April 21st, 2010
Fare Enine aort daralma (TAC), kalp hipertrofisi ve kalp yetmezliği gelişme yatan mekanizmaları incelemek için yaygın olarak kullanılan bir deneysel model. Burada, prosedürler, farelerde kalp hipertrofisi tekrarlanabilir bir derece oluşturmak için aort sıkmak için açıklanmaktadır.
Bu prosedür, bir farenin uyuşturulması, aseptik cerrahi için hazırlanması ve bir ısıtma yastığının üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirilmesiyle başlar. Endotrakeal entübasyon, daha sonra bir kemirgen ventilatörüne bağlanan PE 90 tüpü kullanılarak gerçekleştirilir. Daha sonra, ikinci kaburgaya kısmi bir torakotomi yapılır ve sternum geri çekilir.
Transvers aort tanımlanır ve daha sonra innominat ve sol karotis arterler arasında bağlanır. Göğüs kafesi kapatılır, ardından sürekli bir dikiş şekli ile cilt takip edilir. Son olarak, endotrakeal tüp çıkarılır ve farenin iyileşmesine izin verilir.
Merhaba, ben Baylor Tıp Fakültesi Moleküler Fizyoloji ve Biyofizik Bölümü'nde Dr.Zander Wars'ın laboratuvarından Angela Dal Meda. Bugün size farelerde transvers aort daralması için prosedür göstereceğiz. Laboratuvarımızda bu yöntemi kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliği gelişiminin altında yatan mekanizmaları incelemek için kullanıyoruz.
Öyleyse başlayalım. Transvers aort daralmasına veya vergi ameliyatına başlamadan önce, ameliyat alanını %75 izopropil alkol ile dezenfekte edin. Isıtma yastığını açın ve doğru sıcaklığa ayarlayın.
Önerdiğimiz sistem, 37 artı veya eksi bir santigrat derecede tutulan bir ısı terapisi pedine bağlı bir oyun sirkülasyon suyu pompasıdır. Ameliyattan önce cerrahi aletleri sıcak boncuk sterilizatöründe sterilize edin. Vergi cerrahisi işlemi için aşağıdaki cerrahi aletlere ihtiyaç duyulmaktadır.
Bir çift künt makas, 45 derece açılı forseps bulmak için iki kaba kavisli forseps, Bir çift açılı yaylı makas, bir göğüs ekartörü ve bir iğne tutucu. Kanama durumunda pamuk aplikatörleri de el altında bulundurulmalıdır. Ameliyat alanı hazırlandıktan sonra farenin entübasyonuna geçebiliriz.
Entübasyona hazırlanırken, fare bir indüksiyon odasında uyuşturulur ve kürkü boyun çizgisinden orta göğüs hizasına kadar tıraş etmek için saç kesme makineleri kullanılır. Fareyi ısıtma yastığının üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Kalp atış hızında hızlı bir düşüşü ve olası ani ölümü önlemek için ameliyat sırasında normal vücut ısısını korumak önemlidir.
Farenin tamamen uyuşturulduğunu doğrulamak için fare tırnak yatağına baskı uygulayın. Boynunu uzatmak için hayvanın ön dişlerinin üzerine bir lastik bant yerleştirin Bir elinizle kavisli forseps kullanarak, diğer elinizle dili nazikçe yana doğru hareket ettirin. PE 90 tüpünü trakeaya yerleştirin.
Ardından, endotrakeal tüpü Harvard hacimli döngülü kemirgen ventilatörüne bağlayın. Ventilatör, farenin vücut ağırlığına bağlı olarak dakikada 125 ila 150 nefes ve 0,1 ila 0,3 mililitre tidal hacimde döngü yapmalı, cerrahi alanın içindeki cildi Betadine solüsyonu ve ardından% 70 alkol ile dezenfekte etmelidir. Ameliyat sırasında cerrahi alanın kirlenmesini önlemek için bu prosedürü üç kez tekrarlayın: farenin üzerine steril bir örtü yerleştirin, sadece ameliyat alanını açıkta bırakın.
Artık bu cerrahi işlem sırasında transvers aortun ligasyonunu yapmaya hazırız. Anestezi,% 1.5 ila% 2 flor ve dakikada 0.5 ila bir litre,% 100 oksijen ile tutulur. Fare tırnak yatağına baskı uygulayarak doğru anestezi seviyesini doğrulayın.
Belirteç refleksinin olmadığını onaylamak için. Ameliyata kısmi torakotomi yaparak başlayın. Sternumu kraniyal uçtan başlayarak ikinci kaburga seviyesine kadar kesin.
Cerrahi bir mikroskop kullanarak, bir göğüs ekartörü kullanarak sternumu geri çekin. Ardından, timus ve yağ dokusunu aort kemerinden nazikçe ayırmak için ince uçlu 45 derece açılı forseps kullanın. Transvers aortu belirledikten sonra, bir mezhep ve sol karotis arterler arasına küçük bir parça 6.0 ipek sütür yerleştirin.
Transvers aortun etrafına iki gevşek düğüm atın ve 27 buçuk gauge künt iğneden küçük bir parça yerleştirin. Transfer aortuna paraleldir. İlk düğümü hızlı bir şekilde iğneye, ardından ikinci düğümü bağlayın ve ardından 0,4 milimetre çapında bir daralma elde etmek için iğneyi hemen çıkarın.
Transvers aort bağlandıktan sonra, göğüs ekartörünü çıkarın ve ventilatörün dışarı akışını iki saniye boyunca sıkıştırın. Akciğerleri dikkatli bir şekilde yeniden şişirmek için, kesintili bir dikiş paterni olan 6.0 proline sütür kullanarak göğüs kafesini kapatın. Son olarak, sürekli dikiş desenine sahip 6.0 prolin sütür kullanarak cildi kapatın.
Postoperatif analjezi için. Fare intraperitonealine buprenorfin enjekte edin. Ameliyattan sonra dehidratasyon belirtileri varsa, intraperitoneal 0.3 ila bir mililitre steril salin verilir.
Anesteziyi kademeli olarak kapalı konuma indirin. Spontan solunum belirtileri ortaya çıktığında, endotrakeal tüpü çıkarın, ardından fareyi yüzüstü konuma getirin ve bir ısıtma yastığı üzerinde iyileşmesine izin verin. Transvers aort daralmasından bir hafta sonra, transvers aortun lasyonunun neden olduğu aşırı basınç yükünün derecesini belirlemek için fare yeniden uyuşturulur.
Anestezi ve vücut ısısı daha önce gösterildiği gibi korunur. Boynun sol ve sağ taraflarına 45 derecelik bir açıyla 20 megahertz Doppler probu yerleştirin. Karotis arter akış hızlarını tespit etmek için, doppler sinyallerini görüntülemek ve depolamak için bilgisayar tabanlı bir Doppler sinyal işlemcisi kullanıyoruz.
Deney protokolü için gereken aşırı basınç derecesine bağlı olarak, daha fazla analiz için yalnızca belirli bir aralıkta sol karotis veya lc akış oranı üzerinde sağ karotis veya RC olan fareler dahil edilir. Örneğin, orta derecede bir aşırı basınç yükü, beş ila sekiz arasında bir orana yol açarken, ciddi basınç aşırı yüklenmesine neden olan daha sıkı bir daralma, sekiz ila 10 arasında bir orana yol açar. Bununla birlikte, sahte bir hayvanın yaklaşık bir oranına sahip olması beklenir.
Yabani tip farelerde TAC'yi takiben tipik cerrahi sağkalım yaklaşık %80 ila 90 oranında başarılıdır. Transvers aortun cerrahi ligasyonu, sağ ve sol karotis arter arasında doppler akış hızı oranına veya sahte ameliyatlı farelere kıyasla beş ila 10 arasında lc üzerinden RC'ye yol açacaktır. Aşırı basınç yüklemesi olan farelerin, daralmanın sıkılığına bağlı olarak bir ila iki hafta içinde kardiyak hipertrofi ve altı ila sekiz hafta sonra kardiyak dilatasyon geliştirmesi beklenir.
Farelerde transvers aort daralmasının nasıl gerçekleştirileceğini size az önce gösterdik, ancak bu prosedürü gerçekleştirmek normal vücut ısısını korumak ve kan kaybını en aza indirmek için önemlidir. İşte bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler ve deneylerinizde iyi şanslar.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Bu makale, kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliğini incelemek için kullanılan bir model olan farelerde transvers aort darlığı (TAC) gerçekleştirme prosedürünü açıklar. Yöntem, aort darlığını sağlamak için cerrahi teknikleri içerir ve kontrollü derecede kardiyak hipertrofi ile sonuçlanır.
The transverse aortic constriction (TAC) model in mice provides a reproducible system for studying pressure overload-induced cardiac hypertrophy and heart failure, enabling mechanistic de-risking of therapeutic targets in cardiovascular drug discovery. By establishing a controlled hemodynamic stress that mimics human pathophysiology, TAC supports target validation and phenotypic screening in preclinical pipelines. This model enhances predictive confidence for lead identification and translational biomarker development in heart failure therapeutics.
The TAC model integrates into the cardiovascular discovery continuum from target hypothesis testing through lead identification to preclinical efficacy studies, supporting go/no-go decisions based on hemodynamic and phenotypic outcomes.