5.14: Tanısal Nekropsi ve Doku Hasadı

1. Dış sınav

Vücudun lezyonlar ve kitleler için görsel muayenesini içeren vücudun kaba bir dış muayenesi, nekropsinin ilk adımı olarak yapılmalıdır. Saç tabakası, saç dökülmesi olan alanlar için incelenmelidir. Dişler ve tırnaklar aşırı büyüme veya aşınma açısından değerlendirilir. Ağızda, burunlarda, gözlerde, anal ve genital açıklıklarda kürkte herhangi bir lekelenme olduğuna dikkat edilmelidir. Dış parazitleri tespit etmek için bant testleri, deri kazıma ve post muayeneleri yapılmalıdır (aşağıdaki prosedürlere bakınız).

1. Bant testi
   1. Bir bant testi için gerekli ekipman arasında eldivenler, bir şeffaf selofan bant şeridi, bir cam mikroskop lamı ve makas bulunur.
   2. Yapıştırıcı parmaklardaki yağları ve cilt hücrelerini kaldıracağı, bulguları gizleyeceği veya slaytı değerlendirirken kafa karışıklığına neden olacağından, bandı tutarken her zaman eldiven giyilir.
   3. Mikroskop lamının genişliğinden biraz daha dar ve uzunluğundan daha kısa olan bir bant parçası kesin.
   4. Bandın yapışkan tarafını anüs ve çevresine dikkatlice bastırın ve hızlı bir şekilde çıkarın.
   5. Bandın diğer ucunu kullanarak omuz bıçaklarının arasına bastırın ve hızlı bir şekilde çıkarın.
   6. Bandı mikroskop lamına uygulayın.
   7. Bant testi mikroskobik inceleme için hazırdır. Parazit yumurtaları 4X büyütmede görülebilir, ancak daha sonra türü doğru bir şekilde tanımlamak için 10X büyütmede incelenmelidir.
   8. Bandın yapışkan tarafına dokunmaktan kaçınmak önemlidir. Bant, eldivenli ellerdeki kalıntıları kaldıracak ve slaytın okunmasını zorlaştıracaktır.
2. Cilt kazıma
   1. Deri kazıma testi, alopesi, cilt lezyonları veya ekskoriasyonun herhangi bir bölgesinde yapılır.
   2. Deri kazıma için gerekli ekipman temiz bir cam mikroskop lamı, mineral yağ ve metal bir spatula veya neşter bıçağıdır.
   3. Mikroskop lamına birkaç damla mineral yağ damlatın.
   4. Cildi lezyonun veya ilgilenilen alanın kenarındaki bir kıvrıma sıkıştırın.
   5. Cildinize az miktarda mineral yağ sürün.
   6. Spatula veya neşter bıçağının kenarını cilde yerleştirin ve tüylerin çıkış yönünün tersine kazıyın.
   7. Ciltte az miktarda kızarıklık görünene kadar kazımaya devam edin.
   8. Cilt yüzeyinden kazınan saç ve dokuyu mikroskop lamı üzerindeki yağın içine yerleştirin. Gerekirse, malzemeyi yağda eşit olarak dağılacak şekilde yayın.
   9. Slayt artık mikroskop altında incelenmeye hazırdır. İstenirse sürgü üzerindeki yağ damlasına lamel uygulanabilir. Slaytı 4X ve 10X büyütmede inceleyin.
3. Pelt sınavı
   1. Post muayenesi, yapılan son dış muayenedir; Ancak, aslında iç muayene tamamlandıktan sonra yapılır.
   2. Hayvan, tüm iç organ örnekleri toplandıktan sonra cam veya plastik bir Petri kabına yerleştirilir.
   3. Çanak 15 dakika buzdolabında bekletilir.
   4. 15 dakika sonra, çanak bir diseksiyon mikroskobu altına yerleştirilir ve post dış parazitler açısından incelenir. Çoğu kürk akarı kılların uçlarına doğru hareket eder ve kolayca gözlenir.

2. Karın boşluğunun iç brüt muayenesi

1. Derinin çıkarılması
   1. Dişilerde pelvisin hemen önünde, erkeklerde ise prepusun üzerinde küçük bir kesi yapılır.
   2. Deri kesisi çeneye kadar uzatılır.
   3. Künt diseksiyon, cildi fasya ve kastan gevşetmek için kullanılır.
   4. Enine kesikler arka bacakların önünde ve ön bacakların arkasında yapılır. Koltuk altı bölgesindeki kan damarlarının kesilmemesine özen gösterilmelidir.
   5. Servikal bölgeyi ve göğsü ortaya çıkarmak için künt diseksiyon kullanın. Boyundaki şah damarı ve şah damarlarının yırtılmaması için ekstra özen gösterilmelidir.
2. Meme bezleri
   1. Dişilerde, kitleler, renk değişikliği veya anormallikler aramak için meme dokusunu inceleyin.
   2. Emziren veya hamile kadınlarda meme dokusu hacmi artacaktır ve süt mevcut olabilir.
   3. Meme dokusu, manubriumdaki sternumun tepesinden ventral yüzeydeki genital açıklığa kadar bulunur ve her iki tarafa kadar yanal olarak uzanır, kalça ve omuzlarda dorsal yüzeye neredeyse temas eder.
   4. Meme bezlerinin eksizyonu, bezin kenarının başparmak forseps ile kavranmasını ve cilde olan ekleri gevşetmek için künt diseksiyon kullanılmasını gerektirir. Bez deriden ayrıldıktan sonra, bezi sabitleyici bir çözeltiye yerleştirmeden önce kalan ekleri kesmek için iris makası kullanılabilir.
3. Deri altı bezleri
   1. Preputial bezler eşleştirilir ve erkek sıçanda prepusun hemen önünde bulunur. Büyük görünürler ve köpüklü bir görünüme sahip gri ila sarımsı bir renktedirler.
   2. Submandibuler tükürük bezleri eşleştirilir, mandibulada bulunur ve boyun boyunca manubrium sternuma kadar uzanır. Sert bir kaplamaya sahiptirler ve kaslara sıkıca yapışırlar.
   3. Bu bezlerin çıkarılması, kan damarlarının yırtılmasını önlemek için servikal bölgede çalışırken künt diseksiyon ve ekstra özen gerektirir. Künt diseksiyon, anatomik diseksiyonda dokuların ayrıldığı ve alttaki yapıların kesilmeden ortaya çıkarıldığı bir tekniktir.
   4. Künt diseksiyon için makas, dokuları ayırmak yerine ayırmak için kullanılır. Kapalı uçlar dokuya itilir ve daha sonra dokuyu doğal düzlemler boyunca bölmek için açılır. Bu işlem sabır ve hassas bir dokunuş gerektirir, çünkü dokunun gerilmesi bitişik organlara ve kan damarlarına zarar verebilir.
   5. Altta yatan kaslardan kurtulduktan sonra bezler kaldırılır ve kalan ekler kopar.
   6. Bezler, fiksatifin nüfuz etmesine izin vermek için en az bir kesim gerektirir.
   7. Deri altı yağ, miktar ve birikim açısından değerlendirilir. Obez bir hayvan, cildi kalınlaşmış hissi ile çok miktarda yağa sahip olabilir. Susuz kalan hayvanların derisinin elastikiyeti azalacak ve daha ince hissedecektir.
4. Kas
   1. Boyun ve uzuvların karın, interkostal ve açıkta kalan kaslarını gözlemleyin. Herhangi bir anormal kalınlaşmaya, kütlelere veya renk bozulmasına dikkat edin.
   2. Analiz için kas gerekiyorsa, kan kontaminasyonunu azaltmak için herhangi bir karın organını almadan önce numuneyi seçin ve kesin.
5. Vücut boşluğunun açılması
   1. Açıkta kalan karın kasının en kaudal noktasında küçük bir enine kesi yapılır.
   2. Kası organlardan uzaklaştırarak, linea alba boyunca ksifoide kadar kesin.
   3. Karın kaslarını orta hattan yanal olarak, her iki taraftaki arka bacakların hemen üzerinde kesin.
   4. Karın kasını her iki taraftaki kaburgaların eğrisi boyunca kesin.
6. Karın yağı
   1. Vücut yağının miktarını ve birikimini değerlendirin. Sağlıklı bir hayvan, karın boşluğunda karın yüzeyi boyunca karın yağ yastıkçıklarına ve bir miktar yağa sahip olacaktır. Aşırı zayıf bir hayvan veya çok genç bir hayvan, böbrekleri çevreleyen kayda değer miktarda yağa sahip olmayacaktır.
   2. Vücut yağının rengini gözlemleyin ve herhangi bir anormalliği not edin.

3. Karın içi organlar

1. Karaciğer
   1. Normalde, karaciğer rengi koyu kırmızı olmalıdır. Kenar boşlukları pürüzsüz olmalı ve keskin bir kenara sahip olmalıdır. Anormal bir karaciğer kalınlaşmış bir kenara sahip olacaktır ve çentiklere veya taraklı kenarlara sahip olabilir.
   2. Gevrek bir doku olduğu için karaciğeri tutarken dikkatli olunmalıdır. Organın bütünlüğünün herhangi bir şekilde bozulması, kanın vücut boşluğuna sızmasına ve organların gizlenmesine neden olacaktır.
   3. Karaciğeri yavaşça diyaframdan uzağa yansıtın ve karaciğerin önündeki kan damarlarından bir kesik açın.
   4. Karaciğeri diyaframa doğru geri yansıtın ve karaciğerin tüm loblarını merkezi olarak birbirine bağlayan fibröz düğümü kavrayın. Bağırsak sistemine ve mideye olan tüm ekleri keserken karaciğeri kaldırın.
   5. Karaciğeri tek parça halinde çıkarın ve organın yüzeyindeki fazla kanı kurulayın. Fiksatif solüsyonların nüfuz etmesine izin vermek için daha ince bölümlere kesmeden önce bir tuzlu su banyosuna yerleştirilebilir veya steril tuzlu su ile durulanabilir.
2. Safra kesesi
   1. Safra kesesi, safra birikimi nedeniyle genellikle sarı görünen küçük şeffaf bir kesedir. Farelerde bulunur, ancak sıçanlarda bulunmaz.
   2. Safra kesesi, orta hat boyunca karaciğerin en üst lobları arasında bulunur. Genellikle diyaframa, yanlışlıkla yırtılabilen ve safra kesesinin yırtılmasına neden olabilen ince bir frenulum ile bağlanır.
   3. Safra kesesi karaciğer ile birlikte çıkarılabilir ve daha sonra muayene için ayrılabilir.
3. Dalak
   1. Dalak koyu kırmızıdır ve midenin alt eğriliği boyunca yer alır. Hafif mat bir yüzeye sahip, şekli düzenli olmalıdır.
   2. Genellikle erkeklerde kadınlardan daha büyüktür. İç parazit enfeksiyonları, bakteriyel enfeksiyonlar veya kan hastalıkları olan hayvanlarda genişlemiş dalaklar olabilir.
   3. Dalak, hasarlı kırmızı kan hücrelerini dolaşımdan filtrelediği için kanla dolar. Dalağı çıkarırken, organı delmekten kaçının.
   4. Çıkarmak için dalak kaldırılır ve mide ile dalak arasındaki ekler kesilir.
4. Bağırsak sistemi
   1. Ölüm sonrası değişiklikler hızlı bir şekilde meydana gelir ve dokularda kan göllenmesini içerir, bu da morarma görünümüne ve bağırsakların genellikle bakteri üremesi tarafından üretilen gazla balonlaşmasına neden olur. Bağırsak sistemi vücuttan atıldıktan sonra iyice incelenir.
5. Mide
   1. Mide, yemek borusunun distal ucunda bulunur. Kas ve glandüler kısımları farklılaştıran iki tonlu gibi görünmektedir.
   2. Mide, hissederek gıda varlığı açısından değerlendirilmelidir. Kemirgenler genellikle yüksek metabolizma hızı nedeniyle sürekli yemek yerler. Hastalığın göstergesi olabileceği için boş bir mideye dikkat edilmelidir.
   3. İçindekiler karın boşluğundaki organları kirleteceği için mideyi kesmeyin.
   4. Mideyi bağırsak yolundan çıkarmak için yemek borusu midenin hemen önünden kesilir. Mide ortak bir fiksatif kabına yerleştirilecekse, kesmeden önce mide içeriğinin dökülmesini önlemek için yemek borusunun etrafına bir parça dikiş bağlanabilir.
6. İnce bağırsak
   1. İnce bağırsak üç bölümden oluşur: duodenum, jejunum ve ileum. Dışkı topakları içermez.
   2. Duodenum, arka mide sfinkterinden jejunumun başlangıcına kadar olan daha kısa bir bölümdür. Safra kanalı ince bağırsağa duodenumdan girer ve pankreas dokusu ince bağırsağın bu kısmına daha sıkı bir şekilde bağlanır.
   3. Jejunum, ince bağırsağın merkezi kısmıdır.
   4. Küçük oval yamalar halinde lenfoid dokudan oluşan Peyer Yamaları, sıçanlarda jejunum ve ileumun mezenterik olmayan yüzeyinde bulunur. ³ Bunlar bağışıklık sisteminin bir parçasıdır ve bağışıklık hastalıklarının teşhisinde yardımcı olabilir.
   5. İleum, ince bağırsağın distal kısmıdır ve çekumda sonlanan en uzun kısımdır.
7. Çekum
   1. Çekum yeşilimsi bir renktedir ve çok yumuşaktır.
   2. İnce ve kalın bağırsakların birleştiği yerde bulunur.
   3. Çekumda fermantasyon meydana gelir, bu nedenle organın delinmesi kötü bir kokuya ve organların bakterilerle kirlenmesine neden olur.
8. Kalın barsak
   1. Kalın bağırsak çekumdan başlar ve anüse kadar devam eder. Dışkı peletleri bağırsağın lümeni içinde görselleştirilebildiği için kolayca tanımlanabilir.
   2. Ötenaziden hemen sonra herhangi bir kanama veya renk değişikliği alanı olmamalıdır.
9. Mezenter
   1. İnce ve kalın bağırsaklar, kan damarları, yağ ve lenf düğümleri içeren bir zar olan mezenter ile vücuda tutturulur.
   2. Bağırsak sistemi çıkarılmadan önce genişlemiş lenf bezleri ve herhangi bir kitle açısından incelenmelidir.
10. Pankreas
    1. Pankreas, midenin altında ve onikiparmak bağırsağının ilk kıvrımları arasında bulunan yaygın bir organdır. Açık ten rengi ila gri bir renktedir ve düzensiz kenarları olan çok sayıda küçük lobdan oluşur.
    2. Pankreasın tek parça halinde çıkarılması mümkün olmayabilir.
    3. Pankreas dokusu alınacaksa, bağırsak yolunun çıkarılmasından önce yapılmalıdır.
    4. Pankreas olarak tanımlanan doku, onu çevreleyen mezenterik dokudan dikkatlice uzaklaştırılmalıdır.
11. Bağırsak yolunun çıkarılması
    1. Bağırsak sistemi mideden başlayarak anüse kadar uzanacak şekilde tek parça halinde çıkarılır.
    2. Kalın bağırsaktan, anüsün hemen önünde bir kesi yapılır. Tüm bağırsak sistemi kaldırılabilir ve herhangi bir membranöz ataşman kopabilir. Bağırsak sistemi daha sonra mezenterden çıkarılabilir, bölümlere ayrılabilir ve sabitlenebilir.
    3. Bağırsak bölümlerini diğer organları içeren kavanozlara yerleştirirken, dokuların bağırsak bakterileri ile kontaminasyonunu önlemek için uçların bağlanması zorunludur.
    4. Bağırsak yolunun lümeni, küçük, ince uçlu makas kullanılarak uzunluğu kesilerek açığa çıkarılabilir. Lümen açığa çıktıktan sonra iç kısım durulanabilir.
    5. Bazı çalışmalar, bağırsağın bir kısmının kesilmek yerine çıkarılmasını ve yıkanmasını gerektirebilir. Eksize edilen dokunun bir ucuna künt bir iğne yerleştirilerek, içeriği temizlemek için salin veya fiksatif solüsyon bağırsağa zorlanabilir.
12. Böbrek
    1. Böbrekler, sırt kaslarına karşı yerleştirilmiş eşleştirilmiş organlardır. Sağ böbrek sola göre daha yüksektir. Yaşlı hayvanlarda böbrekler yağ birikintileri ile çevrili olabilir ve bu da onları görselleştirmeyi zorlaştırır.
    2. Yaklaşık olarak koyu renkli bir barbunya büyüklüğü ve rengindedir ve yüzeyleri pürüzsüz olmalıdır.
    3. Böbreğin hemen önünde, küçük, açık pembe bir nodül olarak görünen adrenal bez bulunur.
    4. Böbreği çıkarmak için, bir forseps kullanarak izole edin ve böbrek ile üreter arasında kesin.
    5. Böbrekler, yüzeyleri daha iyi görselleştirmek için soyulabilen sert bir dış kapsüle sahiptir. Bir böbreği uzun eksen boyunca ikiye bölün ve diğer böbreği enine kesin. Böbrekteki herhangi bir kumun, kristallerin veya mineral birikintilerinin varlığını gösterebileceğini unutmayın.
13. Kadın üreme sistemi
    1. Rahim, Y şeklinde bir yapıdır. Uterusun gövdesi kısadır ve solda ve sağda eşleştirilmiş boynuzlar vardır. Boynuzlar fallop tüplerinde ve yumurtalıklarda sonlanır. Hamile olmayan bir kadında, boynuzlar soluk pembe ve ince olacaktır. Hamile bir hayvanda, boynuzlar daha koyu görünecek ve rahim boynuzlarına bitişik uzanan belirgin kan damarlarına sahip olacaktır. Gebelik ilerledikçe, rahim boynuzları bir "inci dizisi" görünümüne sahip olacaktır. Gelişmekte olan embriyolar boynuz içinde soluk bir alan oluşturacak ve geliştikçe rahim gerilecek ve doku incelerek görselleştirmeye izin verecektir.
    2. Yumurtalıklar böbreklerin hemen altında yer alacaktır. Foliküllerin farklı olgunlaşma aşamaları nedeniyle pürüzlü bir yüzeye sahip olacaklardır. Kistik yumurtalıklar sıvı dolu veziküllere sahip olacaktır. Bu sıvı saman renginden sanguineous ile arasında değişebilir.
    3. Yumurtalıkları çıkarmak için, arteriyel ekleri öne ve fallop tüpünü arkaya doğru kesin. İstenirse yumurtalıklar rahime bağlı olarak dışarı alınabilir.
    4. Uterusu çıkarmak için, rahim ağzının altını kesebilmek için nazikçe kavranmalı ve çekiş uygulanmalıdır. Kesimden sonra, uterusun gövdesini ve boynuzlarını kaldırın, vücut boşluğundaki herhangi bir eki kırın.
14. Erkek üreme sistemi
    1. Seminal veziküller beyaz, koç boynuzu şeklinde, idrar kesesinin önünde yer alan ve prostat bezinde orta hatta yapışık eşleştirilmiş yapılardır. Boyut değişir, ancak çekum kadar büyük olabilirler.
    2. Prostat bezi, tabanda idrar kesesini çevreleyen bir yerde bulunur. Bu doku genellikle hafif bir bronzluktur. Yaşlı hayvanlarda hiperplazi gösterebilir. Yaşlı hayvanlar genellikle prostat bezinin görselleştirilmesini zorlaştırabilecek daha fazla vücut yağına sahip olacaktır.
    3. Testisler eşleştirilir ve skrotal keselerde bulunur. Yüzey pürüzsüz olmalı ve yüzeyde ince vaskülarizasyon görülmelidir. Fareler ve sıçanlar, hayvanın testisleri karın boşluğuna çekmesine izin veren bir kasık halkası veya sfinkterden yoksundur. Bunları görselleştirmek için, alt karın bölgesinde bulunan karın yağ yastıkçıklarını kavrayın ve öne doğru çekin. Bu, incelemeye izin vermek için testisleri skrotumdan çekecektir. Epididim, testisin alt kenarı boyuncadır ve tepeye doğru incelenir. Vas deferens, epididimin ucuna bağlanır ve prostata geri döner.
    4. Testislerin çıkarılması, skrotumdaki ekin kesilmesi ve vas deferens'in kesilmesi ile gerçekleştirilebilir.
    5. Prostat ve seminal veziküllerin çıkarılması, prostatın altındaki eklerin koparılmasında idrar kesesinin tabanının kavranması ve kaldırılması gerekir.

4. Göğüs boşluğu

1. Akciğer
   1. Akciğerler normalde parlak pembe renktedir ve pürüzsüz bir yüzeye sahip süngerimsi bir dokuya sahiptir. Bununla birlikte, CO₂ ile ötenazi akciğer kanamalarına neden olabilir ve bu da tüm akciğer yüzeyini kaplayabilen koyu kırmızı lekelere neden olabilir.
2. Kalp
   1. Kalp koyu kırmızıdır ve dört odacıklıdır. Ventriküller kaslıdır ve dokunulduğunda sıkı bir his verir. Kulakçıklar daha koyu kırmızı renktedir ve ventriküllerin tepesinde bulunur. Çok daha az kaslıdırlar ve sarkık görünürler.
   2. Perikardiyal kese, kalbi çevreleyen ince, yarı saydam bir zardır.
3. Timus
   1. Timus kalbin önünde bulunur ve trakeanın üzerine oturur. Dokusu pürüzsüz olmalıdır.
   2. Genç hayvanlarda yağlı bir dokuya sahip ten rengi olarak görünür.
   3. Daha yaşlı hayvanlar, yağ dokusunun timusa sızmasına, onu büyütmesine ve timusa beyaz bir renk vermesine neden olacaktır.
4. Trakea
   1. Trakea, epiglottan bronşların çatallanmasına kadar uzanır. Esnek olan çıkıntılı, kıkırdaklı bir tüptür.
   2. Berrak olmalı ve lümende herhangi bir sıvı veya köpüklü sıvı bulunmamalıdır. CO₂ ile ötenazi, kanamaya bağlı olarak akciğerlerde ve soluk borusunda sıvı (serosanguinöz ve/veya köpüklü) birikime neden olabilir.
5. Yemek borusu
   1. Yemek borusu ağız boşluğundan mideye kadar uzanır. Soluk borusunun hemen arkasında ve kalbin arkasında yer alan ve diyaframdan mideye geçen çok ince bir tüptür.
   2. Doku esnek olmasına rağmen kolayca yırtıldığı için yemek borusunun çıkarılması zordur. Yemek borusunun çıkarılması en kolay şekilde, kalp ve akciğerlerin çıkarılmasından sonra trakeadan diseke edilerek yapılır.
6. Torasik organların çıkarılması
   1. Kalp ve akciğerler en kolay şekilde birlikte çıkarılır.
   2. Forsepsleri trakeaya dik olarak yerleştirin ve trakeayı timusun hemen üzerine sıkıca tutun.
   3. Makası kullanarak, forsepsin hemen önünde trakeaya dik bir kesim yapın. Bu kesi soluk borusu ve yemek borusunu kesmelidir.
   4. Trakea üzerindeki tutuşu gevşetmeden, trakeayı kaudal olarak yukarı kaldırın ve akciğerlerin göğüs kafesindeki omurga yüzeyine olan tüm eklerini kesin.
   5. Kalbi ve akciğerleri göğüs boşluğundan kurtarabilmek için yemek borusunun kesilmesi gerekebilir.
   6. Kalp vücuttan çıkarıldıktan sonra, kalan kan ve pıhtıları çıkarmak için tuzlu su ile yıkanabilir veya aort yoluyla fiksatif ile doldurulabilir.
   7. Akciğerler eksize edildikten sonra fiksatif ile şişirilir. Trakeanın etrafına gevşek bir şekilde bir bağ yerleştirilir. Tercih edilen fiksatifi içeren bir şırıngaya bağlanan bir iğne, trakeanın lümenine geçirilir. Ligatür iğnenin etrafında sıkılır ve akciğerler şişene kadar fiksatif enjekte edilir. İğnenin çıkarılmasından sonra, sızıntıyı önlemek için bağ sıkılır.
7. Ağız boşluğu
   1. Dil
      1. Kemirgenlerin dili pürüzsüzdür.
      2. Alt taraf da dahil olmak üzere yüzeyi lezyonlar açısından inceleyin.
      3. Dil, ağız kanseri çalışmaları gibi özel araştırmalar dışında nadiren hasat edilir.
      4. Dili çıkarmak için, ağız boşluğunun her iki yanındaki bukkal yüzeylerden temporal-mandibular eklemi kesin.
      5. Mandibulayı yerinden çıkarın ve epiglot ve dilin tabanını ortaya çıkarmak için maksillayı yansıtın.
      6. Dili uzatmak için forseps kullanarak, alttaki ekleri kaudal olarak dilin tabanına doğru kesin.
      7. Çekişi koruyarak, ağız boşluğundan kurtarmak için dilin tabanında yatay olarak kesin.
   2. Dişler
      1. Sıçan dentasyonu, üç azı dişi ve her kadranda dişsiz bir diastema ile ayrılan bir kesici dişten oluşur. Sadece labial tarafta emaye ile kaplıdırlar; Dişin iç yüzeyinde dentin bulunur.
      2. Sıçan dişleri normalde sarı/turuncu renktedir. Bu renk en çok kesici diş minesinde belirgindir ve demir içeren bir pigmentin varlığından kaynaklanır. Renk doğumdan yaklaşık 21 gün sonra başlar ve yaşla birlikte derinleşir.
      3. Dişleri aşırı büyüme veya maloklüzyon açısından inceleyin.

5. Kafa

1. Göz
   1. Gözler eşit büyüklükte olmalı ve eksüdadan arındırılmış olmalıdır. Konjonktiva pürüzsüz olmalıdır.
   2. Gözleri çıkarmak için, gözü çevreleyen cilde geriye ve aşağıya doğru baskı uygulayarak gözü yörüngeden çıkıntı yapın. Kavisli uçlu bir forseps kullanarak, küreyi izole edin ve onu yuvada tutan ataşmanları kesin.
2. Kulak
   1. Tanımlama için kulakları gözlemleyin. Bazı araştırmacılar, hayvan kimliğinin doğrulanması için kulak küpelerinin organ örneklerine dahil edilmesini talep etmektedir.
   2. Kulak kanalları herhangi bir lezyon, kitle veya eksüda açısından incelenir.
3. Burun
   1. Burun sıvı veya eksüda açısından gözlenir.
   2. Burun delikleri simetrik ve net olmalıdır.

Nekropsi - organların ölüm sonrası incelemesi anlamına gelir - ve doku hasadı, hasat edilen organların analizlerinden toplanan nihai veri toplama zaman noktalarına dayanan birçok laboratuvar deneyinin ayrılmaz bileşenleridir. Bu nedenle, prosedür toplanan numunelerin kalitesini önemli ölçüde etkileyebileceğinden, doğru tanısal nekropsi ve doku toplama tekniğini öğrenmek önemlidir. Bu sunum, laboratuvar hayvanlarından karın, üreme ve torasik organların diseksiyonu ve ekstraksiyon yöntemini gözden geçirecektir.

Prosedüre başlamadan önce, hayvanın tam bir geçmişini içeren bir form başlatılmalıdır: hayvan kimlik numarası, cinsiyet, barınma koşulları, doğum tarihi, ölüm tarihi, çalışma/protokol numarası ve Baş Araştırmacının adı.

Ardından, diseksiyon alanını hazırlayın. Makas, forseps, steril neşter bıçağı, kemik kesiciler, künt prob, küçük spatula ve emilmeyen dikiş malzemesi içeren nekropsi için tasarlanmış aletler, diseksiyon tepsisi ve bir tezgah örtüsü yerleştirin. Histolojik inceleme için organ ve doku toplama, dokuların fiksatif bir çözelti içinde korunmasını gerektirir. Aksi belirtilmedikçe, en yaygın olarak kullanılan fiksatif %10 nötr tamponlu formalindir. Fiksatif çözeltinin yeterli penetrasyonuna izin vermek için doku örneklerinin kalınlığının 0,5-1 cm olması gerektiğini unutmayın. Fiksasyon çürümeyi, otolizi ve çürümeyi önler; devam eden biyokimyasal reaksiyonları durdurur; ve tedavi edilen dokuların mekanik mukavemetini ve stabilitesini artırabilir.

Hayvanın ötenazi yöntemi de numunelerin kalitesini etkileyebilir. Fareler ve sıçanlar için en yaygın kullanılan ötenazi yöntemi aşırı dozda karbondioksit gazıdır. Hayvanlar, bir odaya yerleştirilen ev kafeslerinde bırakılır ve CO2, oda hacminin/dakikasının %10-30'u kadar bir yer değiştirme hızında kademeli olarak odaya verilir. Bu, hayvanların karbonik asit tarafından nosiseptör aktivasyonu ile ilişkili ağrı algısından önce bilincini kaybetmesine neden olur. Akış daha sonra solunum durması meydana gelene ve hayvan ölene kadar odada tutulur.

Ötenaziyi takiben, önce karkası lezyonlar ve kitleler, aşırı diş büyümesi veya ağızda, burunlarda, kulaklarda, gözlerde ve anal ve genital açıklıklarda kürkte herhangi bir lekelenme olup olmadığını görsel olarak inceleyerek ilk dış muayeneyi yapın. Gerekirse, dış parazitleri tespit etmek için bir bant testi, cilt kazıma ve post muayeneleri yapın. Dış muayene tamamlandıktan sonra, karın boşluğundan başlayarak nekropsiye başlama zamanı gelmiştir. Herhangi bir doku örneğini çıkarmadan önce, organı yerinde gözlemlemenin önemli olduğunu unutmayın.

Cildi eksize etmeye başlamak için, kadınlarda pelvisin hemen önüne ve erkeklerde prepusun üzerine küçük bir kesik yerleştirin. Daha sonra künt diseksiyon tekniğini kullanarak cildi fasya ve kastan gevşetin. Künt diseksiyon, anatomik diseksiyonda dokuların ayrıldığı ve alttaki yapıların kesilmeden ortaya çıkarıldığı bir tekniktir. Bu teknikte makas, dokuları ayırmak yerine ayırmak için kullanılır. Kapalı uçlar dokuya itilir ve daha sonra dokuyu doğal düzlemler boyunca bölmek için açılır. Bu işlem sabır ve hassas bir dokunuş gerektirir, çünkü dokunun gerilmesi bitişik organlara ve kan damarlarına zarar verebilir. Ardından kesimi çeneye kadar uzatın. Daha sonra, arka bacakların önünü ve ön ayakların arkasını enine keser ve servikal alanı ve göğsü ortaya çıkarmak için künt diseksiyon kullanın. Boyundaki şah damarı ve şah damarlarının yırtılmaması için ekstra özen gösterilmelidir.

Dişilerde, deri eksize edildiğinde, manubriumdaki sternumun tepesinden ventral yüzeydeki genital açıklığa kadar meme dokusunu gözlemleyin; her iki tarafta yanal olarak uzanan. Emziren veya hamile kadınlarda meme dokusu hacmi artmış olacaktır ve süt mevcut olabilir. Meme bezlerini çıkarmak için, doku kenarını forseps ile kavrayın ve cilde olan ekleri gevşetmek için künt diseksiyon kullanın. Bez ayrıldıktan sonra, sonraki histolojik analiz için fiksatif bir çözeltiye yerleştirilebilir.

Bu aşamada, mandibulada eşleştirilmiş ve yerleştirilmiş submandibuler tükürük bezlerini gözlemleyebilirsiniz - boyun boyunca manubrium sternuma kadar uzanır. Bu bezlerin çıkarılması, kan damarlarının yırtılmasını önlemek için servikal bölgede çalışırken künt diseksiyon ve ekstra özen gerektirir. Altta yatan kaslardan kurtulduktan sonra, bezleri kaldırın ve kalan ekleri kesin. Bezler, fiksatifin nüfuz etmesine izin vermek için en az bir kesim gerektirir.

Ek olarak, epiglottan bronşların çatallanmasına kadar uzanan trakeayı görebilirsiniz. Esnek olan çıkıntılı, kıkırdaklı bir tüptür. Normalde berrak olsa da, CO2 ile ötenazi akciğerlerde ve trakeada köpüklü berrak bir sıvı gibi görünen sıvı birikimine neden olabilir. Deri altı yağları da bu bölgede bulunacaktır. Miktar ve biriktirme için değerlendirin. Obez bir hayvan, cildi kalınlaşmış hissi ile çok miktarda yağa sahip olabilir.

Vücut boşluğunu açmadan önce, karın, interkostal ve açıkta kalan boyun kaslarını ve uzuvları herhangi bir kalınlaşma, kitle veya renk değişikliği açısından gözlemleyin. Vücut boşluğunu açmak için, önce açıkta kalan karın kasının en kaudal noktasında küçük bir enine kesim yapın. Sonra kası organlardan uzaklaştırın ve linea alba boyunca ksifoide kadar kesin. Daha sonra, kasları orta hattan her iki taraftaki arka bacakların hemen üstüne kadar yanal olarak inceleyin. Son olarak, her iki taraftaki kaburgaların eğrisi boyunca kesin. Vücut boşluğu açıldıktan sonra, karın yağının miktarını ve birikimini değerlendirin. Sağlıklı bir hayvan, karın yağ yastıkçıklarına ve boşluktaki sırt yüzeyi boyunca bir miktar yağa sahip olacaktır. Bu dokunun rengini gözlemleyin ve herhangi bir anormalliği not edin.

Şimdi karın organlarının hasadına başlamaya hazırız. Koyu kırmızı olan ve midenin alt eğriliği boyunca yer alan dalağı bularak başlayın. Şekli düzenli ve hafif mat bir yüzeye sahip olmalıdır. Dalağı çıkarmak için organı kaldırın ve ekleri mideye kesin.

Mide, yemek borusunun distal ucunda bulunur. Kas ve glandüler kısımları farklılaştıran iki tonlu gibi görünmektedir. Yiyecek varlığı için hissedin. Hastalığın göstergesi olabileceği için boş bir mideye dikkat edilmelidir. İçindekiler karın boşluğundaki organları kirleteceği için mideyi kesmeyin.

İnce bağırsaklar distal olarak bağlanır ve mideye daha aşağıdır. İnce bağırsağın üç ayrı bölümü vardır. Birincisi duodenum - arka mide sfinkterinden jejunumun başlangıcına kadar daha kısa bir bölüm. Safra kanalı buradan girer ve pankreas dokusu ince bağırsağın bu kısmına daha sıkı bir şekilde bağlanır. Jejunum orta kısımdır. Lenfoid dokudan oluşan küçük oval alanlar olan Peyer Yamaları, jejunum ve ileum yüzeyinde görülebilir. İleum, ince ve kalın bağırsakların birleştiği yerde bulunan çekumda sonlanan ince bağırsağın en uzun kısmıdır. Çekum yeşilimsi renkte görünür ve çok yumuşaktır.

Kalın bağırsak çekumdan anüse kadar devam eder. Dışkı peletleri bu yapının lümeni içinde görselleştirilebildiği için kolayca tanımlanabilir. İnce ve kalın bağırsaklar, kan damarları, yağ ve lenf düğümleri içeren bir zar olan mezenter ile vücuda tutturulur. Bu, bağırsak sistemi çıkarılmadan önce genişlemiş lenf düğümleri ve herhangi bir kitle açısından incelenmelidir. Pankreas, midenin arkasında bulunan yaygın bir organdır. Açık ten rengi ila gri bir renktedir ve düzensiz kenarları olan çok sayıda küçük lobdan oluşur. Pankreası toplamak için organı kavrayın ve çevredeki mezenterik dokudan nazikçe çıkarın. Bu, bağırsak yolunun çıkarılmasından önce yapılmalıdır.

Mideden başlayıp anüse kadar uzanan tüm yolu tek parça halinde çıkarmak için önce rektuma bir bağ yerleştirin ve ardından anüsün hemen önündeki kalın bağırsaktan bir kesi yapın. Daha sonra, yemek borusu ve midenin birleştiği yere bir bağ yerleştirin, ardından tüm bağırsak sistemi kaldırılabilir ve zarlı ekler kesilebilir. Her şey daha sonra mezenterden ayrılabilir, bölümlere ayrılabilir ve sabitlenebilir.

Böbrekler, sırt kaslarına karşı yerleştirilmiş eşleştirilmiş organlardır. Koyu renkli bir barbunya büyüklüğünde ve renginde olmalı ve pürüzsüz bir yüzeye sahip olmalıdır. Böbreğin hemen önünde, küçük açık pembe bir nodül olarak görünen adrenal bez bulunur.

Bir böbreği çıkarmak için, bir forseps kullanarak izole edin ve organ ile üreter arasında kesin. Sert dış tabaka daha sonra yüzeyi incelemek için soyulabilir. Bir böbreği uzun eksen boyunca ikiye bölün ve diğerini enine kesin. İçindeki herhangi bir kum, kristallerin veya mineral birikintilerinin varlığını gösterebilir. Son olarak, koyu kırmızı renkli olan karaciğeri çıkarın ve kenarları pürüzsüz ve keskin bir kenara sahip olmalıdır. Gevrek bir doku olduğu için karaciğeri tutarken dikkatli olunmalıdır. Organın bütünlüğündeki herhangi bir bozulma, kanın vücut boşluğuna sızmasına ve diğer organların gizlenmesine neden olacaktır.

Karaciğeri çıkarmak için önce lobları diyaframdan nazikçe yansıtın ve yapının önündeki kan damarlarından bir kesik açın. Daha sonra, karaciğeri diyaframa doğru geri yansıtın ve tüm lobları merkezi olarak birbirine bağlayan fibröz düğümü kavrayın. Son olarak, bağırsak sistemine ve mideye olan tüm bağları keserken organı kaldırın.

Kadın üreme sistemi rahim ve yumurtalıklardan oluşur. Rahim, her iki yöne uzanan boynuzları olan Y şeklinde kısa bir yapıdır. Boynuzlar, fallop tüplerinde ve böbreklerin hemen altında bulunan yumurtalıklarda sona erer. Foliküllerin farklı olgunlaşma aşamaları nedeniyle yumurtalıklar pürüzlü bir yüzeye sahip olacaktır.

Yumurtalıkları çıkarmak için, arteriyel ekleri öne ve fallop tüpünü arkaya doğru kesin. Uterusu çıkarmak için, rahim ağzının altını hafifçe kavrayın ve kesin. Kesimden sonra, vücut boşluğundaki herhangi bir eki kırarak uterusun gövdesini ve boynuzlarını kaldırın.

Erkeklerde, prepusun hemen önünde bulunan preputial bezleri de gözlemleyebilirsiniz. Büyük görünürler ve köpüklü bir görünüme sahip gri ila sarımsı bir renktedirler. Bu bezlerin çıkarılması ve sabitlenmesi submandibular bezlere benzer. Ek olarak, erkek üreme sistemi seminal veziküller, prostat bezi ve testislerden oluşur. Seminal veziküller, idrar kesesinin önünde bulunan ve prostat bezinde orta hatta yapışık beyaz, "koç boynuzu şeklinde" yapılardır.

Prostat bezi - genellikle açık ten rengi - tabanda idrar kesesini çevreleyen bir yerde bulunur. Testisleri görselleştirmek için, alt karın bölgesinde bulunan karın yağ yastıkçıklarını kavrayın ve öne doğru çekin. Bu, incelemeye izin vermek için testisleri skrotumdan çekecektir. Yüzey pürüzsüz olmalı ve yüzeyde ince vaskülarizasyon görülmelidir.

Epididim, testisin alt kenarı boyuncadır ve tepeye doğru incelenir. Vas deferens, epididimin ucuna bağlanır ve prostata geri döner. Testisleri çıkarmak için, skrotumdaki ataşmanı kesin ve vas deferens'i kesin. Prostat ve seminal vezikülleri çıkarmak için idrar kesesinin tabanını kavrayın ve prostatın altındaki ekleri keserken kaldırın.

Göğüs boşluğu içindeki organlara geçiyoruz. Hayati yapıları ortaya çıkarmak için, diyaframı kaburgalara olan bağlantıdan çıkarın. Daha sonra, göğüs kafesini her iki taraftan manubrium sternumun tepesine kadar yanal olarak kesin ve ardından torasik organları görselleştirmek için kemikleri kraniyal olarak yansıtın.

Akciğerler normalde parlak pembe renktedir, süngerimsi bir dokuya ve pürüzsüz bir yüzeye sahiptir. Bununla birlikte, CO2 ile ötenazi akciğer kanamalarına neden olabilir ve bu da tüm akciğer yüzeylerini kaplayabilen koyu kırmızı lekelere neden olabilir.

Kalp koyu kırmızıdır ve ventriküller kaslıdır, bu da dokunulduğunda sert hissettirir. Kulakçıklar daha koyu kırmızı renktedir ve ventriküllerin tepesinde bulunur. Çok daha az kaslıdırlar ve sarkık görünürler. Perikardiyal kese adı verilen ince yarı saydam bir zar kalbi çevreler.

Timus kalbin önünde bulunur ve trakeanın üzerine oturur. Dokusu pürüzsüz olmalıdır. Soluk borusunu daha önce anlatıldığı gibi görebilirsiniz ve yemek borusu doğrudan soluk borusunun arkasında ve kalbin arkasında yer alan ve diyaframdan mideye geçen çok ince bir tüptür.

Göğüs boşluğundaki organları çıkarmak için, timusun hemen üzerindeki trakeayı kavrayarak başlayın ve forsepsin hemen önünde dik bir kesim yapın. Kavramayı korurken, trakeayı kaudal olarak yukarı kaldırın ve akciğerlerin göğüs kafesindeki omurga yüzeyine olan tüm eklerini kesin. Kalbi ve akciğerleri göğüs boşluğundan kurtarabilmek için yemek borusunun kesilmesi gerekebilir

Kalp vücut için çıkarıldıktan sonra, kalan kan ve pıhtıları çıkarmak için tuzlu su ile yıkayın veya aort yoluyla fiksatif ile doldurun. Akciğerler eksize edildikten sonra, trakeanın etrafına gevşek bir bağ yerleştirin. Daha sonra, fiksatif içeren bir şırıngaya bağlı bir iğneyi trakeanın lümenine geçirin ve ligatürü sıkın. Daha sonra akciğerler şişene kadar sabitleyiciyi enjekte edin. Son olarak, sızıntıyı önlemek için iğneyi çıkarın ve bağı daha da sıkın.

Kemirgen nekropsisi ve doku hasadı ile ilgili bu bilgi birikimiyle, bu prosedürleri içeren mevcut laboratuvar deneylerinden bazılarına bakalım.

Tanısal nekropsi, kanser metastazı deneylerinde yaygın bir son noktadır. Bu örnekte, araştırmacılar kanser hücrelerini kemirgenin dalağına enjekte ettiler Daha sonra, otuz ila altmış gün sonra, önemli karaciğer metastazlarını ortaya çıkaran nekropsi yaptılar.

Doku ekstraksiyonunu genellikle numunenin mikroskobik anatomisinin incelenmesine yardımcı olan histolojik analiz takip eder. Araştırmacılar, dokuların fiksasyonu, gömülmesi, kesitlenmesi ve boyanması protokolünü takip ederek, bu organlardaki mikroskobik yapıları inceleyebilir ve atomik düzeyde genetik veya farmakolojik müdahalelerin etkisini ortaya çıkarabilirler.

Bazen araştırmacılar, anjiyogenez gibi fizyolojik süreçleri incelemek için dokuları çıkarırlar. Burada, deneyciler vasküler büyümeyi uyarmak için bir farenin mezenterik dokusunu dıştan çıkardılar. Daha sonra, birkaç bölüm topladılar ve vasküler ağ büyümesinde yer alan hücresel dinamikleri incelemek için herhangi bir kan damarının hücrelerini lekeleyen belirteçlerle tedavi ettiler.

JoVE'nin laboratuvar hayvanlarında tanısal nekropsi ve doku toplama adımlarını detaylandıran videosunu izlediniz. Organın çıkarılması ve korunması için uygun tekniklerin kullanılması önemlidir, böylece ekstraksiyon prosedürünün toplanan verilerin yorumlanması üzerinde hiçbir etkisi olmaz. Her zaman olduğu gibi, izlediğiniz için teşekkürler!