U^k'37 Paleotermometrisi için Yağ Asidi Metil Esterlerinin Sabunlaştırma ile Dönüştürülmesi

1. Malzemelerin Kurulumu ve Hazırlanması

1. Bir çözücü ekstraksiyon yöntemi (Sonication, Soxhlet veya Hızlandırılmış Çözücü Ekstraksiyonu (ASE)) kullanarak bir toplam lipit ekstraktı (TLE) elde edin.
2. Metanol içinde% 5 H₂O içinde 2 N KOH çözeltisi hazırlayın.
   1. KOH ve metanol kimyasal perakendecilerden satın alınabilir. Bu kimyasallar saf olmalı ve hidrokarbon içermemelidir.
      1. KOH'nin molar kütlesi ~56 amu'dur ve her mol KOH için 1 mol OH^- verir. Böylece, 2 N'lik bir konsantrasyon elde etmek için, 112 g KOH'yi 0.95 L saf su ve 0.05 L metanol içinde çözün.
      2. KOH'un suda çözünmesinin ekzotermik olduğunu ve büyük miktarda ısı oluşturduğunu unutmayın. Şiddetli bir reaksiyondan kaçınmak için KOH peletlerini suya yavaşça eklemeye özen gösterin.
   2. 112 g KOH peletini otomatik bir karıştırma plakası üzerinde 0,95 L saf suya çözün.
   3. Organik biyobelirteçlerin sulu çözelti içinde çözünmesine yardımcı olmak için KOH'un tamamı çözüldükten sonra 0.05 L metanol ekleyin.
3. H₂O'da 6 N hidroklorik asit (HCl) çözeltisi hazırlayın.
   1. HCl, kimyasal perakendecilerden satın alınabilir. Bu kimyasal saf ve hidrokarbon içermemelidir.
   2. HCl genellikle 13 N olarak konsantre olarak gelir. Bu nedenle, 1:1'lik bir HCl ve saf su karışımı, bu deneyin amaçları için 6 N'ye yeterince yakın olan 6.5 N'lik bir HCl karışımı üretir.
      1. HCl'yi suya eklediğinizden emin olun, tam tersi değil, çünkü konsantre HCl'ye su eklemek ekzotermiktir ve ısı üretir. Bu, HCl'nin sıçramasına neden olabilir.
   3. 100 mL HCl'yi 100 mL saf su içeren bir behere yavaşça ve yavaşça dökün ve karışımı HCl ilaveleri arasında döndürün.
4. H₂O'da %5 NaCl (sofra tuzu) çözeltisi hazırlayın.
   1. NaCl kimyasal perakendecilerden satın alınabilir. Bu kimyasal saf ve hidrokarbon içermemelidir.
   2. ~1 L %5'lik çözelti (a/a) yapmak için gereken tuz kütlesini hesaplayın ve tartın. 1 L su ~1 kg veya 1.000 g ağırlığındadır. Böylece, 950 mL'ye çözünen 50 g NaCl,% 5'lik bir çözelti verir (50 g + 950 g = 1.000 g; 50 g / 1.000 g = 0.05 veya% 5).
   3. Otomatik bir karıştırma plakasındaki saf suya yavaşça 50 g NaCl ekleyin ve çözülmesini bekleyin.
5. Aşağıdaki malzemeleri edinin: 2 temiz ve yanmış (6 saat boyunca 550 °C) PTFE kaplı kapaklı 40 mL borosilikat cam şişe; bir ısıtma fırını veya ısıtma blokları; yanmış (6 saat boyunca 550 °C) borosilikat cam pipetler ve ampuller; pH bandı (asidik aralık); Hekzan (hekzan kimyasal perakendecilerden satın alınabilir. Bu kimyasal Optima Sınıfı veya eşdeğeri olmalıdır).

2. Yöntemler

1. 40 mL borosilikat cam şişelerden birinde kurutulmuş TLE (esterler içeren) ile başlayın.
2. TLE'ye ve kapağa yaklaşık 10 mL 2 N KOH ekleyin.
3. Ester bağını parçalamak için fırında veya bir ısıtma bloğunda 2,5 saat boyunca 60 °C'ye ısıtın (Şekil 3).
4. Numuneyi ocaktan alın ve oda sıcaklığına soğumaya bırakın.
5. TLE'ye yaklaşık 10 mL% 5 NaCl çözeltisi ekleyin (Şekil 3). Bu, sulu ve organik faz (eklenecek) arasındaki arayüzün köpürmesini önlemeye yardımcı olur. Kapatın ve kısa bir süre sallayın.
6. O^- 'yi protonlamak ve nihai ürünü, stabil bir karboksilik asidi oluşturmak için pH 2'ye ulaşılana kadar tuzlanmış TLE'ye damla damla 6 N HCl ekleyin (Şekil 3; test etmek için pH kağıdı kullanın). TLE renkliyse, pH 2 ile çakışan renkte bir kayma olabilir.
7. Artık ester içermeyen asitleştirilmiş çözeltiye yaklaşık 20 mL heksan ekleyin. Sudaki organik bileşikleri çıkarmak için kapağını kapatın ve 5 saniye kuvvetlice çalkalayın.
8. Sulu ve organik fazlar tamamen ayrılana kadar sertleşmesine izin verin. Tuzlar, iyonlar, su ve reaksiyona girmemiş HCl sulu fazda kalır. Organik bileşikler artık hekzanın içindedir.
9. Bir pipet kullanarak süpernatan hekzanın yaklaşık% 75'ini çıkarın ve diğer 40 mL borosilikat cam şişeye dağıtın.
10. 2.7 - 2.9'u iki kez tekrarlayın ve her seferinde yaklaşık 10 mL heksan ekleyin.
11. Kalan sulu karışımı uygun bir atık kabına atın.
12. Heksan ve ester içermeyen organikler içeren şişeyi "TLE - sabunlaştırılmış" olarak etiketleyin.