Name: Farelerde Enine Aort Konstrüksiyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-04-21T18:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 25 s
Description: Öğrenin farelerde enine aort konstrüksiyonu yöntemini, basınç yüklemesiyle kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliği modellemesi için. Bu cerrahi teknik kardiyovasküler hastalık mekanizmalarını in vivo araştırmada kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

XHTW WM Keck Tıp Araştırma Vakfı Seçkin Genç Bilim İnsanı, ve aynı zamanda NIH / NHLBI hibe R01-HL089598 ve R01-R01HL091947 ve Müsküler Distrofi Birliği hibe # 69.238 tarafından desteklenmektedir. RJvO Fizyolojik Genomik 2008-2010 Amerikan Fizyoloji Derneği&#39;nin Doktora Sonrası Araştırma Bursu almıştır. Bu çalışma aynı zamanda CaMKII Kalp Sinyal Vakfı Leducq Alliance tarafından kısmen destekleniyor.

Bölüm 1: İşletim Alan hazırlanması <ol><li> Faaliyet alanı,% 75 izopropil alkol ile dezenfekte edilir. </li><li> Isıtma yastığı ve doğru sıcaklıkta olduğundan emin olun. Önerilen sistem ° C ± 1 ° C 37 tutulur bir tedavi pad bağlı bir Gaymar dolaşan su pompası Kalp hızı hızlı bir düşüş önlemek için ameliyat sırasında normal vücut ısısını korumak için önemlidir. </li><li> Ameliyat öncesi sıcak bir boncuk sterilizatör cerrahi aletler sterilize edilir. Künt makas, elbette kavisli bir forseps X 2, ince 45 ° açılı forseps X 2, açılı yaylı makas, göğüs retraktörü, ve iğne tutucu: Bu işlem için, aşağıdaki cerrahi aletler gerekecektir </li><li> Pamuk aplikatörler yandan kanama durumunda olmalıdır. </li></ol> Bölüm 2: Hazırlık ve Fare, Entübasyon <ol><li> Fare ile indüksiyon odasında anestezi% 2 izofluran 0.5 -1.0 L / dk% 100 O 2 ile karıştırılır. </li><li> Saç kesme makineleri, kürk yaka orta göğüs seviyesine tıraş için kullanılır. </li><li> Fare, vücut ısısını korumak için, bir ısıtma yastığı üzerinde bir yatar pozisyonda yerleştirilir. </li><li> Bir lastik bant boyun uzatmak için hayvan s ön dişlerin üzerine yerleştirilir. Bir yandan kavisli bir forseps kullanma, dil hafifçe yan manipüle. Öte yandan, endotrakeal entübasyon, PE 90 boru kullanılarak yapılır. Endotrakeal tüp daha sonra Harvard 125-150 nefes / dakika hacim döngüsü kemirgen ventilatör bisiklet ve 0.1-0.3ml tidal volüm bağlı. 1.0 L / dk% 100 O 2 - cerrahi işlem sırasında, anestezi 0.5 ile% 1.5-2 izofluran tutulur. Doğru anestezi düzeyi, fare tırnak yatağı (toe-tutam refleks) basınç uygulayarak tarafından doğrulanmadı. </li><li> Cerrahi alanında,% 70 alkol ile takip betadin çözüm ile dezenfekte edilir. Bu işlem üç kez tekrarlanır. </li><li> Operasyon sırasında cerrahi alanın kirlenmesini önlemek için, steril bir drape, sadece faaliyet alanı maruz bırakarak fare üzerine yerleştirilir. </li><li> Steril eldiven, her bir fare için kullanılır. </li></ol> Bölüm 3: Enine Aort ligasyon <ol><li> Ikinci kaburga Kısmi torakotomi cerrahi mikroskop altında yapılan ve sternum göğüs retraktörü kullanarak geri çekilir. </li><li> Güzel ucu 45 ° açılı forseps yavaşça aort kemer timus ve yağ dokusu ayırmak için kullanılır. </li><li> Transvers aort belirlenmesini takiben, 6.0 ipek sütür küçük bir parça innominate ve sol karotis arterler (Şekil 1) arasına yerleştirilir. </li><li> İki gevşek knots transvers aort etrafında bağlı ve küçük bir parça, 27 ½ göstergesi künt iğne transvers aort paralel olarak yerleştirilir. Ilk knot hızla, iğne karşı bağlanmış ardından, ikinci ve iğne çapı 0.4mm bir daralma verim için derhal kaldırılır. Sahte kontrol farelerde, tüm prosedür aort ligasyonu dışında aynıdır. </li><li> Göğüs retraktörü çıkarılır ve akciğerlere yeniden şişirmek için 2 saniye için ventilatör sıkışmak off çıkış. </li><li> Göğüs kafesi, dikişler ile 6.0 prolen dikiş kullanarak kapatılır. </li><li> Cilt sürekli bir dikiş deseni ile 6.0 prolen dikiş kullanılarak kapatılır. </li></ol> Bölüm 4: Post-operatif Kurtarma <ol><li> Post-operatif analjezi için, fare buprenorfin (0.1 mg / kg) intraperitoneal olarak enjekte edilir. Ameliyattan sonra dehidratasyon belirtileri varsa, steril serum fizyolojik intraperitoneal olarak verilir. </li><li> Anestezi kapalı konuma yavaş yavaş indirdi ve spontan solunum belirtileri ortaya çıktığında endotrakeal tüp çıkarılır. </li><li> Fare yüzükoyun pozisyonda taşınır ve ısıtma yastığı kurtarmak için izin verilir. </li></ol> Bölüm 5: Enine Aort Başarılı ligasyon Onay <ol><li> TAC Bir hafta sonra, fare transvers aort ligasyonu ile indüklenen basınç yüklenmesinin derecesini belirlemek için yeniden anestezi. Bakımı, 37 ° 1.0 L / dk% 100 O 2 ve vücut ısısı ° C ± 1 ° C - Yukarıda açıklandığı gibi, anestezi 0.5 ile% 1.5-2 izofluran tutulur </li><li> 20 MHz Doppler probu boynun sağ ve sol tarafta akım hızları tespit etmek için 45 derecelik bir açıyla yerleştirilir. Bir bilgisayar tabanlı Doppler sinyal işlemcisi (İndus Instruments, Houston, Teksas), Doppler sinyalleri görüntüleyebilir ve saklamak için kullanılan 5 </li><li> Sadece sağ karotis (RC) / sol karotis (LC), belirli bir aralık içinde akış oranı ile farelerde deneysel protokol için gerekli basınç yüklenmesinin derecesine bağlı olarak, daha fazla analiz için dahildir. Şiddetli basınç yüklenmesi sonucu sıkı bir daralma t açar Örneğin, basınç aşırı bir derecede, 5-8 'lik bir oran ise yol açar8-10 oa oranı (Şekil 5.3A). Sahte hayvan (işletilen ancak bağlandı değil), ancak, ~ 1 (Şekil 5.3B) bir oran olması beklenir. </li></ol> 6: Temsilcilik Sonuçları Wild-tip farelerde TAC aşağıdaki tipik bir cerrahi sağkalım% 80-90. Transvers aort Başarılı cerrahi ligasyon 5-10 sağ ve sol karotis arter arasında bir Doppler akış hızı oranı (RC / LC) (Şekil 1) yol açacaktır. Sahte çalışan fareler (Şekil 2A) ile karşılaştırıldığında, basınç yükü olan fareler, daralma gerginlik (Şekil 2B) bağlı olarak, 6-8 hafta sonra 1-2 hafta ve kardiyak dilatasyon içinde kalp hipertrofisi geliştirmek bekleniyor. TAC sonraki ilk ay boyunca mortalite, genetiği değiştirilmiş farelerde farklı sağkalım oranları gösterebilir rağmen, wild-tip farelerde genellikle düşük (&lt;% 20). 6,7 <img src="/files/ftp_upload/1729/1729fig1tmb.jpg" alt="Şekil 1" border="0" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. Doppler Hız Ölçüm kullanarak Enine Aort ligasyon teyidi. Hakkının Temsilcisi Doppler hız sinyalleri (RC) ve sol karotis (LC) arterler 6 gün post-TAC. Bu kayıtlar ~ 6.8 RC / LC akış oranı ile başarılı bir ligasyonu göstermektedir. Lütfen Şekil 1'de bir büyük halini görmek için <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1729/1729fig1.jpg">buraya tıklayınız</a> . <img src="/files/ftp_upload/1729/1729fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2. TAC ardından Temsilcisi Tüm Kalp görüntüler. A Şam çalışan vahşi tip fare kalp B. Vahşi tip fare kalp 16 hafta post-TAC. Her satır = 1mm.

<ol><li>Rockman, H. A., Ross, R. S., Harris, A. N., Knowlton, K. U., Steinhelper, M. E., Field, L. J., Ross, J. Jr, Chein, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, 8277-8281 (1991).</li>
<li>Heineke, J., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+cardiac+hypertrophy+by+intracellular+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Mol.+Cell.+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of cardiac hypertrophy by intracellular signaling pathways.</a> Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 7, 589-600 (2006).</li>
<li>Hartley, C. J., Reddy, A. K., Madala, S., Michael, L. H., Entman, M. L., Taffett, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+estimation+of+reduced+coronary+flow+reserve+in+mice+with+pressure+overload+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy.</a> Ultrasound Med. Biol. 34, 892-901 (2008).</li>
<li>Reddy, A. K., Taffett, G. E., Li, Y. -H., Lim, S. -W., Pham, T. T., Pocius, J. S., Entman, M. L., Michael, L. H., Hartley, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+signal+processing+for+use+in+mice%3A+applications%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Doppler signal processing for use in mice: applications.</a> IEEE Trans. Biomed. Eng. 52, 1771-1783 (2005).</li>
<li>Li, Y. -H., Reddy, A. K., Ochoa, L. N., Pham, T. T., Hartley, C. J., Micheal, L. H., Entman, M. L., Taffett, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+age+on+peripheral+vascular+response+to+transverse+aortic+banding+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Effect of age on peripheral vascular response to transverse aortic banding in mice.</a> J. Gerontol. 58A, 895-899 (2003).</li>
<li>Bourajjaj, M., Armand, A. S., Martins, daC. osta, Weijts, P. A., Nagel, B. V. ander, Heeneman, R., Wehrens, S., Windt, X. H. D. e, J, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NFATc2+is+a+necessary+mediator+of+calcineurin-dependent+cardiac+hypertrophy+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">NFATc2 is a necessary mediator of calcineurin-dependent cardiac hypertrophy and heart failure.</a> J. Biol. Chem. 28, 22295-22303 (2008).</li>
<li>Oort, R. J. van, Respress, J. L., Li, N., Reynolds, C., Almeida, A. C. D. e, Skapura, D. G., Windt, L. J. D. e, Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+development+of+pressure+overload+induced+cardiac+hypertrophy+and+dysfunction+in+an+RyR2-R176Q+knockin+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Accelerated development of pressure overload induced cardiac hypertrophy and dysfunction in an RyR2-R176Q knockin mouse model.</a> Hypertension. 55, (2010).</li>
<li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+cardiac+surgery%3A+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).</li>
</ol>

Insan aort stenozu taklit TAC, farelerde kalp hipertrofisi ve kalp yetmezliği ikna etmek için yaygın bir yöntem. Aort daralma için alternatif siteler artan ve abdominal aorta içerir. Artan aort daralma, aşırı sol ventrikül (LV) ve daha hızlı aşırı sağlar. Buna karşılık, abdominal aort daralma olası tazminat aracı olarak dolaşıma bozulmamış büyük bir kısmını bırakır. Soruşturma için daha uygun bir zamana bağımlı biçimde yeterli AG aşırı sağlar Bu nedenle 8, TAC sıklıkla tercih edilen bir model . Bu yordamı uyg...

<table><tbody><tr><td>Gaymar T/pompa</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Model TP-500</td><td>Sirkülasyonlu su pompası</td></tr><tr><td>Sıcaklık terapi pedleri</td><td>Harvard Apparatus</td><td>60-3414</td><td></td></tr><tr><td>Sıcak boncuk sterilizatörü</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Küt uçlu makas</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5980</td><td></td></tr><tr><td>Açılı yaylı makas</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5668</td><td></td></tr><tr><td>Göğüs ekartörü</td><td>Fine Science Tools</td><td>17002-02</td><td></td></tr><tr><td>Kaba eğri pens</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5138</td><td></td></tr><tr><td>Dumont hassas 45&amp;#x00B0; açılı pens</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-25</td><td></td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>Elektrikli tıraş makinesi</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td>Fare tüylerini tıraş etmek için</td></tr><tr><td>PE 90 tüp</td><td>BD Biosciences</td><td>427420</td><td>İntubasyon için</td></tr><tr><td>MiniVent (ventilatör)</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Type 845</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-027132</td><td>Medikal malzeme mağazalarından satın alınabilir</td></tr><tr><td>Steril eldivenler</td><td>Mckesson</td><td>20-1565</td><td></td></tr><tr><td>Stereo mikroskop</td><td>Unico</td><td>ZM186</td><td></td></tr><tr><td>6-0 ipek sütur</td><td>Fine Science Tools</td><td>18020-60</td><td></td></tr><tr><td>27 &amp;frac12; gauge iğne</td><td>BD Biosciences</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>6-0 prolene sütur</td><td>Mckesson</td><td>3286</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin</td><td>Kurumsal Hayvan Tesisi</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde enine aort konstrüksiyon

Transverse Aortic Constriction in Mice

Fare Enine aort daralma (TAC) basınç aşırı bağlı kalp hipertrofisi ve kalp yetmezliği için yaygın olarak kullanılan bir deneysel model.<sup&gt; 1</sup&gt; TAC başlangıçta genellikle geçici bir kardiyak kontraktilite geliştirme ile ilişkili kalp, telafi hipertrofisine yol açar. Ancak zaman içinde, kronik hemodinamik aşırı tepki kardiyak dilatasyon ve kalp yetmezliği sonucu, uyumsuz olur.<sup&gt; 2</sup&gt; Fare TAC modeli ilk Rockman tarafından doğrulanmış oldu<em&gt; Ve ark.</em&gt;.<sup&gt; 1</sup&gt; Ve o zamandan beri yoğun insan kalp ve damar hastalıkları, kalp hipertrofik yanıt ve kalp yetmezliği gelişme ilgili temel sinyalizasyon süreçleri taklit ve aydınlatmak için değerli bir araç olarak kullanılır olmuştur. TAC, sol ön inen koroner arter (LAD) tam tıkalı kalp yetmezliği, diğer deneysel modeller ile kıyaslandığında, kalp hipertrofisi ve kalp yetmezliği gelişme daha zamanla yavaş yavaş bir daha tekrarlanabilir bir model sunar. Burada, farelerde cerrahi TAC gerçekleştirmek için adım adım prosedürü açıklar. Aort ligasyonu ile üretilen basınç yüklenmesinin düzeyini belirlemek için yüksek frekanslı Doppler probu, sağ ve sol karotis arterlerde kan akım hızları arasındaki oranı ölçmek için kullanılır.<sup&gt; 3, 4</sup&gt; Cerrahi sağkalım oranları% 80-90, bantlama transvers aort farelerde sol ventrikül hipertrofisi ve kalp yetmezliği inducing etkili bir tekniktir.

Fare Enine aort daralma (TAC), kalp hipertrofisi ve kalp yetmezliği gelişme yatan mekanizmaları incelemek için yaygın olarak kullanılan bir deneysel model. Burada, prosedürler, farelerde kalp hipertrofisi tekrarlanabilir bir derece oluşturmak için aort sıkmak için açıklanmaktadır.

Farelerde Enine Aort Konstrüksiyon

Farelerde transvers aortik konstriksiyon (TAC), basınç yüklenmesi kaynaklı kardiyak hipertrofi ve kalp... için yaygın olarak kullanılan deneysel bir modeldir.

Bu prosedür, bir farenin anestezi altına alınması, aseptik cerrahiye hazırlanması ve bir ısıtıcı ped üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirilmesiyle başlar. PE 90 tüp kullanılarak endotrakeal entübasyon gerçekleştirilir ve ardından tüp bir kemirgen ventilatörüne bağlanır. Sonrasında, ikinci kaburgaya kadar parsiyel torakotomi uygulanır ve sternum geri çekilir.Transvers aorta belirlenir ve ardından innominate arter ile sol karotis arter arasından bağlanır. Göğüs kafesi kapatılır ve ardından cilt sürekli dikiş yöntemiyle dikilir. Son olarak, endotrakeal tüp çıkarılır ve farenin iyileşmesine izin verilir.Merhaba, ben Baylor College of Medicine'daki Moleküler Fizyoloji ve Biyofizik Bölümü'nden Dr. Zander Wars'ın laboratuvarından Angela Dal Meda. Bugün size farelerde transvers aort constriction (enine aort daraltma) prosedürünü göstereceğiz. Laboratuvarımızda bu prosedürü, kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliği gelişiminin altında yatan mekanizmaları incelemek için kullanıyoruz.Hadi başlayalım. Transvers aort kısıtlama veya tax cerrahisine başlamadan önce, operasyon alanını %75 izopropil alkol ile dezenfekte edin. Isıtma pedini açın ve uygun sıcaklığa ayarlayın.Önerdiğimiz sistem, 37 ± 1 °C'de tutulan bir ısı terapi pedine bağlı bir oyuncu tipi sirkülasyonlu su pompasıdır. Cerrahi aletleri ameliyat öncesinde sıcak boncuk sterilizatörde sterilize edin. Taksonomik cerrahi prosedür için aşağıdaki cerrahi aletler gereklidir.Bir çift küt uçlu makas, iki adet kaba kavisli forseps veya 45 derece açılı forseps, bir çift açılı yaylı makas, bir göğüs ekartörü ve bir iğne tutucu. Kanama durumunda kullanılmak üzere pamuklu aplikatörler de hazır bulundurulmalıdır. Operasyon alanı hazırlandıktan sonra, farenin entübasyon işlemine geçilebilir.Entübasyon hazırlığı için fare, bir indüksiyon odasında anestezi altına alınır ve boyun çizgisinden göğüs ortasına kadar olan bölgedeki tüyler tüy düzeltici ile tıraş edilir. Fareyi ısıtma pedinin üzerine sırt üstü pozisyonda yerleştirin. Kalp hızında hızlı bir düşüşü ve olası ani ölümü önlemek için cerrahi sırasında normal vücut sıcaklığının korunması önemlidir.Farenin tamamen anestezi altında olduğunu doğrulamak için tırnak yatağına basınç uygulayın. Boynu germek için hayvanın ön dişlerinin üzerinden bir lastik bant yerleştirin. Bir elinizde kavisli pens kullanarak, diğer elinizle dili nazikçe yana doğru hareket ettirin. Trakeaya PE 90 tüp yerleştirin.Ardından, endotrakeal tüpü bir Harvard hacim döngülü kemirgen ventilatörüne bağlayın. Ventilatör, farenin vücut ağırlığına bağlı olarak dakikada 125 ila 150 soluk ve 0,1 ila 0,3 mililitre tidal hacimde çalışmalıdır; cerrahi alan içindeki cildi önce Betadine solüsyonu ardından %70 alkol ile dezenfekte edin. Operasyon sırasında cerrahi alanın kontamine olmasını önlemek için bu işlemi üç kez tekrarlayın, ardından sadece operasyon alanı açıkta kalacak şekilde farenin üzerine steril bir örtü yerleştirin.Bu cerrahi prosedür sırasında transvers aort ligasyonunu gerçekleştirmeye hazırız. Anestezi, dakikada 0,5 ila bir litre %100 oksijen ile %1,5 ila %2 isoflorin ile sürdürülür. Fare tırnak yatağına basınç uygulayarak anestezinin doğru düzeyde olduğunu doğrulayın.Token refleksinin yokluğunu doğrulamak için. Cerrahi işleme parsiyel torakotomi yaparak başlayın. Sternumu kranial uçtan başlayarak ikinci kaburga seviyesine kadar kesin.Cerrahi mikroskop kullanarak, bir göğüs ekartörü ile sternumu geri çekin. Ardından, timus ve yağ dokusunu aort kemerinden nazikçe ayırmak için ince uçlu 45 derecelik açılı forseps kullanın. Transvers aort belirlendikten sonra, anoniminat ve sol karotis arterleri arasına küçük bir parça 6.0 ipek sütür yerleştirin.Transvers aortanın etrafına iki gevşek düğüm atın ve 27,5 gauge küt uçlu bir iğneden küçük bir parçayı transvers aortaya paralel olacak şekilde yerleştirin. İlk düğümü hızlıca iğneye dayalı olarak sıkın, ardından ikinci düğümü atın ve ardından 0,4 milimetre çapında bir darlık elde etmek için iğneyi derhal çıkarın.Transvers aorta ligatasyon işlemi tamamlandıktan sonra, göğüs ekartörünü çıkarın ve ventilatör çıkışını iki saniye boyunca sıkıştırın. Akciğerleri dikkatlice yeniden şişirmek için, kesikli dikiş modeliyle 6.0 proline sütür kullanarak göğüs kafesini kapatın. Son olarak, sürekli dikiş modeliyle 6.0 proline sütür kullanarak cildi kapatın.Postoperatif analjezi için fareye intraperitonal olarak buprenorfin enjekte edilir. Cerrahi işlem sonrası dehidratasyon belirtileri görülürse, intraperitonal olarak 0.3 ila 1 mL steril salin uygulanır.Anesteziyi kademeli olarak kapatma konumuna getirin. Spontan solunum belirtileri görüldüğünde endotrakeal tüpü çıkarın, ardından fareyi pron pozisyona getirin ve bir ısıtma pedi üzerinde uyanmasını sağlayın. Transvers aort daraltma işleminden bir hafta sonra, transvers aort ligasyonunun neden olduğu basınç aşırı yüklenme derecesini belirlemek için fareye yeniden anestezi uygulanır.Anestezi ve vücut sıcaklığı daha önce gösterildiği şekilde korunur. 20 megahertz Doppler probu, boynun sol ve sağ yanlarına 45 derecelik açıyla yerleştirin. Karotis arter akım hızlarını tespit etmek için, Doppler sinyallerini görüntülemek ve depolamak amacıyla bilgisayar tabanlı bir Doppler sinyal işlemcisi kullanıyoruz.Deneysel protokol için gereken basınç aşırı yüklenme derecesine bağlı olarak, yalnızca sağ karotis veya RC ile sol karotis veya lc akış oranı belirli bir aralıkta olan fareler ileri analizler için dahil edilir. Örneğin, orta dereceli bir basınç aşırı yüklenmesi beş ila sekiz arası bir orana yol açarken, şiddetli basınç aşırı yüklenmesiyle sonuçlanan daha sıkı bir daraltma sekiz ila 10 arası bir orana yol açar. Ancak, sham grubundaki bir hayvanın oranının yaklaşık bir olması beklenir.Yabani tip farelerde TAC sonrası tipik cerrahi sağkalım oranı yaklaşık %80 ila %90 arasındadır. Transvers aortanın cerrahi ligasyonu, sham operasyon uygulanan farelere kıyasla sağ ve sol karotis arter arasındaki doppler akış hızı oranının (RC/LC) 5 ila 10 arasında olmasına yol açacaktır. Basınç aşırı yüklenmesi olan farelerin, konstriksiyonun sıkılığına bağlı olarak bir ila iki hafta içinde kardiyak hipertrofi ve altı ila sekiz hafta sonra kardiyak dilatasyon geliştirmeleri beklenir.Farelerde transvers aortik konstriksiyonun nasıl gerçekleştirileceğini size göstermiş olduk; ancak bu prosedürü uygularken normal vücut sıcaklığını korumak ve kan kaybını en aza indirmek önemlidir. İşte bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler, deneylerinizde başarılar dileriz.

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu videoda, basınca bağlı aşırı yüklenmeye bağlı kalp yetmezliğini incelemek için farelerde minimal invaziv transvers aort daralması için deneysel bir protokol gösteriyoruz.

Fare Modelinde Transvers Aort Ark Bantlaması: Sol Ventrikülde Yüksek Basıncın İndüksiyonu için Farelerde Minimal İnvaziv Bir Teknik

Bu protokolün amacı, noninvaziv B- ve M-mod ekokardiyografi ve renk / nabız dalga Doppler görüntüleme kullanarak, enine aort daralma yarattığı kalp hastalığı fare modelinde kardiyak yapısal ve fonksiyonel değişikliklerin değerlendirilmesidir.

Ekokardiyografik Imaging tarafından Enine Aort Konstrüksiyon Mouse Modeli Kardiyak Morfolojik Değerlendirilmesi ve Fonksiyonel Değişiklikler

Kardiyak hipertrofi ve yeniden şekillenmeyi indükleyen abdominal aort daralmasının bir sıçan modeli tanımlanmıştır. Miyokard hipertrofisi ve disfonksiyonu araştırmaları için basit ama kullanışlı bir platform sağlamak için verimli, yüksek oranda tekrarlanabilir ve minimal invaziv bir yöntem kullanılır.

Sıçanlarda Karın Aort Konstrüksiyon sayesinde Kardiyak Yaptırma Bir Model

entübasyon ile bir vantilatör kullanımını ortadan kaldırırken Minimal invaziv enine aort daralma (MTAC) normal enine aort daralma (TAC) temellerini korur. Özellikle translasyonel çalışmalarda sol ventrikül aşırı, yüksek verimli çalışmalar için oldukça aranan bir yöntem olduğu kanıtlanmıştır.

Farelerde Minimal İnvaziv Enine Aort Konstrüksiyon

Bu iletişim kuralının amacı adım adım tarif etmektir minimal invaziv transvers aort daralma (TAC) farelerde tekniği. Entübasyon ve yaygın olarak kullanılan standart prosedür için zorunlu olan havalandırma ortadan kaldırılması, minimal invaziv TAC operatif prosedür basitleştirir ve hayvan koymak zorlanma azaltır.

Minimal invaziv transvers aort daralma farelerde sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon için tekniği

Burada, transvers aort daralma (TAC) lateral Torakotomi ile bir protokol mevcut. Bu teknik basınç aşırı yük ve kalp yetmezliği standart TAC laboratuvar ayarları kullanan farelerde benzetimini yapmak için amaçlayan bir minimal invaziv, kapalı göğüs cerrahi işlemdir.

Transvers aort daralma farelerde ikna etmek için kapalı-göğüs manken

Bu protokol, basınç aşırı yükünü giderdikten sonra sol ventrikül hipertrofisi düşüşünü simüle ederek emilebilir dikişli geçici miyokard hipertrofisi elde etmek için geliştirilmiş bir yöntem sunar. Miyokard hipertrofik önkoşul çalışmaları için değerli olabilir.

Geçici Miyokard Hipertrofisi Elde Etmek için Emilebilir Dikiş ile Enine Aort Daralmasını Çalıştırma

Bu protokol, kendi kendine yapılan bir retraktör kullanılarak minimal invaziv transvers aort daralması (TAC) prosedürü ile modifiye edilmiş ve basitleştirilmiş bir tekniği tanımlamaktadır. Bu prosedür ventilatör veya mikroskop olmadan yapılabilir ve sonunda kardiyak hipertrofi veya kalp yetmezliğine yol açan aşırı basınç yüküne neden olur.

Farelerde Transvers Aort Daralması için Modifiye Bir Teknik

Fare heterotopik kalp transplantasyonu modeli ret ve immün yanıt mekanizmaları eğitim için önemli bir yöntem olduğu birçok araştırmacı tarafından kanıtlanmıştır. Ancak, söz konusu teknikleri hala zorlu. Standart teknikler değiştirerek 1000 nakli ile daha fazla başarı elde ettiler.

Farelerde Heterotopik Kalp Nakli

Fare ince bağırsak nakli modeli bağışıklık ret ve ekran yeni immünsupresif ilaçlar mechanismes çalışma için önemli bir araç olarak kabul edilmiştir. Ancak, bu model ilgili teknikleri son derece teknik bir sorundur çünkü kullanımı sınırlıdır. Şimdi değiştirilmiş teknik tanıtmak.

Farelerde Küçük Bağırsak Nakli

Öğrenin farelerde enine aort konstrüksiyonu yöntemini, basınç yüklemesiyle kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliği modellemesi için. Bu cerrahi teknik kardiyovasküler hastalık mekanizmalarını in vivo araştırmada kullanılır.

Farelerde Enine Aort Konstrüksiyon

Daha fazla video keşfet