15 Mayıs 2009
CODA 8-Kanal High Throughput Non-Invasive Kan Basıncı sistem aynı anda 8 fareler ya da sıçanlar için kan basıncı ölçer. Bu kuyruk manşet sistemi, kuyruk kan hacminin belirlenmesinde kan basıncını ölçmek için Toplu Basınçlı Kayıt (VPR) kullanır.
Coda kelimesi İtalyancada kuyruk anlamına gelir. Coda non-invaziv kan basıncı sistemi, bir hayvanın kuyruğu üzerine yerleştirildiğinde kuyruk kan hacmi değişikliklerini ölçen özel bir hacim basınç kayıt sensörü sayesinde kemirgenlerde kan basıncı ölçümlerine olanak tanır. Bu video, sistemin nasıl kurulacağını, hayvanların nasıl hazırlanacağını ve sekiz hayvan için eş zamanlı olarak kan basıncı ölçümlerinin nasıl elde edileceğini göstermektedir.
Merhaba, ben Anju Bala Krishnan; Kentucky Üniversitesi, Lexington'daki Alan Dougherty laboratuvarı Kardiyovasküler Araştırma Merkezi'nde çalışıyorum. Bugün sizlere, kuyruk manşonu yöntemiyle hacim basınç kaydı kullanarak farelerde kan basıncının nasıl ölçüleceğine dair bir prosedürü göstereceğiz. Laboratuvarımızda kardiyovasküler sistemi incelemek için bu prosedürü kullanıyoruz.
Hadi başlayalım. CODA sistemini kurmak için, laboratuvarda oda sıcaklığının stabil bir şekilde 20 °C veya üzerinde olduğu bir alan seçin. Klima menfezlerine yakın yerlerden kaçının; hayvanların yüksek gürültüye veya kokulara maruz kalması irritasyona veya strese neden olabilir.
Hayvan kokuları, üzerinizde bulunan herhangi bir güçlü parfümü de kapsayabilir. Coda kontrol cihazını ve ardından seviye üçe ayarlanmış ısıtma platformlarını açın. Oda sıcaklığı 25 °C'nin üzerindeyse, birinci veya ikinci seviyelerden başlayın.
Önce Kontrolcü Tanılama testini gerçekleştirin, Coda yazılımını açın. Coda cihazı üzerine tıklayarak seçin. Seçili cihazı test et seçeneğine tıklayın.
Test edilecek manşetleri ve kanalları seçin ve test butonuna tıklayın. Kontrolör tanı testi tamamlandıktan sonra cihaz testi penceresini kapatın. Kullanılacak kontrolör kodunu seçin ve ardından tıklayın.
Yazılımı kurmak için bu cihazları kullanın. Araçları yönet personelini seçin. Ardından, araştırmacı bir'e tıklayın.
İsmi değiştirmek için, ek araştırmacılar eklemek amacıyla sonraki satırlara tıklayın. Ardından verileri kaydet'e tıklayın. Teknisyenleri düzenlemek veya eklemek için teknisyenler sekmesine tıklayın.
Ardından, hayvanları kolayca tanımlayabilmek için isimlendirmek ve hayvan türünü seçmek amacıyla örnekler sekmesine tıklayın. Daha sonra verileri kaydet düğmesine tıklayın. Son olarak, hayvanlar sekmesine tıklayın.
Hayvan türünü ve duyarlılığı değiştirmek için veri kaydet seçeneğine tıklayın ve ardından kapatın. Yeni bir deneye başlamak için dosya menüsünden Yeni deney'i seçin. Deney adını girin, sorumlu araştırmacıyı seçin ve bir başlangıç tarihi belirleyin.
Sonrakine tıklayın. Bir sonraki adım temel oturum bilgilerini girmektir. Oturum adını girerek başlayın; alışma döngülerini dahil etmek istemiyorsanız alışma döngülerini beş yerine sıfıra ayarlayın.
Set sayısını bir olarak, setler arası süreyi ise birden fazla set için 30 saniye olarak ayarlayın. Set başına döngü sayısını 20 döngü, döngüler arası süreyi ise beş saniye olarak belirleyin. Ardından sonraki butonuna tıklayın.
Numune seçimine başlamak için, numune havuzundan numuneyi seçin ve ilk müsait kanala atayın. Ardından, oturum parametrelerini ayarlamak için "sonraki"ye tıklayın. Maksimum tıkanma basıncını 250 milimetre olarak ayarlayın.
Civa sönümleme süresini 20 saniyeye ayarlayın. Fareler için minimum hacmi 15 µL'ye ve görüntüleme stilini grafik başına tek kanala getirin. Ayrıca ek araştırmacılar ve teknisyenler de ekleyebilirsiniz.
Ardından sonraki butonuna tıklayın. Oturum betiğini gözden geçirin ve sonraki butonuna tıklayın. Bir sonraki bölümde açıklanan hayvan hazırlama kısmını tamamlayana kadar bitir seçeneğini seçmeyin.
Şimdi hayvanları geri alıp CODA kan basıncı sisteminin yanına yerleştirebilirsiniz. Hayvanları tutuculara yerleştirmeden önce, her bir hayvanın boyutunu seçilen tutucunun boyutuyla karşılaştırın. Hayvan, tutucuya rahatça girebilmelidir.
Her bir hayvanı, kuyruğundan tutarak tutucunun arka kısmına, yani burun konisinin açık ucuna bakan tarafa nazikçe yerleştirin. Arka kapaktaki vidayı çevirerek arka kapağı tutucuya dikkatlice sabitleyin. Arka kapağı sabitlerken kuyruğun veya vücudun diğer herhangi bir kısmının sıkışmamasına dikkat edin.
Sonraki slayt. Burun konisi arka kapağa doğru. Hayvanın hareketini kısıtlama.
Burun konisi, hayvanın dönmesini engelleyecek bir konumda olmalıdır. Hayvan tutucunun içindeyken, tutucuyu ısıtma platformunun üzerine yerleştirin. Belirlenen konumda, hayvanın tutucuya alışması için ona en az beş dakika süre tanıyın.
Hayvana dokunmayın veya onu tutmayın. Tutucu içerisindeyken artan temas hayvanı irite edebilir; hayvanı tutucu içerisinde asla gözetimsiz bırakmayın. Oklüzyon kuyruk manşetini doğru şekilde yerleştirmek için, kuyruğu oklüzyon manşetinden geçirin ve manşeti, zorlamadan, kuyruk köküne mümkün olduğunca yakın bir konuma yerleştirin.
Ardından, kuyruğu VPR sensör manşetinden geçirerek oklüzyon manşetinin iki milimetre yakınına yerleştirin. Tüplerle beraber düzeneği, tutucunun üst arka kısmındaki çentikte sabitleyin. Kuyruk kan akışını engellemek için oklüzyon kuyruk manşeti şişirilir.
Oklüzyon manşeti yavaşça söndürülür ve özel olarak tasarlanmış bir sensör içeren VPR kuyruk manşeti, kan kuyruğa geri dönerken geri dönen kan akışının fizyolojik özelliklerini ölçer. VPR sensör manşeti, kan akışından kaynaklanan arteriyel pulsasyonların sonucunda oluşan kuyruk şişmesini ölçer. Sistolik kan basıncı, kuyruk şişmesinin ilk ortaya çıktığı anda otomatik olarak ölçülür.
Kuyruktaki şişme hızının artışı durduğunda diyastolik kan basıncı otomatik olarak hesaplanır. Tüm hayvanlar tutuculara yerleştirildikten ve kuyruk manşetleri takıldıktan sonra, termal düzenleme yapmaları için onlara en az beş dakika süre tanıyın. Hayvanların sıcaklığını kaydedin.
Kızılötesi bir termometre ile yapılan ölçümlerde, hayvanın sıcaklığı genellikle 32 ile 35 santigrat derece arasında olmalıdır. Hayvanlar hazır olduğuna göre deneye başlayabiliriz. Deneye başlamak için bitir'e tıklayın.
Kırmızı çizgi, oklüzyon manşetinin ve VPR sensör manşetinin sönmesini temsil eder. Mavi çizgi, kuyruktaki kan hacmi değişimlerini temsil eder. Mavi çizginin ilk büküm noktası, yani minimum değişim hızı, sistolik kan basıncını belirler.
Mavi çizginin ikinci büküm noktası olan maksimum değişim oranı, deney sona erdiğinde diyastolik kan basıncını belirler. Hayvanları manşetlerden ve tutucudan derhal çıkarın. Basit bir seans özet raporu görüntülenir.
Deneyde toplanan veriler bir Excel dosyası olarak kaydedilir. Excel dosyası içindeki verileri işlemek için birkaç yöntem bulunmaktadır. Yaygın bir uygulama, ortalamayı ve standart sapmayı elde etmek ve ölçümleri silmektir.
Standart sapma 30'dan büyükse. Ayrıca, reddedilen döngüler görüntülenebilir ve tüm veri tabanı kolayca Excel'e aktarılabilir. Yazılı protokole ve kullanıcı kılavuzuna başvurun.
Daha fazla bilgi için; hacim basınç kaydı kullanarak farelerde kan basıncının non-invaziv olarak nasıl ölçüleceğini size göstermiş oldum. Doğru ve tutarlı ölçümler elde etmek için, bu prosedürü takip ederek hayvan stresini azaltmak büyük önem taşımaktadır. İşte hepsi bu kadar.
İzlediğiniz için teşekkür eder, deneylerinizde başarılar dileriz.
CODA 8 Kanallı Yüksek Kapasiteli Non-İnvaziv Kan Basıncı sistemi, sekiz kemirgene kadar aynı anda kan basıncı ölçümü yapılmasına olanak tanır. Hacim Basınç Kaydı (VPR) ile kuyruk manşeti yöntemini kullanan sistem, kuyruk kan hacmindeki değişiklikleri izleyerek kan basıncını doğru bir şekilde değerlendirir.
Hacim Basınç Kaydı (VPR) kullanılarak farelerde yapılan invaziv olmayan, yüksek kapasiteli kan basıncı ölçümü, preklinik modellerde güçlü kardiyovasküler fenotipleme ve hemodinamik sonlanım noktalarının kantitatif değerlendirilmesini sağlar. Bu yetenek; genetik olarak çeşitli veya farmakolojik olarak tedavi edilmiş kohortlar genelinde tekrarlanabilir, çok parametreli veriler sağlayarak erken keşif, hedef doğrulama ve translasyonel araştırmaları destekler. CODA sisteminin ölçeklenebilirliği ve standardizasyonu, kardiyovasküler ilaç keşfinde portföy düzeyinde karar vermeyi ve çalışmalar arası karşılaştırılabilirliği kolaylaştırır.
VPR kuyruk-manşet yöntemi, erken hedef doğrulamasından aday optimizasyonuna ve preklinik etkinlik çalışmalarına kadar standardize, non-invaziv kardiyovasküler fenotipleme sağlayarak keşiften preklinik aşamaya uzanan sürekliliğe entegre olur.