Name: Amiloid için Anterior Fat Pad FNA Sahne ve İşleme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-10-30T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 41 s
Description: Öğrenin, anterior karın yağ dokusundan ince iğne aspirasyonu ile amiloidoz teşhisi için biyopsi alma ve örnek işleme yöntemlerini. Bu minimal invaziv teknik, doğru tanı için güvenilir sonuçlar sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bayan Bonnie Phetteplace, RN Biz İİAB işlemi gösteri grafik video sırasında yardım için teşekkür ederim.

Giriş Sistemik amiloidoz toplu amiloid olarak adlandırılan çeşitli proteinler hücre dışı birikimi anlamına gelir son derece değişken bir hastalıktır. , Beta pilili yapılandırma ile bu amiloid fibrillerinin birikimi ilgili organlara bağlı olarak çeşitli klinik sunumlar yol açar. Kalp, karaciğer ve / veya böbrek gibi önemli organların tutulumu olduğu zaman sistemik amiloidozun en önemli klinik belirtileri kaydetti. Tarihsel olarak, bu tutulan organlar amiloid varlığını göstermek için biyopsi olacaktır. Bu orta derecede invaziv işlemler kanama da dahil olmak üzere önemli bir risk taşıyordu. Fat pad aspirasyonu beri sistemik amiloidoz 1 amiloid tespiti için güvenilir ve noninvaziv bir yöntem sağlamak için kanıtlanmıştır . Bu prosedür, küçük kan damarı duvarlarının 2 yetersizdir amiloid birikimi değerlendirmek için fibroadipose doku almak için lokal anestezi altında karın ön duvarında cilt altı yağ liposuction aslında karşılaştırılabilir . Dokusunda amiloid tanımlanması için en sık kullanılan yöntem, Kongo kırmızı lekeli bölümleri, polarize ışık mikroskobu 3 altında görselleştirildiği zaman görülen karakteristik elma yeşil birefringence desen kalır. Yağ yastığı aspirasyon yapıldığında, Kongo kırmızı lekeler, doğrudan lekeli slayt veya aspire edilen yağ dokusunun hücre blok hazırlıkları yapılabilir. Ancak, amiloidoz erken evrelerinde hastalar kıt amiloid mevduat, büyük 4,5 Kongo kırmızı lekeli hücre bloklarına hassasiyetini azaltır. Elektron mikroskobu ile yağ yastığı aspiratlar ultrastrüktürel değerlendirme daha iyi tekrarlanabilirlik ve gelişmiş hassasiyet 4 vardır. Bu nedenle, bir hücre bloğu iki hazırlık ve elektron mikroskobu 2 gerçekleştirmek için tüm yağ yastığı aspiratlar göndermek için tavsiye edilir. Fat pad aspirasyon sistemik amiloidoz tanısı için doku elde etmek için nispeten düşük maliyetli ve noninvaziv bir yöntemdir. Bu makale, elektron mikroskobu Kongo kırmızısı boyama ve ultrastrüktürel değerlendirme için numune göndermek için, numune işleme hakkında ayrıntılı bilgi ile birlikte yağ yastığı aspirasyon prosedürü anlatılmaktadır. Bu video, en iyi tanı malzeme almak için bu tekrarlanabilir ve basit bir prosedür ortaya koymaktadır. 1. Anterior Fat Pad FNA Sahne A. yerel Anesthetization (Şekil 1 ve 2) <ol><li> Alkol çubuklar veya belirli bir kurum tarafından tercih edilen cilt temizleme aracı kullanarak, orta hatta yan karın alt kadranda ve göbek (Şekil 1) altında cilt temizleyin. </li><li> Işaretleme kalemi ile Şekil 1'de gösterildiği gibi 2 x 2 inç hakkında rhomboid şeklinde bir alanı işaretleyin. </li><li> 18G iğne ile% 1 aspire yaklaşık 10 ml lidokain. 25G 1 ½ inç iğne şırıngaya takın. Sıvı dağıtılır ve herhangi bir hava kabarcığı kadar piston basarken dik şırınga dokunarak sıkışan havayı çıkarın. </li><li> Şekil 2'de gösterildiği gibi, daha önceden işaretlenmiş rhomboid alan sınırları boyunca anestezisi. A noktası sadece deri altında 25G iğne takarak başlayın ve X şırınga pistonu geri çekin bir gemi içinde olduğundan emin olmak için dikkatlice işaret deri altına iğne itin. Sonra yavaş yavaş iğne iğne ucu A (Şekil 2A3) cilt çıkıp izin vermeden bir noktaya kadar geri çekilirken, 2.5 mL lidokain (10 ml şırınga lidokain ¼ hakkında) kadar sızmak pistonu itin. Deri altına iğne ile hala noktası Y (Şekil 2A4) doğru yönünü değiştirmek ve iğne noktası Y (Şekil 2B1) subkutan itmek. Daha önce olduğu gibi yavaş yavaş noktası üzerinden iğne geri çekilirken, iğne, bir kap içinde olduğunu teyit ve yaklaşık 2,5 mL lidokain dağıtmak (2b4 yoluyla 2b3 Şekil). Noktaları B, X ve Y B (Şekil 2d4 yoluyla 2C1) B noktası ve dağıtım lidokain subkutan itibaren benzer adımları tekrarlayın. Azabı kanamayı önlemek A ve B steril göstergesi parçasının sağlam uygulama. </li><li> Şimdi hafifçe komşu unanesthetized deri ile karşılaştırarak, pamuk gazlı bez parçasının uç / köşe anestezi rhomboid içinde cilde temas alanı anestezi olduğunu kontrol edebilirsiniz. </li></ol> B. yağ yastığı aspirasyonu (Şekil 3) (Yağ yastığı aspirasyon performansı için önce lokal anestezi uygulanması, bölgesel ve bireysel tercihlerine göre, bypass olabilir. Anterior yağ yastığı aspirasyon Düzgün yapılan İİAB prosedürü tek dikmek içinde tamamlanabilir. Ancak, her hastanın ağrı eşiği bağlı , cilt altı yağ dokusu, ileri ve geri 18G iğne manevra nispeten distresşarkı. Anesthetization yöntemi burada sadece 25G iğne ile iki azabı etkiyi ve prosedürü geliştirilmiş hoşgörü ile ağrı kaçırır nitelendirdi.) <ol><li> 10 ml şırınga üzerine 18G 1 ½ inç iğne birleştirin. Düzgün uygulama ve vakum serbest bırakılması için şırınga kavrama ("İİAB kavrama / silah") şırınga-iğne düzeneğini monte. </li><li> Derialtı yağ içine temizlenmiş ve anestezi rhomboid alanı (Şekil 3a) içinde iğne ucu takın. </li><li> Tam vakum (Şekil 3b) subkutan doku oluşturmak için takılan iğne şırınga pistonu geri çekin. </li><li> Vakum korumak ve derialtı yağ (Şekil 3c 3i yoluyla) çeşitli yönlerde iğne ileri ve geri manevra. Her vuruş iğne iğne cilt çıkıp izin vermeden seçilen süresini mümkün olduğunca uzun olmalıdır. Maksimum örnekleme her inme (Şekil 3i) yön değiştirerek elde edilir. Iğne, seroza teğet ve periton boşluğuna delinmesiyle önlemek için deri yüzeyine paralel yönde tutmak için önemlidir. </li><li> Fibroadipose doku şırınga içinde birikir. Bir kez yeterli fibroadipose doku parçaları (parçaları zengin kan karışık örnek 1 ml kadar) alınır, vakum tamamen serbest bırakılması ve iğne çıkarın (Şekil 3k). </li><li> Hasta veya yardımcısı, kan ekstravazasyonu önlemek için gazlı bez bir ped ile usul alanda sağlam bir baskı uygulamak. </li></ol> 2. Örnek İşleme <ol><li> Elektron mikroskobu (Şekil 4B) glutaraldehid çözümü en az 5-6 fibroadipose doku parçaları yerleştirin. </li><li> Fibroadipose doku parçaları birkaç smear kurumsal protokolüne bağlı olarak, iki slayt (Şekil 4A) arasında yayarak hazırlanmış olabilir. </li><li> Kalan malzemeyi şırınga içinde pıhtı (pıhtılaşma zamanı bağlı olarak, 5-7 dakika sürebilir) (Şekil 4C) izin verilir. </li><li> Pıhtılaşmış fibroadipose doku malzemesi, şırınga ve serbest dalgalı (Şekil 4C2) duvardan yerinden böylece şırınga içinde% 10 formalin aspire. (Şekil 4C3) şırınga pistonu çıkarın ve meme ucunu şırınga (Şekil 4C4) karşısında açık sonundan itibaren% 10 formalin kap içine pıhtılaşmış fibroadipose doku transferi. </li><li> Uygun kaplarda Etiket ve elektron mikroskobu için glutaraldehit ve H &amp; E bölümünde ve Kongo kırmızısı polarize mikroskobu altında değerlendirilmesi için leke formalin gönderin. Smear hazırsanız, onlar bireysel laboratuvar protokole göre işleme tabi tutulabilir. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. Anterior yağ yastığı İİAB için anestezi alan. <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2. Yerel Anesthetization. <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3. Anterior yağ yastığı İİAB Sahne. <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig4.jpg" alt="Şekil 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 4"> Şekil 4. Anterior yağ yastığı İşleme aspire amiloid birikimi tespit için laboratuvara teslim edilecek. 3. Temsilcisi Sonuçlar <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig5.jpg" alt="Şekil 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 5"> Şekil 5. Fibroadipose doku parçaları, küçük kan damarlarının duvar amiloid. Fibroadipose doku formalin ile işlenmiş, parafin Kongo kırmızısı ile boyanmış, gömülü ve ışık mikroskobu polarize tarafından incelenir. Küçük kan damarlarının duvarında amiloid yeşil elma birefringence (beyaz ok) gösterir. <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig6.jpg" alt="Şekil 6" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 6"> Şekil 6. Doku amiloidoz eksik. Elma yeşil birefringence yok amiloidoz olmadan farklı bir hasta dokular. Kollajen lifleri Blue birefringence (beyaz ok), hemen hemen tüm örneklerinde genellikle mevcuttur. <img src="/files/ftp_upload/1747/1747fig7.jpg" alt="Şekil 7" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 7"> Şekil 7. Kan damar duvarında amiloid ile uyumlu fibrillerin düz, non-dallanma Elektron mikrografı, 8-10 mil çapı fibriller, kan damar duvarında amiloid oluşan rastgele saçılan .

<ol><li>Westermark, P., Stenkvist, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+for+the+diagnosis+of+systemic+amyloidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">A new method for the diagnosis of systemic amyloidosis.</a> Arch Intern Med. 132, 522-523 (1973).</li>
<li>Devata, S., Hari, P., Markelova, N., Li, R., Shidham, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detecting+AL+Amyloid+in+Abdominal+fat+pad+aspirates%3A+Is+Congo+red+sufficient%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Amyloid%22%5BJournal%5D)">Detecting AL Amyloid in Abdominal fat pad aspirates: Is Congo red sufficient?</a> Amyloid. , Forthcoming Forthcoming.</li>
<li>Merlini, G., Bellotti, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+Mechanisms+of+Amyloidosis%5BTitle%5D)+AND+%22New+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Molecular Mechanisms of Amyloidosis.</a> New Engl J Med. 349 (6), 583-596 (2003).</li>
<li>Shidham, V. B., Kumar, N., Cihlar, K., Varsegi, G., Markelova, N., Li, R., Hari, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fine+needle+aspiration+of+abdominal+fat+pad+for+diagnosis+of+early+amyloidosis%3A+How+can+the+clinical+role+of+the+test+be+improved%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Mod+Pathol%22%5BJournal%5D)">Fine needle aspiration of abdominal fat pad for diagnosis of early amyloidosis: How can the clinical role of the test be improved?</a> Mod Pathol. 20, Suppl ement 2. 1A-380A (2007).</li>
<li>Halloush, R., Lavrovskaya, E., Mody, D., Lager, D., Truong, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+typing+of+systemic+amyloidosis%3A+The+role+of+abdominal+fat+pad+fine+needle+aspiration%5BTitle%5D)+AND+%22Cytojournal%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and typing of systemic amyloidosis: The role of abdominal fat pad fine needle aspiration.</a> Cytojournal. 6, 24-24 (2010).</li>
<li>Hazenberg, I. I., Rijswijk, C. V. an, H, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+Accuracy+of+Subcutaneous+Abdominal+Fat+Tissue+Aspiration+for+Detecting+Systemic+Amyloidosis+and+Its+Utility+in+Clinical+Practice%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Diagnostic Accuracy of Subcutaneous Abdominal Fat Tissue Aspiration for Detecting Systemic Amyloidosis and Its Utility in Clinical Practice.</a> Arthritis Rheum. , 54-546 (2006).</li>
<li>Guy, C. D., Jones, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abdominal+fat+pad+aspiration+biopsy+for+tissue+confirmation+of+systemic+amyloidosis%3A+specificity%2C+positive+predictive+value%2C+and+diagnostic+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Diagn+Cytopathol%22%5BJournal%5D)">Abdominal fat pad aspiration biopsy for tissue confirmation of systemic amyloidosis: specificity, positive predictive value, and diagnostic pitfalls.</a> Diagn Cytopathol. 24, 181-185 (2001).</li>
<li>Westermark, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosing+Amyloidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Scand+J+Rheumatol+Suppl%22%5BJournal%5D)">Diagnosing Amyloidosis.</a> Scand J Rheumatol Suppl. 24, 327-329 (1995).</li>
<li>Linke, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highly+Sensitive+Diagnosis+of+Amyloid+and+Various+Amyloid+Syndromes+Using+Congo+Red+Fluorescence%5BTitle%5D)+AND+%22Virchow+Arch%22%5BJournal%5D)">Highly Sensitive Diagnosis of Amyloid and Various Amyloid Syndromes Using Congo Red Fluorescence.</a> Virchow Arch. 436, 439-448 (2000).</li>
<li>Giorgadze, T. A., Shiina, N., Baloch, Z. W., Tomaszewski, J. E., Gupta, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+detection+of+amyloid+in+fat+pad+aspiration%3A+an+evaluation+of+Congo+red+stain+by+fluorescent+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Diagn+Cytopathol%22%5BJournal%5D)">Improved detection of amyloid in fat pad aspiration: an evaluation of Congo red stain by fluorescent microscopy.</a> Diagn Cytopathol. 31, 300-306 (2004).</li>
<li>DeMay, R. M. Fine Needle Aspiration Biopsy. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDeMay%2C+RM+%22The+Art+%26+Science+of+Cytopathology%22">The Art & Science of Cytopathology</a>. , ASCP Press, American Society of Clinical Pathology. Chicago. 465-46 (1996).</li>
<li>Arbustini, E., Vrga, L., Concardi, M., Pallandini, G., Obici, L., Merlini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electron+and+Immuno-electron+Microscopy+of+Abdominal+Fat+Identifies+and+Characterizes+Amyloid+Fibrils+in+Suspected+Cardiac+Amyloidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Amyloid%22%5BJournal%5D)">Electron and Immuno-electron Microscopy of Abdominal Fat Identifies and Characterizes Amyloid Fibrils in Suspected Cardiac Amyloidosis.</a> Amyloid. 9, 108-114 (2002).</li>
</ol>

Amiloidoz tanısı genellikle etkilenen organlar böbrek, karaciğer, ve / veya kalp gibi bir doku biyopsisi ile elde edilir. Bu yaklaşım yüksek tanısal Ancak, invaziv olan ve kanama 2 gibi komplikasyonlar ile ilişkili olabilir. Rektal, dişeti ve kemik iliği biyopsileri 1960&#39;ların 6,7,8 nispeten daha az invaziv bir yaklaşım olarak tanı için tercih edilmiştir. Karın yağ yastığı aspirasyon sistemik amiloidoz 1 doku tanısı için güvenli, minimal invaziv, basit ve daha az pahalı bir prosedür olarak 1973 yılında rapor edilmiştir . Ancak, alınan numune işleme usul ve yaklaşımın detayları tutarlı değildir. Bu video ve makale prosedürü adım adım açıklanmaktadır. Yağ yastığı aspirasyon amiloid tespit etmek için yaklaşım, benzer şekilde, aynı zamanda iyi bir kaç çalışmada, karşılaştırma ve 1,5,6,7,8 çeşitli yaklaşımların değerlendirilmesi standart değildir . Kongo kırmızısı boyası ile anterior yağ yastığı aspiratlar değerlendirilmesi, özellikle kıt amiloid mevduat 5 amiloidoz erken durumlarda daha düşük gözlemciler arası tekrarlanabilirlik ile daha az duyarlıdır. İmmünohistokimya formalin sabit parafine gömülü hücre bloku bölümleri üzerinde yapılan ve sitoloji smear üzerinde yapılan Kongo kırmızı floresan tanı duyarlılığı artırmak 9,10 bildirilmiştir. Elektron mikroskobu, yağ pad aspiratlarda 4, 5 fibroadipose dokusunda küçük kan damarı duvarlarının kıt amiloid fibriller tespiti ve kimlik geliştirir . Bu bilgiye dayanarak, bu makale hazırlamak için hücre bloklarının (tanısal yeşil elma birefringence için polarize mikroskop altında Kongo kırmızı lekeli hücre bloklarına değerlendirme için ve ayrıca belirtilir immünohistokimya gibi) ve elektron mikroskobu için numune işlenmesi açıklamaktadır. Ancak, amiloid için örnek değerlendirme için seçilen yaklaşım bağlı olarak, sitoloji yayma hazırlanması, hücre blok hazırlanması ve elektron mikroskobu için işleme tabi olabilir. Bazı laboratuvarlar aspire fibroadipose doku parçaları hazırlanan ve Kongo kırmızısı ile boyanarak floresan 10 çalışma smear testleri. Genellikle geç amiloidoz, Kongo kırmızısı polarizasyon mikroskobu ile ışık mikroskobu yeterli olabilir, ancak Kongo kırmızısı boyama hücre bloklarına mikroskobu polarize ile hastalığın erken aşamalarında yağ pedi aspiratlarda 4,5,11 için daha az hassas ve güvenilir . Benzer kısıtlamaları Thioflavin T dahil olmak üzere diğer özel boyalar kullanılıyor olabilir. Amiloid algılamak için diğer yaklaşımlar, Kongo kırmızısı polarize mikroskopi ve floresan 10 ile amiloid aspirat smear değerlendirilmesi içerir . Bizim tecrübelerimize göre bu yöntem daha az tekrarlanabilir. Elektron mikroskobu ile amiloid için yağ ped kan damarlarının değerlendirilmesi bu sınırlamalar 4,11 üstesinden gelir. Amiloid ileri karakterizasyonu immunoelectron mikroskopi 12 tarafından rapor edilmiştir, ancak, bu yöntemler yaygın olarak olmayan bir üçüncü basamak ortamda kullanılabilir olmayabilir . Aspirasyon prosedürleri gerçekleştirmek için kullanılan iğneler göstergesi ince içine boyutları (21-25G), orta (18-20G) ve büyük (örneğin-14G) 11 göre kategorize olabilir. Anterior yağ yastığı özlemlerini ara (18 20G) ince (21 22G) 2,10 arasında değişen değişken göstergeleri kullanılarak yapılması bildirilmiştir. Kitle lezyonları En iyi sitoloji smear hücre bloklarının için ek numune almak için daha geniş bir iğne (18G) ile ek geçiş ile birlikte elde etmek için, ince göstergesi iğneler (25G) ile aspire edilir. Anterior yağ yastığı aspirasyon sırasında, yapışkan fibroadipose dokusu ince iğneler ile iyi aspire değildir. Hücre blok hazırlanması ve elektron mikroskobu, yağ aspiratlar fibroadipose doku parçaları küçük kan damarı duvarlarının değerlendirilmesi için önemlidir. Daha geniş ölçü iğneler (18G), tanı yeterli malzeme 2,10 verim tavsiye edilir . Prosedürü geleneksel İİAB karşılaştırılabilir olduğu gibi, daha geniş insülin iğnesi yağ yastığı aspirasyon bu 5 gerçekleştirmek için kullanılacak olsa bile İİAB olarak anılacaktır .

A correction was made to <a href="http://www.jove.com/index/details.stp?id=1747">Performing and Processing FNA of Anterior Fat Pad for Amyloid</a>. There was an error with an author's name. The author's last name had a typo and was corrected to:
Safwan S. Jaradeh
instead of:
Safwan S. Jardeh

Erratum: Performing and Processing FNA of Anterior Fat Pad for Amyloid

Alkol çubuklar, gazlı bez, işaretleme kalemi, 10 ml şırınga x2,% 1 lidokain (lokal anestezik varsa lidokain tek başına kullanıldığında, instilasyon sonra bir ilk yanma hissi neden olur.% 1 1:1 karışım kullanılarak önlenebilir lidokain ve% 1 sodyum bi karbonat), 18 gauge (G) 1 ½ inç iğne x2 (İİAB gerçekleştirmek için), 25G 1 ½ inç iğne (lokal anestezik enjekte etmek için), ince iğne aspirasyon biyopsisi şırınga sahibinin (&quot;gun&quot;), bandaj, glutaraldehid flakon (elektron mikroskobu) ve% 10 formalin biyopsi konteyner.

amiloid için anterior fat pad fna sahne ve İşleme

Performing and Processing FNA of Anterior Fat Pad for Amyloid

Tarihsel olarak, kalp, karaciğer ve böbrek biyopsileri amiloidoz amiloid mevduat göstermek için yapıldı. Bu hastalığın klinik bulguları çok değişken ve non-spesifik olduğundan, bu biyopsilerin ilişkili riskleri tanısal değeri çok büyük. Gibi deri ya da dişeti gibi düşük bir biyopsi riski, diğer siteler de nispeten invaziv ve pahalı. Buna ek olarak, bu biyopsileri her zaman bir tanı koymak için yeterli amiloid mevduat sahip olmayabilir. Fat pad aspirasyon, düşük maliyetli ve minimal morbidite ile iyi klinik korelasyon göstermiştir. Ancak, bu işlemi gerçekleştirmeden veya değişken ve nonreproducible sonuçlar yol açar aspire örnek işleme için standardize protokoller vardır. Dokuda amiloid tespit için en sık kullanılan yöntemidir polarize mikroskop kullanılarak Kongo kırmızı lekeli bölümleri bir elma yeşil birefringence. Bu teknik, aspire edilen materyal hücre blok hazırlık gerektirir. Ne yazık ki, erken evre amiloidoz başvuran hastalarda, en az miktarda yağ yastığı aspiratlar Kongo kırmızı lekeli hücre bloklarına duyarlılığını büyük ölçüde azaltır amiloid var. Bu nedenle, elektron mikroskobu ile yağ yastığı aspiratlar ultrastrüktürel değerlendirme amiloid tespiti için artmış duyarlılık göz önüne alındığında, kullanılan olmalıdır. Bu makale, Kongo kırmızısı, hücre blok bölümden boyama ve ultrastrüktürel tanımlanması için elektron mikroskobu kullanan amiloid tespiti için ön yağ yastığı aspirasyon yapmak için basit ve tekrarlanabilir bir işlem göstermektedir.

Fat pad aspirasyon gibi sistemik amiloidoz tanısı için amiloid algılamak için diğer yöntemlerle karşılaştırıldığında çok tercih edilen, minimal invazif ve düşük maliyetli bir yaklaşımdır. Bu video makale numunenin optimal tanı sonucu için uygun bir işleme ile yağ yastığı aspirasyonu gerçekleştirmek için bir usul anahat göstermektedir.

Amiloid için Anterior Fat Pad FNA Sahne ve İşleme

Tarihsel olarak, amiloidozda amiloid birikimlerini göstermek için kalp, karaciğer ve böbrek biyopsileri yapılıyordu. Bunun klinik prezentasyonu nedeniyle...

Bu video; ince iğne aspirasyonunu, anterior yağ yastığı biyopsisini ve biyopsi örneklerinin mikroskopi için işlenmesine yönelik bir prosedürü göstermektedir. Karın bölgesinin alt kadranında, orta hattın lateralinde ve göbeğin altında kalan cilt alanı temizlenir ve işaretleme kalemiyle romboid şeklinde bir alan belirlenir. Lokal bölge anesteziyle uyuşturulur ve ince iğne aspirasyonu ile anterior yağ yastığı biyopsisi gerçekleştirilir.Fibroadipoz dokunun beş ila altı fragmanı biyopsi şırıngasından glutaraldehit çözeltisine aktarılır ve şırıngada kalan materyalin pıhtılaşması beklenir. Şırıngaya %10 formalin aspire edilir ve pıhtılaşmış fibroadipoz dokuyu %10 formalinin içine aktarmak için piston çıkarılır. Merhaba, ben Medical College of Wisconsin Milwaukee Patoloji Bölümü'nden Dr. Ham.Ben Dr. Parri. Medical College of Wisconsin'deki Neoplastik Bozukluklar ve İlgili Hastalıklar bölümündenim. Bugün, AMY amiloidozunu incelemek için yağ yastığına ince iğne aspirasyon biyopsisi uygulama prosedürünü göstereceğiz.Bu, amiloidozu göstermek ve dışlamak amacıyla anterior abdominal yağdan fibroadipoz doku örneği almak için kullandığımız bir protokoldür. Öyleyse başlayalım. Doğru şekilde uygulandığında, anterior yağ yastığı aspirasyonu için ince iğne aspirasyon biyopsisi veya İİAB prosedürü tek bir batırmayla tamamlanabilir.Bununla birlikte, subkutan yağ dokusu içerisinde 18 gauge bir iğneyi ileri geri hareket ettirmek nispeten rahatsız edicidir. Burada açıklanan anestezi yöntemi, 25 gauge bir iğne ile sadece iki batırmada istenen etkiyi sağlar ve ağrıyı yönlendirerek prosedüre karşı toleransı artırır. %1 lidokain ve %1 sodyum bikarbonatın bire bir karışımı, alkollü pamuklar, gazlı bezler, işaretleme kalemi, iki adet 10 mililitrelik şırınga, iki adet 18 gauge 1,5 inçlik iğne, bir adet 25 gauge 1,5 inçlik iğne, bir FNA şırınga tutucu veya tabancası, bandaj, elektron mikroskobu için bir glutaraldehit flakonu ve %10 formalin içeren bir biyopsi kabı dahil olmak üzere gerekli tüm malzemeleri toplayarak prosedür için hazırlık yapın.Alkolle temizleme pedleri kullanarak, abdomenin alt kadran bölgesindeki, orta hattın yan tarafında ve göbek deliği işaretinin altında kalan cilt bölgesini temizleyin. Bir işaretleme kalemi ile yaklaşık ikişer inç boyutunda, yuvarlak bir alan belirleyin. 18 gauge iğne ve 10 mililitrelik bir şırınga kullanarak, lokal anestezik olarak kullanılmak üzere yaklaşık 10 mililitre %1 lidokain ve %1 sodyum bikarbonat çözeltisi aspire edin.%1 lidokain tek başına kullanılabilse de, eklenen sodyum bikarbonat başlangıçtaki kısa süreli yanma hissini önleyecektir. Uygulamanın ardından, lidokain dolu şırıngayı hala lidokain flakonu içinde bulunan 18 gauge iğneden ayırın. Şırıngayı dik tutarak, 25 gauge bir buçuk inçlik bir iğne takın.Şırıngada hapsolmuş havayı çıkarmak için pistonu bastırın ve şırınga gövdesine hafifçe vurun; ardından etkilenmiş alanın sınırları boyunca anestezi uygulayın. 25 gauge iğneyi A noktasında cildin hemen altına yerleştirerek başlayın. Ardından iğneyi dikkatlice, cilt altına ve üzerindeki cilt yüzeyine paralel olacak şekilde teğetsel olarak X noktasına doğru itin. X noktasında, iğnenin bir damarın içinde olmadığından emin olmak için şırınga pistonunu geriye doğru çekin.Ardından, iğneyi A noktasına doğru geri çekerken, 2,5 mililitreye kadar lidokain infiltre etmek için pistonu yavaşça itin. İğnenin ciltten çıkmasına izin vermeyin. Şimdi yönü değiştirin ve iğneyi deri altına, Y noktasına doğru itin. Daha önce yaptığınız gibi, şırınga pistonunu geri çekerek iğnenin bir damarda olmadığını doğrulayın ve iğneyi A noktası üzerinden yavaşça geri çekerken 2,5 mililitreye kadar lidokain uygulayın; iğneyi geri çektikten sonra, steril gazlı bezi sıkıca bastırarak kanamayı önleyin.Ardından, B noktasından başlayarak, X noktasından B noktasına kadar lidokaini deri altına enjekte ederek bu işlemi tekrarlayın. Sonra B noktasından Y noktasına uygulayın. Kanamayı önlemek için tekrar gazlı bez uygulayın. Şimdi, bir pamuk parçasının köşesiyle romboid şekil içindeki cilde hafifçe dokunarak ve bunu bitişikteki anestezi uygulanmamış ciltle karşılaştırarak bölgenin anestezi altındaki durumunu kontrol edin. 10 mililitrelik bir şırıngaya 18 gauge boyutunda ve bir buçuk inç uzunluğunda bir iğne takın.Vakumun doğru şekilde uygulanmasına ve serbest bırakılmasına yardımcı olması için şırınga iğnesi düzeneğini FNAB grip tabancası şırınga tutucusuna yerleştirin. İğnenin ucunu, temizlenmiş ve anestezi uygulanmış rhomboid bölgedeki deri altı yağ dokusuna yerleştirin ve vakum oluşturmak için şırınganın pistonunu tamamen geri çekin. Vakumu koruyarak iğneyi deri altı yağ dokusu içerisinde ileri geri hareket ettirin.İğnenin deriden çıkmasına izin vermeden, her bir vuruş mümkün olduğunca uzun tutulmalıdır. Her vuruşta yön değiştirilerek maksimum örnekleme sağlanır. Peritonal kavitenin delinmesini önlemek için iğne yönünün serozaya teğet ve deri yüzeyine paralel tutulması önemlidir.Şırıngada yaklaşık bir mililitre fibroadipoz doku fragmanı biriktiğinde, vakumu serbest bırakın ve iğneyi çıkarın. Subkutan kan birikimini en aza indirmek için hastanın işlem bölgesine gazlı bezle sıkıca bastırmasını sağlayın. Numune artık laboratuvara gönderilmek üzere işleme alınabilir.Daha fazla test yapmak için, şırınga iğnesini çıkarın ve beş ila altı adet fiber adipoz doku fragmanını şırınga ucundan %2'lik glutaraldehit çözeltisine aktarın. İki lam arasında yayılmış bir cam lam üzerine, şırınga ucundan ek küçük doku fragmanları bırakın. Yaymalar hazırlamak için, şırıngada kalan materyalin pıhtılaşmasını bekleyin.Bu işlem beş ila yedi dakika sürebilir. Ardından, pıhtılaşmış fibroadipoz doku materyalinin şırınga duvarından ayrılarak serbestçe yüzmesi için şırıngaya %10 formalini aspire edin. Şimdi, pistonu şırıngadan çıkarın ve pıhtılaşmış fibroadipoz dokuyu, şırınganın uç kısmının karşısındaki açık ucundan etiketli %10 formalin kabına aktarın.Toplanan örnekler artık elektron mikroskobu, hücre bloğu hazırlama ve parafin gömme veya floresan mikroskobu için gönderilebilir. Bu videoda gösterilen yöntem kullanılarak elde edilen ve işlenen fibroadipoz doku, parafine gömülmüş, Kongo kırmızısı ile boyanmış ve polarize ışık mikroskobu ile incelenmiştir. Fibroadipoz dokudaki küçük kan damarlarının duvarındaki amiloid fragmanları, sarı okla belirtildiği üzere elma yeşili görünüm sergilemektedir.Amyloidozis olmayan farklı bir hastadan alınan dokularda ence ile apple green renklenme görülmemektedir. Sarı ok ucuyla belirtilen ve kolajen lifleri temsil eden mavi renklenmeler genellikle neredeyse tüm örneklerde mevcuttur. Deneyimlerimize göre, kolajenle ilişkili bu mavi çift kırılmanın, amiloidin apple green çift kırılmasından ayırt edilmesi zor olabilir.Bu, polarize mikroskop altında Kongo Kırmızısı ile boyanmış örneklerin yorumlanması sırasında karşılaşılan önemli bir yanılgıdır. Bu elektron mikrografı, bir kan damarı duvarında amiloid ile uyumlu, düz, dallanmayan, rastgele dağılmış sekiz ila 10 nm çapındaki fibrilleri göstermektedir.Böylece, amiloid için ön yağ yastığından ince iğne aspirasyon biyopsisinin nasıl yapılacağını size göstermiş olduk. Bu ve benzeri diğer FNAB prosedürlerini gerçekleştirirken, vakumun uygun sıralamayla uygulanması ve bırakılması çok önemlidir. Ayrıca, periton boşluğuna girme riskini önlemek adına, iğne asla eğik bir şekilde yönlendirilmemelidir.Bu nedenle, ileri geri vuruşların yönünü cilde paralel olacak şekilde, fibröz dokunun subkutan düzleminde tutmak önemlidir. Bunlar çok önemli noktalardır. İşte bu kadar.İzlediğiniz için teşekkürler. Teşekkür ederiz.

performing-and-processing-fna-of-anterior-fat-pad-for-amyloid

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu videoda, floresan görüntüleme için ışıldayan konjuge oligotiken boyası - heptamer-formil tiyofen asetik asit veya hFTAA - kullanarak doku bölümlerindeki amiloidleri boyama tekniği açıklanmaktadır. Amiloidler, β yaprak bakımından zengin anormal protein agregatlarıdır. Doku örneklerinde saptanmaları, amiloid ile ilişkili hastalıkların veya proteinopatilerin tanı ve tedavisinde yardımcıdır.

Amiloid Birikintilerinin hFTAA Boyaması: Doku Kesitlerinde Floresan Görüntüleme için Oligotikofen Bazlı Boya Kullanarak Amiloid Fibrilleri Görselleştirme Tekniği

Atomik kuvvet mikroskobunu biyopanlama teknolojisi ile birlikte kullanarak, düşük konsantrasyonlarda bile herhangi bir biyolojik materyalde bulunan hastalığa özgü protein varyantlarına karşı antikorlar elde etmek için negatif ve pozitif bir biyopanlama sistemi oluşturduk.  Amyotrofik Lateral Sklerozda rol oynayan TDP-43 protein varyantlarına karşı antikor elde etmede başarılı olduk.

Amyotrofik Lateral Skleroz TDP-43 Türevleri karşı Morfoloji Özel Reaktifler İzolasyonunda Roman Atomik Kuvvet Mikroskobu Tabanlı biopanning

Bu çalışmanın amacı, sıçanlarda yağ ve şeker yeni alımından sonra dopamin yollar ve terminal sitelerinde eş zamanlı değişiklikleri ölçmek için hücresel c-fos aktivasyonu kullanılarak güvenilir bir immünohistolojik tekniği ortaya koymaya tarafından ödül ile ilgili dağıtılan beyin ağları tespit etmektir.

Sıçanlar Naif Şeker ve Yağ Yeme ardından mezolimbik ve mezokortikal Dopamin Ödül Siteleri c-Fos Aktivasyon Eşzamanlı Algılama

Bu çalışmada microfractured ve saf yağ kaynaklı kök hücre kullanarak talus osteokondral lezyon artroskopik tedavi için bir protokol rapor etmektir.

Otolog Microfractured ve saf yağ dokusu osteokondral lezyon Talus, artroskopik yönetimi için

Yüksek lipid içeriği nedeniyle yağ dokusu geleneksel histolojik yöntemlerle görselleştirmek için zor oldu. Adipo-temiz sağlam etiketleme ve yağ dokusu yüksek çözünürlüklü hacimsel floresan görüntüleme sağlayan tekniği temizleyerek bir dokudur. Burada, numune hazırlama, ön, boyama, takas ve montaj için görüntüleme yöntemleri açıklanmaktadır.

Adipo-Clear: Bir doku Yöntem yağ dokusu üç boyutlu görüntüleme için temizlenmesi

Bu protokol, Fibro-adipojenik progenitörleri (FAP'ler) ve miyojenik progenitörleri (milletvekilleri) sıçan iskelet kasından izole etmek için bir yöntemi özetlemektedir. Sıçanın kas yaralanması modellerinde kullanılması, analiz için atrofik kastan doku mevcudiyetinin artmasını ve serbest hareket eden hayvanlarda kas gücünü ve yürüyüşlerini değerlendirmek için doğrulanmış yöntemlerden oluşan daha büyük bir repertuar sağlar.

Sıçandaki İskelet Kasında Fibro-Adipojenik Progenitörlerin (FAP' ler) ve Miyojenik Progenitörlerin (Milletvekilleri) Tanımlanması, İzolasyonu ve Karakterizasyonu

Sağlıklı kas dokusunun kas içi yağ ile değiştirilmesi, insan hastalıklarının ve koşullarının belirgin bir özelliğidir. Bu protokol, kas içi yağın nasıl görselleştirileceğini, görüntüleneceğini ve ölçüleceğini ana hatlarıyla belirtir ve kas içi yağ oluşumunun altında yatan mekanizmaların titizlikle incelenmesine izin verir.

İskelet Kasında Kas İçi Yağ Oluşumunu ve Hücresel Kökenini İnceleme Kılavuzu

Bu protokol, palmitik asit kaynaklı in vitro modelde platikodin D'nin alkolsüz yağlı karaciğer hastalığı üzerindeki koruyucu etkilerini araştırmaktadır.

Palmitik Asit Kaynaklı In Vitro Modelde Platycodin D'nin Alkolsüz Yağlı Karaciğer Hastalığı Üzerindeki Koruyucu Etkilerinin İncelenmesi

Diyete bağlı alkolsüz yağlı karaciğer hastalığı (NAFLD) fare modeli kullanarak, NAFLD'nin progresyon aşamalarını değerlendirmek için non-invaziv bir yöntem olarak yeni in vivo mikro-bilgisayarlı tomografi görüntüleme tekniklerinin kullanımını, ağırlıklı olarak hepatik vasküler ağa odaklanarak tanımladık.

Alkole Bağlı Olmayan Yağlı Karaciğer Hastalığının Progresyonunu Değerlendirmek İçin Yeni In Vivo Mikrobilgisayarlı Tomografi Görüntüleme Teknikleri

Bu protokol, aynı numunelerden metabolomik analizler için toplu sitozolik fraksiyonu korurken, tek çekirdekli eşzamanlı RNA dizilimi ve ATAC dizilemede kullanılmak üzere donmuş insan olmayan primat pankreas adacıklarından yüksek kaliteli çekirdekleri izole etme prosedürlerini açıklar.

Kombine Tek Çekirdekli RNA Dizileme ve ATAC-Dizileme ve Toplu Metabolomikler için Donmuş İnsan Olmayan Primat Fetal Adacıklarının Hazırlanması

Burada, otolog yağ dokusunu farklı fizikokimyasal özelliklere ve fonksiyonlara sahip çeşitli yağ bileşeni maddelere dönüştürebilen bir protokol sunuyoruz.

Yağları Özel Bileşenlere Dönüştürmek için Yenilikçi Yağ Dokusu Fraksiyonasyonu

Öğrenin, anterior karın yağ dokusundan ince iğne aspirasyonu ile amiloidoz teşhisi için biyopsi alma ve örnek işleme yöntemlerini. Bu minimal invaziv teknik, doğru tanı için güvenilir sonuçlar sağlar.

Amiloid için Anterior Fat Pad FNA Sahne ve İşleme

Daha fazla video keşfet