Farelerde Enine Aort Konstrüksiyon

Bu prosedür, bir farenin anestezi altına alınması, aseptik cerrahiye hazırlanması ve bir ısıtıcı ped üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirilmesiyle başlar. PE 90 tüp kullanılarak endotrakeal entübasyon gerçekleştirilir ve ardından tüp bir kemirgen ventilatörüne bağlanır. Sonrasında, ikinci kaburgaya kadar parsiyel torakotomi uygulanır ve sternum geri çekilir.

Transvers aorta belirlenir ve ardından innominate arter ile sol karotis arter arasından bağlanır. Göğüs kafesi kapatılır ve ardından cilt sürekli dikiş yöntemiyle dikilir. Son olarak, endotrakeal tüp çıkarılır ve farenin iyileşmesine izin verilir.

Merhaba, ben Baylor College of Medicine'daki Moleküler Fizyoloji ve Biyofizik Bölümü'nden Dr. Zander Wars'ın laboratuvarından Angela Dal Meda. Bugün size farelerde transvers aort constriction (enine aort daraltma) prosedürünü göstereceğiz. Laboratuvarımızda bu prosedürü, kardiyak hipertrofi ve kalp yetmezliği gelişiminin altında yatan mekanizmaları incelemek için kullanıyoruz.

Hadi başlayalım. Transvers aort kısıtlama veya tax cerrahisine başlamadan önce, operasyon alanını %75 izopropil alkol ile dezenfekte edin. Isıtma pedini açın ve uygun sıcaklığa ayarlayın.

Önerdiğimiz sistem, 37 ± 1 °C'de tutulan bir ısı terapi pedine bağlı bir oyuncu tipi sirkülasyonlu su pompasıdır. Cerrahi aletleri ameliyat öncesinde sıcak boncuk sterilizatörde sterilize edin. Taksonomik cerrahi prosedür için aşağıdaki cerrahi aletler gereklidir.

Bir çift küt uçlu makas, iki adet kaba kavisli forseps veya 45 derece açılı forseps, bir çift açılı yaylı makas, bir göğüs ekartörü ve bir iğne tutucu. Kanama durumunda kullanılmak üzere pamuklu aplikatörler de hazır bulundurulmalıdır. Operasyon alanı hazırlandıktan sonra, farenin entübasyon işlemine geçilebilir.

Entübasyon hazırlığı için fare, bir indüksiyon odasında anestezi altına alınır ve boyun çizgisinden göğüs ortasına kadar olan bölgedeki tüyler tüy düzeltici ile tıraş edilir. Fareyi ısıtma pedinin üzerine sırt üstü pozisyonda yerleştirin. Kalp hızında hızlı bir düşüşü ve olası ani ölümü önlemek için cerrahi sırasında normal vücut sıcaklığının korunması önemlidir.

Farenin tamamen anestezi altında olduğunu doğrulamak için tırnak yatağına basınç uygulayın. Boynu germek için hayvanın ön dişlerinin üzerinden bir lastik bant yerleştirin. Bir elinizde kavisli pens kullanarak, diğer elinizle dili nazikçe yana doğru hareket ettirin. Trakeaya PE 90 tüp yerleştirin.

Ardından, endotrakeal tüpü bir Harvard hacim döngülü kemirgen ventilatörüne bağlayın. Ventilatör, farenin vücut ağırlığına bağlı olarak dakikada 125 ila 150 soluk ve 0,1 ila 0,3 mililitre tidal hacimde çalışmalıdır; cerrahi alan içindeki cildi önce Betadine solüsyonu ardından %70 alkol ile dezenfekte edin. Operasyon sırasında cerrahi alanın kontamine olmasını önlemek için bu işlemi üç kez tekrarlayın, ardından sadece operasyon alanı açıkta kalacak şekilde farenin üzerine steril bir örtü yerleştirin.

Bu cerrahi prosedür sırasında transvers aort ligasyonunu gerçekleştirmeye hazırız. Anestezi, dakikada 0,5 ila bir litre %100 oksijen ile %1,5 ila %2 isoflorin ile sürdürülür. Fare tırnak yatağına basınç uygulayarak anestezinin doğru düzeyde olduğunu doğrulayın.

Token refleksinin yokluğunu doğrulamak için. Cerrahi işleme parsiyel torakotomi yaparak başlayın. Sternumu kranial uçtan başlayarak ikinci kaburga seviyesine kadar kesin.

Cerrahi mikroskop kullanarak, bir göğüs ekartörü ile sternumu geri çekin. Ardından, timus ve yağ dokusunu aort kemerinden nazikçe ayırmak için ince uçlu 45 derecelik açılı forseps kullanın. Transvers aort belirlendikten sonra, anoniminat ve sol karotis arterleri arasına küçük bir parça 6.0 ipek sütür yerleştirin.

Transvers aortanın etrafına iki gevşek düğüm atın ve 27,5 gauge küt uçlu bir iğneden küçük bir parçayı transvers aortaya paralel olacak şekilde yerleştirin. İlk düğümü hızlıca iğneye dayalı olarak sıkın, ardından ikinci düğümü atın ve ardından 0,4 milimetre çapında bir darlık elde etmek için iğneyi derhal çıkarın.

Transvers aorta ligatasyon işlemi tamamlandıktan sonra, göğüs ekartörünü çıkarın ve ventilatör çıkışını iki saniye boyunca sıkıştırın. Akciğerleri dikkatlice yeniden şişirmek için, kesikli dikiş modeliyle 6.0 proline sütür kullanarak göğüs kafesini kapatın. Son olarak, sürekli dikiş modeliyle 6.0 proline sütür kullanarak cildi kapatın.

Postoperatif analjezi için fareye intraperitonal olarak buprenorfin enjekte edilir. Cerrahi işlem sonrası dehidratasyon belirtileri görülürse, intraperitonal olarak 0.3 ila 1 mL steril salin uygulanır.

Anesteziyi kademeli olarak kapatma konumuna getirin. Spontan solunum belirtileri görüldüğünde endotrakeal tüpü çıkarın, ardından fareyi pron pozisyona getirin ve bir ısıtma pedi üzerinde uyanmasını sağlayın. Transvers aort daraltma işleminden bir hafta sonra, transvers aort ligasyonunun neden olduğu basınç aşırı yüklenme derecesini belirlemek için fareye yeniden anestezi uygulanır.

Anestezi ve vücut sıcaklığı daha önce gösterildiği şekilde korunur. 20 megahertz Doppler probu, boynun sol ve sağ yanlarına 45 derecelik açıyla yerleştirin. Karotis arter akım hızlarını tespit etmek için, Doppler sinyallerini görüntülemek ve depolamak amacıyla bilgisayar tabanlı bir Doppler sinyal işlemcisi kullanıyoruz.

Deneysel protokol için gereken basınç aşırı yüklenme derecesine bağlı olarak, yalnızca sağ karotis veya RC ile sol karotis veya lc akış oranı belirli bir aralıkta olan fareler ileri analizler için dahil edilir. Örneğin, orta dereceli bir basınç aşırı yüklenmesi beş ila sekiz arası bir orana yol açarken, şiddetli basınç aşırı yüklenmesiyle sonuçlanan daha sıkı bir daraltma sekiz ila 10 arası bir orana yol açar. Ancak, sham grubundaki bir hayvanın oranının yaklaşık bir olması beklenir.

Yabani tip farelerde TAC sonrası tipik cerrahi sağkalım oranı yaklaşık %80 ila %90 arasındadır. Transvers aortanın cerrahi ligasyonu, sham operasyon uygulanan farelere kıyasla sağ ve sol karotis arter arasındaki doppler akış hızı oranının (RC/LC) 5 ila 10 arasında olmasına yol açacaktır. Basınç aşırı yüklenmesi olan farelerin, konstriksiyonun sıkılığına bağlı olarak bir ila iki hafta içinde kardiyak hipertrofi ve altı ila sekiz hafta sonra kardiyak dilatasyon geliştirmeleri beklenir.

Farelerde transvers aortik konstriksiyonun nasıl gerçekleştirileceğini size göstermiş olduk; ancak bu prosedürü uygularken normal vücut sıcaklığını korumak ve kan kaybını en aza indirmek önemlidir. İşte bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler, deneylerinizde başarılar dileriz.