What are the advantages of facial and submandibular vein blood collection in mice?

Facial and submandibular vein collection methods do not require anesthesia, making them suitable when anesthetics may confound blood results or other data. These less invasive procedures are methods-of-choice for studies where anesthetic interference is a concern. Both techniques allow researchers to collect blood while minimizing experimental variables.

How do you properly restrain a mouse for facial vein blood collection?

Use the scruffing technique to restrain the animal, minimizing side-to-side head movement for accurate venipuncture. Avoid gripping too tightly, as excessive pressure restricts blood flow and reduces collection volume. Proper restraint ensures safe and efficient blood collection from the facial vein running across the cheek.

What is the correct needle insertion depth for submandibular vein puncture?

Do not insert the needle beyond the bevel tip, as deeper insertion may cause trauma to muscles, nerves, and other vessels in the head, neck, and oral cavity. Proper depth control prevents complications while allowing successful blood collection from the submandibular vein.

How does the saphenous vein collection method differ from femoral vein collection?

Saphenous vein collection yields 10-150 microliters and may contain tissue products, with variable sample quality. Femoral vein collection produces larger volumes more easily and requires two people for conscious animals. Femoral vein puncture should occur near the knee to allow future anterior sampling, whereas saphenous sampling is limited to four samples per leg in 24 hours.

What equipment is needed for saphenous vein blood collection?

Required equipment includes a restraining device, tourniquet made from a syringe and suture, triple antibiotic ointment, hair clipper, 22-gauge needle, and hematocrit tube. The tourniquet is applied cranially to engorge the saphenous vessel, making it visible and accessible for safe venipuncture and blood collection.

Why is positioning the animal's head lower than the heart important during blood collection?

Positioning the head lower than the heart assists blood flow by using gravity to facilitate collection. This positioning helps ensure adequate blood volume is obtained and reduces collection time. After collection, apply pressure to the puncture site to achieve hemostasis and prevent excessive blood loss.

How frequently can the same facial vein site be used for serial blood collection?

Serial samples can be taken by alternating sides of the face, with neither side used more often than every 5-7 days. This interval allows the puncture site to heal and prevents tissue damage. Researchers must also adhere to maximum survival blood collection volumes outlined in Blood Withdrawal I guidelines.

Kan Alma II

0 görüntülenme06:32 dk.

1. Farelerde yüz damarı kanaması

Ekipman
1. Kanın toplanması, bir kan tüpüne veya bir Eppendorf tüpüne serbest bir yakalamadan yapılır. Bazı durumlarda, kanın doğrudan hematokrit tüplerine alınması arzu edilir.
2. Altın Başak neşterleri, yaş ve cinsiyete göre hayvan için uygun boyuta göre seçilecektir.
  1. Lansetler, farelerin yaşına/boyutuna göre aşağıdaki gibi seçilir:
    4 mm neşter: 3-4 haftalık fareler (vücut ağırlığı 15 gramın altında)
    5 mm neşter: 10 haftanın altındaki dişi fareler (~ 20 gram vücut ağırlığının altında)
    5mm neşter: 6 haftanın altındaki erkek fareler (~20 gram vücut ağırlığının altında)
    5 mm neşter: tek damla numuneler için (kan yaymaları için)
    5,5 mm neşter: 10 haftadan uzun dişi fareler (~20 gram vücut ağırlığından fazla)
    5,5 mm neşter: 6 haftadan uzun erkek fareler (~20 gram vücut ağırlığından fazla)
    5,5 mm neşter: büyük örnekler
Kısıtlama
1. Fareler, tırmalama tekniği kullanılarak kısıtlanır.
2. Başın yan yana hareketinin en aza indirilmesi önemlidir. Bu, neşter ile doğru ve güvenli damar delinmesi sağlar.
Kan alma
1. Uygun büyüklükteki lanset, cildin yüzeyine dik olarak tutulur.
2. Lanset noktası, ucu buruna bakacak şekilde hafif açılıdır.
3. Lanset bıçağı en iyi dikey konumda kullanılır.
4. Fareyi kısıtlarken, lateral kantusun altındaki gözün uzunluğunu ve kaudal olarak gözün genişliğini ölçerek yüz damarının yaklaşık alanını bulun.
5. Neşterin ucu ile çene kemiğinin bittiği noktayı nazikçe hissedin.
6. Damarı delmede daha iyi doğruluk için, fareyi yanal yaslanma pozisyonunda konumlandırın.
7. Bu noktada deriyi lansetin omzuna kadar delin. Bu, dart atmak gibi değil, sağlam bir itme ile yapılır.
8. Neşterin çıkarılmasının ardından kan akmaya başlayacaktır.
9. Kan akışına yardımcı olmak için, fareyi başı kalpten daha aşağıda olacak şekilde konumlandırın.
10. Kanı istenen toplama kabında toplayın.
11. Delinme bölgesini kurulayın ve hemostaz için tırnağa üzerindeki baskıyı serbest bırakın.

Şekil 1. Farelerde yüz damarı kanaması.

2. Farelerde submandibular kanama: Yüz damarı kanaması tekniğine çok benzemesine rağmen, bu kanama prosedüründe ekipmanda farklılıklar ve ince farklılıklar vardır.

Ekipman
1. Kanın toplanması, bir kan tüpüne veya bir Eppendorf tüpüne serbest bir yakalamadan yapılır. Bazı durumlarda, doğrudan hematokrit tüplerine toplanması arzu edilir.
2. 18-22 gauge iğneler, yaş ve cinsiyete göre hayvana uygun boyuta göre seçilir.
  1. İğneler, farelerin yaşına/boyutuna göre aşağıdaki gibi seçilir:
    22 gauge: 3-4 haftalık fareler (15 gram vücut ağırlığının altında)
    20 gauge: 10 haftanın altındaki dişi fareler (~20 gram vücut ağırlığının altında)
    20 gauge: 6 haftanın altındaki erkek fareler (~ 20 gram vücut ağırlığının altında)
    20 gauge: tek damla numuneler için (kan yaymaları için)
    18 gauge: 10 hafta boyunca dişi fareler (~ 20 gram vücut ağırlığından fazla)
    18 gauge: 6 hafta boyunca erkek fareler (~ 20 gram vücut ağırlığından fazla)
    18 ölçü: büyük örnekler
Kısıtlama
1. Fareler, tırmalama tekniği kullanılarak kısıtlanır.
2. Başın yan yana hareketinin en aza indirilmesi önemlidir. Bu, iğne ile doğru ve güvenli damar delinmesi sağlar.
Kan alma
1. İğne cildin yüzeyine dik olarak tutulur.
2. Fareyi kısıtlarken, submandibular venin yaklaşık alanını, ağzın köşesinden gelen bir çizginin gözün lateral kantusundan bir çizgiyle kesiştiği noktaya kadar bulun. Bu, ağzın köşesine kadar kaudal bulunan ve çene çizgisinin biraz altında bulunan küçük, tüysüz bir çukurla çakışır.
3. Damarı delmede daha iyi doğruluk için, fareyi yanal yaslanma pozisyonunda konumlandırın.
4. Bu noktada iğnenin ucuyla cildi delin. Bu, dart atmak gibi değil, sağlam bir itme ile yapılır.
5. İğne, eğimin ucunun ötesine sokulmaz.
6. İğnenin çıkarılmasının ardından kan akmaya başlayacaktır.
7. Kan akışına yardımcı olmak için, fareyi başı kalpten daha aşağıda olacak şekilde konumlandırın.
8. Kanı istenen toplama kabında toplayın.
9. Delinme bölgesini kurulayın ve hemostaz için entriye üzerindeki baskıyı serbest bırakın.

Şekil 2. Farelerde submandibuler ven kanaması.

3. Safen kanaması

Ekipman
1. Şeffaf plastik, esnek emniyet konileri fare veya sıçan için kullanılabilir. Fareler için, kısıtlama için modifiye edilmiş 50 mililitrelik plastik konik tüpler kullanılabilir. Sıçanlar için, arka bacağı uzatacak kadar geniş bir yuvaya sahip modifiye edilmiş Pleksiglas kısıtlama tüpleri kullanılabilir.
2. Plastik koni kullanılırken, hayvanın vücut uzunluğuna göre ölçülür ve uyluk seviyesinde oval bir delik açılır.
3. Bu kan toplama yöntemi için bir fare için konik bir tüp, bir solunum deliğine izin vermek için tüpün ucunu keserek değiştirilebilir. Tüpün kapak ucundan yaklaşık 1/2 inç genişliğinde ve 2 inç uzunluğunda bir yuva kesilir. Kenarlar bez bantla kaplanır veya hayvan güvenliği için düzeltilir.
4. Turnike, 3 cc'lik bir şırınga ve 2-0 emilemeyen sütür uzunluğu kullanılarak üretilir. ³
5. Üçlü antibiyotikli merhem veya beyaz vazelin, cilt üzerinde nem geçirmez bir bariyer olarak kullanılır.
6. Damar delinmesi için tercih edilen boyut 22 gauge iğnedir.
7. Kan doğrudan hematokrit tüplerine toplanır.
Kısıtlama
1. Esnek plastik koniler
  1. Fare veya sıçan önce koni burnuna yerleştirilir.
  2. Koninin ucu, hayvanın emniyet konisinden çıkmasını önlemek için küçük bir bağlayıcı klips kullanılarak katlanır ve kapatılır.
  3. Arka bacak oval açıklıktan kasıklara doğru nazikçe çekilir.
2. Fareler için konik tüp
  1. Fare önce tüpün içine burun şeklinde yerleştirilir.
  2. Arka bacak nazikçe yuvaya yönlendirilir.
  3. Farenin tüpten çıkmasını önlemek için orta parmak tüpün ucunun üzerine yerleştirilir.
  4. İşaret parmağı ve başparmak farenin bacağını dengeler.
3. Sıçanlar için pleksiglas kısıtlama tüpü
  1. Sıçan önce tüpün burnuna yerleştirilir.
  2. Arka bacak nazikçe yuvaya yönlendirilir.
  3. Tüpün ucu, farenin geri çekilmesini ve tüpten çıkmasını önlemek için sabitlenmiştir.
  4. İşaret parmağı ve başparmak farenin bacağını stabilize eder.
Kan alma
1. Kıl, bacağın yan tarafından, dizden dikliğe kadar çıkarılır. Bu, kopararak, tıraş ederek veya tüy dökücü bir krem kullanarak yapılabilir.
2. Saçlar alındıktan sonra, az miktarda merhem sürülür ve saçsız bölgeye çok ince bir tabaka halinde yayılır.
3. Turnike mümkün olduğunca kraniyal olarak uygulanır ve sıkılaştırılır.
4. Dizden ayak bileğine kadar bacağın dış yüzeyi boyunca uzanan safen damarı dolmaya başlayacak ve kabarık hale gelecek ve görüntülenmesi kolay hale gelecektir.
5. İğne, doğrudan kan damarı üzerinde cildin yüzeyine dik olarak tutulur. Gemiyi delin. Kasın delinmesini veya kemiğe çarpmasını önlemek için iğneyi bacağın derinliklerine sokmamaya dikkat edin.
6. Kan, hematokrit tüpü ile toplanmak üzere bacağın yüzeyine boncuklanacaktır.
7. Kan toplandıktan sonra, turnikeyi gevşetin ve hemostaz için delinme üzerine baskı uygulayın.
8. Kanama durduktan sonra, hayvanı kısıtlamadan çıkarın ve ev kafesine geri koyun.

Şekil 3. Farelerde safen damar kanaması.

4. Sıçanlar için femoral ven

Ekipman
1. Kan bir hematokrit tüpüne toplanır.
2. Cilt/saç ile kan damlası arasında bir bariyer oluşturmak için üçlü antibiyotikli merhem gereklidir.
3. Damarı delmek için 22 gauge iğne kullanılır.
4. Kılları bacaktan kesmek için yaklaşık 1 inç genişliğinde bıçağa sahip küçük, taşınabilir bir saç kesme makinesi kullanılır.
Kısıtlama
1. Sıçanlar şeffaf, esnek bir plastik kısıtlama konisi kullanılarak kısıtlanır.
2. Plastik koniler vücut uzunluğuna ve uyluk seviyesinde oval bir delik açılarak ölçülür. Koni, arka bacak damara erişim ile dışa açılabilecek şekilde kesilir.
Kan alma
1. Kıllar bacağın iç yüzeyinden kasıktan dize kadar tıraş edilir.
2. Üçlü antibiyotikli merhem, delinme bölgesinde ince bir tabaka halinde uygulanır.
3. Kısıtlayıcı kişi damarı tıkar ve fareyi bacağın iç yüzeyi flebotomiste bakacak şekilde tutar.
4. Damarı delmek için iğneyi kullanın. İğne kan damarına dik tutulur ve delme işlemi doğrudan damar üzerinde yapılır.
5. Delinme, mümkün olduğunca dize yakın yapılır ve ilk kan alma bölgesinin önünde ek örnekleme yapılmasına izin verir.
6. Gemi yüzeyseldir. Bu nedenle, delinmenin derinliği, iğnenin eğiminin uzunluğundan daha derin olmamalıdır.
7. Kan akışına yardımcı olmak için, fareyi bacağı kalpten daha aşağıda olacak şekilde konumlandırın.
8. Cilt yüzeyinde boncuklanırken hematokrit tüplerinde kanı toplayın.
9. Bacağına baskı uygulayın ve hemostaz elde etmek için delinme bölgesine baskı uygulayın.