1. Hardal Konsantresi Çözeltisinin Hazırlanması
2. Solucanların Çıkarılması
3. Toplama Alanları Arasında Solucan Popülasyon Yoğunluğunun Karşılaştırılması
Kaynak: Margaret Workman ve Kimberly Frye Laboratuvarları - Depaul Üniversitesi
Hardal kullanılarak, Lumbricus terrestris solucan popülasyonları, peyzaj bozukluğu veya toksisite olmadan doğrudan toprak derinliklerinden örneklenebilir. Solucanlar daha sonra bir çubuk grafik ve öğrencinin t-testi kullanılarak veri ve istatistiksel analiz için sayılabilir.
Solucan popülasyonlarını izlemek, çevre bilimcileri için hayati bir tekniktir, çünkü çok sayıda solucan türü (en önemlisi Lumbricina alt takımından olanlar) Kuzey Amerika ve Güney Amerika'da istilacı bir şekilde yayılmaktadır. Egzotik solucanlar hemen hemen her kara kütlesinde ve gezegendeki hemen hemen her ekosistemde bulunabilir ve bu türlerin nerede ve ne zaman istilacı hale geldiği uluslararası çevre araştırmalarının odak noktası olmuştur. 1
Ekolojik istila tipik olarak, yerli türlerin yok olmasına doğrudan rekabet ederek, tehlikeye atarak veya başka bir şekilde katkıda bulunarak bir ekosistemin biyolojik çeşitliliğini azaltır. Ekosistem mühendisleri olarak, istilacı solucan türleri, bitki köklerinin besin maddeleri için maden çıkardığı toprağın üst horizonlarındaki organik maddenin ayrışma oranları yoluyla besinlerin döngüsünü değiştirir. İstilacı Lumbricus türlerinin her ikisi de yerli solucan türlerini yok etmiş ve istila edilmiş topraklarda mevcut nitrojen konsantrasyonunu ve nitrojen oranlarını arttırdığı gösterilmiştir. 2 Olumlu bir geri besleme döngüsünde, hızlandırılmış nitrojen seviyeleri, sistemi, yerli bitki türlerine kıyasla yüksek nitrojen seviyelerine adapte olmuş istilacı bitki türlerine karşı daha misafirperver hale getirir ve "istila erimesi" olarak bilinen bir fenomende yerlileri geride bırakır. İstilacı solucan türleri Lumbricus terrestris (Avrupa solucanı) ve istilacı bir bitki türü için bir istila erime ilişkisi önerilmiştir Rhamnus cathartica (Avrupa cehri). 3
1. Hardal Konsantresi Çözeltisinin Hazırlanması
2. Solucanların Çıkarılması
3. Toplama Alanları Arasında Solucan Popülasyon Yoğunluğunun Karşılaştırılması
Solucan popülasyonlarının izlenmesi çevre bilimcileri için hayati önem taşır, çünkü istilacı egzotik solucanlar gezegendeki hemen hemen her ekosistemde bulunabilir. Ekolojik istila tipik olarak, yerli türlerin yok olmasına veya yerel neslinin tükenmesine veya yerel neslinin tükenmesine doğrudan rekabet ederek, tehlikeye atarak veya katkıda bulunarak bir ekosistemin biyolojik çeşitliliğini azaltır.
Gece gezgini olarak da adlandırılan Avrupa solucanının Lumbricus terrestris türü, Kuzey Amerika'da son derece yaygındır, ancak yerli değildir. Sonuç olarak, yerli solucan türlerini büyük ölçüde yok etti. Lumbricus terrestris, bitki köklerinin besin maddeleri için maden çıkardığı toprağın üst katmanlarındaki organik maddenin ayrışması yoluyla besin maddelerinin döngüsünü değiştirir ve böylece toprak tabakası yapısını değiştirir. Ek olarak, besin sağlayan ayrışan materyalin çoğunu içeren organik kalıntı tabakası tamamen kaybolur.
Bu istilacı solucanlar ayrıca istila edilmiş topraklardaki mevcut nitrojen konsantrasyonunu da arttırır. Buna karşılık, değişen toprak katmanları ve yüksek nitrojen seviyeleri, toprağı, yerli bitki türlerine kıyasla yüksek nitrojen seviyelerine daha fazla adapte olan Avrupa Cehri gibi istilacı bitki türlerine karşı daha misafirperver hale getirir. Bu fenomen "istila erimesi" olarak bilinir.
Avrupa solucanının ve Avrupa cehri gibi egzotik bitkilerin istilasından kaynaklanan istila erimesi, Kuzey Amerika'daki orman bitki yaşamının çeşitliliğini önemli ölçüde azalttığı için önemli bir endişe kaynağıdır.
Bu video, cehri istilasına karşı savunmasızlıklarını değerlendirmek için çeşitli park alanlarında Avrupa solucanlarının izlenmesini gösterecektir.
İstila edilen bölgelerdeki solucan popülasyonlarını belirlemek için, solucanlar bir kapsaisin çözeltisi kullanılarak doğrudan topraktan çıkarılır.
Bu deneyde, kapsaisin baharatlı hardaldan ekstrakte edilir ve önceden boyutlandırılmış bir kare veya kuadrat ile tanımlanan bir alanda doğrudan toprağa dökülür. Daha sonra toprak matrisinden solucanların bulunduğu yere nüfuz eder.
Kapsaisin çözeltisi, solucandaki mukoza zarlarında tahrişe neden olur. Solucanlar, kapsaisin çözeltisinden kaçmak için toprak yüzeyine hareket ederek tahrişe tepki verir. Yüzeye çıktıktan sonra, solucanlar toplanır ve popülasyon yoğunluğu analiz edilir.
Aşağıdaki deney, solucanların topraktan çıkarılmasını ve popülasyon analizlerini gösterecektir.
İlk olarak, kapsaisin çözeltisini en az 24 saat önceden 38 g öğütülmüş oryantal sıcak hardal tartarak ve kapaklı plastik bir kaba aktararak hazırlayın. Hardal içeren plastik kaba 100 mL musluk suyu ekleyin. Kabın kapağını kapatın ve hardalın tamamı suda eriyene kadar kuvvetlice çalkalayın.
Hardaldan maksimum kapsaisin ekstraksiyonu için çözeltiyi 24 saat bekletin. Kapsaisin ekstraksiyonu tamamlandığında, hardal çözeltisini 8 L'lik bir su kabında 4 L su ile seyreltin. Karıştırmak için hardal çözeltisini birkaç kez çalkalayın ve su taşıyıcıya aktarın. Seyreltilmiş çözeltiyi kullanarak kalan hardalı durulayın.
Su taşıyıcı kapağını kapatın ve vananın "KAPALI" konumda olduğundan emin olun. Eşit şekilde karıştırmak için su taşıyıcıyı üç kez ters çevirin. Her test bölgesi için bir kap kapsaisin çözeltisi hazırlayın.
Bir kuadrat ve seyreltilmiş hardal çözeltisi içeren su taşıyıcı ile numune alma alanına ilerleyin. Ayrıca site başına üç numune alma kabı getirin. Örnekleme alanı başına üç kopya için uygun şekilde etiketlenmelidirler.
Kuadrat'ı boş bir yere rastgele yerleştirin. Toprağı net bir şekilde ortaya çıkarmak için fırçayı, yaprakları ve malçları mümkün olduğunca temizleyin. Seyreltik çözeltiyi tekrar karıştırın ve ardından kapak valfini AÇIK konuma getirin.
Seyreltilmiş hardal çözeltisinin yaklaşık üçte birini kuadrat içine dökün ve sıvının çoğunu kuadrat alanının merkezinde yoğunlaştırın. Toprak doygun hale gelir ve havuzlar oluşturursa, dökmeyi bırakın ve devam etmeden önce biriken çözeltinin toprağa sızmasını bekleyin.
Kuadrat bölgesini 5 dakika boyunca yakından gözlemleyin ve solucan görünümünü arayın. Doğrudan kuadratın kenarlarının altına baktığınızdan emin olun.
Tüm solucanların kuadrat alanı içindeki topraktan çıkmasını bekleyin ve ardından onları forseps ile toplayın. 5 dakika sonra numune kabını kapatın ve bir sonraki numune alma alanına geçin.
Tüm örnekleme siteleri için toplama adımlarını yineleyin. Her siteye dönün ve site başına 3 çoğaltma gerçekleştirin. Her numune için toplanan solucan sayısını sayın ve ardından her toplama bölgesi için ortalama ve standart sapmayı hesaplayın.
Toplama alanları arasındaki ortalama solucan popülasyon yoğunluklarını karşılaştırmak için bir çubuk grafik oluşturun. Hata çubuklarını oluşturmak için standart sapmayı kullanın. Birinci site yönetilen bir parktır ve bu nedenle havalandırma ve gübre gibi rahatsızlıklar nedeniyle solucan popülasyonlarına daha misafirperverdir. İkinci bölge yönetilmemektedir ve bu nedenle solucan popülasyonları için daha az misafirperverdir.
Egzotik solucanlar ve Avrupa cehri, özellikle orta batı Amerika Birleşik Devletleri'nde meydana gelen "istila erimesinin" bir parçası olarak gösterildi. Solucan popülasyonlarını izlemek, iki istilacı tür arasındaki ilişkileri aydınlatmaya yardımcı olabilir ve araştırmacıların daha fazla yayılmayı önlemek için yöntemler geliştirmelerini sağlayabilir.
Az önce JoVE'nin solucan popülasyonlarının çıkarılması ve analizine girişini izlediniz. Artık topraktan solucan ekstraksiyonunun ilkelerini ve örnekleme alanları arasındaki karşılaştırmayı anlamalısınız. İzlediğiniz için teşekkürler!
Örnekleme alanı 1, havalandırma ve gübre gibi önemli rahatsızlıkların görüldüğü yönetilen bir parktı. Örnekleme alanı 2, insan müdahalesi görmeyen yönetilmeyen bir alandı. Şekil 1'de gösterildiği gibi, site 1, muhtemelen insan rahatsızlıkları nedeniyle artan misafirperverlik nedeniyle daha yüksek bir solucan popülasyonu yoğunluğuna sahiptir. Bununla birlikte, Site 1 ayrıca daha yüksek örnekleme değişkenliğine sahiptir, bu da solucan popülasyonunun ortalamanın önerdiği kadar tutarlı bir şekilde yoğun olm...
İstilacı türler biyolojik çeşitlilik için büyük bir tehdittir. Egzotik solucanlar (örneğin: Lumbricus terrestris) ve Avrupa topalak (Rhamnus cathartica), Amerika Birleşik Devletleri'nin orta batısındaki ormanlık topluluklarda meydana gelen "istilacı erimenin" bir parçası olarak suçlanmıştır. İstilasal erime, bir türün istilasının diğerlerinin istilasını kolaylaştırdığı süreçtir. Bu nedenle, istilacı türlerin yerini yenilerine bırakması nedeniyle ekolojik sağlık kaybı oranı büyük ölçüde hızlanabilir. İst...
Chapters in this video
0:00
Overview
2:06
Principles of Earthworm Analysis
3:03
Experimental Preparation
4:14
Extraction of Earthworms
6:17
Application
6:40
Summary
Videos from this collection: