Name: Fareler için açık / koyu Geçiş Testi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2006-11-13T00:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 35 s
Description: Öğrenin farelerde anksiyete benzeri davranışları değerlendirmek için açık/koyu geçiş testi yöntemini. Bu davranışsal nörobilim tekniği, insan anksiyete bozukluklarına dair önemli bilgiler sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu araştırma tarafından desteklenen Hibeler Genç Bilim Keşif Araştırma (A) (16.680.015), Grant-in-Aid (16.653.065), Bilimsel Araştırma Öncelikli Alanlar için Grant-in-Aid (18.023.022,-Aid # Milli Eğitim Bakanlığı, Kültür, Spor, Bilim ve Teknoloji Japonya, Hibe Yardım Biyomedikal Yenilik Ulusal Enstitüsü (NIBIO), Sağlık Bilimleri Temel Araştırmalar Teşvik Grant-18.016.012 # 18.053.015) Nöroinformatik Japonya Merkezi (NIJC), RIKEN yardım

<ol><li> Açık / koyu geçiş testi için kullanılan aparat, bir kapısı olan bir bölüm (Ohara &amp; Co, Tokyo) tarafından eşit büyüklükte iki bölüme ayrılır bir kafes (21x42x25 cm) oluşuyordu. </li><li> Fareler, yiyecek ve su ad libitum erişim ile 12 saat ışık / karanlık döngüsü (7:00 PM ışıklar) ile bir odaya kafes ortalama 3-4 ev sahipliği yapmaktadır. İdeal olarak, iki kontrol ve iki mutant fareler sütten zaman genotip olarak en kısa sürede yeniden organize ederek, birlikte ev sahipliği yapmaktadır. Davranışsal test 9:00 arasında yapılan ve ilk deneme başlamadan önce, farelerin içeren tüm kafesleri davranış test odası 30 dakika transfer PM 06:00. </li><li> Bir odasının diğer odasının karanlık (2 lux) ise parlak, beyaz diyotlar (390 lüks) tarafından aydınlatılır. Fareler karanlık tarafına yerleştirilir ve fare kızılötesi kamera tarafından tespit edildiğinde otomatik olarak 3 saniye sonra kapı açıldı. Kapı farelerin ışık odasına girmek için gecikme kaygı gibi davranış bir göstergesi olarak hizmet edebilir, deneyci kaçmak için motivasyon yayımlanmasından sonra hemen ışık odasına girmeyin bu kadar kullanılır. </li><li> Fare 10 dakika süreyle açık kapı ile iki odadan arasında serbestçe hareket etmesine izin verilir. (Görüntü LD4) davranışsal veri edinme ve analiz için kullanılan uygulama, kamu malı Görüntü J programı (Ulusal Ruh Sağlığı Enstitüsü byWayne Rasband gelişmiş ve http://rsb.info.nih.gov/ij mevcut dayanmaktadır /), Tsuyoshi Miyakawa (O&#39;Hara &amp; Co, Tokyo, Japonya üzerinden kullanılabilir) tarafından güncellenmiştir. </li><li> Mesafe, her kamarada yolculuk geçişleri toplam sayısı, her odasında geçirdi ve Görüntü LD4 programı tarafından kaydedilen hafif chamberare girmek için gecikme. </li><li> Her bir yargılama sonucunda, tüm odaları koku alma ipuçları dayalı bir önyargı önlemek için süper hipokloröz su ile temizlenir. </li></ol>

<ol><li>Austin, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+knockout+mouse+project%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">The knockout mouse project.</a> Nat Genet. 36, 921-924 (2004).</li>
<li>Aiba, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+liaison+for+integrative+brain+research%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse liaison for integrative brain research.</a> Neurosci Res. 58, 103-104 (2007).</li>
<li>Takao, K., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+gene-to-behavior+pathways+in+psychiatric+disorders%3A+the+use+of+a+comprehensive+behavioral+test+battery+on+genetically+engineered+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Investigating gene-to-behavior pathways in psychiatric disorders: the use of a comprehensive behavioral test battery on genetically engineered mice.</a> Ann N Y Acad Sci. 1086, 144-159 (2006).</li>
<li>Takao, K., Yamasaki, N., Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+brain-behavior+phenotypying+of+genetically-engineered+mice+on+research+of+neuropsychiatric+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Impact of brain-behavior phenotypying of genetically-engineered mice on research of neuropsychiatric disorders.</a> Neurosci Res. 58, 124-1232 (2007).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What%27s+Wrong+With+My+Mouse%3F+Behavioral+Phenotyping+of+Transgenic+and+Knockout+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">What's Wrong With My Mouse? Behavioral Phenotyping of Transgenic and Knockout Mice.</a> , John Wiley & Sons. (2000).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploratory+behavior+models+of+anxiety+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">Exploratory behavior models of anxiety in mice.</a> Neurosci Biobehav Rev. 9, 37-44 (1985).</li>
<li>Crawley, J., Goodwin, F. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preliminary+report+of+a+simple+animal+behavior+model+for+the+anxiolytic+effects+of+benzodiazepines%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Preliminary report of a simple animal behavior model for the anxiolytic effects of benzodiazepines.</a> Pharmacol Biochem Behav. 13, 167-1670 (1980).</li>
<li>Miyakawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conditional+calcineurin+knockout+mice+exhibit+multiple+abnormal+behaviors+related+to+schizophrenia%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Conditional calcineurin knockout mice exhibit multiple abnormal behaviors related to schizophrenia.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 8987-8992 (2003).</li>
<li>Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+mouse+behavior%3A+interactions+with+laboratory+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genetics of mouse behavior: interactions with laboratory environment.</a> Science. 284, 1670-162 (1999).</li>
</ol>

Tüm işlemler, Kyoto Üniversitesi Hayvan Kullanım ve Bakım Komitesi tarafından kabul edildi. Tsuyoshi Miyakawa KUŞ, Japonya Bilim ve Teknoloji Ajansı, Saitama, Japonya ile ilişkilidir.

Tüm fare genomu dizilerinin belirlenecek olmasına rağmen, bu genlerin çoğunun fonksiyonları bilinmemektedir. Gen hedefleme teknikleri, ancak, belirli bir genin, farelerde (; Austin ve ark, 2004. Aiba ve ark, 2007) silebilir veya işlemek için kullanılan olabilir. Verilen bir genin belirli bir davranışı üzerinde etkisi daha sonra mutant fareler davranışsal analizler yaparak (Takao ve ark, 2007 Takao ve Miyakawa, 2006) tespit edilebilir. Mutant farelerde davranış fenotipleme için bir test olarak, açık / koyu geçiş testi farelerde davranış (Crawley, 2000) gibi anksiyete ölçmek için en yaygın kullanılan testler biridir. Test aydınlatılmıştır alanlarda farelerin doğal kaçınma ve roman ortamlarda kendiliğinden keşif davranışı (Crawley, 1985) dayanır. Test anksiyolitik ilaç tedavisi (Crawley, 1985) duyarlıdır. Cihaz karanlık bir oda ve aydınlık odasına oluşur. Kısıtlı açılması, 3 cm yüksekliğinde ve 5 cm genişliğinde, iki odadan bağlanır. Fareler iki odaları arasında serbestçe hareket etmesine izin verilir. Parlak odasına giriş sayısı ve süresini parlak alan farelerde anksiyete göstergeleri olarak kullanılmaktadır geçirdi. Açık / koyu geçiş testi başlangıçta Crawley ve arkadaşları (Crawley ve Goodwin, 1980) tarafından geliştirilmiştir. Orijinal versiyonu ve test arasında iki fark vardır. Birincisi, iki odaların büyüklüğü test sürümü aynı ise hafif odası, orijinal versiyonu karanlık oda daha büyüktür. İkinci olarak, orijinal versiyonu, ışık odasının tavanı yoktu ve biz ışık odasının tavan ve duvar için opak beyaz plastik kullanımı sırasında ışık odasının duvarları, saydam olan (Crawley ve Goodwin, 1980). Yani Bu farklılıklar, ışık odanın büyüklüğü ve açıklık, aynı anda parlak uzay anksiyete tespiti yanı sıra, testin orijinal versiyonunda, açık alan anksiyete için izin verir. Laboratuvarımızda, ancak, açık alan farelerde davranış gibi anksiyete, yükseltilmiş artı labirentte test edilir. Opak duvarlar ve tavan, ışık odanın büyüklüğü ve bizim özel ışık / karanlık geçiş test protokolü, orijinal sürümüne göre parlak boşluk anksiyete tespit daha uzmanlaşmıştır. Açık / koyu geçiş testi ve yükseltilmiş artı labirent anksiyete gibi davranış değerlendirmek için kullanılır olmasına rağmen, sonuçlar her zaman tutarlı değildir. Örneğin, ışık açık / koyu geçiş test odasında önbeyin özel kalsinörin knockout farelerde azalma miktarı bir zaman harcamak, ancak yükseltilmiş artı labirent kolları açık bir artış miktarı (Miyakawa ve ark, 2003) . Biz, bizim açık / koyu geçiş testi ve yükseltilmiş artı labirent testleri gibi parlak boşluk anksiyete ve açık alan, kaygı gibi davranış olarak kaygı gibi davranış farklı yönlerini değerlendirmek varsaydık. Bu hipotezi test etmek için, biz büyük bir veri her iki testte de aynı fareler kullanılarak toplanan ayarlayın. Laboratuvarımızda, gen davranış önemi için ekran için birçok etki alanı kapsayan davranış testi pilleri yürütürler. Birkaç hafta test bataryası tamamlamak için gereklidir. Test dönemi boyunca, fare kafesleri tesisimiz bir raf üzerinde tutulur. Farelerin diğer kurumlarda laboratuvar varsa, bunlar bizim tesisin çevreye en az 1 hafta alışmış. Alışma döneminden sonra, farelerin genel bir sağlık kontrolü ve tarama nörolojik (Miyakawa ve ark, 2003) tabi tutulur, ve bu basit incelemelerin ardından, fareleri açık / koyu geçiş testine tabi tutulur. Filmde gösterildiği gibi, test, deney odasına alışma 30 dakika sonra bir ses geçirmez deney odasında yapılır. Biz 60&#39;tan fazla filmin gösterildiği protokolünü kullanarak genetiği mutant farelerin suşları değerlendirilmeli ve 3000&#39;den fazla fareler (yabani tip ve mutant fareler de dahil olmak üzere) için ham veriler büyük bir set var. Biz büyük ham veri seti yararlanmak için faktör analizleri gerçekleştirilmiştir. Aslında indeksleri (yayınlanmamış veri) arasında bazı anlamlı korelasyon olmasına rağmen, biz, her bir test (yayınlanmamış veri) farklı faktörleri tespit .. Bu veriler şu anda inşa ediyoruz halka açık bir veritabanı bir parçası olarak ilan edilecektir. Test bataryası, yabani tip littermates genellikle kontrol olarak kullanılır. Bir arka plan gerginlik olarak, C57BL/6J farelerin yaygın olarak kullanılmaktadır. Biz C57BL/6J farelerde test bataryası mutant farelerin kontrol olarak kullanılan veri topladı. Aşağıdaki gibi açık / koyu geçiş testi C57BL/6J fareler elde endeksleri (n = 795, ortalama SEM); katedilen mesafe: 846,5 8.88 cm ışık odasında, karanlık odasında 1478,5 9.53 cm; zaman süresi geçirdim : ışık 215,8 1.85 s, karanlıkta 395,8 1.86; bölmeleri arasındaki geçişlerin sayısı: 30.52 0.43; ışık odasına girmek için gecikme: 64.94 2.40 s Odalarına girişlerinde çevresinde farelerin Hareketi kamera tarafından tespit edilir ve c hem harcanan zaman olarak sayılırhambers. Bu nedenle, zaman süresi ortalama toplam harcanan ışık ve karanlık bölümlerinde testi (600 s) tüm süresi daha fazlaydı. Protokolde, bir fare ilk karanlık odasında yerleştirilir. Üç saniye karanlık odasında fare yerleştirdikten sonra, odaları arasında kapı otomatik olarak açılır ve iki odadan fare arasında serbestçe hareket edebilir. 215,8 1.85 s, karanlıkta harcanan zaman süresi: 316,3 2.11 s [zaman karanlıkta harcanan C57BL/6J fareler (p &lt;0.0001, süresi ışık harcanan ışık odasında karanlık odasında daha az zaman harcamak ilk kez], n = 795, eşleştirilmiş t testi) ilk kez ışık odasına girmeden önce karanlık harcanan dahil değildir. Bu C57BL/6J farelerin ışık odasına önlemek eğilimi gösterir ve ışık için harcanan zaman, kaygı gibi davranış iyi bir dizin olduğunu. Tüm verileri aynı protokolü kullanılarak elde edilir, çünkü mutant farelerde çeşitli suşları elde edilen sonuçları kolayca karşılaştırılır. Mutant farelerin kolayca çoğaltılabilir ve diğer mutantların verileri ile mukayese edilebilir bir suşu fenotipleme sonuçları elde etmek için, davranışsal test yöntemleri laboratuarlar arasında mümkün olduğunca aynı olmalıdır. Crabbe ve arkadaşları arasındaki etkileşim fare davranış ve tam olarak aynı kendilenmiş suşları ve bir boş mutant suşu kullanarak laboratuvar ortamında test edilmiştir. Yaptıkları çalışmada, cihaz, test protokolleri ve birçok çevresel değişkenler titizlikle standardize edilmiştir. Aynı zamanda tüm davranışları (Crabbe ve ark, 1999) deformasyon farklılıkları tespit rağmen standardizasyon rağmen, laboratuvarlar boyunca davranış sistematik farklılıklar bulundu. Onlar mutantlar karakterize kontrol edilemeyen değişkenler ve deneyler belirli bir laboratuar kendine özgü sonuçlar doğurabilir bildirdi. Laboratuarlar arasında mevcut usul farklılıkları zor laboratuvarlar arasında sonuçları karşılaştırmak ya da çoğaltmak olun. Burada, protokolün ayrıntıları ortaya böylece bir film olarak açık / koyu geçiş testi için bizim protokol mevcut. Protokol görsel belgeler oluşturulması, laboratuvarlar boyunca ve mutant farelerde çeşitli suşları davranış fenotipleri karşılaştırmalar için kullanılan protokollerin standartlaştırılması için izin deneysel prosedürlerin ayrıntıları daha iyi anlaşılmasını kolaylaştırmak, bu test ile değerlendirildi. Filmler, biz bizim davranışsal test bataryası kullandığımız yükseltilmiş artı labirent, açık alan testi, porsolt zorla yüzmeye testi, korku klima, gibi diğer protokolleri, henüz gelecek video dergi makaleleri gibi yayın yapılıyor.

fareler için açık / koyu geçiş testi

Light/dark Transition Test for Mice

Tüm fare genomu dizilerinin tespit edilmiştir rağmen, henüz bu genlerin çoğunun fonksiyonları bilmiyorum. Gen hedefleme teknikleri, ancak, belirli bir genin, farelerde silmek veya işlemek için kullanılan olabilir. Mutant farelerde davranış analizleri yapılarak belirli bir davranışın belirli bir genin etkisi tespit edilebilir. Mutant farelerde davranış fenotipleme için bir test olarak, açık / koyu geçiş testi farelerde davranış gibi anksiyete ölçmek için en yaygın kullanılan testler biridir. Test aydınlatılmıştır alanlarda farelerin doğal kaçınma ve roman ortamlarda kendiliğinden keşif davranışı üzerinde dayanır. Test anksiyolitik ilaç tedavisine duyarlıdır. Cihaz karanlık bir oda ve aydınlık odasına oluşur. Fareler iki odaları arasında serbestçe hareket etmesine izin verilir. Parlak odasına giriş sayısı ve süresini parlak alan farelerde anksiyete endeksleri vardır geçirdi. Mutant farelerin kolayca çoğaltılabilir ve diğer mutantların ile mukayese edilebilir bir suşu fenotipleme sonuçları elde etmek için, davranışsal test yöntemleri laboratuarlar arasında mümkün olduğunca aynı olmalıdır. Laboratuarlar arasında mevcut usul farklılıkları Ancak, zor laboratuvarlar arasında sonuçları karşılaştırmak ya da çoğaltmak olun. Burada, protokolün ayrıntıları ortaya böylece bir film olarak açık / koyu geçiş testi için bizim protokol mevcut. Laboratuvarımızda, 60&#39;dan fazla filmin gösterildiği protokolünü kullanarak mutant farelerin suşları değerlendirilmiştir. Bu veriler şu anda inşa kamu veritabanı bir parçası olarak ilan edilecektir. Protokolün Görselleştirme, laboratuarlar ve mutant farelerde çeşitli suşları davranış fenotipleri karşılaştırmalar genelinde kullanılan protokoller standardizasyonu sağlayarak, tüm deneysel işlemin ayrıntılarını anlaşılmasını kolaylaştırmak, bu test ile değerlendirildi.

Açık / koyu geçiş testi farelerde davranış gibi anksiyete ölçmek için en yaygın kullanılan testler biridir. Burada, test yapmak konusunda ayrıntılı yordamlar gösteren bir film sunuyoruz.

Fareler için açık / koyu Geçiş Testi

Fare genom dizilerinin tamamı belirlenmiş olsa da, bu genlerin çoğunun işlevlerini henüz bilmiyoruz. Gen hedefleme teknikleri, ...

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu makalede, farelerde sirkadiyen fonksiyonu ve ışık yanıt belirlemek için kullanılan yöntemleri gözden geçirilecektir.

Tekerlek Koşu Aktivitesi kullanarak Fare Sirkadiyen ve Akut Işık Yanıtları Ölçüm

Burada Drosophila larva için bir ışık-karanlık tercih testi açıklar. Bu testte ışık algılama ve işleme photobehavior doğuştan gelen ve sirkadiyen düzenleme hakkında bilgi sağlar.

Içinde Doğuştan gelen ve sirkadiyen Ayarlı Photobehavior Eğitim ışık tercih Testi<em&gt; Drosophila</em&gt; Larva

Genel olarak Parkinson hastalığı, hareket bozuklukları, hassas ve güvenilir bir davranış testleri yeni potansiyel terapötikler test etmek için gereklidir. Burada, nigrostriatal sistemine zarar derecelerine ve klinik öncesi çalışmalar için yararlı duyarlı olan fareler için duyu testler yönetilebilir bir pil açıklanmaktadır.

Parkinson Hastalığı Fare Modeller Duyusal Motor Fonksiyon Değerlendirilmesi

Epidermal melanin tenli UV duyarlı insan bir fare modelinde forskolin topik uygulanmasıyla elde edilir. En az eritematöz doz (MED) deneyi ile ölçüldüğü gibi güçlü bir UV aracılı enflamasyonun (güneş yanığı) karşı koruma koyulaşması deri ve epidermal cAMP düzeyleri farmakolojik manipülasyonu.

Bir Insanlaşmış Fare Modeli epidermal melanin ve Karşı Koruma yanığı Farmakolojik İndüksiyon

Genetik ve farmakolojik manipülasyonlar etkilerini değerlendirmek amacıyla, mekansal yerelleştirme, zamansal lokalizasyonu, süresi, hızı ve olasılık tahmini, risk değerlendirmesi, dürtüsellik ve doğruluğunu ve hafıza hassasiyet arabuluculuk mekanizmalarının fizyolojik anlamlı özelliklerini ölçmek için tam otomatik sistem Farelerde biliş temel mekanizmaları.

Farelerin Otomatik, Kantitatif / Bilişsel Davranışçı Tarama: Genetik, Farmakoloji, Hayvan Biliş ve Lisans Öğretim İçin

İnsan hastalıklarıyla ilişkili gen ailelerini anlamak için fareyi model sistem olarak kullanan bir ters genetik yaklaşım sunulmuş ve sonraki fare fenotipleme programı açıklanmıştır. İlgilenilen bir gen olan HtrA2'de kusurlu fareler Parkinson semptomları gösterdiğinden, fenotipleme rejimi nörolojik kusurları tanımlamaya odaklanır.

Yaşlanma İnsan Hastalıkları karıştığı Genler Eğitim için kullanılır Genetiği Değiştirilmiş Fareler için Fenotiplendirme Rejimi

Photobiomodulation tedavi geniş bir nörolojik ve psikiyatrik hastalıkların tedavisi için yenilikçi bir noninvaziv modalite ve aynı zamanda sağlıklı beyin fonksiyonlarını artırabilir. Bu iletişim kuralı tarafından diğer laboratuvar Rodents kullanmak için adapte edilebilir Transkraniyal ışık teslim farelerde beyin photobiomodulation gerçekleştirmek için adım adım yönergeler içerir.

Farelerde Transkraniyal Photobiomodulation tedavisi için bir iletişim kuralı

Kemirgenler migren semptomlarını bildiremezler. Burada, migrenli hastalarda en yaygın ve rahatsız edici semptomlardan biri olan ışıktan kaçınmayı ölçmek için yönetilebilir bir test paradigmasını (açık / karanlık ve açık alan testleri) açıklıyoruz.

Farelerde Işıktan Kaçınma Kullanarak Migren Benzeri Davranışların İncelenmesi

Burada sağlanan protokol, veri toplama, analiz ve yorumlamaya odaklanarak, Trypanosoma cruzi enfeksiyonunun biyolüminesans modelinde ilaç etkinliği çalışmaları gerçekleştirmek için ayrıntılı adımları açıklamaktadır. Teknik sorunları en aza indirmek için sorun giderme ve kalite kontrol prosedürleri de sağlanmaktadır.

İlaç Etkinliği Çalışmaları için Bir Chagas Hastalığı Fare Modelinin In Vivo Biyolüminesans Görüntülemesinin Gizeminin Çözülmesi

Bu çalışma, gündüz sirkadiyen faz kaymasını güvenilir şekilde mümkün kılmak için kemogenetik ve mor ışığı temelli stratejiler sunmaktadır.

Kemogenetik ve spektral yaklaşımlarla gündüz sirkadiyen faz kaymalarını indüklemek

Öğrenin farelerde anksiyete benzeri davranışları değerlendirmek için açık/koyu geçiş testi yöntemini. Bu davranışsal nörobilim tekniği, insan anksiyete bozukluklarına dair önemli bilgiler sağlar.

Fareler için açık / koyu Geçiş Testi

Daha fazla video keşfet