Farelerde birinci mandibuler molar dişin çekimi için modifiye bir yaklaşım açıklanmış ve prosedürel verimlilik ile tekrarlanabilirliği değerlendirmek amacıyla geleneksel yaklaşımla karşılaştırılmıştır. Modifiye yaklaşım, prosedürel tutarlılığı artırmakta ve bir fare mandibuler diş soketi iyileşme modeli oluşturulmasındaki teknik zorlukları azaltmaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bir Fare Mandibular Diş Soketi İyileşme Modelinde Prosedürel Verimliliği ve Tutarlılığı Artırmak İçin Modifiye Edilmiş Bir Diş Çekim Yaklaşımı
Bu makalede
Özet
Özet
Diş soketi iyileşme modeli (TSHM), kemik rejenerasyonunun altında yatan moleküler mekanizmaları araştırmak için yaygın olarak kullanılan bir hayvan modelidir. Fare mandibuler TSHM, mandibula spesifik patolojik süreçlerin incelenmesi açısından değerli olsa da, mandibuler molar bölgenin anatomik ve biyomekanik özellikleri nedeniyle bu modelin kurulması teknik açıdan zorlayıcı olmaya devam etmektedir. Bu protokol, prosedürel verimliliği ve tekrarlanabilirliği artırmak amacıyla farelerde mandibuler birinci molar ekstraksiyonu için modifiye edilmiş bir yaklaşımı tanımlamakta ve performansını geleneksel teknikle karşılaştırmaktadır. Kontrollü deneysel koşullar altında, modifiye yaklaşım ortalama ekstraksiyon süresini 29 dakikadan 10 dakikaya önemli ölçüde indirmiştir. Ayrıca, modifiye grubunda kök ve alveolar kemik kırıkları dahil olmak üzere ekstraksiyonla ilişkili daha az komplikasyon görülmüş, bu da prosedürel tutarlılığın arttığını göstermiştir. Mikro bilgisayarlı tomografi (μCT) analizi, erken iyileşme sırasında ekstraksiyon soketi mimarisinin daha iyi korunduğunu daha net bir şekilde ortaya koymuştur. Bu bulgular, modifiye ekstraksiyon yaklaşımının, fare mandibuler diş ekstraksiyonu ile ilişkili teknik zorlukları azaltırken prosedürel verimliliği ve tekrarlanabilirliği artırdığını göstermektedir. Bu protokol, özellikle sınırlı mikrocerrahi deneyimine sahip araştırmacılar için fare mandibuler diş soketi iyileşme modellerinin daha tutarlı bir şekilde kurulmasını kolaylaştırabilir.
Giriş
Diş soketi iyileşme modeli (TSHM), kemik rejenerasyonunu incelemek için kullanılan klasik bir modeldir1. Bu model, alveolar kemik içerisinde zorlayıcı ancak kritik altı bir yaralanma oluşturarak, ek bir müdahale olmaksızın uygun doğal iyileşmenin gerçekleşmesini sağlar1. Fareler; genetik arka planları, kemik metabolizmalarının insanlara benzerliği, nispeten düşük üretim maliyetleri ve bakım kolaylıkları nedeniyle model organizmalar olarak yaygın şekilde kullanılmaktadır2. Geçtiğimiz birkaç on yıl boyunca, gen düzenleme teknolojisindeki hızlı ilerlemeler, fareleri kemik rejenerasyonunun altında yatan moleküler mekanizmaların araştırılmasında vazgeçilmez hale getirmiştir3. Sonuç olarak, transgenik farelerde azı dişlerinin çekimi, kemik rejenerasyonunun düzenleyici mekanizmalarını incelemek amacıyla TSHM oluşturmak için yaygın olarak kullanılmıştır4,5,6.
Önceki çalışmaların çoğu, mandibula maksillaya göre mekanik olarak daha sert ve daha az esnek olduğu için7 diş çekiminin teknik zorluğunu artırması nedeniyle, fare TSHM modellerini maksilla kullanarak oluşturmuştur4,5,6. Ek olarak, maksiller molar çekimi için cerrahi alan nispeten daha erişilebilirdir ve maksillayı stabilize etmek mandibulaya göre daha kolaydır, bu da prosedürü teknik olarak daha az zahmetli hale getirir. Bu zorluklara rağmen, fare mandibuler birinci molar dişinin kavisli ve genişlemiş apikal kök morfolojisi, çevre alveol kemiği içindeki mekanik tutunmayı artırarak8,9 çekim işlemini daha da karmaşık hale getirir (Şekil 1). Buna rağmen, mandibuler çekim modelleri; osteomiyelit, ilaçla ilişkili çene osteonekrozu, implant osseointegrasyonu ve biyomalzemeler kullanılarak yapılan kemik rejenerasyonu dahil olmak üzere mandibula spesifik patolojik süreçlerin araştırılması için vazgeçilmez olmaya devam etmektedir10,1,12. Bu nedenle, mandibula spesifik diş soketi iyileşme modelleri gerektiren çalışmalar için farelerde mandibuler molarların çekimine yönelik tekrarlanabilir ve güvenilir bir yöntem önemlidir.
Şekil 1İnsanlarda ve farelerde diş morfolojisinin şematik karşılaştırması.
(A) Yetişkin bir insan dişinin şematik gösterimi. (B) Ergen bir farenin alt çene birinci azı dişinin şematik gösterimi. (C) Yetişkin bir farenin alt çene birinci azı dişinin şematik gösterimi. Diyagramlar, yetişkin fare alt çene birinci azı dişlerinin alveolar kemik içindeki artmış mekanik tutunmasına katkıda bulunan kök morfolojisi ve sement dağılımındaki farkları vurgulamaktadır. Mine, dentin ve sement, anahtarda gösterilen karşılık gelen renklerle belirtilmiştir. Anatomik özellikler, yayınlanmış tanımlamalara dayanmaktadır.8,9,15. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Araştırma grubumuz tarafından daha önce geliştirilen bir diş çekim tekniği, dental elevatörlere dönüştürülmüş şırıngalar kullanmaktadır13. Bu yöntem farelerde sağ mandibuler birinci molar dişin başarılı bir şekilde çekilmesine olanak tanısa da, yüksek düzeyde teknik hassasiyet gerektirmekte ve kapsamlı pratik talep eden dik bir öğrenme eğrisine sahiptir. Deneyimsiz operatörler, komşu anatomik yapılarda istenmeden yaralanmalara neden olabilirler. Ek olarak, sol mandibuler birinci molar dişin çekimi, prosedürel yetkinliği kazanmak için ek bir "ayna görüntüsü" eğitimi gerektirir. Bu zorluklar, çekim soketinin bütünlüğünü bozabilir, hayvanlar arasındaki iyileşme sonuçlarının tutarlılığını azaltabilir ve mikrocerrahi deneyimi sınırlı olan araştırmacıların modele erişimini kısıtlayabilir.
Bu protokol, prosedür erişilebilirliğini ve tekrarlanabilirliğini artırmak amacıyla farelerde mandibular birinci molar dişin çekimi için modifiye edilmiş bir yaklaşımı tanımlamaktadır. Protokol, mandibular birinci molar TSHM oluşturmak için 8 haftalık erkek C57BL/6 farelerde valide edilmiştir. Modifiye yaklaşım; prosedür verimliliğini, çekim başarısını ve prosedürle ilgili komplikasyonları değerlendirmek için geleneksel teknikle sistematik olarak karşılaştırılmıştır. Ayrıca, murine mandibular TSHM oluşturan araştırmacılara pratik rehberlik sağlamak amacıyla yöntem edinimi sırasında karşılaşılan yaygın teknik hata modları analiz edilmiştir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Tüm prosedürler, Sichuan Üniversitesi West China Stomatoloji Fakültesi Etik Kurulu tarafından onaylanmış (WCHSIRB-D-2025-18) ve kurumsal hayvan bakım kılavuzlarına uygun olarak gerçekleştirilmiştir.
NOT: 2–29 g ağırlığında, 8 haftalık erkek C57BL/6 fareler kullanın. Hayvanları standart barındırma koşulları altında (21°C–24°C, %40–%60 nem ve 12 saatlik ışık-karanlık döngüsü), standart yem diyeti ve ad libitum su ile besleyin. Materyaller Tablosunda listelenen malzeme ve aletleri kullanın. Karşılaştırmalı değerlendirme ve başarısız vakaların sunumu için 24 fare kullanın. Karşılaştırmalı deneyden önce operatör eğitimi için ek fareler kullanın.
1. Cerrahi öncesi hazırlık
- Enstrüman hazırlığı
- Elevatör olarak kullanmak üzere 25 G şırınga iğnelerini hazırlayın (isteğe bağlı). Her iğnenin eğimli ucunu yaklaşık 20°–40° bükün13.
- Dental pens olarak kullanmak üzere dişli oftalmik pensetleri hazırlayın. Dişlerin düzgün hizalandığını ve deformasyon olmadığını doğrulamak için dişli ucu büyütme altında inceleyin.
- Bir adet lastik bant ve dört adet 25 G şırınga iğnesi kullanarak bir ağız retraktörü oluşturun. Operasyon platformu olarak bir köpük levha veya karton, fare uzuvlarını sabitlemek için bant ve cerrahi alanı aydınlatmak için bir kafa lambası hazırlayın.
- Postoperatif iyileşme için bir ısıtma pedi hazırlayın ve cerrahi öncesinde yaklaşık 38°C'ye kadar ön ısıtma yapın. Hemostaz için pamuk topları ve ağız boşluğunu temizlemek için uygun miktarda salin solüsyonu hazırlayın.
- Ekstraksiyon prosedürü sırasında operatörü korumak ve başparmağı örtmek için bir parmak kılıfı hazırlayın.
- Steril alanı korumak için operasyon yüzeyinin ve ısıtma pedinin üzerine steril dokunmamış kumaş yerleştirin.
- Anestezi hazırlığı
- Povidon–iyot antiseptik solüsyonuna batırılmış bir pamuk topu kullanarak fare karnını dezenfekte edin. İntraperitonal olarak %1 pentobarbital sodyum (50 mg/kg) uygulayın14. Anestezi derinliğini ayak parmağı sıkıştırma testi ile değerlendirin ve gerektiğinde ek anestezi uygulayın.
NOT: Ayak parmağı sıkıştırma refleksi geri dönerse veya prosedür beklenen anestezik süresine yaklaşırsa, prosedürü durdurun ve onaylanmış kurumsal veteriner protokolüne göre ek anestezi uygulayın. - Kornea kurumasını önlemek için anesteziden hemen sonra her iki göze veteriner oftalmik pomad uygulayın.
- Povidon–iyot antiseptik solüsyonuna batırılmış bir pamuk topu kullanarak fare karnını dezenfekte edin. İntraperitonal olarak %1 pentobarbital sodyum (50 mg/kg) uygulayın14. Anestezi derinliğini ayak parmağı sıkıştırma testi ile değerlendirin ve gerektiğinde ek anestezi uygulayın.
- Dezenfeksiyon ve sterilizasyon hazırlığı
- Cerrahi platformu, ısıtma pedini, bandı, parmak kılıfını ve çevre çalışma alanını %75 etanol ile dezenfekte edin. Her fare için yeni steril pamuklu çubuklar, dokunmamış kumaş, lastik bantlar ve iğneler kullanın. Dişli pensetleri ve salin solüsyonunu kullanmadan önce standart kurumsal buhar sterilizasyon protokolünü kullanarak sterilize edin.
DİKKAT: %75 etanol yanıcıdır. Isı, kıvılcım, açık alev ve diğer tutuşma kaynaklarından uzak, iyi havalandırılan bir alanda kullanın. Uygun kişisel koruyucu ekipman giyin. Prosedüre başlamadan önce etanol ile işlenmiş enstrümanların ve yüzeylerin tamamen kurumasını bekleyin. - Prosedüre başlamadan önce el hijyeni sağlayın. Temiz cerrahi scrublar, steril bir cerrahi bone, cerrahi maske ve steril eldivenler giyin.
- Cerrahi platformu, ısıtma pedini, bandı, parmak kılıfını ve çevre çalışma alanını %75 etanol ile dezenfekte edin. Her fare için yeni steril pamuklu çubuklar, dokunmamış kumaş, lastik bantlar ve iğneler kullanın. Dişli pensetleri ve salin solüsyonunu kullanmadan önce standart kurumsal buhar sterilizasyon protokolünü kullanarak sterilize edin.
2. Cerrahi süreç
- Farelerin fiksasyonu ve temizliği
- Fareyi fiksasyon plakasına sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve uzuvlarını bantla sabitleyin. Orbital-kulak düzlemi seviyesindeki köpük levhaya iki adet 25 G iğne yerleştirin ve mandibulanın altına iki adet ek 25 G iğne yerleştirin.
- Ağzı açık tutmak için lastiği iğnelerin üzerine ve kesici dişlerin üzerinden geçirin. Cerrahi alanın tıkanmasını önlemek için dili nazikçe geri çekin ve ekstraksiyon bölgesinin karşı tarafına konumlandırın. Bu protokol boyunca temsilci örnek olarak sağ mandibuler birinci molar dişi kullanın.
- Oral kavitedeki gıda artıklarını ve diğer yabancı maddeleri, salin solüsyonu ile nemlendirilmiş küçük bir pamuk yumağı kullanarak temizleyin.
NOT: Fazla salini uzaklaştırmak ve boğulmaya neden olabilecek sıvının oral kaviteye girmesini önlemek için pamuk yumağını iyice sıkın.
- Distal ve mezial direncin ortadan kaldırılması (isteğe bağlı)
- Ağzın sağ köşesini geri çekmek ve sağ mandibuler birinci molar dişi ile çevredeki bukkal ve lingual yumuşak dokuları tamamen açığa çıkarmak için sol elinizle pens kullanın.
- Pensle sağ eliyle tutun. Ardından, sol elinizle bir 25 G iğne tutun ve periodontal ligament boşluğu oluşturmak için iğneyi dikkatlice distal kökün bitişiğindeki bukkal periodontal ligamente yerleştirin.
- Kökü alveolar soketten gevşetmek için, iğneyi mezial ve lingual yönde molara doğru döndürken yavaşça periapikal bölgeye doğru ilerletin.
- Bukkal taraftan bir 25 G iğneyi kök furkasyonuna yerleştirin ve sol elinizle oklüzal yönde yükseltin. Sağ elinizle, mezial kökün bitişiğindeki lingual periodontal ligamente ikinci bir 25 G iğne yerleştirerek bir periodontal ligament boşluğu oluşturun, ardından iğneyi distal ve bukkal yönde döndürün.
- Periodontal ligament ön gevşetme işlemi tamamlandıktan sonra her iki iğneyi de cerrahi alandan geri çekin.
NOT: Periodontal ligament ön gevşetmesini, dişin forsepsle yapılan ilk sallama hareketinden sonra minimum mobilite göstermesi ve belirgin direnç sergilemesi durumunda gerçekleştirin.
- Sallama ve ekstraksiyon
- Sol elin işaret ve orta parmaklarını kullanarak fare başını sabitleyin. Sağ el ile pensi tutarken, destek sağlamak için parmak kılıfı ile kaplanmış başparmağı mandibuler kesici dişlere dayayın.
- Pens uçlarını oklüzal düzleme dik ve dişin uzun eksenine paralel tutun. Stabil bir traksiyon sağlamak için tırtıklı uçları kök furkasyonuna yerleştirin.
NOT: Diş kökünü pensle doğrudan kavramayın, çünkü bu durum kök kırılmasına neden olabilir. - Kuronu pensle kavrayın ve nazik bukkolingual sallama hareketleri uygulayın. Bukkal sallama açısını 30° ve lingual sallama açısını 50° ile sınırlandırın. Her 1–1.5 s'de bir sallama hareketi gerçekleştirin.
- Mandibulayı stabilize etmek için sol başparmak yastığıyla mandibuler kesici dişlere karşı sabit bir karşı destek uygularken, moların uzun ekseni boyunca apeksden kurona doğru traksiyonu sürdürün.
NOT: Kesici dişlerin ve bitişik yumuşak dokuların aşırı sıkışmasından veya yer değiştirmesinden kaçınarak sürekli ve stabil bir karşı destek sağlayın. - Diş kademeli olarak mobil hale gelene ve oklüzal yüzey bitişik molarların üzerinde görünür şekilde yükselene kadar sallama hareketlerine devam edin. İşlem boyunca pens uçlarını dişin uzun eksenine paralel tutun, ardından yeterli mobilite sağlandığında dişi ekstrakte edin.
NOT: Final ekstraksiyon kuvvetini uygulamadan önce, kuronu bukkolingual yönde nazikçe sallayarak diş mobilitesini değerlendirin. Ekstraksiyona ancak kuron minimum dirençle yer değiştirebildiğinde ve bukkolingual hareket genliği yaklaşık kuron genişliğinin yarısına ulaştığında geçin. Tam ekstraksiyondan hemen önce anestezi derinliğini yeniden değerlendirin. Gerekiyorsa ek anestezi uygulayın (Şekil 2).
Şekil 2Konvansiyonel ve modifiye fare mandibular birinci molar diş ekstraksiyon yöntemlerinin karşılaştırılması.
(A) Bükülmüş 25 G iğnenin periodontal ligamente yerleştirildiği ve dişi lükse etmek için bir kaldıraç olarak kullanıldığı konvansiyonel ekstraksiyon yönteminin şematik illüstrasyonu. (B) Dişli oftalmik penslerin kurona tutturulduğu ve dişin uzun eksenine paralel traksiyon uygulandığı modifiye ekstraksiyon yönteminin şematik illüstrasyonu. (C) Elevatör olarak kullanılan 25 G iğnenin bükülmüş ucunun temsili görüntüsü. (D) Mikro-ekstraksiyon forsepsi olarak kullanılan dişli oftalmik penslerin temsili görüntüsü. (E) Mandibuler birinci molar ekstraksiyonundan hemen sonraki ekstraksiyon soketini gösteren temsili intraoperatif görüntü; kesikli çizgiler ekstraksiyon soketlerini göstermektedir. (F) Başarıyla ekstrakte edilmiş mandibuler birinci moların bukkal görünümü. (G) Ekstrakte edilen aynı mandibuler birinci moların lingual görünümü. Ölçek çubukları = 2 mm (C,D) ve 400 µm (E–G). Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
3. Ekstraksiyonla alınan dişlerin ve ekstraksiyon soketlerinin incelenmesi
- Ekstraksiyonu yapılan dişi, tamamen çıkarıldığını ve yapısal bütünlüğünü onaylamak için inceleyin. Kök morfolojisinin korunduğunu; daha uzun bir mezial kök, daha kısa bir distal kök ve apikal genişleme olduğunu doğrulayın15. Ekstraksiyonu yapılan dişe yapışık alveolar kemik fragmanlarının kalmadığını teyit edin.
- Ekstraksiyon soketini, temiz olduğunu ve artık kök fragmanları içermediğini onaylamak için inceleyin (Şekil 2).
NOT: Ekstraksiyon sırasında içeride kalmış veya kırılmış bir kökten şüpheleniliyorsa, tekrarlayan manipülasyonlardan kaçının; çünkü aşırı denemeler soket defektlerini şiddetlendirebilir. Artık kök fragmanlarının varlığını onaylamak için ekstraksiyon bölgesini büyütme altında inceleyin. İçeride kalmış veya kırılmış köklerin olduğu vakaları başarısız ekstraksiyon olarak kaydedin ve bunları sonraki model değerlendirmesinden hariç tutun. Bu hayvanları onaylanmış hayvan protokolüne göre yönetin.
4. Ameliyat sonrası bakım
- Hemostaz sağlamak için kuru pamuk uygulayın. Ağız boşluğunu salin solüsyonu ile nemlendirilmiş küçük bir pamuk parçası kullanarak temizleyin ve ardından dili eski konumuna getirin.
NOT: Pamuk parçasını, serbest sıvı oluşturmadan yüzeyini nemlendirmek için gereken minimum steril salin hacmi ile nemlendirin. - Postoperatif analjezi için cerrahi işlem sonrası carprofen (5 mg/kg, subkütan) uygulayın.
- Hayvanı bir ısıtma pedine yerleştirin ve bilinci yerine gelene kadar sürekli olarak izleyin.
- Anesteziden çıkıştan sonra, 3 gün boyunca kafes tabanında yumuşatılmış standart yem veya jel diyet sağlayın ve suyu ad libitum olarak erişilebilir kılın. Normal beslenme davranışı onaylandıktan sonra standart yem diyetine geri dönün.
- Yem alımı, vücut ağırlığı, aktivite, tımar davranışı, yüz şişliği, ağız kanaması ve ağrı veya stres belirtilerini önceden belirlenmiş aralıklarla izleyin.
5. Operatörlerin eğitimi
- Fare sert doku rejenerasyon modellerinde önceden deneyimi olmayan iki operatörü, rastgele olarak geleneksel veya modifiye ekstraksiyon grubuna atayın. Operatörleri, hem geleneksel hem de modifiye ekstraksiyon yaklaşımlarında yetkin olan aynı eğitmenin gözetiminde ayrı eğitin.
- İlk hafta boyunca, her operatöre cerrahi iş akışına aşina olmaları için atanan ekstraksiyon prosedürünü fare kadavraları üzerinde uygulamaları talimatını verin.
- İkinci hafta boyunca, her tekniğin pratik uygulamasını değerlendirmek ve geliştirmek için canlı fareler üzerindeki eğitimi denetleyin. Yeterli anesteziyi sağlamak ve hatalı enstrüman manipülasyonunun neden olduğu çevre yumuşak doku yaralanmaları veya alveolar yapıların zarar görmesi gibi istenmeyen cerrahi komplikasyonları önlemek için her prosedürü izleyin. Operatör, üst üste üç başarılı ekstraksiyonu bağımsız olarak gerçekleştirebildiğinde operatör yetkinliğini onaylayın. Gözetimli eğitimi tamamladıktan sonra, karşılaştırmalı ekstraksiyon deneylerine geçin.
6. Numune hazırlama
- Fareleri servikal dislokasyon yoluyla ötanize edin. Mandibulaları kafadan ayırın ve yapışık yumuşak dokuyu temizleyin.
- Mandibulaları 48 saat boyunca %4'lük paraformaldehit çözeltisinde sabitleyin. Örnekleri µCT taraması öncesinde PBS içinde saklayın.
7. µCT ve analizler
- Mandibulaları bir µCT tarayıcı kullanarak tarayın. Tarama parametrelerini 80 kV, 500 µA, 10 µm voksel çözünürlüğü ve katman katman tarama olarak ayarlayın.
- µCT sistemini bir hidroksiapatit fantom kullanarak kalibre edin. Fantomu tarayın ve yeniden yapılandırılmış görüntüleri DataViewer kullanarak dışa aktarın.
- Fantom görüntülerini CTAn kullanarak analiz edin. Atenüasyon değerlerini BMD'ye dönüştürmek için, fantom eklerinin ölçülen CT atenüasyon değerlerini bilinen mineral yoğunluklarıyla ilişkilendirerek bir kalibrasyon eğrisi oluşturun.
- Tüm örneklere aynı tarama ve yeniden yapılandırma parametrelerini uygulayın.
- Tüm veri setlerini, µCT sistemi ile ilişkili CTAn'daki standartlaştırılmış yeniden yapılandırma iş akışını kullanarak yeniden yapılandırın. Tüm örneklere aynı yeniden yapılandırma ayarlarını, ROI tanımını ve kantitatif analiz kriterlerini uygulayın. Temsili görselleştirme için Mimics Research kullanarak, CTAn kantitatif analizi için kullanılan aynı ROI tanımını takip ederek ayrı bir üç boyutlu yeniden yapılandırma gerçekleştirin.
- Ekstraksiyonu yapılmış mandibular birinci moların distal kök bölgesini seçerek ilgi bölgesini (ROI) tanımlayın. Komşu ikinci moların sementominamel birleşiminden apikale doğru uzanan 10 ardışık transvers kesit toplayın.
- Her kesitteki ROI'yi, ekstraksiyon soketini çevreleyen yeni oluşmuş alveolar kemiğin sınırı boyunca manuel olarak ana hatlarıyla belirleyin. Sonraki görüntü işlemeyi ve kantitatif analizi, tüm örnekler için aynı analiz parametreleriyle CTAn kullanarak gerçekleştirin.
- Mimics Research kullanarak üç boyutlu yeniden yapılandırma gerçekleştirin. Kök kırığı ve soket duvarı defektlerinin insidansını, her bir durumu sergileyen mandibular örneklerin toplam mandibular örnek sayısına oranına göre hesaplayın.
- Tüm istatistiksel analizleri gerçekleştirin ve grafikleri GraphPad Prism v10.1.2 kullanarak oluşturun. Sürekli değişkenlerin normalliğini Shapiro–Wilk testi ile değerlendirin.
- Tüm analizler için her bir fareyi ve ona karşılık gelen ekstraksiyon soketini deneysel birim olarak tanımlayın.
- Gruplar arasındaki ekstraksiyon süresini, BMD'yi ve BV/TV'yi eşleşmemiş iki kuyruklu Student’s t testi kullanarak karşılaştırın. Kök kırığı ve soket duvarı defektlerinin insidansını Fisher’s kesin testi kullanarak karşılaştırın.
- İstatistiksel anlamlılığı şu şekilde belirtin: *, p < 0.05; **, p < 0.01; ve ***, p < 0.01. İki grup arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark olmadığını belirtmek için “ns” ifadesini kullanın.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Mandibular birinci molar diş çekimi ile ilgili anatomik özellikler Şekil 1'de gösterilmiş olup, geleneksel ve modifiye çekim yaklaşımları şematik olarak Şekil 2A,B'de sunulmuştur. Hazırlanan iğnenin ve dişli oftalmik pensetin, taze çekim soketlerinin ve çekilen mandibular birinci molar dişin temsili görüntüleri Şekil 2C–G'de gösterilmiştir. Tüm prosedür iş akışı Şekil 3...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
TSHM'nin başarılı bir şekilde kurulması, çevredeki alveolar mimariyi koruyarak dişin tamamen çıkarılmasını gerektirir; çünkü ekstraksiyona bağlı yaralanmalar sonraki kemik rejenerasyonunu tehlikeye atabilir16. Bu nedenle, ekstraksiyon prosedürünün tekrarlanabilirliği, model güvenilirliğinin kritik bir belirleyicisidir17. Bu çalışmada, modifiye edilmiş forseps tabanlı mandibüler birinci molar ekstraksiyon yaklaşımı, standart eğitim koşulları altında geleneksel kaldıraç taban...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.
Teşekkürler
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğal Bilimler Vakfı (Hibe No. 82571084) ve Sichuan Eyaleti Bilim ve Teknoloji Programı (Hibe No. 2024JDKXJ0001) tarafından desteklenmiştir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 25 G şırınga iğneleri | Beyotime | FS802-30pcs | Ağız retraktörü ve isteğe bağlı periodontal ligament ön gevşetme işlemi için kullanılan tek kullanımlık şırınga iğneleri |
| %4 paraformaldehit çözeltisi | Solarbio | P1110 | Numune fiksasyonu için kullanılan %4 paraformaldehit çözeltisi |
| %75 etanol | Ouse Medical Devices Store | N/A | Yüzey dezenfeksiyonu için kullanılan %75 tıbbi sınıf etanol |
| C57BL/6 fareler | Charles River | 213 | 22–29 g ağırlığında, 8 haftalık erkek C57BL/6 fareler |
| Karprofen | Solarbio | C5350 | 5 mg/kg dozunda subkutan olarak uygulanan postoperatif analjezik |
| Pamuk topları | Ouning Medical Devices | N/A | Oral temizleme ve hemostaz için kullanılan steril pamuk topları |
| CTAn v1.18.4.0+ | SkyScan | N/A | μCT görüntü analizi için kullanılan yazılım |
| DataViewer v1.5.6.2 | SkyScan | N/A | Rekonstrükte edilmiş μCT görüntülerini görüntülemek ve dışa aktarmak için kullanılan yazılım |
| Parmak kılıfları | LeSu Office | MEKU-1/2/3B | Çıkarma işlemi sırasında başparmak koruması için kullanılan parmak kılıfları |
| Köpük levha | Dongguan Lijianglong Industrial Co., Ltd. | N/A | Operasyon ve fiksasyon platformu olarak kullanılan köpük levha |
| Jel diyet | ReadyDietech | J10001 | Kullanıldığında, 3 gün boyunca kafes tabanında sağlanan postoperatif diyet |
| GraphPad Prism v10.1.2 | GraphPad | RRID: SCR_002798 | İstatistiksel analiz ve grafik oluşturma için kullanılan yazılım |
| Kafa lambası | Bazhou Pengen Protective Equipment Factory | N/A | Cerrahi alanı aydınlatmak için kullanılan kafa lambası |
| Isıtıcı ped | Shijiazhuang Jianuan Electrical Appliances Co., Ltd. | N/A | Postoperatif iyileşme için yaklaşık 38 °C'ye önceden ısıtılmış ısıtıcı ped |
| Hidroksiapatit fantom | QRM | QRM-70127 | CT atenüasyon değerlerini kemik mineral yoğunluğuna dönüştürmek için kullanılan kalibrasyon fantomu |
| Büyütme cihazı | Olympus Corporation | SZX10 | Dişli pens uçlarını ve ekstraksiyon soketini büyütme altında incelemek için kullanılan cihaz |
| Maske | Senlun Medical Devices Specialty Store | N/A | Cerrahi maske |
| Mikro-bilgisayarlı tomografi tarayıcı | Bruker SkyScan | SkyScan 1276 | 80 kV, 500 μA ve 10 μm voksel çözünürlüğünde kullanılan μCT tarayıcı |
| Mimics Research v21.0 | Materialise | RRID: SCR_015802 | Üç boyutlu rekonstrüksiyon için kullanılan yazılım |
| Pentobarbital sodyum | Sigma-Aldrich | P3761 | %1'lik anestezik çözelti olarak kullanılan pentobarbital sodyum tuzu |
| Fosfat tamponlu salin çözeltisi | Solarbio | P1010 | 0.01 M fosfat tamponlu salin tozu, pH 7.2–7.4 |
| Povidon-iyodür antiseptik çözeltisi | Belkon Pharmacy Flagship Store | N/A | Abdominal dezenfeksiyon için kullanılan povidon-iyodür çözeltisi |
| Lastik bantlar | Foshan Puli Rubber Products Factory | N/A | Ağız retraktörünü monte etmek için kullanılan lastik bantlar |
| Salin çözeltisi | Thermo Fisher | BR0053G | Oral temizleme çözeltisini hazırlamak için kullanılan salin tabletleri |
| Standart yem diyeti | Jiangsu Xietong Pharmaceutical and Biotechnology Engineering Co., Ltd. | XTC01WC-001 | Rutin barındırma için kullanılan ve postoperatif besleme için yumuşatılan standart yem |
| Buharlı sterilizatör | Kurumsal tesis | N/A | Dişli pensleri ve salin çözeltisini sterilize etmek için kullanılan ekipman |
| Steril pamuklu çubuklar | Kangbailai Medical Devices Store | N/A | Tek kullanımlık steril pamuklu çubuklar |
| Steril eldivenler | Senlun Medical Devices Specialty Store | N/A | Steril lateks eldivenler |
| Steril dokunmamış kumaş | Shandong Xinhua Infection Control Supplies Hangzhou Store | N/A | Operasyon yüzeyini ve ısıtıcı pedi örtmek için kullanılan steril dokunmamış kumaş |
| Steril cerrahi bone | Senlun Medical Devices Specialty Store | N/A | Steril cerrahi bone |
| Cerrahi scrubs | Senlun Medical Devices Specialty Store | N/A | İşlem sırasında giyilen temiz cerrahi scrubs |
| Bant | Thermo Fisher | 15947 | Fare uzuvlarını sabitlemek için kullanılan yapışkan bant |
| Dişli oftalmik pensler | Beyotime | FS229 | Dental pens olarak kullanılan dişli oftalmik forsepsler |
| Veteriner oftalmik pomad | Dechra Veterinary Products | 143-16 | Kornea kurumasını önlemek için anesteziden sonra uygulanan oftalmik pomad |
Kaynaklar
- Chavez MB, et al. Bone sialoprotein is critical for alveolar bone healing in mice. J Dent Res. 2023;102(2):187-196.
- Guan B, Liu L, Liu Y. Application and characterisation of four genetically engineered animal models (mouse/zebrafish/rhesus monkey/drosophila) in acute myeloid leukemia. Gene. 2025;963:149607.
- Varshney GK, Burgess SM. Crispr-based functional genomics tools in vertebrate models. Exp Mol Med. 2025;57(7):1355-1372.
- Phanrungsuwan A, Donnelly B, Millán JL, Foster BL. Targeted alkaline phosphatase therapy enhances alveolar bone healing in X-linked hypophosphatemia in mice. J Periodontal Res. 2026;61(3):309-322. doi:10.1111/jre.70044.
- Mohamed FF, et al. Dentoalveolar defects and impaired alveolar bone healing in a neural crest-directed conditional knockout mouse model of hypophosphatasia. Bone. 2025;198:117538.
- Oka H, et al. Subset of the periodontal ligament expressing leptin receptor contributes to part of hard tissue-forming cells. Sci Rep. 2023;13(1):3442.
- Chen S, Rittel D, Shemtov Yona K. The normal stiffness of the edentulous alveolar process. Bone Rep. 2021;14:101066.
- Lungová V, et al. Tooth-bone morphogenesis during postnatal stages of mouse first molar development. J Anat. 2011;218(6):699-716.
- Iwama H, et al. Acellular extrinsic fiber cementum is invariably present in the superficial layer of apical cementum in mouse molar. J Histochem Cytochem. 2024;72(2):109-120.
- Hadad H, et al. Rodents as an animal model for studying tooth extraction-related medication-related osteonecrosis of the jaw: Assessment of outcomes. Arch Oral Biol. 2024;159:105875.
- Mouraret S, et al. A pre-clinical murine model of oral implant osseointegration. Bone. 2014;58:177-184.
- Yu F, Liu L, Xia L, Fang B. Establishment of a C57BL/6 mandibular critical-size bone defect model. J Craniofac Surg. 2021;32(7):2562-2565.
- Yu C, Yu F, Li F, Ye L. The establishment of a murine mandibular molar extraction socket healing model. J Vis Exp. 2023;(191). doi:10.3791/64855.
- University of Michigan Unit for Laboratory Animal Medicine. Guidelines on anesthesia and analgesia in mice. Updated January 23, 2026. Available at: https://az.research.umich.edu/animalcare/guidelines/guidelines-anesthesia-and-analgesia-mice/. Accessed August 5, 2026.
- Qiu Y, et al. Investigation of the furcation morphology of permanent mandibular first molars by using micro-computed tomography. BMC Oral Health. 2024;24(1):1150.
- Vieira AE, et al. Intramembranous bone healing process subsequent to tooth extraction in mice: Micro-computed tomography, histomorphometric and molecular characterization. PLoS One. 2015;10(5):e0128021.
- Jiang J, Mou J, Wang S, Liu J. Protocol for establishing a mouse model of bilateral maxillary first molar extraction to study alveolar bone healing. STAR Protoc. 2026;7(1):104366.
- Liang B, Zhang W, Xue Y. Observation and analysis of tooth extraction wound healing process of maxillary first molars in C57BL/6 mice. Chin J Pract Stomatol. 2019;12(232):e6.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
Bu makale yayımlandı
Video yakında