Name: Zebrafish görme fonksiyonu çalışma optokinetik yanıt (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-02-02T18:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 59 s
Description: Öğrenin yetişkin Danio rerio'da optokinetik yanıt ölçüm protokolü ile görme fonksiyonlarını değerlendirme yöntemini. Bu davranışsal analiz nörobilim araştırmalarında görsel işlemeyi anlamaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Zebra balığı yetiştirme ona destek için teşekkür ederim Bayan Fan Shen. Bu Dr Bing Hu (Çin Bilimler Akademisi, &quot;Bai Ren Ji Hua&quot;, NSFC 30.870.833 ve Çin Ulusal Temel Bilimler Programı, 2009CB941302) fonlarının tarafından desteklenen. Tüm hayvan deneyleri, Çin (USTC) Hayvan Kaynakları Merkezi ve Üniversite Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu Bilim ve Teknoloji Üniversitesi tarafından belirlenen kurallara ve düzenlemelere uygun olarak gerçekleştirilmiştir.

Bölüm I: okr aparat Construct Detayları video gösterimi gösterilmiştir. Bölüm II: Yetişkin Zebra balığı okr Laboratuar okr aparat inşa varsa, yetişkin zebrafish okr anahtar balık tutmak için. Bu bölümde, size adım adım gösterecektir. Bizim cihaz belirtilen başkalarının benzer aşağıdaki bölümleri oluşturur. Dairesel balık odasının dış çapı 7.0 cm, iç çapı 6.5 cm ve 7.0 cm yüksek. Balık odasının etrafında davul çıkış çapı 8,5 cm, iç çapı 7,5 cm ve 7,0 cm yüksek. ~ 70 dakikada rotasyonlar (rpm) saat yönünde ve saat yönünün 20 ila hızı ile saat yönünün tersine döndürmek. Siyah ve beyaz çizgili Eleven döngüleri davul dışında yapıştırılır aydınger çizilir. Işık sistemi, 21 cm çapında iki daire ışık tüpleri oluşur. <img src="/files/ftp_upload/1742/1742fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. Sünger modeli. Uçurum bu orta yapılan görme alanı korunaklı olmadığını emin olun. <ol><li> Şekil 1'de gösterildiği gibi bir sünger iki bölümden oluşmaktadır. Sol kısmında 3 cm x genişlik 3 cm x 2 cm yüksekliğinde uzunluğu. Sağ kısmı uzunluk x genişlik 3 cm 3 cm x 3 cm yüksekliğinde. </li><li> Balık odasının altındaki bu sünger koyun ve yaklaşık 2 cm derinliğinde yetiştirme su dökün. Sünger gizlemek Hava kabarcığı sürülen olmalıdır. </li><li> Uçurumun arkasında yaklaşık 2 mm, sünger sağ kısmının önünde bir iğne takın. </li><li> MS-222 yetişkin bir zebrafish anestezisi. </li><li> Dorsal kadar sünger Zebra balığı koyun ve göğüs yüzgeci bir tarafında ilk pin önce izin. </li><li> İkinci pin diğer göğüs yüzgeci arkasında eklenir. Bu ilk pin (ayrıca bkz Şekil 2) ile işbirliği yaparak zebrafish küçülen vücut kaçınabilirsiniz. </li><li> Bir arter balık odasının üzerine yapıştığı kauçuk bir parça (modelleme kil) arter kelepçe kelepçe ve düzeltmek kuyruğunu sıkıştırın. </li><li> Üçüncü ve dördüncü pin balık vücudun kloakal gözenek yakın site dikilir. Bu yoğun kuyruk dalga zebrafish önleyebilir. </li><li> Altıncı pin diğer tarafta, daha sonra birinci ve üçüncü pin ve beşinci pin arasındaki oturtulmuş. Vücudu sallayarak zebrafish önleyebilir. </li><li> Yedinci ve sekizinci pin başkanı yönünü tutmak için solungaç yakın siteler eklenir. </li><li> Balık odasında yetiştirme su dökün. </li><li> Zebrafish uyanır sonra, 5 ~ 10 dakika boyunca uyum sağlar. </li><li> Bu cihazların ışık açın ve zebrafish 2 dakika boyunca bu aydınlatma uyum sağlar. </li><li> Izgara sürücü ve 1 dakika boyunca adapte zebrafish izin motor açın. </li><li> Kamerayı açın ve gözleri hareket kayıt. </li><li> Kişisel bilgisayar (göz açıları analiz temsili bir örnek Şekil 2'de gösterilmiştir) göz açıları 6 ve sakkaddan numaraları analiz edin. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1742/1742fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 göz ekseni ve vücut ekseni arasındaki açı. a) ızgara yönünde burun-temporal, negatif bir açı balık vücudun öncesi açı tanımlanmış ve balık vücut açısı, tam tersi olumlu bir açı (kısaca gözden geçirilmesi için de Ref. 6). Bu rakam sayılar pim dizisi temsil eder. b) normal grupta bir balık okr analiz örneğidir. Bir saniyelik bir film serisi çerçeveler transfer edildi ve her kare göz açıları Image-Pro Plus yazılımı ile ölçüldü. Bu rakam her noktasında ölçülen her kareyi temsil eder. Notlar: <ol class="lalpha"><li> Tüm pinler sadece vücudu sallayarak zebrafish önlemek için kullanılan, çok sıkı balıklar için zararlı olacaktır. </li><li> Arter kelepçe temas alanı küçük olduğu gibi kuyruk zarar verebilir. Kuyruk sonra, bu balığın düzeltmek için çok zor bu. Bazı koşulların tavsiye kuyruk etrafında bir bandaj sarın. </li><li> Solungaç yakın site ekilir yedinci ve sekizinci pin ızgara kendi görüş sığınak olmamalıdır. </li></ol> Bölüm III. Larvaların Zebra balığı, okr 1. Metilselüloz Uzun bir süre canlı tutmak Larvaların zebrafish% 6 metilselüloz çözüm immobilize edilebilir. Metilselüloz çözüm aşağıdaki gibi hazırlayın. <ol><li> Mikrodalga fırında yüksek düzeyde yaklaşık 3 dakika kaynatın 200 ml GKD 2 Ç. </li><li> Coşkulu bir ocak sıcak su transferi ve kuvvetlice karıştırın. </li><li> Yavaş yavaş sıcak su içine 12 g metilselüloz ekleyin. </li><li> Metilselüloz iyi dağınık sonra 3 dakika boyunca karıştırmaya devam edin. </li><li> Buz su ile çözümler açık hale gelinceye kadar soğutun ve ardından 4 ° C </li></ol><pclass larvalar zebra bal><ol><li> Çiftleri iki erkek ve emzirmeden sonra saat 17:00 'de, yetişkin zebrafish bir çiftleşme tankı bir kadın. Ertesi sabah taze bir çiftleşme tankı aktarabilir ve 1 saat sonra embriyolar toplamak. </li><li> 14:10, karanlık döngüsü: yumurta ışığı ile 28.5 ± 0.5 ° C inkübatör embriyo ortamda tutulur. </li><li> Yumurta 48 saat sonrası fertilizasyon (hpf) dışarı yumurtadan olacak ve okr hpf 72 ya da daha sonra test edilecektir. Bu video larvaes 5 dpf'e. </li></ol> 3. Okr, Prosedürü <ol><li> CCD kamera ve bu cihazların ışık anahtarı ile donatılmıştır Stereoskop altında aparat yerleştirin. </li><li> 55 mm petri 20 ml% 6 methycellulose ekleyin. </li><li> Bu çanak merkezi bir satır birkaç larvaes yerleştirin. </li><li> Kamera alanında 1 ul hacmi hakkında bir hava kabarcığı koyun, ızgara yönünü yansıtacak şekilde bir ayna olabilir. </li><li> Motor açın ve gözlerini hareket kayıt. </li></ol> Bölüm IV. Yetişkin Zebra balığı, OMR Yetişkin zebrafish OMR bu aparatı ile de yapılabileceğine, (hız dönen siyah-beyaz döngüsü 11 36 rpm, Fig.3a gösterdi) merkezi arasında balık yüzme önlemek için balık odasında bir sütun. <ol><li> Bu balık odasında bir balık koyun. </li><li> Bu balığın odanın merkezinde 2 cm çapında bir sütun durun. </li><li> Bir dakika boyunca her iki hala ızgara ve rotasyon ızgara uyarlayın. </li><li> Zebrafish hareketi kaydedin. </li><li> Kişisel bilgisayar zaman tesadüf oranı analiz (bir örnek Fig.3b olarak gösterilir, döner hızı 36 rpm, siyah-beyaz döngüsü 11) </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1742/1742fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3. Yetişkin Zebra balığı OMR. (A), beyaz plastik sütun üzerinde yüzen balıklar önlenmesi için balık odasının ortasına yerleştirildi. (B) yetişkin zebrafish tesadüf oranı ızgara. Tesadüf hızı, toplam kayıt süresi aşağıdaki ızgara zaman oranı olarak tanımlanmıştır. % 50 değer% 100 çok iyi, balık, balık Aşağıdaki ızgara gösterir rastgele yüzme olduğunu gösterir. Her ikisi de yaklaşık 10 saniye bir mücevher forseps ile optik sinirler ezildi. OMR davranışı ezmek sonra rastgele bir yüzme gibi göründü. </pclass>

<ol><li>Beck, J., Gilland, E., Tank, D., Baker, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+the+Ontogeny+of+Optokinetic+and+Vestibuloocular+Behaviors+in+Zebrafish+Medaka%2C+and+Goldfish%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Quantifying the Ontogeny of Optokinetic and Vestibuloocular Behaviors in Zebrafish Medaka, and Goldfish.</a> J Neurophysiol. 92, 3546-3561 (2004).</li>
<li>Brockerhoff, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+the+optokinetic+response+of+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Measuring the optokinetic response of zebrafish larvae.</a> Nature Protocols. 1, 2448-2451 (2006).</li>
<li>Emran, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OFF+ganglion+cells+cannot+drive+the+optokinetic+reflex+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">OFF ganglion cells cannot drive the optokinetic reflex in zebrafish.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 19126-19131 (2007).</li>
<li>Rinner, O., Rick, J., Neuhauss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrast+Sensitivity%2C+Spatial+and+Temporal+Tuning+of+the+Larval+Zebrafish+Optokinetic+Response%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Contrast Sensitivity, Spatial and Temporal Tuning of the Larval Zebrafish Optokinetic Response.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 46, 137-142 (2005).</li>
<li>Roeser, T., Baier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visuomotor+Behaviors+in+Larval+Zebrafish+after+GFP-Guided+Laser+Ablation+of+the+Optic+Tectum%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Visuomotor Behaviors in Larval Zebrafish after GFP-Guided Laser Ablation of the Optic Tectum.</a> The Journal of Neuroscience. 23, 3726-3734 (2003).</li>
<li>Easter, S., Nicola, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Development+of+Vision+in+the+Zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">The Development of Vision in the Zebrafish (Danio rerio).</a> Developmental Biology. 180, 646-663 (1996).</li>
<li>Maaswinkel, H., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatio-temporal+frequency+characteristics+of+the+optomotor+response+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">Spatio-temporal frequency characteristics of the optomotor response in zebrafish.</a> Vision Research. 43, 21-30 (2003).</li>
</ol>

Okr tanımına göre, hayvanlar, kendiliğinden dönen bir ızgara takip gözlerini hareket ettiğini bir olgudur. Bu davranışı, uzun bir süre (örneğin 6 saat üzerinde) için yapılmıştır varsa, göz kaslarının yorgun olabilir ve okr zayıflatılmış olacaktır. Yetişkin zebrafish OMR diğerleri 7 tamamen tarif edilmiştir. Bu video, biz sadece bizim aparatı ile bu davranışı göstermek. Optik sinirler ezildi sonra, onlar çok iyi bu ızgara olamazdı. Biz zebrafish görme f...

<table><tbody><tr><td>Metilselüloz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M6385</td><td>Viskozite 25 cP</td></tr></tbody></table>

zebrafish görme fonksiyonu çalışma optokinetik yanıt

Using the optokinetic response to study visual function of zebrafish

Optokinetik yanıt (okr), bir hayvan, kendi ekseni etrafında dönen ızgara takip gözlerini titreme bir davranış biçimidir. Bu yaygın olarak larva zebrafish 1-5 görme fonksiyonlarını değerlendirmek için kullanılır olmuştur. Bununla birlikte, larva balık için standart bir protokol henüz yetişkin zabrafish kolayca uygulanabilir değildir. Burada, yetişkin zebrafish okr laboratuarımızda yılında kurulan yeni bir protokol kullanarak basit inşa edilen özel bir aparat ile nasıl ölçüleceği tanıtmak. Aparat ve yetişkin zebrafish okr adım adım prosedürü her ikisi de bu video gösterilmiştir. Buna ek olarak, larva okr ölçümleri yanı sıra optomotor yanıt (OMR) yetişkin zebrafish test, aynı zamanda bu video gösterilmektedir. Okr deneyde yetişkin zebrafish Bu tahlil, 4 saate kadar sürebilir. Yetişkin balık görme sistemi manipüle zaman yetişkin balık uygulanan bu okr testi daha verimli bir şekilde görme fonksiyonu soruşturma yararlanacaktır. Su-Qi Zou ve Wu Yin bu kağıt eşit katkıda bulunmuştur.

Optokinetik yanıt larva zebrafish görsel işlevlerini değerlendirmek için yaygın kullanılır olmuştur. Bununla birlikte, larva balık için standart bir protokol henüz yetişkinler kolayca uygulanabilir değildir<sup&gt; 1-5</sup&gt;. Burada, laboratuarımızda yılında kurulan yeni bir protokol kullanarak yetişkin zebrafish okr ölçmek için nasıl tanıtmak.

Zebrafish görme fonksiyonu çalışma optokinetik yanıt

Optokinetik yanıt (OKR), bir hayvanın etrafındaki dönen bir ızgarayı takip etmek için gözlerini titreştirdiği bir davranıştır. ... değerlendirmek için yaygın olarak kullanılmıştır.

Herkese merhaba. Benim adım Mean Jing, USTC'den geliyorum. Bildiğiniz üzere, Optokinetik yanıt veya kısaca OKR, bir hayvanın bir gradyanı takip etmek için gözlerini hareket ettirdiği bir davranış testidir.Etrafında hareket etme. Bu davranış yaygın olarak kullanılmıştır. Zebra balığı larvalarının görsel fonksiyonlarını değerlendirin.Ancak, larva balıkları sabitlemek için kullanılan standart yöntem yetişkinler için kolayca uygulanabilir değildir. Bu nedenle, bu videoda yetişkin OKR kaydını mümkün kılan yeni bir yöntemi göstereceğiz. Ayrıca karşılaştırma yapmak amacıyla, larva balıklar için OKR testini ve yetişkin balıklar için OMR testini uygulamalı olarak göstereceğiz.OMR ile motor yanıtı kastediyorum. Şimdi size özelleştirilmiş OKR uygulamamızın görünümünü göstereceğim. Güzel görünüyor, değil mi?Bu görünümde, bir motor tarafından tahrik edilen bir ızgara tabanı bulunmaktadır. Izgara tüpü bu ızgara tabanı üzerinde durur ve onunla birlikte döner. Izgara tabanının üzerine, dönmeyen bir hazne plakası yerleştirilmiştir ve ızgarayı aydınlatmak için dairesel bir lamba kullanılır.Hepsi bu. Balık haznesini hazne plakasına yerleştirin ve hazırız. Merhaba, ben Sui.Merhaba, ben W. USPC'de nöral gelişim ve ELL üzerine çalışıyoruz. Bugün size zebra balığının yüksek test taramasını göstereceğiz. Tamam, hadi başlayalım.Öncelikle, yetişkin zebra balıkları için OKR testini nasıl gerçekleştirdiğimizi göstereceğiz. Şimdi süngeri balık haznesine yerleştirin ve içine bir miktar su dökün. Hava kabarcıklarını gidermek için süngeri hafifçe sıkın.Şimdi size balığın pinlerle nasıl sabitleneceğini adım adım göstereceğiz. Şimdi, sırt yüzgecinin yukarı baktığından emin olmak için balığı biraz hareket ettirelim ve gövdenin düz olması için kuyruğu gerelim. Kuyruk yüzgecini sabitlemek için arter klempi kullanın ve klempi modelleme kili yardımıyla hazneye yapıştırın.Sabitleme işleminden sonra, hazneye daha fazla Su doldurun ve balığı uyandırmak için ona doğru biraz su püskürtün. Artık hazırlık aşamasını tamamladık ve asıl maceraya hazırız: OKR testi.Ekranın üst kısmındaki iki nesnenin sadece kırinım ızgarasının iğne ucundaki yansıması olduğuna dikkat edin. Şimdi larva OKR testini nasıl yaptığımıza bakalım. Erkek ve dişi balıkları çiftleşme tankına koyduk ve yumurta bırakmalarını bekledik.Ardından yumurtaları toplayıp cam bir kaba aktarırız. Larva balıkları sabitlemek için metil selüloz çözeltisi kullanırız. Çözelti, ısıtıldıktan sonra hızla soğutulmalıdır.Ardından, şeffaf hale gelene kadar buzlu suda tutarak hafifçe çalkalıyoruz. Şimdi bir kaba 20 mililitre metilselüloz koyun. Çözeltide hava kabarcığı kalmadığından emin olun.Larvaları solüsyonun içine yan yana dizin. Derecelendirme yansımasını görebilmeniz için görüş alanına küçük bir mikrolitre hava kabarcığı ekleyin. Bu, vahşi tip zebra balığı larvalarının OKR davranışının gösterimidir.Son olarak, yetişkin zebra balıkları için OMR testinin nasıl yapılacağını göstereceğiz. Öncelikle, bir balık yakalayın ve onu bir balık haznesine yerleştirin. Şimdi balık haznesini yerine yerleştirin.Ardından, test öncesinde balıkların merkezden geçememesi için haznenin merkezine beyaz bir silindir yerleştirin. Balıkların bu ışıklandırma koşullarına bir dakika boyunca adapte olmalarını sağlamak daha iyidir. Tamam, yetişkin zebra balıkları için OMR testinin gösterimi bu şekildedir.Yetişkin zebra balıklarında OKR testinin nasıl gerçekleştirileceğini size göstermiş olduk. Bu testte, zebra balığını metilselüloz yerine iğnelerle sabitlemeyi denedik. Bu yöntemi kullanarak, dört saatten fazla süren güçlü bir yanıt kaydetmeyi başardık.Bu, deney yapanlara bolca zaman tanıyacaktır.

using-the-optokinetic-response-to-study-visual-function-of-zebrafish

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Görsel-Motor Yanıt hafif artışlarla ve azaltır yanıt larva zebrafish motor çıkışını ölçmek için geliştirdi. Biz de dahil olmak üzere başka bir görme testi optokinetik refleks tarafından test edildiğinde tamamen kör olduğu düşünülüyordu optokinetik yanıt (NRC) mutantlar, hiçbir zebrafish vizyon mutant inceledi.

Işık Parlaklıkları değişiklikler Zebra balığı, Duyarlılık Tedbir Davranış Testi

VisioTracker göz hareketlerinin kayıt dayalı larva ve küçük yetişkin balık görsel performans kantitatif analizi için otomatik bir sistemdir. Bu tür görsel sistem gelişimi ve işlevi, farmakoloji, nöral devre çalışmaları ve sensorimotor entegrasyon gibi alanlarda yüksek verimli araştırma sağlayarak, görsel uyarana özellikleri ve gerçek zamanlı analiz üzerinde tam denetime sahiptir.

VisioTracker, Okülomotor Analizi Yenilikçi Otomatik Yaklaşım

Bu videoda zebra balıklarında optokinetik tepki testi açıklanmaktadır. Video, görsel hareketli uyarana dayalı olarak refleksif göz hareketlerini ölçer ve zebra balıklarında görme keskinliğini belirler.

Optokinetik Yanıt Testi: Zebra Balıklarında Görme Keskinliğini Ölçmek İçin Bir Yöntem

Bu videoda, genetik olarak modifiye edilmiş somatosensoriyel nöronları aktive ederek ve ortaya çıkan davranışsal yanıtı yüksek hızlı bir video kamera ile kaydederek optogenetik teknikler açıklanmaktadır.

Zebra Balığı Optogenetiği: Larva Davranışsal Tepkilerini İncelemek için Genetik Olarak Değiştirilmiş Somatosensoriyel Nöronun Aktive Edilmesi

Optogenetic teknikleri mümkün davranışına özgü nöronların katkısı çalışma yaptık. Biz bir diyot pompalı katı hal (DPSS) lazer ile channelrhodopsin varyant (şef) ifade ve yüksek hızlı video kamera ile ortaya çıkardı davranışların kaydedilmesi tek somatosensoriyel nöronlar aktive larva zebrafish bir yöntem açıklanmaktadır.

Chef-tdTomato kullanarak Zebrafish Somatosensoriyel Nöron Optogenetic Etkinleştirme

Zebra balığı birçok araştırma alanları için değerli bir araç olmuştur. Burada görsel bir yanıt ortaya çıkarmak ve yetişkin Zebrafish fonksiyonel görme keskinliği hesaplamak için bir yöntem ortaya koymaktadır.

Zebra balığı görme keskinliğinin bir nicel ölçü olarak Optokinetik Tepki

Zebra balığı larvalarının mikromanipülasyon ve elektroretinografi tekniklerini kullanarak elektroretinografik (ERG) analizi için bir yöntem sunuyoruz. Bu, zebra balığı larvalarının in vivo görsel işlevini test etmek için basit ve anlaşılır bir yöntemdir.

Zebra balığı Larva Görsel Tepki Elektroetinogram Analizi

Bu protokol, zebra balığının erken göz gelişiminin toto etiketlemesi ve çok boyutlu görüntülenmesi için bir yaklaşımı açıklar. Lazer tarama konfokal mikroskopisi kullanarak etiketleme, gömme ve dört boyutlu (4D) görüntülemeyi ve optik bardak morfogenezinin diseksiyon mekanizmaları için veri kümelerinin alımını optimize etmek için dikkat edilmesi gereken noktaları açıklıyoruz.

Zebra Balığı Optik Kupası Morfogenezinin 4 Boyutlu Görüntülenmesi

Makale, retinal girdinin optik tektum büyümesini ve gelişimini nasıl etkilediğini araştırmaya yönelik ilk adım olarak canlı zebra balığı larvalarından gözlerin cerrahi olarak nasıl çıkarılacağını açıklamaktadır. Ek olarak, makale larva anesteziizasyonu, fiksasyon ve beyin diseksiyonu, ardından immünohistokimya ve konfokal görüntüleme hakkında bilgi vermektedir.

Görsel Sistemin Innervasyona Bağlı Büyümesini ve Gelişimini İncelemek için Canlı Zebra Balığı Larvalarında Göz Çıkarılması

Sinyal yollarının optogenetik manipülasyonu, gelişim, rejenerasyon, homeostaz ve hastalıkta sinyalleşmenin nasıl çözüldüğünü araştırmak için güçlü bir strateji olabilir. Bu protokol, erken zebra balığı embriyosunda ışık-oksijen-voltaj algılama alanı tabanlı Nodal ve kemik morfojenik protein (BMP) sinyal aktivatörlerinin kullanılması için pratik yönergeler sağlar.

Zebra Balığı Embriyolarında Optogenetik Sinyal Aktivasyonu

Burada, konfokal mikroskopi kullanarak GCaMP kalsiyum göstergelerini eksprese eden transgenik zebra balıklarının beyin bölgelerindeki nöral aktiviteyi incelemek için ayrıntılı bir protokol sunuyoruz.

In vivo (İn canlı) Kısmen Kısıtlanmış Larva Zebra Balıklarında Duyusal Stimülasyonla İndüklenen Nöral Aktivitenin Konfokal Floresan Görüntülemesi

Öğrenin yetişkin Danio rerio'da optokinetik yanıt ölçüm protokolü ile görme fonksiyonlarını değerlendirme yöntemini. Bu davranışsal analiz nörobilim araştırmalarında görsel işlemeyi anlamaya yardımcı olur.

Zebrafish görme fonksiyonu çalışma optokinetik yanıt

Daha fazla video keşfet