February 25th, 2007
Benim adım Voia Friedman. Princeton Üniversitesi'nde yardımcı araştırmacıyım. Ve bugün size transenfekte etmek için geliştirdiğim birkaç protokolden bahsedeceğim, başlangıçta izole etmek, enfekte sineklerin sarmalından geri dönmek ve daha sonra helikopter beslemesini etkilenmemiş uçuşlara enjekte etmeye yardımcı olmak.
Yani temelde, bu onu temel ihtiyaçlar için izole etmek için çok basit bir protokoldür. Ve bu cihazı kullanacaksınız, mepo'dan bir E.So üzerine çıkan bir filtre içeren bu filtreyi temel olarak koymak için ihtiyacınız olan yaklaşık yüz sinekten başlıyoruz. Sinekleri anize ediyorsunuz, onları filtre cihazına koyuyorsunuz, sadece bir huni kullanabiliyorsunuz ve bu da diğer uyumumuzu bu cihaza çok kolay bir şekilde ekleyecek ve% 70 etanol ile yıkayacak.
Sadece onu alıyorsunuz, geleceği alıyorsunuz, etanolü atabilirsiniz ve son yıkamanızı üç kez yaptıktan sonra molekül suyuyla yapıyorsunuz çünkü bakterilerin etanol izleriyle birlikte olmasını istemezsiniz. Ve sonra yeni bir silah kapısına gidiyorsunuz ve, ve sonra iki dakika boyunca mikro, gerçek bir mikroya dönüyorsunuz Ve daha sonra bunu nasıl enjekte edebileceğinize geçiyorsunuz. Sadece etkilenmeyen sinekleri besler.
Yani temelde bir çift çubuklu bant alın ve genellikle bu çift çubuklu bantların iki tarafı vardır, bir tarafı diğerinden daha fazla çıkartmadır. Bu yüzden çıkartma tarafını yukarı bırakın çünkü yapıştıracağınız ve üzerine uçan taraf budur. Ve temel olarak, gaz aparatı, eğer üzerinde bu ışık varsa, gaz akışı olmayacak ve sinekler kaydırağın üstündeyse uyandıracaksınız.
Böylece sadece akışı yönlendirebilirsiniz, küçük bir başlık yapabilir, bant kullanarak küçük bir oda yapabilirsiniz. Sonra gazı sineklerin üzerine yönlendirirsiniz. Sonra kendinizi, bu ışığı bantla buraya koyarsınız ve siz, sinekleriniz olur.
Sinekleri bandın üst kısmına, hepsi aynı yönde olacak şekilde yapıştırın ve başlarını iğneyi getireceğiniz yöne doğru koyun. Çünkü o zaman kanadın hemen üzerinden geçebilirsin, uçtukları için uçmak istemediğinden emin olursun. İşlem sırasında uyandılarsa, gitmelerini istemeyin.
Bu yüzden biraz uç aldığınızdan ve sineğin kuyruğundaki kanatlarına baskı uyguladığınızdan emin olun. Ve eğer kanatları hasar görürse sorun değil. Ve kurtulduğunuzda, sinekleri iğneye aldığınızda, büyük olasılıkla kanatlarını zaten kaybedecekler, böylece hayatta kalacaklar.
Bu yararlı olabilir çünkü sinekleri kaybetmeyeceksiniz, bu yüzden iğnenin arkası için mikrometreye bir mineral yağ koyar, sonra iğne enjeksiyonu polar ve sonra, malzemeyi iğnenin ucuna getirmek için basıncı ayarlayabilirsiniz. Ben, 10 ila 15 nanolitre arasında bir yere enjekte etmek için yaptım, ama tutarlı olduğum sürece. Tamam, bu deneyin önemli bir detayı da şu: Sinek enjekte edildikten sonra iğneyi gördüğünüzde karnın üst kısmından olabildiğince uzağa gelmesi gerekiyor.
Çünkü burada, temel olarak iğne içeri girdiğinde, a, a, a, a, yukarı ve aşağı gitmek için daha büyük bir alanınız var. Ve temel olarak, kütiküle yakınsa, uçuş sırasında hayati organlara nüfuz etme olasılıkları daha düşüktür. Siz, bağırsaklarınızda bir delik açmanız pek olası değildir, örneğin, ameliyatı gerçekleştirdiğiniz uçuşu öldürecekse.
Benim adım Voia Friedman. Princeton Üniversitesi'nde Eric Hels'in laboratuvarında yardımcı araştırmacıyım. Ve bugün size az önce gördüğünüz bu protokolden, gösteriden bahsetmek istiyorum.
Bu protokol yapıldı çünkü UBA'nın dokuları geçebildiğini kanıtlamak istedik. Yani UBA, yeryüzündeki en başarılı hücre içi paralardan biridir. Böceklerin% 20 ila 70'ini ve birçok partikülü enfekte eder.
Ve ayrıca, insan hastalıkları açısından çok önemlidir, çünkü aynı zamanda nehir körlüğü veya s ve ssis gibi hastalıkları ileten nematodları da enfekte eder. Ve böylece, ve CCA, bu solucanlarda bizim zorunlu endo'muzdur. Ve CCA'yı aynı zamanda sivrisinek ve Danny ve bu ve sıtma ve dang humması gibi sivrisinekler tarafından parazitik hastalıklar vericisini kontrol etmek için bir araç olarak kullanmaya çok ama çok büyük bir ilgi var.
Yani bu, bu, bu protokol temel olarak bir sineğin karın boşluğuna CCA girdiğinde, dokuları geçip mikroba ulaşabileceğini göstermek için geliştirildi. Yani temel olarak burada görebileceğiniz şey, drosophila yumurtalığının oph'u ve yaprağında bir kez bulunduğunda geri dönebilir, pembe bir peronial geçebilir. O yumurtalık etrafında.
Ve sonra bir kas tabakasını geçerler. Ve aslında yumurtalığın içine ilk girdikleri yerlerden biri de somatik kök hücre görüntüsüdür. Ve sonra germ hattına ulaşabilirler.
Ve bu bakteri, mitokondrinin bulaştığı gibi, bulaşan anne yoluyla, yumurtada bulunan ana cyop bitkileri aracılığıyla bulaşır. Bu yüzden tabii ki germ hattında bulunmaları gerekiyor. İşte bu yüzden bu protokol geliştirildi.
Ve bu protokol, geleneksel olarak insanların wbaa'yı trans olarak enfekte etmeye çalışacakları şekilde çok faydalı olabilir, temelde wbaa'yı alıp yeni bir böcek türü tanıtın. Bu, embriyonun içine mikro enjeksiyonlar yaparak olacaktır. Ancak bunlar çok daha karmaşıktır.
Ve temel olarak burada sadece biyolojiden faydalanıyoruz çünkü dokuları çaprazlayabiliyorlar ve kök hücre dokularına geçebiliyorlar, germ hattına geçebiliyorlar. Bu, UBA'yı enfekte olmuş belirli böcek türlerinden almayı kolaylaştırır ve bunlar enfekte olmayan türlere bulaşabilir. Prob: Sanırım enjeksiyonun kendisi.
Temel olarak, sineği olabildiğince iyi hareket ettirmek için dikkatli olmanız gerekir. Çift taraflı yapışkan bant kullanıyoruz ve iğneyi temel olarak sineğe mümkün olduğunca yakın, paralel olarak nüfuz etmeniz gerekiyor, böylece derinlere inmiyorsunuz. Ve ameliyatı gerçekleştirdikten sonra sineği öldürme olasılığımız daha düşük.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Bu makale, enfekte olmuş sineklere spesifik bir ajan izole etmek ve enjekte etmek için geliştirilen protokolleri sunar. Açıklanan yöntemler basittir ve etkili izolasyon için özel bir cihaz kullanır.
This protocol enables tissue-crossing bacterial transfer in Drosophila, supporting mechanistic de-risking in target validation for intracellular symbiont-based interventions. By demonstrating germ-line transmission via somatic stem cell colonization, it provides a predictive model for evaluating Wolbachia-driven pathogen blocking strategies. The approach reduces reliance on complex embryonic microinjection, improving scalability in preclinical screening workflows.
The method fits within early discovery to preclinical transition, enabling symbiont characterization prior to vector-based delivery system development.