Name: Model Genetik Organizma olarak kullanmak için Medaka Embriyolar, Mikroenjeksiyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-22T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 25 s
Description: Öğrenin medaka embriyolarına mikroenjeksiyon tekniğini genetik analizler için. Bu yöntem, gen fonksiyonlarını tek hücre düzeyinde in vivo çalışmalarla belirlemeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma, MRC bir hibe ile desteklenmiştir.

1. Çiftleşme ve yumurta toplama <ol><li> Kadın ve erkek Medaka sırt ve anal yüzgeçlerinin büyüklüğü ve şekli ile kolayca ayırt edilebilir. Kadın ile karşılaştırıldığında erkeklerin anal yüzgeçleri daha büyük ve paralelkenar şekilli. Kadın anal yüzgeci küçük ve üçgen şeklinde. Erkek sırt yüzgeci son iki ışınları arasında açıkça görünür derin bir çentik vardır. </li><li> Medaka her gün 40 kadar yumurta yatıyordu ve tank tesislerinde çıkardı önce Medaka kadın, birkaç saat için ek filamentler göbek kümelenmiş yumurtaları taşımak. </li><li> Kadınlar net yakalanmış ve bir yandan her iki taraftan hafifçe içinde tutulur. Yumurta yavaşça diğer elin işaret parmağı ile karnından alay olabilir. Kadın, daha sonra tank iade edilebilir. Yumurta, embriyo medya ile künt forseps veya parmak ile dolu bir 6 cm Petri kabı transfer edilmelidir. </li><li> Küçük bir çiftleşme kutusuna tutulur Medaka çiftleri nadiren mücadele ediyoruz. Bu nedenle, beslenir ve yumurta, birkaç ay boyunca her gün aynı çifti alınabilir böylece, küçük bir su akışı ile tankında muhafaza edilebilir. </li><li> Bu kadın balık yumurtlama Medaka kadınlarda günlük oluşur, erkek olmadan tutulmalıdır gerektiğini önemlidir. Aksi takdirde, kadınlarda yumurta sunmak ve iyi olmak değildir. </li></ol> 2. Temizleme embriyolar <ol><li> Transfer 9cm petri kabı kapağı yerleştirilmiş bir cam pipet zımpara (P2000 tane iriliğine, su geçirmez) ile yumurta unclustered. Aşırı orta çıkarın ancak embriyo kurumasını önlemek için yeterli bir hacim kalmasını sağlamak. </li><li> Yavaşça minimum basınç uygulayarak ve koryon dış yüzey tüyleri bazı kaldırmak için yaklaşık 45-60 saniye parmak kum kağıt yüzeyine paralel tutmak, işaret parmağı kullanılarak zımpara embriyolar rulo. Bu önlem embriyolarının birbirlerine altında ezilme riskini en aza indirecek bir defada 5-7 embriyolar daha fazla rulo etmeyin. </li><li> Embriyo orta taze yemek temizlenmelidir embriyo transferine. </li></ol> 3. Mikroenjeksiyon sırasında embriyoların tutmak için agaroz plakaları yapma Embriyolar% 1.5 agaroz bir pleksiglas kalıp (Şekil 1) ile yapılan enjeksiyon sırasında olukları yapılmaktadır. Agaroz konsantrasyonu, düzgün embriyolar tutmak için önemlidir. <ol><li> İlk olarak, pleksiglas kalıp tutmak için agaroz bir çerçeve yapın. % 1.5 agaroz 0.5cm derinliği 9cm Petri kabındaki su dökün ve tamamen katılaşır kadar bekleyin. Agaroz bir alanda kalıp boyutundan daha büyük kesin. </li><li> % 1.5 agaroz kesim alanını doldurmak ve kabarcıklar sıkışıp kalmasına ve agaroz katılaşır kadar bekleyin böylece kalıp yere dökün. Bu agaroz plaka solidifaction hızlandırmak için buzdolabında saklanabilir. </li><li> Yumurta tutmak için olukları oluşturmak için kalıp çıkarın. 4 gerekli ° C ye kadar kalıp, kapak ve mağaza batırmayın yeterli embriyo orta ekleyin. <img src="/files/ftp_upload/1937/1937fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 olukları mikroenjeksiyon için agaroz plakaları hazırlamak için kullanılan ölçüye göre kalıp şematik. </li></ol> 4. Medaka embriyolar, Mikroenjeksiyon Medaka, DNA, RNA, morfolino oligonükleotidler ve tracer boyalar 64-hücreli aşamada embriyo yerine zebrafish gibi sarısı 1 sitoplazma içine koryon yoluyla microinjected. Sitoplazma rodamin-dekstran, bu beceriyi geliştirmek için tavsiye edilir boyalar enjekte edilerek uygulama, Medaka içinde daha küçük ve daha az görünür olduğu için. Fenol kırmızısı bir izleme olarak eklenmesi de enjeksiyon onay izin teşvik edilmektedir. Medaka embriyoları çevreleyen koryon zor olduğu gibi, kısa, güçlü ve geniş bir enjeksiyon iğnesi gereklidir (Şekil 2). Filament içeren cam kapiller bu güçlü geniş enjeksiyon iğnesi hazırlayın. <ol><li> Bir izleme olarak fenol kırmızısı ile enjeksiyon solüsyonu hazırlayın ve bir Eppendorf Microloader arka iğne içine yüklemek. Hava pompası enjektör iğnesi bağlayın. </li><li> Yumurta en kısa sürede tek hücreli aşamada enjekte döllenme sonrasında toplanan ve unclustered olmalıdır. Daha fazla embriyolar hücre bölünmesini durdurmak için buz (30 dakikadan fazla) saklayarak enjekte edilebilir. <img src="/files/ftp_upload/1937/1937fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 Medaka ve zebrafish iğneler karşılaştırılması. MF iğne ucu (üst) kısa ve sert koryon delinmesiyle Medaka embriyoları çevreleyen güçlü dolayısıyla daha geniş. </li><li> Agaroz plaka içine yumurta transferi ve forseps ile olukları hizalamak. Sadece enjeksiyondan önce tek hücre bir sitoplazma ve hücre zarının th vurmak olabilir, bu yüzden beş yumurta rotasyona tabi tutulmalıdıre iğne dik. Tek hücre sitoplazma yoğun yağ damlacıkları yumurta yan karşısında küçük yağ damlacıkları yoksun bir alana bakarak bulunabilir. Belirlenen alanda yan görüş sitoplazma teyit edilebilir. </li><li> Iğne yakın yumurta yerleştirin. Koryon iğne ucu hafifçe dokunarak ya da microforceps (Şekil 3) kullanılarak iğne ucu açın. Enjeksiyon maddenin küçük bir miktarı akmaya görülmelidir. </li><li> Ponksiyon yoluyla koryon iğne içinde ucu yere koryon. Hiçbir reflü sert koryon (tutma basıncı ve enjeksiyon basıncı 500 700hPA 80-100hPA ayarları) ile ponksiyon üzerine yüksek basınç nedeniyle oluşur sağlamak için, nispeten yüksek tutma basıncı enjektör ayarlayın. </li><li> Iğne ucu keskin bir membran alay sitoplazma içine yerleştirin. Sarısı içine iğne ucu ekleme kaçının. Aksine Zebra balığı, yumurta sarısı içerisine enjekte edilen malzeme sitoplazma içine aktarılabilir. Enjekte sıvılar sitoplazma sınır bulanık ise yumurta sarısı (Şekil 4) enjekte edildiğinde belirgin bir sınır var. Bazen iğne agaroz / enkaz tarafından engellenmiş olabilir. Forseps, iğne sonuna dokunmatik / rebreak ve tıkanma kaldırmak için kullanılabilir. Iğne, enjeksiyon sırasında herhangi bir noktada kırılırsa, embriyo orta köpüren görülebilir ve madde enjekte kaybolur. Enjeksiyonlar agaroz kanal boyunca alt üst ve kalıp boyunca soldan sağa doğru sistematik olarak yapılmalıdır. </li><li> Enjekte edilen embriyolar embriyo orta içeren temiz bir tabak aktarılır ve uygun sıcaklıkta olmalıdır. <img src="/files/ftp_upload/1937/1937fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3, enjeksiyon için önce iğne ucu Breaking . 1: embriyonun koryon yakın iğne ucu hareket ettirin; 2: koryon dokunun ve ucu kırmak için hafifçe geriye ve ileriye doğru hareket iğne, 3: enjeksiyon maddenin küçük bir miktar iğne sonu dışarı akar bu kırılma onayladığında ucu. </li></ol> 5. Temsilcisi sonuçları <img src="/files/ftp_upload/1937/1937fig4.jpg" alt="Şekil 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 4"> Şekil 4 enjekte Medaka embriyolar Temsilcisi görüntüler. Panel A rodamin-dekstran tek hücreli aşamadır Medaka embriyo sitoplazma içine doğru enjeksiyon temsil eden bir görüntü gösterir. Panel B, tek hücreli bir sahne Medaka embriyo yumurta sarısı kesesi içine rodamin-dekstran yanlış enjeksiyon temsil eden bir görüntü gösterir. Paneller C ve D-enjeksiyon sonrası yaklaşık 30 saat A ve B sırasıyla paneller embriyoların göstermektedir. EM: embriyo C ve D ve görünümü dorsal anterior panelleri yukarı doğru. Panel D embriyonun vücut kırmızı boya yanlış yolk kesesi içine enjekte edildi değildir. B ve D Oklar rodamin-dekstran farklı dairesel sınır dikkat yanlış yolk kesesi içine enjekte göstermektedir. Noktalı satır A ve B tek hücre sitoplazma anahat göstermektedir lateral.

<ol><li>Furutani-Seiki, M., Sasado, T., Morinaga, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+genome-wide+screen+for+mutations+affecting+organogenesis+in+Medaka%2C+Oryzias+latipes%5BTitle%5D)+AND+%22Mech+Dev%22%5BJournal%5D)">A systematic genome-wide screen for mutations affecting organogenesis in Medaka, Oryzias latipes.</a> Mech Dev. 121, 647-658 (2004).</li>
<li>Furutani-Seiki, M., Wittbrodt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medaka+and+zebrafish%2C+an+evolutionary+twin+study%5BTitle%5D)+AND+%22Mech.+Dev%22%5BJournal%5D)">Medaka and zebrafish, an evolutionary twin study.</a> Mech. Dev. 121, 629-6237 (2004).</li>
</ol>

Bu video, biz, tek hücre sahne Medaka embriyolar içine hücre tracer, mRNA, DNA veya anti-sense oligonükleotid enjeksiyon için bir yöntem ortaya koymaktadır. Bu teknik bize gerçek zamanlı in-vivo çeşitli gelişim süreçlerini incelemek için izin verdi. Bu süreç ve daha sonraki detaylı analiz onu tanıyor, önemli omurgalı organogenez ve temel hücre biyolojisi anlayışımızı geliştirmek için bir potansiyele sahiptir. Bu tür bilgi ve rejeneratif tıp terapötik uygulamalar verim olabilir.

<table><tbody><tr><td>4&quot; ince ağ</td><td>Araçlar</td><td>J K Aquatics Ltd.</td><td>MD001</td><td>Yumurta toplama sırasında balıkları yakalamak için kullanılır.</td></tr><tr><td>Embriyo besiyeri</td><td>Reaktif</td><td>Ev yapımı</td><td></td><td>200ml 50X stok çözelti, 10 litre RO su içerisinde 1ml %1 metilen mavisi in H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O (50X stok çözelti: 1 litre RO su içerisinde NaCl 14.7g, KCl 0.6g, CaCl&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; 2H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O 2.4g, MgSO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt; 7H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O 4.0g).</td></tr><tr><td>İnce su geçirmez zımpara kağıdı - p2000 kum boyutu</td><td>Araçlar</td><td>Hermes Abrasives Ltd.</td><td></td><td>Koryonlu embriyoların yuvarlanması/temizlenmesi için çok ince kum boyutu.</td></tr><tr><td>Borosilikat cam kapilerler</td><td>Araç</td><td>Harvard Apparatus</td><td>GC100-10F</td><td>Mikroenjeksiyon iğneleri hazırlamak için.</td></tr><tr><td>Mikropipet çekici</td><td>Ekipman</td><td>Narishige International</td><td>Model PP-830</td><td>Mikroenjeksiyon iğneleri hazırlamak için.</td></tr><tr><td>Eppendorf mikro yükleyici</td><td>Araç</td><td>Eppendorf</td><td>5242956.003</td><td>Mikroenjeksiyon iğnelerini doldurmak için.</td></tr><tr><td>Mikroenjektör düzeneği</td><td>Ekipman</td><td>Eppendorf</td><td></td><td>Model 5242.</td></tr><tr><td>Mikromanipülatör</td><td>Ekipman</td><td>Narishige International</td><td></td><td>Model MN151.</td></tr><tr><td>Agaroz enjeksiyon plakası</td><td>Araçlar</td><td>Ev yapımı</td><td></td><td>Enjeksiyon sırasında embriyoları tutmak için.</td></tr></tbody></table>

model genetik organizma olarak kullanmak için medaka embriyolar, mikroenjeksiyon

Microinjection of Medaka Embryos for use as a Model Genetic Organism

Bu video, tek hücreli aşamada Medaka embriyolar içine mikroenjeksiyon tekniği göstermektedir. Medaka, hem de genetik ve embriyolojik analizler sağlar ve omurgalı model organizmaların genom fenotip odaklı mutant ekranları Zebra balığı ve fare gibi, 1 gerçekleştirilmiştir hangi bir yumurta küçük bir tatlı su balığı . Medaka ve zebrafish arasında ilgili genlerin fonksiyonel örtüşme Farklılıklar, böylece tek bir türün 2, Medaka ve zebrafish omurgalı genomu fonksiyonları genetik diseksiyon için tamamlayıcı tanımlanamayan roman fenotiplerinin kimlik sağlar . Embriyolar, şeffaf ve dışarıdan geliştirmek Medaka balık yararlanmak için, mikroenjeksiyon yapmak için aşırı ifade ve vurma aşağı ilgi genler ve DNA&#39;lar etiketleme hücreleri, ya da anti-sense mRNA&#39;ların oligonükleotidler için tracerlerin hücre enjekte etmek için önemli bir tekniktir transgenik hatları.

Medaka ve zebrafish omurgalı genomu fonksiyonları genetik diseksiyon için tamamlayıcı niteliktedir. Bu protokol, Medaka embriyolara başarılı mikroenjeksiyon, bir laboratuvarda Medaka ve zebrafish kullanarak embriyolojik ve genetik analiz için önemli bir tekniktir için kilit noktaları vurgulamaktadır.

Model Genetik Organizma olarak kullanmak için Medaka Embriyolar, Mikroenjeksiyon

Bu videoda, tek hücreli evredeki medaka embriyolarına mikroenjeksiyon tekniğini gösteriyoruz. Medaka, ... imkan tanıyan, yumurta bırakan küçük bir tatlı su balığıdır.

Bu prosedürün genel amacı, ilgilendiğiniz gen veya proteinin normal ekspresyon modellerini bozarak gen protein fonksiyonunu belirlemektir. Bu işlem, öncelikle aros kalıbının ve enjeksiyon iğnelerinin hazırlanmasıyla gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, tek hücre aşamasındaki mid embriyolarını toplamaktır.Prosedürün üçüncü adımı, tek hücre evresindeki embriyoların enjeksiyon için doğru konuma getirilmesidir. Prosedürün son adımı ise tek hücre evresindeki midar embriyolarına hücre izleyicilerinin, mRNA'ların veya antisense oligonükleotidlerin enjekte edilmesidir. Nihayetinde, enjekte edilen maddenin etkilediği proteinle ilişkili morfolojik, fizyolojik veya moleküler değişiklikleri gösteren mikroskobik gözlemler yoluyla sonuçlar elde edilebilir.Merhaba, ben Bath Üniversitesi Biyoloji ve Biyokimya Bölümü'nden Dr. Makoto Seki laboratuvarından Sean Brazinski. Seki laboratuvarını temsilen buradayım. Bugün size Medaka embriyolarına hücre izleyicileri, mRNA'lar ve antisense oligonükleotidlerin mikroenjeksiyonu için izlenecek prosedürü göstereceğiz.Laboratuvarımızda, ilgilenilen genin in vivo tek hücre düzeyindeki fonksiyonunu incelemek için bu prosedürü kullanıyoruz. Öyleyse başlayalım. Zebrafish'lerin aksine, maka cinsiyetleri dimorfik yüzgeçleri sayesinde kolayca ayırt edilebilir.Dişi yüzgeçleri, düz bir kenara sahip yuvarlak bir şekle sahiptir. Erkeğin hem anal hem de dorsal yüzgeçleri dişekinden daha büyüktür ve dorsal yüzgecin son iki ışını arasında derin bir çentik bulunur. Bir çift çiftleşme aşamasındaki meca'yı, su akışı olan veya olmayan bir çiftleşme tankında tutun.Bu balık, akan suyu olan bir tankta iki aya kadar tutulabilir. Günlük enjeksiyon için, dişi balıklar her gün 40 adede kadar yumurta bırakabilir ve bu yumurtalar yapışkan filamentler aracılığıyla karın bölgesinde kümelenir. Bir dişi balığı tanktan yakalayıp çıkarmak için bir ağ kullanın ve balığı ağın içinde sabitlemek için bir elinizle tutun. Yumurtaları işaret parmağınızla nazikçe ayırın.Dişiyi tanka geri koyun. Yumurtaları, embriyo ortamı ile doldurulmuş altı santimetrelik bir Petri kabına aktarmak için pens veya işaret parmağı kullanın. Bir diseksiyon mikroskobu altında, bağlantı filamentlerini kesmek ve yumurtaları birbirinden ayırmak için iki çift pens kullanın.Embriyoları dışkı ve alglerden ayırmak için bir pasta pipetle toplayın ve en fazla 40 yumurtayı taze embriyo ortamı içeren bir kaba aktarın. Hemen mikroenjeksiyon yapacaksanız yumurtaları buz üzerine yerleştirin. Alternatif olarak, inkübasyon sıcaklığındaki varyasyonlarla gelişimin sonraki evrelere geçiş hızını yönetin.Enjeksiyon sırasında embriyoları tutmak için agaroz plakaları hazırlamak amacıyla bir pleksiglas kalıp gereklidir. Detaylar için bu protokolün yazılı kısmına bakınız. Dokuz santimetrelik bir Petri kabına, su içinde %1,5 agarozdan 0,5 santimetre dökünüz.Aase katılaştığında, kalıbın dibe çökmemesi için kalıptan biraz daha küçük bir alan kesin. Kesilen alanı daha fazla %1,5 aase ile doldurun ve pleksiglas kalıbı üzerine yerleştirin. Aris katılaştığında hava kabarcıkları oluşmamasına dikkat edin.Genellikle oluklar oluşturmak için kalıbı serbest bırakın. Aris'i embriyo medyumu ile kaplayın. Kabın ağzını kapatın ve kullanıma hazır olana kadar dört derece Celsius'ta saklayın.Cam kılcal tüp içeren bir filamentten güçlü ve geniş bir enjeksiyon iğnesi hazırlayın. Bir mikro yükleyici kullanarak, izleyici olarak fenol kırmızısı içeren enjeksiyon solüsyonu ile enjeksiyon iğnesini arkadan doldurun; iğneyi bir hava pompası enjektör standına bağlayın. Bir diseksiyon mikroskobunun yanına kurun.Uygun evredeki yumurtaları arose enjeksiyon plakasına aktarın. Stereomikroskop altında enjeksiyon işlemi gerçekleştirilirken, gelişimi durdurmak için embriyolar buz üzerinde 30 dakikaya kadar tutulabilir. Her bir hazneye yedi ila 10 yumurta yerleştirmek için pens kullanın.Enjeksiyon iğnesinin yumurtalara dik açıyla temas etmesi için yumurtaları döndürün. Embriyonun tek hücresi, girintili yağ damlacıklarının karşısındadır. Bu nedenle, enjeksiyon için tek hücre sağda kalacak şekilde, yağ damlacığı sola doğru yönlendirilmelidir.Nükleik asitler ve izleyici boyalar, yumurta sarısı yerine korion aracılığıyla embriyonun sitoplazmasına mikroenjeksiyon yöntemiyle aktarılır. Zebrafish için yapıldığı gibi, iğneyi yumurtalara yaklaştırın. İğne ucunu koriona değdirin veya iğne ucunu açmak için mikro pens kullanın; böylece enjekte edilecek solüsyonun küçük bir miktarı uçtan dışarı akacaktır.Tıkanma durumunda iğneyi tekrar kırın, Corian'ı delin ve iğneye geri akış olasılığını azaltmak için enjeksiyon iğnesinin ucunu iç katmanın hemen içine doğru hareket ettirin. Enjektörün tutma basıncını yaklaşık olarak 80 ila 100 hektopascal değerine kesin olarak ayarlayın. Membranı delin ve iğneyi sitoplazmaya yerleştirin.Embriyoyu enjekte edin. Enjekte edilen materyalin sitoplazma içinde eşit dağılımını onaylamak için embriyoyu yan taraftan inceleyin. Sitoplazmaya doğru şekilde enjekte edilen sıvıların sınırları bulanıktır; vitelluse çok derin enjekte edilen materyalin ise belirgin bir sınırı vardır ve sitoplazmaya aktarılmayacaktır.Enjekte edilen embriyoları, embriyo ortamı içeren temiz bir kaba aktarın ve uygun sıcaklıktaki bir inkübatörde gerekli süre boyunca gelişmelerine izin verin. Panel A, tek hücreli aşamadaki bir Meca embriyosunun sitoplazmasına rumine dekstranın doğru enjeksiyonuna ait temsilci bir görüntüyü göstermektedir. Panel B, tek hücreli aşamadaki bir Meca embriyosunun vitellüs kesesine rumine dekstranın hatalı enjeksiyonuna ait temsilci bir görüntüyü göstermektedir; kesikli çizgiler tek hücreli aşamadaki sitoplazmanın dış hatlarını belirtmektedir.Panel C ve D, sırasıyla A ve B panellerindeki embriyoları enjeksiyondan yaklaşık 30 saat sonra göstermektedir. Panel D'deki embriyo gövdesinin, boyanın yanlışlıkla vitellüs kesesine enjekte edilmesi nedeniyle kırmızı olmadığını fark edin. Size nükleik asitlerin veya izleyicilerin, daha koyu renkli embriyoların tek hücreli evresine nasıl mikroenjekte edileceğini göstermiş olduk.Bu prosedürü uygularken, başarılı bir enjeksiyon için embriyonun doğru evrede olması önemlidir. Şimdilik anlatacaklarım bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler ve deneylerinizde başarılar dilerim.

microinjection-of-medaka-embryos-for-use-as-a-model-genetic-organism

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Mikroenjeksiyon döllenmiş zebrafish embriyolar içine yabancı maddeler tanıtmak için bir köklü ve etkili bir yöntemdir. Burada, mRNA aşırı ekspresyonu gerçekleştirmek için sağlam bir mikroenjeksiyon tekniği ve morfolino oligonükleotid gen devirme çalışmaları zebrafish göstermektedir.

Zebra balığı Embriyolar mRNA ve morfolino Antisens Oligonükleotidler Mikroenjeksiyon.

Bu video morfolino veya mRNA sonraki gelişimi sırasında spesifik gen ürünlerinin seviyesini azaltmak veya artırmak için tek hücreli aşamada zebrafish embriyoların nasıl enjekte edilebilir gösterir.

Gen Fonksiyon Analiz Zebra balığı Embriyolar Mikroenjeksiyon

, Sert koryon ve yumuşak embriyolar, Medaka embriyo manipülasyonu nedeniyle daha zebrafish içinde daha fazla yer almaktadır. Bu video görüntüleme ve kuruntulardan üretimi için hücre nakli için agaroz dechorionation montaj Medaka embriyolar işlemek için nasıl adım adım yordamlar, gösterir. Bu prosedürler, omurgalı genomu fonksiyonları genetik diseksiyon için tamamlayıcı özellikleri tam olarak yararlanmak için bir laboratuvar Medaka ve zebrafish kullanmak için gereklidir.

Chimeras Üretim Medaka Embriyolar ve Hücre Nakli Dechorionation

Bu videoda, bileşikleri Zebra balığı yumurta sarısı kesesine vermek için bir Embriyo mikroenjeksiyon tekniği açıklanmaktadır.

Embriyo Mikroenjeksiyonu: Zebra Balığı Sarısı İçine Bir Bileşik Verme Tekniği

Mikroenjeksiyon yumurtalar, embriyo ve çeşitli türlerin hücrelerine DNA yapıları, mRNA, morfolino antisens oligonükleotidler veya diğer tedaviler sunmak için kullanılan bir tekniktir.

Deniz Kestanesi Zigotlar Yüksek Randımanlı Microinjections

Morphant embriyolar üretme yöntemleri gelişim düzenleyici mekanizmalarının ve gen ağları incelemek için gereklidir. Deniz yıldızı Patiria miniata bu çalışmalar için gelişmekte olan bir model sistem. Burada bir embriyo kültürleri, gamet elde üretmek için protokol ve bu türlerden zigot hızlı mikroenjeksiyon sunuyoruz.

Mikroenjeksiyonu Bir Yöntem Patiria Minata Zigotların

Akdeniz meyve sineği (medfly) Ceratitis capitata (Diptera: Tephritidae) dünya çapında bir tarım zararlısıdır. Biyolojisinin daha derin bir şekilde anlaşılması, medfly popülasyonlarını kontrol etmenin ve böylece ekonomik etkiyi azaltmanın anahtarıdır. Embriyo mikroenjeksiyonu, bu türde hem germ hattı transformasyonuna hem de ters genetik çalışmalara olanak sağlayan temel bir araçtır.

Dünya Tarım Pest Böcek Embriyo Mikroenjeksiyon yoluyla Nükleik Asitler teslim edilmesi,<em&gt; Ceratitis capitata</em

Küçük laboratuvar balıkları, insan kemik bozukluklarının altında yatan mekanizmalar üzerine kemik araştırmaları ve kemik modüle edici ilaçların taranması için popüler modeller haline gelmiştir. Bu yazıda, osteoporotik lezyonları olan medaka larvalarında alendronatın kemik hücreleri üzerindeki etkisini değerlendirmek için bir protokol tanımlanmıştır.

İlaç Tedavi ve<em&gt; İn Vivo</em&gt; Bir Medaka Balık Osteoporoz Modelinde Osteoblast-Osteoklast Etkileşimler Görüntüleme

Gen kanal yayın balığı embriyo CRISPR/Cas9 sistemini kullanarak düzenleme için basit ve etkili mikroenjeksiyon protokol sunulmuştur. Bu protokol için RNA'ların rehberlik ve Cas9 protein tek hücreli embriyo sarısı microinjected. Bu protokol iki kanal yayın balığı bağışıklık ile ilgili genlerin knocking tarafından doğrulandı.

CRISPR/Cas9 Protein gen düzenleme için mikroenjeksiyon kanal yayın balığı, Ictalurus yılan, embriyo içine

Bu makalede, küçük model balık medakasından (Oryzias latipes) sperm toplamak için iki hızlı ve etkili yöntemin yanı sıra, bilgisayar destekli sperm analizi (CASA) kullanarak sperm kalitesini güvenilir bir şekilde değerlendirmek için bir protokol açıklanmaktadır.

Teleost Modelinde Sperm Toplama ve Bilgisayar Destekli Sperm Analizi Japon Medakası (Oryzias latipes)

Öğrenin medaka embriyolarına mikroenjeksiyon tekniğini genetik analizler için. Bu yöntem, gen fonksiyonlarını tek hücre düzeyinde in vivo çalışmalarla belirlemeye yardımcı olur.

Model Genetik Organizma olarak kullanmak için Medaka Embriyolar, Mikroenjeksiyon

Daha fazla video keşfet