Yöntem makalesi

Mikobakteriler, Elektroporasyon

27.1K görüntüleme

DOI:

10.3791/761

23 Mayıs 2008

Bu makalede

Özet

Mikobakteriyel patojenik stratejileri tam olarak anlaşılamamıştır. Çoğu türlerin yavaş büyüme hızı, hücre duvar aşılmaz doğa ve patojenler ile çalışan tehlikeleri mikobakteriler zor çalışma yapmak ve bu organizmalar bizim kötü anlamak için büyük ölçüde sorumludur. Bu video, DNA girişi sağlamak için kısa bir yüksek elektrik uyarısı konusu hücreler içerir elektroporasyon tekniği, gösterecektir. Mikobakteriyel hücrelerin içine DNA tanıtmak için en yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir.

Özet

Yüksek verimlilik dönüşümü mikobakterilerin çalışma önemli bir sınırlama yoktur. Cinsi, Mycobacterium dönüştürmek için zor olabilir; özellikle kalın ve mumsu bir hücre duvarı neden olduğu, ancak en moleküler teknikler, Escherichia coli ve Bacillus subtilis olarak uzaktan ilgili türler için geliştirilmiştir sahip olduğu gerçeği ile birleşir. Bu engellere rağmen, mikobakteriyel plazmid tespit edilmiştir ve birçok mikobakteriyel türlerin DNA dönüşüm tarif edilmiştir. Mikobakteriler içine DNA tanıtmak için en başarılı yöntem elektroporasyon. Birçok parametreler başarılı bir dönüşüme katkıda bulunur; bu türlerin / gerilme, dönüştürücü DNA doğa, seçilebilir marker kullanılan, besi ve elektroporasyon darbe için gerekli koşulları içerir. Hem yavaş ve hızlı-yetiştiricisi dönüşümü için optimize edilmiş yöntemler burada ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Dönüşüm verimliliği, farklı mikobakteriyel türler için ve çeşitli seçilebilir işaretleri ile rapor edilir.

Açıklamalar

Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Mikoseriyel ElektroporasyonDNA TransformasyonuMycobacterium T rleriTransformasyon Verimlili iKompetan H crelerSe ilebilir Mark rH cre Duvar Ge irgenli iAntibiyotik DirenciPlazmit Giri iElektroporasyon Parametreleri