Name: Sigara insan Stereotaksik Uzay Primate Beyin Diseksiyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-07-16T20:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: Öğrenin stereotaksik uzayda insan dışı primat beyni bloklama prosedürünü. Bu yöntem, normal gelişim ve patolojik durumları incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar Ikiel Ptito onun devam eden teknik destek için teşekkür etmek istiyorum. MP NSERC hibe.

Bölüm 1: Ön-işleme doku <ol><li> Doku paraformaldehid, glutaraldehid, ya da formalin ile perfüze edilmelidir. Bu, genellikle diğer organlarda hasat için kullanılan standart transcardial perfüzyon yoluyla elde edilebilir. Bu çalışmada konu derinden sodyum pentobarbital (25 mg / kg, iv), aşırı dozda ötenazi ketamin hidroklorür (10 mg / kg, im), sedasyon ve tamamen exsanguinated.This takip olana kadar 0.1 M PBS ile transcardially perfüze 5 dakika (~ 1 litre) PBS içinde% 4 paraformaldehid çözüm. </li></ol> Bölüm 2: Stereotaksik engelleme <ol><li> Önce baş stereotaksik çerçeve içine yerleştirerek Horsley-Clarke/interaural uçak sıfır koordinatları alınması gerekir. Bu kulağı arasında teorik bir orta nokta. Bu düzlemde ölçmek için, kulak çubukları eşit aparat takılır gerekir, daha sonra stereotaksik manipülatör kolunun bir neşter bıçak ve kulak çubukları arasındaki orta ölçmek. Bu araştırma ihtiyaçlarını dayalı doku blok nerede belirlemek için önemlidir. Bu aşama tamamlandıktan sonra kafatası stereotaksik cihazın içine sabitleme için hazırlıklı olmak gerekiyor. </li><li> Baş stereotaksik çerçeve içine yerleştirmek için alt çene kemik rongeurs ve bir neşter ile temizlenebilir olması. Ayrıca cilt, kas, bağ doku ve kemik, kafatası açığa amacıyla çıkarılmalıdır. Bağ dokusu, kafatası kaldırıldıktan sonra, calvaria (oksipital kemik tablo kısmı parietal yanı sıra, reklam frontal kemiklerin) yontulmasıyla beynin maruz bırakmayın. Calvaria mevcut deney parçası olarak tüm hazır kaldırıldı. Temporal kemikler kulak kanalları stereotaksik çerçeve içine başını yere sağlam olması gerekir, çünkü tamamen kaldırmak için değil, dikkatli olun. Maruz kalan bir beyin kalan dura madde çıkarılmalıdır. Kafatası stereotaksik çerçeve içine yerleştirilmek üzere hazırdır. </li><li> Aynı şekilde tek bir stereotaksik ameliyat olacağı, göz, damak ve kulak çubukları ağzı stereotaksik aparat sabit olduğunu ayarlayabilirsiniz. Stereotaksik manipülatör yerleştirin ve önceden belirlenmiş (A / P) anterior / posterior koordinatlarda manipülatör beynin lateral hareket. Yavaşça, beyin içine bıçak alt beyinden gelen bıçak tamamen yükseltmek, daha sonra mediale hareket ettirin ve tekrar bıçak düşük. Bıçak ters yarımkürede lateral ulaşıncaya kadar bu iki adımı tekrarlayın. Bu ilk koronal blok tamamlar. Tüm beyni bloke dek sonraki koronal blok A / P ekseni ve tekrar manipülatör 1cm hareket. </li></ol> Bölüm 3: kafatası beyin çıkarma <ol><li> Stereotaksik çerçeve başını çıkarın ve elinizin avuç maruz kalan beyin tutun. Coddling beyin elinizin avuç içinde hafifçe yerleştirerek ve frontal loblar, kafatasının, beynin bu en aza indirir hareketi arasında serçe parmak beyin güvenli çalışın. Pial beyin yüzeyinin kurumasını önlemek için, bir parça PBS beyin boyunca nemlendirilmiş gazlı bez yerleştirin. Omuriliğe birlikte kafatası ve yonga uzak kalan oksipital ve temporal kemikler tarafından iyice kafa tutun. Bu beyin taban ve yanal yönlerini ortaya koyar. Son olarak koku ampuller erişim sağlayacaktır kalan frontal kemik ve burun kemiği, kaldırmak. Kafatası tabanı kaldırmak gibi beyin biraz hareket eder ve frontal loblar fontal kemik pürüzlü kenarlar zarar görmüş olabilir, çünkü son frontal kemikte kaldırmak için önemlidir. Kesme ve kalan dura madde kaldırmak. Dikkatle, beynin ön kaldırın kafatası, beyin ve beynin altında neşter kaydırın. </li></ol> Bölüm 4: Ölçüler <ol><li> Donmaya karşı önce yapılabilir yararlıdır ölçümlerin bir dizi vardır. Örneğin, bir cetvel ile beyin A / P ekseni. Ayrıca belirli bir yoğunluk mezun silindir hacmi deplasman (Tablo 1) ağırlık bölünmesi yerinden su hacmini ölçerek, beyin ağırlığında ölçülebilir. </li></ol> Bölüm 5: Son beyin engelleme. <ol><li> Genelde beyin neşter bıçak takıldığında bunu tamamen beyin tam dorsal-ventral ölçüde nüfuz etmek için yeterince uzun değildir. Beyin kaldırılır ve brüt ölçümler elde edildikten sonra, bir doku dilimleme bıçağı alır ve beynin ventral tarafında (Şekil 2) yoluyla beyni bloke bitirmek. </li><li> Blokları dondurma önce, bakımı, 4 ˚ C kadar beyin lavabolar (10, 20, ve% 30) doku cryoprotect kademeli PBS-tamponlu sakaroz çözümler gereklidir. Genellikle 2-3 gün ve% 20 ek 3-5 gün kabın dibine batırmak için bloklar için% 30,% 10 bir gece inkübasyon alır. Inci bir günlük değişime% 30 sakaroz çözeltisini tavsiye edilir. </li></ol> Bölüm 6: Temsilci Sonuçlar Beyin kafatası kaldırıldıktan sonra yapılabilir brüt morfolojik ölçümleri vardır. Bunlar A / P uzunluk, ağırlık, ve özgül yoğunluğu (Tablo 1). Biz genellikle 1cm (Şekil 1) ölçüm 6-7 bloklar halinde beyin blok. Her bir parça sonra fotoğraflandı (Şekil 2) ve daha fazla araştırma ihtiyaçlarına bağlı olarak disseke veya kademeli sakaroz çözümler dondurmak için hazırlanmış olabilir. <table border="1"><tbody><tr><td> Konu </td><td> A / P Uzunluk (Mm) </td><td> Ağırlık (Gram) </td><td> Su Hacmi (Ml) </td><td> Özgül Yoğunluk (G / ml) </td></tr><tr><td> O2303-2-1-1 </td><td> 64,3 </td><td> 28,1 </td><td> 24 </td><td> 1,171 </td></tr><tr><td> O5180-1 </td><td> 71,3 </td><td> 38,7 </td><td> 34 </td><td> 1,138 </td></tr><tr><td> O2708-3-1 </td><td> 62,8 </td><td> 28,7 </td><td> 26 </td><td> 1,104 </td></tr><tr><td> O9184-4-2 </td><td> 65,3 </td><td> 29,5 </td><td> 24 </td><td> 1,229 </td></tr><tr><td> N459-1-14-2 </td><td> 68,2 </td><td> 31,6 </td><td> 26 </td><td> 1,215 </td></tr><tr><td> ORTALAMA </td><td> 66,38 </td><td> 31,32 </td><td> 26,8 </td><td> 1,171 </td></tr><tr><td> STD DEV </td><td> 3,38 </td><td> 4,33 </td><td> 4,17 </td><td> 0,052 </td></tr></tbody></table> 5 Ay Eski Vervets sağ yarımkürede Tablo 1 Brüt Morfolojik Ölçümleri <img src="/files/ftp_upload/1259/1259fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> <img src="/files/ftp_upload/1259/1259fig2.jpg" alt="Şekil 1.5" /> Şekil 1. Beyin engellemek için kullanılan koronal planlarda Şemalar Bu bir dışsallaşmış yetişkin vervet beyin bir örnektir. Engelleme işlemi örneği. Burada dikey çizgiler genellikle her yarımkürede 7 koronal blok üreten, 1 cm aralıklı. <img src="/files/ftp_upload/1259/1259fig3.jpg" alt="Şekil 2" /> Şekil 2. Stereotaksik alan beyin doku bloklar Her blok 50μm alınan yaklaşık 200 bölüm verim. Bu örnekleme şeması ile koronal planda dilimlenmiş korteks üzerinden 1200&#39;den fazla bölümleri beyincik ve ek bir 400-500 olacak.

<ol><li>Gallagher, M., Rapp, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+animal+models+to+study+the+effects+of+aging+on+cognition.+Annu+Rev+Psychol+48%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The use of animal models to study the effects of aging on cognition. Annu Rev Psychol 48.</a> , 339-370 (1997).</li>
<li>Clancy, B., Darlington, R., Finlay, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translating+developmental+time+across+mammalian+species%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Translating developmental time across mammalian species.</a> Neuroscience. 105, 7-17 (2001).</li>
<li>Nowakowski, R. S., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+site+of+origin+and+route+and+rate+of+migration+of+neurons+to+the+hippocampal+region+of+the+rhesus+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">The site of origin and route and rate of migration of neurons to the hippocampal region of the rhesus monkey.</a> J Comp Neurol. 196, 129-154 (1981).</li>
<li>Rakic, P., Bourgeois, J. P., Eckenhoff, M. F., Zecevic, N., Goldman-Rakic, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concurrent+overproduction+of+synapses+in+diverse+regions+of+the+primate+cerebral+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Concurrent overproduction of synapses in diverse regions of the primate cerebral cortex.</a> Science. 232, 232-235 (1986).</li>
<li>Granger, B., Tekaia, F., Le Sourd, A. M., Rakic, P., Bourgeois, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tempo+of+neurogenesis+and+synaptogenesis+in+the+primate+cingulate+mesocortex%3A+comparison+with+the+neocortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Tempo of neurogenesis and synaptogenesis in the primate cingulate mesocortex: comparison with the neocortex.</a> J Comp Neurol. 360, 363-376 (1995).</li>
<li>Zecevic, N., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+layer+I+neurons+in+the+primate+cerebral+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Development of layer I neurons in the primate cerebral cortex.</a> J Neurosci. 21, 5607-5619 (2001).</li>
<li>Ervin, F. R., Palmour, R. M., Young, S. N., Guzman-Flores, C., Juarez, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+consumption+of+beverage+alcohol+by+vervet+monkeys%3A+population+screening%2C+descriptive+behavior+and+biochemical+measures%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Voluntary consumption of beverage alcohol by vervet monkeys: population screening, descriptive behavior and biochemical measures.</a> Pharmacol Biochem Behav. 36, 367-373 (1990).</li>
<li>Palmour, R. M., Mulligan, J., Howbert, J. J., Ervin, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Of+monkeys+and+men%3A+vervets+and+the+genetics+of+human-like+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Hum+Genet%22%5BJournal%5D)">Of monkeys and men: vervets and the genetics of human-like behaviors.</a> Am J Hum Genet. 61, 481-488 (1997).</li>
<li>Boire, D., Théoret, H., Ptito, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereological+evaluation+of+neurons+and+glia+in+the+monkey+dorsal+lateral+geniculate+nucleus+following+an+early+cerebral+hemispherectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Stereological evaluation of neurons and glia in the monkey dorsal lateral geniculate nucleus following an early cerebral hemispherectomy.</a> Exp Brain Res. 142, 208-220 (2002).</li>
<li>Bjugstad, K. B., Teng, Y. D., Redmond, D. E. J. r, Elsworth, J. D., Roth, R. H., Cornelius, S. K., Snyder, E. Y., Sladek, J. R. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+neural+stem+cells+migrate+along+the+nigrostriatal+pathway+in+a+primate+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Human neural stem cells migrate along the nigrostriatal pathway in a primate model of Parkinson's disease.</a> Exp Neurol. 211, 362-369 (2008).</li>
<li>Lemere, C. A., Beierschmitt, A., Iglesias, M., Spooner, E. T., Bloom, J. K., Leverone, J. F., Zheng, J. B., Seabrook, T. J., Louard, D., Li, D., Selkoe, D. J., Palmour, R. M., Ervin, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alzheimer%27s+disease+abeta+vaccine+reduces+central+nervous+system+abeta+levels+in+a+non-human+primate%2C+the+Caribbean+vervet%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Alzheimer's disease abeta vaccine reduces central nervous system abeta levels in a non-human primate, the Caribbean vervet.</a> Am J Pathol. 165, 283-297 (2004).</li>
<li>Mash, D. C., Staley, J. K., Doepel, F. M., Young, S. N., Ervin, F. R., Palmour, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+dopamine+transporter+densities+in+alcohol-preferring+vervet+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Altered dopamine transporter densities in alcohol-preferring vervet monkeys.</a> Neuroreport. 7, 457-462 (1996).</li>
<li>Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+reduction+in+frontal+cortex+of+primates+after+prenatal+alcohol+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure.</a> Neuroreport. 20, 13-17 (2009).</li>
</ol>

Yazarların beyan edecek bir çıkar çatışması yoktur.

St Kitts vervet (Chlorocebus aethiops sabeus) insanların kortikal ve subkortikal beyin gelişiminde benzer alışkanlıkları ve oranları ile bir Eski Dünya primat. Bu tür gibi karmaşık insan davranış bozuklukları endişeli davranış, hipertansiyon 8, hemisferektomi 9, Parkinson hastalığı 10, Alzhemier hastalığında 11 ve alkol kötüye kullanımı 12 modeli için kullanılır olmuştur. Daha yakın zamanlarda, bu tür natüralist prenatal etanol maruz kalma nöroanatomik etki...

<table><tbody><tr><td>Sakalpel</td><td>Fine Science Tools</td><td>10003-12</td><td></td></tr><tr><td>Sakalpel uçları</td><td>Fine Science Tools</td><td>10011-00</td><td></td></tr><tr><td>Makas</td><td>Fine Science Tools</td><td>14090-11</td><td>Herhangi bir cerrahi makas yeterlidir</td></tr><tr><td>Rongeur</td><td>Fine Science Tools</td><td>16121-14</td><td></td></tr><tr><td>Pens</td><td>Fine Science Tools</td><td>11027-12</td><td></td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>Fisher Scientific</td><td>09-924-150</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaksik Çerçeve</td><td>Kopf Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Doku dilimleme bıçağı</td><td>Thomas Scientific</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

sigara insan stereotaksik uzay primate beyin diseksiyon

Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space

Insan olmayan primatlardan, insanlarda gelişim ve yaşlanma süreçleri anlamak için mükemmel bir translasyonel modeli sağlar<sup&gt; 1-6</sup&gt;. Buna ek olarak, insan olmayan primatlardan kullanımı son zamanlarda, alkol bağımlılığı gibi karmaşık psikiyatrik bozukluklar doğal olarak modellemek için fırsat sağladığı vardır<sup&gt; 7</sup&gt;. Burada koronal düzlemde vervet maymun beyni bloke etmek için bir tekniktir (<em&gt; Chlorocebus aethiops sabeus</em&gt;) Stereotaksik alanı bozulmamış bir kafatası. Bu yöntem, burada blok ve bloklar arasındaki konular ve en aza indirir kısmi bölümleri arasındaki bölümde standart bir düzlemde sağlar nitelendirdi. Koronal düzlemde bir doku blok Kesit de bir ilgi alanı tarif kolaylaştırır. Bu yöntem, 50μm az dilimleme vervet maymun tek bir yarımkürede 1200&#39;den fazla bölüm verir yönetilebilir büyüklükte bloklar sağlar. Ayrıca beyin 1cm bloklar halinde bloke ederek, cyroprotection için sakaroz penetrasyonu kolaylaştırır ve blok standart bir Kriyostat dilimlenmiş olanak sağlar.

Insan dışı primat beynin normal işleme anlamak için önemli bir translasyonel türüdür. Primat beynin anatomik organizasyonu, insanlarda normal ve patolojik durumları önemli bilgiler sağlayabilir.

Sigara insan Stereotaksik Uzay Primate Beyin Diseksiyon

İnsan dışı primatların kullanımı, insanlardaki gelişimsel ve yaşlanma süreçlerini anlamamız için mükemmel bir translasyonel model sunmaktadır1-6. ...

Bu işlem, iyi perfüze edilmiş bir maymun başı ile başlar. Kalvaryum çıkarıldıktan sonra baş stereotaksik çerçeveye yerleştirilir ve manipülatör kolu ile bir dizi stereotaksik koronal kesit alınır; ardından beyin çıkarılır, ölçülür ve kriyokorunmaya alınır. Merhaba, ben Montreal Üniversitesi Optometri Okulu'ndaki Görsel Nörobilimler Laboratuvarı'ndan Dr. Mark Burke.Ben Dr. Shaheen Zur, Montreal Üniversitesi Optometri Okulu Görsel Nörobilimler Laboratuvarı'ndanım. Ben Dr. Mo Petto, Montreal Üniversitesi Optometri Okulu Görsel Nörobilim Laboratuvarı direktörüyüm. Bugün sizlere, insan dışı primat beyninin stereotaktik uzayda sabitlenmesi işlemine dair bir prosedür göstereceğiz.Laboratuvarımızda, normal gelişim sürecindeki ve gelişimsel müdahalelere yanıt olarak beyin organizasyonunun çeşitli yönlerini incelemek için bu prosedürü kullanıyoruz. Öyleyse başlayalım. Bu protokol, bir vervet maymununun ötanazi, fiksasyon ve başının kesilmesinin ardından başlar.Beyin çıkarılmadan önce stereotaksik çerçeve hazırlanmalıdır. Öncelikle Horsley Clark interaural düzlem sıfırının veya kulaklar arasındaki teorik orta noktanın koordinatları belirlenmelidir. Bu düzlemi ölçmek için kulak çubuklarını aparata eşit şekilde yerleştirin.Ardından, stereotaksik manipülatör koluna bir bistüri ucu yerleştirin ve kulak çubukları arasındaki orta noktayı ölçün. Sonra, başı stereotaksik çerçeveye yerleştirmek için hazırlayın. Alt çeneyi çıkarmak için kemik rgo ve bir bistüri kullanın.Bu noktada, sonraki adımlar boyunca kalan kalvayı yavaşça temizleyin. Kafa stereotaksik çerçeveye sabitlenirken kulak kanallarının sağlam kalması gerektiğinden, temporal kemikleri çıkarmamaya dikkat edin. Pens ve makas kullanarak, açığa çıkan beynin üzerindeki görünür dura mater'yi dikkatlice kesin.Artık kafatası stereotaksik manipülatöre yerleştirilmeye hazırdır. Beynin stereotaksik bloklamasına başlamak için başı çerçeveye yerleştirin; göz paletini ve kulak barlarını stereotaksik cerrahide yapacağınız gibi ayarlayın. Stereotaksik manipülatörü önceden belirlenmiş anterior, posterior veya AP eksenine yerleştirin.Beyin bloklama işlemine başlamak için manipülatörü beynin en sol veya en sağ tarafına konumlandırın ve ilk kesiyi yapmak için bıçağı indirin. Bıçak, koronal düzlemde kesim yaparak beynin orta hattına dik olacaktır.Bıçağı beyin yüzeyinden tamamen uzaklaşacak şekilde kaldırın. Ardından, ilk kesiğinizle hafifçe örtüşecek şekilde mediale ilerleyin ve bıçağı indirin. Bu işlemi tekrarlayın. Beynin karşı kenarına ulaşana kadar örtüşen kesiler yapmaya devam edin.Bu işlemle ilk koronal blok tamamlanmış olur. Manipülatörü AP ekseni boyunca bir santimetre ileri veya geri hareket ettirin ve önceki kesimlerinize paralel olarak koronal düzlemde yeni bir kesim serisi yapın. Tüm beyin bloklanana kadar bu şekilde devam edin.Kesim işlemini tamamladığınıza göre, beyni kafatasından çıkarma zamanı gelmiştir. İlk olarak, başı çerçeveden çıkarın. Beynin kafatası içinde sarsılıp zarar görmesini önlemek için, avucunuzun içinde hafifçe destekleyerek beyni sabitlemeye çalışın.Beynin soyulacak yüzeyinin kurumasını önlemek için serçe parmağınızı frontal lobların üzerine yerleştirin. Bir parça gazlı bezi PBS ile ıslatın ve beynin üzerine örtün. Kafayı kafatasından sıkıca tutun ve geri kalan oksipital ve temporal kemikleri omurga ile birlikte yavaşça kırarak temizleyin.Bu işlem, beynin taban ve yan kısımlarını açığa çıkarır. Şimdi geri kalan durayı çıkarın. Son olarak, olfaktor bulblara erişim sağlayacak olan nazal kemiği ve geri kalan frontal kemiği çıkarın.Frontal kemiğin en son çıkarılması önemlidir; çünkü kafatası tabanı çıkarılırken beyin hafifçe hareket eder ve frontal kemiğin tırtıklı kenarları frontal loblara zarar verebilir.Kalan dura mater kısımlarını dikkatlice temizleyin, beynin ön kısmını hafifçe kaldırın, bisturiyi beynin altına kaydırarak beyni kafatasından ayırın. Kesme bıçağı ventral tarafa kadar tam olarak ulaşmadığı için beyin, sapından dilimlenmiş bir soğan gibi bir arada kalacaktır. Beyni dondurmadan önce yapabileceğiniz bir dizi faydalı ölçüm bulunmaktadır.Öncelikle, beynin AP eksenini ölçmek için bir kumpas kullanılabilir. Ardından, spesifik yoğunluğunu belirlemek için beyni tartın. Daha sonra, mezürdeki su yer değiştirmesile hacmi ölçün.Artık yoğunluğa, yani kütlenin hacme bölünmesine sahipsiniz. Tüm beyin üzerinde ölçümleri tamamladığınıza göre, doku bloklarını beynin ventral tarafından bağlı oldukları yerden ayırmanın ve dondurma işlemine hazırlamanın zamanı gelmiştir. Bir doku dilimleme bıçağı alın ve blokları serbest bırakmak için her bir kesiği beynin ventral tarafından gerçekleştirin.Medial, lateral ve anterior posterior AE'leri ölçmek için bir kumpas kullanılabilir. Beyin blokları artık kriyokoruma işlemine ve dondurulmaya hazırdır. Size, insan dışı primat beyninin stereotaksik uzayda nasıl bloklandığını göstermiş olduk.Bu prosedür uygulanırken, stereotaksik manipülatör ile herhangi bir medial lateral hareket yapılmadan önce bıçağın tamamen geri çekilmesi önemlidir. Ayrıca, kemikleri beyinden temizlerken ER'ler ile kortekse zarar vermemeye dikkat edin. Hepsi bu kadar.İzlediğiniz için teşekkür ederiz, deneylerinizde başarılar dileriz.

dissecting-the-non-human-primate-brain-in-stereotaxic-space

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Beyin bankacılık ve biyolojik materyalin sistematik örnekleme tarafsız stereology temelini sağlar ve olası veri her numune elde edilen en üst düzeye çıkarır.

Beyin Bankacılık: Araştırma Örneklerinin En iyi şekilde

Primat beynin anatomik organizasyonu, insanlarda normal ve patolojik durumları önemli bilgiler sağlayabilir. Hakkında tarafsız stereology, doğru ve etkin bir biçimde, belirli bir referans alanı toplam nöron numarası (veya başka bir hücre tipi) tahmin etmek için bir...

Sigara insan Primate Beyin | Stereology: sayar ne bilmek

Lateral ventrikül duvarları en büyük yetişkin memelilerin beyin germinal bölge içerir. Geleneksel olarak, bu bölgedeki nöron çalışmaları klasik histolojik analiz için kesit alma teknikleri dayanıyordu. Burada, bu germinal bölgenin kapsamlı, en-yüz görünümü sağlar wholemount tekniği, alternatif bir yaklaşım sunuyoruz.

En yüze Subventricular Bölge: Wholemount Boyama ve ependim Akış

Bu kağıt yüzeysel beyaz madde yolları ortaya çıkarmak için bir lif disseksiyon yöntem etkin kullanımı ve ventrikül Morfoloji, öğrenci anlama yardım etmek için üç boyutlu uzaydaki insan beyni yapılarının periventriküler gösteriyor.

Derin uzay - anatomi Lateral ventrikül insan beyninin ortaya çıkarmak için periventriküler yapıların ortaya çıkararak keşfetmek

Bu makalede, düzleştirilmiş teğet bölümleri memeli cortices elde etmek ve histochemical kullanarak kortikal modülleri ve immunohistokimyasal yöntemleri görselleştirmek için detaylı bir metodoloji.

Görselleştirme düzleştirilmiş memeli Cortices'deki kortikal modülleri

Aşağıda özetlenen yöntem, üç boyutlu (3D) baskı yöntemleri ve MR Veri çıkarma nın yeni bir kombinasyonunu kullanarak insan dışı primat (NHP) nöroşirürji sinin hazırlanması için kapsamlı bir protokol sağlamayı amaçlamaktadır.

İnsan olmayan Primatlarda Nöroşirürji Planlaması için MRI Tabanlı Araç Kutusu

Fare beyninin çıkarılması ve taze beyin dokusundan ayrı bölgelerin diseksiyonu için uygulamalı, adım adım, hızlı bir protokol sunuyoruz. Moleküler analiz için beyin bölgelerinin elde edilmesi birçok sinirbilim laboratuvarında rutin hale gelmiştir. Bu beyin bölgeleri, sistem seviyesi analizi için yüksek kaliteli transkriptomik veriler elde etmek için hemen dondurulur.

Fare Beyninin İşlevsel ve Anatomik Olarak Farklı Bölgelere Mikrodiseksiyonu

Bu makale, manyetik rezonans görüntüleme (MRI) taramalarına dayalı insan dışı primat nöroşirürji planlaması için otomatik süreçleri özetlemektedir. Bu teknikler, NHP'ler için özelleştirilmiş implant tasarımını desteklemek için programlama ve tasarım platformlarındaki prosedürel adımları kullanır. Her bir bileşenin geçerliliği daha sonra üç boyutlu (3D) basılmış gerçek boyutlu anatomik modeller kullanılarak doğrulanabilir.

İnsan Olmayan Primatlar için Nöral İmplant Tasarım Araç Kutusu

Seri iki fotonlu tomografi (STPT) görüntüleme, iki fotonlu görüntülemeyi otomatik evre kontrolü ve mikrotom dilimleme ile birleştirerek bir doku kütlesini üç boyutlu şeklinde görüntülemek için kullanılan bir tekniktir. Burada, marmoset beyinlerinin yapısal özelliklerini daha iyi anlamaları için bunu uygulamak için bir protokol açıklıyoruz.

Nöroanatomik Analizler için Tüm Marmoset Beyninin Seri İki Fotonlu Tomografisi

Tek hücreli elektroporasyon (SCE), in vivo hazırlıkları da dahil olmak üzere sağlam doku içindeki tek tek hücrelerin içine DNA veya diğer makromoleküller teslim sağlayan özel bir tekniktir. Xenopus laevis larva bozulmamış beyin içinde nöronların bir floresan boya veya plazmid DNA SCE için burada ayrıntılarıyla prosedür.

Tek Hücre Elektroporasyon bozulmamış Gelişmekte olan beyin içindeki in vivo

Öğrenin stereotaksik uzayda insan dışı primat beyni bloklama prosedürünü. Bu yöntem, normal gelişim ve patolojik durumları incelemek için kullanılır.

Sigara insan Stereotaksik Uzay Primate Beyin Diseksiyon

Daha fazla video keşfet