Bileşik Yönetim IV

İntrakardiyak, retro orbital ve ayak tabanı, biyomedikal araştırmacıların bu atipik yollarla bileşiklerin verilmesini gerektiren deneyler için kullandıkları özel enjeksiyon yöntemlerinden bazılarıdır.

İntrakardiyak enjeksiyon, bileşiği sol ventriküle iletir ve maddenin doğrudan arteriyel dolaşıma girmesine izin verir. Retro orbital yol, kuyruk ven enjeksiyonuna bir alternatiftir ve bileşiği venöz dolaşıma iletmek için kullanılır. Ve bir ayak pedi enjeksiyonu, eşyanın hayvanın arka ayağına deri altından uygulanmasını içerir. Bu video, bu özel enjeksiyon tekniklerinin dikkate alınması, prosedürleri ve uygulamalarını gösterecektir.

Bu yönetim prosedürlerine başlamadan önce bazı arka plan bilgileri ve göz önünde bulundurulması gereken şeylerle başlayalım.

İntrakardiyak uygulama genellikle iğneyi kalpte doğru yere yönlendirmek için bir ultrason kullanılarak yapılır. Bununla birlikte, uygun yer işaretleri kullanılarak doğru bir şekilde gerçekleştirilirse, uygulama ultrason görselleştirmesi kullanılmadan gerçekleştirilebilir. Prosedürün genel anestezi kullanılmasını gerektirdiğini ve hayatta kalma prosedürleri için hayvan başına sadece bir enjeksiyona izin verildiğini unutmayın. Bu enjeksiyon için genellikle 27-30 gauge iğne kullanılır ve maksimum uygulama hacmi fareler ve sıçanlar için sırasıyla 100 ve 300 mikrolitredir.

Retro orbital yol yoluyla intravenöz enjeksiyon için, orbital venöz yapı hakkında adil bir anlayışa sahip olunmalıdır. Bir farenin, supraorbital, dorsal nazal, inferior palpebral ve yüzeysel temporal olmak üzere birkaç damarın birleştiği bir sinüsü vardır. Sıçanlarda ise, birkaç damardan oluşan bir ağ veya pleksus vardır. Enjeksiyon doğrudan sinüs veya pleksus içine yapılır. İntrakardiyak gibi, bu prosedür de genel anestezi kullanımını gerektirir ve hayatta kalma prosedürleri için göz başına toplam iki enjeksiyon ile günde sadece bir enjeksiyon önerilir. Tüm enjeksiyonlarda olduğu gibi, en küçük boyutlu iğne seçilmelidir - genellikle 27-30 gauge - ve önerilen maksimum hacim 150 ° C'dir. Göz başına L.

Tartışmalara rağmen, tipik olarak iltihaplanma ve tümör büyümesi ile ilgili bazı çalışmalar için ayak pedi enjeksiyonunun kullanılması hala gereklidir. Enjeksiyonların sadece bir ayak üzerinde yapılabileceğini, asla iki taraflı olarak yapılamayacağını unutmayın. Ve ayak pedi ölçümleri, belirgin şişlik meydana gelir gelmez günlük olarak yapılmalıdır. Enjeksiyon için 29-30 gauge iğne önerilir ve önerilen maksimum hacim 50 μL'dir. Herhangi bir enjeksiyondan sonra, tüm hayvanlar ağrı belirtileri, gıda tüketimi seviyesi ve normal ambulasyon açısından yakından izlenmelidir. Genel olarak, lezyon veya tümör hayvanın yürüyebilme veya yiyecek ve suya ulaşma yeteneğini engellediğinde hayvana ötenazi yapılmalıdır.

Şimdi intrakardiyak enjeksiyondan başlayarak enjeksiyon prosedürlerini öğrenelim. Prosedürü bir farede göstereceğiz, ancak bir sıçan için yer işaretleri ve protokol benzerdir.

İlk adım şırıngayı hazırlamaktır. Fareler için 29 gauge iğne ve 1 cc şırınga uygundur. Ve intrakardiyak enjeksiyon için maksimum hacim 100 mikrolitredir. Çözeltiyi çizerken, piston ile enjeksiyon malzemesi arasında az miktarda hava bırakın. Bu, kalbe yerleştirilirken kanın şırıngaya girmesine izin vermek içindir.

Başlamak için, uçucu veya enjekte edilebilir anestezikler kullanarak hayvanı uyuşturun. Bu koleksiyonun başka bir videosunda genel anesteziyi sürdürme hususlarını gözden geçirin. Ardından, hayvanı yalıtımlı bir platform üzerinde sırt yaslanma pozisyonunda konumlandırın. Ardından, ön ayakları platforma bantlayın ve kalçaların üzerine karın boyunca yatay olarak bir parça bant yerleştirin. Bu, hayvanı daha da sabitlemek ve iğne yerleştirildikten sonra herhangi bir hareketten kaçınmak içindir. Daha sonra, bir bez kullanarak, hayvanın göğsünü% 70 alkolle ıslatın.

Enjeksiyon bölgesini tam olarak belirlemek için önce ksifoid ve manubrium sternumu bulun. Ardından, iki yer işareti arasındaki orta noktayı bulun. Bu noktadan 1-2 mm solunda, iğne batırma yer işaretidir. Pamuk uçlu bir aplikatör kullanarak, iğne yerleştirme bölgesini işaretlemek için povidon iyot uygulayın.

Enjekte etmek için iğneyi masaya dik olarak yönlendirin ve yaklaşık 2 mm derinliğe kadar yerleştirin. Ardından, pistona çok hafif bir geri basınç uygulayın. Şırınga göbeğine parlak kırmızı oksijenli bir kan girmelidir, bu da uygun yerleşimi onaylar. Şırıngayı aynı noktada tutun ve malzemeyi 30 ila 60 saniye boyunca yavaş ve istikrarlı bir şekilde enjekte edin. Hızlı enjeksiyon, hücrelerin topaklanmasına ve arterlerin tıkanmasına, maddenin sıcaklığının vücut sıcaklığından önemli ölçüde düşük olması nedeniyle sisteme bir şok verilmesine veya ventrikülün genişlemesine ve kalp ritminin bozulmasına neden olabilir.

Malzeme şırıngayı temizledikten sonra, kalp kaslarına zarar verebileceği için herhangi bir yanal hareket olmadan iğneyi yavaş ve dikkatli bir şekilde çıkarın. Daha sonra bandı hemen ön ayaklardan ve karından serbest bırakın ve hayvanı, yalıtkan bir tabaka görevi görecek kadar derin bir yatağa sahip temiz bir kafese yüzüstü pozisyonda yerleştirin. Bu kurtarma kafesinin yarısının bir ısıtma kaynağı üzerinde olduğunu ve anestezi uygulanmış hayvanın kafesin ısıtılmış tarafında yer aldığını unutmayın. Bu, hipotermiyi önler ve hayvan anesteziden kurtulduğunda, ısıtılmış taraftan istenildiği gibi hareket edebilecektir.

Daha sonra, sıçanlarda retro-orbital pleksusu kullanarak intravenöz enjeksiyon yöntemini öğrenelim. Yine, prosedürü bir fare üzerinde göstereceğiz, ancak fareler için yer işaretleri ve protokol benzerdir.

Uygun iğneyi seçilen şırıngaya takın ve enjeksiyon malzemesini doldurun. Unutmayın, genellikle mümkün olan en küçük şırınga ve maksimum 150 mikrolitre hacme sahip 27-30 gauge bir iğne kullanılır.

Prosedürü başlatmak için önce hayvanı uyuşturun. Ardından, yanal yaslanma pozisyonunda düz bir yüzeye yerleştirin. Şimdi işaret parmağınızı başınızın üstüne ve başparmağınızı çenenin üzerine yerleştirin ve yavaşça geri ve aşağı çekin. Bu cildi sıkılaştırmak ve göz küresini dışarı çıkarmak içindir. Soluk borusuna baskı uygulamamaya ve hava akışını kısıtlamamaya özen gösterin. Birden fazla enjeksiyon planlıyorsanız, tetrakain veya proparakain gibi topikal oftalmik anestezik uygulayın.

İğneyi 45'te gözün medial kantusuna sokun? burun açısı. Derinlik, konjonktival dokulara nüfuz etmek ve oküler orbitaya ve sinüse ilerlemek için yeterli olmalıdır. Yörüngenin arkasındaki kemikle karşılaşmamalıdır. Kan damarlarının yırtılmasını önlemek için, iğnenin yerleştirildikten sonra minimum harekete sahip olduğundan emin olun. Damarları çökerteceği için aspire etmeyin. Makaleyi yavaş ve istikrarlı bir şekilde enjekte edin. Daha sonra iğneyi nazikçe geri çekin ve kanamayı kontrol altına almak ve hemostaz sağlamak için göze hafif basınç uygulayın.

Son olarak, fare ve sıçanlarda footped enjeksiyon yöntemini gözden geçirelim. Başlamak için uygun iğneyi takın ve şırıngayı doğru hacimle doldurun. Bu işlem bilinçli hayvanlarda yapılabilir.

Hayvanı, bir arka ayağı izole edilmiş ve derisi dikmenin üzerinde kavrayarak uzatılmış bir emniyet tüpüne yerleştirin. Enjeksiyondan önce kalıntıları temizlemek için ayağı su veya alkolle silin. Ayağın uzunluğu boyunca uzanan kan damarından kaçınmak için, enjeksiyon işareti merkezdedir, ancak orta hattın hemen dışında, ayak parmaklarına daha yakındır.

İğne eğimini enjeksiyon bölgesine yerleştirin ve topuğa doğru yönlendirin. Ayak dokularının hızlı bir şekilde şişmesini önlemek için makaleyi yavaş ve istikrarlı bir şekilde enjekte edin. Bu, enjeksiyon materyali bu deri altı boşluğunu doldururken ayak tabanının şişmesine neden olur. Küçük bir hayvanın ayağında, enjeksiyondan kaynaklanan şişlik topuğa kadar uzanabilirken, daha büyük bir hayvanda daha lokalize olacaktır.

Enjeksiyondan sonra, hayvanları günlük olarak gözlemleyin ve kalıcı şişlik varsa veya deney protokolünün bir sonucu olarak lezyonlar veya tümörler varsa, daha sonra bir kumpas kullanarak ayak pedi ölçümünü yapın. Bu alet, ayak kalınlığını milimetre cinsinden ölçer ve şişliğin nicelleştirilmesine yardımcı olur.

Şimdi intrakardiyak, retro orbital ve footpad enjeksiyonlarını kullanan birkaç örnek deneyi tartışalım.

İntrakardiyak uygulamanın birçok uygulamasından biri, kanser metastazı için bir hayvan modelinin geliştirilmesidir. Burada, araştırmacılar bu yolu kemik kolonizasyonu eğilimi olan tümör hücrelerini enjekte etmek için kullandılar. İlerleyen günlerde, X-ışını ve floresan görüntüleme tekniklerini kullanarak kemiklerdeki tümör büyümesini incelediler. Başka bir çalışmada, nötrofilleri etiketleyen spesifik antikorları enjekte etmek için retro orbital rota kullanıldı. Daha sonra, intravital görüntülemenin yardımıyla, bilim adamları etiketli hücrelerin göç modelini izleyebildiler.

Son olarak, araştırmacılar inflamatuar yanıtı analiz etmek için sıklıkla ayak pedi enjeksiyonu kullanırlar. Bu deneyde, araştırmacılar insan kan örneklerinden periferik kan mononükleer hücrelerini izole ettiler, bunları farklı test antijenleriyle karıştırdılar ve çözeltileri hayvanın ayak tabanına enjekte ettiler. Son olarak, farklı antijenlere bağlı şişme tepkisini ölçmek için ayak ölçümleri yaptılar.

JoVE'nin olağan ve özel bileşik uygulama teknikleriyle ilgili son bölümünü az önce izlediniz.

Özetlemek gerekirse, ilk bölümde en yaygın parenteral yolu gözden geçirdik. İkinci bölümde, enteral ve topikal prosedürleri tartıştık. Üçüncü bölüm, yenidoğanlarda intradermal, intranazal ve intrakraniyal gibi ilk atipik prosedürleri ele aldı. Son olarak, burada biyomedikal araştırmacıların laboratuvarlarda belirli amaçlar için kullandıkları üç ek rotayı tartıştık.

Bu diziyi izledikten sonra, farklı yönetim tekniklerini çok daha iyi anlamalı ve ayrıca bu bileşik uygulama protokolleriyle ilgili genel ve özel hususları da bilmelisiniz Her zaman olduğu gibi, izlediğiniz için teşekkürler!