir risk faktörü olduğunu ve hastalık ilerledikçe hastaların sinüzit veya nazal polipler geliştirme olasılığının arttığını, bunun da hastalığın yükünü daha da artırdığını doğrulamıştır4,5. Bu nedenle, AR'nin önlenmesi ve kontrol altına alınması solunum yolu hastalıkları alanında temel bir görev haline gelmiştir. Ancak, AR'nin patogenezi henüz tam olarak aydınlatılmamıştır. AR'nin patofizyolojik mekanizmasının derinlemesine araştırılması ve hedeflenmiş tedavi stratejilerinin geliştirilmesi kritik öneme sahiptir. Bu durum, aynı zamanda acilen çözülmesi gereken güncel bilimsel konulardır.
AR başlangıcı çevresel ve genetik faktörlerle ilişkilidir6. Güncel araştırmalar genel olarak, bireysel genetik yatkınlık ile alerjen maruziyeti ortamının sinerjik etkisinin AR başlangıcındaki temel itici faktör olduğunu kabul etmektedir. Brozek ekibi, vücudun genetik yatkınlığı ile çevresel maruziyetler arasındaki etkileşimin AR'nin temel nedeni olduğunu daha sonra teyit etmiştir2. AR genetik mekanizma araştırmaları alanında, genetik polimorfizm bilim insanlarının dikkatini giderek daha fazla çeken bir odak noktası haline gelmiştir. Genetik polimorfizmin yaygın bir formu olan tek nükleotid polimorfizmleri (SNP'ler), organizmalarda genetik bilgi varyasyonunun birincil nedenidir7. Biriken kanıtlar, IL-33 rs7044343'teki TT genotipinin AR'nin önlenmesi ve tedavisi için potansiyel bir hedef olabileceğini göstermektedir8. Ek olarak, CD14 promotör C-159T bölgesindeki TT genotipi, AR riski için öngörücü bir belirteç görevi görmektedir9. Bu durum, kilit gen SNP'lerinin AR riskini değerlendirmek, erken uyarılar sağlamak ve kesin önleme ile tedaviyi gerçekleştirmek için önemli moleküler hedefler olarak hizmet edebileceğini göstermektedir. Bu, AR'nin genetik yatkınlık mekanizmasının daha derinlemesine anlaşılması için kritik ipuçları sağlamaktadır.
Çok sayıda çalışma, mikroRNA'ların (miRNA'lar) anormal ekspresyonunun, geniş bir hastalık yelpazesinin ortaya çıkışında ve gelişiminde temel itici faktörlerden biri olduğunu ortaya koymuştur10. miRNA'lar, vücut sıvılarında stabil olarak bulunma özelliğine sahiptir ve bu durum onları hastalık teşhisi için oldukça hassas moleküler markerlar haline getirir. miR-146a, kapsamlı biyolojik fonksiyonlara sahip bir kodlamayan RNA molekülü türüdür11. rs2910164 polimorfizmi, prekürsör miR-146a sekansının sap-ilmek (stem-loop) bölgesinde yer alır. Bu bölgedeki varyasyon, pre-miR-146a'nın işlenme ve olgunlaşma verimliliğini etkileyebilir; böylece olgun miR-146a'nın ekspresyon seviyesini değiştirerek downstream immün ve inflamatuar yanıtları etkileyebilir. Önceki çalışmalar, miR-146a'nın aşırı ekspresyonunun astım fare modellerinde hava yolu hiperreaktivitesini önemli ölçüde azaltabildiğini ve sensitize olmuş lenfositlerin aktivasyonunu inhibe edebildiğini doğrulamıştır12. Epidermal büyüme faktörü reseptörünün (EGFR) aktivitesini hedefleyip inhibe ederek, miR-146a sinüzitin inflamatuar hasarını etkili bir şekilde hafifletebilir13. Ayrıca, miR-146a'nın aşırı ekspresyonu, Toll benzeri reseptör 4 (TLR4) sinyal yolunu bloke ederek AR fare modelinin patolojik semptomlarını da hafifletebilir14. Bu gözlemler, miR-146a'nın solunum sistemi hastalıklarını modüle etmedeki hayati rolünü vurgulamaktadır.
Genetik polimorfizm çalışmalarından elde edilen mevcut kanıtlar, miR-146a rs2910164 lokusundaki G alel frekansının hava yolu hiperreaktivitesi ile yakından ilişkili olduğunu göstermektedir15. Bu SNP, aynı zamanda Kore popülasyonunda astım riski için potansiyel bir biyobelirteç olarak kabul edilmektedir15. Ek olarak, Jimenez-Morales ekibi, miR-146a rs2910164 lokusundaki CC genotipinin astıma karşı koruma sağladığını ortaya koymuştur16. Bununla birlikte, miR-146a rs2910164 polimorfizmi ile AR duyarlılığı arasındaki ilişyere dair raporlanmış ilgili bir çalışma bulunmamaktaydı. Bu nedenle, bu çalışma miR-146a rs2910164 polimorfizminin AR üzerindeki etkisini doğrulamayı ve AR'nin patogenezi, klinik tanısı ve tedavisi için yeni bir teorik temel sağlamayı amaçlamaktadır.
Protokol
Etik beyan:
Tüm katılımcılar deneyimizin amacı hakkında tam olarak bilgilendirilmiş ve bilgilendirilmiş onam formunu imzalamıştır. Bu araştırma, Fujian Tıp Üniversitesi Longyan Birinci Bağlı Hastanesi etik kurulu tarafından onaylanmıştır (Onay numarası LYREC2023-k007-01). Tüm prosedürler ilgili kılavuzlara, düzenlemelere ve Helsinki Deklarasyonu'na uygun olarak gerçekleştirilmiştir.
Katılımcı Alımı, Uygunluk Kriterleri ve Örnek Toplama
Ocak 2023 ile Mayıs 2025 tarihleri arasında, Fujian Tıp Üniversitesi Longyan Birinci Bağlı Hastanesi'nin kulak burun boğaz polikliniğinden AR tanısı konmuş toplam 211 birey ve 180 sağlıklı katılımcı (AR olmayan) alınmıştır. AR tanı kriterleri, Çin Alerji Derneği'nin Alerjik Rinit Tanı ve Tedavi Kılavuzları'ndan17 benimsenmiştir. Hastaların burun kaşıntısı, hapşırma, burun tıkanıklığı veya burun akıntısı dahil olmak üzere en az iki klinik AR semptomu göstermesi şart koşulmuştur. Ek olarak, burun mukoza muayenesinde solukluk ve ödem görülmesi ve Deri Prick Testi (SPT) sonucunun veya serum IgE testi sonucunun pozitif olması gerekmiştir. Doğruluğu ve tutarlı sonuçları garanti etmek amacıyla SPT, poliklinik alerjen test odasında uzman personel tarafından gerçekleştirilmiştir. Tüm AR hastaları, tıbbi personelin yardımıyla Rino konjonktivit Yaşam Kalitesi Anketi (RQLQ) ve Toplam Nazal Semptom Skoru (TNSS) değerlendirmelerine tabi tutulmuş ve skorlar sonraki analizler için kaydedilmiştir.
Hastanede rutin fiziksel muayeneden geçen sağlıklı gönüllüler, AR olmayan grup olarak çalışmaya dahil edilmiştir. Uygun katılımcıların kişisel veya ailesel AR öyküsü, astım veya diğer alerjik hastalık öyküsü, kronik sinüzit veya burun boşluğunun diğer inflamatuar hastalıkları bulunmamaktaydı ve önceki ay içerisinde herhangi bir solunum yolu enfeksiyonu geçirmemişlerdi. Ayrıca, ciddi kardiyak, hepatik, pulmoner veya renal hastalık öyküsü olanlar ya da herhangi bir malign tümörü bulunan bireyler çalışma dışı bırakılmıştır.
İki gönüllü grubundan periferik venöz kan örnekleri toplandı. Antikoagüle edilmiş venöz kanın bir kısmı DNA ekstraksiyonu ve plazma RNA ekstraksiyonu için kullanıldı. Venöz kanın diğer bir kısmı, serumla ilişkili faktörlerin (immünoglobulin E (IgE), interlökin-4 (IL-4), IL-6 ve IL-10) tespiti için kullanılmak üzere serum elde etmek amacıyla ayrıştırıldı.
DNA Ekstraksiyonu:
Tam kan genomik DNA ekstraksiyon kiti kullanılarak 200 µL periferik venöz kan örneklerinden DNA ekstraksiyonu yapılmıştır (Materyaller Tablosu'na bakınız). Kan örnekleri lityum heparin antikoagülan tüplere toplanmış, ardından alikotlanarak saklama için -20 °C'de dondurulmuştur. Spesifik uygulama prosedürleri, kitin talimatlarına kesinlikle uyulmalıdır. Son olarak, DNA'yı elüye etmek için 100 µL elüsyon tamponu kullanılmıştır. Ekstrake edilen DNA örneğinin saflığı, nükleik asit/protein analizörü (Spektrofotometre) ile belirlenmiştir (OD₂₆₀/OD₂₈₀ oranı 1,8 ile 2,0 arasındaydı). Tespit sonrası DNA örnekleri, sonraki genotipleme deneylerinde kullanılmak üzere -20 °C'de saklanmıştır.
Genotip Belirleme
miR-146a rs2910164 genotiplerinin dağılımını belirlemek için TaqMan SNP genotiplendirme kiti kullanılmıştır. Kit bilgileri sarf malzemeleri listesine eklenmiştir. Toplam PCR reaksiyon hacmi; 5 µL Master Mix, 0,5 µL tipleme probu primer karışımı, 10 ng kalıp DNA ve RNase-free su içeren 10 µL olarak belirlenmiştir. DNA amplifikasyonu, Roche LightCycler 480 II gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR cihazı ile gerçekleştirilmiştir. Reaksiyon koşulları: 95 °C'de 10 dk ön-denatürasyon; 40 döngü (95 °C'de 15 saniye, 60 °C'de 1 dk) ve FAM/VIC floresansı 60 °C'de okunmuştur. Amplifikasyon tamamlandıktan sonra, toplanan FAM/VIC çift floresan sinyalleri LightCycler 480 Yazılımı kullanılarak analiz edilmiş ve genotip verileri istatistiksel olarak işlenmiştir. Tek bir FAM sinyali homozigot bir genotipi, tek bir VIC sinyali diğer homozigot genotipi ve her iki sinyalin varlığı ise heterozigot bir genotipi temsil eder. Anormal sinyallere sahip olan veya tekrarlandığında tutarsız sonuçlar veren örnekler yeniden test edilecektir. Her deney, kalite kontrol amacıyla hem kalıp içermeyen kontrol hem de pozitif kontrol ile yürütülmüştür. Tüm örnekler üç teknik tekrara tabi tutulmuştur.
RT-qPCR
Toplam plazma miRNA ekstraksiyonu, özel bir miRNA ekstraksiyon kiti kullanılarak 100 µL plazmadan gerçekleştirilmiştir. Kit bilgileri sarf malzemeleri listesine girilmiştir. RNA konsantrasyonu bir spektrofotometre kullanılarak belirlenmiştir. Ekstraksiyonu yapılmış kaliteli miRNA örneklerinin OD₂₆₀/OD₂₈₀ oranı 1,8 ile 2,0 arasında değişmiştir. cDNA sentezlemek için ters transkripsiyonda 200 ng RNA kullanılmış ve reaksiyon prosedürü kitin standart talimatlarına uygun olarak yürütülmüştür. Ters transkripsiyon, 42 °C'de 60 dk inkübasyon ve 85 °C'de 5 dk inaktivasyon dahil olmak üzere toplam 20 µL hacimde gerçekleştirilmiştir. qPCR reaksiyonu, toplam 20 µL hacimle belirlenmiş protokole uygun olarak hazırlanmıştır. Reaksiyon karışımı şu şekilde düzenlenmiştir: 10 µL qPCR pre-mix, 0,4 µL ileri primer, 0,4 µL ters primer, 1 µL cDNA kalıbı ve 8,2 µL RNaz-free su. miR-146a ve dahili referans gen U6 için spesifik primerler kullanılmıştır. Amplifikasyon, Roche LightCycler 480 II gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR cihazı kullanılarak tamamlanmıştır. qPCR termal döngü koşulları şu şekildeydi: 30 s boyunca 95 °C'de ön-denatürasyon, ardından 40 döngü boyunca 5 s 95 °C'de denatürasyon ve 30 s 60 °C'de bağlanma ve uzama. Tüm örnekler üç teknik tekrara tabi tutulmuştur. Deneysel veriler LightCycler 480 Yazılımı kullanılarak analiz edilmiştir. Örnekler arası varyasyonu düzeltmek için dahili referans olarak U6 kullanılarak, önce ΔCt (miR-146a Ct değeri - U6 Ct değeri) hesaplanmış, ardından ΔΔCt (deney grubunun ΔCt değeri - kontrol grubunun ΔCt değeri) hesaplanmış ve son olarak miR-146a'nınle göreceli ekspresyon seviyesi 2⁻ΔΔCt ile elde edilmiştir.
ELISA
IgE, IL-4, IL-6 ve IL-10 serum düzeyleri ELISA kitleri ile tespit edildi. Deneysel prosedürler için kullanım kılavuzuna başvuruldu. Spesifik adımlar şu şekildedir: İlk olarak, konsantre yıkama solüsyonu seyreltildi ve standart eğrisi için çalışma solüsyonlarını hazırlamak amacıyla standartlar gradyanlı olarak seyreltildi. İkinci olarak, kuyucuklara 50 µL dilüent, standart solüsyon ve test edilecek örnek eklendi ve 37 °C'de 60 dk inkübe edildi. İnkübasyon sonrası kuyucuklar, yıkama tamponu ile üç kez yıkandı. Ardından, 50 µL enzim-konjuge antikor çalışma solüsyonu eklendi ve plaklar 37 °C'de 30 dk inkübe edildi. İnkübasyon tamamlandıktan sonra sıvı atıldı ve kuyucuklar tekrar yıkandı; ardından kromojenik solüsyon eklendi ve karanlıkta 37 °C'de 15 dk inkübe edildi. Durdurma solüsyonu eklendikten sonra, bir mikroplaka okuyucu kullanılarak 450 nm'de absorbans ölçüldü. Örnek konsantrasyonları standart eğrisine göre hesaplandı. Her örnek üç kez test edildi. Varyasyon katsayısı %10'dan küçük olan veriler geçerli kabul edildi. Kalite kontrol için deney sırasında boş kuyucuklar ve kontrol kuyucukları oluşturuldu. Kitin tespit aralığı ve hassasiyeti, üretici kılavuzunda belirtilen yönetmeliklere uygundu.
Veri istatistikleri
Deneysel veriler SPSS ve GraphPad Prism 9 yazılımları kullanılarak analiz edilmiştir. Veriler ortalama ± standart sapma (ortalama ± SD) olarak sunulmuştur. Sürekli değişkenlerin normalliğini değerlendirmek için Shapiro-Wilk testi, varyans homojenliğini değerlendirmek için ise Levene testi uygulanmıştır. İki grup arasındaki sürekli değişkenlerin karşılaştırması bağımsız örneklem t-testi kullanılarak analiz edilmiştir. Çoklu grup karşılaştırmaları için tek yönlü ANOVA ve ardından Tukey post-hoc testi uygulanmış, iki bağımsız faktörün ana etkilerini ve etkileşim etkilerini değerlendirmek için ise iki yönlü ANOVA uygulanmıştır. Aykırı değerler, 3 standart sapma kuralına göre belirlenmiş ve hariç tutulmuştur. Bu çalışmada eksik veri tespit edilmemiştir. miR-146a'nın AR için tanısal etkinliğini analiz etmek amacıyla alıcı işletim karakteristik (ROC) eğrisi kullanılmıştır. İlgili ROC parametreleri ve %95 güven aralıkları, yerleşik istatistiksel algoritmalar kullanılarak hesaplanmıştır. miR-146a ekspresyonu ile serumla ilişkili faktörlerin seviyeleri arasındaki doğrusal korelasyonu ölçmek için Pearson korelasyon analizi kullanılmıştır. AR için risk faktörlerini taramak amacıyla tek değişkenli ve çok değişkenli lojistik regresyon analizleri yapılmıştır. Tek değişkenli analizde p < 0.05 olan değişkenler, çok değişkenli lojistik regresyon modeline dahil edilmiştir. p < 0.05 değeri istatistiksel olarak anlamlı kabul edilmiştir.
Sonuçlar
Katılımcı Özellikleri ve Genotip Dağılımı
İki denek grubunun klinik bazal verileri istatistiksel olarak analiz edilmiştir. Sonuçlar; serum IgE, IL-4, IL-6 ve IL-10 seviyelerinin anlamlı farklılıklar gösterdiğini ortaya koymuştur. AR olmayan gönüllü grup ile karşılaştırıldığında, AR hastası grubunda serum IgE, IL-4 ve IL-6 konsantrasyonlarının arttığı, IL-10 seviyesinin ise azaldığı görülmüştür (Tablo 1). miR-146a rs2910164'ün genotip dağılımı TaqMan-qPCR yöntemi kullanılarak tespit edilmiştir. Analiz sonuçları, rs2910164'ün GG genotipinin (χ2=7.018, OR (95% CI) = 0.471 (0.269-0.825), p=0.008) ve G alelinin (χ2=7.474, OR (95% CI) = 0.637 (0.506-0.894), p=0.006), AR olmayan gruba kıyasla AR hastası grubunda daha yaygın olduğunu göstermiştir. rs2910164 lokusundaki genotip dağılımı Hardy-Weinberg dengesine uygundur (pHWE = 0.191) (Tablo 2).
Plazma miR-146a Ekspresyon Analizi
İki çalışma kohortunda plazma miR-146a ekspresyon düzeyi ölçülmüştür. AR hastalarında miR-146a düzeyinde belirgin bir azalma gözlemlenmiştir (Şekil 1A). ROC eğrisi analizi, miR-146a'nın AR için iyi bir tanısal etkinliğe sahip olduğunu göstermiştir (Şekil 1B). AUC değeri 0,891 olarak belirlenmiştir. 0,785 optimal kesim değerinde duyarlılık %83,89, özgüllük %79,44 ve Youden indeksi 0,633'tür. miR-146a rs2910164 genotipine göre, iki denek grubu sırasıyla GG, GC ve CC olmak üzere üç alt gruba ayrılmıştır. Her bir alt gruptaki miR-146a ekspresyon farkları karşılaştırılmıştır. İstatistiksel sonuçlar, AR olmayan grupta miR-146a ekspresyonunun farklı genotip alt grupları arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark göstermediğini ortaya koymuştur (Şekil 1C); AR grubunda ise, GG genotip alt grubundaki plazma miR-146a ekspresyon düzeyi, GC ve CC genotip alt gruplarına göre anlamlı derecede düşük bulunmuştur (Şekil 1D). Yukarıdaki veriler, rs2910164 GG genotipini taşıyan AR hastalarında plazma miR-146a ekspresyonunun azaldığını göstermektedir.
Serum Sitokin Analizi ve miR-146a Ekspresyonu ile Korelasyonu
Ardından, deneklerin farklı genotip alt gruplarındaki IgE, IL-4, IL-6 ve IL-10 serum seviyeleri istatistiksel olarak analiz edilmiştir. İstatistiksel sonuçlar, farklı genotip alt grupları arasında IgE, IL-4, IL-6 ve IL-10 serum seviyelerinde anlamlı bir fark olmadığını ortaya koymuştur (Şekil 2A-D); AR grubunda, GG genotipini taşıyan hastalardaki serum IgE, IL-4 ve IL-6 seviyeleri, GC ve CC genotipli hastalara göre anlamlı derecede daha yüksekken, serum IL-10 seviyesi daha düşük bulunmuştur (Şekil 2A-D). Plazma miR-146a ekspresyonu ile TNSS skoru, RQLQ skoru ve ayrıca IgE, IL-4, IL-6 ve IL-10 serum seviyeleri arasındaki doğrusal korelasyonları incelemek için Pearson korelasyon analizi kullanılmıştır. Sonuçlar, miR-146a ekspresyonunun TNSS skoru, RQLQ skoru ve IgE, IL-4 ve IL-6 serum seviyeleri ile anlamlı derecede negatif korelasyon gösterdiğini, IL-10 serum seviyesi ile ise pozitif korelasyon gösterdiğini belirtmiştir (Tablo 3). Bu bulgular, miR-146a ekspresyon seviyesinin AR şiddetinin yanı sıra alerjik reaksiyon ve inflamasyon seviyeleriyle yakından ilişkili olduğunu göstermektedir.
Alerjik Rinit için Risk Faktörü Analizi
AR'nin risk faktörlerini analiz etmek için tek değişkenli lojistik regresyon kullanılmıştır ve sonuçlar IgE (OR = 1.719, 95% CI = 1.151-2.568, p = 0.008), IL-4 (OR = 1.602, 95% CI = 1.073-2.392, p = 0.021), IL-6 (OR = 1.566, 95% CI = 1.048-2.341, p = 0.029), IL-10 (OR = 0.649, 95% CI = 0.435-0.968, p = 0.034) ve miR-146a ekspresyonunun (OR = 0.149, 95% CI = 0.096-0.233, p < 0.001) AR gelişimi üzerinde etkili olduğunu göstermiştir. Çok değişkenli lojistik regresyon analizi aracılığıyla karıştırıcı faktörler kontrol edildikten sonra, IgE (OR=1.724, 95% CI = 1.092-2.722, p = 0.019), IL-4 (OR = 1.943, 95% CI = 1.206-3.131, p = 0.006), IL-10 (OR = 0.479, 95% CI = 0.296-0.773, p = 0.003) ve miR-146a ekspresyonunun (OR = 0.148, 95% CI = 0.093-0.235, p < 0.001) AR için bağımsız risk faktörleri olduğu istatistiksel olarak saptanmıştır (Tablo 4).
Şekil 1: İş akışının şematik diyagramı. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 2. AR'de plazma miR-146a ekspresyonu ve tanısal performans.
(A) AR olmayan gönüllülerde ve AR'li hastalarda göreli plazma miR-146a ekspresyonu. (B) Plazma miR-146a'nın AR için tanısal performansını değerlendiren ROC eğrisi. (C) AR olmayan gruptaki GG, GC ve CC genotip alt grupları arasında plazma miR-146a ekspresyonu. (D) AR grubundaki GG, GC ve CC genotip alt grupları arasında plazma miR-146a ekspresyonu. Veriler ortalama ± SD olarak sunulmuştur. ***p < 0.001. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3. Non-AR ve AR gruplarında miR-146a rs2910164'ün farklı genotiplerine sahip deneklerin serum sitokin konsantrasyonları.
Non-AR ve AR gruplarının GG, GC ve CC genotip alt gruplarında (A) IgE, (B) IL-4, (C) IL-6 ve (D) IL-10 serum seviyeleri. Veriler ortalama ± SD olarak sunulmuştur. *p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001; ns, anlamlı değil. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
| Bilgi | AR-dışı | Artırılmış Gerçeklik | p-değeri |
| Yaş (yıl) | 42.37±12.43 | 41.81±11.86 | 0.316 |
| VKİ (kg/m²2) | 23.72±2.36 | 23.58±2.71 | 0.302 |
| Cinsiyet (erkek, n) | 87 | 97 | 0.641 |
| Sigara İçen | 81 | 94 | 0.929 |
| IgE (IU/ml) | 36.17±10.44 | 116.52±24.38 | <0.001 |
| IL-4 (ng/L) | 1.76±0.61 | 18.74±4.62 | <0.001 |
| IL-6 (ng/L) | 1.29±0.57 | 9.63±3.79 | <0.001 |
| IL-10 (ng/L) | 3.26±0.68 | 1.74±0.73 | <0.001 |
| TNSS | / | 5.92±1.82 | |
| RQLQ | / | 2.43±1.16 | |
| Kısaltmalar: AR, Alerjik rinit; BMI, Vücut Kitle İndeksi; IgE, İmmünoglobulin E; IL, İnterlökin; TNSS, Toplam Nazal Semptom Skoru; RQLQ, Rinokonjonktivit Yaşam Kalitesi Anketi; p<0,05 istatistiksel anlamlılığı belirtir. | |||
Tablo 1: Çalışma katılımcılarının klinik özellikleri.
Non-AR ve AR grupları arasındaki demografik özelliklerin, serum sitokin seviyelerinin ve klinik değerlendirme skorlarının karşılaştırması. Kısaltmalar tablo dipnotunda tanımlanmıştır.
| rs2910164 | AR-olmayan (n=180) (%) | AR (n=211) (%) | Χ2 | p-değeri | OR (%95 GA) |
| Kodominant model | |||||
| GG | 31 (17.22%) | 57 (27.01%) | 1 | ||
| Gaz Kromatografisi | 82 (45.56%) | 96 (45.50%) | 2.832 | 0.092 | 0.637 (0.376-1.079) |
| CC | 67 (37.22%) | 58 (27.49%) | 7.018 | 0.008 | 0.471 (0.269-0.825) |
| Baskın model | |||||
| GG+ GC | 113 (62.78%) | 153 (72.51%) | 1 | ||
| CC | 67 (38.22%) | 58 (27.49%) | 4.232 | 0.04 | 0.639 (0.417-0.980) |
| Resesif model | |||||
| GG | 31 (17.22%) | 57 (27.01%) | 1 | ||
| GC + CC | 149 (82.78%) | 154 (72.99%) | 5.34 | 0.021 | 0.562 (0.344-0.919) |
| Aleller | |||||
| G | 144 (40.00%) | 210 (49.76%) | 1 | ||
| C | 216 (60.00%) | 212 (50.24%) | 7.474 | 0.006 | 0.637 (0.506-0.894) |
| pHWE | 0.494 | 0.191 | |||
| Kısaltmalar: AR, Alerjik rinit. OR, Odds Oranı; pHardy-Weinberg Dengesi>0,05 değeri, grubun Hardy-Weinberg dengesi ile uyumlu olduğunu göstermektedir. p < 0,05 istatistiksel anlamlılığı ifade eder. Not: Tüm genetik modeller için referans grup olarak GG genotipi belirlenmiştir (OR = 1,000). | |||||
Tablo 2: miR-146a rs2910164 polimorfizmi ile alerjik rinit arasındaki ilişki.
Kodominant, dominant, resesif ve allel genetik modelleri kullanılarak analiz edilen AR olmayan ve AR gruplarındaki rs2910164 genotiplerinin ve allellerinin dağılımı.
| Ögeler | miR-146a | TNSS | RQLQ | IgE | IL-4 | IL-6 | IL-10 |
| Pearson korelasyonu | 1 | -0.742 | -0.736 | -0.806 | -0.756 | -0.727 | 0.757 |
| p-değeri | / | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | <0.001 |
| Kısaltmalar: TNSS, Toplam Nazal Semptom Skoru; RQLQ, Rinokonjonktivit Yaşam Kalitesi Anketi; IgE, İmmünoglobulin E; IL, İnterlökin; p<0,05 istatistiksel anlamlılığı belirtir. | |||||||
Tablo 3: Plazma miR-146a ekspresyonunun klinik ve inflamatuar parametrelerle korelasyonu.
Çalışma katılımcılarında plazma miR-146a ekspresyonunun TNSS skoru, RQLQ skoru, serum IgE seviyesi ve sitokin seviyeleri ile Pearson korelasyon analizi.
| Ögeler | Tek değişkenli regresyon analizi | Çok değişkenli regresyon analizi | ||||
| VEYA | %95 GA | p-değeri | VEYA | %95 GA | p-değeri | |
| Yaş | 0.984 | 0.661-1.465 | 0.937 | |||
| VKİ | 1.301 | 0.799-2.119 | 0.29 | |||
| Cinsiyet | 1.099 | 0.738-1.638 | 0.641 | |||
| Sigara İçen | 1.018 | 0.683-1.519 | 0.929 | |||
| IgE | 1.719 | 1.151-2.568 | 0.008 | 1.724 | 1.092-2.722 | 0.019 |
| IL-4 | 1.602 | 1.073-2.392 | 0.021 | 1.943 | 1.206-3.131 | 0.006 |
| IL-6 | 1.566 | 1.048-2.341 | 0.029 | 1.489 | 0.924-2.353 | 0.088 |
| IL-10 | 0.649 | 0.435-0.968 | 0.034 | 0.479 | 0.296-0.773 | 0.003 |
| miR-146a ekspresyonu | 0.149 | 0.096-0.233 | <0.001 | 0.148 | 0.093-0.235 | <0.001 |
| Kısaltmalar: AR, Alerjik rinit; BMI, Vücut Kitle İndeksi; IgE, İmmünoglobulin E; IL, İnterlökin. | ||||||
Tablo 4: Alerjik rinit ile ilişkili faktörlerin lojistik regresyon analizi.
Demografik değişkenleri, serum sitokinlerini ve plazma miR-146a ekspresyonunu AR ile ilişkili faktörler olarak değerlendiren tek değişkenli ve çok değişkenli lojistik regresyon analizleri.
Ek Dosya 1: Ham Veriler Bu dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayın.
Tartışma
AR, solunum yollarının kronik alerjik inflamatuar bir hastalığıdır. AR'nin temel mekanizması, vücudun alerjenlere maruz kalmasının ardından nazal mukozadaki inflamatuar lezyonların IgE tarafından aracılanmasıdır17,18. Klinik semptomlar temel olarak burun kaşıntısı, burun tıkanıklığı, hapşırma ve berrak burun akıntısını içerir ve bunlar hastaların yaşam kalitesini ciddi şekilde bozar. Epidemiyolojik ve genetik çalışmalar, genetik yatkınlığın AR'nin başlangıcı ve gelişimi üzerinde hayati ve vazgeçilmez bir etkiye sahip olduğunu doğrulamıştır19. Bu çalışma ayrıca miR-146a rs2910164 polimorfizminin AR'ye yatkınlıkla yakından ilişkili olduğunu ve rs2910164'ün GG genotipinin patojenik genotip olabileceğini ortaya koymuştur. AR'li hastalarda gözlenen IgE, IL-4 ve IL-6'nın yükselmiş serum konsantrasyonları ile azalmış IL-10 seviyeleri, hastalığın immünopatolojik özellikleriyle uyumlu olan artmış alerjik ve inflamatuar yanıtları göstermektedir.
Önceki çalışmalar, miR-146a SNP'sinin romatoid artrit20, sistemik lupus eritematozus21 ve inflamatuar bağırsak hastalığı22 gibi çeşitli alerjik hastalıkların patogenezine katkıda bulunduğunu göstermiştir. Rasha ve ark., rs2910164 lokusundaki GG genotipi frekansının ve G alelinin dağılımının inflamatuar bağırsak hastalığına yatkınlıkla anlamlı şekilde ilişkili olduğunu bildirmişlerdir22. Hai-Bo ekibi, rs2910164 lokusundaki CC genotipinin sedef hastalığı (psoriasis) için koruyucu bir genotip olduğunu keşfetmiştir. GG genotipini taşıyan bireylerde sedef hastalığı gelişme riski anlamlı derecede daha düşüktür23. Çok sayıda çalışma, rs2910164 polimorfizminin astım yatkınlığı ile yakından ilişkili olduğunu bildirmiş ve GG genotipinin astım gelişme riskini anlamlı şekilde artırdığı onaylanmıştır15,16,24. Bu çalışma ayrıca, AR hastalarında miR-146a rs2910164 GG genotipinin dağılım frekansının sağlıklı kontrol grubuna göre daha yüksek olduğunu ortaya koymuş ve GG genotipinin AR'ye yatkınlığı artırabileceğini göstermiştir. AR grubunda GG genotipinin ve G alelinin gözlemlenen zenginleşmesi, miR-146a rs2910164 genetik varyasyonunun hastalık yatkınlığına potansiyel katkısını daha da desteklemektedir. rs2910164 GG genotipini taşıyan AR hastaları için serum IgE, IL-4, IL-6 ve IL-10 konsantrasyonları artmıştır. GG genotipini taşıyan bireylerde gözlemlenen değişmiş sitokin profili, daha güçlü bir inflamatuar ve alerjik yanıtın olduğunu göstermektedir ve bu durum artan hastalık yatkınlığına katkıda bulunabilir. Bu sonuç, GG genotipinin alerjik ve inflamatuar yanıtı güçlendirerek AR'nin patogenezinde rol oynayabileceğini düşündürmektedir.
İnflamatuar yanıtın temel bir düzenleyicisi olan miR-146a, güçlü bir anti-inflamatuar etki gösterir. miR-146a'nın aşırı ekspresyonu, aşağı akış genlerini düzenler ve inflamasyonla ilişkili birçok hasarı önemli ölçüde hafifletir25,26,27. Önceki çalışmalar, miR-146a'nın aşırı ekspresyonunun, transkripsiyon faktörü forkhead box protein 3 (FOXP3) ekspresyonunu yukarı regüle ederek alerjik konjunktivitin inflamatuar yanıtını etkili bir şekilde baskılayabildiğini doğrulamıştır28. Diğer hayvan deneyleri, mutant farelerde miR-146a nakavtunun, vahşi tip farelere kıyasla amfizem gelişme riskini artırdığını ortaya koymuş ve miR-146a'nın solunum yolu hastalıklarındaki koruyucu rolünü daha da doğrulamıştır29. Sinüzit modelinde miR-146a, Mucin5AC (MUC5AC) aktivasyonunu inhibe ederek mukozal inflamasyonu ve aşırı mukus salgısını azaltır13. Bu çalışma sonucunda, AR hastalarındaki miR-146a seviyesinin azaldığı ve rs2910164 GG genotipi taşıyan hastalarda plazma miR-146a ekspresyonunun daha da düşük olduğu görülmüştür. Bu bulgular, rs2910164 GG genotipinin, azalmış miR-146a ekspresyonu ve değişmiş immün düzenleme ile ilişkisi aracılığıyla AR duyarlılığını etkileyebileceğine işaret etmektedir. GG genotipi miR-146a ekspresyonunu azaltarak, onun anti-inflamatuar düzenleyici fonksiyonunu zayıflatabilir ve AR duyarlılığını artırabilir. Pearson korelasyon analizi, miR-146a ekspresyon seviyesi ile AR şiddeti ve inflamatuar durum arasındaki ilişkiyi daha detaylı olarak göstermiştir. miR-146a ekspresyonu; TNSS, RQLQ ve serum IgE, IL-4 ve IL-6 seviyeleri ile doğrusal negatif korelasyon, IL-10 seviyesi ile ise doğrusal pozitif korelasyon göstermiştir. Bu durum, daha düşük miR-146a ekspresyonuna sahip AR hastalarında klinik semptomların daha şiddetli olduğunu, yaşam kalitelerinin daha fazla bozulduğunu, alerjik reaksiyonların ve inflamatuar yanıtların ise daha güçlü olduğunu göstermektedir.
Bu çalışma bir vaka-kontrol çalışmasıydı. Analiz, miR-146a rs2910164 polimorfizmi ile AR duyarlılığı arasında anlamlı bir ilişki olduğunu doğrulamıştır. Bununla birlikte, araştırmanın hala belirli kısıtlamaları bulunmaktadır. Bir yandan, nispeten küçük olan örneklem büyüklüğü bulgularımızın genelleştirilebilirliğini kısıtlayabilir ve popülasyondaki rs2910164 genotipinin dağılım özelliklerini tam olarak tanımlayamayabilir. Öte yandan, bu çalışma yalnızca miR-146a rs2910164 polimorfizmi ile AR duyarlılığı arasındaki ilişkiyi göstermektedir ancak miR-146a rs2910164 polimorfizmi ile AR arasındaki nedensel ilişkiyi net bir şekilde ortaya koyamamaktadır. Bu nedenle, gelecekte daha fazla hastayı kapsayan prospektif bir kohort çalışması yürütülecek; miR-146a rs2910164 polimorfizmi ile AR'nin başlangıcı, seyri ve prognozu arasındaki ilişki açıklığa kavuşturulacak ve AR'nin önlenmesi ve tedavisi için daha yeterli bir teorik temel sağlanacaktır.
Genel olarak, AR'li hastalarda plazma miR-146a ekspresyonu azalmıştır ve rs2910164 GG genotipi artan hastalık duyarlılığı ile ilişkili bulunmuştur. Bu çalışma, AR açısından yüksek risk altındaki bireylerin belirlenmesi için potansiyel bir moleküler belirteç sunmakta ve hastalığın gelişimi ile ilerlemesinin altında yatan genetik mekanizmalara yönelik gelecekteki araştırmalar için bir temel oluşturmaktadır.
Açıklamalar
Bu makalede herhangi bir beyan bulunmamaktadır.
Veri kullanılabilirliği:
Bu çalışma sırasında üretilen veya analiz edilen tüm veriler, bu makaleye Ek dosya olarak eklenmiştir. Daha fazla bilgi için sorumlu yazara başvurulabilir.
Yazar katkısı:
YMY kavramlaştırma ve tasarıma, verilerin elde edilmesine veya verilerin analizine ve yorumlanmasına önemli katkılarda bulunmuş ve taslağın hazırlanmasında yer almıştır. YYH veri elde etme, veri analizi ve istatistiksel analiz konularında destek vermiştir. GML ve JCW sonuçların yorumlanmasına katkıda bulunmuş ve taslağı kritik bir şekilde gözden geçirmiştir. Tüm yazarlar nihai taslağı okumuş ve onaylamıştır.
Teşekkürler
Uygulanamaz.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 15 mL santrifüj tüpü | Corning | 430791 | Plazma ayrıştırma, numune alt paketleme ve nükleik asit ekstraksiyon işlemi için |
| Applied Biosystems TaqMan Genotiplendirme Master Mix | Thermo Fisher Scientific | 4371355 | 2× hot-start Taq polimeraz, dNTP'ler, magnezyum iyonları, reaksiyon tamponu ve ROX referans boyası içeren, SNP genotipleme için optimize edilmiş konsantre master mix. Manuel sistem hazırlığı gerektirmez. Yukarıda belirtilen TaqMan SNP Genotipleme Analizi ile uyumlu olup; SNP amplifikasyonu ve floresan genotipleme için yüksek tekrarlanabilirlik ve net kümeleme sonuçları sağlayan stabil bir enzimatik reaksiyon sistemi sunar. |
| Applied Biosystems TaqMan SNP Genotipleme Analizi (rs2910164, miR-146a) | Thermo Fisher Scientific | C__15946974_10 | İnsan miR-146a rs2910164 lokusunun SNP genotiplendirmesi için önceden tasarlanmış primer ve prob karışımı. Spesifik PCR primerleri ve iki MGB floresan prob içerir. VIC C alelini, FAM ise G alelini işaretler. qPCR cihazlarında uç nokta allelik ayrımı için uygun olup, tek bir reaksiyon tüpünde üç genotipi (CC, CG, GG) doğru bir şekilde ayırt edebilir. |
| BD Lityum Heparin Antikoagülan Kan Toplama Tüpleri | BD Vacutainer | 367884 | Klinik biyokimya, acil testler ve hematoloji araştırmaları |
| Graphpad | ABD | / | Profesyonel bilimsel grafik çizimi & istatistik yazılımı, biyoloji/tıp için standart, kodlama gerektirmez. Temel güçlü yönleri: t-testleri, ANOVA, sağkalım analizi, doğrusal olmayan regresyon (örneğin, doz-yanıt eğrileri); qPCR, Western Blot ve hücre deneyleri için yayına hazır grafikler (sütun, dağılım, sağkalım eğrileri) oluşturur. |
| İmmünoglobulin E (IgE) ELISA Kiti | Jiancheng | H108-1-2 | Uygulama: İmmün yanıt, alerjik hastalık araştırmaları |
| İnterlökin-10 (IL-10) ELISA Kiti | Jiancheng | H010-1-2 | Uygulama: İnflamasyon, immün regülasyon, klinik biyobelirteç araştırmaları |
| İnterlökin-4 (IL-4) ELISA Kiti | Jiancheng | H005-1-2 | Araştırma alanı: İnflamasyon, Th2 bağışıklık yanıtı, alerjik reaksiyon |
| İnterlökin-6 (IL-6) ELISA Kiti | Jiancheng | H007-1-2 | Uygulama: İnflamasyon, immün regülasyon, klinik biyobelirteç araştırmaları |
| LightCycler 480 Yazılımı (v1.5 /v1.6) | Roche Diagnostics | / | Tek tıklamayla qPCR veri elde etme, kantitatif analiz, erime eğrisi analizi ve SNP genotipleme (TaqMan uç nokta yöntemi + HRM) imkanı sağlayan resmi Roche yazılımı. |
| miRcute Geliştirilmiş miRNA cDNA İlk Zincir Sentez Kiti | TIANGEN | KR211-02 | Tüm olgun miRNA ters transkripsiyon işlemleri için uygundur |
| miRcute Serum/Plasma miRNA Ekstraksiyon ve İzolasyon Kiti | TIANGEN | DP503 | Uygulanabilir örnek: İnsan serumu, plazması, hücre süpernatantı |
| Roche LightCycler 480 Instrument II (Gerçek Zamanlı PCR Sistemi) | Roche Diagnostics | 05015278001 | qPCR Kantifikasyonu + SNP Genotiplemesi (TaqMan dahil) + HRM Yüksek Çözünürlüklü Erime Eğrisi Analizi |
| SPSS 27.0 | ABD | / | Kapsamlı sosyal bilimler/tıbbi istatistik yazılımı, menü tabanlı (kodlama gerektirmez), geniş örneklemler için idealdir & karmaşık tasarımlar. Temel özellikler: tanımlayıcı istatistikler, ANOVA, regresyon, ki-kare, sağkalım analizi, güvenirlik, örneklem büyüklüğü hesaplaması; veri temizlemeyi destekler & klinik, anket ve epidemiyolojik veriler için çok formatlı içe aktarma (Excel/CSV). |
| SuperReal PreMix Plus (SYBR Green) | TIANGEN | FP205-02 | Yüksek özgüllükle geliştirilmiş master mix; H-bağı faktörü ile optimize edilmiş tampon, primer dimerlerini minimize eder & spesifik olmayanlar; LightCycler 480 II için hot-start Taq + ROX; yüksek hassasiyet & tekrarlanabilirlik; düşük bolluktaki genler, karmaşık örnekler ve yüksek kapasiteli genotipleme için idealdir. |
| Thermo Scientific Multiskan FC Mikroplaka Fotometresi | Thermo | 51119180 | Üst segment çok modlu plaka okuyucu; absorbans (450 nm dahil) + floresans + lüminesans; doğrusallık 0–4 Abs (±%2) 450 nm'de, kesinlik SD&<0,001 Abs; 96/384 kuyucuk uyumlu, otomatik dinamik aralık; ELISA, hücre canlılığı, immünosayımlar, moleküler etkileşimler için idealdir. |
| Thermo Scientific NanoDrop One UV-Vis Spektrofotometre | Thermo | / | Altın standart mikrohacimli UV-Vis spektrofotometre; 1–2 μL örnek, küvet gerekmez; nükleik asitleri (260 nm), proteinleri (280 nm) ve konsantrasyonla birlikte OD600'ü doğrudan ölçer & saflık oranları (A260/A280, A260/A230); 190 nm'den başlayan tam spektrum taraması–850 nm, otomatik kalibrasyon, dokunmatik ekran; qPCR, NGS, protein saflaştırma kalite kontrolü için idealdir. |
| Tam kan genomik DNA ekstraksiyon kiti | TIANGEN | DP304-03 | Uygulanabilir örnek: Periferik tam kan, kan hücreleri, doku örnekleri |
Kaynaklar
- Bernstein, J. A., Bernstein, J. S., Makol, R. & Ward, S. Allergic Rhinitis: A Review. JAMA. 331 (10), 866-877, (2024).
- Brozek, J. L. et al. Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma (ARIA) guidelines-2016 revision. J Allergy Clin Immunol. 140 (4), 950-958, (2017).
- Pagel, J. M. L. & Mattos, J. L. Allergic Rhinitis and Its Effect on Sleep. Otolaryngol Clin North Am. 57 (2), 319-328, (2024).
- Nappi, E. et al. Comorbid allergic rhinitis and asthma: important clinical considerations. Expert Rev Clin Immunol. 18 (7), 747-758, (2022).
- Grimm, D., Hwang, P. H. & Lin, Y. T. The link between allergic rhinitis and chronic rhinosinusitis. Curr Opin Otolaryngol Head Neck Surg. 31 (1), 3-10, (2023).
- Wise, S. K. et al. International consensus statement on allergy and rhinology: Allergic rhinitis - 2023. Int Forum Allergy Rhinol. 13 (4), 293-859, (2023).
- Vignal, A., Milan, D., SanCristobal, M. & Eggen, A. A review on SNP and other types of molecular markers and their use in animal genetics. Genet Sel Evol. 34 (3), 275-305, (2002).
- Falahi, S. et al. Association between IL-33 Gene Polymorphism (Rs7044343) and Risk of Allergic Rhinitis. Immunol Invest. 51 (1), 29-39, (2022).
- Kamel, M. A. et al. Association of serum CD14 level and functional polymorphism C-159T in the promoter region of CD14 gene with allergic rhinitis. Clin Exp Med. 23 (8), 4861-4869, (2023).
- Vishnoi, A. & Rani, S. miRNA Biogenesis and Regulation of Diseases: An Updated Overview. Methods Mol Biol. 2595 1-12, (2023).
- Vijayakumar, S., Yesudhason, B. V., Anandharaj, J. L., Kalaivanan, L. & Selvan Christyraj, J. R. S. Exosomes and Their miRNA as a Potential Biomarker in the Diagnosis of Parkinson's Disease. ACS Chem Neurosci. 16 (15), 2756-2766, (2025).
- Han, S., Ma, C., Bao, L., Lv, L. & Huang, M. miR-146a Mimics Attenuate Allergic Airway Inflammation by Impacted Group 2 Innate Lymphoid Cells in an Ovalbumin-Induced Asthma Mouse Model. Int Arch Allergy Immunol. 177 (4), 302-310, (2018).
- Yan, D. et al. Human Neutrophil Elastase Induces MUC5AC Overexpression in Chronic Rhinosinusitis Through miR-146a. Am J Rhinol Allergy. 34 (1), 59-69, (2020).
- Wang, J. et al. MiR-146a mimic attenuates murine allergic rhinitis by downregulating TLR4/TRAF6/NF-kappaB pathway. Immunotherapy. 11 (13), 1095-1105, (2019).
- Trinh, H. K. T. et al. Association of the miR-196a2, miR-146a, and miR-499 Polymorphisms with Asthma Phenotypes in a Korean Population. Mol Diagn Ther. 21 (5), 547-554, (2017).
- Jimenez-Morales, S. et al. MiR-146a polymorphism is associated with asthma but not with systemic lupus erythematosus and juvenile rheumatoid arthritis in Mexican patients. Tissue Antigens. 80 (4), 317-321, (2012).
- Bayar Muluk, N., Bafaqeeh, S. A. & Cingi, C. Anti-IgE treatment in allergic rhinitis. Int J Pediatr Otorhinolaryngol. 127 109674, (2019).
- Lv, R. et al. Research progress of anti-IGE treatment for allergic rhinitis. Am J Otolaryngol. 46 (3), 104646, (2025).
- Davila, I. et al. Genetic aspects of allergic rhinitis. J Investig Allergol Clin Immunol. 19 Suppl 1 25-31, (2009).
- Bogunia-Kubik, K. et al. Significance of Polymorphism and Expression of miR-146a and NFkB1 Genetic Variants in Patients with Rheumatoid Arthritis. Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 64 (Suppl 1), 131-136, (2016).
- El-Akhras, B. A. et al. mir-146a genetic polymorphisms in systemic lupus erythematosus patients: Correlation with disease manifestations. Noncoding RNA Res. 7 (3), 142-149, (2022).
- Ghorab, R. A. et al. MiR-146a (rs2910164) Gene Polymorphism and Its Impact on Circulating MiR-146a Levels in Patients with Inflammatory Bowel Diseases. Inflammation. 48 (3), 1193-1205, (2025).
- Gong, H. B., Zhang, S. L., Wu, X. J., Pu, X. M. & Kang, X. J. Association of rs2910164 polymorphism in MiR-146a gene with psoriasis susceptibility: A meta-analysis. Medicine (Baltimore). 98 (6), e14401, (2019).
- Dong, J., Sun, D. & Lu, F. Association of two polymorphisms of miRNA-146a rs2910164 (G > C) and miRNA-499 rs3746444 (T > C) with asthma: a meta-analysis. J Asthma. 58 (8), 995-1002, (2021).
- Zhou, Z., Zhu, Y., Gao, G. & Zhang, Y. Long noncoding RNA SNHG16 targets miR-146a-5p/CCL5 to regulate LPS-induced WI-38 cell apoptosis and inflammation in acute pneumonia. Life Sci. 228 189-197, (2019).
- Olivieri, F. et al. miR-21 and miR-146a: The microRNAs of inflammaging and age-related diseases. Ageing Res Rev. 70 101374, (2021).
- Xiong, J. R. et al. miR-146a Regulates Neuroinflammation and Immune Cell Function in Neurodegenerative Diseases. Curr Med Sci. 45 (4), 725-744, (2025).
- Guo, H. et al. MiR-146a upregulates FOXP3 and suppresses inflammation by targeting HIPK3/STAT3 in allergic conjunctivitis. Ann Transl Med. 10 (6), 344, (2022).
- Yoshikawa, H. et al. miR-146a regulates emphysema formation and abnormal inflammation in the lungs of two mouse models. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 326 (1), L98-L110, (2024).