Name: Desenlendirme Biyomoleküller Mikroelektronlar Kendinden monte mono tabakaları Zehirli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-08-25T16:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 27 s
Description: Öğrenin, mikroelektrotlar üzerinde PEG-SAM oluşturarak biyomoleküllerin elektroforezle desenlendirilmesini. Bu yöntem biyokirlenmeyi önler ve mikrotübüllerin hassas konumlandırılmasını sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz SAM formasyonu üzerinde yararlı tartışmalar için Melissa Grunlan kabul etmiş sayılırsınız. Bu araştırma, Robert A. Welch Vakfı (A-1585) tarafından kısmen desteklenmiştir.

Reaktiflerin hazırlanması BORU tamponu (pH 6,8 KOH ile ayarlanmış 80 mM BORU 1mm MgCl 2, 1mm EGTA) hazırlayın. -70 Ve mağaza kısım glukoz oksidaz, katalaz ve glikoz ° C ve taksol -20 ° C mevcut protokollere göre 1,2 Temsili miktar ve mağaza tubulin -70 ° C tedarikçi tarafından verilen talimatlara göre. Litografi kullanarak Desen Au Mikroelektronlar <ol><li> Bir katip veya gofret kesici kullanarak 1 cm 1.5 cm substratlar içine silikon gofret kesin. Kapak ve 5 dakika sonikasyon kadar aseton beher yerleştirerek substratlar temizleyin. Yüzeylerde kurumasına izin vermeden, taze aseton onları yıkayın, sonra hemen izopropanol ve kuru nitrojen içinde durulayın. </li><li> Au Mikroelektronlar temiz yüzeyler üzerinde istenen özellikleri boyutuna bağlı olarak, standart, pozitif tonu fotolitografi veya elektron demeti litografi kullanarak imal 3 desen geometri tasarlarken, kapsama sağlamak için her elektrot desen çapı 100 mikron altında tutmak PEG SAM (sonraki bölümde açıklandığı gibi). Yastık bağlayan bir elektrot (Şekil 1) ile 1 mm çizgi ile desen, 500 mm ile 300 konumlandırılmış temas pedleri (~ 300 mm 2) ekleyin . Akışını odasının montajı için desen etrafında yer kalmasına izin verecek yüzey ortasına yakın litografik kalıpları yerleştirin. <img border="0" src="/files/ftp_upload/1390/1390fig1thumb.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1. Örnek geometri. Lütfen Şekil 1&#39;de bir büyük halini görmek için <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1390/1390fig1.jpg">buraya tıklayınız</a> . </li><li> Karşı katmanı desen kalkınma sonra, karşı temas pedi cımbız kullanarak (Şekil 1) substrat kenarına bir çizgi çizebilir. Metal birikimi üzerine, sıfırdan elektrot ve yüzey kenarı arasındaki elektriksel temas sağlayacaktır. Biriktirme haznesi, tercihen iki kaynaktan ile bir metal katmanı yatırmak için kullanılır. Elektrotlar vakum bozmadan, Au 6 nm takip Cr 2 nm birikimi (yapışma) tarafından oluşturulur. Odasının içine donatılmış bir kuvars kristali mikro depolanması sırasında filmlerin kalınlığı ölçmek için kullanılabilir. </li></ol> SAM hazırlayın <ol><li> Onceden ve iyi havalandırılan bir alanda fırın - 75 ° C 250 ml cam beher 20 mL toluen ekleyerek silanization çözüm hazırlayın. Daha sonra plastik bir pipet kullanarak toluen için 1 ml PEG-silan (yani% 5 v / v) ekleyin. Yukarı ve aşağı pipetleme 5 ila 10 kat ve daha sonra 30 saniye boyunca pipet ile karıştırarak PEG-silan iyi karıştırın. </li><li> PEG-silan toluen çözümü tamamen sular altında ve eşit olarak beher alt kısmında aralıklı emin olun desenli örneklerin beher desenli yüzü yukarı bakacak şekilde yerleştirin. Fırında behere koyun ve 18 ila 21 saat fırında 75 ° C. SAM oluşturan iken, counterelectrode hazırlamak (aşağıya bakınız) ve kalan adımlar için gerekli olan tüm ek parçaları bir araya toplamak. </li><li> Fırında 18-21 saat sonra, toluen, PEG-silan viskoz bir kalıntı desenli örnekler bırakarak buharlaşır gerekir. 20 mL toluen beher ekleyin ve 1-2 dakika örnekleri bekletin. Örnekleri kaptan çıkarın ve sonra toluen, izopropanol durulayın ve nitrojen ile nihayet kuru. Bu noktada, numuneler temiz bir görünüm ve SAM katmanı çıplak gözle görünmez olmalıdır. SAMs serin kuru hava şartlarında (25 ° C, orta nem) altında saklanan iki gün kadar kullanılabilen bu şekilde hazırladı. Yüzeyinde bulutlu veya düzensiz Mutfak dekorasyonunun puf noktalari kalıntı kaplama Başarısız SAM oluşumuna neden olur. </li></ol> Counterelectrode Üretiyor Mikroelektrot depolanması için kullanılan aynı birikimi odasının kurulumu, 22 x 50 mm No 1 ya da 0 no&#39;lu cam lamel üzerine Au 4 nm Cr 1 nm, para yatırma bir counterelectrode olun. Counterelectrode açık gri ya da pembe bir renk tonu ile neredeyse şeffaf olmalıdır. Temiz tutmak için bir Petri kabındaki kaplı yan counterelectrode saklayın. MTS içine polimerize tubulin <ol><li> Çözülme tubulin ve rodamin tubulin etiketlenmemiş ve hemen elde etmek için parlak MTS etiketsiz için etiketli 1:2 oranında kombine. Birkaç kez aşağı yukarı pipetleme karıştırın. Isıtılmış su banyosunda 20-40 dakika tubulin polimerize 37 ° C. MTS uzunluğu uzun polimerizasyon kez daha büyük olacaktır. Tubulin polimerize olmasına rağmen, 20 mM için taksol BORU tampon içeren bir mikrosantrifüj tüpe ekleyerek BORU taksol tampon hazırlamak. Yukarı ve aşağı pipetleme birkaç kez ve vorteks taksol iyi karıştırın ve daha sonra 37 ısıtılmış banyoya tüp yeri ° C. Polimerizasyon sonra, sıcak BORU taksol tampon ve kalkan 1 / 100 MTS sulandırmakışıktan. Bu şekilde hazırlanan MTS zaman ve paket, daha fazla seyreltme azaltılabilir uzayacaktır. </li><li> 30 ml soğuk BORU tampon (0-4 ° C), 2-mercaptoethanol% 50, 5 ml katalaz glukoz oksidaz, 5 ml ve 5 ml glikoz 5 ml birleştirerek 10x oksijen süpürücü karışımı (OS) hazırlayın. 2 Glikoz son ilave edilmelidir. Her bileşen ekledikten sonra 3-5 kez pipetleme ve aşağı çevirerek karıştırın. OS karışımı buz koyun, yaklaşık 2 saat boyunca etkili olmaya devam edecektir. </li><li> MT polimerizasyon başarılı oldu ve MTS görüntüleme 1x OS karışımı ile hazırlanan MTS floresans uyarma birkaç dakika altında stabil olduğunu doğrulayın. Görüntüleme için bu şekilde hazırlanan MTS, rodamin floresan için uygun bir uyarma / emisyon filtre kombinasyonu kullandığınızdan emin olun. BORU 1x OS karışımı ile tampon ve görüntüleme kullanarak 1 / 10 ila 1 / 100 MTS seyreltilmesi görüntüleme bireysel filamentler için en iyi çalışma seyreltme belirleyin. </li><li> Bir akış odası, iki adet çift taraflı bant dışında 2-3 mm yerleştirilir büyük (22 x 50 mm) ve küçük (22 x 22 mm) cam lamel sandviç hazırlayın. Bant cam slayt üzerine yerleştirerek ve bir jilet kesim tarafından kolayca şeritler halinde kesilir. Mikropipet kullanarak akış hücre içine MTS bir kaç mikrolitre tanıtın. Yüksek büyütme görüntüleme için, uzun çalışma mesafesi hedefleri üst yüzey akış odasının görüntüleme için gerekli olabilir. Lamel / numune yüzey akış odasının üst yüzeyi arasındaki mesafe bant kalınlığına göre belirlenir ve 60-100 mm olmalıdır. </li></ol> Desen MTS elektroforez kullanarak <ol><li> Elektrot bant (Şekil 2) dik çalışan bağlantı yolu ile şeritler arasında olduğu gibi, desenli, SAM-kaplı numune üzerinde çift taraflı bant iki ince şeritler koyarak bir elektroforez odasının hazırlayın. Yaklaşık 3 mm (Şekil 2) tarafından örnek çıkıntılar counterelectrode kenarında çift taraflı bant, teyp gibi dokunmadan metal yüzü counterelectrode yerleştirin. Birkaç 15 cm uzunlukta, yalıtılmış bakır mıknatıs tel kesin ve her iki ucunda 1 cm yalıtım kapalı şerit. Counterelectrode (bu bir multimetre ile kontrol edilebilir) ile elektrik kontağı yapmaktan kaçınmaya dikkat çekerken, küçük bir damla gümüş boya kullanarak substrat maruz Au alan bir tel takın. Counterelectrode gümüş boya kullanarak ikinci bir tel takın. Teller gümüş boya ile bağlı bant ile örnekler daha güvenli olabilir. <img src="/files/ftp_upload/1390/1390fig2thumb.jpg" border="0" alt="Şekil 2" /> Şekil 2 ters bir floresan mikroskop Flow hücre montajı. Lütfen Şekil 2&#39;de büyük halini görmek için <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1390/1390fig2.jpg">buraya tıklayın</a> . </li><li> 1x final konsantrasyon OS ile birlikte BORU tampon kullanarak istenilen seyreltme MTS tanıtın. 20X büyütme Görüntü ve bir voltaj uygulamadan önce silikon gofret desen bulmak. İsteğe bağlı olarak, akış odasının, akışkan akışı ve akış odasının düzlemde MT göçü önlemek için oje kullanılarak kapatılmalıdır. </li><li> 1 V kadar bir gerilim uygulayın ve MTS göç gözlemlemek. MTS, geri dönüşümlü hapsi istenen ise daha düşük voltaj (yaklaşık 0.5 V) kullanılıyor olabilir, ancak bu yanal kayma önlemek için akış odasının sızdırmazlık gerektirir. Tırnak cilası akış odasının açık biter sızdırmazlık için iyi çalışır. V 0.7 hakkında yukarıda gerilimler, bazı MT yapışma zayıf olsa, desen olabilir. Yaklaşık 0,9 V Yukarıdaki gerilimler, MT göçü daha hızlı olacak ve yapışma güçlü olacak. Mikroelektronlar yok etmek için de indükleyici elektroliz (gaz kabarcığı oluşumu) ve yaklaşık 1,2 V üstünde olasılığını önemli ölçüde artırır. Göç mikroskop odak dikey düzlemde ayarlayarak takip edilebilir. Doğru şekilde yapılmazsa, MTS elektrot yüzeylerinde lokalize. </li></ol>

<ol><li>Tubulin Polymerization with GTP/GMPCPP/Taxol [Internet]. , Harvard University. Cambridge, Ma. Available from:
 
 <a target="_blank" href="http://mitchison.med.harvard.edu/protocols/poly.html">http://mitchison.med.harvard.edu/protocols/poly.html</a> (2009).</li>
<li>Flow Cell Assays with Microtubules: Motility/Dynamics [Internet]. , Harvard University. Cambridge, Ma. Available from:
 
 <a target="_blank" href="http://mitchison.med.harvard.edu/protocols/flowcell.html">http://mitchison.med.harvard.edu/protocols/flowcell.html</a> (2009).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Handbook+of+Microlithography%2C+Micromachining%2C+and+Microfabrication%3A+Microlithography%22">Handbook of Microlithography, Micromachining, and Microfabrication: Microlithography</a>. Rai-Choudhury, P. , SPIE Press. Bellingham, WA. (1997).</li>
</ol>

Yazarların beyan edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

MTS, göç nedeniyle parlaklık ve düşük eşiğe kolayca floresan mikroskopi kullanılarak görüntülenmiştir. Sadece biyomoleküllerin tampon pH uygun ayarı ile net ücret taşımak için ikna olmasını gerektirir Bu yöntem, genellikle biyomolekülün desenlendirme için geçerli. Kapiler elektroforez kullanılan silika duvarlar gibi hiçbir ücret yüzeyleri vardır çünkü Electroosmosis Bu kurulum kaçınılmalıdır. Bu yöntem çeşitli değişiklikler yapılabilir. Sızdırmazlık akış odasının uçları açık biter buharlaşma...

No: 1 borosilikat cam lamelleri (22 X 50 mm) VWR satın alınmıştır. Cilalı elektronik sınıf p-tipi &lt;111&gt; silikon gofret Yüksek saflıkta gümüş boya Yapısı Sonda, Inc (Katalog # 5001 AB) elde edilmiştir Addison Mühendisliği, Inc satın alındı. Yalıtımlı ince göstergesi Bakır Bobin Teli (~ 0.08 mm (0.003) çap), elektronik tedarik şirketlerinden elde edilebilir.

desenlendirme biyomoleküller mikroelektronlar kendinden monte mono tabakaları zehirli

Antifouling Self-assembled Monolayers on Microelectrodes for Patterning Biomolecules

Biz, altın Mikroelektronlar, bir silikon taban poli (etilen glikol) (PEG) trimethoxysilane kendinden montajlı tek tabaka (SAM) oluşturmak için bir prosedür mevcut. PEG-SAM tek bir montaj adımda oluşturulur ve silikon ve altın yüzeyler üzerinde biyolojik kirlenmeye engeller. SAM standart, pozitif ton litografi desenli ceket Mikroelektronlar kullanılır. Mikrotübül bir örnek olarak kullanarak, geri dönüşümlü bir şekilde SAM-örtülü elektrot elektroforetik göç ikna etmek için bir DC gerilim uygulanır. Bir akış odası, görüntüleme için elektroforetik göç ve mikrotübül desenlendirme kullanılan<em&gt; In situ</em&gt; Epifloresans mikroskopi kullanılarak. Hedef moleküller hareketsiz ve böylece spesifik moleküler etkileşimler gerektirmez elektroforez çalışanı olarak bu yöntem, genellikle biyomolekülün desenlendirme uygulanabilir. Ayrıca, desen SAM moleküllerin doğrudan litografik teknikleri kullanarak çalışırken karşılaşılan sorunları önler. Elektron demeti litografi ile uyumluluk, bu yöntem nano ölçekli desen biyomoleküllerin kullanılmasına izin verir.

Biz altın Mikroelektronlar bir silikon taban üzerinde bir poli (etilen glikol), kendinden montajlı tek tabaka (PEG-SAM) oluşturmak için bir prosedür mevcut. PEG-SAM, tek bir adımda oluşan ve silikon ve altın yüzeyler biofouling engeller. Elektroforez sonra nano ölçekli desenlendirme biyomoleküllerin için kullanılır.

Desenlendirme Biyomoleküller Mikroelektronlar Kendinden monte mono tabakaları Zehirli

Altın içeren bir silikon altlık üzerinde poli(etilen glikol) (PEG) trimetoksisilan öz-düzenleyici tek tabaka (SAM) oluşturmaya yönelik bir prosedür sunuyoruz...

Bu prosedür, silikon bir alt tabaka üzerinde bir mikro elektrotun üretilmesiyle başlar. Mikrotübüllerin kirlenmesini önlemek için mikro elektrot ve alt tabaka üzerinde bir polietilen glikol kendi kendine düzenlenen tek tabaka oluşturulur. Ardından, rumin işaretli mikrotübüller hazırlanır.Son olarak, elektroforez kullanılarak mikrotübüller desenlenmiş elektrotlar üzerine yerleştirilir. Merhaba, ben Texas A&M Üniversitesi Fizik Bölümü'ndeki Nana Laboratuvarı'ndan ve Biyomedikal Mühendisliği Bölümü'ndeki Moleküler Biyomekanik Laboratuvarı'ndan John Noel. Ben de Fizik Bölümü'nden ve Texas A&M Üniversitesi'ndeki Center Skill Science and Technology'nin direktörü Wil free Teza.Ben Juan Quang, Texas A&amp;M Üniversitesi Biyomedikal Mühendisliği Bölümü Moleküler Biyomekanik Laboratuvarı'nın direktörüyüm. Bugün size, kirlenmeyi önleyici (non-fouling) bir kendiliğinden düzenlenen tek tabaka (self-assembled monolayer) ile kaplanmış mikroelektrotların hazırlanma prosedürünü göstereceğiz. Laboratuvarımızda bu prosedürü, elektroforez kullanarak mikrotübül paketlenmesini incelemek için kullanıyoruz.Hadi başlayalım. Başlangıç olarak, substrat olarak kullanmak üzere silikon gofretleri bir çizici veya gofret kesici ile 1 cm x 1,5 cm boyutundaki parçalar halinde kesin. Şimdi, substratları onları kaplayacak kadar aseton içeren bir behere yerleştirerek temizleyin ve substratların kurumasına izin vermeden beş dakika boyunca sonikasyon uygulayın.Bunları taze aseton ile durulayın, ardından hemen tekrar izopropanol ile durulayıp kurutmak için nitrojen kullanın. Temiz altlıklar üzerine altın mikro elektrotları standart pozitif ton fotolitografi veya elektron demeti litografisi kullanarak imal edin. Desen geometrisini tasarlarken, her bir elektrot deseninin çapını 100 mikronun altında tutun. Polietilen glikol trimetoksisilan öz-düzenli tek tabaka veya peg SAM ile kaplanmasını sağlamak için, desenden 300 ila 500 mikrometre uzaklıkta konumlandırılmış, pedi elektrota bağlayan bir milimetrelik hatta sahip kontak pedleri ekleyin.Rezist tabakasındaki desen geliştirildikten sonra, cımbız kullanarak kontak pedinden substrat kenarına kadar rezist üzerinde bir çizik oluşturun. Metal biriktirme işlemi sırasında, bu çizik elektrot ile substrat kenarı arasında elektriksel temas sağlanmasına olanak tanıyacaktır. Metal tabakasını biriktirmek için tercihen iki kaynağı olan bir biriktirme odası kullanılır.Elektrotlar, iki nanometre krom ve ardından altı nanometre altın biriktirilerek oluşturulur. Vakum bozulmadan, hazne içine yerleştirilmiş bir kuvars kristal mikroterazi, biriktirme sırasında filmlerin kalınlığını ölçmek için kullanılabilir. Artık iyi havalandırılan bir alanda kendi kendine düzenlenen tek tabakayı hazırlamaya başlayabiliriz; fırını önceden 75 °C'ye ısıtın. 250 mililitrelik bir cam behere 20 mililitre toluen içerisine bir mililitre peg seline ekleyerek hazırlama çözeltisini hazırlayın.Pipetle beş ila 10 kez yukarı-aşağı çekerek iyice karıştırın ve ardından pipetle 30 saniye boyunca karıştırmaya devam edin. Desen örneklerini, desenli yüzeyleri yukarı bakacak şekilde, çözeltinin içinde tamamen kaldıklarından ve beher tabanına eşit aralıklarla yerleştirdiklerinden emin olarak behere yerleştirin. Beheri fırına yerleştirin ve SAM oluşurken 18 ila 21 saat boyunca pişirin.22 x 50 milimetrelik bir cam lam üzerine önce bir nanometre krom, ardından dört nanometre altın çöktürerek karşıt elektrodu hazırlayın. Karşıt elektrot, açık gri veya pembe tonlarında, neredeyse şeffaf olmalıdır. Temiz tutmak için karşıt elektrodu, kaplamalı yüzeyi yukarı bakacak şekilde bir Petri kabında saklayın.Fırında 18 ila 21 saat beklettikten sonra, beheri fırından çıkarın. Toluen buharlaşmış olmalı ve desen örnekleri viskoz bir peg cline kalıntısı içinde kalmalıdır. Behere 20 milliliters toluen ekleyin ve örnekleri bir ila iki dakika boyunca bekletin.Numuneleri beherin içinden çıkarın ve önce toluen, ardından izopropanol ile durulayın ve son olarak nitrojen ile kurutun. Bu aşamada numuneler temiz görünmeli ve SAM tabakası çıplak gözle görülmemelidir. Bu şekilde hazırlanan SAM'ler, serin ve kuru koşullarda saklandığında iki güne kadar kullanılabilir.Başarısız SAM oluşumu, yüzeyde bulanık veya düzensiz renkli bir kalıntı kaplamasıyla sonuçlanır. SAM'ler hazırlandıktan sonra, tübülinin mikrotübüllere polimerizasyonuna başlayabiliriz. İşleme, işaretlenmemiş tübülin ve r-domine tübülini çözerek başlayın ve parlak mikrotübüller elde etmek için bunları derhal iki birim işaretlenmemişe bir birim işaretli oranında birleştirin.Pipetle birkaç kez yukarı-aşağı çekerek iyice karıştırın. Ardından, tubulini 37 °C sıcaklıktaki bir su banyosunda 20 ila 40 dakika boyunca polimerize edin. 20 µM Taxol'ü pipee tamponu ile karıştırarak bir pipes Taxol tamponu hazırlayın.Pipetle birkaç kez yukarı aşağı çekerek ve vorteksleyerek iyice karıştırın, ardından tüpü 37 °C'ye ısıtılmış benmariye yerleştirin. Polimerizasyon sonrası, mikrotübülleri ılık Taxol tamponu ile seyreltin ve ışıktan koruyun. Mikrotübül polimerizasyonunun başarılı olduğunu ve mikrotübüllerin birkaç dakikalık floresan eksitasyon altında stabil kaldığını doğrulayın.Tübülinin mikrotübüllere polimerizasyonu tamamlandıktan sonra, hazırlanan mikrotübülleri bir oksijen yakalayıcı karışım ile görüntüleyin. Şimdi, elektroforez ile MTS desenlendirmeye başlayalım. Başlamak için, çift taraflı bandı bir lam üzerine yerleştirip bir jilet yardımıyla keserek ince şeritler haline getirin ve desenli Sam kaplı örneğin üzerine, elektrot şeritlerin arasında kalacak ve bağlantı yolu banda dik yönde ilerleyecek şekilde iki şerit çift taraflı bant yerleştirin.Karşıt elektrodu, numunenin kenarı karşıt elektrotu yaklaşık üç milimetre kadar aşacak şekilde, metal tarafı banda değecek biçimde çift taraflı bandın üzerine yerleştirin. İzolasyonlu bakır mıknatıs telinden birkaç adet 15 santimetrelik parça kesin ve her iki uçtan bir santimetrelik izolasyonu soyun. Karşıt elektrotla elektriksel temas kurmamaya dikkat ederek, substratın açıkta kalan altın alanına bir tel sabitlemek için küçük bir damla gümüş boya kullanın.Şimdi, karşıt elektroda ikinci bir teli tutturmak için gümüş boya kullanın. Gümüş boya ile tutturulan elektrot telleri, bant yardımıyla numunelere daha sıkı bir şekilde sabitlenebilir. Ardından, bir pipet kullanarak istenen dilüsyondaki mikrotübülleri ekleyin, 20x büyütmede görüntüleyin ve voltaj uygulamadan önce silikon gofret üzerindeki deseni belirleyin.Akış odasının derinliği nedeniyle, akış odasının üst yüzeyini görüntülemek için uzun çalışma mesafeli objektifler gerekebilir. Örnek yüzeyi ile akış odasının üst yüzeyi arasındaki mesafe, bandın kalınlığı ile belirlenir ve yaklaşık 60 ila 100 mikrometre civarında olmalıdır. Bir volta kadar voltaj uygulayın ve mikrotübüllerin göçünü gözlemleyin.Mikrotübüllerin tersinir şekilde yakalanması isteniyorsa, yanal kaymayı önlemek için akış odasını oje ile mühürleyin ve yaklaşık 0.5 volt değerine kadar daha düşük voltajlar kullanın. Mikroskobun dikey odak düzlemi ayarlanarak göç takip edilebilir; uygulanan voltajlar yaklaşık 0.9 ile 1.2 volt arasındayken mikrotübüller elektrot yüzeylerinde lokalize olur.Daha yüksek voltaj, göçü hızlandıracak ve adezyonu güçlendirecektir, ancak aşırı voltaj elektrolize neden olacak ve depolimerizasyonu tetikleyecektir. Mikrotübüller, SAM kaplamanın mikro elektrotlar üzerinde mikrotübül absorbsiyonunu önlemesi nedeniyle, MT desenleme için SAM kaplı mikro elektrotların nasıl hazırlanacağını size göstermiş olduk. Bu prosedür, mikrotübüllerin tersinir desenlemesi için de kullanılabilir.Ayrıca, bu süreç sadece mikrotübüllerle sınırlı değildir, genel olarak biyomoleküllerin desenlenmesi için de kullanılabilir. İşte böyle. İzlediğiniz için teşekkürler, deneylerinizde başarılar dileriz.

antifouling-self-assembled-monolayers-on-microelectrodes-for

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Sigara kirlenme PEG silan tek tabaka, indirgeyici bir potansiyel uygulama cam üzerine ayrı ayrı adreslenebilir İTO elektrotlar desorbed oldu. Elektrokimyasal elektrot desen yakından karşılık gelen cep telefonu modelleri ile, hücre adezyon, mekansal olarak tanımlanan bir moda yer alması için izin İTO Mikroelektronlar PEG-silan tabaka sıyırma.

Optik Şeffaf indiyum kalay oksit Elektrotlar Desenlendirme Hücreler

Uzun zincirli altın Alkan tiyoller oluşan Kendinden monte mono tabakaları (SAMs), protein desen ve hücre hapsi oluşumu için iyi tanımlanmış substratları sağlar. Microcontact baskı ile dolgu takip polidimetilsiloksan (PDMS) damga kullanarak hexadecanethiol glikol-sonlandırılır Alkan tiyol monomer damgalı hexadecanethiol bölgede sadece protein ve hücreler adsorbe bir desen üretir.

Protein ve hücre Etrafının İki Boyutlu Desenli Yüzeyler Oluşturma

Tek tabaka korunan kümeleri (MPCs) olarak bilinen Alkanethiolate stabilize altın kolloidler, sentezlenmiş karakterize ve adsorpsiyon gibi basit redoks protein protein tek tabaka elektrokimya için bir arayüz olarak ince filmlerin içerisine...

Monolayer sentezi, Montaj ve Karakterizasyonu Protein Monolayer Elektrokimya Korumalı Altın Nanopartikül Filmler

Bu protokol, SiO 2 hücre modelleme için bir mikroimalat uyumlu bir yöntemi tarif etmektedir. Önceden tanımlanmış bir parylene C dizayn photolithographically SiO 2 gofret yazdırılır. Serum (veya başka bir etkinleştirme solüsyonu) ile inkübasyondan sonra hücreler için özel olarak uygun (ve uygun göre gelişir) SiO 2 bölgeleri ile püskürtüldü olmak iken esas parylene,-C,.

Photolithographically Tanımlı Parylene-C hücre Desenlendirme: SiO<sub&gt; 2</sub&gt; Yüzeyleri

Tek bir nöron mikroakışkan arraying ve biyomalzeme kaplamaların içinde-çip plazma desenlendirme için su maskeleme için protokoller anlatılmıştır. Yüksek birbirine eş hücre kültürleri en az girişler kullanılarak hazırlanabilir.

Tek Hücre Hassas Nevronik Co-kültürler hazırlanması

Desteklenen ikili lipid tabakalarıdır ve doğal zar parçacıkları hücre zarlarının özelliklerini yaklaşık ve analitik çeşitli stratejiler dahil edilmesi uygun sistemlerdir. Burada destekli lipid iki katmanlı kaplı SiO 2 boncuklar, fosfolipid vezikülleri ya da doğal zar parçacıklarının oluşan mikrodizileri hazırlanması için bir yöntemi göstermektedir.

Bir Çekçek tabanlı Meclisi Yöntemi ile Biomembrane Mikroarray&#39;ler oluşumu

Çok çeşitli tek molekülleri kovalent olarak bir AFM ucuna bağlamak için bir protokol sunulmuştur. Bu moleküllerin katı mesnetler ve biyo-arayüzler üzerindeki yapışma kuvvetini ve serbest enerjisini belirlemek için prosedürler ve örnekler verilmiştir.

Atomik Kuvvet Spektroskopi Tek Molekül Yapışma incelenmesi

Arası hücresel iletişim içinde ve hücre dışında çeşitli fizyolojik aktiviteleri kontrol edilmesi için çok önemlidir. Bu kağıt tek hücre salgılarının uzay-zamansal yapısını ölçmek için bir protokol tanımlamaktadır. Bunu başarmak için, bir multidisipliner bir yaklaşım canlı hücre görüntüleme ile algılama etiket içermeyen nanoplasmonic entegre olan kullanılır.

Tek Hücre Salgıları uzay-zamansal Görüntüleme için bir etiket içermeyen Tekniği

Bu rapor, biyolojik araştırmalar için mikroakışkan kanalları hücreler ve substratlarla doldurmak için düşük basınçlı vakum kullanan basit, uygulaması kolay bir tekniği açıklamaktadır.

Desenlendirme Proteinlerin ve Hücreleri Çok Yönlü Yöntemi

Biyoilham iskelesi, mekanik olarak sağlam ve elektriksel iletken hidrojeller kullanılarak yumuşak bir fotolitografi tekniği ile imal edilir. Mikro desenli hidrojeller yönlü kardiyomiyosit hücre hizalama sağlar, aktüasyon özel bir yönde sonuçlanan. Esnek mikroelektrotlar da kendi kendini harekete geçiren bir kardiyak doku için elektrik kontrol edilebilirlik getirmek için iskele entegre edilmiştir.

Anonim Mikroelektrotlu Bioinspired Yumuşak Robot

Bakteri ve kolloidler gibi bir sıvıda asılı mikro boyutlu nesneleri polidimetilsiloksisan substratında öngörülen dizilere desenleştirmek için mikroakışkan bir platformda kapilarite destekli montaj kullanan bir teknoloji sunuyoruz.

Sıralı Capillarity destekli Montaj yoluyla Mikroorganizmaların ve Mikropartiküllerin Deseni

Öğrenin, mikroelektrotlar üzerinde PEG-SAM oluşturarak biyomoleküllerin elektroforezle desenlendirilmesini. Bu yöntem biyokirlenmeyi önler ve mikrotübüllerin hassas konumlandırılmasını sağlar.

Desenlendirme Biyomoleküller Mikroelektronlar Kendinden monte mono tabakaları Zehirli

Daha fazla video keşfet