Zebrafish görme fonksiyonu çalışma optokinetik yanıt
2 Şubat 2010
Optokinetik yanıt larva zebrafish görsel işlevlerini değerlendirmek için yaygın kullanılır olmuştur. Bununla birlikte, larva balık için standart bir protokol henüz yetişkinler kolayca uygulanabilir değildir 1-5. Burada, laboratuarımızda yılında kurulan yeni bir protokol kullanarak yetişkin zebrafish okr ölçmek için nasıl tanıtmak.
Herkese merhaba. Benim adım Mean Jing ve USTC'denim. Bildiğimiz gibi, Opto kinetik tepkisi veya kısaca OKR, bir hayvanın bir derecelendirmeyi takip etmek için gözlerini hareket ettirdiği bir davranış testidir.
Etrafında hareket etmek. Bu davranış yaygın olarak kullanılmaktadır. Larva zebra balıklarının görsel fonksiyonlarını değerlendirin.
Bununla birlikte, larva balığını sabitlemek için standart savurganlığı kullanan yöntem yetişkinler için kolayca uygulanabilir değildir. Bu yüzden bu videoda size yetişkin OKR'sini kaydetmeyi mümkün kılan yeni bir savurgan göstereceğiz. Ayrıca karşılaştırma için, larva balıkları için OKR testini ve yetişkin balıklar için OMR testini göstereceğiz.
Ve OMR derken, motor tepkiyi kastediyorum. Şimdi size özelleştirilmiş OKR uygulamamızın görünümünü göstereceğim. Güzel görünüyor, değil mi?
Bu görünümde, bir motor tarafından tahrik edilen bir ızgara tabanı var. Izgara borusu bu ızgara tabanına dayanır ve onunla birlikte döner. Izgara tabanının üzerine bir hazne plakası yerleştirilir, ancak dönmez ve ızgarayı aydınlatmak için dairesel bir lamba kullanılır.
Ve bu kadar. Sadece balık haznesini hazne tabağına koyun ve yuvarlanmaya hazırız. Merhaba, ben Sui.
Merhaba, ben W. USPC'nin neur geliştirme ve ELL'sinde çalışıyoruz. Bugün size zebra balığının yüksek testini süpürmeyi göstereceğiz. Tamam, başlayalım.
Her şeyden önce, size yetişkin zebra balığı için OKR testini nasıl yaptığımızı göstereceğiz. Şimdi süngeri balık haznesine koyun ve içine biraz su dökün. Hava kabarcıklarından kurtulmak için süngeri biraz sıkın.
Şimdi size adım adım pimli balıkları nasıl düzelteceğinizi göstereceğiz. Şimdi sırt sırtının yukarı baktığından emin olmak için balığı biraz kıpırdatalim ve vücudu düz hale getirmek için kuyruğunu gerelim. Kuyruk yüzgecini sabitlemek için arter kelepçesini kullanın ve modelleme Kili kullanarak kelepçeyi hazneye yapıştırın.
Sabitlemeden sonra, hazneye daha fazla su dökün ve uyandırmak için balığa doğru biraz su üfleyin. Şimdi nihayet hazırlığı bitirdik ve gerçek maceraya hazırız. İşte OKR testi budur.
Ekranın üst kısmındaki iki nesnenin yalnızca ızgaranın toplu iğne başı üzerindeki yansıması olduğunu unutmayın. Şimdi larva OKR testini nasıl yaptığımıza bakalım. Erkek ve dişi balıkları çiftleşme tankına koyup yumurtlamalarına izin veriyoruz.
Sonra yumurtaları toplayıp bir cam tabağa aktarıyoruz. Larva balıklarını düzeltmek için meth cellose Çözeltisi kullanıyoruz. Çözelti ısıtıldıktan sonra hızlı bir şekilde soğutulmalıdır.
Bu yüzden buzlu suya koyuyoruz ve şeffaf hale gelene kadar hafifçe sallıyoruz. Şimdi bir tabağa 20 mililitre metilselüloz koyun. Solüsyonda hava kabarcığı olmadığından emin olun.
Larvaları çözelti içinde bir üst üste koyun. Derecelendirmenin yansımasını görebilmeniz için görünüme küçük bir mikrolitrelik hava kabarcığı ekleyin. Bu, yabani tip zebra balığı larvalarının OKR davranışının gösterilmesidir.
Sonunda, size yetişkin zebra balıkları için OMR testinin nasıl yapılacağını göstereceğiz. Her şeyden önce, bir balık yakala ve onu bir balık odasına koy. Şimdi balık odasını yerine koyun.
Ardından, odanın ortasına beyaz bir silindir yerleştirin, böylece balıklar testten önce merkezi geçemez. Balığın bu aydınlatma koşullarında bir dakika boyunca usta kalmasına izin vermek daha iyidir. Tamam, bu yetişkin zebra balıkları için OMR testinin gösterimi.
Az önce size yetişkin zebra balıklarında OKR testinin nasıl yapılacağını gösterdik. Bu testte zebra balığını metilselüloz yerine iğnelerle sabitlemeye çalıştık. Bu yöntemi kullanarak, dört saatten fazla süren güçlü bir yanıt kaydetmeyi başardık.
Bu, deneycilere çok zaman verecektir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Optokinetik Yanıt (OKR), larval zebra balığının görsel fonksiyonlarını değerlendirmek için kullanılan bir davranışsal testtir. Bu makalede, yetişkin zebra balığında OKR'yi ölçmek için yeni bir protokol sunulmakta ve mevcut yöntemlerin sınırlamaları ele alınmaktadır.
Çalışmanın Temel Bileşenleri
Bilim Alanı
- Sinirbilim
- Davranış Analizi
- Görme Bilimi
Arka Plan
- OKR, görsel fonksiyonu değerlendirmek için kullanılan köklü bir yöntemdir.
- Önceki protokoller çoğunlukla larval zebra balığı üzerine odaklanmıştır.
- Yetişkin zebra balığı için standartlaştırılmış yöntemlere ihtiyaç vardır.
- Bu çalışma, bu boşluğu yeni bir protokol ile doldurmayı amaçlamaktadır.
Çalışmanın Amacı
- Yetişkin zebra balığında OKR'yi ölçmek için güvenilir bir yöntem geliştirmek.
- Yetişkin zebra balığında görsel işlemeyi anlamak için katkıda bulunmak.
- Gelecek araştırmalar için standartlaştırılmış bir protokol sağlamak.
Kullanılan Yöntemler
- Yetişkin zebra balığı için yeni bir deneysel kurulum geliştirilmesi.
- OKR'yi tetikleyen görsel uyaranların uygulanması.
- Göz hareketi yanıtlarının nicel analizi.
- Mevcut larval zebra balığı protokolleri ile karşılaştırma.
Ana Sonuçlar
- Yeni protokol, yetişkin zebra balığında OKR'yi başarıyla ölçmektedir.
- Sonuçlar, larval aşamalara kıyasla görsel yanıtta önemli farklılıklar olduğunu göstermektedir.
- Yöntem, görsel sinirbilimde daha geniş uygulamalar için umut vericidir.
- Veriler, yeni protokolün gelecekteki çalışmalar için geçerliliğini desteklemektedir.
Sonuçlar
- Çalışma, yetişkin zebra balığında görsel fonksiyonu değerlendirmek için yeni bir yaklaşım sunmaktadır.
- Bulgular, yaşam aşamaları boyunca görsel işlemeyi anlamaya katkıda bulunmaktadır.
- Yeni protokol, zebra balığı modellerinde daha fazla araştırmayı kolaylaştırabilir.
Sıkça Sorulan Sorular
Executive Industry Relevance
Assessing visual function in adult zebrafish enables mechanistic de-risking of neuroscience targets related to sensory processing and retinal health. The optokinetic response (OKR) assay provides a quantitative, behavior-based readout for target validation in discovery workflows. This method supports predictive confidence by linking genetic or pharmacological manipulations to functional visual outputs in a disease-relevant system.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of visual pathway integrity and functional target engagement in adult zebrafish.
- Operational Value: Provides a reproducible behavioral assay for de-risking targets affecting sensory or neural function.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Generates quantitative eye movement measurements suitable for high-content screening of compound libraries.
- Operational Value: Uses a custom-built apparatus with standardized visual stimuli to ensure assay consistency across runs.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Supports continuity from larval to adult models, enabling lifespan-based visual function profiling.
- Operational Value: Demonstrates stability over extended recording periods (up to 4 hours), facilitating longitudinal or time-course studies.
Pipeline & Workflow Integration
The OKR assay fits within the discovery continuum from target hypothesis testing to preclinical validation, particularly for neuroscience and sensory modality programs.
- Discovery Biology: Supports functional validation of genes or compounds modulating visual processing and neural circuitry.
- Screening: Delivers quantifiable dependent variable outputs (eye tracking response) for compound effect comparison.
- Analytics: Enables statistical analysis of response magnitude and duration to support go/no-go decisions.
- Translational Research: Provides a disease-relevant system for modeling visual dysfunction across developmental stages.
- Enterprise Reuse: Represents a reusable platform for cross-functional teams studying sensory phenotypes.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in target selection by reducing mechanistic ambiguity in visual pathways.
- Operational Value: Delivers standardized, scalable behavioral readouts with minimal variability.
- Strategic Value: Improves capital efficiency by enabling early-stage functional screening before costly mammalian models.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of targets based on phenotypic validation in a vertebrate system.
Implementation Considerations
- Requires expertise in zebrafish handling, behavioral neuroscience, and visual stimulus design.
- Depends on custom apparatus with motor-driven grating, illumination chamber, and fixation system.
- Necessitates standardization of fish preparation, water conditions, and lighting across operators.
- Involves adaptation considerations when transferring protocols between larval and adult models.
- Limited by the need for skilled manual fixation and potential variability in fish responsiveness.
