Name: Kanser Borealis Stomatogastric Sinir Sistemi Diseksiyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-03-23T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 37 s
Description: Öğrenin, Cancer borealis yengecinin stomatogastrik sinir sistemini (STNS) elektrofizyolojik kayıtlar için hazırlama yöntemini. Bu diseksiyon protokolü, sinir devreleri ve motor patern oluşumunu incelemek üzere STG'ye erişim sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz minnetle Marder Lab üyeleri kabul etmiş oluyorsunuz. Danışmanı Dr. Havva Marder, Biz ona destek ve cesaret için teşekkür ederim. Bu araştırma, Ulusal Nörolojik Bozukluklar ve İnme Hibeler NS-17.813 ve NS-058.110 Enstitüsü tarafından desteklenmiştir.

1. Brüt Diseksiyon <ol><li> Hayvan donuk duyu ve motor sistemlerinin 30 dakika boyunca buz üzerinde bir yengeç yerleştirin. Buz ile her tarafta onu çevreleyen. Yengeç Kullanım sırasında eldiven giyilmelidir. </li><li> Diseksiyonu pan ve kullanacağınız araçları dışarı atarken brüt diseksiyon için hazırlayın. Rongeurs, kemik kesme makası, küçük makas, dişli forseps, konik kenarı ile spatula, siyah Sylgard kaplı çanak, ve böcek pimleri ihtiyaç vardır. </li><li> Sıkışmasını önlemek ve diseksiyon tavada yerleştirmek için, arka bacak buz kovası yengeç çıkartın. </li><li> Içe her bir büküm ilk pençeleri çıkarın. Sonra aynı büküm hareketi her bacak kaldırmak. </li><li> Rongeurs kullanarak, ağız kapsayan maksilla çıkarın. Ayrıca yumuşak maxillule çıkarın. </li><li> Rongeurs kullanarak tekrar karapaksla lateral posterior sonundan itibaren başlamak ve bunun kenar iyi bir kavrama olsun. Kelepçe rongeurs ile aşağı ve karapaksla bir parça kesiyorum. Spatula açılış girmesi için yeterli karapaksta kaldırmak için emin olun. Gözleri karapaksla kenarından yukarı kaldırarak, diğer tarafta devam edin ve işlemi tekrarlayın. </li><li> Spatula sivri tarafı hafifçe dorsal karapaksla çatı uzak yumuşak iç dokusu kazımak. Spatula STNS zarar görmesini önlemek için karapaksta ile temas halinde tutun. Rongeurs dokusundan ayrılmış karapaksla parçaları kurtulmak için kullanın. Ayrıca bazı yumuşak doku karapaksla doku ekleme adduktor kasları ayrı emin olun ventral karapaksla ayırın. </li><li> Karapaksta çıkıntılı iki küçük kemikçikler vardır kalbinde kadar posterior dorsal karapaksla Break Away. Gibi çok ön mümkün olduğunca kesin. Dorsal karapaksla en ön parça terkedip Cephalon (&quot;yüz&quot;) bir parmak ile sabitleyin. </li><li> Karapaksla ventral tarafta, onlara ekli epistome mandibula çıkarmak için dışa büküm ve dışarı çekerek, mandibula üzerine rongeurs demir bir zamanda çene kemiklerini bir çekin. İki kasları ile uzun kemikçikler, doğru yapılırsa Ayıklanan mandibula eklenmelidir. </li><li> Spatula ile Gözlere yakın Cephalon iki doku ayırın. Doku tabakası tarafından, olası bir katman olarak kemik parçası sırt yakın kesen küçük diseksiyon makas. </li><li> Diseksiyonu pan bir duvara yengeç istirahat ve yerine o güvenliğini (pençeleri için kullanılan olabilir) desteklemek. Herhangi bir doku eklenmiş bırakmamaya dikkat ederek epistome uzak labrum (üst dudak) kesin. Kemik kesme makası kullanarak Cephalon kaldırmak için ventral karapaksla iki diyagonal kesimler yapmak. </li><li> Dişli forseps ile labrum ve ventral tarafta kemik parçası uzak labium (&quot;alt dudak&quot;) kesmek. Sonra yavaşça kalan ventral karapaksla uzak dudak kaldırma. Karapaksla döşeyen doku mide ventral kısmı ayırmak için küçük makas kullanın. Mide yengeç çıkarılan kadar pilorik ampullae görünür olduğunda, bunun her iki tarafta doku uzak mide kesmek. </li><li> Yine de, elin avuç içi karşı mide dinlenme ve ağız içine tuzlu su dökün, forseps ile dudak mide tutarak. Bu mide genişler ve daha kolay açık kesmek için yapar. Aşağı pilorusta ampullae arasındaki kemik parçası ile sağ arasındaki ağız açılması kesin. Sonra iki Kardiyal şubeleri aracılığı ile çapraz aşağı kesti. Mide içinde üç diş ipuçları kesti. </li><li> Mide aşağı mide içinde büyük, siyah, Sylgard kaplı tabağa yerleştirin. Beş köşeli hazırlık böcek iğneli pin ve çanak tüm hazırlık çeker (bkz. Şekil 1), soğuk tuzlu su ile doldurun. </li></ol> 2. İnce Diseksiyon <ol><li> , Mikro-disseksiyon araçları ince diseksiyon için ihtiyaç vardır. Özellikle, forseps ve yaylı makas tungsten iğne ile bir iğne tutucu yanı sıra ihtiyaç vardır. Net, Sylgard kaplı petri ve bazı ince tel pimleri da hazırlanmış olmalıdır. </li><li> En düşük büyütme başlayarak, ağız açıklığı için kullanılan dudak yakın kapakları aşağı iğneleyerek başlar. Hazırlık gergin yapmak ve diğer alanlarda gerekli her türlü pin pimleri geri kalanı yeniden düzenleyin. </li><li> Hazırlık alt kısmını kapsayan benekli hipodermis dikkatlice kaldırın ve iki beyaz nokta ile hipodermis bir yama bırakarak üzerinden bunu düzeltin. </li><li> Hazırlanması alt yakın sarı, bir tutam, membranöz doku kadar soyun. Mvns zayıf bu doku alt bağlıdırlar. O kadar çekilir gibi sarı doku dikkatlice mvns ayırın. Sarı doku takip ve beyin yanında kesmek. </li><li> Beyin çıkmadan kalın süreçlerini takip uzatmak laterally Bunlar commisural sinirler vardır. Commissural sinir sonuna ulaşıldığında, beynin yan uzak kesilmiş, off-beyaz süngerimsi doku kitle çıkarın. </li><li> Iyonları ve oğulları Cogs buluştuğu yer, iyonları ve oğulları uzunluğu ortaya çıkarmak için kas ve doku kesip. </li><li> Benekli hipodermis yama dönün ve kesti. Bu STG çevreleyen arter bir açıklık bırakmanız gerekir. , Iki kaslar bu kanadını STG ayrı delikten kesin. Bu kasların uçları yukarı kaldırın ve sağ kesim, onları arter ayırmak için alns ve agns maruz altında . Stn üzerinde uzanan kıkırdak olarak kadarıyla yan kasları ayırın. </li><li> Mvns, dgn STG aşağı çevreleyen arter doku kesilip, dvn karşılamak. Lvns dvn Çalışma ve lvns kaplayan beyaz, narin doku kesti. </li><li> Psn hazırlanması alt yakın kemik parçası üzerinde bulun. Psn LVN ve dlvn kavşak bulmak için kullanılabilir. </li><li> Sonraki pyn ve PDN bulmak için dlvn izleyin. Pyn sık sık açılması pilorik ampulla üzerine sarar. PDN dlvn çatal kapalı ve pilorik ampulla ve kardiyo pilorik valf kasları arasındadır. Hazırlık net Sylgard çanak transfer edildiğinde kolayca karışabilir, çünkü bu sinirlerin bağlı bazı kas bırakın. </li><li> Bir kez tüm sinirlerin STNS ve mide, doku ve istenmeyen sinirler arasında kalan herhangi bir bağlantıları, sever ortaya edilmiştir. Dikkatli bir şekilde, herhangi bir cevapsız bağlantıları kesme, mide geri kalanı uzakta STNS hareket. </li><li> Sylgard artık çok yapışkan ya da kuru hissedene kadar Sylgard yüzey üzerinde sürtünme mide dokusu kalan kitle ile açık Sylgard çanak durumu. Sylgard hidrofobik ve Sylgard kaplı çanak bu şekilde şartlandırılmış değilse STNS kuvvetle uyacaktır. </li><li> Çanak bazı soğuk tuzlu su ekleyin. Forseps ile commissural sinirlerin üst ucunu alın ve STNS açık Sylgard çanak getirmek. </li><li> STNS Sylgard üzerine sabitleyin. Commissural sinirler beyin Sever ve Minuten pimleri Cogs dört ucu aşağı ilk sabitlemek için kullanabilirsiniz. Hazırlık IVN Sylgard uzak işaret olup olmadığını kontrol sağ tarafında olduğunu emin olun. STG sağ taraftaki dgn STG altında biraz çıkmalısınız. Sinirin geri kalanı Pin aşağı ince tel iğneler ile sona erer. </li><li> STNS kalan kas veya doku temizleyin. </li><li> Desheath bir iğne tutucu ve biraz bağladım, ince, tungsten iğne kullanarak STG. STG kılıf hücre gövdeleri uzak bir köşesinde küçük bir delik açın ve bu delik kullanmak kılıf katmanları arasındaki almak için. STG neuropil ve hücre organları açığa çıkarmak için ayrılmış bir kılıf kapağı dikkatlice kesin. </li><li> Hücre gövdeleri erişilebilirlik artırmak ve hücre içi kayıtları için STG stabilize etmek için aşağı kılıfı herhangi bir flep Pin. Her sinir gergin ve ekstraselüler bir kayıt (bkz. Şekil 3) aralıklı sağlanması STNS geri kalanı Re-pin. </li></ol> 3. Sonuçlar <ol><li> İdeal olan, tüm sinirlerin özellikle çizik ve hasar, kaydedilmiş olacak olanlar ücretsiz olmalıdır. Sinirlerin Yok karışık veya bükülmüş olmalıdır. STG neuropil etrafında bir sakal oluşumu düzenlenen tüm hücrelerin sağlam olmalıdır. Sağlam STNS bilateral simetrik ve bacaklar, kollar ve kafa olarak ön uç olarak mvns lvns bir minyatür gibi görünüyor. </li></ol> Kısaltmalar: <table border="1"><tbody><tr><td> STNS </td><td> Stomatogastric sinir sistemi </td></tr><tr><td> STG </td><td> Stomatogastric ganglion </td></tr><tr><td> COG </td><td> Commissural ganglion </td></tr><tr><td> RG </td><td> Özofagus ganglion </td></tr><tr><td> mvn </td><td> Ortalama ventriküler sinir </td></tr><tr><td> iyon </td><td> İnferior özofagus sinir </td></tr><tr><td> oğlum </td><td> Üstün özofagus sinir </td></tr><tr><td> AGN </td><td> Ön mide sinir </td></tr><tr><td> Aln </td><td> Anterior lateral sinir </td></tr><tr><td> dgn </td><td> Dorsal mide sinir </td></tr><tr><td> dvn </td><td> Dorsal ventriküler sinir </td></tr><tr><td> LVN </td><td> Lateral ventrikül sinir </td></tr><tr><td> psn </td><td> Arka mide sinir </td></tr><tr><td> pyn </td><td> Pilorik sinir </td></tr><tr><td> PDN </td><td> Pilorik dilatör sinir </td></tr><tr><td> dlvn </td><td> Lateral ventrikül sinirin dorsal dalı </td></tr><tr><td> IVN </td><td> İnferior ventriküler sinir </td></tr></tbody></table><img src="/files/ftp_upload/1207/figure_1_90ppi.jpg" alt= &quot;Şekil 1&quot; /&gt; Şekil 1: diseksiyon önce mide STNS yaklaşık yerleştirme gösteren diyagram. <img src="/files/ftp_upload/1207/figure_2_90ppi.jpg" alt="Şekil 2" /> Şekil 2:, açık yeşil, mide ve STNS bir yerleşim alt kısmı çeşitli kasların Diyagramı . STG her hücre tipi kasları innerve bilinen listelenir. Bu harita, planlama, belirli bir hücre (nezaket Nadim laboratuar) bir sinyal taşıyan sinir incelemek yararlı olacaktır. <img src="/files/ftp_upload/old/1207_2009_1_12_5/figure_3.jpg" alt="Şekil 3" /> Şekil 3: STNS, hücre içi elektrotlar ve hücre dışı kuyu (Marder ve Bucher, 2007) ile şematik .

<ol><li>Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHarris-Warrick%2C+RM+%22Dynamic+Biological+Networks%3A+The+stomatogastric+nervous+system%22">Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system</a>. , MIT Press. Boston. (1992).</li>
<li>Marder, E., Bucher, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+circuit+dynamics+using+the+stomatogastric+nervous+system+of+lobsters+and+crabs%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs.</a> Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).</li>
<li>Maynard, D. M., Dando, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+of+the+stomatogastric+neuromuscular+system+in+Callinectes+sapidus%2C+Homarus+Americanus+and+Panulirus+argus+%28Decapoda+crustacean%29%5BTitle%5D)+AND+%22Philos.+Trans.+R.+Soc.+Lond.+B+Biol.+Sci%22%5BJournal%5D)">The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean).</a> Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268 (892), 161-220 (1974).</li>
<li>Selverston, A. I., Russell, D. F., Miller, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Stomatogastric+Nervous+System%3A+Structure+and+function+of+a+small+neural+network%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">The Stomatogastric Nervous System: Structure and function of a small neural network.</a> Prog. Neurobiology. 7, 215-290 (1976).</li>
</ol>

STNS diseksiyonu bir elektrofizyoloji veya immünohistokimya deney, ya da hücre hücre kültürü elde etmek için yerine ilk adımdır. Amaçlanan deney ne olursa olsun, brüt diseksiyon değişmeden kalır. Ancak, ince diseksiyon değişebilir. Öncesinde kayıt hücreleri ve sinirler zaman planı için önemlidir. STG nöronların çoğu mide en az bir kas innerve (bkz. Şekil 2) ve innerve hedef göre sınıflandırılır süreçleri var. Bu nedenle, ekstraselüler kayıtları tam intraselüler kaydedilmiş olan bir hücre kimliğini doğrulamak için gerekl...

<table><tbody><tr><td>Siyah Sylgard 170</td><td>Diğer</td><td>Dow Corning</td><td>170</td><td>Kaba Diseksiyon</td></tr><tr><td>İnce Makas</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>14090-09</td><td></td></tr><tr><td>Böcek İğnesi boyut 6</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>26000-65</td><td></td></tr><tr><td>Mayo Makası</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>14110-17</td><td></td></tr><tr><td>Mikro-Spatula</td><td>Cerrahi</td><td>WARD&amp;rsquo;s Natural Science</td><td>15 V 4313</td><td></td></tr><tr><td>Rongeur</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>16000-14</td><td></td></tr><tr><td>Doku Penseti</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>11021-12</td><td></td></tr><tr><td>İnce Tungsten Tel (0.001 in. çapında)</td><td>Cerrahi</td><td>California Fine Wire Company</td><td></td><td>İnce Diseksiyon</td></tr><tr><td>Penset #5</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>91150-20</td><td></td></tr><tr><td>Minuten İğneleri</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>26002-10</td><td></td></tr><tr><td>Moria Yaylı Makas (7mm bıçaklı)</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>15370-52</td><td></td></tr><tr><td>Petri Kabı (100x15mm)</td><td>Diğer</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-757-12</td><td></td></tr><tr><td>İğne Tutucu</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>26018-17</td><td></td></tr><tr><td>Süper ince penset #5SF</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>Sylgard 182</td><td>Diğer</td><td>Dow Corning</td><td>182</td><td></td></tr><tr><td>Tungsten İğneler</td><td>Cerrahi</td><td>Fine Science Tools</td><td>10130-05</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon Mikroskobu</td><td>Mikroskop</td><td>Wild</td><td>MC3</td><td>Çeşitli</td></tr><tr><td>Jonah Yengeci (&lt;em&gt;C. borealis&lt;/em&gt;)</td><td>Hayvan</td><td>Commercial Lobster</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

kanser borealis stomatogastric sinir sistemi diseksiyon

Cancer Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection

Iyi karakterize bir hücre nispeten az sayıda (yaklaşık 25 C borealis) içerdiğinden stomatogastric ganglion (STG), hücresel ve ağ etkileşimleri çalışmak için mükemmel bir model . STG hücreler çıkışları geniş bir sergi ve mide motor eylemler için sorumludur. Mide, üç iç dişleri ile gıda ve gıda midgut ulaşmadan önce filtreler pyloru parçalayan gastrik değirmen içerir. STG merkezi desen jeneratörleri (CPG&#39;lerin hepsi aynı) olarak bilinen mide değirmen ve pyloru kontrol etmek için iki ritmik çıkışları üretir. STG Her hücre bu ritimleri birini veya her ikisini katılabilir. Bu CPG&#39;lerin nöromodülasyon çalışmada, homeostazı, hücresel ve ağ değişkenlik, ağ geliştirme ve ağ kurtarma için izin verir. Jonah yengeç (Kanser borealis) stomatogastric sinir sistemi (STNS) diseksiyonu iki parça halinde yapılır; kaba ve ince diseksiyon. Brüt diseksiyon tüm mide yengeç disseke edilir. Ince diseksiyon sırasında STNS mide bir diseksiyon mikroskobu ve mikro diseksiyon araçları (bkz. Şekil 1) kullanılarak elde edilir. STNS STG, özofagus ganglion (RG) ve commissural ganglionlar (cog) yanı sıra mide kasları innerve sinirleri içerir. Burada, ekstrasellüler kayıtları için kullanılan olurdu STG hücrelerin intraselüler ve periferik sinirleri kaydedilen olacak bir elektrofizyoloji deney için hazırlık STNS tam bir diseksiyon nasıl göstermektedir. Somata ve neuropil ortaya çıkarmak için ganglion desheathing bizim teknik olarak istenilen sinirler bulmak için uygun tekniği de gösterilmiştir.

Jonah yengeç stomatogastric sinir sistemi (STNS) (<em&gt; C. poyraz</em&gt; Elektrofizyoloji, immünhistokimya ve hücre kültürü çalışmaları için kullanılabilir). STNS çıkarma iki bölümden yapılır: kaba ve ince diseksiyon.

Kanser Borealis Stomatogastric Sinir Sistemi Diseksiyon

Stomatogastrik ganglion (STG), nispeten az sayıda ... içerdiği için hücresel ve ağ etkileşimlerini incelemek adına mükemmel bir modeldir.

Bu prosedür, yengeçten eklemlerin ve dorsal karpusun çıkarıldığı yengeç midesinin genel diseksiyonu ile başlar. Midenin tamamı hayvandan disekte edilir. Mide kesilerek açılır ve siyah bir sardiyen tabağına düz bir şekilde iğnelenir.Hassas diseksiyon hazırlığı için, Steamatic mide sinir sistemi mideden diseke edilir ve bir elektrofizyoloji deneyi hazırlığı kapsamında kılıfından çıkarılmak üzere şeffaf, Sard kaplı bir Petri kabına aktarılır. Merhaba, ben Brandeis Üniversitesi'ndeki Martyr Laboratuvarı'ndan Rachel Au. Ve ben de yine Martyr Laboratuvarı'ndan Gabrielle Gutierrez.Bugün size Crab Cancer Borealis'ten somatik mide sinir sisteminin diseksiyonu için bir prosedürü göstereceğiz. Laboratuvarımızda elektrofizyoloji, immünohistokimya ve hücre kültürü deneylerimiz için yengeç St NS'yi kullanıyoruz. Bu sinir ağını kullanarak; nöromodülasyon homeostazı, ağ değişkenliği, ağ gelişimi ve ağ onarımı gibi nörobiyolojinin çeşitli temel prensiplerini araştırabiliyoruz.Haydi başlayalım. Diseksiyona başlamadan önce, yengeç 30 dakika boyunca buzla gömülerek uyuşturulmalıdır. Yengecin her yanının buzla çevrildiğinden emin olun.Buz, yengecin duyusal ve motor sistemlerini etkisiz hale getirir ancak yengeç soğutulurken, buzdan çıkarıldığında hala yanıt verebilir. Protokolün bu bölümü için gerekli ekipmanları toplayarak kaba diseksiyona hazırlanın. Başlamadan önce; diseksiyon tepsisi, Ron pensi, kemik kesme makası, küçük makas, diş forsepsi, konik uçlu bir spatula, siyah silikon korumalı bir kap ve böcek iğnelerini hazırlayın.Eldivenleri giyerek hazırlık yapın. 30 dakika geçtikten sonra, yengeci arka bacağından tutarak buz kovasından çıkarın. Kıskaçların sıkıştırmasını önlemek için, önce her bir kıskacı içe doğru döndürerek çıkarın ve ardından yengeci diseksiyon tepsisine yerleştirin.Ardından, aynı döndürme hareketiyle her bir bacağı çıkarın. Hayvanın ekstremiteleri alındıktan sonra, ağzı örten maksillayı ve yumuşak maksil dokusunu çıkarmak için Ron forceps kullanın. Ron forceps ile tekrar, karpusun lateral posterior ucundan başlayarak kenarını sıkıca kavrayın. Ron forceps ile bastırarak karpusun o parçasını kırıp ayırın.Spatulanın açıklıktan girebilmesi için karpusun yeterince uzaklaştırıldığından emin olun. Karpus kenarını gözlere kadar çıkarmaya devam edin ve işlemi diğer tarafta tekrarlayın. Spatulanın konik tarafıyla, yumuşak iç dokuyu dorsal karpusun tavanından nazikçe sıyırın.Bunu yaparken spatulayı carus ile temas halinde tutun. STNS'ye zarar vermemek için, dokudan ayrılmış olan carus parçalarını koparmak üzere Ron Jos kullanın. Dorsal carus'u, carus'tan dışa doğru çıkıntı yapan iki küçük S olduğu yere kadar koparın.Mümkün olduğunca anteriordan kesin. Dorsal carusun en anterior kısımlarını koparırken, cephalonu bir parmağınızla sabitleyin. Ventral carustaki yumuşak dokunun bir kısmını ayırın.Karusun ventral tarafında dokuyu karusa bağlayan tüm adduktor kasların ayrıldığından emin olun. Yanlış çeneleri bir mandibula üzerine sabitleyip dışarı doğru döndürerek ve çekerek mandibulaları tek tek çıkarın; çıkarılan mandibulaya bağlı kaslarla birlikte iki uzun engel ayrılmalıdır. Doğru yapıldığında, doku sefalonun gözlere yakın yan kısımlarından ayrılacaktır.Küçük diseksiyon makası ve spatula kullanarak, ossiklet çıkıntısının hemen yanındaki dokuyu katman katman kesin. Yengecin kalan kısmını diseksiyon kabına yaslayın. Ayrılmış kıskaçları kullanarak, labrumun tamamını epistolden ayırın.Kemik kesme makası olan küçük makasları kullanarak, ventral karpus üzerine iki diyagonal kesi yapın. Sefalonu çıkarmak için şimdi labrumu dişli pensle tutun ve ventral tarafta labiumu osci'den kesin. Dudak kısmını kalan ventral karus'tan nazikçe kaldırın.Midenin ventral kısmını karusuyla çevresindeki dokudan ayırmak için küçük makaslar kullanın. Pori kanülleri görünür olduğunda, mideyi pensle dudak kısmından tutarak, mide yengeçten tamamen çıkarılana kadar her iki yanındaki dokuları kesin. Mideyi avucunuzun içine yerleştirin ve ağızdan içeriye salin dökün.Bu işlem mideyi genişletecek ve küçük makaslar kullanılarak açılmasını kolaylaştıracaktır. Ağız açıklığından başlayarak, engelin tam arasından aşağıya doğru kesin. Ardından, iki kardiyo dalı boyunca çaprazlama aşağıya doğru kesin.Son olarak, midenin içindeki üç dişin uçlarını kesin. Detaylı diseksiyon için hazırlık yapmak amacıyla, mideyi iç kısmı aşağı gelecek şekilde siyah bir sard kaplı kaba yerleştirin. Midenin beş köşesini böcek iğneleriyle sabitleyin ve hazırlığı soğuk saline içine daldırın.Hassas disseksiyon stereoskop altında yapılır; pens ve yaylı makasın yanı sıra tungsten iğneli bir iğne tutucu gerektirir. Kaplamalı şeffaf bir korumalı Petri kabı ve bazı ince tel iğneler önceden hazırlanmış olmalıdır; en düşük büyütme ile başlanarak, eskiden ağız açıklığı olan dudak yakınındaki kapakçıklar iğne ile sabitlenir. Ardından, gerektiği gibi iğneleri düzenleyerek ve ekleyerek preparatı gergin hale getirin.Pensetle, preparasyonun alt kısmını örten benekli hipodermisi dikkatlice kaldırın ve kesin. Geriye iki beyaz noktası olan bir hipodermis yaması kalmalıdır. Şimdi preparasyonun alt kısmındaki sarı, ince membranöz dokuyu soyun. M vns, bu dokunun alt yüzeyine zayıf bir şekilde tutunmuştur.Makas ağzını kullanarak, yukarı çekilen M VNS'yi sarı dokudan dikkatlice ayırın. Beynin görünür olan birkaç kalın beyaz uzantısının yanındaki sarı dokuyu kesin. Beynin büyük bir kısmı şu anda doku içinde gömülüdür.Lateral yönde ve dudağa doğru uzanan süreçleri takip edin. Bunlar iki komissural sinirdir. Komissural sinirin ucu bulunduğunda, beynin yan tarafından kesilip çıkarılmış olan yoğun süngerimsi kirli beyaz dokuyu uzaklaştırın.iOS ve sos'u, commis ganglionları ile birleştikleri noktada bulun. IO ns ve so ns'nin uzunluğunu ortaya çıkarmak için kas ve dokuyu kesin; bu iki sinir commis ganglionlarından mediale doğru uzanır ve özofagus siniri ile birleşir. Benekli hipodermis yamasına geri dönün ve orayı kesin.Bu işlem, STG'yi çevreleyen arterde bir açıklık oluşturmalıdır. STG'nin her iki yanındaki iki kası ayırmak için bu açıklıktan kesin. Bu kasların uçlarını kaldırın ve arterden ayırmak için altlarından kesin. Bu adım ALN'leri açığa çıkarır.Yanlardaki kasları, STN üzerindeki kıkırdak hattına kadar uzaklaştırın. TN, STG'den yukarı doğru uzanan ve hafif bir şişkinliği olan bir sinirdir. Ardından, STG'yi çevreleyen arteriyel dokuyu, M vns DGN ve DVN'nin birleştiği yere kadar kesin.DVN'yi iki LVN'ye ayrıldığı noktaya kadar takip edin. Her bir LVN tamamen açığa çıkana ve DLVN ile birleşene kadar beyazımsı hassas dokuyu kesin. Osco üzerindeki PSN'yi bulun.Preparasyonun alt kısmına yakın bölgede, PSN, LVN ve DLVN ekleminin yerini belirlemek için kullanılabilir. Böylece DV DLV bu yöne doğru gider. Buradan aşağı iner. Evet.Ardından ayrılıyor ve bu yöne gidiyor. Doğru. Bu yüzden normalde yaptığım şey, onları burada bulmak ve yukarıya doğru ilerlemektir. PDN, DLVN'den ayrılır ve ULA ile kardiyo Pylori valve kasları arasındadır. Evet. Burada ampule ula, ula ampule, tam burada PYN var.Bu sinirleri birbirinden ayırt etmek için işaretleyici olarak, her birine bir miktar kas dokusu yapışık bıraktığınızdan emin olun. Tüm sinirler açığa çıkarıldıktan sonra, STNS ile mide arasındaki kalan tüm bağlantıları kesin. Son olarak, STNS'yi midenin geri kalanından dikkatlice uzaklaştırın.Kaçırılan tüm bağlantıları kesin. Şeffaf S koruma kabını, ıslak ve daha az yapışkan hissedilene kadar üzerine biraz mide dokusu sürerek hazırlayın. STNS, sogar'a güçlü bir şekilde yapışacaktır.Kap bu şekilde koşullandırılmadıysa, kaba bir miktar taze soğuk salin ekleyin. Komissüral sinirlerin üst uçlarını pensle tutun ve st NS'yi şeffaf agar kaba taşıyın. Karışıklığı önlemek için beyin, komissüral sinirlere bağlı kalacaktır.Şimdi, beyni Commis sinirlerinden ayırarak STNS'yi iğnelemeye hazırlayın. Commis sinirlerinin dört ucunu sill guard'a sabitlemek için minuchin iğneleri kullanın. IVN'nin yukarı baktığını ve DGN'nin STG iğnesinin hemen altından çıktığını kontrol ederek preparasyonun doğru yönde olduğundan emin olun.Sinirin geri kalanı, ince forseps ve makas kullanılarak ince tel pinlerle sonlandırılır. STNS üzerindeki tüm kalıntı kas veya dokular dikkatlice temizlenir. STG, şimdi bir pin tutucu ve hafifçe kancalanmış ince bir tungsten iğne kullanılarak kılıfından çıkarılmalıdır.STG kılıfının, hücre gövdelerinden uzaktaki köşesine küçük bir delik açın. Tungsten iğneyi deliğe nazikçe itin ve kılıf ile Samara arasına yerleştirin. STG nöropili ve hücre gövdelerini açığa çıkarmak için ayrılmış kılıfın bir kısmını kesin veya nazikçe yırtın.Hücre gövdelerine erişimi artırmak ve hücre içi kayıtlar için STG'yi sabitlemek amacıyla kılıfın herhangi bir kanadını aşağıya iğneleyin. Her bir sinirin ekstrasellüler kayıt için gergin ve yeterli aralıkta olduğundan emin olarak STNS'nin geri kalanını sabitleyin. İdeal olarak, özellikle kayıt yapacağınız sinirler dahil tüm sinirler boğumlardan ve hasarlardan arındırılmış olmalıdır.Sinirlerin hiçbirinde dolaşma veya bükülme olmamalıdır. STG, tüm hücreleri NI gagası etrafında sakal oluşumu şeklinde dizilmiş halde sağlam olmalıdır. TNS bilateral olarak simetriktir ve LVN'lerin bacaklar olduğu bir homunkülusa benzer.M vns kollardır ve ön uç ise baştır. Yengecin somatik gastrik sinir sisteminin, bir elektrofizyoloji deneyine hazırlık amacıyla nasıl diseke edileceğini size göstermiş olduk. Bu prosedürü uygularken, kayıt almayı planladığınız sinirleri, bu sinirlerin innerve ettiği bilinen kaslara doğru takip ederek diseke etmenizi hatırlatmak önemlidir.STNS'nin, STG'nin kılıfsız tarafı yukarı bakacak şekilde şeffaf puro tabağına gergin bir şekilde sabitlendiğinden emin olun. Hepsi bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler ve deneylerinizde başarılar dileriz.

cancer-borealis-stomatogastric-nervous-system-dissection

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Biz Amerikan ıstakoz mide stomatogastric sinir sisteminin ince diseksiyon tarif...

Homarus americanus Stomatogastric Sinir Sistemi Diseksiyon

Biz Amerikan ıstakoz mide brüt diseksiyon tarif...

Brüt Diseksiyon Lobster Mide, Homarus americanus</em

RAS V12 ve karalanmış, tümör hücreleri de invaziv davranışlar sergileyen Drosophila tümör büyüme neden gibi hücre polarite genlerindeki mutasyonlar gibi bir aktive onkogen arasındaki işbirliği. Burada iyi huylu ve invaziv tümörlerin indüksiyon ve gözlem için basit bir protokol verilmektedir.

Arasında Cephalic Kompleksi Genetik İndüksiyon ve Benign ve İnvaziv vizüalizasyonun için Protokol<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Lamprey tam omurilik hasarı sonrası lokomosyonu kurtarmak. Ancak, bazı spinal çıkıntı nöronlar iyi rejeneratörler ve diğerleri değildir. Bu kağıt tam omurilik kesilerde üreten ve in situ hibridizasyon için Wholemount beyinleri ve omurilik hazırlama, konut deniz taşemen larvaları (ve son zamanlarda dönüştürülmüş yetişkinler) için teknikleri göstermektedir.

Sonradan wholemount için komple Omurilik Yaralanmalı ve Beyin Diseksiyon Protokolü<em&gt; Yerinde</em&gt; Larva Deniz taşemen içinde Hibritleşme

Burada kerevit abdominal sinir kordonunun diseksiyonunu tarif ediyoruz. Ayrıca, yüzücü motor nöronlarından hayali hareketi kaydetmek için elektrofizyolojik bir teknik de gösteriyoruz.

Kerevit ve yüzgeç Sistemi: Sinir Kordon ve Motorlu Pattern Extracellular Recordings ve Diseksiyon için Pratik Kılavuzu

Bu video makale, pankreatik duktal adenokarsinomda dorsal kök gangliyonları (DRG)/kanser hücresi modelinin kullanımını göstermektedir.

Sırt kök ganglion Modeli: Kanserli Sinir Invasion Vitro Modelleme

Perinöral invazyon (PNI), baş ve boyun skuamöz hücreli karsinomunun (HNSCC) yaygın bir özelliğidir ve daha düşük sağkalım oranları sağlar. Mekanizmaları tam olarak anlaşılamamıştır. Yarı katı bir matris ile sınırlı murin dorsal kök gangliyonlarından üretilen nöritler kullanılarak, HNSCC hücre hatlarının PNI'sinde yer alan yollar araştırılabilir.

Baş ve Boyun Skuamöz Hücre Karsinomu içinde perinöral invazyon İçin Bir Model

Burada, bu kasların beslenme davranışı sırasındaki rollerini anlamak için deniz yumuşakçaaplikası kalinonik kalinonik besleyici cihaza kasların minimal invaziv cerrahi lezyoniçin bir protokol sıyoruz.

Aplysia californica Odontofor Kaslar Için Minimal İnvaziv Lezyon Tekniği

Bu protokol, transgenik olmayan omurgasız türlerde, absorbans voltajı duyarlı boyalar ve bir fotodiyot dizisi kullanılarak nöronal popülasyon aktivitesini tek hücreli çözünürlükle görüntüleme için bir yöntem sunar. Bu yaklaşım, görüntüleme ve analizin tek bir gün boyunca takip edilebildiği hızlı bir iş akışı sağlar.

Transgenik Olmayan Omurgasızlarda Tek Nöron Çözünürlüğü ile Ağ Dinamiklerini Kaydetmek için Fotodiyot Tabanlı Optik Görüntüleme

Bu protokol, superior servikal ganglionu tanımlayarak ve rezeke ederek adrenerjik innervasyonun ablasyonunun bir fare modelini tanımlamaktadır.

Bir Murin Modelinde Superior Servikal Ganglionektomi için Cerrahi Teknik

Öğrenin, Cancer borealis yengecinin stomatogastrik sinir sistemini (STNS) elektrofizyolojik kayıtlar için hazırlama yöntemini. Bu diseksiyon protokolü, sinir devreleri ve motor patern oluşumunu incelemek üzere STG'ye erişim sağlar.

Kanser Borealis Stomatogastric Sinir Sistemi Diseksiyon

Daha fazla video keşfet