1. Deri altı enjeksiyon

Şekil 1. Farelerde deri altı enjeksiyonu.
2. İntraperitoneal enjeksiyon

Şekil 2. Farelerde intraperitoneal enjeksiyon için yer işaretleri.
3. Kas içi enjeksiyon

Şekil 3. Sıçanlarda gluteal kas içine intramüsküler enjeksiyon.
4. Kuyruk damarı kullanılarak intravenöz enjeksiyon

Şekil 4. Farelerde kuyruk damarı enjeksiyonu.
Kaynak: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Notre Dame Üniversitesi, IN
Birçok araştırma protokolü, bir maddenin bir hayv…
1. Deri altı enjeksiyon

Şekil 1. Farelerde deri altı enjeksiyonu.
2. İntraperitoneal enjeksiyon

Şekil 2. Farelerde intraperitoneal enjeksiyon için yer işaretleri.
3. Kas içi enjeksiyon

Şekil 3. Sıçanlarda gluteal kas içine intramüsküler enjeksiyon.
4. Kuyruk damarı kullanılarak intravenöz enjeksiyon

Şekil 4. Farelerde kuyruk damarı enjeksiyonu.
Bileşik uygulaması genellikle bir hayvan çalışmasının ayrılmaz bir bileşenidir ve bileşiğin doğru ve insancıl bir şekilde verilmesini sağlamak için birçok faktörün değerlendirilmesi gerekir. İki ana uygulama yolu, sindirim sistemi yoluyla enteral ve sindirim sistemi dışında parenteraldir. Temel fark, eğer bileşik enteral yolla verilirse, kan dolaşımına girmeden ÖNCE hepatik metabolizmaya uğrar. Oysa, intravenöz veya intramüsküler gibi herhangi bir parenteral yolla, madde karaciğerden bu ilk geçişi atlar ve genellikle daha yüksek bir biyoyararlanım ile sonuçlanır.
Bileşik uygulama serisinin bu ilk videosunda, genel olarak uygulama yolunun seçimini etkileyen faktörleri tartışarak başlayacağız. Ardından, SC veya SubQ olarak kısaltılan deri altı, intraperitoneal veya IP, intramüsküler veya IM ve intravenöz AKA IV dahil olmak üzere en yaygın parenteral enjeksiyon yöntemlerini gözden geçireceğiz.
Herhangi bir bileşik uygulama prosedürünü önceden oluşturmadan önce akılda tutulması gereken birkaç şeyi gözden geçirerek başlayalım. İlk adım, enjekte edilecek çözeltiyi veya süspansiyonu hazırlamaktır ve madde hazırlama için ilk temel husus sterilitedir. Patojenlerin hayvana girmesini önlemek için, enjeksiyon malzemesinin yanı sıra kullanılacak iğne ve şırıngaların da steril olması önemlidir.
İkinci husus fizyolojik uyumluluktur. İster enteral ister parenteral olarak uygulansın, bir doz çözeltisi, bileşiğin uygun şekilde emilmesi ve doku hasarının önlenmesi için fizyolojik olarak uygun pH'a tamponlanmalıdır. Üçüncü faktör, iğne seçiminde kritik bir rol oynayan enjeksiyon eşyasının viskozitesidir. Genellikle, fareler ve sıçanlar için parenteral uygulama prosedürlerinde 20 ila 30 gauge iğne kullanılır. Bu iğnelerin göbekleri genellikle tanımlama kolaylığı için renk kodludur.
Solüsyon, bu iğnelerden en az birinden geçecek kadar akışkanlığa sahip olmalıdır. Çözüm birden fazla çözümden geçebiliyorsa, genel olarak seçim mümkün olan en küçük ölçüdür. Bir sonraki faktör, şırınga seçimini etkileyen uygulama hacmidir. İğnelere benzer şekilde, doğru derecelerle doğru dozlama için gereken mümkün olan en küçük şırınga seçilmelidir. İğne ölçüsü ve uygulama hacmi de rotaya ve uygulanan hayvanın türüne, boyutuna ve yaşına bağlıdır. Bu videoda tartışılan rotalarla ilgili değerleri gözden geçirmek için aşağıdaki Tablo 1'e bakın. Son önemli husus, her uygulama yoluna göre önemli ölçüde değişen ve en uygun yöntemin seçilmesinde rol oynayabilen emilim oranıdır.
Şimdi, rutin olarak kullanılan enjeksiyon yöntemlerinin kendine özgü özelliklerinden bahsedelim.
SC veya SubQ Enjeksiyonu, malzemeyi cilt katmanları ile kas arasına, cildin kaldırılmasıyla oluşturulan sanal bir alana yerleştirir. Bu, daha büyük hacimlerin güvenli enjeksiyonuna izin verir, ancak absorpsiyon oranı diğer yollardan daha yavaştır ve daha kalıcı bir etki sağlar. IP uygulaması sırasında, bileşik doğrudan periton boşluğuna enjekte edilir. Bu, büyük hacimli çözelti sunmak için kullanılan başka bir yaygın yöntemdir. Bir IP enjeksiyonu parenteral uygulama olarak kabul edilse de, emilim mekanizması aslında oral dozlamaya daha benzerdir.
Bir IM enjeksiyonu, bir bileşiği doğrudan gluteal veya gastroknemius kasına iletir. Enjekte edilen bir madde IM, kas dokusu içindeki bol sayıda damar nedeniyle hızla emilir ve bu da bazı durumlarda tercih edilen bir yol haline getirebilir. Kasta yanlış veya tekrarlanan enjeksiyon, felç veya kas nekrozu ile sonuçlanan sinir hasarına neden olabilir. Son olarak, hayvanın kuyruk damarına bir IV enjeksiyonu, madde doğrudan dolaşım sistemine sokulduğu için en etkili uygulama yoludur. Bileşiğin, kuyruğun yanlarında bulunan lateral kaudal kuyruk damarlarından birine enjekte edilmesi gerektiğini unutmayın. Kuyruğun ventral orta hattı boyunca uzanan ve enjeksiyon amaçları için uygun olmayan bir damar vardır.
Artık arka planı tartıştığımıza göre, SC enjeksiyonlarından başlayarak prosedürleri öğrenelim. Fareler için, hayvanı kuyruğundan alın ve tel çubuk kapak gibi başka bir güvenli yüzeyde dinlenmesine izin verin. Ardından, boynunun etrafındaki deriyi kaldırarak bir çadır oluşturarak hayvanı elle kısıtlayın. Daha sonra, hayvanı arka ayakları yüzeye dayanacak şekilde masanın üzerine koyun ve hayvanın nefes almasını tehlikeye atabilecek aşırı ağırlığı önlemek için elinizin topuğunu masanın üzerine koyun.
Enjekte etmek için, enjekte edilecek çözelti ile şırıngayı alın ve kafatasına delinme olasılığını önlemek için iğneyi omurgaya paralel ve kafadan uzağa yönlendirin. Ardından, iğneyi eğimi yukarı bakacak şekilde yerleştirin, bu da cilde yumuşak bir kayma sağlar. İğnenin doğru yerleştirilip yerleştirilmediğini kontrol etmek için pistonu geri çekin. Piston geri çekildiğinde geri basınç varsa, iğne doğru konumdadır. Pistona hava çekilirse, iğnenin yeniden konumlandırılması gerekecektir.
İğnenin doğru şekilde yerleştirildiğini onayladıktan sonra, sabit bir hareketle yavaşça enjekte edin. Enjeksiyondan sonra duraklayın ve enjeksiyon malzemesinin kaybını önlemek için iğneyi derinin altında hafifçe döndürün. Ardından, enjeksiyon bölgesinde cildi sıkıştırın ve iğneyi geri çekin. Aynı yöntem sütten kesilen sıçanlarda da kullanılabilir.
Yetişkin sıçanlar için, önce hayvanın, bu koleksiyonun "Taşıma ve Kısıtlamanın Temelleri" videosunda tartışılan bir cihaz kullanılarak kısıtlanması gerekir. Daha sonra, SC enjeksiyonu farelerde olduğu gibi gerçekleştirilebilir.
Daha sonra, bir IP enjeksiyonunun nasıl gerçekleştirileceğini öğreneceğiz. Farelerde, yine "Taşıma ve Kısıtlamanın Temelleri" videosunda anlatılan hayvanı manuel olarak dizginlemek için iki elle kısıtlama tekniğini kullanın. Baskın olmayan elinizin, hayvanın dönmesini önlemek için boynunda yeterince yükseğe yerleştirildiğinden emin olun. Kuyruğu üçüncü ve dördüncü parmakların arasına yerleştirerek veya cildi kalan parmaklar ile başparmağın tabanı arasına sıkıca sabitleyerek arka kısmı sabitleyin.
Ardından, hayvanı karnını açıkta bırakacak şekilde konumlandırın. Hayvanı başı 30'da aşağı bakacak şekilde eğin? bağırsakların öne düşmesine izin vermek için açı. Enjeksiyon dönüm noktası şu şekilde özetlenebilir: kalçanın üst kısmında, yandan yana doğru vücut boyunca yatay olarak uzanan hayali bir çizgi çizin. Ardından, zıt yönlerde büyüyen saçların buluştuğu çizgi boyunca medial sınırı veya orta çizgiyi çizin. Son olarak, erkeklerde kalçaların üstünden prepusa kadar uzanan ve kadınlarda meme başlarını takip eden bir çizgi olan yan sınırı hayal edin. Bu, güvenli IP enjeksiyonu için üçgen alan sağlar.
Tartışacağımız bir sonraki yöntem IM enjeksiyonudur. Hem fareler hem de sıçanlar için bu teknikte kısıtlama, iki kişi veya bir kısıtlama tüpünün kullanılmasını gerektirir. Burada, bir kısıtlama cihazı kullanan tek kişilik yöntemi açıklayacağız.
İlk olarak, hayvanı tüpe yerleştirin ve arka ayakları dışarıda olacak şekilde, hayvanı konumlandırmak için kuyruğu çekin. Daha sonra, bacağı uzatmak ve boğulmanın bükülmesini önlemek için uyluk kemiğinin kraniyal kısmındaki kanadın derisini kavrayın. Ardından, enjeksiyon bölgesinin görselleştirilmesine izin vermek için kısıtlama cihazını konumlandırın.
Gluteal dönüm noktasını tanımlamak için, femurun arkasındaki gluteal kas kütlesini bulun. Kemik palpe edilebilir ve büyük kas kolayca hissedilir. Kanca noktasından kuyruğa kadar uzanan orta çizgiye dikkat edin. Yan ve iç yüzeylerden gelen saçların bir araya geldiği çıkıntının zıt yönlerde büyüdüğünü sıklıkla görebilirsiniz. Tipik olarak, enjeksiyonlar orta hattan yan tarafa doğru yapılır. Gastroknemius baldır kasıdır ve bu kas içine enjeksiyon da en iyi şekilde arka yönden yapılır.
Gluteal kas için, bulunan yer işaretinde, iğneyi maksimum yaklaşık 5 mm derinliğe kadar yerleştirin. Kas hasarını önlemek için enjeksiyon sırasında şırıngayı yeniden konumlandırmaktan kaçının. Ardından, yerleşimin bir kan damarı değil, kas içinde olduğundan emin olmak için aspire edin. Ve son olarak, materyali yavaş ve sabit bir şekilde enjekte edin, çünkü hızlı enjeksiyon doku travmasına neden olacaktır. İğneyi, yerleştirme ile aynı rotayı takip ederek dikey bir şekilde çıkarın. Gastroknemius kası için, iğneyi maksimum 3 mm derinliğe kadar batırın ve enjeksiyonu gluteal kas ile aynı şekilde gerçekleştirin.
Son olarak, kemirgenlerin kuyruk damarlarında IV enjeksiyonunun nasıl yapıldığını öğrenelim. Aynı yöntem hem fareler hem de sıçanlar için geçerlidir.
Hayvanı silindirik bir emniyet tüpüne yerleştirin ve yaklaşık 2-5 dakika ORTA olarak ayarlanmış bir elektrikli ısıtma yastığı kullanarak hayvanın tüm vücudunu ısıtın. Kan damarları genişleyene kadar hayvanı ısıtmaya devam edin, bu gözle görülür şekilde daha büyük olur. Unutmayın, lateral kaudal kuyruk kuyruk damarları kuyruğun yanlarında bulunur. Ventral orta hatta bulunan arter enjeksiyon amaçları için uygun değildir. Emniyet tertibatını döndürün ve kuyruğu, yanal kuyruk damarları yukarı bakacak ve gergin tutulacak şekilde konumlandırın. Aşırı gerginlik uygulamayın, aksi takdirde damar gerilebilir ve kan akışı azalabilir.
İğne eğimini mümkün olduğunca distal olarak doğrudan kan damarının üzerine yerleştirin ve iğneyi omurgaya paralel kuyruğa kaydırmak için hafif bir baskı uygulayın. Malzemeyi yavaş, akıcı bir hareketle enjekte edin ve kan enjeksiyon malzemesi tarafından dışarı itilirken damarın beyazladığına dikkat edin. İğne damara düzgün bir şekilde yerleştirilmezse, enjeksiyon sırasında güçlü bir direnç olacaktır ve kuvvetle enjekte ederseniz, malzeme deri altı boşluğunu dolduracak ve kuyruk balonlaşacaktır. İntravenöz olarak enjekte edilmek üzere tasarlanmış materyal çevredeki dokulara yakıcı olabileceğinden hemen durun. İğneyi geri çekin ve kuyrukta daha kraniyal olarak başka bir enjeksiyon deneyin. Başarılı bir enjeksiyondan sonra, iğneyi geri çekin ve hayvanı kafese geri göndermeden önce iyi bir hemostaz sağlamak için enjeksiyon bölgesine baskı uygulayın.
Artık yaygın enjeksiyon yöntemlerine aşina olduğunuza göre, bu uygulama yollarının ilaç dağıtımı dışındaki bazı uygulamalarına bakalım.
Birkaç deneyde, enfeksiyonu incelemek için farelere spesifik bir patojen enjekte edilir. Burada, araştırmacılar lezyonlara neden olan antibiyotiğe dirençli bakterileri tanıtmak için deri altı yolunu kullandılar ve bu lezyonların boyutu patojenin virülansı için bir okuma görevi gördü. Çeşitli bilim adamları, sistemik doğumu takiben kök hücrelerin dağılımını ve hayatta kalmasını incelemekle ilgilenmektedir. Bu çalışmada, araştırmacılar multipl skleroz hayvan modelinde genetik olarak etiketlenmiş nöral kök hücrelerin kuyruk damar enjeksiyonunu gerçekleştirdiler ve enjekte edilen hücrelerin omurilik ve beyin bölgelerine dağılımını belirlediler.
Başka bir deneyde, araştırmacılar floresan etiketli miyoblastları bir kas distrofisi hayvan modelinde kas içine enjekte ettiler. Bunu takiben, kök hücrelerin başarılı bir şekilde implantasyonunu analiz etmek için biyolüminesans gerçekleştirildi. Son olarak, hayvan modelleri oluşturmak için enjeksiyonlar da kullanılabilir. Bu bilim adamları, daha sonra karaciğer hastalığının gelişimini incelemek için kullanılacak bir karaciğer fibrozu hayvan modeli oluşturmak için erkek Wistar sıçanlarında güçlü bir karaciğer toksini olan Dimetilnitrozamin'in intraperitoneal enjeksiyonunu gerçekleştirdiler.
JoVE'nin yaygın olarak kullanılan parenteral enjeksiyonları tartışan bileşik uygulama konusundaki ilk bölümünü izlediniz. Unutmayın, en uygun dağıtım yolu, enjekte edilen çözeltinin pH'ı, hacmi ve viskozitesi dahil olmak üzere çeşitli faktörlere dayanmaktadır. Ve her tekniğin, deneysel ihtiyaçlarla ilgili olarak dikkate alınması gereken avantajları ve dezavantajları vardır. Her zaman olduğu gibi, izlediğiniz için teşekkürler!
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Q1: What is the main difference between enteral and parenteral routes of compound administration?
Enteral administration delivers compounds via the digestive tract, where the substance undergoes hepatic metabolism before entering the bloodstream. Parenteral routes, such as intravenous or intramuscular injection, bypass the liver, resulting in higher bioavailability. This first-pass metabolism difference significantly affects how quickly and completely the compound reaches systemic circulation.
Q2: Why is sterility important when preparing injection solutions for animal studies?
Sterile preparation prevents introducing pathogens into the animal during injection. Both the injection material and the needles and syringes must be sterile to avoid infection. Contamination can compromise animal health and invalidate experimental results, making sterility a fundamental consideration before any compound administration procedure.
Q3: How does needle gauge selection relate to injection solution viscosity?
Solution viscosity determines needle selection because thicker solutions require larger gauge needles to pass through. For mice and rats, 20 to 30 gauge needles are typically used in parenteral administration. The solution should flow through at least one needle, and the smallest gauge feasible is chosen if the solution passes through multiple needle sizes.
Q4: What are the advantages of subcutaneous injection compared to other parenteral routes?
Subcutaneous injection allows safe administration of larger volumes by placing material between skin layers and muscle in a virtual space created by lifting the skin. Although absorption is slower than other routes, this provides a more sustained effect. The technique is relatively simple and carries lower risk of complications compared to intramuscular or intravenous injection.
Q5: Why must intravenous injections target the lateral caudal tail veins rather than the ventral midline?
The lateral caudal tail veins on the sides of the tail are suitable for injection because they deliver compounds directly into the circulatory system. The artery running along the ventral midline is not suitable for injection purposes. Proper vein selection ensures effective delivery and prevents tissue damage from injecting into arterial or subcutaneous spaces.
Q6: What precautions should be taken during intramuscular injection to prevent tissue damage?
Inject material slowly and steadily, as rapid injection causes tissue trauma. Avoid repositioning the syringe during injection to prevent muscle damage. For the gluteal muscle, insert the needle to a maximum depth of 5 mm; for the gastrocnemius, use 3 mm maximum. Improper or repeated injections can cause nerve damage resulting in paralysis or muscle necrosis.
Q7: How does intraperitoneal injection absorption compare to other parenteral routes?
Although intraperitoneal injection is classified as parenteral administration, its absorption mechanism is actually more similar to oral dosing. The compound is injected directly into the peritoneal cavity, allowing safe delivery of large volumes. This route provides intermediate absorption rates compared to subcutaneous and intravenous routes, making it useful for specific experimental applications.
Chapters in this video
0:00
Overview
1:30
Key Considerations for Compound Administration
3:43
Characteristics of Different Injection Techniques
5:15
Subcutaneous Injection
7:15
Intraperitoneal (IP) Injection
9:30
Intramuscular (IM) Injection
12:02
Intravenous (IV) Injection via the Tail Vein
13:36
Applications
14:34
Summary
Videos from this collection: